日粮酪氨酸水平对1～4周龄泰和乌骨鸡生产性能及组织黑色素含量的影响

日粮酪氨酸水平对1～4周龄泰和乌骨鸡生产性能及组织黑色
素含量的影响
赵艳平;黎观红;瞿明仁;李建喜
【摘要】本试验旨在研究日粮酪氨酸水平对1～4周龄泰和乌骨鸡生产性能、血清及组织中游离酪氨酸含晕和组织黑色素含量的影响.选用1日龄泰和乌骨鸡270只,随机分成6个处理,每个处理设3个重复,每个重复15只鸡,饲养至4周龄.6个处理日粮酪氨酸水平分别为0.38%、0.58%,0.78%、0.98%、1.18%和1.38%.结果表明:随日粮酪氨酸水平的提高,泰和乌骨鸡平均日增重、平均日采食量提高,料重比降低,当日粮酪氨酸水平为1.18%时平均日增重达到最高、料重比达到最低,1.18%水平组平均日增重极显著高于其他各水平组(P<0.01),其料重比极显著低于除0.78%
水平组和0.98%水平组之外的其他各水平组(P<0.01);泰和乌骨鸡血清及组织中游
离酪氨酸含量随日粮酪氨酸水平的提高而提高,当日粮酪氨酸水平为1.18%时游离
酪氨酸的含量达到最高,且极显著或显著高于其他各水平组(P<0.01或P<0.05);泰
和乌骨鸡组织中黑色素含量随着日粮酪氪酸水平的提高先增加后降低,心脏、肌肉、皮肤中黑色素的含量在1.18%水平时达到最高且与其他各水平组差异极显著
(P<0.01);而肝脏组织中黑色素的含量在0.98%水平达到最高,也与其他各水平组差异极显著(P<0.01).山此可知,在一定的酪氨酸水平范围内,提高日粮酪氨酸水平可提高泰和乌骨鸡血清及组织中游离酪氨酸含量、组织中黑色素的含量和生产性能.【期刊名称】《动物营养学报》
【年(卷),期】2010(022)001
【总页数】6页(P181-186)
【关键词】泰和乌骨鸡;酪氨酸;生产性能;游离酪氨酸;黑色素
【作者】赵艳平;黎观红;瞿明仁;李建喜
【作者单位】江西农业大学动物科技学院,南昌,330045;江西农业大学动物科技学院,南昌,330045;江西农业大学动物科技学院,南昌,330045;江西省家畜血吸虫防治站,南昌,330046
【正文语种】中文
【中图分类】S831.5
泰和乌骨鸡(Taihe silky fowls)原产于江西省泰和县，具有乌皮、乌肉、乌骨等十
大特征，是我国特有的珍贵家禽[1]，具有特殊的营养滋补和药用保健价值。

《本
草纲目》中记载:“泰和乌鸡的入药效果与乌鸡皮、骨、肉中的黑色素的深浅有关，其颜色愈黑者，入药愈佳”[2]。

胡泗才等[3]研究表明:泰和乌骨鸡黑色素能明显延长雄性果蝇的平均寿命。

现代医学证明，黑色素具有抗氧化、清除体内自由基和延缓衰老等作用[4-6]。

目前，对泰和乌骨鸡药理作用的解释主要归因于泰和乌骨鸡
机体的黑色素，认为乌骨鸡的经济与药用价值主要决定于乌骨鸡的“乌色”性状。

因此，提高泰和乌骨鸡体内黑色素含量，是提高泰和乌骨鸡药用滋补价值的重要措施。

国内外对乌骨鸡黑色素的分布、沉积规律、乌度特征以及黑色素的物理化学性质、基因调控等方面进行了大量研究[7-11]。

但到目前为止很少见有关如何采用营养调控措施来提高泰和乌骨鸡黑色素含量及药用价值的研究报道。

动物体内黑色素是由酪氨酸经酪氨酸酶的作用，经过一系列复杂的生物转化过程而形成的。

酪氨酸是黑色素合成的前体物质[12]，由此推断，日粮酪氨酸水平可能对泰和乌骨鸡组织黑色素的合成具有重要影响。

为此，本试验采用6种酪氨酸水平
的日粮饲喂泰和乌骨鸡，观察日粮酪氨酸水平对泰和乌骨鸡1～4周龄生产性能及血清和组织中游离酪氨酸含量和组织中黑色素含量的影响，从而为利用营养调控技术提高泰和乌骨鸡药用滋补价值提供依据。

1 材料与方法
1.1 试验动物与试验设计
采用单因子试验设计方法。

选用健康、体重均匀的1日龄泰和乌骨鸡270只，随
机分成6个处理，每个处理设3个重复，每个重复15只鸡，饲养至4周龄。

各处理间初始体重无显著差异(P＞0.05)。

在试验期，6个处理分别饲喂酪氨酸水平为
0.38%、0.58%、0.78%、0.98%、1.18%和1.38%的日粮。

1.2 试验日粮
依据NRC(1999)家禽营养需要和本实验室前期实验结果配制基础日粮，其组成及
营养水平见表1，其酪氨酸水平为0.38%(实测值)。

在基础日粮中按照试验设计分别添加不同水平的晶体酪氨酸，使试验日粮酪氨酸分别达到相应水平。

所有日粮除酪氨酸外，其余营养水平均相同。

酪氨酸购于北京嘉康源有限公司，纯度为98.5%以上。

表1 基础日粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis，%)1)预混料为每千克日粮提供Premix provided following per kg of diet:VA 12 500 IU;VD33 750 IU;VE 20
IU;VK33.75 mg;VB13.75 mg;VB28 mg;VB6 3.75 mg;VB1225 mg;生物素
biotin 100 mg;尼克酸 nicotinic acid 50 mg;叶酸 folic acid 1.25 mg;泛酸钙calcium pantothenate 12.5 mg;Cu 8 mg;Fe 80 mg;Zn 40 mg;Mn 60 mg;I
0.35 mg;Se 0.15 mg。

2)计算值 Calculated values。

3)实测值 Determined values。

项目Items 含量Content原料Ingredients玉米Corn 51.40玉米淀粉Corn starch 13.50麦麸Wheat bran 3.00花生仁粕Peanut meal 18.60菜籽粕
Rapeseed meal 7.00菜籽油Rapeseed oil 2.00食盐NaCl 0.30石粉Limestone 1.30磷酸氢钙CaHPO4 1.70蛋氨酸Met 0.14赖氨酸Lys 0.46预混
料Premix1) 0.60合计Total 100.00营养水平Nutrient levels代谢能
ME(MJ/kg)2) 12.16粗蛋白质CP2) 17.41钙Ca2) 0.97有效磷AP2) 0.46蛋氨酸Met3) 0.35赖氨酸Lys3) 0.94酪氨酸Tyr3) 0.38
1.3 饲养管理
试验于2008年10月至2008年11月在江西农业大学动物科技学院饲养实验室
进行。

各处理泰和乌骨鸡的饲养条件完全相同。

试验鸡采取随机分层立体饲养，自由饮水(试验的第1～3天在鸡的饮水中加入多维和葡萄糖)，用红外灯24 h保温，第1周育雏室室温控制在34～35℃，以后每周下降2℃，湿度保持在55%～65%。

定期清理打扫鸡舍卫生并消毒，每天冲洗饮水器。

按照正常免疫程序进行免疫。

1.4 测定指标与方法
1.4.1 生产性能指标
于4周龄末晨喂前逐只空腹称重，记录各重复的饲料消耗量，计算平均日增重(average daily gain，ADG)、平均日采食量(average daily feed intake，ADFI)
和料重比(ratio of feed to gain，F/G)。

1.4.2 血清及组织中游离酪氨酸含量的测定
第4周龄末从每处理中选1只(共18只)健康状况良好、接近平均体重的乌骨鸡，
于清晨空腹称重后，立即放血宰杀，收集约5 mL血液于EP管中，室温静置 30 min后，3 500 r/min(630×g)离心3 min，取得血清并分装，-20℃保存备用。

打开腹腔，分别取心脏、肝脏、肌肉(胸部)、皮肤(胸部)，置于-20℃冰箱中保存。

样品前处理:将样品从冰箱中取出，置室温下解冻后取组织0.5 g加入1 mL生理盐水在冰浴中匀浆2 min，用1 mL生理盐水清洗匀浆器3次，再用0.5 mL生理盐
水清洗匀浆器1次，合并匀浆液和清洗液，然后置于低温高速离心机中4℃离心
15 min(9 500×g)将上清液作为组织待测液，装入5 mL的EP管中，置于-20℃
冰箱中冷藏待测。

测定方法参照邹明珠等[13]的方法并稍加改进:按表2操作程序进行检测，用722
可见分光光度计测定吸光度，波长480 nm，比色杯光径1 cm，空白管调零，读
取0 min时的吸光度，按下列公式计算:
样品中游离酪氨酸的含量(mol/L)=(A+0.017)×10-3/3.1。

1.4.3 组织中黑色素含量的测定
参照Ozeki等[14]的方法并稍加改进:准确称取10 mg组织溶解在1 mL的Soluene-350∶water=9∶l(V/V)试剂中，沸水浴45 min，冷却，用722可见分
光光度计在500 nm处测定吸光度。

1.5 统计分析
所有结果以“平均值±标准差”表示。

采用SPSS 13.0软件对数据进行方差分析和Duncan氏多重比较。

表2 血清及组织游离酪氨酸含量测定步骤Table 2 Procedure of assay for dissociative tyrosinase(TYR)contents in serum and tissues (μ L)样本和试剂Sample and reagent 测定管Determination tube 空白管Blank tube样品液Sample solution 100 —4-氨基安替比林4-aminoantipyrine(5.0×10-2mol/L) 500 500 NH4OH-NHCl缓冲溶液NH4OH-NHCl buffer solution(pH 9.40) 250 250高碘酸钠溶液Sodium periodate(0.1 mol/L) 250 250蒸馏水Distilled water 1 900 2 000总体积Total volume 3 000 3 000
2 结果
2.1 日粮酪氨酸水平对泰和乌骨鸡生产性能的影响
由表3可知，泰和乌骨鸡的平均日增重和平均日采食量随着日粮酪氨酸水平的提
高而提高，料重比则随之下降，当日粮酪氨酸水平为1.18%时的平均日增重最大，
料重比最低，之后继续提高日粮酪氨酸水平，平均日增重则降低，料重比增大。

1.18%水平组泰和乌骨鸡的平均日增重极显著高于其他各水平组(P＜0.01)，料重
比极显著低于除0.78%水平组和0.98%水平组之外的其他各组(P＜0.01)。

表3 日粮酪氨酸水平对1～4周龄泰和乌骨鸡生产性能的影响Table 3 Effects of dietary tyrosine levels on performance of Taihe silky fowls at 1～4 weeks of age同列内具有相同字母肩标者表示差异不显著(P＞0.05)，具有不同大写字母肩
标者表示差异极显著(P＜0.01)，具有不同小写字母肩标者表示差异显著(P＜0.05)。

In the same column，values with the same letter superscripts were not significantly different(P＞0.05)，while with the different capital letter superscripts were significantly different(P＜0.01)，and with the different small letter superscripts were significantly different(P＜0.05).日粮酪氨酸水平Dietary tyrosine levels(%) 平均日增重ADG(g/d) 料重比F/G 平均日采食量ADFI(g/d)0.38 4.86±0.01dD 2.20±0.01bB 10.69±0.03dD 0.58 5.28±0.04cBC 2.17±0.02bcB 11.47±0.04cC 0.78 5.33±0.09cBC 2.16±0.01bcBC
11.51±0.16cC 0.98 5.61±0.03bB 2.09±0.00cdBC 11.75±0.06cC 1.18
6.07±0.12aA 2.04±0.01dC 12.39±0.17bB 1.38 5.26±0.03cC 2.58±0.06aA 13.59±0.26aA
2.2 日粮酪氨酸水平对泰和乌骨鸡血清及组织中游离酪氨酸含量的影响
由表4可知，泰和乌骨鸡血清及组织中游离酪氨酸的含量随着日粮中酪氨酸添加
水平的提高呈现出提高的趋势，当日粮酪氨酸水平为1.18%时游离酪氨酸的含量
达到最高，且极显著或显著高于其他各水平组(P＜0.01或P＜0.05)，当日粮酪氨
酸水平为1.38%时，游离酪氨酸的含量有所下降。

2.3 日粮酪氨酸水平对泰和乌骨鸡不同组织中黑色素含量的影响
由表5可知，随着日粮酪氨酸添加水平的提高泰和乌骨鸡组织中黑色素含量先增
加后降低。

心脏、肌肉、皮肤中黑色素的含量在1.18%水平时达到最高且与其他
各水平组差异极显著(P＜0.01);而肝脏组织中黑色素的含量在0.98%水平达到最高，也与其他各水平组差异极显著(P＜0.01)。

3 讨论
在本试验条件下，在1～4周龄泰和乌骨鸡所有生产性能指标、血清和组织中游离酪氨酸的含量及组织中黑色素的含量随着日粮酪氨酸水平(0.38%、0.58%、
0.78%、0.98%、1.18%和1.38%)的提高先提高后降低，除肝脏组织中黑色素的
含量在0.98%水平达到最高外，均在1.18%水平时达到了最佳，且与其他各水平
组差异极显著或显著(除与0.98%水平组料重比差异不显著外)(P＜0.01或P＜
0.05)。

表4 日粮酪氨酸水平对4周龄泰和乌骨鸡血清及组织中游离酪氨酸含量的影响Table 4 Effects of dietary tyrosine levels on the dissociative tyrosine contents in serum and tissues of Taihe silky fowls at 4 weeks of age (mol/L)日粮酪氨酸水平Dietary tyrosine levels(%) 血清Serum 心脏Heart 肝脏Liver
肌肉Muscle 皮肤Skin 0.38 0.297E-4±0.002cB0.251E-4±0.009fE0.373E-
4±0.005dC0.323E-4±0.002eD1.542E-4±0.005dD 0.58 0.322E-
4±0.002bA0.283E-4±0.007eE0.399E-4±0.009dC0.344E-4±0.003deD1.880E-4±0.039cC 0.78 0.329E-4±0.002abA0.533E-4±0.007dD0.430E-
4±0.122dC0.406E-4±0.007cC2.001E-4±0.041cBC 0.98 0.331E-
4±0.004abA0.922E-4±0.010bB0.545E-4±0.034cB0.428E-4±0.014cC2.076E-
4±0.129bcBC 1.18 0.333E-4±0.003aA1.013E-4±0.007aA0.712E-
4±0.010aA0.738E-4±0.001aA2.551E-4±0.082aA 1.38 0.296E-
4±0.007cB0.834E-4±0.008cC0.627E-4±0.045bAB0.509E-4±0.006bB2.258E-
4±0.054bAB
表5 不同日粮酪氨酸水平对4周龄泰和乌骨鸡不同组织中黑色素含量的影响
Table 5 Effects of different dietary tyrosine levels on melanin content in different tissues of Taihe silky fowls at 4 weeks of age日粮酪氨酸水平Dietary tyrosine levels(%) 心脏Heart 肝脏Liver 肌肉Muscle 皮肤Skin 0.38 0.150±0.001eE 0.297±0.001fF 0.224±0.006eE 0.775±0.001eE 0.58
0.183±0.001dD 0.517±0.004dD 0.282±0.004dD 0.820±0.011dD 0.78
0.194±0.002dD 0.564±0.003bB 0.311±0.011cC 0.873±0.009cC 0.98
0.222±0.005cC 0.610±0.006aA 0.341±0.003bB 0.945±0.003bB 1.18
0.346±0.006aA 0.542±0.002cC 0.423±0.003aA 1.108±0.002aA 1.38
0.261±0.007bB 0.488±0.002eE 0.327±0.006bcBC 0.876±0.004cC
瞿明仁[15]和Li等[16]研究发现，泰和乌骨鸡对酪氨酸需要量与外来肉鸡及其他地方品种鸡相比存在很大差异。

泰和乌骨鸡与生长速度相近的生长期白壳蛋鸡相比，其苯丙氨酸+酪氨酸的需要量比生长期白壳蛋鸡高18.49%～26.50%，这应与泰和乌骨鸡独特的遗传特性有关。

泰和乌骨鸡与其他品种家鸡相比，最显著的区别是其体内含有大量的黑色素。

乌骨鸡黑色素是由酪氨酸经酪氨酸酶的作用，经过一系列复杂的生物转化过程而形成，酪氨酸酶是黑色素生成的关键酶和限速酶，其在体内的表达量和活性决定着黑色素合成的速度和产量[12]。

Solminski等[17]利用仓鼠
黑素细胞进行体外培养发现，酪氨酸不仅是黑色素的前体，而且提高培养液中酪氨酸的水平还可上调酪氨酸酶的活性，并进而提高黑色素的合成;酪氨酸对黑素细胞
酪氨酸酶活性的促进作用存在剂量依赖性，在一定浓度范围内，酪氨酸酶活性随酪氨酸浓度的提高而提高，但当酪氨酸水平超过一定范围时，反而会对酪氨酸酶活性有抑制作用。

与此相似，人皮肤黑素细胞体外培养发现，在适宜酪氨酸水平范围内，高水平的酪氨酸总是伴随着黑色素沉积的增加，但过高水平的酪氨酸则抑制由黑素细胞刺激激素(α-melanocyte-stimulating hormone，α-MSH)诱导的黑素细胞
增殖反应和黑色素合成，并改变皮肤黑素细胞形态[18-19]。

本试验亦发现，日粮
酪氨酸水平在0.38%～1.18%范围内，泰和乌骨鸡组织黑色素含量随酪氨酸水平
的提高而升高，而当日粮酪氨酸水平超过1.18%后组织黑色素含量开始下降，这
与Solminski等[17]体外细胞培养的结果一致。

这种现象也符合酶反应动力学规律，随着酶反应的进行以及底物浓度的进一步提高，反应产物可阻抑反应的顺利进行，即存在反馈抑制作用。

这一点也可从组织游离酪氨酸浓度与日粮酪氨酸水平之间的变化趋势得到反映。

而且，酪氨酸在体内还存在其他的代谢途径，随着日粮酪氨酸水平的进一步提高，酪氨酸其他代谢途径亦增强，这些代谢途径的中间产物有可能对黑色素细胞和酪氨酸酶活性产生不利影响，尤其是在过高酪氨酸水平下。

因此，为最大程度地促进泰和乌骨鸡组织黑色素的合成，日粮需提供较高水平的酪氨酸，在本试验条件下，以1.18%水平为宜。

Avraham等[20]研究发现，给运动小鼠注射非必需酪氨酸能够通过抑制5-羟色胺生成而抑制运动性食欲减退，提高小鼠采食量、认知力和运动耐受力。

同样地，通过改变日粮酪氨酸水平可调节动物(哺乳动物和鸟类动物包括鸡、鸭、火鸡等)体重[21]，当动物体重降低时，提高日粮酪氨酸水平可提高动物采食量和平均日增重;
而当动物超重时，降低日粮酪氨酸水平可降低平均日增重。

本试验亦发现，在一定水平范围内，泰和乌骨鸡平均日增重和平均日采食量有随日粮酪氨酸水平的提高而增加的趋势，且变化趋势与组织黑色素含量变化一致。

由此可知，通过提高日粮酪氨酸水平不仅可以提高泰和乌骨鸡生产性能，还可促进泰和乌骨鸡组织黑色素的合成。

研究发现，饲喂苯丙氨酸+酪氨酸缺乏的日粮会导致黑发猫的毛发由黑色变成红褐色，向日粮中添加充足的酪氨酸或苯丙氨酸+酪氨酸可防止这一变化，毛发中黑色素含量与日粮酪氨酸水平(日粮苯丙氨酸含量固定为10 g/kg)成正相关关系;然而，维持毛发最佳黑色素沉积时苯丙氨酸+酪氨酸需要量高于维持最大生长需要量的2倍[22-24]。

综合本试验各指标，日粮酪氨酸水平在1.18%时，泰和乌骨鸡可
同时取得最大生长性能和组织黑色素沉积。

4 结论
在本试验的条件下，以日粮中1.18%的酪氨酸为适宜水平，泰和乌骨鸡组织中黑色素的合成量最大，生产性能最高。

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