微生物检验 第十二章 真菌
微生物标本采集手册
微生物标本采集手册目录第一章血液及骨髓标本的微生物检验 (1)第二章痰标本的微生物检验 (5)第三章上呼吸道标本的微生物检验 (8)第四章尿液标本的微生物检验 (10)第五章粪便标本的微生物检验 (12)第六章化脓和创伤标本的微生物检验 (14)第七章脑脊液标本的微生物检验 (16)第八章胆汁标本的微生物检验 (18)第九章胸水标本的微生物检验 (20)第十章腹水标本的微生物检验 (22)第十一章心包液标本的微生物检验 (24)第十二章关节液标本的微生物检验 (26)第十三章鞘膜积液标本的微生物检验 (28)第十四章生殖道标本的微生物检验 (30)第十五章外眼部标本的微生物检验 (33)第十六章感染性疾病相关检测 (35)第一节降钙素原检查 (35)第二节内毒素检查 (37)第三节1-3-β-D-葡聚糖检查 (39)第一章血液及骨髓标本的微生物检验一、检查项目血液、骨髓液的细菌培养二、标本采集【标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
【标本送检指征】病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。
1 发热（≥38℃）或低温（≤36℃）2 寒战3 白细胞增多（＞10×109/L，特别有“核左移”时）4 粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×109/L）5 血小板减少6 皮肤、粘膜出血7 昏迷8 多器官衰竭9 血压降低10 呼吸加快几种特殊情况：1 可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。
2老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养。
骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。
但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。
美国BD公司血培养仪配套血培养瓶(我院)，各种血培养仪配套血培养瓶或手工血培养瓶。
微生物检验常用技术与方法—临床真菌检验技术与方法(微生物检验课件)
掌握真菌的检验方法。 熟悉真菌标本采集及注意事项； 熟悉真菌的鉴定程序；真菌药物 敏感试验方法。
第一节 真菌形态检验技术
一、标本的采集和处理
1. 标本的采集—— 根据真菌感染部位采集不同的标本。 浅部真菌感染 取毛发、皮屑、指（趾）甲等标本
深部真菌感染
取痰液、脓汁、血液、脑脊液等标本
培养基用途 真菌的常规培养 真菌的常规培养 观察白假丝酵母菌的厚膜孢子 观察真菌菌落色素，用于鉴别 生化反应鉴别培养（红色癣菌和石膏样癣菌） 深部真菌培养 真菌的培养与鉴定
第二节 真菌培养技术
显色鉴定培养基
代谢基质 产色基团
原
真菌的酶
理
分解代谢基质
真菌特异性酶的 底物（无色）
产色基团游离 （显色）
4. 病理组织检查 用于深部真菌感染的诊断。
5. 核酸检测
用于真菌的分型鉴定。
有ELISA、生物学方法、薄层层析法、高效液相
6. 真菌毒素的检测 色谱法等多种方法。
7. G试验
用于念珠菌、曲霉菌等深部真菌感染的早期诊断。
返回章内容
第四节 真菌检验G试验、GM试验
应用背景
• 侵袭性真菌病临床表现不典型，确 诊通常需要侵入性的组织标本，因 此有较高的漏诊率。目前国内大多 数医院都在开展非侵袭性实验室技 术如G试验和GM试验，成为真菌 感染的诊断标准之一，以提高真菌 感染的阳性率。
同化氮源试验
• 检测真菌对氮源利用能力的试验，主 要用于鉴定酵母菌。
明胶液化试验
• 某些真菌具有明胶酶，可分解明胶蛋 白，使其失去凝胶性质而不能凝固。
尿素分解试验
• 某些真菌具有尿素酶，可分解尿素。
第三节 真菌的鉴定方法
真菌的微生物检验
§ 多细胞真菌由菌丝和孢子组成
菌丝分枝交织成团，形成菌丝体（Mycelium）， 并长有各种孢子，这类真菌即一般称为霉菌（Mold）。
§ 由于生活环境（如营养、温度、氧气等）的 改变，有些真菌的孢子与菌丝两种形态可以
互变，这类真菌称为二相性真菌（dimorphic fungus），如球孢子菌、组织胞浆菌及芽生 菌。
多见
无
单纯菌丝
PPT文档演模板
真菌的微生物检验
（二）检验方法：
§ 1．直接镜检：直接采取病变部位的标本，用显微镜检 查有无菌丝及孢子的存在，本法迅速简便，是临床真 菌检查最常用的方法
PPT文档演模板
真菌的微生物检验
2．分离培养：
取毛发、皮屑、甲屑等标本，用70％乙醇 消毒，接种沙保氏琼脂斜面培养基，25℃培养 7～14天，根据菌落形态及颜色、并挑取菌落 镜检菌丝及孢子的特征进行鉴定。
PPT文档演模板
真菌的微生物检验
（二）致病性和免疫性
§白色念珠菌可侵犯人体许多部位，可引起：
1. 皮肤念珠菌病：好发于皮肤皱褶处； 2. 粘膜念珠菌病：鹅口疮、口角炎、阴道炎最多见。 3. 内脏及中枢神经念珠菌病：肺炎、肠胃炎、心内膜
炎、脑膜炎、脑炎等。
§机体可产生一定免疫力。
PPT文档演模板
真菌的微生物检验
§ 深部真菌可用血琼脂或脑心葡萄糖血琼 脂37℃培养；
PPT文档演模板
真菌的微生物检验
（三）免疫学试验
§用于检测深部感染真菌的抗体，作为辅助诊 断组织胞浆菌、念珠菌、曲霉菌。
§检测深部感染真菌的抗原，用于早期、快速、 特异的诊断。
▪ 乳胶凝集法检测新型隐球菌病患者的荚膜多糖抗原 ▪ ELISA法检测白色念珠菌感染者的甘露聚糖抗原 ▪ 免疫荧光法检测孢子丝菌病患者的可溶性抗原
真菌检验
• 掌握白假丝酵母菌的鉴定
二、实验器材和试剂
• • • • 菌种：白假丝酵母菌 培养基：沙氏培养基，血琼脂 试剂：革兰染液， 其他：载玻片、小试管、 温箱等。
1.分离培养、菌落检查：将白假丝酵母菌和接种于 沙氏平板和血平板上，室温（ 25 ℃ 左右）培养后 观察其菌落特征。白假丝酵母菌的菌落均为酵母 型，表面光滑湿润．边缘整齐，灰白色或奶酪色。
2.显微镜检查：取白假丝酵母菌培养物制片， 经革兰染色，镜下观察其芽生孢子及是否有 假菌丝
3.芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于0.5ml人或动 物血清中，37℃孵育1.5-4h，显微镜观察有无芽管形 成。白假丝酵母菌可由孢子长出短小的芽管。
五、实验结果
• 记录所观察到的菌落形态、染色情况 及相关试验结果。 • 完成实验报告
请确保油镜头擦拭干净！ 请安排同学留下值日
EP6.0-2.6.12微生物限度检查
2.6.12非无菌产品的微生物限度检查（总的需氧菌菌落计数）本章包括两种检验方法。
第一种方法给出的是测定适用性的参考方法。
因些在一个专论中依照本法就意味着依从第一种方法，除非特别指出要使用第二种方法。
第二种方法也是欧洲药典的官方组成部分，并且值得注意的是第二种方法特别适用于销售认可。
一旦该相关专论被修订就意味着将用第二种方法替代第一种方法。
第二种方法包含日本药典和美国药典的共同部分使其能够协调。
A．欧洲药典方法该试验方法所讲的是在需氧条件下生长的嗜温性细菌和真菌类微生物的定量检测。
设计该试验的最初目的是以审疑的态度为了测定一种物质按照欧洲药典的检测方法是否符合微生物的特定限定要求。
如果是以这种目的来测定的话，根据下述方法，包括所需的样品数和按照下面方法来解释结果。
该法也用来测定药典所描述的抗菌保留的有效性（5.1.3）。
此外，该法也可以用来监测原料质量同时也可以用来作为微生物质量检测的指导方针（5.1.4）。
如果是用来指导以下目的，如生产厂家的原料检测和/或终产品的检测或终点判定，则包括所需样品数和结果解释的试验方法就必须在生产厂家和主管当局之间达成一致。
执行该方法所设计的实验条件就必须避免所测产品受到意外污染。
避免污染所采取的措施不侧够影响任何所测的微生物。
如果所测产品有抗菌活性，则该产品活性必须补充分中和掉。
如果因为该种目的使用灭活剂则必须证明该灭活剂对微生物的有效性和无毒性。
测定总的需氧微生物数通过微孔滤膜法或专论中所描述的平板菌落计数法。
当没有其它方法可以釆用来测定细菌数时保留最大可能数（Most Probable Number, MPN）.选择哪种应该根据产品的特性和可预计的微生物数等因素来选择。
任何选择的方法必须通过合理的验证。
当根据5.1.3或5.1.4使用时，可以使用平板浇注法和表面扩散法，和微孔滤膜法。
样品制备：抽样检验方法：所选样品必须遵循抽样样品规则。
抽样检验的结果依赖于下列因素：如样品批号，不可接受的高污染产品的健康危害，产品特性，可预料的污染程度等。
真菌学检验
浅部感染真菌 深部感染真菌
42
浅部感染真菌
43
定义：侵犯皮肤、毛发、指甲等角化组织。 分类：皮肤癣真菌(临床最多见） 表皮感染真菌
皮下组织感染真菌
44
皮肤癣真菌
侵犯皮肤、毛发、指甲等角蛋白组织引起癣症
（发癣、体癣、甲癣等），分三属，约45种
45
皮肤癣菌的特征
种 数 侵犯部位 皮 指 毛 肤 甲 发 形态特征 小分生孢 子
鉴定试验：
59
如毛发穿孔试验、脲酶试验等。
被石膏样毛癣菌穿孔的毛发
60
其它浅部真菌
糠秕马拉色菌
花斑癣
61
着色真菌
62
花瓶型分生孢子
63
孢子丝菌
孢子丝菌
64
深部感染真菌
65
定义：能侵袭深部组织和内脏及全身的真菌. 主要致病菌： 假丝酵母菌
隐球菌
曲霉菌 毛霉菌 组织胞浆菌 卡氏肺孢菌
66
内可见芽生孢子、假菌
丝；
68
假菌丝
(pseudohypha): 指酵母菌菌种进行一 连串的芽殖后，长大的子细胞仍不脱落分离， 并继续出芽，细胞成串排列，在分隔处缢缩, 这种菌丝状的细胞串就称为假菌丝。
微生物特性： 在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。
70
厚膜孢子形成试验
微生物检验
1、标本直接检查：
平皿培养：只能培养生长繁殖较快的真菌; 大试管培养:用于皮肤癣菌的培养和真菌菌种的保存;
玻片培养(微量、小培养):可用于真菌菌种的鉴定。
39
观察菌落形态应注意：
1、菌落的性质：酵母菌还是霉菌； 2、菌落的大小：病原性真菌菌落小，条件致病 性真菌则大； 3、菌落颜色：病原性真菌色淡，污染性真菌色深； 4、致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开裂，污染性 真菌菌落不下沉，很少引起培养基开裂。
临床检验技士-微生物检验 讲义 12
第十二章微生物自动化检测1.微生物自动培养系统（1）自动血培养检测系统（2）自动分枝杆菌检测系统2.微生物自动鉴定系统（1）原理（2）基本结构与性能（3）工作流程和操作要点3.自动药敏检测系统（1）微量稀释法试验系统（2）纸片扩散法阅读系统自动血培养检测系统原理：检测细菌和真菌生长时所释放的二氧化碳来作为血液中有无微生物存在的指标。
检测技术：放射标记、颜色变化（CO2感受器）、荧光技术和压力检测等。
适用：血培养，其他无菌部位标本如脑脊液、胸水、腹水和关节液等。
仪器的基本结构包括：①主机，恒温孵育系统（全自动）、检测系统；②计算机及其外围设备；③培养瓶；④抗凝剂和吸附剂。
影响因素：正确使用和定期维护；采血次数；采血时间；采血量；采血方法；及时送检；终末传代。
自动分枝杆菌检测系统原理：检测分枝杆菌生长时所释放的C02或者所消耗的02作为标本中有无微生物存在的指示。
检测技术：放射标记、颜色变化、荧光技术等。
微生物自动鉴定系统的原理微生物数码分类鉴定技术基本原理：计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。
（1）数据库：已知临床相关菌株按照对各种生化反应的出现频率事先编码建立数据库。
（2）数码鉴定：计算未知菌对5种反应的出现频率。
（3）编码：对未知菌编码。
（4）查码。
微生物自动鉴定系统的基本结构与性能全自动微生物鉴定仪的主要结构：·充液/封口部件：标本注入。
·读数仪/孵箱：读取样本生长变化。
·计算机：分析资料储存。
·键盘：输入操作指令。
·打印机：显示打印结果。
微生物自动鉴定系统的工作流程及操作要点（1）菌种准备：标本处理，预实验和菌落的选择。
（2）接种：制备细菌悬液，接种。
（3）观察及记录结果。
（4）结果解释。
自动药敏检测系统-微量稀释法试验系统目前应用最多的系统。
分类：计算机辅助手工系统、半自动系统、全自动系统。
原理：肉汤稀释法；常采用比浊法检测液体培养基中细菌生长。
(医学检验技术专业)微生物学检验教学
《微生物学检验》教学大纲课程代码：00031025课程名称：微生物学检验课程总学时：136学时（其中理论68学时，实验68学时）课程类别：必修课课程性质：专业课面向专业：医学检验技术专业开设单位：基础教学部病原生物与免疫学教研室一、课程的性质、地位和任务《微生物学检验》是医学检验技术专业的一门专业课程。
本课程总论部分主要介绍微生物学及微生物学检验的基本知识，各论部分主要介绍常见病原微生物的生物学特性，包括形态染色特征、培养特性、生化反应特点、抗原性和分类，致病性和免疫性，微生物学检验的标本采集要求与方法、检验鉴定程序、具体的鉴定方法及鉴定要点和报告方式。
通过实验课程的学习，巩固和加强对微生物学及微生物学检验理论知识的认识和理解，提高学生的实际操作能力，培养学生创新思维和实事求是的科学态度。
二、课程教学目标（一）理论、知识方面1.明确微生物学检验的研究内容，学习微生物学检验的目的，认识医学微生物分类的意义及各类医学微生物的主要特性。
2.掌握医学微生物的主要生物学性状、遗传与变异机理、理化因素及生物因素对医学微生物的影响。
3.熟悉病原微生物的主要传播途径、致病性及免疫性。
学会对各类病原性微生物感染的常用实验室诊断方法。
4.明确病原微生物感染的特异性防治和药物治疗原则。
5.掌握常见的微生物所致疾病的临床症状和诊断指标6.了解对各类病原微生物的防治原则。
（二）能力、技能方面1.熟练掌握显微镜的使用和保养。
2.正确阐述常见的病原微生物的生物学性状，致病物质，主要传播途径及引起疾病的类型。
3.掌握常见的病原微生物感染的诊断方法。
4.将理论知识与具体的实验操作相结合，熟练掌握各种基本的医学微生物学诊断方法的机理，熟练各种基本实验的操作。
5.能运用学到的微生物学及微生物学检验专业知识，对各类临床标本进行病原微生物学的鉴定，及时地发出规范、准确的鉴定报告。
三、课程教学内容和要求第一篇微生物学检验基础绪论（1学时）1.教学内容及基本要求【教学内容】（1）微生物与微生物学（2）医学微生物学发展简史（3）微生物学及微生物学检验【基本要求】：掌握:微生物的定义与特点;微生物的分类。
微生物实验室真菌检查质量控制流程
微生物实验室真菌检查质量控制流程1.设立实验室标准操作程序（SOP）在实验室进行真菌检查前，首先需要制定标准操作程序。
SOP应该包括实验的目的、所需材料和试剂、操作步骤、质量控制要求、仪器设备的校准和维护等详细信息。
制定SOP有助于确保实验的规范化和一致性。
2.确认标准菌株和对照菌株在真菌检查中，确定一些标准菌株和对照菌株对于质量控制至关重要。
标准菌株通常用于检验实验室技术的准确性和可重复性，而对照菌株则用于验证其中一实验的可靠性。
标准菌株和对照菌株的选择应根据实验的具体目的和要求来确定。
3.样品采集和处理4.质量控制样品准备5.实验室设备的校准和维护实验仪器和设备的精确度和可靠性对实验结果的准确性具有重要影响。
实验室应定期对仪器设备进行校准和维护，并记录校准和维护的结果。
这样可以确保仪器设备的正常工作和准确性。
6.检测方法的验证实验室进行真菌检查时，应验证所使用的检测方法的准确性和可靠性。
方法的验证包括可重复性和恢复率等。
验证的结果应记录并与实验室要求进行比较。
7.质量控制数据分析质量控制实验的数据分析是质量控制的最后一步。
通过对数据的分析，可以评估实验的准确性和可靠性。
如果质控数据不符合预期的结果，应重新检查实验过程，找出问题所在，并采取措施进行纠正。
8.质量管理体系的建立和维护在真菌检查质量控制流程中，建立和维护一个完善的质量管理体系是非常必要的。
质量管理体系应包括实验室SOP的建立和执行、质量控制记录的管理、人员培训和技能认证等。
定期对质量管理体系进行审核和评估，以确保体系的有效性和持续改进。
以上是一个典型的真菌检查质量控制流程。
质量控制流程的目的是确保实验结果的准确性和可靠性，以提高实验室的技术水平和服务质量。
实验室应根据自身的具体情况和实验需求，制定适合的质量控制流程，并根据实际情况不断改进和完善。
真菌鉴定方法
真菌鉴定的方法主要有直接涂片、墨汁涂片、涂片或组织切片染色和培养检查12。
1.直接涂片：为最简单而重要的诊断方法。
取标本置玻片
上，加一滴10%KOH溶液，盖上盖玻片，在酒精灯火
焰上稍加热溶解角质后，轻轻加压盖玻片使标本透明即
可镜检。
可用于检查有无菌丝或孢子，但不能确定菌种。
2.墨汁涂片：用于检查隐球菌及其他有荚膜的孢子。
取一
小滴墨汁与标本（如脑脊液）混合，盖上盖玻片后直接
镜检。
3.涂片或组织切片染色：染色可更好地显示真菌形态和结
构。
革兰染色适用于白念珠菌、孢子丝菌等。
4.培养检查：可提高真菌检出率，并能确定菌种。
标本接
种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上，置室温或37℃培养
1-3周，必要时可行玻片小培养协助鉴定。
微生物检验-真菌PPT110页
2、要冒一次险!整个生命就是一场冒险。走得最远的人，常是愿意 去做，并愿意去冒险的人。“稳妥”之船，从未能从岸边走远。-戴尔．卡耐基。
梦 境
3、人生就像一杯没有加糖的咖啡，喝起来是苦涩的，回味起来却有 久久不会退去的余香。
微生物检验-真菌4、守业的最好办法就是不断的发展。 5、当爱不能完美，我宁愿选择无悔，不管来生多么美丽，我不愿失 去今生对你的记忆，我不求天长地久的美景，我只要生生世世的轮 回里有你。
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。——CocoCha nel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。——杰纳勒 尔·乔治·S·巴顿
谢谢！
பைடு நூலகம்
真菌的检验
第二十四页
菌落的观察
为了培养完整的巨大菌落以供观察记录，可将纯培养 物点植于平板上。
方法是：将平板倒转，向上接种一点或三点，每菌
接种两个平板，倒置于25～28℃温箱中进行培养。 当刚长出小菌落时，取出一个平皿，以无菌操
作，用小刀将菌落连同培养基切下1cm×2cm的 小块，置菌落一侧，继续培养，于5～14d进行观察。 此法代替小培养法，可直接观察子实体着生状态。
第十八页
检查视野数的确定
对一般样品，每个涂片均检查50个视野（每一个样品 至少应测25个视野，才能代表样品的各个部分。
如果检查结果阳性视野低于30％，则检查25个视野 即可；如果在30～40％之间，须检查50个视野；如 果在40～50％之间，须检查100个视野；如果在50 ％以上或超过更多，则要继续检查，直至检查25
定义：霉菌和酵母菌数的测定是指食品检 样经过处理，在一定条件下培养后，所得 1克（毫升）检样中所含的霉菌和酵母菌 落总数。（粮食样品是指1克粮食表面的 霉菌总数。）
检测方法：平板倾注混合法。
第十页
第十一页
真菌检测与细菌检测
培养基： 细菌是计数平板；真菌是PDA（加
抗菌素）、孟加拉红培养基。
第二十五页
斜面观察
将霉菌纯培养物划线接种(曲霉、青霉)或 点种(链刀菌或其他菌)于斜面，培养5～ 14d；
观察菌落形态，同时还可以将菌种管置显 微镜下用低倍镜直接观察孢子的形态和排 列。
第二十六页
制片
取载玻片加乳酸－苯酚液一滴，用接种针 钩取一小块霉菌培养物，置乳酸－苯酚液 中，用两支分离针将培养物撕开成小块， 切忌涂抹，以免破坏霉菌结构。
第二页
图片
第三页
[课件]微生物(真菌篇)PPT
![[课件]微生物(真菌篇)PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/7b941f1131126edb6f1a10ba.png)
用甲醛熏蒸被真菌污染的物品，可达到消毒的目的。 对常用抗生素如四环素、青霉素、链霉素等均不敏 感，灰黄霉素、制霉菌毒、两性霉素等对某些真菌 有抑制作用。
三、致病性
1.致病性真菌感染 主要是一些外源性真菌感染， 可引起皮肤、皮下及全身性真菌感染。 2.条件致病真菌感染 主要是一些内源性真菌引起 的，如假丝酵母菌、曲霉菌、毛霉菌等。
三）真菌的培养与繁殖
单细胞真菌中虽有少数酵母菌可以二分裂繁
殖，但多数真菌是以出芽、形成菌丝、产生 孢子以及菌丝分枝与断裂等方式进行繁殖。 真菌的繁殖力极强，但生长速度较慢
（四）真菌抵抗力
对热的抵抗力不强，一般60℃ 1h即被杀死 对干燥、日光、紫外线及多数化学药品的耐受性较 强。
3.真菌变态反应性疾病 在临床变态反应性疾病中 有一部分是由真菌引起的。常见的变态反应性疾病 有荨麻疹、接触性皮炎、哮喘等
பைடு நூலகம்
三、致病性
4.真菌性中毒 有些真菌在粮食和饲料上生长， 人、畜食用后可导致急性或慢性中毒，引起中毒的 可以是真菌本身,也可以是真菌产生的毒素。
5.真菌毒素与肿瘤的关系 近年来不断发现有些真 菌产物与肿瘤有关，例如：黄曲霉毒素有较强致癌 作用,摄入一定量的黄曲霉毒素可导致肝癌。
微生物(真菌篇)
真菌
真核细胞型微生物，属于真菌界。具有典型
细胞核，不含叶绿素，不分根、茎、叶。以 寄生或腐生方式生存。由单细胞或多细胞组 成的，细胞壁含几丁质和（或）纤维素。能 进行有性生殖和（或）无性生殖。
第一节
一、真菌的分类
真菌的基本特性
二、生物学性状
一）真菌的基本形态
多细胞真菌 二相性真菌 在体内或体外含动物蛋白 的培养基上37℃培养 为酵母型真菌，而在 体外普通培养基上 25℃培养时霉菌型真 菌 如球孢子菌、组织胞浆菌、 芽生菌和孢子丝菌、 副球孢子菌
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
大分生孢子 小分生孢子 芽生孢子
厚膜孢子 关节孢子
6
芽生孢子
精选课件
7
厚膜孢子
精选课件
8
关节孢子
精选课件
9
孢子囊孢子
精选课件
10
标本
（1）皮肤的角质性物质
注（2意）各（种1）分采泌集物的和标排本泄要物适宜
（3）血（液2）和在体用液药前采集标本 （4）脓（汁3）及采渗集出的物标本量要足
1．直接显微镜检查可采用透明胶带粘贴 取材法，将透明胶带直接贴于皮肤表面， 数分钟后揭下，直接贴于载玻片上镜检 或经棉蓝染色或革兰染色后镜检。可见 孢子和菌丝。孢子为圆形或卵形，厚壁， 芽颈较宽，常成簇分布；菌丝粗短，呈 腊肠样。
2．分离培养与鉴定
精选课件
28
毛癣菌属
• 毛癣菌属（Trichophyton）属半知菌亚门－丝孢菌目 －丛梗孢菌科，有20余种，其中14种能引起人和动 物的感染。
精选课件
15
（二）、真菌抗原检测
• 白假丝酵母菌甘露聚糖抗原、隐球菌多糖 荚膜抗原、组织胞浆菌循环多糖抗原
• 常用的方法有胶乳凝集试验、ELISA、半定 量放射免疫法
精选课件
16
（三）、真菌的分离培养
真菌培养是目前准确鉴定真菌的可靠方法 真菌的培养特点：三低两高
平皿培养 大试管培养
玻片培养
精选课件
21
直接检查 检测抗原 直接镜检
固定标 墨汁负 KOH 本染色 染色法 法
脑
毛发
脊
指甲
液 皮屑
临床标本
分离培养 测 分
动病
检
子
物理
测
生
实检
抗
沙氏培养基 物
验查
体
学
检
25℃
37℃
观察菌落
镜检、生化反应
精选课件
22
小结
真菌的致病性
真菌的基本特性：菌丝、孢子、培养特性
标本采集注意事项
常用的检查方法：显微镜检查、分离培养、 生化实验
真菌繁殖结构，一条菌丝可生成 多个孢子
孢子
芽胞
作用 真菌繁殖结构
细菌休眠结构，
抵御不良环境
低抗力 不强，加热60~70℃ 强 ， 有 的 可 耐
短时间即可死亡 100℃数小时
精选课件
5
Categories of spore
sexual se 叶状孢子
孢子囊孢子
真核细胞型微生物
有 有 有丝分裂，减数分裂
常有固醇 复杂，有内质网和高尔基体
80S 线粒体
精选课件
2
• Dimorphism （二相性真菌）
Unicellular
机体内寄生37℃ yeast
含动物蛋白培养基
普通培养基25℃
Multicellular
mold
沙保氏培养基25℃
精选课件
3
精选课件
4
Morphology of Spore
真菌
有细胞壁、典型细胞核，不含叶绿素，不分根、茎、叶 的真核细胞型微生物。细胞质内有完整的细胞器。
精选课件
1
原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较
原核细胞型微生物
细胞核结构 核膜 核仁 分裂方式 细胞质结构 质膜 内膜 核糖体 呼吸系统
无 无 主要以二分裂
常缺乏固醇 较简单，有中介体
70S 质膜或中介体
精选课件
30
微生物检验
1．标本采集采集新发生的皮肤损害边缘皮屑；指甲 近尖端下面甲屑；拔取无光泽病发。
2．直接显微镜检查
皮屑10%KOH液；指甲25%KOH/25%NaOH处理 镜检可见透明、有隔，常有分支的菌丝及成链的关节孢子
精选课件
31
皮肤癣菌感染的毛发
精选课件
32
三.分离培养 标本 70%乙醇或在青、链霉素混合液
局限性：
①阴性结果不能排除真菌感染；
②有假阳性结果。
精选课件
14
常用的染色方法
• 常用的染色方法有革兰染色、瑞氏染色、荧光染色， 乳酸酚棉蓝染色、还有墨汁负染色等。
• 对检测骨髓和外周血中的荚膜组织胞浆菌，需作瑞 氏染色或姬氏染色后镜检。
• 检测病人脑脊液标本中新生隐球菌，需作墨汁负染 色后检查，背景为黑色，新生隐球菌和荚膜不着色
1.糖(醇)类发酵试验
2.同化碳源试验
3.同化氮源试验
精选课件
19
核酸检测 毒素的检测 动物试验
精选课件
20
抗真菌药物分类--化学结构分类
1.多烯类抗生素，如两性霉素B、制霉菌素、 曲古霉素等。
2.吡咯类，包括酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、 伏立康唑、克霉唑、益康唑等。
3.其他类如氟胞嘧啶。
精选课件
毛癣菌属 表皮癣菌属 小孢子菌属
皮下组织感染真菌
着色真菌 孢子丝菌
精选课件
26
• 位置：寄居于人体皮肤和毛干的最表层。 因不接触组织细胞，很少引起宿主细胞反 应。
• 嗜脂性酵母样菌
• 代表：秕糠马拉色菌(Malasseziafurfur)
• 症状：皮肤表面出现花斑癣（汗斑）
精选课件
27
微生物检验
精选课件
23
思考题：
1.简述真菌的致病性特点。
2.真菌标本采集是有哪些注意事项？
3.形态学检查和培养在真菌检查中的意义。
精选课件
24
目的要求
（一）掌握毛癣菌属、表皮癣菌属和小孢子丝 菌生物学特性、微生物学检验方法及鉴定。 （二）熟悉浅部真菌感染的种类
精选课件
25
表面感染真菌
糠秕马拉色菌
皮肤癣真菌
• 临床上常见的有 红色毛癣菌(trichophyton rubrum) 须癣毛癣菌(T.mentagrophytes,又称石膏样毛癣菌) 许兰毛癣菌(T.schoenleinii,又称黄癣菌) 紫色毛癣菌（T.violaceum） 断发毛癣菌（T.tonsurans）
精选课件
29
毛癣菌：菌落灰白、红、橙或棕色, 表面呈绒毛状、粉粒状或蜡样。 大分生孢子细长棒状薄壁。菌丝有 螺旋状、球拍状、鹿角状和结节状
17
菌落的性状是鉴别真菌的重要特征
①菌落性质：酵母菌还是霉菌
②菌落大小：病原性真菌菌落小，而条件致 病性真菌菌落大
③菌落颜色 病原性真菌颜色淡， 污染真菌 颜色深；
④致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开 裂；污染性真菌菌落不下沉,很少引起开裂。
精选课件
18
真菌鉴定
菌种鉴定是一个复杂过程，仅观察菌落形态是远远 不够的，还需作生化反应，分子生物学鉴定，必要 时将菌种送有关单位鉴定。
（4）严格无菌操作
（5）采集的标本立即送检
精选课件
11
实验室检验
1. 镜检真菌形态 2. 真菌抗原检测 3. 真菌分离培养与鉴定 4. 真菌核酸检测 5. 真菌毒素检测
精选课件
12
• 癣病标本多用KOH湿片检查法
精选课件
13
意义
直接镜检阳性表示：
①有诊断意义。 ②看到的就是真菌的形态，可确定某些致病性真菌 的属或种。 ③判断某些真菌种的致病性等,如皮肤癣菌、曲霉等。