13.巴氏染色液

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巴氏染色技术要点

巴氏染色

巴氏（Papanicolaou）染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。对如何染好巴氏染色，笔者有以下几点体会，报告如下。

1 EA 36染液pH值的测试

EA 36染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用，EA 36染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。在溶媒中其发色团是负离子部分。发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合，从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。在偏碱环境中，蛋白质的羧基游离增多（带负电）。在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）。所以必须把染液pH值调至5.2为宜［1］。EA 36染液pH的调节，可用石蕊试纸法，也可用酸度计测试。当然用酸度计法最为准确。但以上方法均比较麻烦，同时还要受到仪器设备的限制，不方便。本文采用一种简单方便的方法。即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。具体做法是，拿一张滤纸先滴少量染液于纸上，若滴染液处呈紫色，说明染液偏碱，则滴加少量10%磷钨酸。若显绿色，说明染液偏酸，则滴加少量饱和碳酸锂。并充分混匀。直至染液滴在纸上既显绿色又有红色，颜色鲜艳为宜。用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样，同样可获得满意的染色效果。磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料的着色力。同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱，实际上是一对缓冲剂。可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。保证染色达到理想效果。

巴氏染色原理

巴氏染色原理是一种常用的细胞染色技术，用来对细胞或组织进行染色。该原理是基于酚醛固定的原理，通过将细胞或组织固定在玻片上，然后处理它们使得它们能够与染料发生反应。

巴氏染色的步骤如下：

1. 固定：将细胞或组织浸泡在酚醛液中，使其固定在玻片上。酚醛能够保持细胞或组织的形状和某些结构的完整性。

2. 脱水：通过将样本逐渐浸泡在濃度递增的酒精溶液中，使其逐渐失去水分。这样做是为了减少细胞或组织内的水分，以便尽可能地提高染料对细胞或组织的亲和力。

3. 渗透：将细胞或组织浸泡在骨胶液中，使其充分浸润。骨胶液能够渗透到细胞或组织的内部，使得染料更容易地与它们发生反应。

4. 染色：将染料溶液滴在样本上，使其与细胞或组织结合。染料能够结合到不同的细胞或组织结构中，从而显示出不同的颜色或形态。

5. 清洗：将多余的染料以及其他杂质通过浸泡在去离子水中进行清洗。这样可以让染色的结果更加清晰。

6. 封片：在玻片上涂上封片剂，以保护样本并固定染料。这样可以使染色的结果保持较长时间。

通过巴氏染色原理，我们可以对细胞或组织进行染色，并观察它们的结构，从而得到更多关于它们的信息。这种染色方法在细胞学和组织学研究中广泛应用，为我们研究生物体内部的结构和功能提供了重要的工具。

巴氏染色液(Papanicolaou EA65)操作步骤及注意事项

货号：G1614

规格：4×100ml/4×500ml

有效期：6个月有效。

产品内容：

产品组成4×100ml4×500ml Storage

试剂(A):苏木素染色液100ml500ml RT避光

试剂(B):蓝化液100ml500ml RT

试剂(C):橘黄G6染色液100ml500ml RT避光

试剂(D):EA65染色液100ml500ml RT避光

产品说明：

细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法。Papanicolaou Stain最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。橘黄G6与EA36或EA50联用使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。细胞核染色液主要为Harris苏木素染液，细胞质染色液主要为EA36染液、EA50染液。巴氏染色液用于细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。

巴氏染色液(Papanicolaou EA50)细胞质染色采用EA50染色液，细胞核染色采用无毒改良型苏木素染色液，不仅适用于妇科细胞学涂片染色如筛查宫颈癌和癌前病变，也适用于胸水、腹水、痰液等非妇科细胞样本的染色。

自备材料：

1、固定液(如95%乙醇-冰乙酸固定液)

巴氏染色液EA 染色液使用说明书

3 组，每组上下跌落 6-8 次
80 and Histanol 95）进行脱水
5.
OG-6，Pap 2A 染色
2-3 min
6.
95 % 乙醇（Histanol 95）冲洗
2 次，每次上下跌落 6-8 次
7.
EA 31，Pap 3A 试剂染色 / EA 50，Pap 3B 试 2-3 min
上海科汇生物技术有限公司
测试样本可为妇科细胞样本和非妇科细胞样本，如痰液，尿液，细胞穿刺等。为
获得优质的染色效果，EA 50 Pap 3B 试剂特性与 KOHYPATH 其他用于细胞学涂片
染色试剂（苏木素 HP，Pap 1A 试剂，OG-6，Pap 2A 试剂）相符。
【主要组成成分】含生物染料级别（BSC）的伊红 Y 和亮绿 SF，并添加磷钨酸和
上下跌落 6-8 次
13.
100 %乙醇（Histanol 100）脱水
3-5 min
14.
二甲苯（BioClear）或其替代物（BioClear New）
上下跌落 6-8 次
透明处理
15.
二甲苯（BioClear）或其替代物（BioClear New）
3-5 min
透明处理
透明化处理后应立即用合适的封片剂进行封片。如果使用二甲苯（BioClear ）透明化，对
为防止苏木素 HP 溶液沉淀和表面形成金属光泽漂浮物，使用前过滤处理。

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查

中应用价值

1. 引言

1.1 背景介绍

宫颈液基细胞检查是一种常见的癌症筛查方法，通过对宫颈细胞进行染色和观察，可以及早发现潜在异常细胞的存在，从而帮助医生及时进行治疗和干预。而在宫颈液基细胞检查中，HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法。

HE染色是指用苏木精红染色液对细胞组织进行染色，然后通过镜检查细胞结构和形态的变化，从而判断细胞是否正常。HE染色在宫颈液基细胞检查中具有较高的分辨率和清晰度，可以清晰显示细胞的核质比和细胞核的形态，有利于医生进行细胞学分析和诊断。

巴氏染色是一种特殊的染色方法，可以通过染色剂对细胞核进行染色，使异常细胞核在显微镜下呈现出特殊的形态和颜色。巴氏染色在宫颈液基细胞检查中常用于检测细胞的DNA含量和核型，可以帮助医生判断细胞的恶性程度和预后。

HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中发挥着重要的作用，它们可以相互补充，提高检测的准确性和灵敏度，为患者提供更准确的诊断和治疗方案。

1.2 研究目的

研究目的是通过比较分析HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中的应用价值，探讨它们在临床实践中的优劣势和适用

范围。具体来说，我们的研究目的包括以下几个方面：

1. 比较HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的染色效果和

细胞形态学分析的准确性，评估它们对细胞结构和形态的显现能力。

2. 探讨HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的操作流程和

技术难易度，比较它们的操作成本和时间消耗。

3. 调查HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的临床应用情

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查

中应用价值

【摘要】

宫颈液基细胞检查是一项重要的筛查方法，而HE染色和巴氏染色是其中常用的染色方法。本文从染色原理和特点入手，探讨了两种染色方法在宫颈液基细胞检查中的应用价值。HE染色可以清晰显示细胞核和细胞质，有利于细胞形态学的分析和诊断；而巴氏染色则能够突出核蛋白质，有助于观察病理性细胞改变。通过比较两种染色方法的优劣，我们发现结合使用可以提高宫颈液基细胞检查的准确性，进一步优化细胞学诊断的技术和方法。结合HE染色和巴氏染色的优势，能够更全面地评估细胞形态学的特征，为临床诊断提供更加可靠的依据。

【关键词】

关键词：HE染色、巴氏染色、宫颈液基细胞检查、应用价值、原理、特点、比较、优势、准确性、细胞学诊断、技术、方法。

1. 引言

1.1 HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值

HE染色是一种广泛应用的染色方法，其原理是利用不同细胞结构和染色质的亲和性，通过镜下观察不同颜色反映出细胞的特征。在宫

颈液基细胞检查中，HE染色可以帮助医生明确细胞形态、结构和异型细胞的出现，从而提高癌前病变和癌症的诊断准确性。

相比之下，巴氏染色是一种特异性染色方法，其原理是利用特定

的染色剂选择性染色细胞某些成分，如细胞核或核蛋白。巴氏染色在

宫颈液基细胞检查中能够更加清晰地显示细胞核的形态和结构，有助

于鉴别异常细胞和癌细胞。

HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中各有其独特的应用价值，结合使用能够提高检查的准确性，进一步优化细胞学诊断的技术和方法，为宫颈癌的早期筛查和诊断提供更为可靠的依据。

巴氏染色原理及操作步骤

巴氏染色法就是脱落细胞染色中最好得染色方法.苏木素染液，细胞核内得染色质主要就是去氧核糖核酸（DNA，DNA得双螺旋结构中,两条链上得磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷得苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上得染液，但就是在细胞核中结合过多得染料与细胞浆中吸附得染料必须用分化液 1 %盐酸酒精脱去，才能保证细胞核与细胞浆染色得分明，把这个过程称为染色得分化作用.因酸能破坏苏木素得醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下

处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上得细胞核变呈蓝色，称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水最佳）变蓝。E A50 染液得酸碱度对于巴氏染色得成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成。伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料，在溶解媒中其发色团就是负离子部分，发色团可与蛋白质中带正电得氨基结合，从而就是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色，但蛋白质所带正负电荷得多少就是随溶液得PH值而改变得，在偏碱环境中,蛋白质得羧基游离增多（带负电），在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电），磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料得着色力，同时磷钨酸与碳酸锂还就是一对弱酸弱碱，实际上就是一对缓冲剂，可中与分化及蓝化时可能留下得少量酸或碱，保证染色达到理想效果，其适用于上皮细胞及间皮组织得标本,就是阴道脱落细胞检查中最常用得染色方法，该染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点•

巴氏染色液册产品标准

医疗器械注册产品标准

YZB/皖

巴氏染色液试剂盒

2013-11-10发布 2014-03-01实施

前言

巴氏染色试剂盒是以分泌物中的脱落细胞含有多种氨基酸，具有酸碱化学物质，且带有不同的电荷，与巴氏染色液中的酸碱化学物质起化学反应，与巴氏染色液中不同电荷的染料结合，从而使分泌物中的脱落细胞染成不同的颜色为原理，用于脱落细胞涂片染色，方便观察诊断。目前尚无国家标准或行业标准，为了规范生产，确保产品质量，特制订本注册产品标准。

本标准的编写遵循了GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写、第2部分：标准中规范性技术要素内容的确定方法》和《医疗器械注册产品标准编写规范》中的有关医疗器械注册产品标准编写的基本规定，并参照YY 0466-2003《医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号》，本标准于2014年3月首次发布。

本标准由合肥华今生物科技有限公司提出并起草。

本标准主要起草人：万士林梁锋

巴氏染色液试剂盒

1 范围

本标准规定了巴氏染色液试剂盒的分类、要求、试验方法、检验规则、标志、标签、使用说明书和包装、运输、贮存。

本标准适用于本公司生产的巴氏染色液试剂盒（以下简称试剂盒）。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB 191-2008 包装贮运图示标志

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查

中应用价值

1. 引言

1.1 研究背景

宫颈液基细胞检查是一种常用的筛查宫颈癌前病变的方法，对于

早期发现和治疗宫颈异常细胞具有重要意义。在宫颈液基细胞检查过

程中，染色方法是至关重要的环节，其影响着细胞形态的清晰度和准

确性。目前，常用的染色方法包括HE染色和巴氏染色，它们在宫颈液基细胞检查中的应用具有各自的特点和优势。

HE染色是一种广泛应用的常规染色方法，能够显示出细胞的核和胞浆结构，使细胞形态更加清晰可见。而巴氏染色则是一种专门用于

观察细胞核形态和结构的染色方法，能够更加明显地显示出核的特征。两种染色方法各有其适用的场合和优势，因此在宫颈液基细胞检查中

的应用价值也不尽相同。

在深入研究HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的应用之前，有必要对其研究背景进行充分了解，以便更好地理解这两种方法的特

点和优势。通过比较分析HE染色和巴氏染色方法，在实际应用中能够更好地选择适合的染色方法，提高宫颈液基细胞检查的准确性和有效性。

1.2 研究意义

宫颈液基细胞检查是一种常见的临床检查方法，用于早期筛查宫颈癌和前癌病变。而在这一检查过程中，HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法，它们在提高细胞检查准确性和敏感性方面具有重要意义。通过对HE染色和巴氏染色两种方法在宫颈液基细胞检查中的应用及优缺点进行深入研究，可以为临床医生提供更多的选择，并提高检查结果的可靠性，降低漏检和误诊率，为患者提供更好的诊疗服务。

对这两种染色方法的比较分析也可以促进技术的进步和改进，为宫颈液基细胞检查的发展提供新的思路和方向。对HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的综合价值进行评估，能够为日后的相关研究提供重要参考和借鉴。研究HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的应用价值，对于促进医学进步，提高临床诊断水平具有重要的现实意义和深远意义。

巴氏染色液

巴氏染色试剂盒(Papanicolaou EA50)

产品简介：

细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法。Papanicolaou Stain 最初仅用检测于阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。Harris苏木素染液是比较好的核染色剂，但由于Harris苏木素有毒性，本公司采用美国最新流行的改良Lillie-Mayer苏木素染色液。橘黄G6与EA36或EA50联用使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。

目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。细胞核染色液主要为Harris苏木素染液，细胞质染色液主要为EA36染液、EA50染液。巴氏染色液用于细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。

Leagene 巴氏染色试剂盒(Papanicolaou EA50)细胞质染液采用EA50染液，不仅适用于妇科细胞学涂片染色如筛查宫颈癌和癌前病变，也适用于胸水、腹水、痰液等非妇科细胞样本的染色。

主要成分：

试剂(A): 主要由苏木素、硫酸铝钾等组成。

试剂(B): 主要由碳酸锂或氨水等组成。

试剂(C): 主要由橘黄G6等组成。

试剂(D): 主要由淡绿、伊红、磷钨酸等组成。

自备材料：

1、固定液如95%乙醇-冰乙酸固定液

2、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇、无水乙醇

快速巴氏染色液注意事项

快速巴氏染色液是一种常用的细胞染色方法，具有快速、简单、显色明亮等优点。然而，在使用快速巴氏染色液时，我们需要注意一些事项，以确保染色效果的准确性和稳定性。以下是使用快速巴氏染色液的注意事项：

1. 样本制备：在进行细胞染色前，样本制备非常关键。首先，要确保样本的新鲜度，尽量选择新鲜组织或细胞。其次，样本处理要轻柔，避免引起细胞破裂或变形。最后，要注意样本固定的时间和方法，固定时间过短或过长都会影响染色效果。

2. 清洗步骤：在染色之前，样本需要进行充分的清洗，以去除可能的干扰物质。清洗步骤应该重复进行，直到洗涤液不再有颜色残留为止。同时，要避免使用含有蛋白酶或酸碱性溶液进行清洗，以免影响细胞的形态和染色结果。

3. 染色时间控制：染色时间的控制对于快速巴氏染色液来说非常重要。染色时间过短会导致染色不均匀或染色效果不明显，而染色时间过长则可能出现过度染色的情况。因此，在染色之前，要根据样本类型和染色液的浓度进行试验，以确定最佳的染色时间。

4. 染色液的使用：在使用快速巴氏染色液时，要注意染色液的储存和使用。首先，要避免染色液暴露在阳光下或高温环境中，以免影

响染色效果。其次，要定期检查染色液的有效期，过期的染色液可能会导致染色效果不佳。最后，要遵循染色液的供应商提供的使用说明，按照正确的比例稀释染色液，避免使用过量或过少的染色液。

5. 染色结果的观察和记录：染色完成后，要仔细观察染色结果，并及时记录。观察时要注意细胞的形态和染色的均匀性。如果发现染色结果不理想，可以尝试调整染色时间或染色液的浓度。同时，要将染色结果进行记录，以备后续分析和比较。

巴氏染色原理及操作步骤

巴氏染色法是脱落细胞染色中最好(de)染色方法.苏木素染液,细胞核内(de)染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA(de)双螺旋结构中,两条链上(de)磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷(de)苏木素精碱

性染料以离子或氢键结合而被染色.苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色. 分化：苏木素染色之后,用水洗去未结合在细胞上(de)染液,但是在细胞核中结合过多(de)染料和细胞浆中吸附(de)染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去,才能保证细胞核和细胞浆染色(de)分明,把这个过程称为染色(de)分化作用.因酸能破坏苏木素(de)醌型结构,使色素与组织解离,

分化不可过度.蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,在碱性条件下处于蓝色离子状态,而呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木精染上(de)细胞核变呈蓝色,称蓝化作用,一般

多用自来水浸洗即可变蓝,也可用温水（50度温水最佳）变蓝.EA50染液(de)酸碱度对于巴氏染色(de)成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成.伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料,在溶解媒中其发色团是负离子部分,发色团可与蛋白质中带正电(de)氨基结合,从而是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色,但蛋白质所带正负电荷(de)多少是随溶液(de)PH值而改变(de),在偏碱环境中,蛋白质(de)羧基游离增多（带负电）,在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）,磷钨酸在染色过程中,不但作为媒染剂可增加染料(de)着色力,同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱,实际上是一对缓冲剂,可中和分化及蓝化时可能留下(de)少量酸或碱,保证染色达到理想

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值

宫颈液基细胞检查是一种用于早期发现宫颈癌和其他宫颈病变的重要方法。宫颈液基细胞检查通过收集宫颈细胞、一种简单而有效的获得宫颈细胞的方法，然后用染色技术将细胞染色，以便观察细胞的形态和结构。在宫颈细胞检查中，HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法，它们各具优势，可以为医生提供更多的信息和帮助，以更准确地判断宫颈细胞的异常情况，为临床诊断和治疗提供重要参考。

HE染色是一种常用的组织学染色技术，可以将细胞和组织结构清晰地显示出来，有助于观察细胞核、质膜和胞质等结构，帮助医生判断细胞的形态和结构是否正常。在宫颈液基细胞检查中，HE染色可以清晰地显示出细胞的形态和结构特征，有助于观察细胞的核质比、核形态、核浆比、细胞核的染色质和嗜银性等特征，帮助医生判断细胞是否异常，更准确地判断宫颈细胞的病变情况。HE染色在宫颈液基细胞检查中具有重要的应用价值，可以提供临床诊断和治疗所需的重要信息和帮助。

HE染色和巴氏染色是两种在宫颈液基细胞检查中常用的染色方法，它们各具优势，可以为医生提供更多的信息和帮助，帮助他们更准确地判断宫颈细胞的异常情况。在宫颈液基细胞检查中，HE染色可以清晰地显示出细胞的形态和结构特征，有助于观察细胞的核质比、核形态、核浆比等特征，为医生提供临床诊断和治疗所需的重要信息；巴氏染色可以清晰地显示出细胞核中DNA的含量和分布情况，有助于观察细胞的增生情况和核酸的异常情况，为医生提供更多的帮助。HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中均具有重要的应用价值，可以为临床诊断和治疗提供重要参考，有助于提高宫颈癌和其他宫颈病变的早期发现率和治疗效果，对于提高妇女健康水平和降低疾病发病率具有重要意义。加强对HE染色和巴氏染色技术的研究和应用，提高其在宫颈液基细胞检查中的应用价值和临床意义，对于保障妇女健康和预防宫颈癌具有重要意义。

巴氏染色步骤

1．将涂片置于95%酒精固定15分钟以上。

2．水洗后，用苏木素染液3—5分钟，直到染色明显为止后用清水冲洗。

3．置于稀碳酸锂溶液1—2分钟。使涂片返蓝后用水冲洗。4．放入95%乙醇中脱水1分钟，水洗甩干。

5．在橘黄G6染色3分钟，水洗。

6．依次放入80%、95%、95%乙醇中各10秒、脱水。

7．水洗后放入EA36染液中染色5分钟左右，至胞浆着色鲜明为止，再水洗。

8．用95%酒精洗涤2—3次，再置于纯酒精中脱水

9．晾干或吹干后用树胶封片固定即可。

注：①一套染液可根据染色深浅情况更换，一般为3—5月更换一次

②更换染液时，苏木素及EA36染液可适量加入10ml冰醋酸，

③春冬两季及温度较低时，可适当延长染色时间。

快速染色法

苏木素色精染色液1-2min水洗晾干，苏木素分色液3s水洗晾干，苏木素返蓝液5s水洗晾干，苏木素多彩染液1-2min,水洗吹干，封片。

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巴氏染色液作用安全操作及保养规程

巴氏染色液是在生物科学研究和医学诊断中广泛使用的一种染色剂。就像所有化学试剂一样，正确的使用和保养非常重要。下面我们将重

点介绍巴氏染色液的作用、安全操作和保养规程。

巴氏染色液的作用

巴氏染色液是由甲醛和孟德尔水杨酸（也称为苯酚）混合而成的染

色剂。它广泛用于细胞和组织的标本制备，以便观察细胞学的形态、

结构和功能。巴氏染色液可以染色核糖核酸（RNA）、蛋白质和细胞核

等有机物。

安全操作规程

巴氏染色液是一种刺激性化学物质，在使用时需要保护好自己和实

验室同事的健康。以下是一些巴氏染色液的安全操作规程：

1.密封存储

巴氏染色液必须密封存储在冷暗处，避免暴露在阳光下或高温地方。应该将巴氏染色液储存在标有危险物品的储存柜或房间中。

2.戴手套和护目镜

在接触巴氏染色液前必须戴上手套和护目镜。如果不小心触碰到染

色液，要迅速将其冲洗掉并咨询专业人员。

3.通风

操作巴氏染色液时必须在通风的环境下进行。这将有助于防止呼吸危害和其他安全问题。

4.遵循正确的操作程序

使用巴氏染色液前要阅读和理解安全数据表和物质安全说明书，确保了解正确的操作程序和应急处理方法。

5.避免接触皮肤和呼吸道

避免巴氏染色液接触皮肤和呼吸道。如果染色液不慎接触到皮肤或呼吸道，需要立即清洗或呼吸新鲜空气，并在情况严重时咨询医生。

保养规程

保养巴氏染色液可以最大限度地保持其质量和性能，并延长其使用寿命。下面是一些保养巴氏染色液的规程：

1.不要过度稀释

巴氏染色液不宜过度稀释。稀释过量会使其染色效果不佳，使用寿命缩短。

2.避免冻结

巴氏染液配制

巴氏染液配制1、苏木精：Harris苏木精：苏木精5g溶于无水乙醇50ml ，硫酸铝钾100g溶于蒸馏水1000ml ，混合后煮沸，待稍冷加入氧化汞2.5g，再煮沸2min，用前加冰醋酸20ml

改良Gill氏半氧化苏木精：苏木精2g, 无水乙醇250ml, 硫酸铝17.6g,（可减半量）碘酸钠0.2g, 柠檬酸2g，甘油50ml, 蒸馏水750ml。

配制方法：将苏木精溶于无水乙醇，硫酸铝溶于蒸馏水，完全溶解后两液混合，依次加入碘酸钠，柠檬酸，甘油。此配方特点：配制时勿须加温。配后即可应用。性能稳定，基本消除了过度氧化的苏木精结晶污染涂片的麻烦。唯染色时间较长，须5～10min。

2、桔黄G6(orangeG6)：桔黄G 0.5g，溶于95%酒精100ml, 加磷钨15mg。

3、EA染液：EA36：由三种贮备液按比例混合而成：0.5%亮绿(light green)酒精溶液45ml，

0.5%裨士麦褐(bismark brown)酒精溶液10ml，0.5%伊红Y(eosin yellowish)酒精溶液45ml，混合后，再加磷钨酸0.2g，饱和碳酸锂水溶液1滴。EA50：3%亮绿水溶液10ml，纯甲醇250ml，20%伊红Y 水溶液20ml，冰醋酸20ml，磷钨酸2g (水溶后加入)，95%酒精700ml 。

染色方法

1、经固定的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精分化、返兰同HE染色。

2、70%、80%、95%酒精逐级脱水各1min。3桔黄G6 3～ 5 min 。

4、95%酒精二缸漂洗各 1 min 。

13.巴氏染色液

巴氏染色技术要点

巴氏染色原理

巴氏染色液(Papanicolaou EA65)操作步骤及注意事项

巴氏染色液EA 染色液使用说明书

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值

HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值

巴氏染色原理及操作步骤

巴氏染色液册产品标准

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巴氏染色液

快速巴氏染色液 注意事项

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巴氏染色步骤

巴氏染色液作用安全操作及保养规程

巴氏染液配制

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