兔子髓过氧化物酶(MPO)说明书

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小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

仅供科研使用,不得用于临床检验。

小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称:小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)英文名称:Mouse Myeloperoxidase(MPO)ELISA KIT【包装规格】48人份/盒,96人份/盒【预期用途】仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠髓过氧化物酶(MPO)的浓度。

【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。

在预包被抗小鼠髓过氧化物酶(MPO)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入小鼠髓过氧化物酶(MPO)校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗小鼠髓过氧化物酶(MPO)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。

加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中小鼠髓过氧化物酶(MPO)的浓度正相关。

拟合校准品曲线,可以计算出样本中小鼠髓过氧化物酶(MPO)的浓度。

【主要组成成分】主要成分校准品检测范围:0.156-10ng/ml。

校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。

2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。

3、开封后,按照建议的条件保存,校准品、包被微孔板和HRP标记抗体,有效期为14天,其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。

大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA检测试剂盒

大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA检测试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被大鼠髓过氧化物酶(MPO)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的大鼠髓过氧化物酶(MPO)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品(480 U/L)0.6mL 0.6mL 按说明书进行稀释标准品稀释液6mL 3mL 无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:480、240、120、60、30、15 U/L 试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求百奥泰康

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求百奥泰康

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)适用范围:该产品用于体外定量测定人血清或血浆中髓过氧化物酶浓度。

1.1 产品规格1.2 组成成分1.2.1试剂组成:液体双试剂。

1.2.2校准品的组成五个水平的冻干校准品,在磷酸盐缓冲液(50mM)中添加髓过氧化物酶纯品。

定值范围:(50-100)ng/mL;(100-180) ng/mL;(200-500)ng/mL;(550-800)ng/mL;(800-1400)ng/mL。

1.2.3质控品的组成两个水平的冻干质控品,在牛血清(20g/L)中添加髓过氧化物酶纯品。

定值范围:(30-150)ng/mL;(500-1000)ng/mL。

2.1 外观液体双试剂:试剂1:无色至淡黄色澄清液体,试剂2:乳白色液体。

校准品:冻干品,复溶后为无色至淡黄色澄清液体。

质控品:冻干品,复溶后为无色至淡黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度应在0.3-2.0之间。

2.4 分析灵敏度浓度为120ng/mL时,吸光度变化范围应大于0.01。

2.5 线性测试血清或血浆样本,试剂线性在(0,1000]ng/mL范围内,线性相关系数(r)应不小于0.990;在(0,200]ng/mL范围内绝对偏差不超过20ng/mL,在(200,1000]ng/mL范围内的相对偏差不超过±10%。

2.6 批内重复性试剂盒测试项目重复性CV≤10%。

2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤15%。

2.8 准确度:回收试验:回收率应在90%-110%之间。

2.9 质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。

2.10 批内瓶间差校准品批内瓶间差瓶间重复性CV≤5%质控品批内瓶间差CV≤5%。

2.11校准品溯源性根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供髓过氧化物酶校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。

髓过氧化物酶抗体(MPO-Ab)定量测定试剂盒及其检测方法[发明专利]

髓过氧化物酶抗体(MPO-Ab)定量测定试剂盒及其检测方法[发明专利]

专利名称:髓过氧化物酶抗体(MPO-Ab)定量测定试剂盒及其检测方法
专利类型:发明专利
发明人:于大为,杨晓勇
申请号:CN201410136534.7
申请日:20140405
公开号:CN104459107A
公开日:
20150325
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明属于临床免疫学检测技术领域,公开了一种髓过氧化物酶抗体(MPO-Ab)定量测定试剂盒,包括磁分离试剂、酶标记试剂、校准品、清洗浓缩液、底物溶液以及稳定剂。

本发明还公开了上述试剂盒的制备方法。

本发明还公开了上述试剂盒的检测方法。

本发明制备的试剂盒精确度、灵敏度以及稳定性较好,并且成本低廉,操作简单,具备广阔的应用前景。

申请人:北京中航赛维生物科技有限公司
地址:100049 北京市大兴区经济技术开发区经海二路29号院8号楼二层
国籍:CN
代理机构:北京富天文博兴知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:刘寿椿
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髓过氧化物酶MPO的临床应用

髓过氧化物酶MPO的临床应用

髓过氧化物酶指数在57例急性冠状动脉综合征患者的临床应用髓过氧化物酶(MPO)是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酶,是血红素过氧化物酶超家族成员之一。

分子量为150KDa。

MPO基因位于人第17号染色体,其编码蛋白翻译修饰后形成2条轻链和2条重链,构成四聚体糖基化蛋白。

在早期由北京协和洛克和美国克利夫兰医院共同研究发现出来,它具有早期预警和提前筛查心脑血管疾病一个标记物。

另一方面血液中95%的MPO来源于多形核白细胞。

尽早明确急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的诊断、危险分层及正确地评估个体近期发生ACS的危险性,对尽早干预治疗ACS至关重要。

有研究表明,血浆髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MP0)是早期诊断ACS的重要指标,与心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)联合应用更能增加ACS诊断的灵敏度[1]。

尤其是当cTnI正常时,血浆MPO升高可预测心脏事件的发生[2]。

但血浆MPO检测方法繁琐,目前无法自动化,临床应用受到限制。

Unionluck全自动血细胞分析仪是一种基于流式细胞分析原理的仪器,现在广泛应用于大中型医院实验室,在计数全血细胞的同时可根据细胞内MPO染色的情况得出中性粒细胞过氧化物酶活性指数(myeloperoxidase index,MPXI),用于评价炎症状况和白血病[3-4]。

现将本院分析MPXI在57例ACS患者的临床应用报道如下。

1资料与方法1.1一股资料选择2011年5~8月本院收治的ACS患者57例。

其中,不稳定型心绞痛(UAP)20例为UAP组,其中,男12例,女8例,年龄(70.00±10.10)岁。

非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)20例为NSTEMI组,其中,男12例,女8例,年龄(67.00±18.10)岁。

ST段抬高型心肌梗死(STEMI)17例为STEMI组,其中,男8例,女9例,年龄(69.90±15.20)岁。

髓过氧化物酶

髓过氧化物酶

髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)又称过氧化物酶,是一种重要的含铁溶酶体,存在于髓系细胞(主要是中性粒细胞和单核细胞)的嗜苯胺蓝颗粒中,是髓细胞的特异性标志,随着对MPO研究的深入,人们发现MPO基因多态性导致个体对一些疾病易感性的差异,与人类多种疾病的发生、发展密切相关,因此越来越受到国内外学者的重视。

髓过氧化物酶MPO研究1.MPO的结构髓过氧化物酶(MPO)是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酶,是血红素过氧化物酶超家族成员之一。

MPO是I相代谢酶。

每个酶分子有两个铁素基团,顺磁共振波谱表明血红素中的铁是在甲酰基血红素部分。

MPO的合成是粒细胞进入循环之前在骨髓内合成并贮存于嗜天青颗粒内,外界刺激可导致中性粒细胞聚集,释放髓过氧化物酶(MPO)。

在成熟的粒细胞中,MPO是含量最丰富的糖蛋白,约占外周血多形核中性粒细胞(PMNs)内总蛋白质含量的5%,血液中95%的MPO来源于PMNs。

MPO的相对分子质量为150×103,是由2个亚单位聚合而成的二聚体,每个亚单位又由一条重链(α链,相对分子质量约60×103)和一条轻链(β链,相对分子质量约15×103)所构成。

2个亚单位在α链处由1个二硫键相连。

重链具有亚铁卟啉基团,说明MPO是铁依赖性的。

MPO以3种亚形存在于髓系细胞中,分别为MPOⅠ、Ⅱ、Ⅲ。

3种亚型主要是重链有差异,轻链的差异较小,导致它们在相对分子质量及疏水性等方面不同,3种亚型在功能上的差异还不明确,有待进一步研究。

2.MPO基因及其多态性人髓过氧化物酶基因位于染色体17q23?q24,含有12个外显子和11个内含子,长约14 638 bp,调控其基因表达的是生长因子。

MPO的mRNA在早幼粒细胞的表达水平最高,其次是原始粒细胞、幼稚和原始单核细胞;当细胞分化到成熟时期,MPO基因表达水平迅速下降。

髓过氧化物酶测定试剂盒(酶法)产品技术要求lepu

髓过氧化物酶测定试剂盒(酶法)产品技术要求lepu

髓过氧化物酶测定试剂盒(酶法)适用范围:用于体外定量测定人血清中髓过氧化物酶的活性。

1.1规格试剂1: 1×24mL,试剂2: 1×12mL,试剂3: 1×9mL;试剂1: 2×24mL,试剂2: 2×12mL,试剂3: 2×9mL。

1.2主要组成成分试剂1主要组分:试剂2主要组分:试剂3主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.2 外观试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液;试剂3:无色或淡黄色透明溶液。

外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在505nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.2;2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.3。

2.4 分析灵敏度测试150 ng/mL的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0055。

2.5 准确度在样品中加入一定体积的纯品,计算回收率,应介于90%-110%之间。

2.6 重复性批内变异系数(CV)应不超过10%。

2.7 线性2.7.1在[50,1300] ng/mL区间内,线性相关系数r应不低于0.990;2.7.2 [50,156 )ng/mL L区间内绝对偏差不超过±18.7 ng/mL;[156,1300] ng/mL 区间内相对偏差不超过±12%。

2.8 批间差对同一份样品进行重复测定,相对极差≤12%。

2.9 稳定性取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

过氧化物酶(Peroxidase POD)试剂盒说明书

过氧化物酶(Peroxidase POD)试剂盒说明书

货号:MS1502 规格:100管/96样过氧化物酶(Peroxidase,POD)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:POD(EC 1.11.1.7)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

测定原理:POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。

自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水试剂的组成:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体×1瓶,4℃保存;用时加入3mL试剂一充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;试剂三:液体3 mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提取:1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至470nm,蒸馏水调零。

2、测定前将试剂一、二和三在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)放置10min以上。

470nm下30s时第1页,共3页的吸光值A1和1min30s后的吸光值A2。

计算ΔA=A2-A1。

注意事项:1、若一次性测定样本较多,可将试剂一、二、三和蒸馏水按比例配成混合液,在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)放置10min以上,测定时加入10µL样本和240µL混合液测定。

小鼠髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒说明书

小鼠髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒说明书

小鼠髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T3µg/L -160µg/L小鼠髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。

用纯化的人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),再与HRP 标记的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)浓度。

试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(320µg/L)0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

160µg/L 5 号标准品150µl 的原倍标准品加入150µl 标准品稀释液80µg/L 4 号标准品150µl 的5 号标准品加入150µl 标准品稀释液40µg/L 3 号标准品150µl 的4 号标准品加入150µl 标准品稀释液20µg/L 2 号标准品150µl 的3 号标准品加入150µl 标准品稀释液10µg/L 1 号标准品150µl 的2 号标准品加入150µl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

髓过氧化物酶

髓过氧化物酶

髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)又称过氧化物酶,是一种重要的含铁溶酶体,存在于髓系细胞(主要是中性粒细胞和单核细胞)的嗜苯胺蓝颗粒中,是髓细胞的特异性标志,随着对MPO研究的深入,人们发现MPO基因多态性导致个体对一些疾病易感性的差异,与人类多种疾病的发生、发展密切相关,因此越来越受到国内外学者的重视。

髓过氧化物酶MPO研究1.MPO的结构髓过氧化物酶(MPO)是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酶,是血红素过氧化物酶超家族成员之一。

MPO是I相代谢酶。

每个酶分子有两个铁素基团,顺磁共振波谱表明血红素中的铁是在甲酰基血红素部分。

MPO的合成是粒细胞进入循环之前在骨髓内合成并贮存于嗜天青颗粒内,外界刺激可导致中性粒细胞聚集,释放髓过氧化物酶(MPO)。

在成熟的粒细胞中,MPO是含量最丰富的糖蛋白,约占外周血多形核中性粒细胞(PMNs)内总蛋白质含量的5%,血液中95%的MPO来源于PMNs。

MPO的相对分子质量为150×103,是由2个亚单位聚合而成的二聚体,每个亚单位又由一条重链(α链,相对分子质量约60×103)和一条轻链(β链,相对分子质量约15×103)所构成。

2个亚单位在α链处由1个二硫键相连。

重链具有亚铁卟啉基团,说明MPO是铁依赖性的。

MPO以3种亚形存在于髓系细胞中,分别为MPOⅠ、Ⅱ、Ⅲ。

3种亚型主要是重链有差异,轻链的差异较小,导致它们在相对分子质量及疏水性等方面不同,3种亚型在功能上的差异还不明确,有待进一步研究。

2.MPO基因及其多态性人髓过氧化物酶基因位于染色体17q23?q24,含有12个外显子和11个内含子,长约14 638 bp,调控其基因表达的是生长因子。

MPO的mRNA在早幼粒细胞的表达水平最高,其次是原始粒细胞、幼稚和原始单核细胞;当细胞分化到成熟时期,MPO基因表达水平迅速下降。

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求huaketai

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求huaketai

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(荧光免疫层析法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清、血浆、全血中髓过氧化物酶(MPO)的含量。

1.1规格10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。

1.2主要组成成分注:1.质控品质控范围批特异,具体浓度详见标签。

2.1物理性能2.1.1外观检测卡应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染;材料附着牢固。

2.1.2膜条宽度膜条的宽度应不小于3mm。

2.1.3移行速度液体移行速度应不低于10mm/min。

2.2溯源性根据GB/T21415-2008的有关规定,提供所用校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容,溯源至企业工作校准品,并与已上市产品比对赋值。

2.3空白限空白限应不高于5ng/mL。

2.4准确度回收率应在85%~115%之间。

2.5线性在线性范围[10,1000]ng/mL内,相关系数(r)应不低于0.99。

2.6重复性分别检测高值和低值两个样本,重复性(CV%)应不高于15.0%。

2.7批间差在三个批次产品之间,样本测定结果的变异系数(CV%)应不高于20.0%。

2.8特异性2.9质控品赋值有效性测定高值、低值浓度质控品,其结果均应在质控范围内。

2.10稳定性2.10.1效期稳定性10℃~30℃储存(质控品2℃~8℃),有效期12个月,效期后2个月内分别检测2.3~2.6,2.8,2.9项,其结果应符合各项要求。

2.10.2质控品复溶稳定性冻干粉试剂复溶后,-20℃以下储存,有效期1个月,分别检测2.6,2.9项,其结果应符合各项要求。

髓过氧化物酶(mpo)蛋白定位

髓过氧化物酶(mpo)蛋白定位

髓过氧化物酶(mpo)蛋白定位
髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO) 是一种存在于中性粒细胞和单核细胞中的酶,它在细胞内的定位主要在嗜天青颗粒中。

嗜天青颗粒是一种特殊的细胞器,位于中性粒细胞和单核细胞的细胞质中。

MPO 作为嗜天青颗粒的主要成分之一,与其他蛋白质和酶一起被包裹在嗜天青颗粒内。

当细胞受到刺激时,如病原体入侵或炎症反应,嗜天青颗粒会与细胞膜融合,释放出其中的内容物,包括MPO。

MPO 随后可以参与细胞的呼吸爆发过程,产生大量的活性氧物种(ROS),如过氧化氢(H2O2) 和次氯酸(HClO),以帮助杀死病原体。

此外,MPO 还可以在细胞外释放,并与其他蛋白质形成复合物,参与炎症反应和免疫防御过程。

MPO 蛋白主要定位在中性粒细胞和单核细胞的嗜天青颗粒中,当细胞受到刺激时,它会被释放出来参与细胞的呼吸爆发和免疫防御过程。

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(化学发光法)产品技术要求深圳泰乐德

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(化学发光法)产品技术要求深圳泰乐德

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒
(化学发光法)
2. 性能指标
2.1外观
2.1.1分装盒中试剂条各组分应齐全、完整、无泄漏,试剂盒(瓶)上包装标签应清晰、无磨损。

2.1.2试剂条中的磁微粒试剂摇匀后,应为均匀悬浊液,无明显凝集;其他液体试剂溶液组分应澄清,无悬浮物、无沉淀物、无絮状物。

2.1.3校准品、质控品为冻干品,呈粉末或块状固体,不起泡、不塌陷;复溶后应为清澈透明液体,无沉淀,无悬浮物,无絮状物。

2.2准确度
相对偏差应在±10%范围内。

2.3空白限
应不大于5 ng/mL 。

2.4重复性
批内变异系数CV应不大于10%。

2.5线性范围
试剂盒线性范围(50~800)ng/mL ,在此线性范围内,相关系数r应≥0.9900。

2.6批间差
批间变异系数CV应不大于15%。

2.7 校准品、质控品均一性
瓶内均一性≤8.0%,瓶间均一性≤5.0%。

2.8 校准品赋值准确性
相对偏差应在±10%范围内。

2.9 质控品赋值准确性
质控品测值在参考范围内。

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(酶联免疫吸附法)产品技术要求xieheluoke

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(酶联免疫吸附法)产品技术要求xieheluoke

髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(酶联免疫吸附法)
适用范围:用于体外定量测定人血浆中髓过氧化物酶(MPO)的含量。

1.1产品规格:24人份/盒、48人份/盒、96人份/盒、192人份/盒1.2主要组成成分
注:校准品具有批特异性,每批靶值详见瓶签;质控品质控范围靶值批特异详见:质量控制检验单
2.1外观
试剂盒各组份应齐全、完整,液体组分无渗漏,标识清晰易识别。

2.2检测限
不大于25ng/ml。

2.3准确度
回收率为85%~115%。

2.4线性
试剂盒的线性范围为[50,800]ng/ml,相关系数r不小于0.9900。

2.5重复性
用高、低2个浓度水平的样本各重复检测10次,其变异系数(CV)不大于13%。

2.6特异性
白蛋白ALB50g/L、高密度脂蛋白HDL浓度1.6g/L做交叉反应,MPO浓度与本底的差值应不大于25ng/ml。

2.7校准品溯源性
生产企业应根据GB/T21415-2008及有关规定提供所用校准品的来源,赋值过程以及不确定度等内容,溯源至企业一级校准品。

2.8可接受区间
分别取高、低两个浓度,检测其浓度值,每个测试值均应在所示的质控范围内。

2.9批间差
用3个批号试剂盒检测同一份样本,变异系数(CV)应不大于15%。

2.10稳定性
试剂盒在2℃~8℃储存有效期为12个月,取到效期后产品进行检测,检测结果应符合2.1~2.6、2.8项要求。

抗髓过氧化物酶(MPO)、蛋白酶...

抗髓过氧化物酶(MPO)、蛋白酶...

抗髓过氧化物酶(MPO)、蛋白酶...抗髓过氧化物酶(MPO)、蛋白酶3(PR3)、肾小球基底膜(GBM)IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫斑点法)适用范围:用于体外定性检测人血清样本中的抗髓过氧化物酶(MPO)、蛋白酶3(PR3)、肾小球基底膜(GBM)的IgG抗体。

1.1型号/规格16人份/盒(3项)、16人份/盒(2项)、32人份/盒(3项)、32人份/盒(2项)其中,3项为MPO、PR3、GBM;2项为MPO、PR31.2主要组成成分2.1外观2.1.1液体试剂中,底物液和酶标二抗为淡黄色,其它试剂为无色,均无浑浊,无未溶物。

2.1.2检测膜条干净、无污渍、无破损。

2.1.3膜条尺寸长度:115±0.5mm 宽度:2±0.2mm2.2装量及组件数量检查装量应不少于标示值。

2.3阳性参考品符合率对阳性参考品P1~P10进行检测,其阳性参考品符合率应为100%。

2.4阴性参考品符合率从阴性参考品N1~N15中随机抽取10支,其阴性参考品符合率应为100%。

2.5最低检出限用企业内部检出限参考品进行检测,在MPO参考品01滴度不低于1:400、PR3参考品02滴度不低于1:400、GBM参考品03滴度不低于1:400时,结果应均为阳性。

2.6重复性用试剂盒测定同一份阳性参考品,重复检测10次,其检测结果均为阳性。

2.7批间差用三个批号的试剂盒检测同一份阳性参考品,每批重复检测10次,其检测结果均为阳性。

2.8稳定性2℃~8℃保存,有效期为12个月。

取失效期的试剂盒进行检测,应符合2.3、2.4、2.5、2.6的要求。

人髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(酶联免疫法)产品技术要求海格德生物科技

人髓过氧化物酶(MPO)测定试剂盒(酶联免疫法)产品技术要求海格德生物科技

2.性能指标
2.1外观和性状
试剂盒各组分应齐全、完整,液体无渗漏;中文包装标签应清晰、明确、牢固,无划破或缺失部分。

2.2各组份净含量
各组份应不低于装量瓶标签标示的装量要求。

2.3试剂盒校准品均一性
瓶间重复性CV值应≤10%。

2.4准确度
检测浓度与理论浓度的偏差应在±10%范围内。

2.5试剂盒最低检测限
应不大于20 ng/ml。

2.6线性范围及线性要求
试剂盒线性范围在50 ng/ml~800 ng/ml之间,在该范围内试剂盒的相关系数r值应≥0.9900。

2.7精密度
试剂盒批内变异系数应≤10%,批间变异系数应≤15%。

2.8分析特异性:血红蛋白5 mg/ml、甘油三酯10 mg/ml、胆红素0.2 mg/ml、促红细胞生
成素(EPO)50 IU/ml时,用于本试剂盒的干扰实验检测,均无非特异性反应,干扰样本检测浓度与对照样本检测浓度的相对偏差应在±15%范围内。

1。

MPO、MMP-2和MMP-9在兔房颤模型心房肌中的表达变化

MPO、MMP-2和MMP-9在兔房颤模型心房肌中的表达变化

MPO、MMP-2和MMP-9在兔房颤模型心房肌中的表达变化∗杨倩;容春莉;王立立;宋学莲;齐晓勇【摘要】目的::观察兔房颤模型心房肌组织髓过氧化物酶( MPO)、基质金属蛋白酶( MMP)-2和MMP-9的表达,并探讨三者与房颤时心房结构重构的关系。

方法:20只新西兰大白兔,开胸后于左心房植入起搏电极,随机分为2组:快速心房起搏组( RAP组)以600 min-1的频率快速起搏心房3周;假手术组( sham组)不予起搏。

起搏前、后行超声心动图检查评价心房和心室的结构和功能,行心房burst 刺激检测房颤诱发率;起搏后采用Masson染色评价心房的间质纤维化程度,采用RT-qPCR和Western blot检测心房MPO、MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达水平。

结果:起搏3周后,与sham组相比,RAP组兔左心房明显扩张伴收缩功能障碍,左心室的结构和功能变化不明显;RAP组房颤诱发率和间质纤维化百分比均明显增加,且心房MPO、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达明显增加。

结论:持续快速心房起搏兔房颤模型会出现明显心房结构重构,心房MPO、MMP-2和MMP-9表达上调可能是其潜在的分子机制。

%AIM:To investigate the expression of myeloperoxidase ( MPO) , matrix metalloproteinase ( MMP)-2 and MMP-9 in the atrial myocardium, and their potential effects on atrial structural remodeling in a rabbit atrial fibrilla-tion ( AF) model. METHODS: The sternotomy was performed and the pacing electrode was fixed to the left atria of 20 New Zealand white rabbits. The animals were randomly divided into 2 groups:rapid atrial pacing ( RAP) group and sham group. The rabbits in RAP group were subjected to RAP for 3 weeks. The structure and function of the atria and ventricle were analyzed by echocardiography.Atrial burst stimulation was performed to test AF inducibility. The atrial fibrosis was e-valuated by Masson trichrome-staining. The mRNA and protein levels of MPO, MMP-2 and MMP-9 were detected by RT-qPCR and Western blot. RESULTS: After 3 weeks of RAP, obvious left atrial enlargement and dysfunction were ob-served, but almost no change of left ventricular diameter and function was found in RAP group compared with sham group. AF inducibility, atrial interstitial fibrosis and the mRNA and protein levels of MPO, MMP-2 and MMP-9 were all signifi-cantly increased in RAP group compared with sham group. CONCLUSION:Obvious atrial structural remodeling is found in the rabbit AF model induced by sustained RAP, and the up-regulation of MPO, MMP-2 and MMP-9 may be the potential molecular mechanism of atrial structural remodeling.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2016(032)011【总页数】5页(P1934-1938)【关键词】快速心房起搏;心房颤动;髓过氧化物酶;基质金属蛋白酶【作者】杨倩;容春莉;王立立;宋学莲;齐晓勇【作者单位】河北省人民医院心内科,河北石家庄050051;河北省人民医院心内科,河北石家庄050051;河北省人民医院心内科,河北石家庄050051;河北省人民医院心内科,河北石家庄050051;河北省人民医院心内科,河北石家庄050051【正文语种】中文【中图分类】R363心房颤动(atrial fibrillation,AF),简称房颤,是临床上最常见的心律失常之一[1]。

过氧化物酶染色液(联苯胺法)使用说明

过氧化物酶染色液(联苯胺法)使用说明

过氧化物酶染色液(联苯胺法)使用说明货号:G2370有效期:6个月有效。

产品说明:过氧化物酶(Peroxidase,简称POX或MPO)是由微生物或植物所产生的一类能催化很多反应的以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶氧化还原酶,主要存在于细胞的过氧化物酶体中,以铁卟啉为辅基,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

过氧化物酶染色液(联苯胺法)是ICSH推荐采用的POX染色液,其原理是细胞内的过氧化物酶能将无色的3,3-二氨基联苯胺(DAB)的氢原子传递给过氧化氢,使前者催化成有色染料沉积在细胞质中的POX所在部位。

该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片过氧化物酶染色,POX活性部位呈棕黄色。

自备材料:1、载玻片2、显微镜操作步骤(仅供参考):1、血液、骨髓或细胞涂片滴加预冷的BFA固定液,4℃固定30~60s,稍水洗。

2、滴加配制好的POX孵育液,室温(20~25℃)避光孵育10~15min,水洗2min。

3、滴加WG染色液,孵育30~60s。

4、直接滴加等量WG buffer,染色10~15min。

5、水洗、晾干、镜检。

染色结果:POX活性部位棕黄色细胞核蓝色粒细胞系除早期原粒细胞阴性外,分化好的原粒细胞以下阶段细胞随细胞成熟而阳性反应增强,衰老中性粒细胞反应程度减弱单核细胞系弱阳性,淋巴细胞系为阴性。

浆细胞及巨核细胞均为阴性。

嗜酸性粒细胞和Auer小体呈强阳性反应。

阳性反应强度的判断:阴性无颗粒弱阳性颗粒小,分布稀疏阳性颗粒粗略。

分布密集强阳性颗粒粗大,呈蓝黑色,充满胞浆临床意义:1、急性粒细胞白血病晚期的原粒细胞呈阳性,颗粒较少且大。

2、急性单核白血病细胞呈阴性或弱阳性,颗粒小且稀疏。

3、单核急性白血病呈阴性或弱阳性。

4、急性早幼粒白血病呈强阳性,某些早幼粒细胞呈阳性,恶性组织细胞呈阴性。

5、急性淋巴细胞白血病呈阴性。

注意事项:1、血液或骨髓涂片应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。

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12.5U/L
1 号标准品
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl, 然后再加待测样品 10µl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。 7. 温育:操作同 3。 8. 洗涤:操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结:
兔子髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 6U/L - 200U/L
96T
使用目的:
本试剂盒用于测定兔子血清,血浆及相关液体样本中髓过氧化物酶(MPO)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子髓过氧化物酶(MPO)水平。用纯化的兔子髓
过氧化物酶(MPO) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入髓过氧
用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
计算 以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
化物酶(MPO),再与 HRP 标记的髓过氧化物酶(MPO) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体
复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸
的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的髓过氧化物酶(MPO)呈正相关。用酶标
仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中兔子髓过氧化物酶(MPO)
释。
200U/L
5 号标准品
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
100U/L
4 号标准品
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
50U/L
3 号标准品
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
25U/L
2 号标准品
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7 终止液
6ml×1 瓶
2 酶标试剂
6ml×1 瓶
8 标准品(400U/L) 0.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液
6ml×1 瓶
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6 个月
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
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