外标法测定叶酸片中叶酸含量

测定过程演示2
标样及试样配制 ➢叶酸标准品：精密称取0.01g叶酸对照品，置50mL容量瓶中，加 30ml0.5%的氨水溶解，再用纯水定容至刻度。 ➢叶酸试样（5mg/片）：取叶酸片40片，精确称量，研磨至均匀，精 确称取二片重量的叶酸粉未于50ml的容量瓶中，加入30ml0.5%氨水， 在热水浴中振摇20分钟，冷却后用纯水定容至刻度，摇匀，过滤。 打开检测器、高压泵的电源开关，按上述分离条件设置参数；打开 排放阀，“purge”1-2分钟，关闭“purge”，使仪器在设定的条件下平 衡。
常见减压蒸馏和气流吹蒸两种方式
• （1）土壤矿物质
原生矿物——主要四类：硅酸盐类矿物、氧化 物类 、矿物、硫化物类矿物、磷酸盐类矿物。
次生矿物——分为三类：简单盐类、三氧化物 类、次生铝硅酸盐类。
• （2）土壤有机质 是土壤中含碳有机物的总称，主要来源于动植 物和微生物残体，可分为非腐殖物质和腐殖质 两大类 。
测定过程演示1
配制流动相： ➢磷酸二氢钠缓冲液：取磷酸二氢钠6.80g，加水 880mL，振摇 使溶解，用氢氧化钠溶液调节pH＝6.30±0.05 ➢把磷酸二氢钠缓冲液和甲醇以80∶20的比例混合，用0.45μm 有机相滤膜减压过滤，脱气。
色谱分离条件： ➢色谱柱：C18色谱柱（5μm,4.6mm i.d.×250mm） ➢波长：254nm ➢流速：1.0mL·min-1。 。
在粘重而乏有机质的土中生成。
• 2.片状结构：水平面排列，水平轴比垂直轴长，界面呈水平薄片状；农田 犁耕层、森林的灰化层、园林压实的土壤均属。
• 3.柱状结构：沿垂直轴排列，垂直轴大于水平轴，土体直立，结构体大小 不一，坚实硬，内部无效孔隙占优势，植物的根系难介入、通气不良、结 构体之间有形成的大裂隙，既漏水又漏肥。
样品的预处理技术
样品预处理的目的是消除基质干扰，保护仪器， 提高方法的准确度、精密度、选择性和灵敏度。预 处理的过程一般包括： ➢提取
经典的方法有均质提取法、振荡提取法、索氏提 取法等。 ➢净化
比较传统的净化手段有液液萃取和固相萃取等，目前比较 先进、实用的处理技术凝胶渗透色谱、基质固相分散技术、 分子印记技术等也得到了比较广泛的应用。 ➢浓缩
• （4）黏粒
主要是次生矿物，粒径＜0.001mm。含黏粒多的土壤，营养元素含 量丰富，团聚能力较强，有良好的保水保肥能力，但通气和透水性 差。
样品的预处理技术(续）
➢衍生化 所谓衍生化，就是将用通常检测方法不能直接检测或检测灵敏度比较 低的物质与某种试剂（即衍生化试剂）反应，使之生成易于检测的化合物。 按衍生化的方法可以分为柱前衍生化和柱后衍生化。按生成衍生物的类型 又可分为紫外-可见光衍生化、荧光衍生化、拉曼衍生化和电化学衍化。 衍生化技术不仅使高效液相色谱分析体系复杂化，而且需要消耗时间， 增加分析成本，有的衍生化反应还需要控制严格的反应条件。因此，只有 在找不到方便而灵敏的检测方法，或为了提高分离和检测的选择性时才考 虑用衍生化技术。
2.土壤液相
• 指土壤中的水分及其水溶物。主要来自大 气降水和灌溉。土壤水分既是植物养分的 主要来源，也是进入土壤的各种污染物向 其他圈层迁移的媒介。
3．土壤气相
• 指土壤中有无数的空隙充满空气，典型土 壤约35%的体积是充满空气的。 土壤中空气与大气差异：
（1）不连续体系；ห้องสมุดไป่ตู้（2）O2和CO2含量差异大； （体3）；含有CH4、H2S、H2和NH3等还原性气 （4）存在污染物。
二、土壤的结构
• 土壤结构是指土壤颗粒（包括团聚体） 的排列与组合形式，按形状可分为块状、 片状和柱状三大类型；按其大小、发育 程度和稳定性等，再分为团粒、团块、 块状、棱块状、棱柱状、柱状和片状等 结构。
• 1.块状结构：近似立方体型，长、宽、高大体相等，组分一般
大于3cm，1～3cm之内的称作核块状结构体，外形不规则，多
颗粒名称
石块 石砾 粗砾 细砾 砂粒 粗砂粒 细砂粒 粉粒 粗粉粒 细粉粒 黏粒 粗黏粒 粗黏粒
粒 径（mm） >10
10~3 3~1
1~0.25 0.25~0.05 0.05~0.01 0.01~0.005
0.005~0.001 <0.001
各粒级的主要矿物成分和理化特性
• （1）石块和石砾
多为岩石碎块，直径大于1mm。土壤中含石块和石砾多时，其空隙 过大，水分和养分易流失。
液相色谱分析法模块之
任务4 外标法定量
能力目标
完成叶酸片中叶酸含量的测定 能进行定性定量分析
课程引入
叶酸是人体必须的一种物质，它能促进胎儿脑神经的发育， 也能防止人体贫血，你能设计一可行的分析方案，检测某药厂 的叶酸片中的叶酸的含量吗？ 常用的方法是化学分析法、液相色谱法（内标法和外标法） 本项目采用外标法测定叶酸片中叶酸的含量 叶酸片是药物制剂，除了主成分外，还含有大量的淀粉、糊精 等辅料，因此样品处理非常重要。
同粒径的土壤矿物质颗粒（土粒），其性质和成分都不一 样。为了研究方便，按粒径的大小将土粒分为若干组，称 为粒组或粒级，同组土粒的成分和性质基本一致，组间则 有明显差异。
• 国际上粒级的划分标准及详细程度主要有三种不 同的划分：即国际制、前苏联制和美国制，其划 分情况见下表。
我国的土壤粒级的划分标准为五级：石块、石砾、砂砾、粉粒、黏粒
• 4.团粒结构：是最适宜植物生长的结构体土壤类型，它在一定程度上标志 着土壤肥力的水平和利用价值。有协调土壤水分和空气的矛盾、土壤养分 的消耗和累积的矛盾、土壤温度等，并改善土壤的温度状况，能改良土壤 的可耕性，对改善植物根系的生长伸长条件。
三、土壤的粒级分组与质地分组和各粒级的理化特性
• 1．土壤的粒级分组与各粒级的理化特性 • 土壤矿物质是以大小不同的颗粒状态存在的。不
• （2）砂砾
主要为原生矿物，大多为石英、长石、云母和角闪石等。其中以石 英为主。粒径为1~0.05mm。空隙大，通气和透水性强，保水保肥 能力弱，营养元素含量少。
• （3）粉粒
是原生矿物和次生矿物的混合体，粒径为0.05~0.005mm。物理化学 性质介于砂粒与粘粒之间。团聚、胶结性差，分散性强。保水保肥 能力较好。