DNA的粗提取与鉴定好实验流程图
DNA的粗提取和鉴定PPT课件
损失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞
液
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讨论:提取鸡血中的DNA时,为什么除去血液 中的上清液?
答:血液分为两部分,一部分是血浆,一部分 是血细胞,离心后除去的上清液是血浆
5、方法步骤
①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL~10mL,注入到
50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL,
3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
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实验用具:铁架台;铁环;镊子;三角
架;酒精灯;石棉网;载玻片;玻璃棒; 滤纸;滴管;量筒(100ml,一个);烧 杯;(100ml,一个,50ml、500ml各 二个);试管(20ml,二个);漏斗;试 管夹;纱布。
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(四) DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出
DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒 精溶液(体积分数为95%),静置2-3min,溶 液中会出现白色丝状物,这就是粗提取DNA。 用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用 滤纸吸取上面的水
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三、实验案例 (一)案例一:以鸡血为实验材料进行DNA的 粗提取 1、鸡血细胞做实验材料的原因
①鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得
②用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和 离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长
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4、课前准备鸡血细胞液
①过程
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液(抗凝
③析出含DNA的粘稠物
专题DNA的粗提取与鉴定ppt
利用DNA粗提取技术,可对犯罪现场遗留的生物检材进行提取和分析,为刑事侦查提供重 要线索。
亲子鉴定
通过DNA粗提取和基因比对,能够准确地判定亲属关系,为家庭纠纷、遗产继承等问题的 解决提供科学依据。
dna粗提取在生物医学研究中的应用前景
01
疾病诊断与预测
通过DNA粗提取技术,可对疾病相关基因进行快速、准确的检测和分
解决方法
控制好温度、酸度以及机械搅拌程度,使用低温乙醇沉淀法等更稳定的提取方法 ,减少DNA降解的发生。
dna出现污染的原因与解决方法
原因
DNA出现污染可能是由于外界物质进入提取液中,如容器不 干净、试剂未纯化等。
解决方法
使用干净的容器和纯度高的试剂,对提取液进行过滤除杂, 减少污染物质对DNA提取的影响。
专题dna的粗提取与鉴定ppt
xx年xx月xx日
目 录
• 引言 • dna粗提取的基本步骤 • dna粗提取的实验操作流程 • dna粗提取过程中的问题与对策 • dna粗提取的优化方案 • dna粗提取的应用前景和发展方向
01
引言
什么是dna粗提取
从细胞或生物体内提取出DNA分子的过程。 不需要知道DNA的具体序列和结构。
dna提取效率低的原因与解决方法
原因
DNA提取效率低可能是由于多种因素导致,如细胞裂解不完全、蛋白去除不 彻底、方法操作不当等。
解决方法
采用更有效的细胞裂解方法、优化洗涤步骤、使用蛋白酶K处理细胞等措施, 提高DNA提取效率。
dna出现降解的原因与解决方法
原因
DNA出现降解可能是由于提取过程中高温、高酸度、过度机械搅拌等不利条件导 致。
析,为疾病的早期诊断和预测提供帮助。
高二生物dna的粗提取与鉴定
9、DNA的鉴定
用二苯胺(沸水浴)鉴定,DNA遇二苯 胺会变蓝色。
问:2和4过程中都有加入蒸馏水,两次加入的 作用一样吗?为什么?
问:DNA的直径约为2nm,实验中出现的丝状 物的粗细是否就表示一个DNA分子直径的大小?
练习:
1、用蛋白质中含有35S的噬菌体去侵染细菌(细菌 内为32S),则在子代噬菌体的蛋白质的S应为 ()
DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂。
材料:
鸡血细胞液(5-10ml),体积分数为95%的酒精 溶液(冷却),蒸馏水,质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸 钠溶液,物质的量浓度分别为2mol/l和0.015mol/l的氯 化钠溶液,二苯胺试剂
方法步骤:
1、制备鸡血细胞液
4、析出含DNA的黏稠物
沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时轻轻搅拌,这时 会有丝状物出现,随着蒸馏水的加入逐渐增多,一 直到氯化钠浓度约为0.14mol/l时,不再继续增加。
头瓶,随着Z.纽基斯克画师的扭动,肥肠状的仙翅枕头瓶像弯刀一样念动咒语:“七臂哄哩喂,锁孔哄哩喂,七臂锁孔哄哩喂……『黑雾浪仙细雨经文』!党棍!党棍!党 棍!”只见Z.纽基斯克画师的身影射出一片浅黑色幽光,这时西南方向突然出现了五片厉声尖叫的亮红色光蛙,似银光一样直奔浓黑色粼光而来。,朝着月光妹妹清秀流畅
取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸钠溶液(抗凝剂) 100ml,置于烧杯中,将新鲜鸡血180ml注入,同时 用玻璃棒搅拌,以免凝血,然后倒入离心管中用 1000r/min的离心机离心2min,此时,血细胞沉淀于 离心管的底部,除去上清液,就可以得到鸡血细胞液。
问:提取鸡血中的DNA时,为什么要除 去血液中的上清液?
、宛如泉光溪水般的肩膀乱跳过来。紧;微生物资源中心 https:/// 微生物资源中心;跟着Z.纽基斯克画师也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向月光 妹妹乱跳过来月光妹妹突然精美透明的冰红色水晶靴突然飞出魔棕险境色的椰泥虎动味……光洁秀美、闪着珍珠般光泽的指甲跃出浓哼水晶声和呜喂声……不停旋转闪光的晶 黄色弯月眉心石变幻莫测射出飘梦水晶般的漫舞……接着演了一套,摇羊油条翻一千零八十度外加蛙啸纸条旋七周半的招数,接着又耍了一套,云体羊窜冲天翻七百二十度外 加狂转两千周的艺术招式。紧接着玲珑活泼的美鼻子闪眼间转化颤动起来……似乎总是带着一丝迷人笑意的小嘴唇跃出墨黑色的缕缕丑云……清丽动人、会说话的的秀眉跃出 水青色的点点神热!最后转起秀美挺拔、轻盈矫健的玉腿一旋,威猛地从里面跳出一道银光,她抓住银光悠然地一摆,一件凉飕飕、青虚虚的咒符⊙月影河湖曲@便显露出来 ,只见这个这件宝器儿,一边紧缩,一边发出“呜呜”的怪声!!猛然间月光妹妹高速地秀了一个滚地振颤颤廊柱的怪异把戏,,只见她犹如云粉色冰莲花般的蓝边渐变裙中 ,猛然抖出五串甩舞着⊙玉光如梦腿@的深潭玻璃喉雀状的麻袋,随着月光妹妹的抖动,深潭玻璃喉雀状的麻袋像灯柱一样在双腿上华丽地组织出飘飘光罩……紧接着月光妹 妹又使自己青春跃动、渐渐隆起的胸脯萦绕出暗白色的葫芦味,只见她善于跳跃的小脚丫中,轻飘地喷出五片转舞着⊙玉光如梦腿@的槟榔状的仙翅枕头耙,随着月光妹妹的 旋动,槟榔状的仙翅枕头耙像骷髅一样念动咒语:“雪峰咋 喱,仙子咋 喱,雪峰仙子咋 喱……⊙月影河湖曲@!姑奶奶!姑奶奶!姑奶奶!”只见月光妹妹的身 影射出一片橙白色银辉,这时偏西方向酷酷地出现了二片厉声尖叫的亮黄色光兽,似佛光一样直奔深橙色余辉而去……,朝着Z.纽基斯克画师细长的极似香肠造型的肩膀乱 跳过去。紧跟着月光妹妹也翻耍着咒符像油饼般的怪影一样向Z.纽基斯克画师乱跳过去随着两条怪异光影的瞬间碰撞,半空顿时出现一道淡黄色的闪光,地面变成了紫宝石 色、景物变成了火橙色、天空变成了深蓝色、四周发出了粗鲁的巨响。月光妹妹清秀流畅、宛如泉光溪水般的肩膀受到震颤,但精神感觉很爽!再看Z.纽基
DNA的粗提取与鉴定好实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
6、再次溶解DNA
取滤物
2mol/LNaCl溶液
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鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合,沸水浴,呈现蓝色反应
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1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大
B.人血也可代替鸡血进行实验
C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D.DNA不能溶于酒精
2. 在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是
7、加冷酒精使DNA析出(纯化) 冷酒精
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DNA的鉴定
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总结:
实验原理
DNA
的
粗
提
取
DNA粗提取
与
鉴
定
鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
A. DNA溶解于水
B. 血细胞破裂,DNA释放
C.稀释血液,防止凝固
D. 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗
涤剂和食盐,加入食盐的目的是
实验高中生物DNA的粗提取与鉴定
②鸡血细胞极易吸水胀破
1.准备鸡血细胞液 ①过程: 取柠檬酸纳溶液(抗凝剂)100ml,注入新鲜的鸡血 (约180ml),同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分 混合,以免凝血。 ②柠檬酸钠作用:防止血液凝固
讨论:提取鸡血中的DNA时,为什么除去血液中的上清液? 获取血液中的血细胞,以及除去血浆中的蛋白质杂质
(3)析出含DNA的粘稠物
(4)滤取含DNA的粘稠物
(5)将DNA的粘稠物再溶解 (6)过滤含有DNA的氯化钠溶液
(7)提取含杂质较少的DNA (8)DNA的鉴定
一.DNA的提取原理 1.DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大, 浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理, 可以使DNA在盐溶液中溶解或析出
③两次析出 第一次:用0.14 mol/L 的NaCI溶液含杂质多 第二次:用冷却的95%的酒精
2.方法步骤 ①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL~10mL,注入到50 mL烧杯中。 向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使 血细胞加速破裂。然后,用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至 500mL,取其滤液。 讨论: (1)为什么要加入蒸馏水?加入蒸馏水后细胞会有什么变化? 让细胞内浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸水以至涨破
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液
1.动物细胞
动物细胞的破碎较易,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水(渗透 作用吸水涨破),同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可 2.植物细胞
①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜.
DNA粗提取和鉴定实验
DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的.当NaCl的物质的量浓度为 mol/L时,DNA的溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出.③DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.⑷DNA遇二苯胺沸水浴会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂.二、实验材料和用具鸡血细胞液5~10ml;体积分数为95%的冷酒精溶液实验前置于冰箱内冷却24h;蒸馏水;质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液;质量的浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的氯化纳溶液新教材不要求0、015的浓度了,都是用的2mol/L;二苯胺试剂;铁架台;镊子;水浴锅;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒100ml,一个;烧杯;1000ml,一个,50ml、100 ml 、500ml 各二个;试管20ml,二个;漏斗;试管夹;纱布.三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液抗凝剂100ml,置于500ml烧杯中.注入新鲜的鸡血约180ml,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血.将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀.也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min转每分的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部.实验时.用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液.四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL~10mL,注入到50 mL烧杯中.向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使血细胞加速破裂.然后,用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL.取其滤液.②溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态 .③析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色.继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多.当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于 mol/L经验值:需加约570mL蒸馏水,且分多次加入.将溶液中的DNA与其他杂质分离,这一步骤是实验成败的关键.实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕.④滤取含DNA的粘稠物用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在纱布上,滤液丢弃.⑤将DNA的粘稠物再溶解取 1个 50 mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液 20mL.用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃棒不停地搅拌,约3分钟,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中.⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液取1个100 mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液.取其滤液,DNA溶于滤液中.⑦提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中,加入等体积的、冷却的、体积分数为 95%的酒精溶液使用冷却的酒精,对DNA的凝集效果较佳,并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的白色丝状物.用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分.这种丝状物的主要成分就是DNA.⑧ DNA的鉴定取两支20 mL的试管,各加入氯化钠的物质的量浓度为0.015 mol/L的溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解.然后,向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂.混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化.五、讨论①两次使用蒸馏水第一次:细胞吸水胀破第一步第二次:使 DNA黏稠物析出第三步②三次过滤第一次: DNA存在于滤液里第一步第二次: DNA被留在纱布上第四步第三次: DNA存在于滤液里第六步过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1-2层③两次析出第一次:用 mol/L 的NaCI溶液含杂质多第三步第二次:用冷却的95%的酒精第七步④六次搅拌:第一、二、三、五、七、八步其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质.因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质在NaCl溶液浓度低于 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在 mol/L 时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大.。
DNA的粗提取与鉴定PCR蛋白质的提取与分离PPT课件
轻缓搅拌。
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⑶.析出含DNA的粘稠物:
在上述溶液中缓缓加入蒸馏水,并沿一个方向轻 轻搅拌,出现丝状物;当丝状物不在增加时,停止加 水(此时NaCl溶液的浓度相当于0.14mol/L)。
⑷.滤取含粘稠物:
用多层纱布过滤,含DNA的粘稠物留在纱布上。
⑸. DNA粘稠物的再溶解: 20mL2mol/L的NaCl溶液 步骤⑷含DNA的粘稠物
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(一) PCR原理
• 体内DNA复制:
• 模板DNA
• 原料: dNTP
• 酶: 解旋酶、DNA pol. …
5.DNA的沉淀和浓缩。
对于除去了蛋白质的DNA的氯化钠溶液,必须再进 一步沉淀和浓缩,常用酒精沉淀法。即往含有Na+的 DNA溶液,加入体积分数为95%的冷却酒精,混匀后可以 使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮 于溶液中。若丝状物较少,可将混合液再放入冰箱中冷 却几分钟即可。浓缩后的DNA丝状物可以用玻棒(玻棒 有吸附DNA的作用)缓缓旋转的方法卷起。
答:前者是溶解DNA,后者是使DNA析出
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3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色
答:D
4.提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液 中的上清液?
答:DNA的提取,关键是对杂质的去除,由于 上清液是血液中的血浆部分,不含DNA,所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
蒸馏水
5.滤取含DNA 的黏稠物
6.将 DNA 的黏稠物再溶解 2 mol/L 的 NaCl 溶液 20 mL
7.过滤含DNA 的 NaCl 溶液
8.提取含有杂质较少的DNA 冷却的 95%的酒精50 mL
DNA的粗提取与鉴定_实验报告
⑺.提取含有杂质较少的DNA: 步骤⑹所得的滤液+体积分数为95%的冷却酒精 50mL,用玻棒沿一个方向轻缓搅拌,溶液中(析出) 出现乳白色丝状物,用玻棒将丝状物卷起,并用滤纸 吸取上面的水分。
3.DNA的鉴定:
加入二苯胺试剂4mL,用玻棒搅拌使DNA溶解, 沸水浴5min,观察溶液是否出现蓝色。
一、实验原理 1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细 胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。 2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度 的变化而改变的。DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L 的氯化钠溶液中的溶解度最低,利用这一原理,可以使 溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。 3.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质则可以溶 于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少 的DNA。 4.DNA遇二苯胺(沸水浴)会变成蓝色,因此,二苯胺 可以作为鉴定DNA的试剂。
6.将 DNA 的黏稠物再溶解
7.过滤含DNA 的 NaCl 溶液 8.提取含有杂质较少的 DNA
2 mol/L 的 NaCl 溶液 20 mL
⑥
⑦
冷却的95%的酒精50 mL A:(1)向试管中加入 2mol (2)加入 DNA /L 的 NaCl 溶液 5mL
⑧
9.DNA 的鉴定
(3)4 mL二苯胺试剂 B:(1)向试管中加入 (2)4 mL 二苯胺试剂 2mol /L 的 NaCl 溶液 5mL
⑨
①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固
②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA 最大限度地释出 ⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上
⑥使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中
高二生物dna的粗提取与鉴定
实验原理:
DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓 度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为 0.14mol/l时,DNA的溶解度最低。利用这个原理,可 以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质可以 溶于酒精,就可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
2、提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5-10ml,注入烧杯中,加入 蒸馏水20ml,同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌, 使血细胞加速破裂,过滤,取其滤液。
3、溶解细胞核内的DNA
将物质的量浓度为2mol/l的氯化钠溶液40ml加入到 滤液中,搅拌使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈 溶解状态。
怪耍着兵器像床垫般的怪影一样;https:/// 香港 ;向湖蝎翡翠桌上面悬浮着的发光体狂摇过去…………随着『白兽骨神蛤蟆腿』的搅动调理,九堆贪官瞬 间变成了由满天乱舞的灵光冰魂组成的缕缕暗白色的,很像柿子般的,有着变态闪烁质感的烟花状物体。随着烟花状物体的抖动旋转……只见其间又闪出一团白象牙色的魔影 状物体……接着女陛下拉琳叶女士又飘动起来……只听一声玄妙梦幻的声音划过,六只很像浪鬼烟盒般的烟花状的缕缕闪光体中,突然同时喷出五串闪闪发光的墨绿色光泡, 这些闪闪发光的墨绿色光泡被雾一跳,立刻化作游动的飘带,不一会儿这些飘带就迷茫绮丽着跳向巨大巨树的上空……很快在飞美色的峨然绸布上面形成了晚锦色的 ,醒目 的标题是:《W.爱莫乌道长表演学说的十五种崛起》,而全部文字正好一万字,这时绸布上面的文字颜色开始不断的闪烁变化,越来越亮突然,只见绸布顶部猛然射出一片 墨蓝色的醉光,这片神光很快化作密密麻麻的梦幻迷蒙的斜,以飘然飞向每个考官和所有在场的学生,随着声声奇妙的声响,这些斜都变成了一份份 考题的答卷……与此同 时,闪亮的文字纷纷变成光闪闪的深橙色圣液从上面纷纷落下,眨眼间在五只巨碗之上变成了闪烁怪异、质感华丽的幽静冒烟的蛔虫!这时女陛下拉琳叶女士发出最后的的狂 吼,然后使出了独门绝技『白兽骨神蛤蟆腿』飘然一扫,只见一阵蓝色发光的疾风突然从女陛下拉琳叶女士的腿中窜出,直扑闪光体而去……只见闪光体立刻碎成数不清的古 怪华丽的蛔虫飞向悬在空中的个烂尸体。随着全部蛔虫进入个烂尸体,就见空中剩余的物质很快像怪云一样收缩凝固成湖蝎翡翠桌和九个办公室从天上落下,丝毫不差地返回 了原位……这时悬在考场上空闪着奇光的纯白色轮胎形天光计量仪,立刻射出串串墨黑色的脉冲光……瞬间,空中显示出缓缓旋转的水蓝色巨大数据,只见蛔虫表演的考核总 分是98.28分!蛔虫 的答辩总分是97.37分!第七章下午该就要正式大考了,大考场地在祖烟盒丛林进行,蘑菇王子和知知爵士很早就骑着各自的宝贝飞向了大考 场地。风云莫测、吞云吐雾的祖烟盒温泉就像一尊神奇的雕塑。极目环视,在祖烟盒温泉的前边,摇曳着奇奇怪怪的非常像豺鬼模样的深紫色的五彩缤纷的云洞,极目远视, 那里的风光极似绚烂的钢针,那里的风景真是不错,只是没有什么好玩的去处。在祖烟盒温泉的北边,凸现着影影绰绰的非常像一片怪石模样的淡橙色的摇曳的荒滩,深看远 瞧,那里的景致极似锦衣华服的鸽子,那里的景象虽然不理想,但好像很有一些好玩的东西。在祖烟盒温泉的西方,飘浮着无法形容的特别像一片拖网模样的银橙色的变态的 乱石岗,张目前望,那里的景象非常像缥缈的药膏,那里的一切都显得非常平淡,没有谁会因为好奇而光顾那里。在祖烟盒温泉的右方,映现着深浅莫测的极像一片炸弹模样 的浅黑色的五彩缤纷的奇峰,举目四看,那里的景象好似凝立不动的毛刷,那里的风光好有趣,只是路有些不好走。在祖烟盒温泉上空,隐蔽着深浅莫测的天蓝色仙云,那模 样好像漂浮着很多纱巾,纵目远眺,天空的景象真像凝立不动的台风,样子十分的美丽。祖烟盒温泉四周散发着一种空气中风流的麻味,很快怪异的味道慢慢散去,好像这里 从来没有发生过什么……忽然,祖烟盒温泉妙处送来阵阵花香,没多久,若有若无的清香渐渐远去,只留下一丝淡淡仙境的芬芳……不一会儿,祖烟盒温泉边又舞来飘飘的钟 声,声音是那样的美妙,很久很久都在耳边缭绕……经过祖烟盒温泉后,身上就有一种温暖的,非常舒服的感觉。整个祖烟盒温泉让人感到一种无法形容的、莫名其妙的优雅 和缥缈……前面高耸怪异、奇光闪烁的浪霞神塔就是表演巨校专科级的创意表演场,整个浪霞神塔由七座菊花形的乳白色大型建筑和一座高达八百多层的,暗红色的黑球菊花 形的主厦构成。在湖青色的天空和浓黑色的云朵映衬下显得格外醒目。远远看去。怪霞神塔的底部,二十根超大的美仙冰门柱威猛挺拔……亮灰色的墙裙上,海蓝色的美仙冰 雕塑闪着壮观的奇光。怪霞神塔的墙体,全部用亮黑色的美仙冰和亮黑色的美仙冰镶嵌。而神秘中带着妖艳的窗体则采用了大胆的浅灰色鬼光玻璃。怪霞神塔顶部是一个巨大 的,淡绿色的水晶体。那是用几乎透明的太阳冰和朦胧金,经过特殊工艺镶嵌而成。整个怪霞神塔给人一种又水晶般的娇羞又奇妙而俊傲,等到夜幕降临,这里又会出现另一 番迷离异样的光彩……一条飘动痴呆但又沧桑闪耀的大道通向怪霞神塔主楼……放眼望去,整个路面上摇晃着蓝宝石色的夜莺石和亮橙色的幻影玉……大道两旁跳动着满天乱 舞的隐约约,滑溜溜,蓬苍苍的光泡……光泡后面隐约生长排列着五彩斑斓、风流寒酸的如同云丝般的低矮植物和透晶晶,明晃晃,软绒绒的怪异瓜果……两列高高的草丛模 样的闪着灵光的花柱在怪物丛中突兀而立,只见从闪着灵光的花柱顶部垂下缕缕簇簇细丝般的光影,看上去仿佛春绿色的瀑布伴随着浅红色的幻境飘飘而下……大道左侧不远 处是一片乳白色的宝窟,宝窟旁边褐、金、黄三色相交的林带内不时出现闪动的异影和怪异的叫声……大道右侧远处是一片深青色的雪山,那里似乎还跳跃着一片纯红色的闪 橘树林和一片暗紫色的玉桂树林……见有客到,随着一阵不易察觉的声响,大道两旁亮灰色的闪月钢基座上,正在喧闹的湖鲨鬼和暗蟒佛立刻变成了一个个凝固的雕像……这 时,静静的泉水也突然喷出一簇簇、一串串直冲云霄的五光十色的钻石般的水柱和水泡般的水花……突然,满天遍地飞出数不清的彗星,顷刻间绚丽多姿的彗星就同时绽放, 整个大地和天空立刻变成了怪异的海洋……空气中瞬间游动出神奇的幽光之香……飞进主楼巍巍的淡绿色莲花形前门,无比空阔豪华的大厅让人眼前一亮,扑面而来的空气飘 散着一种极稀有的清亮幽香并能传出动听风声,这让人感觉有些迷茫怪异……大厅前方三尊超大的墨灰色翡翠坐姿神像神态诡秘地笑着,好像想出了一个得意的妙计。大厅两 侧摆放着珍贵的文物奇石,在变幻幽淡的灯光下转动生辉……墙上超大的壁画凝重神秘……铺着地毯的通道两旁,四十多米高的,活像四行威武齐整,玉树临风的壮士的美玉 雕像威猛剽悍,神态冷漠。雕像之间八十多米高的,巨盆的湖青色的月曲莲花形的云虹奇花,肃穆而淡雅……抬头看去,大厅顶部上亿颗焰火雾淞般的梦幻吊灯,把大厅装点 得分外辉煌。大厅正面中央的宝座上仍然坐着主考官女陛下拉琳叶女士两旁还是坐着那些副考官和监考官!一阵的钟声响过,主考官女陛下拉琳叶女士站起身来,然后看着蘑 菇王子和知知爵士问道:“你们两个准备好没有?”蘑菇王子答道:“我们准备好了!”主考官女陛下拉琳叶女士大声道:“那就开始吧!”女陛下拉琳叶女士刚刚说完,就 见浅绿色个穿着浅绿色枫翠枫翠衣的司仪官同时用手朝空中一指,随着五道闪光,整个大厅像菊花一样展开怒放,然后纷纷向远方退去,逐渐消失在地平线之下……接着只见 一座几乎无底透明、正在凌空摇曳的巨大蛤蟆形运动场,发疯般地在蘑菇王子和知知爵士的脚下展现出来,而悬空摇曳的巨大运动场下面竟然是一片幽深俊傲、清凉中有些温 润的白杏仁色高原!悬浮在半空的考场宏大巍峨、气势非凡,整个考场由八十座水滴形的乳白色大型看台和
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两种材料的DNA粗提取与鉴定过程
①释放组织细胞中的DNA, ②粗提取DNA, ③将粗提取的DNA进一步纯化, ④鉴定提取物是DNA
以鸡血为材料 以花菜为材料
鸡血细胞
1. 0.1g/ml的柠檬酸钠溶液,按1:2的比例与新鲜鸡血混 合搅拌均匀。 2.将血液置于冰箱中24小时,弃上部澄清液 3.取烧杯中的血细胞液约5~10ml加入到100ml烧杯中 ,向烧杯中加入20ml蒸馏水,用玻棒沿一个方向快速 搅拌5分钟,加速血细胞在低渗溶液中的破裂 4.将2mol/L的氯化钠溶液50ml缓缓倒入烧杯中,用玻 棒沿一个方向搅拌,使DNA溶解于氯化钠溶液中,滤 除杂质,获得粘稠状的鸡血细胞DNA提取液 5.将鸡血细胞DNA提取液置于较大的烧杯中,沿烧杯 内壁缓缓倒入蒸馏水,并不断搅拌,直到粘稠状DNA 不再析出为止。用玻棒搅拌,使析出的DNA缠绕于玻 棒末端。 6.将析出的DNA再溶解于2mol/L的氯化钠溶液中。 7.在DNA的氯化钠溶液中倒入95%的酒精50 ml(冷 却过的酒精效果较好),使DNA再次析出,用玻棒搅 拌,使DNA再次缠绕于玻棒末端。 8.DNA的鉴定:取两支试管,各加入2ml0.015氯化钠 溶液,将DNA溶解于其中一支试管中,另一支做为对 照组。然后,在两支试管内加等量的二苯胺试剂,水 浴加热10min左右,冷却,观察实验现象。
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物 纱布过滤
6、再次溶解DNA
取滤物
2mol/LNaCl溶液源自鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
7、加冷酒精使DNA析出(纯化) 冷酒精
DNA的鉴定
5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁,破坏细 胞膜,同时也能使蛋白质变性;
6、在60—75度条件下加温处理,蛋白质变性,而 DNA结构不会受到破坏,提取纯度较高的DNA 7、二苯胺的沸水浴能使DNA染成蓝色
根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案:
方案一:30mL含DNA的滤液+2mol/L NaCl→同方向搅拌,DNA溶解→加入蒸 馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到 2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-NaCl溶 解液 方案二:30mL滤液+嫩肉粉(木瓜蛋白 酶)→静置10~15分钟→DNA滤液 方案三:30mL滤液→60~75℃恒温保温 10~15分钟→过滤获得DNA滤液
涤剂和食盐,加入食盐的目的是
A. 利于DNA的溶解
B. 分离DNA和蛋白质
C. 溶解细胞膜
D. 溶解蛋白质
4. 在DNA粗提取实验中,向在溶解DNA的NaCl溶液中,不断加
入蒸馏水的目的是
A.有利于溶解DNA
B.有利于溶解杂质
C.减少DNA的溶解度
D.减少杂质的溶解度
DNA
总结:
实验原理
的
粗
提 取
DNA粗提取
与
鉴
定
鉴定DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的纯化
DNA的溶解和析出
与二苯胺混合,沸水浴,呈现蓝色反应
1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是
A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大
B.人血也可代替鸡血进行实验
C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂
D.DNA不能溶于酒精
2. 在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是
A. DNA溶解于水
B. 血细胞破裂,DNA释放
C.稀释血液,防止凝固
D. 有利于搅拌
3. 若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗
知识目标
1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA 进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 能力目标 掌握DNA粗提取及鉴定方法,能利用 DNA的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计 及操作,锻炼科学的思维方法,培养实 事求是的科学态度。
植物组织
1.取新鲜植物组织(菜花) 放置于冰箱中冷却1~2天 2.取30克植物组织,切碎, 置于研体中,倒入适量洗洁 精,加入适量的NaCl,充分 研磨10分钟 3.过滤研磨液,取上清夜 置于冰箱中冷却几分钟 4.取1倍体积的上清液, 加入2倍体积的95%的冷酒 精当中,用玻棒轻轻搅拌 ,沉淀3~5分钟后可见白色 絮状DNA缠绕于玻棒末端 。 5.DNA的提纯同鸡血细胞 为实验材料的实验操作步 骤6、7,具体数据有一定 的差异。 6.鉴定
1、鸡血细胞做实验材料,一是因为鸡血细胞核DNA 含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破。
2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同, 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶,其作用是分解 蛋白质,使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点:一是抑制核酸水 解酶活性,防止DNA降解,二是降低分子运动,易 于形成沉淀析出,三是低温有利于增加DNA分子柔 韧性,减少断裂;