分子生物学作业
分子生物学2-7章作业及答案
第二章
一、名词解释
1、DNA 的一级结构:四种脱氧核苷酸根据一定的排列顺序以3’ , 5 ’磷酸二酯键相连
形成的直线或环状多聚体,即四种脱氧核苷酸的连接及排列顺序.
2、DNA 的二级结构:DNA 两条多核苷酸链反向平行盘绕而成的双螺旋结构.
3、DNA 的三级结构:DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构.
4、DNA 超螺旋:DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构,是DNA 结构的主要形式,可分为正超螺旋与负超螺旋两大类.按DNA 双螺旋的相反方向缠绕而成的超螺旋成
为负超螺旋,反之,那么称为正超螺旋.所有天然的超螺旋DNA 均为负超螺旋.
5、DNA 拓扑异构体:核苷酸数目相同, 但连接数不同的核酸, 称拓扑异构体
6、DNA的变性与复性:变性(双链—单链)在某些理化因素作用下,氢键断裂, DNA双链解开成两条单链的过程. 复性(单链-双链)变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子根据碱基互补配对原那么重新恢复天然的双螺旋设想的现象.
7、DNA 的熔链温度( Tm 值) :DNA 加热变性时, 紫外吸收到达最大值的一半时
的温度,即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链. Tm值计算公式:Tm = 69.3+0.41 (G+C) %; <18bp 的寡核甘酸的Tm 计算:Tm = 4 (G+C)+2 (A+T).
8、DNA 退火:热变性的DNA 经缓慢冷却后即可复性,称为退火
9、基因:编码一种功能蛋白或RNA 分子所必需的全部DNA 序列 .
10、基因组:生物的单倍体细胞中的所有DNA ,包括核DNA 和线粒体、叶绿体等细胞器DNA
分子生物学作业(完整版)
分子生物学作业
第一次
1、Promoter:(启动子)一段位于结构基因5…端上游、能活化RNA聚合酶的DNA序列,是RNA聚合酶的结合区,其结构直接关系转录的特异性与效率。
2、Cis-acting element:(顺式作用元件)影响自身基因表达活性的非编码DNA序列,组成基因转录的调控区包括:启动子、增强子、沉默子等
一、简述基因转录的基本特征。(作业)P35
二、简述蛋白质生物合成的延长过程。P58
肽链的延伸由于核糖体沿mRNA5 ′端向3′端移动,开始了从N端向C端的多肽合成。
起始复合物,延伸AA-tRNA,延伸因子,GTP,Mg 2+,肽基转移酶
每加一个氨基酸完成一个循环,包括:
进位:后续AA-tRNA与核糖体A位点的结合
起始复合物形成以后,第二个AA-tRNA在EF-Tu作用下,结合到核糖体A位上。
通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu·GTP复合物,参与下一轮循环。
需要消耗GTP,并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子。
转位:P位tRNA的AA转给A位的tRNA,生成肽键;
移位:tRNA和mRNA相对核糖体的移动;
核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子,二肽酰-tRNA2进入P位,去氨酰-tRNA 被挤入E位,空出A位给下一个氨酰-tRNA。移位需EF-G并消耗GTP。
三、真核细胞mRNA分子的加工过程有哪些?P40
1、5’端加帽
加帽指在mRNA前体刚转录出来或转录尚未完成时,mRNA前体5’端在鸟苷酸转移酶催化下加G,然后在甲基转移酶的作用下进行甲基化。
帽子的类型
分子生物学作业(完整版)
分子生物学作业
第一次
1、Promoter:(启动子)一段位于结构基因5…端上游、能活化RNA聚合酶的DNA序列,是RNA聚合酶的结合区,其结构直接关系转录的特异性与效率。
2、Cis-acting element:(顺式作用元件)影响自身基因表达活性的非编码DNA序列,组成基因转录的调控区包括:启动子、增强子、沉默子等
一、简述基因转录的基本特征。(作业)P35
二、简述蛋白质生物合成的延长过程。P58
肽链的延伸由于核糖体沿mRNA5 ′端向3′端移动,开始了从N端向C端的多肽合成。
起始复合物,延伸AA-tRNA,延伸因子,GTP,Mg 2+,肽基转移酶
每加一个氨基酸完成一个循环,包括:
进位:后续AA-tRNA与核糖体A位点的结合
起始复合物形成以后,第二个AA-tRNA在EF-Tu作用下,结合到核糖体A位上。
通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu·GTP复合物,参与下一轮循环。
需要消耗GTP,并需EF-Tu、EF-Ts两种延伸因子。
转位:P位tRNA的AA转给A位的tRNA,生成肽键;
移位:tRNA和mRNA相对核糖体的移动;
核糖体向mRNA3’端方向移动一个密码子,二肽酰-tRNA2进入P位,去氨酰-tRNA 被挤入E位,空出A位给下一个氨酰-tRNA。移位需EF-G并消耗GTP。
三、真核细胞mRNA分子的加工过程有哪些?P40
1、5’端加帽
加帽指在mRNA前体刚转录出来或转录尚未完成时,mRNA前体5’端在鸟苷酸转移酶催化下加G,然后在甲基转移酶的作用下进行甲基化。
帽子的类型
分子生物学课后习题答案 2)
分子生物学课后习题答案(2)
《现代分子生物学》第四次作业
1、简述原核生物和真核生物mRNA的区别。答:①原核生物mRNA常以多顺反子的形式存在。真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在。
②原核生物mRNA的转录和翻译不仅发生在同一个细胞空间里,而且这两个过程几乎是同步进行的。真核生物mRNA的合成和功能表达发生在不同的空间和时间范畴内。
③原核生物mRNA半衰期很短。真核生物mRNA的半衰期较长。④原核与真核生物mRNA的结构特点也不同:原核生物mRNA的5’端无帽子结构,3’端没有或只有较短的poly A结构。真核生物mRNA的5’端存在帽子结构,且绝大多数具有poly A结构。
2、大肠杆菌的终止子有哪两大类?请分别介绍一下它们的结构特点。
答:大肠杆菌的终止子可以分为不依赖于p因子(内在终止子)和依赖于p因子两大类。
不依赖于p因子的终止子结构特点:1.终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区,由这段DNA转录产生的RNA容易形成发卡式结构。2.在终止位点前面有一端由4—8个A组成的序列,所以转录产物的3’端为寡聚U,这种结构特征的存在决定了转录的终止。依赖于p因子的终止子的结构特点:1.转录的RNA也具有发夹结构,但发夹结构后无poly(U)。2.形成的发夹结构较疏松,茎环上不富含GC。3.终止需要ρ因子的参与。4.与不依赖于ρ因子的终止一样,终止信号存在于新生的RNA 链上而非DNA链上过程。
3、真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟的mRNA,以用作蛋白质合成的模版?
分子生物学试题及答案(整理版)
分子生物学试题及答案(整理版)
一、选择题
1.DNA双螺旋结构是由哪两种碱基之间的氢键支撑的? A. 腺嘌呤和胸腺嘧啶
B. 腺嘌呤和鳌酷嘧啶
C. 胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
D. 腺嘌呤和胸腺嘧啶、胸腺嘧啶和鳌酷嘧啶
2.在RNA转录中,哪种RNA是由RNA聚合酶合成的? A. mRNA
B. rRNA
C. tRNA
D. snRNA
3.下列哪个过程不属于DNA复制中的信息单向传递过程? A. 串联扭曲
B. 连续DNA合成
C. 不连续DNA合成
D. 缺氧齿合
二、填空题
1.DNA双螺旋结构中,两根链之间的碱基互为__________。
2.在生物细胞中,DNA的复制是由__________完成的。
3.参与DNA复制的酶包括DNA__________酶、DNA__________酶和
DNA__________酶。
三、简答题
1.请简要说明DNA双螺旋结构的特点和形成方式。
2.什么是DNA复制?简要描述DNA复制的过程。
四、解答题
1.请根据你的理解,解释DNA复制的半保留复制特点。
2.试分析DNA复制过程中可能出现的错误及其纠正机制。
以上为分子生物学试题及答案的整理版,希望能对您的学习有所帮助。
福师1203班秋《分子生物学》在线作业一满分答案
福师1203班秋《分子生物学》在线作业一满分答案
分子生物学在线作业一
一、单选题(共15 道试题,共30 分。)
1. 假基因是由于不均等交换后,其中一个拷贝失活导致的。选出下面关于此过程的正确叙述。( )
A. 失活点可通过比较沉默位点变化的数量和置换位点变化的数量采确定;
B. 如果假基因是在基因复制后立即失活,则它在置换位点比沉默位点有更多的变;
C. 如果假基因是在基因复制后经过相当长一段时间才失活,则它在置换位点与沉默位点有相同数量的变化
满分:2 分
2. 下列叙述不正确的是:( )
A. 共有20个不同的密码子代表遗传密码;
B. 色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子;
C. 每个核苷酸三联体编码一个氨基酸;
D. 不同的密码子可能编码同一个氨基酸;
E. 密码子的第三位具有可变性
满分:2 分
3. 哪些有关免疫球蛋白基因重排的叙述是正确的?( )
A. 所有物种中V基因的数目是一样的;
B. J是恒定区的一部分;
C. 各部分连接时,将产生缺失或重排;
D. 当一个等位基因中发生有意义的重排时,另一个等位基因也发生重排
满分:2 分
4. 多态性(可通过表型或DNA分析检测到)是指:( )
A. 在一个单克隆的纯化菌落培养物中存在不同的等位基因;
B. 一个物种种群中存在至少两个不同的等位基因;
C. 一个物种种群中存在至少三个不同的等位基因;
D. 一个基因影响了一种表型的两个或更多非相关方面的情况;
E. 一个细胞含有的两套以上的单倍体基因组
满分:2 分
5. 一个复制子是:( )
A. 细胞分裂期间复制产物被分离之后的DNA片段;
福师21秋《分子生物学》在线作业一【标准答案】
福师《分子生物学》在线作业一-0005
试卷总分:100 得分:100
一、单选题 (共 15 道试题,共 30 分)
1.Copia元件: ( )
A.在drosophla基因组中约有20000个拷贝;
B.串联排列;
C.两例为定向重复;
D.不被转录;
E.与反转录病毒的env基因有同源性
答案:C
2.tRNA参与的反应有:( )
A.转录;
B.复制;
C.翻译;
D.前体mRNA的剪接;
答案:C
3.真核生物复制子有下列特征,它们: ( )
A.比原核生物复制子短得多,因为有末端序列的存在;
B.比原核生物复制子长得多,因为有较大的基因组;
C.通常是双向复制且能融合;
D.全部立即启动,以确保染色体在S期完成复制;
E.不是全部立即启动,在任何给定的时间只有大约15%是有活性的
答案:C
4.叶绿体基因组含:( )
A.两个大的反向重复;
B.四两个大的反向重复;
C.两个大的单一序列DNA;
D.的两个短的单一序列DNA
答案:A
5.锌指蛋白与锌的结合( )
A.是共价的;
B.必须有DNA的存在;
C.通过保守的胱氨酸和组氨酸残基间协调进行;
D.位于蛋白质的α—螺旋区域
答案:C
6.假基因是由于不均等交换后,其中一个拷贝失活导致的。选出下面关于此过程的正确叙述。( )
A.失活点可通过比较沉默位点变化的数量和置换位点变化的数量采确定;
B.如果假基因是在基因复制后立即失活,则它在置换位点比沉默位点有更多的变;
分子生物学作业及答案
分子生物学作业及答案
《分子生物学》期末考试
一.名词解释
1.增色效应
答:当DNA 从双螺旋结构变为单链的无规则卷曲状态时,它在260nm 处的吸收便增加,这叫“增色效应”。
2.核酶
答:指具有催化活性的RNA,其作用底物是RNA,主要参与RNA的加工成熟。
3. DNA半不连续复制
答:指DNA复制时,前导链上DNA的合成是连续的,后随链上是不连续的,故称为半不连续复制。
4.操纵子
答:在转录水平上控制基因表达的协调单位,包括启动子(P)、操纵基因(O)和在功能上相关的几个结构基因。
5.增强子
答:指真核生物的一段DNA序列,不具有方向性,距离结构基因可远可近(甚至可以位于内含子)。它与某些蛋白质因子结合后,通常能够增强启动子
的转录活性,有时也可以抑制转录。
6.核小体
答:是贪色提的基本结构单位,由DNA和组蛋白构成。
7.核糖体
答:是细胞中的一种细胞器,由一大一小两个亚基结合形成[2],主要成分是相互缠绕的RNA和蛋白质。
8.启动子
答:指结构基因的转录起始位点附近的一段DNA序列,它结合RNA聚合酶(真核生物还需要结合其他蛋白质因子)后能够开放基因转录。
9.终止子
答:是一段位于基因或操纵组末端的DNA片段,可中断转录作用。
10. DNA克隆
答:在体外将DNA插入载体分子,构成重组DNA分子,然后将其分子导入原先没有这类分子的宿主细胞内并能够持续稳定的繁殖。
二.请选择正确的选项
1.以下哪个是核蛋白( C )
A.角蛋白
B.染色质
C.组蛋白
D.蛋白聚糖
2.DNA中的一段5''-AGTCTGACT-3''序列等同于RNA中的哪一段( A )A.5''-AGUCUGACU-3''
《分子生物学》作业及答案
中,负责 (20) 的合成。
12. DNA 复制时,一条链是连续的,另一条链是不连续的,称为 一条连来自亲代 DNA,另一条链是新合成的,这种方式叫 13. 原核生物 RNA 聚合酶核心酶的亚基组成为(25) 二、判断
中, (26) 负责识别转录起点。
1. 地衣酚试剂可以使 DNA 变成蓝色,二苯胺试剂能使 RNA 变成绿色。 2. DNA 片断越大,复性速度越慢。 3. DNA 复制时,前导链和后随链是由同一个 DNA 聚合酶的两个活性中心催化合成的,合成方向均为 5′→3 ′。 4. 所有生物的嘧啶二聚体均可用光复活系统修复。 5. 基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区。 6. 大肠杆菌染色体 DNA 由两条链组成,其中一条链为模板链,另外一条链为编码链。 7. 生物体内,天然存在的 DNA 分子多为负超螺旋。 8. 水分子可以插入天然 DNA 分子双螺旋的空隙中。 9. 原核生物的 DNA 聚合酶Ⅰ主要负责切除冈崎片段的 RNA 引物,并用 DNA 链填补缺口。 10. DNA 损伤的错配修复系统一旦发现错配碱基,就会切除甲基化的链,并以未甲基化的链为模板进行修复 合成。 11. 大肠杆菌的所有基因转录都由同一种 RNA 聚合酶催化。 12. 真核生物基因表达的效率比原核生物高, 其转录产物不需要加工, 即可作为模板用于指导蛋白质的合成。 13. B-DNA 是细胞内 DNA 的基本构象,在某些情况下还会有 A 型、Z 型和三股螺旋的局部构象。 14. 将凝胶上的 RNA 转移到硝基纤维薄膜上的技术叫 Southern 印迹法。 15. DNA 的两条链反向平行,复制时,两条新合成的链也按相反的方向延伸。 16. 嘧啶二聚体可以通过重组修复被彻底去除。 17. 真核生物的 RNA 聚合酶需要多种蛋白质因子协助,才能与转录起点结合。 18. 原核生物转录生成的 mRNA 多数不需要加工,但 rRNA 是由初级转录产物加工而成的。
分子生物学
分子生物学实验作业姓名:罗志敏
学号:6130111032
专业:食品工程
班级:食硕1308班
1.已知一个基因的cDNA序列,现在要把该基因插入质粒载体中,论述其基因
克隆的过程。
答:①.PCR引物的设计。做普通的克隆会涉及到甲基化形式有两种:dam甲基化和dcm甲基化。常用的大肠杆菌都有这两种甲基化酶。dam甲基化酶识别GATC位点并甲基化;dcm甲基化酶识别CCWGG位点(W是A或T)并甲基化。如果有这两种位点那么多数情况内切酶是切不开了。容易甲基化的切点设计引物时一定要注意,避免引入甲基化位点。
②.PCR反应。主要包括以下三个步骤:a.变性:加热使模板DNA在高温下(94℃)变性,双链间的氢键断裂,从而形成两条单链DNA作为反应的模板。b.退火:将反应体系冷却至特定的温度,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合,形成模板-引物复合物。C.延伸:将反应体系的温度提高到72℃并维持一
段时间,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反应混合物中的4种Dntp,按5,→3,方向复制出互补DNA。
③.提质粒。有时手工小提或粗提的质粒酶切效果不好,这可能是提取的不够纯或者内切酶品质不好。所以若酶切效果不佳建议用柱子精提或大提。
④.酶切。用于连接的酶切很关键。需注意如下几点:
a.如果是双酶切A和B,预实验中必须做A和B各自的单酶切和A+B的双酶切,好确认这几种酶都好用,质粒上的切点都好用。
b.酶切尽量用大体系,如50ul、100ul等。大体系能稀释内切酶包装中的甘油,对反应有利。相反,连接尽量用小体系,以增加DNA末端的碰撞机会。
分子生物学课后作业(重点)
分子生物学研究的内容狭义分子生物学的概念中心法则的概念
分子生物学与其他学科的关系DNA作为遗传物质的证据
染色体与DNA
1、染色体作为遗传物质的特征;
2、真核细胞染色体的组成;
3、DNA的二级结构及特点;
4、原核与真核染色体DNA比较;
5、原核与真核DNA复制的比较;
6、DNA的双螺旋结构模式要点和特点;
7、半保留复制的概念;
8、DNA复制的一般过程。
C值反常现象(C值谬论)真核生物基因组的结构特点染色体的结构模型
参与原核生物DNA聚合反应有关的酶类真核生物与原核生物DNA合成的区别DNA的修复的类型DNA的转录(从DNA到RNA)
生物信息的传递(上)
1、基因与基因表达的概念;
2、转录的步骤和主要内容;
3、转录与复制的异同点;
4、真核生物的RNA聚合酶的产物与特性;
5、启动子和增强子概念及其对转录的影响;
6、原核生物和真核生物mRNA的特征比较。
RNA转录后加工的内容及生理功能(P94)
生物信息的传递(下)
遗传密码——三联子的概念
遗传密码的性质
摆动假说
遗传密码的简并性概念及其对保持物种遗传稳定性的意义
信使RNA (mRNA)、转移RNA (tRNA)、核糖体RNA (rRNA)的概念和功能
真核细胞及原核细胞蛋白质合成的步骤和主要内容
蛋白质合成后的加工修饰
几类主要蛋白质的运转机制
信号肽的概念及其特点
DNA重组技术
1、中心法则;
2、半保留复制;
3、基因表达;
4、信使RNA (mRNA);
5、真核生物与原核生物DNA合成的区别;
6、真核细胞蛋白质合成的步骤;
7、DNA重组技术的基本过程。
DNA重组技术的概念与基本过程理想的基因工程载体所要具备的特点
分子生物学1000题绝对经典
〔绝对经典强烈推荐〕分子生物学1000题!
分子生物学试题
1. 证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是:( ) ---(选择题)
2. 1953年Watson和Crick提出:(DNA双螺旋结构模型 ) ---(选择题)
3. 双链DNA中的碱基对有:( ) ---(选择题)
4. DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述:( ) ---(选择题)
5. DNA的变性:( ) ---(选择题)
6. 在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中,发夹结构的形成:( ) ---(选择题)
7. DNA分子中的超螺旋:( ) ---(选择题)
8. DNA在10nm纤丝中压缩多少倍(长度)? (7 ) ---(选择题)
9. DNA在30nm纤丝中压缩多少倍?(42 ) ---(选择题)
10. DNA在染色体的常染色质区压缩多少倍?( 8400) ---(选择题)
11. DNA在中期染色体中压缩多少倍?( ) ---(选择题)
12. 组蛋白的净电荷是:( ) ---(选择题)
13. 核小体的电性是:( ) ---(选择题)
14. 当新的核小体在体外形成时,会出现以下哪些过程?( ) ---(选择题)
15. 1953年Watson和Crick提出:( ) (e)分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 ---(选择题)
16. 当一个基因具有活性时:( ) ---(问答题)
分子生物学试题集
分子生物学试题集
第一部分:选择题
1.DNA的全称是什么? A. Deoxyribonucleic Acid B. Ribonucleic Acid C. Deoxyribose Nucleic Acid D. Ribose Nucleic Acid
2.RNA主要功能是什么? A. 催化化学反应 B. 储存遗传信息 C. 蛋白质合成 D. 细胞结构支持
3.核糖核酸中的胸腺嘧啶通过碳碳键连接的项是? A. C1-C2 B. C1-C3 C. C1-C4 D. C1-C5
4.以下哪一个不属于DNA的碱基? A. 腺嘌呤 B. 胸腺嘧啶 C. 尿嘧啶 D. 酸
5.在真核细胞中,mRNA翻译发生在? A. 核糖体上 B. 核糖体外 C. 核糖体内 D. 核糖体上
第二部分:解答题
1.请简要描述DNA的结构特征及其功能。
2.请解释DNA复制是如何进行的。
3.RNA的种类有哪些,分别有什么功能?
4.请解释核糖体的结构和功能。
5.请简述转录的过程及其在细胞生物学中的重要性。
第三部分:应用题
1.在一次实验中,研究者将一段DNA序列加入到目标细胞中,预计这段DNA会被转录和翻译出什么样的蛋白质?请说明原因。
2.如果一种细菌的染色体含有6000条核苷酸,计算该细菌一般的DNA 分子量是多少?
3.请设计一个实验,验证核糖体在蛋白质合成中的功能,并描述实验步骤。
4.请说明mRNA与tRNA在蛋白质合成中的作用及差异。
5.对于DNA复制中可能出现的错误,谈谈你的看法并提出改善措施。
结语
本试题集涉及了分子生物学中的基本知识、概念以及实验设计,希望能够帮助读者更加深入地了解分子生物学的重要概念和方法,同时提升对生命科学的理解水平。
分子生物学作业
1、联系自己的实验或你自己的兴趣,对果树某一基因核苷酸序列进行检索。
登陆NCBI网站,选择Gene数据库,查询苹果的拉丁名:Malus x domestica,得到有72个基因。
选择第三个基因cox1,点击查看细则,这个基因能编码蛋白质,位于线粒体上,是细胞色素C有关基因,gi号为404481676。
序列FASTA格式如下:
>gi|404481676:c11788-10301 Malus x domestica mitochondrion, complete genome ATGGGCACA TGCTTCTCAGTACTGATTCGTA TGGAATTAGCACGACCCGGCGA TCAAA TTCTTGGTGGT AA TCA TCAACTTTA TAA TGTTTTAA TAACGGCTCACGCTTTTTTAATGA TCTTTTTTATGGTTA TGCCGGC GA TGATAGGCGGATCTGGTAA TTGGTCTGTTCCGA TTCTGA TAGGTGCACCTGACA TGGCA TTTCCACG ATTAAA TAA TA TTTCATTCTGGTTGTTGCCACCTAGTCTCTTGCTCCTA TTAAGCTCAGCCTTAGTAGAAG TGGGTAGCGGCACTGGGTGGACGGTCTATCCGCCCTTAAGTGGTATTACCAGCCATTCTGGAGGAGCT GTTGATTTAGCAA TTTCTAGTCTTCA TCTA TCTGGTGTTTCATCCA TTTTAGGTTCTA TCAA TTTTA TAACA ACTATCTCCAACA TGCGTGGACCTGGAATGACTA TGCATAGATCACCCCTA TTTGTGTGGTCCGTTCTAG TGACAGCATTCCTACTTTTA TTA TCACTTCCGGTACTGGCGGGGGCAA TTACCA TGTTA TTAACCGA TCG
分子生物学课后习题答案(3)
分子生物学课后习题答案(3)
《现代分子生物学》第五次作业
1、遗传密码有哪些特性?
答:a.遗传密码的连续性,密码间无间断也没有重叠,即起始密码子决定了所有后续密码子的位置。
b.遗传密码的简并性,即同一个氨基酸可能由一种以上密码子编码。
c.遗传密码的通用性和特殊性,无论是体内还是体外,也无论是对病毒、细菌、动物还是植物而言,遗传密码都是通用的;但是某些密码子在不同生物中有着相对特殊的作用。
d.遗传密码子与反密码子的相互作用,在蛋白质生物合成过程中,tRNA的反密码子在核糖体内是通过碱基的反向配对与mRNA上的密码子相互作用的。
2、有几种终止密码子?它们的序列和别名是什么?
答:3种,它们的序列是UAA、UGA和UAG,其中UAA叫赭石密码,UAG叫琥珀密码,UGA叫蛋白石密码。
3、简述摆动学说。
答:1996年,Crick根据立体化学原理提出摆动学说,解释了反向密码子中某些稀有成分的配对,以及许多氨基酸有两个以上密码子的问题。假说中提出:在密码子与反密码子的配对中,前两对严格遵守碱基配对原则,第三对碱基有一定的自由度,可以“摆动”,因而使某些tRNA可以识别一个以上的密码子。一个tRNA 究竟能识别多少个密码子是由反密码子的第一位碱基的性质决定的,反密码子的第一位A或C时智能识别1种密码子,为G或U时可以识别2种密码子,为I 时可识别3种密码子。如果有几个密码子同时编辑一个氨基酸,凡是第一、二位碱基不同的密码子都对应于各自独立的tRNA。
4、tRNA在组成及结构上有哪些特点?
答:(1)所有的tRNA都具有共同的特征:存在经过特殊的修饰碱基,tRNA的3’端都以CCA-OH结束,该位点是tRNA与相应氨基
分子生物学习题与答案
分子生物学习题与答案
1. DNA复制的过程中,以下哪些事件是正确的?
•[ ] A. DNA链的两端向外延伸
•[ ] B. DNA链的两端向内收缩
•[ ] C. DNA链的两端同时向外延伸
•[ ] D. DNA链的两端同时向内收缩
答案: A. DNA链的两端向外延伸
2. RNA与DNA的区别在于:
•[ ] A. RNA具有三个碱基
•[ ] B. RNA中的磷酸基不同
•[ ] C. RNA中的核糖糖基与DNA中的脱氧核糖糖基不同
•[ ] D. RNA中的碱基顺序不同
答案: C. RNA中的核糖糖基与DNA中的脱氧
核糖糖基不同
3. DNA转录的过程中,以下哪些事件是正确的?
•[ ] A. DNA链的两端同时向外延伸
•[ ] B. RNA链的两端向外延伸
•[ ] C. DNA链的两端向内收缩
•[ ] D. RNA链的两端向内收缩
答案: B. RNA链的两端向外延伸
4. DNA修复的过程中,以下哪些事件是正确的?
•[ ] A. DNA链的两端同时向外延伸
•[ ] B. DNA链的两端向外延伸
•[ ] C. DNA链的两端同时向内收缩
•[ ] D. DNA链的两端向内收缩
答案: B. DNA链的两端向外延伸
5. 下列哪种方法可以对DNA重组进行研究?
•[ ] A. 基因敲除
•[ ] B. PCR
•[ ] C. 克隆
•[ ] D. 基因组重测序
答案: C. 克隆
6. PCR技术的原理是:
•[ ] A. 核酸酶切割DNA
•[ ] B. DNA链延伸合成
•[ ] C. DNA链循环扩增
•[ ] D. RNA链转录
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分子生物学作业
一、名词解释
1.断裂基因
真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区相互间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因成为断裂基因。
2.单核苷酸多态性
单核苷酸多态性是由基因组DNA上的单个碱基的变异引起的DNA 序列多态性。是人群中个体差异最具代表性的DNA多态性,相当一部分还直接或间接与个体的表型差异、对疾病的易感性或抵抗能力、对药物的反应性等相关。单核苷酸多态性被认为是一种能稳定遗传的早期突变。
一、简答题
1.简述真核生物基因组的结构与功能特点。
①真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体,储存于细胞核
内,除配子细胞外,体细胞内基因组是双份的(即双倍体),有两份同源的基因组。
②真核生物的基因转录产物为单顺反子。即一个结构基因经过转
录生成一个mRNA分子,再翻译生成一条多肽链。
③真核生物基因组存在重复序列,重复次数可达百万次以上。
④真核生物基因组中不编码的区域多于编码的区域。
⑤真核生物的大部分基因都含有内含子,因此,基因是不连续的
(断裂基因)。
⑥真核生物基因组远远大于原核生物的基因组,具有多复制起始
点,而每个复制子的长度较小。
2.试述双向凝胶电泳技术的基本原理。
双向凝胶电泳技术是指第一向的固相pH梯度等电聚焦电泳与第二向SDS-PAGE组成的分离系统,也称双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,简称2-DE。等电聚焦电泳是基于蛋白质等电点(pI)的差异进行分离,SDS-PAGE则是根据蛋白质分子量(Mw)的不同进行分离。
其中等电聚焦指:在电场中电泳基质形成一个从正极到负极不断增大的PH梯度,由于蛋白质为两性电解质,带负电荷的蛋白质分子向正极移动,待正电荷的蛋白质分子向负极移动,当蛋白质分子运动到各自的PI处时,所带净电荷变为零,于是停止迁移而留在该位置上,这种不同的蛋白质分别聚焦在各自的PI处,形成一条狭窄稳定的区带而彼此分开的现象就称为等电点聚焦。
SDS-PAGE是在PAGE系统中加入SDS和还原剂后所组成的电泳系统。SDS是一种阴离子去垢剂,疏水端能插入蛋白质分子内,破坏蛋白质分子内的氢键及疏水作用,改变蛋白质分子的三级和四级结构;还原剂则断裂蛋白质分子内的二硫键,使蛋白质分子去折叠,结构变得舒展。蛋白质分子与SDS充分结合后,形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物,所带负电荷大大超过蛋白质分子原有的电荷量,消除了不同分子间原有电荷的差异。蛋白质-SDS复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳系统中的迁移率不再与电荷相关,而主
要取决于椭圆棒的长轴长度,及蛋白质的分子量大小。
1.分子克隆技术包括哪些基本步骤?
包括:①目的基因的获取;②载体的选择;③目的基因与载体连接;④重组DNA导入受体细胞;⑤重组体的筛选。
2.目的基因和载体连接主要有哪些方法?
①粘性末端DNA分子的连接
②平末端连接法
③通过同聚尾连接
3.简述分子克隆中常用的工具酶及其作用。
①限制性核酸内切酶:能根据需要在特定的位点上精确切割双链DNA 分子。
②DNA聚合酶:1. DNA聚合酶Ⅰ和Klenow片段 DNA聚合酶Ⅰ5'→3' DNA聚合酶活性3'→5'核酸外切酶活性 5'→3'核酸外切酶。Klenow 片段作用活性补齐双链DNA的3'末端,同时可使3'末端DNA标记上同位素。cDNA克隆中,合成cDNA第二链。DNA序列分析。2.Taq DNA 聚合酶Taq酶具有5'→3'聚合酶活性和依赖于聚合作用的5'→3'外切酶活性。3.逆转录酶反转录作用核酸酶H的水解作用依赖DNA的DNA聚合酶作用。4.末端脱氧核苷酰转移酶在载体或目的基因 3'末端加上互补的同质多聚尾,形成人工粘性末端,便于DNA重组连接。用于DNA 3'末端的同位素探针标记。
③DNA连接酶:能催化两个互补粘性末端双链DNA分子的5’磷酸基
团与3’羟基形成磷酸二酯键,将具有相同粘性末端或平末端的DNA 连接起来。
④碱性磷酸酶:能除去DNA片段上的5’磷酸以防自身连接;在使用T4多核苷酸激酶和32P同位素标记前,从RNA或DNA上出去5’端的磷酸。
⑤T4多核苷酸激酶:既能连接粘性末端,又能连接平末端。
⑥核酸酶S1:可除去粘性末端以产生平末端,除去cDNA合成时形成的发夹结构,分析RNA的茎环结构和DNA-RNA分子的杂交情况。
4.举例说明载体应具备的基本要素。
①能自我复制并具较高的拷贝数
②分子量一般<10Kb
③带有遗传筛选标记
④有适当的限制酶酶切位点,便于外源DNA的插入和筛选
如pBR322质粒克隆载体,它是由一系列大肠杆菌质粒DNA通过DNA 重组技术构建而成的双链克隆载体,长为 4.36Kb。它含有一个能保证高拷贝自我复制的复制起始点(Ori),并装有四环素抗性(Tetr)基因和氨苄青霉素抗性(Ampr)基因供菌落筛选。在这两个抗性基因中分别含有BamH I和Pst I等限制酶的单一酶切位点,用于插入外源DNA片段。如有外源基因的插入,会导致这些标志性基因的失活。
5.简述双抗生素筛选和蓝白斑筛选的原理。
双抗生素筛选:某些质粒载体如 pBR322质粒中有Ampr和Tetr 抗性基因,在这两个基因中装有几个常用的MCS,如将外源DNA片段插入
BamHⅠ识别序列时,则此质粒由Tetr变为对四环素敏感(Tets )。这种重组子导入宿主菌后,宿主菌在含四环素琼脂糖平皿上不能生长而在含氨苄青霉素的平皿上能够生长。在含四环素和氨苄青霉素的平皿上都能够生长的细菌只含有空载体,此筛选方法称为双抗生素筛选法
蓝白班筛选:某些质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ基因,该基因含一段编码-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸-肽的DNA片段, IPTG可诱导此片段合成,此片段能与宿主细胞所编码的缺陷型-半乳糖苷酶实现基因内-互补,形成完整的-半乳糖苷酶,催化指示剂底物X-gal 形成蓝色产物,结果重组克隆呈蓝色菌落。当外源基因插入lacZ基因中MCS,lac -肽基因阅读框架被破坏,细菌内将无-半乳糖苷酶活性,结果重组克隆呈白色菌落,这是常用的蓝白斑筛选法。
6.有哪些常用的探针标记物?
常用的探针标记物有:光敏生物素、生物素化补骨脂素、FITC和罗丹明、地高辛、[α32P]dNTP、[γ32P]dNTP、35S、3H、Bio-ll-dUTP、HRP和ALP。
7.如何进行探针的标记?
缺口平移法、随机引物法、末端标记法、聚合酶链式反应。
8.影响核酸分子杂交的因素有那些?如何进行杂交条件的优化?
影响因素:
1)核酸分子的浓度和长度:核酸浓度越大,复性速度越快。探针长