《分子生物学检验技术》教学大纲

《分子生物学检验技术》教学大纲 第二版

《分子生物学检验技术》教学大纲是依据梵绮诗主编的《分子生物学检验技术》第一版的内容，结合临床实验室的具体应用和我校教学的具体条件制定的。重点突出与临床分子诊断应用密切相关的分子生物学技术和知识点的介绍和讲解。本学科教学总时数为32学时，其中包括26学时理论，6学时实验课和国庆放假4学时。

第一章 临床分子诊断绪论

[目的要求]

了解 课程设置；分子诊断在临床中的应用

[教学时数]

讲授4学时。

[讲授内容] 分子诊断在临床中的应用和发展

第二章 生物大分子的分离纯化

[目的要求]

掌握 基因组DNA分离的常用方法，如酚抽提法；RNA分离纯化方法，如酸性异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法；质粒DNA分离纯化方法，如加热法和碱裂解法；固相支持物吸附法

了解 核酸的一般理化性质；核酸进一步纯化的方法

[教学时数]

讲授4学时。

[讲授内容]

核酸的理化性质；核酸分离纯化的原则；核酸分离纯化的设计；基因组（高分子量） DNA的分离纯化；质粒DNA的分离纯化；RNA的分离纯化;磁性硅胶吸附技术

[自学内容]

蛋白质分离纯化的一般方法

第三章 聚合酶链反应技术

[目的要求]

掌握 PCR的概念和基本原理；PCR反应体系的组成；实时荧光定量PCR 的概念、原理和荧光示踪方法；外标定量法的原理

了解 PCR及有关技术的发展演变历史；PCR产物的检测方法；PCR技术的发展变化和PCR相关的扩增技术；临床PCR 实验室的标准化和质量控制

[教学时数]

讲授6学时

[讲授内容]

PCR及有关技术的发展历史；PCR的概念和基本原理；PCR反应体系的组成和各组分介绍；PCR扩增产物的检测；实时荧光定量PCR概念和各种荧光示踪方法的介绍；实时荧光定量PCR定量理论和基本知识；外标定量法的原理及其优缺点；PCR 技术的变化和发展及PCR相关的扩增技术；PCR实验室的标准化和实验室的质量控制

[自学内容]

PCR 反应条件的优化；PCR 产物的克隆

第四章 核酸分子杂交技术

[目的要求]

掌握 分子杂交的基本原理；核酸探针的设计；固相杂交方法的适用范围；Southen/Northen印迹杂交。

了解 探针的检测核酸探针的标记；探针的纯化；其他杂交技术；限制性内切酶多态；SNP；chips

[教学时数]

讲授4学时

[讲授内容]

核酸变性定义，Tm值定义，影响因素；核酸复性； 分子杂交的概念，同源性；核酸探针定义；核酸探针的种类，制备，优缺点；核酸探针的标记，缺口平移，

随机引物，PCR；探针的检测；杂交技术，southern 过程，用途 ，限制性内切

酶；其他杂交技术，northern, colony, in situ ,chips

[自学内容]

标记探针的纯化

第五章 DNA测序技术

[目的要求]

掌握 基因诊断及分子诊断的基本概念；DNA测序策略及链末端终止法的

原理

了解 DNA测序技术的发展史；DNA测序技术在医学中的应用前景及意义

[教学时数]

讲授2学时

[讲授内容]

介绍DNA测序技术的发展史； DNA测序策略及链末端终止法的原理； DNA测序

技术在医学中的应用前景及意义；

第六章 病毒性肝炎的分子诊断

[目的要求]

掌握 乙肝病毒载量测定意义；乙肝病毒分型和耐药的方法和意义。

了解 慢性乙肝临床诊断和治疗进展；

[教学时数]

讲授4学时。

[讲授内容]

慢性乙型肝炎临床诊断、治疗进展；病毒载量测定，基因分型和耐药监测和意义。[自学内容]

其他感染性疾病分子诊断基本策略与方法。

第七章 血液肿瘤的分子诊断

[目的要求]

掌握 分子诊断方法在血液肿瘤诊断、治疗监测和预后判断中的作用；常见血液肿瘤分子诊断方法；常见血液肿瘤相关分子标志物

了解 其它血液肿瘤相关分子标志物及应用

[教学时数]

讲授2学时。

[讲授内容]

分子诊断方法在血液肿瘤诊断、治疗监测和预后判断中的作用；常见血液肿瘤分子标志物及分子诊断方法。

[自学内容]

其它血液肿瘤相关分子标志物及应用

第八章遗传病和个体识别

[目的要求]

熟悉 遗传病的定义及诊断策略；亲子鉴定的定义；个人识别的定义。DNA 指纹、STR、SNP的定义；SNP的应用前景。

了解 不同遗传标记之间的比较；多种用于法医学领域的遗传标记；SNP 的识别与检测。

[教学时数]

讲授2学时。

[讲授内容]

单基因，多基因遗传病诊断方法；亲子鉴定与个人识别定义与区别；应用法医学领域的不同的遗传标记及使用的分子生物学技术；最新型的遗传标记——SNP的定义，应用价值。

[自学内容]

SNP的识别与检测。

实验 乙型肝炎病毒（HBV）实时荧光定量PCR（自编教

材）

[目的要求]

掌握 血清中HBV-DNA的提取方法及原理；HBV-DNA实时荧光定量PCR的测定原理； HBV-DNA实时荧光定量PCR实验操作及结果分析

了解 核酸测定引物设计原理；实时荧光定量PCR仪的工作原理及操作。 [教学时数]

讲授2学时，实验6学时。

[讲授内容]

血清中病毒DNA的提取方法和原理；实时荧光定量PCR的测定原理；核酸测定引物设计原理；HBV-DNA测定引物设计思路；HBV-DNA荧光定量PCR试剂组成、相应作用及反应混合液配制；实时荧光定量PCR仪的工作原理及操作

[实验内容]

分组提取血清中HBV-DNA；配制反应液并上机操作，实时观察，结果分析；

实验结果讨论；实验总结

[自学内容]

“感染性疾病的分子诊断”

编写：张磊 陆小军 王军 宋兴勃 印彬武

校稿、排版：张磊 宋兴勃

2010-9-1