药物分析参考资料

药物：是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法和用量的物质。

药品：通常是指由药物经一定的处方和工艺制备而成的制剂产品，是可供临床用的商品。

药物通常比药品表达更广的内涵。

《中华人民共和国药品管理法》规定了：药品，包括中药材、中药饮片、中成药、化学原料药及其制剂、抗生素、生化药品、放射性药品、血清、疫苗、血液制品和诊断药品等。

药物分析：是利用分析测定手段，发展药物的分析方法，研究药物的质量规律，对药物进行全面检验与控制的科学。

GMP《药品质量生产管理规范》GSP《药品经营质量管理规范》GLP《药物非临床研究质量管理规范》GCP《药物临床试验质量管理规范》GAP《中药材生产质量管理规范》标准品：系指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位（或ug）计，以国际标准品进行标定。

对照品：指用于生物检测时，除另规定外，均按干燥品（或无水物）进行计算后使用的标准物质。

液体的滴：系在20℃时，以1.0ml水为20滴进行换算。

乙醇未指明浓度时，均系指95%（ml/ml）乙醇。

精密称定系指称取重量应准确至所取质量的千分之一; 称定系指称取重量应准确至所取质量的百分之一;精密量取系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求;量取系指可用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具。

取用量为“约”若干时系指取用量不得超过规定量的+10%。

恒重：除另有规定外，系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在0.3mg以下的重量。

空白试验：系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果。

比旋度：偏振光透过长1dm并每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。

百分吸收系数（E）：当溶浓度为1%（g/100ml）、液层厚度为1cm时的吸光度(A)。

药物安全性检查主要指标：异常毒性、热源、细菌内毒素、升压物质、降压物质、无菌、微生物、过敏性等。

《中国药典》2010版由一部（中药：药材和饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂）、二部（化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品一级药用辅料）、三部（生物制品）及其增补本组成，内容包括凡例、正文、附录、索引。

《中国药典》已经先后颁布9版（1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005、2010版）。

美国药典USP 英国药典BP 欧洲药典EP 日本药局方JP 国际药典Ph.Int.国家食品药品监督管理局领导下的国家级药品检验机构是中国药品生产制品检定所（2010年9月已更名为：中国食品药品检定研究院/中国药品检验总所），各省、自治区、直辖市药品检验所分别承担各辖区内的药品检验工作。

17.药品检验程序：取样（检品收检）检验留样报告。

药物的杂质与限量1.药物的纯度：指药物的纯净程度.2.药物中的杂质主要分为两个来源：（1）由生产过程中引入（2）在储藏过程中受外界因素的影响，引起药物理化特性发生变化而产生。

3.药物中的杂质按照其来源来分可分为一般杂质和特殊杂质。

（1）一般杂质：是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，它们含量的高低与生产工艺水平密切相关，所以也常常称为信号杂质。

（2）特殊杂质：是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质，也常常成为有关物质。

药物中的杂质按照其毒性分类，杂质又可分为毒性杂质和信号杂质。

重金属、砷盐为毒性杂质。

氯化物、硫酸盐等属于信号杂质，信号杂质一般无毒，但其含量的多少可反映出药物的纯度情况。

杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量，称之为杂质限量。

杂质限量=标准溶液的浓度×标准溶液的体积/供试品量×100%，即L=C×V/S×100%.药物中一般杂质的检查1.氯化物检查法原理：药物中的微量氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度进行比较，判断公式品中氯化物是否符合限量规定。

注意事项：（1）加硝酸的作用：可避免弱酸银盐及氧化银沉淀的干扰，且可加速氯化银沉淀的生产并产生较好的乳浊。

（2）氯化物浓度以50ml中含50~80ug的CL为宜此范围内氯化物所显浑浊度明显，便于比较。

（3）酸度以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。

1.硫酸盐检查法原理：药物中微量硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量的标准硫酸钾溶液在相同条件产生的硫酸钡浑浊程度进行比较，判断供试品硫酸盐是否符合限量规定。

注意事项：盐酸可防止碳酸钡或磷酸钡等弱酸形成钡盐沉淀对比浊的影响。

但酸度过大可是硫酸钡溶解，降低灵敏度；以50ml溶液中含2ml稀盐酸为宜。

2.铁盐检查法原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子，与一定量的标准铁溶液用同法处理后进行比色。

注意事项：（1）在盐酸酸性条件下反应，可防止Fe2+的水解。

经试验，以50ml溶液中含稀盐酸1ml为宜。

（2）加入氧化剂过硫酸铵的作用：既可氧化供试品中Fe2+成Fe3+，同时可防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。

3.重金属检查法重金属：系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫代钠作用显色的金属杂质。

第一法：硫代乙酰胺法（适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物为常用的方法）. 原理：硫代乙酰胺在弱酸性（pH=3.5）条件下水解，产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，判定供试品中重金属是否符合限量规定。

注意事项：金属离子与硫化氢的呈色溶液受pH影响较大，当pH3.0~3.5时硫化铅沉淀较完全。

第二法：炽灼后的硫代乙酰胺法（适用于含芳环、杂环、以及难溶于水、稀酸及乙醇的有机药物。

原理：重金属可能会与芳环、杂质环形成牢固的价键，需先将供试品炽灼破坏，残渣加硝酸进一步破坏，蒸干。

加盐酸转化为易溶于水的氯化物，再按第一法经行检查。

注意事项：（1）温度越高，重金属损失越多。

温度应控制在500~600℃.（2）炽灼残渣加硝酸加热处理后，必须蒸干、除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢析出硫，影响比色。

第三法：硫化钠法（本法适用于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物）第四法：微孔滤膜法｛适用于重金属限量低（2~5ug））的药物｝4.砷盐的检查方法古蔡氏法：金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量的砷盐反应生成具有挥发性的砷化锌，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液所产生的标准砷斑比较，判断供试品中砷盐是否符合限量规定。

古蔡氏法特点:优点：灵敏度高(1ugAs)；缺点：Sb干扰（2）白田道夫法（3）二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法)（4）奇列氏法（次磷酸法）1.滴定度：系指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量，《中国药典》用毫克(mg)表示。

2.滴定度的计算通式：T（mg/ml）=m × a/b ×M m 滴定液的摩尔浓度（mol/L a被测药物的摩尔数b滴定剂的摩尔数M被测药物的毫摩尔质量（分子量，以mg表示）3.色谱系统适用性试验包括：色谱柱的理论板数（n）色谱峰的分离度（R）色谱系统的重复性色谱峰的拖尾因子（T）等四个指标。

4.药品质量标准分析方法验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。

5.准确度：系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示，准确度应在规定的范围内测试。

精密度：系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。

精密度一般用标准偏差（s或SD）或相对标准偏差（RSD）表示。

水杨酸、苯甲酸、阿司匹林、对乙酰氨基酚的鉴别。

1.水杨酸的水溶液加三氯化铁试液，即生成紫堇色配位化合物. 苯甲酸盐在中性溶液中与三氯化铁反应生成赭色沉淀。

阿司匹林加水煮沸使水解生成水杨酸后，与三氯化铁试液反应显紫堇色。

对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液即显蓝紫色。

2.三氯化铁反应（具有酚羟基或水解后能产生酚羟基的）直接：水杨酸、双水杨酸酯、对乙酰氨基酚间接：阿司匹林、贝诺酯。

3.重氮化——偶合反应（具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物）直接：阿司匹林、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因（胺）间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）4.阿司匹林中特殊杂质为水杨酸。

5.阿司匹林含量测定方法：两步滴定法1.对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的性质（1）芳伯氨基特性：对氨基苯甲酸酯类药物的结构中具有芳伯氨基（除盐酸丁卡因外），故显重氮化-偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱反应；易氧化变色等。

（2）水解特性：含有酰胺键和酯键（3）弱碱性：分子结构中的脂肪烃侧链为叔胺氮原子（除苯佐卡因外）（4）其他特性：其游离碱难溶于水，可溶于有机溶剂；其盐酸盐易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。

盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查：其中对氨基苯甲酸贮藏时间的延长或受热，可进一步脱羧转化为苯胺，而苯胺又可被氧化为有色物，使注射液变黄、疗效下降、毒性增加。

亚硝酸钠滴定法原理：芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点。

测定的主要条件：（1）加入适量溴化钾加快反应速度（2）加过量盐酸加速反应：这有利于重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果（3）反应温度：10-30℃（4）滴定速度：先快后慢指示终点的方法：永停滴定法巴比妥类药物结构母核：环状丙二酰脲理化性质①弱酸性：巴比妥类药物的母核环状结构中含有1，3-二酰亚胺基团，因而其分子能发生酮式-烯醇式互变异构，在水溶液中发生二级电离。

由于本类药物具有弱酸性（pKa7.2~8.4），故可与强碱反应生成水溶性的盐类，一般为钠盐。

②水解反应：（针对母核）巴比妥类药物的分子结构中含有酰亚胺结构，与碱液共沸即水解，释放出氨气。

可使红色石蕊试纸变蓝，用于鉴别异戊巴比妥和巴比妥。

③与金属离子反应与银盐反应：巴比妥类药物分子结构中含有酰亚胺基团，在碳酸钠溶液中，生成钠盐而溶解，再与硝酸银溶液反应，首先生成可溶性的一银盐，加入过量硝酸银溶液，则生成难溶性的二银盐白色沉淀。

可用于本类药物的鉴别和含量测定。

与铜盐的反应：巴比妥类药物生成紫堇色或生产紫色沉淀，含硫巴比妥类药物则呈现绿色。

鉴别试验（1）丙二酰脲反应（巴比妥类药物共有反应）银盐反应：先生成可溶性一银盐，再生成难溶性二银盐。

铜盐反应：巴比妥类药物加吡啶溶液即显紫色或生成紫色沉淀；含硫巴比妥类药物则呈现绿色。