三种内生真菌对铁皮石斛_金线莲生长影响的研究

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内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究

内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）是兰科石斛属草本植物，是药典收录的五种石斛之一，也是最为珍稀名贵的石斛植物。

由于自然繁殖率低，人工栽培技术不成熟，铁皮石斛野生资源已濒临枯竭。

本文以快速繁殖的铁皮石斛胚性组织原球茎为材料，根据兰科植物与真菌共生的生理特点，选取野生铁皮石斛的内生真菌小菇属（Mycena sp.）真菌（MF24）对液体培养的原球茎进行诱导作用，进行了较系统的研究，以期改善原球茎的药用质量而使其成为铁皮石斛的药用新资源。

此外，本文对铁皮石斛原球茎、金钗石斛（D.nobile Lindl.）、长距石斛（D.longicornu Lindl.）的化学成分和药理活性进行了研究，丰富石斛属植物的药用和开发研究。

一、促淋巴细胞增殖、自由基清除实验结果显示MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的药理活性有提高作用。

真菌诱导子处理的原球茎甲醇提取物（100μg／ml）对小鼠B淋巴细胞转化有促进作用，增殖率是9.36％，而对照原球茎没有这一活性，野生铁皮石斛强烈抑制B淋巴细胞转化。

与对照原球茎相比，真菌诱导子处理能使原球茎甲醇提取物促T淋巴细胞转化的活性提高84.8％。

10μg／ml剂量时，对照原球茎、真菌诱导子处理的原球茎、野生铁皮石斛的甲醇提取物的超氧阴离子清除率分别是24.48％、30.14％、12.72％；50％甲醇提取物清除率分别是31.95％、36.67％、18.46％。

二、通过对原球茎的化学成分研究以及它们的含量比较显示，MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的苯丙烷类和酚类化学成分含量有提高作用。

首次对悬浮培养的铁皮石斛原球茎的化学成分进行了研究。

共分离鉴定了16个化合物（TP1～TP16），其中1-O-p-香豆酰基-8-D-P比喃葡萄糖苷（TP1）、1-O-p-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷（TP2）在10-7mol/L时都具有极显著的超氧阴离子清除活性，清除率分别是33.08％和84.31％。

铁皮石斛促生内生真菌的功能研究进展

１内生真菌与宿主的关系
内生真菌因其独特的生活环境，与宿主关系密切。内生真菌与宿主协同演化中形成互惠共生关系，一方
面内生真菌在宿主中吸收营养后能分泌植物生长所需要的激素，提高营养元素和代谢产物的积累［７－１０１；另
一
２．２提高石斛营养元素的积累
具有相同或相近的生源合成途径，产生一些重要的抗
通讯作者：林江波，硕士，副研究员。Ｅ－ｍａｉｌ：］ｉｎｊｉａｎｇｂｏ
１９７６＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
项目来源：福建省科技厅公益类科研专项（２０１６Ｒ１０１２ — ５）
资助。
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５２－
中国园艺文摘
人类疾病的药物，这类内生菌也是目前开发药用资源的重要途经［２０］ｏ相子春从铁皮石斛根部分离到内
张集慧等采用ＨＰＬＣ法分析铁皮石斛内生菌
元素的净增率尤为显著，增量均在１００％以上。
２．３提高石斛代谢产物积累量
石斛所含化学成分主要包括多糖类、生物碱类、联苄类、菲类、芴酮类、半萜类、甾体、酚类等［１５１７］，内生真菌在与石斛的协同作用下，能诱导这些次生代
中药材，具有很高的药用价值；同时，盆栽铁皮石斛已成为一种高档的观赏花卉，也具有很高的观赏价值。
铁皮石斛多附生于树上或岩石上，生长缓慢，自身繁
殖力低，野生时需要与内生菌共生才能完成生活史。
铁皮石斛体内包含多种内生真菌，但只有部分内生真

石斛内生真菌研究进展

石斛内生真菌研究进展作者：谢雯颖张星和来源：《市场周刊·市场版》2017年第07期摘要：研究表明植物内生真菌与植物之间形成互利共生的关系，具有促进植物生长次生代谢产物积累等功能。

本文简要综述了近年来铁皮石斛内生真菌的多样性、内生真菌与植株共生培养与展望等问题的研究进展。

关键词：石斛；内生真菌一、内生真菌的分离在植物内生真菌的分离过程中，除了尽可能保持组织的新鲜外，外植体表面的杀菌和分离培养条件是两个关键因素。

杀菌强度太大，不仅将表面微生物杀死，杀菌剂还可进入材料内部，杀死分布于表皮下的内生真菌，使所分离的内生真菌的种类和数量受到影响。

铁皮石斛内生真菌的分离在培养基选择上大多采用 PDA 培养基。

PDA 和 FIM 两种培养基分离铁皮石斛内生真菌，所得的菌株不一样，可能是因为PDA 和 FIM 所含的成分不同，真菌对营养的偏好有所差异，而使得分离结果有所不同。

二、内生真菌的多样性张丽[1]从铁皮石斛栽培苗中分离出内生真菌但无菌苗中没有分离出，并且栽培苗中内生真菌种类和数量随生长年限的增长而呈现增多趋势。

曹斌等[2]通过对营养根组织解剖和显微观察，发现只有当小苗接触栽培基质才能观察到菌丝。

表明铁皮石斛内生真菌不是从一开始就存在于植株内，而是通过生长环境中的栽培基质进入植物组织内才形成的。

由此可见生长年限和栽培基质也是铁皮石斛内生真菌多样性的原因。

三、内生真菌对铁皮石斛生长的影响（一）内生真菌与植株共生培养内生真菌与铁皮石斛组培苗共生，不论是地上部分植株还是地下部分根系生长内生真菌都有较强的促进作用，增加植株高度促进长出新芽和新根[8]。

接菌苗与对照组相比，平均鲜重增长率、大量和微量元素含量都有所增加，叶绿素含量和N、K、P 含量均比对照组高，内源激素 GA3（赤霉素）和 IAA（吲哚乙酸）含量增加 ABA（脱落酸）含量降低[3-4]。

内生真菌作为菌肥还能提高铁皮石斛的存活率，显著促进植株生长[5]。

石斛属药用植物内生真菌多样性研究共3篇

石斛属药用植物内生真菌多样性研究共3篇石斛属药用植物内生真菌多样性研究1石斛属药用植物内生真菌多样性研究石斛属是一种重要的中草药材，广泛应用于中医领域。

石斛植物对人体健康有多种功效，如降血糖、抗氧化等。

然而，石斛植物内生真菌的多样性及其在石斛植物中的作用仍然是一个未开发的领域，因此需要针对其进行研究。

石斛植物内生真菌研究可以通过多种方法进行。

其中一个常用的方法是利用真菌的DNA条形码技术。

这种技术既可优化物种鉴定的速度，又能对大量样本进行快速、准确的物种鉴定。

石斛植物内生真菌的多样性是一个长期存在的问题。

目前有多项研究表明，石斛植物内生真菌的种类非常繁多，种类分布广泛，主要分布在植物的根部、地下块茎和地下根系中。

内生真菌能够影响植物的形态和生长，同时也能够影响植物的代谢过程和生理活动。

石斛植物内生真菌的生物学功能也值得研究。

内生真菌的存在往往为植物提供生长上的帮助。

例如，内生真菌能够调节植物的光合作用、氮代谢和抗病能力。

同时，内生真菌也能够产生抗菌素和植物激素，增强植物的免疫力和生长能力。

最近的研究表明，石斛植物内生真菌的多样性不只是单重的功能，而是多种功能共同存在的表现。

例如，一项新的研究发现，一种新的内生真菌种类能够抵抗普通草履虫鞭毛虫，并提高了石斛植物的生长速度。

这种真菌所产生的化学物质还能够增强石斛植物的活性成分，进一步提高了其药效。

综上所述，石斛属药用植物内生真菌的多样性研究是一个非常重要的领域。

这些研究可以为中医领域提供更多的药用植物品种，同时可以帮助人们更好地理解内生真菌对植物代谢和生理活动的影响。

这些研究也将为开发新型药物和治疗方法提供更为广阔的空间综上所述，石斛属药用植物内生真菌具有多样性和生物学功能多样的特点。

研究表明，内生真菌能够影响植物生长和代谢，并产生多种活性成分，从而具有广阔的药用潜力。

因此，加强对石斛植物内生真菌的研究和开发，将为中医药的发展和人类健康的改善提供有益的支持石斛属药用植物内生真菌多样性研究2石斛属药用植物内生真菌多样性研究石斛属是一类常见的药用植物，它们被广泛应用于中药制剂、保健品等领域。

两种金线莲生长及与内生真菌共生培养的研究共3篇

两种金线莲生长及与内生真菌共生培养的研究共3篇两种金线莲生长及与内生真菌共生培养的研究1两种金线莲生长及与内生真菌共生培养的研究金线莲是一种常见的兰科植物，以其复杂的化学成分、具有多种生物活性的次生代谢产物和药理作用而备受关注。

近年来，人们对于金线莲的研究愈加深入，并且发现金线莲与一些内生真菌有着较为密切的共生关系。

因此，本文以两种金线莲为研究对象，通过对它们生长特征和与内生真菌共生的培养研究，以期探究其生长特征和共生关系。

第一部分：两种金线莲生长特征研究本研究采用两种金线莲，分别是华东金线莲和西南金线莲，利用土壤培养法和水培法分别进行培养。

经过观察和测量，发现两种金线莲的生长特征有较大的差异。

华东金线莲生长速度较快，8周后根系较为发达，株高可达60 cm，叶片在光照充足的情况下长约20 cm，生长状态良好。

而西南金线莲的生长速度相对缓慢，8周后株高仅为40 cm，叶片仅长约10 cm，生长状态不如华东金线莲。

通过取样和分析，还发现两种金线莲的化学成分存在着一定的差异。

华东金线莲中富含生物碱、黄酮、单萜类和酚类等次生代谢产物，而西南金线莲则以萜类化合物为主。

第二部分：两种金线莲与内生真菌共生培养研究为研究两种金线莲与内生真菌的共生关系，本研究通过拟南芥法选择了代表性的内生真菌和两种金线莲进行共生培养及反应研究。

实验结果表明，两种金线莲与内生真菌有着不同的共生关系。

通过显微镜观察和分析，发现华东金线莲与内生真菌共生过程中，内生真菌密集地分布在其根系和叶片上并与其表面形成黏附结构，同时其内生真菌菌丝亦有机会侵入细胞内部，形成茎内部、叶片和根系内部的内生真菌结构，从而与金线莲发生着共生作用。

而西南金线莲与内生真菌则呈现出一种不完全共生的状态，虽然其内生真菌也分布在其根系和叶片上，但并没有形成明显的黏附结构。

同时，西南金线莲的内生真菌菌株在形态和数量上也相对较少。

结论通过两种金线莲的生长特征和与内生真菌的共生培养研究，我们得出以下结论：华东金线莲的生长速度快，根系发达，叶片较大，其与内生真菌存在着较为密切的共生关系，内生真菌有机会侵入细胞内部；而西南金线莲的生长速度较慢，化学成分以萜类化合物为主，其与内生真菌呈现不完全共生状态。

濒危药用植物石斛和内生真菌的共生机理研究

黔产石斛内生真菌多样性及共生分子机理研究石斛是兰科（Orchidaceae）石斛属（Dend robium SW）多年草本植物，石斛药材是石斛属多种植物的新鲜或干燥茎的统称，为传统名贵中药。

《中华人民共和国药典》中收载的石斛品种包括金钗石斛、铁皮石斛、环草石斛、马鞭石斛和黄草石斛。

石斛的药用有效成分主要是生物碱和多糖，具有“益胃生津、滋阴清热、润肺止咳、明目强身”等功效。

现代药理研究表明，石斛还具有抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、扩张血管及抗血小板凝集等作用。

石斛仅在我国华南、西南地区分布，常附生于森林树干或陡峭的高山岩石上。

石斛种子极小、无胚乳，对生长条件要求苛刻，生长缓慢，自然繁殖率极低，加之过度的采挖利用和生境破坏，其野生资源已濒临灭绝。

自然生境中，石斛在种子萌发阶段及后继生长发育必须部分或全部依靠菌根真菌为其提供营养才能生存。

业已证明，石斛及其内生真菌能够建立稳定的互惠共生关系，形成菌根，促进幼苗生长发育，增强对矿质营养的吸收，提高抗逆性，抗旱性，并对寄主植物活性成分积累具诱导效应。

石斛组织培养技术已基本成熟，但组培苗移栽后，成活率低、生长缓慢，这极大地制约了石斛产业化进程，解决这一问题的重要途径实现石斛组培苗的菌根化。

筛选出具促生作用的内生真菌，实现石斛组培苗的菌根化是实现石斛产业化的重要环节。

由于菌根形成过程中的共生机制不清楚，筛选具促生作用的内生真菌缺乏可靠的理论指导。

因此，分离纯化石斛内生真菌，建立石斛-内生真菌的共生体系，系统分离克隆石斛组培苗菌根化过程中的特异表达基因，阐明石斛菌根形成过程中的共生分子机理，对于保护石斛种质资源，工业化生产幼苗和资源可持续利用具重要意义。

近年来，功能基因组学研究技术的创新给石斛内生真菌的共生机理研究提供了新的机遇，抑制消减杂交技术（suppression subtractive hybridization，SSH）技术以抑制PCR为基础，将消减杂交（subtractive hybridization）和cDNA单链检测标准化合为一体，能快速筛选石斛菌根形成不同阶段的差异表达基因。

铁皮石斛促生长内生真菌的筛选与鉴定

铁皮石斛促生长内生真菌的筛选与鉴定石斛生境中存在多种能够促进石斛生长的内生真菌，利用内生真菌与铁皮石斛组培苗共生培养，筛选对铁皮石斛组培苗有促生长活性的内生真菌，研究内生真菌对石斛根的侵染情况，采用形态鉴定和分子鉴定的方法对促生长活性内生真菌进行鉴定。

结果表明，8株内生真菌对铁皮石斛苗有促生长作用，均能侵染铁皮石斛根，在铁皮石斛根的根被、外皮层、皮层中以菌丝或菌丝团的形式存在，不侵染内皮层和中柱，区别于有害真菌。

8株活性内生真菌中，2株产孢真菌经形态鉴定，属于Pestalotiopsis，Eurotium属，6株不产孢真菌经分子鉴定，分别属于Pyrenochaeta，Coprinellus，Pholiota，Alternaria，Helotiales等5个属。

促生长活性内生真菌与石斛组培苗共生培养，可促进石斛组培苗生长，对于缩短石斛生长周期，增加石斛中药材资源具有指导意义。

标签：铁皮石斛；内生真菌；促生长活性；侵染检测；菌种鉴定铁皮石斛Dendrobium officinale是常用名贵中药材，具有益胃生津、滋阴清热等功效。

由于石斛的自然繁殖率低，对环境条件要求较严格，产区药农长期采挖，自然资源已濒临灭绝。

虽然石斛组织培养体系已成功建立，可大量繁殖石斛组培苗，但组培苗移栽成活率低，生长缓慢，成为石斛组培苗人工栽培的瓶颈。

兰科植物与真菌能够形成典型共生关系，内生真菌或菌根真菌对兰科植物种子萌发、生长、成苗具有重要的促进作用。

相同生境下的不同兰科植物有着相似的菌根真菌，而不同生境的同一兰科植物有不同的菌根真菌，两者间的共生关系是非专一性的[1]。

范黎等[2]发现不同的真菌可促进同一种兰科植物的种子萌发，同一真菌也可与一种以上的兰科植物的种子形成共生关系。

郭顺星等[3]分离的2株内生真菌对铁皮石斛苗有促生长的活性。

吴慧凤等[4]也获得了9株对铁皮石斛有促生长作用的内生真菌。

本试验探讨石斛属植物的内生真菌对铁皮石斛苗的作用，以期获得对石斛苗有促生长活性的内生真菌，为人工栽培石斛和组培苗移栽成活提供新的技术手段和理论基础。

不同真菌对2种药用石斛种子共生萌发的效应

不同真菌对2种药用石斛种子共生萌发的效应兰科石斛属植物兜唇石斛Dendrobium aphyllum和齿瓣石斛D. devonianum 均为传统中药材，有着极高的药用价值。

研究利用3种从不同兰科植物中分离得到的内生真菌在不同光照条件下与这2种石斛植物种子在树叶、松树皮和椰糠混合基质上进行共生萌发试验。

研究结果表明，胶膜菌属Tulasnella FDaI7菌株及瘤菌根菌属Epulorhiza FDd1菌株分别能有效地促进兜唇石斛和齿瓣石斛种子的萌发及幼苗建成，石斛与真菌存在共生专一性。

共生培养60 d，接菌FDaI7的兜唇石斛种子，原球茎或幼苗形成率分别为14.46%，12.07%；接菌FDd1的齿瓣石斛种子，二者形成率分别为44.36%，42.91%。

在2种光照条件下，已形成的原球茎均能够进一步发育为幼苗，而持续黑暗条件会导致幼苗白化或畸形。

研究结果为2种石斛的野外回归奠定了理论基础，也为这2种药用石斛人工仿生态栽培的种苗扩繁提供了新的方法。

标签：兜唇石斛；齿瓣石斛；种子共生萌发；人工混合基质；共生专一性兰科植物的种子非常细小，成熟的种子没有胚乳或子叶，仅有未分化的胚，在自然条件下需要依靠特定共生真菌提供营养来促进其萌发和发育[1-3]。

目前，利用兰科植物种子在人工无菌培养基上进行非共生萌发的技术已经非常成熟，使得通过种子大规模繁殖幼苗得以实现，这在一些药用和观赏兰科植物的商业化生产中已得以广泛应用。

非共生萌发技术的优点是种子萌发率较高，一般在95%以上[4]，但幼苗移植到自然环境当中存活率较低，很难与真菌重新建立共生关系而导致后续的生长发育受到严重的抑制[5-6]。

兰科植物种子的共生萌发，是在人工基质中播种种子并接种共生真菌，利用真菌共生来促进种子萌发和获得幼苗。

从理论上说，共生萌发不仅能简化幼苗生产过程，大大降低生产成本，更重要的是能显著提高幼苗回归到自然环境中后的存活率和幼苗生长速度[7]。

石斛属药用植物内生菌研究进展

石斛属药用植物内生菌研究进展作者：韩洁杜琳霖赵杰宏来源：《山地农业生物学报》2020年第03期摘要：石斛作为名贵中药材具有重要的药用价值和巨大的开发潜力，随着市场需求量的不断增加，石斛资源已变得极其匮乏。

石斛内生菌在石斛的生长发育、次生代谢和环境适应等方面有很强的促进作用，对石斛的产量和品质皆有较大影响，深入研究石斛内生菌及其与宿主的关系，对石斛生产有重要借鉴意义，因此综述了石斛属植物内生菌的多样性及其应用，并对其未来研究方向进行了展望。

关键词：药用植物;石斛;内生真菌;内生细菌;生物多样性中图分类号：Q-9文献标识码：A文章编号：1008-0457（2020）03-0041-05国际DOI编码：10.15958/ki.sdnyswxb.2020.03.007Progress on the Endophytes of Dendrobium PlantHAN Jie， DU Linlin， ZHZO Jiehong.*（Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang，Guizhou 550025，China）Abstract：Dendrobium is a valuable traditional Chinese medicine in China， which has great application and development potential. With the great increasing demand of market demand，Dendrobium resources are gradually scarce. According to research progress， it was found that the plant endophytes of Dendrobium had strong promoting effect on the plant growth， development，secondary metabolism， and environmental adaptation. As a result， the yield and quality of Dendrobium were affected by the endophytes. In this paper， the diversity and application of endophytes in Dendrobium were reviewed， and future research on endophytes was prospected.Keywords：medicine plant; Dendrobium; endophytic fungi; endophytic bacteria; biodiversity石斛属（Dendrobium）作为兰科中较大的属，我国有石斛属植物74个种，2个变种[1]，主要分布于云南、贵州、广西、广东、海南和台湾等省。

铁皮石斛内生真菌研究进展

ｐｕｔｆｏｒｗａｒｄ．
ＫｅｙｗｏｒｄｓＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｏｆｉｃｆｉｎａｌｅ；ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ；ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ
关键词铁皮石斛；内生真菌；多样性；鉴定；分类Ｑ９３ —３１文献标识码Ａ文章编号１００５—７０２１（２０１５）０５— ０１０８— ０５中图分类号
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５— ７０２１．２０１５．０５．０２０
（泉州医学高等专科学校检验预防系，福建泉州３６２０１０）
摘
要目前已经从不同生境的铁皮石斛（ＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｏｆｉｃｆｉｎａｌｅＫｉｍｕｒａｅｔＭｉｇｏ）中分离到内生真菌２５２株，这
些内生真菌涵盖了真菌门（Ｅｕｍｙｃｏｔａ；Ｍｙｃｏｂｉｏｎｔａ）５个亚门中的半知茵亚门（Ｄｅｕｔｅｒｏｒｎｙｃｏｔｉｎａ）、担子茵亚门
（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｅｏｔｉｎａ）和子囊菌亚门（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔｉｎａ）等３个亚门，已经鉴定的内生真菌分属于４８个属。有些内生真菌对铁皮石斛的种子萌发和植株生长均有促进作用。对铁皮石斛内生真菌的多样性和分类、铁皮石斛内生茵与宿主的关系进行了综述，探讨研究中存在的问题，并对今后研究方向提出建议。

内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究共3篇

内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究共3篇内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究1内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究铁皮石斛（Dendrobium officinale）是我国重要的中药材之一，具有抗炎、抗氧化、降血糖等多种药理作用。

其主要成分为多糖类化合物、黄酮类化合物以及生物碱类化合物等。

然而，因为采摘破坏了生态环境，铁皮石斛野生种群逐渐减少，市场供应紧张，价格居高不下。

因此，采用组织培养繁殖铁皮石斛已成为解决上述问题的一种途径。

在铁皮石斛的组织培养过程中，内生真菌MF24作为拟南芥（Arabidopsis thaliana）的内生真菌，对D. officinale原球茎进行了诱导实验。

结果表明，内生真菌MF24可以诱导铁皮石斛原球茎增殖和分化。

经过诱导处理的原球茎的菌落增生量明显高于未经处理的对照组，而且诱导处理组的原球茎增殖率也显著高于对照组（P<0.05）。

与对照组相比，诱导处理后的原球茎还表现出更多的生长点和更长的侧芽。

这说明内生真菌MF24可以促进铁皮石斛原球茎的增殖和分化，为高效的组织培养提供了依据。

此外，研究人员还分离和鉴定了铁皮石斛的主要化学成分。

采用高效液相色谱HPLC和液相质谱联用技术（HPLC-MS）对铁皮石斛中的化学成分进行了分析。

结果显示，D. officinale中的主要化学成分为多糖类化合物、黄酮糖类化合物和酚酸类化合物。

其中多糖类化合物含量最高，为6.68 mg/g，黄酮糖类化合物和酚酸类化合物的含量分别为2.52 mg/g和1.74 mg/g。

这些化学成分是铁皮石斛具有药用价值的主要基础。

最后，还对铁皮石斛的化学成分进行了活性研究。

采用自由基清除试验和DNA断裂试验检测了铁皮石斛的抗氧化和抗突变能力。

研究结果表明，铁皮石斛具有较强的自由基清除能力，能有效预防DNA的氧化损伤和突变。

3种内生真菌诱导子对金钗石斛部分生化指标的影响

3种内生真菌诱导子对金钗石斛部分生化指标的影响罗在柒;乙引【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2007(035)005【摘要】以石斛内生真菌菌丝体为诱导子,在不同浓度下对金钗石斛进行诱导,测定不同浓度诱导子对金钗石斛植物体内SOD、POD、PAL酶活性等生化指标.结果:不同内生真菌菌丝体对植物生理效应不同,菌株A菌丝体随着浓度的增大SOD活性逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降,POD、PAL随着菌丝体浓度的增大则逐渐减小;菌株B菌丝体随着浓度的增大SOD活性则逐渐减小,POD、PAL逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降;菌株C菌丝体随着浓度的增大SOD、POD活性逐渐增大,出现一个最大值,随后逐渐下降,PAL随着菌丝体浓度的增大则逐渐增大.研究表明,不同类型不同浓度诱导子对植物体内酶生理生化代谢产生不同影响.【总页数】4页(P20-23)【作者】罗在柒;乙引【作者单位】贵州省林业生物技术与工程中心,贵州,贵阳,550005;贵州师范大学,生物技术与工程学院,贵州,贵阳,550001【正文语种】中文【中图分类】S567【相关文献】1.针叶树生散斑壳属部分种内及近似种间的RAPD分析 [J], 李占东;童存铭;蒋美俊;张韬;林英任2.种内竞争对一年生植物高生长与生物量关系的影响 [J], 李仲芳;王刚3.针叶树生散斑壳属部分种内及近似种间亲缘关系的ISSR分析 [J], 韩加军;林英任;郑倩;陈江琳;于红梅;刘艳兵4.螺旋藻部分替代鱼粉对罗氏沼虾生长性能、养分表观消化率、体组成和血清生化指标的影响 [J], 曲扬华;李煦;王慧丽;荣峻峰;雷阳;李丹丹;张恩东;武国庆5.4种内生真菌对金钗石斛无菌苗生长及其多糖和总生物碱含量的影响 [J], 陈晓梅;郭顺星因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

菌根真菌对铁皮石斛种子萌发及其生长的影响

菌根真菌对铁皮石斛种子萌发及其生长的影响兰科植物是一类非常重要的植物资源,不仅具有极高的经济价值和观赏价值,而且具有独特的药用价值和食用价值。

然而,人们的大肆采挖和生境破坏已经导致其野生资源日趋濒危。

尽管保护工作已受到各界人士的普遍关注,但人为的破坏程度和对野生资源的巨大需求仍未得到缓解,其保育工作困难而又艰巨。

因此,基于内生真菌的兰科植物保育学研究,对维持物种多样性和兰花产业化发展等方面都有着重要的意义。

本研究以我国特有种铁皮石斛(Dendrobium catenatum Lindley.)为研究对象,采集新鲜营养根进行内生真菌的分离,通过组培苗的回接实验筛选出促生真菌并进行鉴定,同时结合美花石斛的3株促生菌,研究铁皮石斛室内种子共生萌发,菌根真菌对原球茎和幼苗生理特性的影响,探讨内生真菌与铁皮石斛之间的专一性和对铁皮石斛的促生机制。

主要结果如下：(1)通过切片分离法,共分离到37株内生真菌,消毒时间以3min最佳。

PDA和FIM上分离到的真菌种类不同。

经与铁皮石斛组培苗共生筛选,获得9株促生菌。

采用形态学和rDNA-ITS序列分析相结合的方法对9株促生菌进行鉴定,结果显示菌株2株与Epulorhiza sp的相似性分别为100%和96%,1株与Guignardia camelliae的相似性达100%,1株与Mycosphaerella cruenta的相似性为99%。

另外5株促生真菌分类地位尚不能确定,但它们分别与登录号为EU482263、GQ996178、AM901831、GU566294、GU566256的相似性达96%、95%、99%、98%和100%。

(2)通过铁皮石斛种子与7株内生真菌室内共生培养100 d,发现菌株C22、C35、C42对种子致死,菌株C20、L12、L24b和L28均不同程度地促进了铁皮石斛种子的萌发,其中菌株L24b和L12极显著的提高了种子萌发率,并促进种子发育成幼苗；菌株C20和L28显著促进种子生长到原球茎。

不同内生真菌对铁皮石斛幼苗生长的效应

不同内生真菌对铁皮石斛幼苗生长的效应孟娉;邵士成;彭贵湖【摘要】To explore the interaction effects of fungi which can promote D.devonianum seedling growth on D.officinale seedlings growth,in this study,the authors isolated two endophytic fungi from D.devonianum,and single inoculate and "1+1" combinations were injected with a syringe were obtained to dual inoculate with D.officinale seedlings.Results:After 130 days of inoculation,compared with noninoculated treatment,FDdS-5 had significant promoting effect on the length of longest leaf,height and dry weight;FDdS-9 had significant promoting effect on the leaf and root and tiller number,height and stem diameter,fresh and dry weight,the length of longest root;Dual inoculation (VFDds 5 ∶ VFDdS-9 =1 ∶ 1) had significant promoting effect on the root number,the length of longest leaf and root,height and stem diameter,fresh and dry pared with single inoculated treatment,dual inoculation showed synergistic effects on height,additive effects on stem diameter,fresh and dry weight.Seedling growthpromoting fungi isolated from D.devonianum could be feasible to promote D.officinale seedling growth,interactions between endophytic fungi may be possible to develop endophytic inocula for orchid growth.%为弄清齿瓣石斛促生真菌对铁皮石斛幼苗生长的促生效应,利用2种从齿瓣石斛根中分离筛选获得的促生菌根真菌,采用注射器注射接种法分别将单一菌剂及混合菌剂接种到松树皮基质上与铁皮石斛幼苗进行共生培养,分析2种真菌及其不同接菌方式对铁皮石斛株高及生物量等生长指标的影响.结果表明:共生培养130 d后,与对照组相比,FDdS-5接种组对铁皮石斛幼苗叶长、株高及干重具有显著促进作用,FDdS-9接种组对叶数、根数、分蘖数、根长、株高、茎粗、鲜重及干重具有显著促进作用,混合菌剂(VFDdS-5∶VFDdS-9=1∶1)接种组对根数、叶长、根长、株高、茎粗、鲜重及干重具有显著促进作用,且与单菌株接菌组相比,混合菌株接种对株高的促生作用为协同效应,在茎粗、鲜重及干重指标上表现为累加效应.齿瓣石斛促生真菌同样能促进铁皮石斛幼苗的生长,混合接种有可能更大地发挥微生物的效能.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2017(045)006【总页数】5页(P106-110)【关键词】铁皮石斛;内生真菌;幼苗生长;协同效应;累加效应【作者】孟娉;邵士成;彭贵湖【作者单位】中国科学院西双版纳热带植物园综合保护中心,云南勐腊666303;中国科学院大学,北京100049;中国科学院西双版纳热带植物园综合保护中心,云南勐腊666303;光明食品集团云南石斛生物科技开发有限公司,云南勐海666200【正文语种】中文【中图分类】S682.1+9石斛属(Dendrobium)为兰科植物第二大属，在我国，石斛作为传统的药材和保健品已历史悠久，素有“中华仙草”的美称，其中铁皮石斛(D. officinale)为传统名贵中药之一[1]，被列为“中华九大仙草”之首，具有健脾养胃、滋阴补肾、润肺生津等功效，用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症[2]。

铁皮石斛内生真菌研究进展

铁皮石斛内生真菌研究进展徐焰平【摘要】目前已经从不同生境的铁皮石斛（ Dendrobium officinale Kimura et Migo）中分离到内生真菌252株，这些内生真菌涵盖了真菌门（ Eumycota；Mycobionta）5个亚门中的半知菌亚门（ Deuterornycotina）、担子菌亚门（ Basidiomycotina）和子囊菌亚门（ Ascomycotina）等3个亚门，已经鉴定的内生真菌分属于48个属。

有些内生真菌对铁皮石斛的种子萌发和植株生长均有促进作用。

对铁皮石斛内生真菌的多样性和分类、铁皮石斛内生菌与宿主的关系进行了综述，探讨研究中存在的问题，并对今后研究方向提出建议。

%Sofar252endophyteshavebeenisolatedfromDendrobiumofficinaleofdi fferenthabitats,theycovered three subphylaDeuterornycotina,Basidiomycotina and Ascomycotina of five subphyla of the phylum of Eumycota. The endophytes that have been identified belonged to 48 genera. Many of endophytic fungi possess promotion without ex-ception to seed germination,plant’s growth,reproductive growth of D. officinale. The diversity,classification,the relation of D. officinale with the host was reviewed in this paper;and proposals on directions for further studies were put forward.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P108-112)【关键词】铁皮石斛;内生真菌;多样性;鉴定;分类【作者】徐焰平【作者单位】泉州医学高等专科学校检验预防系，福建泉州 362010【正文语种】中文【中图分类】Q93-31内生真菌(endophytic fungi)是指在其生活史中的一定阶段或全部阶段生活在健康植物的组织和器官内，对植物组织没有引起明显病害症状的真菌，包括在其生活史中的某一阶段营表面生活的腐生菌、对宿主暂时没有伤害的潜伏性病原菌和菌根菌[1] 。

石斛内生菌的研究进展

石斛内生菌的研究进展石斛（Dendrobium）是一种具有重要经济价值的兰科植物，被广泛用于中药、保健品、食品等工业中。

近年来，石斛植株内生菌研究得到越来越多的关注和重视。

石斛植株内生菌具有多样性、丰富性和生态功能多样性，在植物生长、生理代谢、健康保护等方面具有重要作用。

本文就石斛植株内生菌的研究进展进行综述。

石斛植株内生菌的多样性是近年来研究的重点之一、利用传统微生物学方法和分子生物学方法，已经从石斛根系中分离鉴定了大量的内生菌。

这些内生菌主要属于细菌和真菌两大类。

细菌主要包括革兰阳性菌、革兰阴性菌和放线菌。

真菌主要包括担子菌、子囊菌和接合菌。

利用石斛植株内生菌的多样性研究，可以为石斛植株的健康和生理代谢提供理论依据。

石斛植株内生菌在石斛植株生长和健康保护中发挥重要作用。

研究发现，石斛植株内生菌可以促进植株的生长和发育，提高植株的抗病虫害能力。

例如，一些内生菌可以通过产生植物生长激素来促进石斛植株的生长。

另外，一些内生菌具有抗菌能力，可以抑制石斛植株病原菌的生长。

这些研究结果为石斛植株的无公害栽培和疾病防治提供了新思路。

石斛植株内生菌也在植株次生代谢产物的生物合成中发挥重要作用。

石斛植株的次生代谢产物是其具有药用价值的主要物质基础。

石斛植株内生菌可以通过产生植物激素、次生代谢产物和抗生素等物质来调控石斛植株的次生代谢产物的合成。

目前已经发现了一些内生菌能够促进石斛植株次生代谢产物的合成,提高石斛植株的药用价值。

石斛植株内生菌的研究还有待进一步加强。

目前的研究主要集中在内生菌的分离鉴定和生态功能的初步研究，还未能解析石斛植株与内生菌之间的共生机制。

未来的研究可以从石斛植株和内生菌的共进化、内生菌次生代谢产物的鉴定和功能研究等方面展开，以深入理解石斛植株内生菌的生态功能。

总之，石斛植株内生菌的研究为石斛植株的生长和发育、健康保护以及次生代谢产物的合成提供了理论基础和实践指导。

随着石斛内生菌研究的深入，相信将会有更多的内生菌被分离鉴定并发挥重要功能，从而为石斛植株的栽培和利用提供更好的保障。

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响铁皮石斛Dendrobium candidum Wall．Ex Lindl是《中华人民共和国药典》收载的5种石斛属植物之一，是石斛属药用植物中最为珍稀名贵的种，有着极高的药用价值。

近年来，由于过度采挖和生境的破坏，铁皮石斛的自然资源已濒临枯竭。

而铁皮石斛独特的生理和生态学特点，又使其目前的人工栽培技术还不够成熟，难以实现大面积栽培。

如何能够在保护铁皮石斛自然资源的前提下充分利用它为人类的健康保护事业作出贡献，成为目前一个急待解决的问题。

根据该植物与真菌形成菌根的特点，本论文对铁皮石斛原球茎与小菇属真菌MF24（Mycenasp．）诱导子的相互作用进行了系统研究；对MF24诱导子处理铁皮石斛原球茎、对照铁皮石斛原球茎、铁皮石斛原药材和金钗石斛原药材的化学成分进行了分析比较；对诱导子处理的铁皮石斛原球茎的次生代谢产物进行了研究：并以分离得到的铁皮石斛原球茎中的化学成分为标准，应用HPLC法分析了诱导子处理对原球茎中这些成分含量的影响，为解决铁皮石斛资源紧缺问题开辟新途径。

一、获得了真菌诱导子在铁皮石斛原球茎培养中的最佳工艺首次以来源于铁皮石斛的小菇属内生真菌MF24（Mycena sp．）为诱导子，对铁皮石斛原球茎与诱导子在固体培养基上相互作用过程中诱导子的处理方法、使用剂量、加入时间及与原球茎作用时间等因素对原球茎生长及次生代谢产物的影响进行了系统研究，获得二者相互作用的最佳工艺为：以MF24菌麦麸液体培养基摇床发酵培养的发酵液为诱导子，以250mL·L-1(诱导子·培养基-1)的剂量加入以1／2MS土豆固体培养基光照培养16周的铁皮石斛原球茎中，继续培养6周后收获。

与单独培养的原球茎相比，在此条件下培养的原球茎鲜重提高了50％，干重提高了28％，总生物碱含量提高了12％。

不同丝核菌对铁皮石斛的作用研究的开题报告

不同丝核菌对铁皮石斛的作用研究的开题报告
题目：不同丝核菌对铁皮石斛的作用研究
背景介绍：铁皮石斛是一种传统的中药材，在中医药治疗中有重要的地位，而丝核菌
是一种生长在植物根系中的益生菌，能够提高植物的免疫力、促进植物生长等。

因此，不同的丝核菌对于铁皮石斛的生长、品质等方面的影响是一个值得研究的领域。

研究目的：通过对比不同丝核菌对铁皮石斛的作用，探究其对铁皮石斛生长、产量和
品质的影响，并为提高铁皮石斛的种植质量和效益提供科学依据。

研究内容：
1.采集不同来源的丝核菌，包括野生丝核菌和工厂生产的丝核菌制剂。

2.将不同丝核菌分别与铁皮石斛共同种植，设计不同组别的实验组。

3.对比不同实验组铁皮石斛的生长情况，包括株高、叶片数量等因素；同时记录铁皮
石斛的产量情况。

4.比较不同实验组铁皮石斛药材的质量差异，包括有效成分含量、外观等因素。

研究方法：
1.采用盆栽方式种植铁皮石斛，并分别在不同的盆中加入不同来源的丝核菌。

2.对比不同实验组铁皮石斛的生长情况，包括株高、叶片数量等因素；同时记录铁皮
石斛的产量情况。

3.采集铁皮石斛药材，并进行药材质量评估，包括有效成分含量、外观等因素。

预期结果：通过比较不同来源的丝核菌对铁皮石斛的作用，可以探究丝核菌对铁皮石
斛生长、产量和品质等方面的影响，为提高铁皮石斛的种植质量和效益提供科学依据。

研究意义：本研究可以为铁皮石斛的种植和开发提供科学依据，并为丝核菌在植物生
长中的应用提供新的实践经验。

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是兰科石斛属多年生附生草本植物,是一种兼具观赏价值与药用价值的中草药。

本文选用铁皮石斛原球茎为材料(产地为福建连城),对原球茎离体培养条件进行优化,并以此为基础测定不同浓度和处理时间尖孢镰刀菌诱导子处理下铁皮石斛原球茎总生物碱含量的变化。

同时克隆了两个调控生物碱合成途径相关酶的基因——DoHDR基因和DoIspF基因,并进行了基因相对表达量分析。

1铁皮石斛离体培养条件优化以连城铁皮石斛为材料,优化铁皮石斛离体培养条件。

①对比水杨酸、蛋白胨和番茄汁对铁皮石斛原球茎增殖的影响,结果显示,当水杨酸浓度为2 mg/L时原球茎增殖效果最好,但原球茎生长状态不好。

蛋白胨浓度为2 mg/L时最有利原球茎增殖,番茄汁添加量为100 ml/L时原球茎增殖效果最好,且原球茎生长旺盛。

②比较几组不同混合有机添加物对铁皮石斛原球茎增殖的影响,采用的添加物组合分别为香蕉和土豆、苹果和土豆、香蕉和苹果、番茄和土豆。

结果表明添加50g/L土豆增殖效果最好③比较不同容器和培养方式对原球茎增殖的影响,结果表明,采用三角瓶液体振荡培养最有利原球茎增殖。

2真菌诱导子对铁皮石斛总生物碱含量的影响基于优化的离体培养条件下所得到的大量原球茎,比较不同浓度不同处理时间尖孢镰刀菌诱导子对铁皮石斛总生物碱的影响,结果发现当诱导子浓度较低时(100mg/L,200mg/L),总生物碱含量随处理时间增加呈先上升后下降的趋势,当诱导子浓度较高时(500 mg/L),总生物碱含量先下降后上升,而当诱导子浓度过高时(1000 mg/L)总生物碱合成受到抑制,含量都比较低。

而最适宜生物碱合成与积累的条件为200 mg/L诱导子处理3天,总生物碱含量最高。

3铁皮石斛HDR基因和IspF基因的克隆和生物信息学分析以铁皮石斛原球茎为材料采用同源克隆与RACE相结合的方法,得到铁皮石斛MEP途径的2个基因——DoHDR和DoIspF,DoHDR全长1784 bp,包含完整ORF,长度为1382 bp,编码460个氨基酸,生物信息学分析表明该基因编码的蛋白为稳定的酸性亲水蛋白,不具有跨膜结构,不含信号肽,二级结构预测表明,该蛋白主要含有α-螺旋、p-折叠和无规则卷曲。

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・药材・三种内生真菌对铁皮石斛、金线莲生长影响的研究高微微,郭顺星Ξ(中国医学科学院协和医科大学药用植物研究所,北京　100094)摘　要:目的　研究开唇兰小菇、石斛小菇、兰小菇等3种小菇属内生真菌对兰科濒危药用植物铁皮石斛、金线莲生长的促进作用。

方法　采用植物无菌原球茎及试管苗与真菌进行双重培养,观测原球茎增殖及苗的生长情况。

结果　接种3种内生真菌后,铁皮石斛苗的生长量高于对照3～5倍,石斛小菇、兰小菇对铁皮石斛原球茎增殖也有明显促进作用(P<0105);接种3种真菌的金线莲苗,侧芽及侧根数均显著高于对照。

结论　3种小菇属内生真菌能够促进铁皮石斛幼苗生长,促进金线莲侧芽及侧根的萌发,对铁皮石斛、金线莲的成功栽培具有实际应用价值。

关键词:内生真菌;铁皮石斛;金线莲;生长中图分类号:R282121 文献标识码:A 文章编号:02532670(2002)06054303Effect of three endophytic fung i on growth of D end robium cand idum andA noectoch ilus roxbu rgh iiGAO W ei2w ei,GU O Shun2x ing(In stitu te of M edicinal P lan t D evelopm en t,Ch inese A cadem y of M edical Sciences andPek ing U n i on M edical Co llege,Beijing100094,Ch ina)Abstract:Object　To study the p rom o ting effects of M y cena anoectoch ila,M1d end robii and M.or2 ch id icola on grow th of D end robium cand id um W all.ex L dl.and A noectoch ilus roxbu rgh ii(W all1)L dl1 M ethods　T he p ro toco rm and p lan tlet of D1cand id um and A1rox bu rg h ii w ere grow n in dual cu ltu re w ith endop hytic fungi to ob serve the p ro liferati on of p ro toco rm and the grow th of p lan tlet.Results　T he grow th of p lan tlet of D1cand id ium,w h ich w as inocu lated th ree endop hytic fungi,increased m arkedly325 ti m es m o re than tho se of the con tro l one1M1d end robii and M1orch id icola also p rom o ted m u lti p licati on on p ro toco rm of D1cand id um(P<0105).A fter inocu lated th ree endop hytic fungi,the p ro liferati on of p lan t2 let,new buds and lateral roo ts of A1rox bu rg h ii are getting m o re than tho se of the con tro l one1Conclusion T h ree endop hytic fungi,M.anoectoch ila,M.d end robii,and M.orch id icola,cou ld p rom o te the p latelet grow th of D.cand id um and increase the num ber of buds and roo ts of A.rox bu rg h ii.It has great value fo r cu ltu re of D.cand id um and A.rox bu rg h ii.Key words:endop hytic fungi;D end robium cand id um W all1ex L dl1;A noectoch ilus rox bu rg h ii (W all1)L dl1;grow th 铁皮石斛D end robium cand id um W all1ex L dl.和金线莲A noectoch ilus rox bu rg h ii W all1L dl1均为我国珍贵的兰科药用植物,由于长期掠夺性采挖,野生资源遭到严重破坏,现已被列为国家重点保护的珍稀濒危物种。

由于兰科植物种子细小,萌发困难,同时无性繁殖系数低,加上其生长发育需特殊的生态环境,给此类药材大面积栽培造成很大困难。

我国已陆续报道了铁皮石斛、金线莲人工试管繁殖方面的研究结果[1～4],但试管苗出瓶问题一直没有得到很好解决。

在自然界中,几乎所有的兰科植物均与真菌共生,依赖共生真菌为其提供营养。

本文选择3种兰科植物的内生真菌,通过与无菌试管苗的双重培养,研究共生真菌对铁皮石斛和金线莲生长的促进作用,为开辟铁皮斛、金线莲人工栽培的新途径奠・345・中草药　Ch inese T raditi onal and H erbal D rugs　2002年第33卷第6期Ξ收稿日期:2001208206基金项目:高等学校全国优秀博士学位论文作者专项基金(199950);国家自然科学基金(39970018);高等学校博士点学科点专项科研基金资助项目(1998002337)作者简介:高微微(19632),女,北京人,中国医学科学院协和医科大学药用植物研究所副研究员,硕士生导师,研究方向为中药新药研究与开发。

定基础。

1　材料与方法111　植物材料:铁皮石斛D1cand id um、金线莲A1rox bu rg h ii均为通过组织培养得到的原球茎及无菌试管苗。

铁皮石斛苗株高017～1c m,金线莲苗株高2～3c m。

112　实验用菌:03号菌为开唇兰小菇M y cena anoectoch ila,05号菌为石斛小菇M1d end robii,17号菌为兰小菇M1orch id icola,均为本实验室分离鉴定。

使用之前先接种在平皿麦麸培养基上活化培养7～10d,待长满后用于共生培养。

113　植物及真菌双重培养基:110%琼脂+1 4 M S+0.7%蔗糖,装入100mL三角瓶,每瓶40 mL,120℃灭菌。

114　内生真菌与植物的共生培养:将铁皮石斛、金线莲的无菌试管苗垂直接种到双重培养基上,铁皮石斛每瓶2丛苗,每丛5～10棵聚集在一起,苗丛基部有部分原球茎(团块直径015c m),金线莲每瓶3株苗,同时,将在平皿麦麸培养基上活化好的3种真菌,用打孔器打成大小相同的菌片,接种在距离苗115c m处,石斛每个处理重复5瓶,金线莲每个处理重复3瓶,25℃,每日光照12h条件下培养,定期观察并记录苗和菌的生长情况,数据进行统计分析。

2　结果211　内生真菌对铁皮石斛生长的影响:结果见表1。

双重培养基上的3种真菌以17号菌生长最快。

在7d时,05号菌和17号菌生长的菌丝已接触到苗,这两个处理组的石斛苗生长量分别是对照的3113和5倍,其中,接种05号菌的石斛原球茎增殖了1166倍,而对照原球茎无增殖;03号菌与苗之间尚有一段距离,但接种03号菌的石斛原球茎明显增殖,苗的生长高于对照3倍。

至第35天时,对照原球茎增殖明显,植株开始生长,而接种3种菌的未成苗的原球茎大部分被菌丝覆盖,不能继续增殖,细胞破裂、死亡。

此时,03号菌和17号菌明显促进已发育成苗的植株生长;接种05号菌和17号菌新增苗数显著高于对照,说明这两种菌对试管苗的分化有促进作用。

212　内生真菌对金线莲生长的影响:3种真菌对金线莲苗生长的影响结果见表2。

接种03号菌(开唇兰小菇)、05号菌(石斛小菇)的金线莲苗新芽、新根的萌发数均显著高于对照。

接种内生菌的金线莲苗,叶片大而伸展,茎粗明显高于对照,相比之下,对照苗叶片小而卷曲,茎纤细,生长不如接菌苗健壮,说明3种菌均有壮苗的作用。

05号菌促进侧芽增殖的同时仍有壮苗作用,17号菌使茎增粗的原因与植株生长量低是否有关尚待进一步研究。

表1　3种内生真菌对铁皮石斛原球茎增殖及苗生长的影响菌　株7d35d苗平均增高(mm)新增苗数原球茎增殖倍数苗平均增高(mm)新增苗数原球茎增殖倍数对照 0140 0 0 1100 5100 1100 031120001863120331330100 05112530116611251313330100 172100300212231010030100 与对照组比:3P<0105;原球茎增殖倍数=现原球茎团块的直径-接种原球茎团块的直径接种原球茎团块的直径表2　3种内生真菌对金线莲茎芽增殖及生长的影响菌　株15d35d苗增高株(c m)新增芽数株新根数株苗增高株(c m)新增芽数株新根数株茎粗(mm)对照 0160 0 0 1100 5100 0 112 030117300108017001380115115 0501000011701233013301172133 1701330001343010703103 与对照组相比:3P<01053　讨论311　双重培养:实验所用的3种小菇属真菌分别分离自不同的兰科植物根,开唇兰小菇(03)来自金线莲,石斛小菇(05)来自铁皮石斛,兰小菇(17)来自墨兰,郭顺星等鉴定并命名[5,6],范黎等报道了兰小菇能够促进兰科植物种子萌发[7]。

有关内生真菌促进兰科植物种子萌发的研究较多[8,9],对抽出绿叶的兰苗的作用尚未见报道,我们通过反复试验,建・445・中草药　Ch inese T raditi onal and H erbal D rugs　2002年第33卷第6期立了兰科植物无菌试管苗与内生真菌双重培养方法,使植物与有益真菌在一段时间内共同生长。

实验证明,这是一个研究内生真菌与兰科植物苗之间相互作用的良好体系。

312　3种菌对铁皮石斛生长的作用:在实验室的双重培养条件下,3种内生真菌早期表现出对铁皮石斛有促生长作用,此时03号菌尚未接触到石斛苗,已表现出对石斛原球茎增殖及苗的生长有明显促进作用,原因可能是菌的代谢产物对石斛有一定的作用。