酸浆的组织培养与植株再生
酸浆
花花梗长6-16mm，开花时直立，后来向下弯曲，密生柔毛而果时也不脱落；花萼阔钟状，长约6mm，密生柔 毛，萼齿三角形，边缘有硬毛；花冠辐状，白色，直径15-20mm，裂片开展，阔而短，顶端骤然狭窄成三角形尖 头，外面有短柔毛，边缘有缘毛；雄蕊及花柱均较花冠为短。
果果梗长约2-3cm，多少被宿存柔毛；果萼卵状，长2.5-4cm，直径2-3.5cm，薄革质，脉显著，有10纵肋， 橙色或火红色，被宿存的柔毛，顶端闭合，基部凹陷；浆果球状，橙红色，直径10-15mm，柔软多汁。种子肾脏 形，淡黄色，长约2mm。花期5-9月，果期6-10月。
酸浆分布于甘肃、四川、河南、湖北、云南地区。常生长于空旷地、山坡、林下、路旁及田野草丛中。酸浆 喜温暖、潮湿气候，但能耐寒，在北方稍冷的地方也能生长，以肥沃、排水良好的砂质土或粘土栽培。酸浆是栽 培养殖和种子繁殖。
《医学入门·卷之二·本草分类·治疮门》中说到：天下有之，苗似水茄而小，叶亦可食，实作房如囊，囊 中有子如梅李大，赤黄色，味如酸浆。微寒，无毒。主热烦满，定志益气，利水道，难产吞其实立下。其根如范 芹，白色，绝苦，搞汁饮治黄病多效，嫩叶，小儿食之可除热。夏月采叶，阴干。酸浆别名为锦灯笼、灯笼草、 红菇娘、挂金灯、戈力、灯笼果。
酸浆常见的虫害有蚜虫、菜青虫、棉铃虫等。 虫害
主要价值
经济价值 食用价值
园林价值 药用价值
酸浆(7张)酸浆具有清热、解毒、利尿、降压、强心、抑菌等功能。主治热咳、咽痛、音哑、急性扁挑体炎、 小便不利和水肿等病。
酸浆成熟时挂满枝头，如同一串串灯笼，别具特色。
酸浆果实中含有人体需要的多种营养成分，其中钙的含量是西红柿的73.1倍、胡萝卜的13.8倍，维生素C的 含量是西红柿的6.4倍、胡萝卜的5.4倍。它独特的风味和丰富的营养，是加工饮料、果酒等饮品的好原料。
植物组织培养与再生机制
植物组织培养与再生机制植物组织培养技术是一种利用植物体细胞、组织和器官在体外培养和再生的技术，它可以用于研究植物细胞和组织的生长与分化过程、繁殖、遗传变异和抗性等问题。
植物组织培养技术的应用范围非常广泛，可以应用于农业、林业、园艺、医药、生物科学等领域。
植物组织培养技术的历史可以追溯到20世纪初，当时最早的一些实验主要是培养萝卜的根尖细胞和玉米的胚芽，但是，那时发现的几种组织，其生长和再生的能力都非常有限。
直到20世纪50年代初期，美国科学家默里·S·斯科特在对应用荧光素于防治棉铃虫时进行研究时，偶然发现了利用荧光素诱导的萼叶细胞再生植株的现象，这是植物组织培养史上的里程碑事件，因为这种发现说明若干种植物细胞和组织在体外的条件下也能够生长和再生。
从那时起，植物组织培养技术得以迅速发展。
植物组织培养主要包括以下几个方面：1.细胞培养：将植物体中的细胞进行分离，分别培养并繁殖，例如春雪草的细胞培养就比较常见。
2.组织培养：将不同的植物器官，如根、茎、叶和花等进行分离培养。
3.花粉培养：收集花药中的花粉，进行营养体的多倍化和交配试验。
4.干胚培养：将早期胚珠或精子进行培养，进行遗传变异研究。
植物组织培养的方法主要有以下几种：1.原代分化培养：将植物材料分离培养，在培养基中添加各种培养物质，使细胞沿着分化程度依次分化；它是利用植物残体细胞的分化能力进行组织或器官再生的方法。
2.再分化培养：在原代培养的基础上，移植分化细胞于新的培养基上进行次级培养，从而使得轻重体组织细胞获得再分化能力；通常情况下，需要添加一定的生长素和细胞分裂素，以刺激再分化的发生。
3.愈伤组织培养：通过人工创建负伤口，促进植物接口四周组织的分生组织细胞增生和分化，形成愈伤组织，从而实现组织再生的目的。
植物组织培养研究所涉及的主要领域包括组织培养基的组成、形态发生和发育生理，以及水培、无土栽培和稳定性的研究等。
从植物组织培养的再生机制来看，愈伤组织的形成和再生过程是其重要的基础。
植物组织培养应用的原理
植物组织培养应用的原理什么是植物组织培养植物组织培养是指在无菌条件下，通过培养植物组织和细胞，使其在合适的培养基上快速繁殖和生长，从而实现植物繁殖、育种和遗传改良等目的的一种生物技术。
植物组织培养的原理植物组织培养基于植物的细胞分化和再生能力，通过以下原理来实现：1.细胞分化和再生：植物组织培养利用植物细胞的分化和再生能力。
在培养基中，通过提供合适的激素和营养物质，可以促使植物组织分化出不同的细胞类型，如根、茎、叶等。
同时，在培养基上，通过调节激素的浓度和比例，可以控制细胞再生的过程。
2.愈伤组织的利用：植物组织培养常常利用愈伤组织来进行培养。
愈伤组织是一种具有再生能力的组织，通常是由受伤或刺激后产生的。
在组织培养中，将愈伤组织分离培养在合适的培养基上，可以快速生长和再生。
3.细胞的无菌培养：植物组织培养需要在无菌条件下进行，以防止外部微生物的污染。
在培养过程中，需要使用无菌器具和培养基，并对操作环境进行严格的无菌控制。
植物组织培养的应用1. 植物繁殖植物组织培养可以实现植物的无性繁殖，即通过组织培养快速繁殖大量植株。
这对于育种和遗传改良非常重要，能够提高繁殖效率和培育优良品种的速度。
此外，植物组织培养还可以用于繁殖濒危植物或困难繁殖植物，以保护物种的多样性和遗传资源。
2. 分子生物学研究植物组织培养在分子生物学研究中发挥着重要的作用。
通过组织培养，可以提供大量的植物材料进行基因表达、基因工程和蛋白质研究。
此外，植物组织培养还可以用于生物合成和次生代谢产物的生产，如药物、激素和香料等。
3. 植物病毒检测与病毒释放植物组织培养可用于检测植物病毒感染，并进行病原体的移除和病毒的释放。
通过组织培养，可以从受感染的植物组织中分离出病毒，并进行鉴定和研究。
同时，利用组织培养中的无菌条件和组织再生能力，可以移除病毒，并将无病毒的组织重新培养出健康的植物。
4. 植物细胞工程植物组织培养可以用于植物细胞工程的研究和应用。
植物的组织培养方法
植物的组织培养方法植物组织培养是一种无性繁殖技术，通过培养植物的各种器官组织，包括种子、茎、叶和根的细胞和组织，使其在适当的条件下进行生长和分化，从而产生新的植株。
这项技术已被广泛应用于农业、园艺、林业和植物学研究中。
以下是植物组织培养的一般步骤和方法：1. 材料准备：首先，选择适合的植物作为材料，常用的包括水果、蔬菜和花卉植物。
收集新鲜的种子、茎、叶或根，并进行消毒处理，以防止细菌、真菌和其他病原体的污染。
2. 植物组织的分离：将植物材料切成小块或将细胞分离开来。
对于植物的种子，可以直接将种子表面进行消毒处理后，在培养基上进行培养；对于茎、叶和根等组织，则需要进行切割处理。
3. 培养基的准备：制备适当的培养基是进行植物组织培养的重要步骤。
培养基通常由无机盐和有机添加剂组成，以提供植物生长所需的营养物质。
根据组织的不同类型，可以使用不同种类和浓度的培养基。
4. 培养基的调整：将分离的组织放入培养基上，可以将培养基涂覆在组织表面上，或者将组织植入培养基中。
然后，在无细菌的条件下，将组织培养在适当的温度、湿度和光照条件下。
5. 激素的添加：植物生长激素是控制植物生长和分化的关键因素。
在组织培养中，可以根据实验的需要添加适量的激素来促进细胞分裂和分化。
常用的激素有生长素、细胞分裂素和愈伤组织生成素等。
6. 愈伤组织的诱导：愈伤组织是植物组织培养中产生的一种可分化细胞。
通过搅拌、震荡或辐射等途径，诱导组织分化成愈伤组织，然后将其继续培养。
7. 植株的再生：通过培养基中激素的平衡调节，可以使愈伤组织再生为整个植株。
在培养基中，植株的幼苗养分丰富，需要的培养基成分和激素浓度可能与之前的不同。
8. 培养环境的控制：为了使植物组织正常生长和分化，需要控制培养环境的参数。
例如，可以调节培养基的pH值、光照强度、温度和湿度等因素。
9. 组织转化：经过培养，植物组织中可以引入外源基因，使其具有某种特定的性状，这被称为转基因。
细胞名词解释
细胞名词解释1.愈伤组织：原意是指植物体的局部受创伤刺激后，在其伤⼝表⾯新⽣的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中是指在⼈⼯培养基上由已经分化的外植体的细胞重新分裂⽣长⽽形成的⼀团⽆特定形状、⽆序⽣长的薄壁细胞。
在⼀定条件下离体状态的植物组织中已经分化并停⽌⽣长的细胞重新分裂⽣长所形成的⽆组织结构的细胞团。
2.外植体：指植物组织培养中作为培养材料的离体组织块离体器官或离体细胞。
3.胚状体：由外植体或愈伤组织产⽣的与正常受精卵发育成的胚相类似的胚胎状结构。
据来源分为体细胞胚与⽣殖细胞胚。
4.极性：⾼等植物均具⼀主轴，各器官沿此主轴有顺序的进⾏⽣长分化。
主轴的⾸尾两端在⽣理形态上都有着明显差异，通常⾸段⽣芽尾端长根（形态学上端下端）这种现象叫极性。
5.植株再⽣：指通过组织培养技术将植物的细胞、组织、器官等培养成完整植株的过程。
6.形态发⽣（形态建成）：指⽣物个体发育或再⽣过程中⽣物体及其器官的形态结构的形成过程。
7.试管苗：指在⽆菌离体条件下的⼈⼯培养基上对植物细胞、组织或器官进⾏培养所获得的再⽣植株。
8.玻璃苗：指外表呈玻璃状，幼茎、叶⽚呈现半透明⽔渍状态的畸形试管植物。
9.体细胞⽆性系：指由同⼀个外植体反复进⾏继代培养后得到的⼀系列后代。
在细胞培养中，由单细胞形成的后代叫但细胞⽆性系。
10.培养基：⽤于满⾜植物正常发育所需各种营养物质的总和。
11.初代培养：指从植物体上分离外植体进⾏的第⼀次培养。
12.继代培养：将初代培养的培养物（愈伤组织、芽等）重新切割转移到新的培养基上继续扩⼤培养的过程。
13.固体培养：指加⼊琼脂等固化剂使培养基呈固体状态所进⾏的培养。
14.液体培养：指不加Agar等固化剂使培养基呈液体状态所进⾏的培养。
U11、细胞⼯程：按照⼀定的设计⽅案，通过在细胞、亚细胞或组织⽔平上进⾏实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性⽣物⼯程。
2、摇床：常⽤来进⾏细胞悬浮培养，可根据震荡⽅式分为⽔平往复式和回旋式两种，震荡速度因培养材料和培养⽬的的不同⽽不同，常⽤的震荡速度为100r/min.3、培养瓶：⼀般的植物组织和细胞培养常⽤玻璃三⾓瓶、试管、各种⼤⼩的⼴⼝玻璃瓶时，有时甚⾄⽜奶瓶和罐头瓶也都可以利⽤，特别是在进⾏快速繁殖时更常⽤造价较低的培养器⽫。
组织培养再生的步骤
组织培养再生的步骤一、接种组织培养的接种是指将灭过菌的材料，在无菌的情况下，切成小块，放入培养基的过程。
科研、生产部门的接种工作，多在无菌室或超净工作台上进行，中学可制作接种箱，在箱内进行接种。
接种的方法步骤如下：1、在无菌室或接种箱中放好接种时所需要的酒精灯、贮存70%酒精和棉球的广口瓶、各种镊子、接种针、解剖刀、手术剪、火柴、培养基等。
2、在无菌室或接种箱内用紫外灯灭菌（无菌室照射20～50分钟，接种箱照射15分钟）。
3、放入已灭菌的接种材料（用培养皿盛取）。
同时，操作人员用酒精棉球擦手，并对接种工具用酒精灯火焰烧灼。
4、用手术刀片将材料切割成若干片段，并迅速接种入培养基中。
接种时，锥形瓶（或试管）应斜向火焰，在酒精灯火焰附近操作。
5、材料接种好后，将锥形瓶瓶口在酒精灯火焰上转动烧一遍，盖好瓶盖，注明材料名称及接种日期。
材料接种后，应置于26～28℃的培养室中进行培养。
二、植株诱导本阶段是组织培养中最重要的一环。
在培养基中植物激素的作用下，外植体通过三条途径迅速增殖，这就是侧芽增殖、诱导不定芽的形成和诱导胚状体的形成。
1、侧芽增殖种子植物的每个叶腋中通常都存在着腋芽，在一定条件下可以使它生长。
现在知道顶端优势抑制侧芽生长，可被外源的细胞分裂素打破，所以在利用侧芽增殖这条途径时，培养基中几乎都要加入细胞分裂素（有时也加入少量生长素）。
由于细胞分裂素的持续作用，侧芽不断分化和生长，逐渐形成芽丛。
如果反复切割和转移到新的培养基上继代培养，就可在短期内得到大量的芽。
侧芽增殖的主要优点是能保持遗传的稳定性，因为茎尖的细胞常是均一的二倍体细胞，它不易受培养条件的影响而发生变异，也易于保持嵌合体的性状。
目前已有近百种植物可以用这种方法进行繁殖，如草毒、苹果、葡萄、唐菖蒲、非洲菊、月季、甜菜和凤梨等。
关于培养基中加入细胞分裂素的浓度，是0.1～10.0毫克/升，一般为1.0～2.0毫克/升。
在几种细胞分裂素中用的最多的是6-苄基嘌呤，其次是激动素和异戎基腺苷，玉米素用的很少。
酸浆的养殖方法和注意事项
酸浆一般在秋季成熟，采收时间应选择在早晨或傍晚，避免中午高温时段。
采收方法
采收时，用剪刀将酸浆剪下，留下约2cm的梗，以保持其完整性。
加工流程与注意事项
清洗
切片
晒干
储存
注意事项
将采收的酸浆进行切成约1cm厚的 薄片。
将切好的酸浆放在阳光 下晒干，或者用烘干机 进行烘干。注意要经常 翻动，以免出现潮湿和 发霉。
种子处理
将种子浸泡在温水中，促进种子 发芽，提高发芽率。
土壤准备与播种
土壤准备
选择肥沃、排水良好的土壤，进行深 耕细作，提高土壤质量。
播种
在适宜的播种时间内，将种子均匀撒 在土壤表面，覆盖一层薄土，轻轻压 实。
苗期管理
01
02
03
浇水
保持土壤湿润，促进幼苗 生长。
施肥
根据幼苗生长情况，适时 施肥，提供充足的养分。
除草
及时清除杂草，防止杂草 与幼苗争抢养分。
移栽与定植
移栽
当幼苗长到适宜大小时，进行移栽，提高植株生长空间。
定植
选择适宜的定植时间和地点，进行定植，确保植株生长良好 。
02
酸浆的养殖环境与设施
温度与光照需求
温度
酸浆适宜生长的温度范围为15-25℃，在炎热夏季需要注意遮阴降温，寒冷冬 季则需采取保温措施。
水分
保持土壤湿润是酸浆生长的关键，生 长期间应定期浇水，避免过度干旱或 积水。
病虫害防治
病害
酸浆常见的病害有白粉病、叶斑病等，可通过加强通风、降低湿度、定期喷洒杀菌剂等措施进行防治 。
虫害
酸浆常见的虫害有蚜虫、红蜘蛛等，可采用生物防治、物理防治或化学药剂等方法进行防治。
中药材酸浆解读
中药材酸浆解读别名：锦灯笼、寒浆、醋浆、苦蒧采收加工：夏、秋季采收，鲜用或晒干。
药用部位：全草产地：陕西、甘肃、河南、湖北、湖南、四川、贵州和云南等科：茄科原植物：酸浆植物情况：多年生草本基部常匍匐生根。
茎高约40-80cm，基部略带木质。
叶互生，常2枚生于一节；叶柄长约1-3cm；叶片长卵形至阔形，长5-15cm，宽2-8cm，先端渐尖，基部不对移狭楔形，下延至叶柄，全缘而波状或有粗芽齿，两面具柔毛，沿叶脉亦有短硬毛。
花单生于叶腋，花梗长6-16mm，开花时直立，后来向下弯曲，密生柔毛而果时也不脱落；花萼阔钟状，密生柔毛，5裂，萼齿三角形，花后萼筒膨大，弯为橙红或深红色，呈灯笼状包被将果；花冠辐状，白色，5裂，裂片开展，阔而短，先端骤然狭包被浆果；花冠辐状，白色，5裂，裂片开展，阔而短，先端骤然狭窄成三角形尖头，外有短柔毛；雄蕊5，花药淡黄绿色；子房上位，卵球形，2室。
浆果球状，橙红色，直径10-15mm，柔软多汁。
种子肾形，淡黄色。
花期5-9月，果期6-10月。
酸浆药材性状：茎圆柱形，木质化较硬。
叶互生，完整的叶片阔卵形，长5-15cm，宽2-8cm，先端尖，基部不对称，波状缘有粗齿。
宿萼卵形，直径1.5-2.5cm，先端尖，基部不对称，波状缘有粗齿。
宿萼卵形球形，直径1.5-2.5cm，黄绿色，薄纸质。
浆果球形，皱缩，直径1-1.2cm，。
气微，味苦。
酸浆药性:【本经原文】味酸，平，无毒。
治热，烦满，定志，益气，利水道。
产难，吞其实立产。
生川泽及人家田园中，一名醋浆。
又名洛神珠。
灯笼草。
【产地】田园之中。
【性味】其根及苗味苦，性寒。
酸浆果味酸，性平。
【主治】其苗，叶，根，茎皆为解热，排水药，治百日咳，黄疸，小便赤涩，果能催生。
【别录】酸浆果主治烦热，定志益气，利水道，难产吞之，立产。
【弘景】酸浆捣汁服，治黄病多效。
【唐本】灯笼草治上气咳嗽，风热，明目，根茎花实并用。
【苏颂】酸浆果食之除热，治黄疸，尤宜小儿。
植物再生技术-概述说明以及解释
植物再生技术-概述说明以及解释1.引言1.1 概述植物再生技术是一种利用植物细胞或组织培养技术，通过一系列的细胞分化、增殖和再生过程，实现全新植株的培育。
这项技术在植物学、农学、园艺学等领域有着广泛的应用和重要意义。
通过植物再生技术，可以实现对植物基因的编辑、繁殖优良品种、推广新品种以及保护濒危物种等目标。
在本文中，我们将探讨植物再生技术的历史发展、应用领域和方法步骤等内容，旨在深入了解这一领域的最新进展和未来发展方向。
1.2文章结构1.2 文章结构：本文将首先介绍植物再生技术的定义和历史发展，让读者了解这一技术的起源和演变过程。
接着分析植物再生技术在不同领域的应用和意义，探讨其对农业、医药等行业的重要性。
然后详细描述植物再生技术的方法和关键步骤，解释其实现植物再生的原理和技术手段。
最后，对植物再生技术的前景和挑战进行评估，并提出未来发展方向和建议，总结全文内容。
通过这样的文章结构，读者将能够全面了解植物再生技术的现状和发展趋势。
1.3 目的本文旨在深入探讨植物再生技术在现代农业和生物学领域的重要性和应用价值。
通过对植物再生技术的定义、历史发展、方法和关键步骤的介绍，以及其在农业生产、环境保护、生物工程等领域的应用和意义的阐述，旨在帮助读者更全面地了解和认识这一领域的前沿科技。
同时，通过对植物再生技术的前景和挑战的分析，探讨其未来的发展方向和可能的发展趋势，为相关研究和应用提供参考和建议。
通过本文的阐述和分析，希望能够引起更多人对植物再生技术的关注和重视，促进其在农业和生物领域的广泛应用和推广，为推动农业生产和生物科学的发展做出贡献。
2.正文2.1 植物再生技术的定义和历史发展植物再生技术是一种利用植物体内的特殊细胞或组织进行再生和重组的技术。
通过诱导植物体内的生殖细胞或幼胚等特殊细胞再生，可以实现植物的无性繁殖和遗传改良，从而提高作物的产量和品质。
植物再生技术起源于20世纪70年代，最早应用于植物育种领域。
植物组织培养学通过培养技术实现植株繁殖和基因转移
植物组织培养学通过培养技术实现植株繁殖和基因转移植物组织培养学是一门应用生物学领域的学科，通过培养技术实现植物的繁殖和基因转移。
它不仅可以加速植物繁殖的速度，还可以培育出更具抗病性和适应性的新品种，对农业生产和植物研究具有重要意义。
一、植物组织培养技术的基本原理植物组织培养技术是在无菌条件下，利用植物的无性繁殖特性，通过外植体培养、愈伤组织诱导、植株再生等步骤，将植物细胞、组织或器官在无菌培养基上快速增殖，最终得到新的植株。
二、植物组织培养技术的应用1. 植物繁殖植物组织培养技术可以通过离体培养的方式，将植物的种子、茎尖、芽等部分转移到培养基上进行培养，实现植株的无性繁殖。
这种方法可以大大提高植物繁殖的速度，节省种子和种苗资源。
2. 基因转移植物组织培养技术还可以用于基因转移，通过导入外源基因，使植物获得新的性状或者改善已有性状。
基因转移技术为农业生产带来了巨大的变革，例如转基因作物的出现，使得作物获得了更好的抗虫性、耐旱性等性状，提高了农作物的产量和质量。
三、植物组织培养技术的步骤1. 外植体培养外植体培养是植物组织培养的第一步，通过将幼嫩的茎尖、芽或种子表皮等部分切割出来，置于无菌培养基上，并提供适当的养分和激素，促使外植体的生长和分化。
2. 愈伤组织诱导愈伤组织是植物受到机械性创伤或化学物质刺激后产生的未分化的细胞块，具有再生植株的能力。
通过给培养基添加不同的激素，可以诱导出愈伤组织。
3. 植株再生通过培养基中添加特定的激素和养分，植物的愈伤组织可以分化为根、茎、叶等不同组织，最终形成新的植株。
这一步骤需要精确控制培养条件，包括温度、光照、培养基成分等。
四、植物组织培养技术的优势与挑战植物组织培养技术具有许多优势，如能够快速繁殖植株、培育新品种、实现基因转移等。
然而，植物组织培养技术仍然面临一些挑战，如培养过程中的变异性、染色体不稳定性、费用高昂等问题，这些问题仍需进一步解决。
结论植物组织培养技术通过培养技术实现植株繁殖和基因转移，对农业生产和植物研究具有重要意义。
植物器官和组织培养的基本程序
植物器官和组织培养的基本程序离体的植物器官和组织在人工培养条件下，通过不同的器官发生途径，形成体细胞胚或茎芽，进一步再生成完整植株。
因此，植物器官和组织培养的基本程序包括：无菌外植体的获得、初代培养物的建立、形态发生、植株再生以及培养产物的观察记载。
一、无菌外植体的获得从自然界和室内采集的植物器官和组织材料携带有各种微生物，这些污染源一旦进入培养容器中，造成培养基和培养材料污染，实验无法进行。
所以，污染是组织培养的一大障碍。
利用各种灭菌剂可以进行外植体的灭菌，但不同植物或同一植物不同器官和组织的带菌程度不同，所用灭菌剂的种类、浓度及灭菌方法也不尽相同。
(一)茎尖、茎段、叶片的灭菌灭菌前外植体用清水冲洗，茸毛较多的外植体用皂液洗涤后再用清水冲洗、用吸水纸吸干表面水分；将外植体浸泡在0.1%～0.2%的氯化汞溶液中2～10min，或先在70%～75%酒精中浸数秒，然后在10%次氯酸钙溶液中浸泡10～20min。
或先在70%～75%酒精中浸泡数秒，再在2%次氯酸钠溶液中浸泡15～30min进行灭菌；灭菌后倒掉灭菌液，无菌水冲洗外植体3～5次，置外植体于无菌滤纸上吸干表面水分，适当分割后接种。
(二)根、块茎、鳞茎的灭菌这类材料生长在土中，灭菌较困难，且挖取时易受损伤。
所以灭菌前应仔细清洗，对凹凸不平及鳞片缝隙处，需用软刷清洗，并切除损伤部位。
灭菌时应增加灭菌时间或增大灭菌剂浓度，如将外植体浸泡在0.1%～0.2%氯化汞溶液中5～12min，或在70%～75%酒精中浸数秒，然后用6%～10%次氯酸钠溶液浸5～20min进行灭菌。
灭菌后的操作步骤同上。
(三)花蕾的灭菌未开放花蕾中的花药为花被包裹，处于无菌状态，所以采摘后可直接灭菌。
灭菌时先在70%～75%酒精中浸蘸10～30s，然后在0.1%氯化汞溶液中浸泡3～10min或在1%次氯酸钠溶液中浸泡10～20min。
灭菌后的处理同上。
(四)果实、种子的灭菌这类材料有的表皮具有茸毛或蜡质。
植物组织培养的用途
植物组织培养的用途
植物组织培养是一种基于细胞和组织的体外培养技术，广泛应用于植物科学、农业、园艺和生物技术等领域。
以下是植物组织培养的一些主要用途：
1. 植物繁殖与繁育：通过组织培养技术可以实现植物的无性繁殖，包括愈伤组织的诱导、植株再生和植株繁殖。
这种方法可以大幅提高繁殖速度和繁殖量，以获得大量具有相同基因型的植株。
2. 基因转化与遗传改良：植物组织培养可用于导入外源基因到植物细胞或组织中，实现基因转化。
这为植物遗传改良提供了重要的手段，包括抗病虫害、耐逆性和提高产量等方面的改良。
3. 药物和化学物质生产：通过组织培养技术，可以大规模培养植物细胞或组织，以生产药物、天然产物和化学物质。
这种方法具有高效、可控和可重复的优点，为药物和化学工业提供了可持续的生产途径。
4. 培育优良品种和育种研究：植物组织培养可以用于筛选和培育优良的植物品种，包括抗病虫害、适应性强和高产性等特点的育种。
这为农业生产和园艺业的发展提供了重要的技术支持。
5. 保存和恢复濒危植物：植物组织培养技术可以用于保存和恢复濒危植物种质资源。
通过体外培养，可以保存和繁殖濒危植物，以防止物种灭绝和遗传多样性的丧失。
6. 研究植物生理和生物学：植物组织培养为研究植物生理和生物学提供了实验材料和平台。
通过控制培养条件和处理方式，可以研究植物生长、发育、代谢和响应环境的机制。
总的来说，植物组织培养在植物科学、农业和生物技术等领域具有广泛的用途。
它为植物繁殖、遗传改良、药物生
产、品种培育、濒危物种保护和科学研究提供了强大的工具和平台。
植物组织培养中的愈伤组织与再生植株
植物组织培养中的愈伤组织与再生植株植物组织培养是一种重要的生物技术手段，通过这种方法可以实现对植物组织和细胞的离体培养，进而实现愈伤组织的形成和再生植株的繁殖。
本文将探讨植物组织培养中的愈伤组织与再生植株的形成机理及应用价值。
一、愈伤组织的形成机理愈伤组织是指在植物组织培养中由受伤组织或原始组织经过愈伤反应形成的可再生新生组织。
愈伤组织的形成机理主要包括以下几个方面。
1. 组织分化和再分化：在组织培养的过程中，受创组织或原始组织中的未分化细胞会经历分化和再分化的过程，从而形成愈伤组织。
2. 激素调控：激素在愈伤组织形成中起着至关重要的作用。
生长激素如细胞分裂素和生长素可以促进愈伤组织的增殖，而植物激素如乙烯和脱落酸则能够促使细胞分化。
3. 渗透调节：适当的渗透调节对愈伤组织的形成也有一定的影响。
渗透调节可以改变细胞的渗透压，调节细胞内外的水分平衡，进而刺激愈伤组织的形成。
二、再生植株的培养与应用在植物组织培养中，愈伤组织的培养和再生植株的繁殖是一个密不可分的过程。
通过适当的培养条件和激素调控，可以促进愈伤组织的增殖和分化，最终实现再生植株的形成。
再生植株的培养与应用有以下几个方面的意义和价值。
1. 育种：通过植物组织培养中的再生技术，可以实现对植物的快速繁殖和筛选，从而提高植物的育种效率。
它在育种领域具有广泛的应用前景，可以用于无性繁殖的经济作物的高效育种。
2. 遗传改良：植物组织培养技术可以通过对植物基因的改造和修饰，实现对植物遗传性状的调控和改良。
这对于传统育种方法无法改变的一些特征具有重要意义。
3. 保存濒危植物：通过植物组织培养的再生技术，可以对濒危植物进行有效的保存和再生繁殖，从而保护和恢复濒危植物种群的数量和多样性。
4. 生物制剂生产：植物组织培养中的再生技术还可以应用于生物制剂的生产，如植物激素、抗生素和药物等的合成，对于药物和化妆品等产业具有重要的经济意义。
总结：植物组织培养中的愈伤组织与再生植株是一项重要的生物技术手段。
酸浆无公害栽培技术
酸浆无公害栽培技术酸浆，又名红姑娘、挂金灯、金灯、锦灯笼、泡泡草等，属于茄科、酸浆属一年生草本植物。
主要分布于我国内蒙古、吉林、黑龙江等省区，栽培面积很小。
酸浆大多用于生食，皮薄、果肉柔软、多籽多汁、酸甜适口；除生食外，还可以加工成罐头、果汁、果茶等，用途广泛；生产周期短，见效快，是农民脱贫致富的好途径。
随着人们生活水平的提高和休闲食品结构的改善，以及对水果消费需求的日益增长，有草本水果之称的酸浆将越来越受到城乡居民的青睐。
一、特征特性1.形态特征株高50~70厘米，茎生柔毛，主茎上着生分枝7~9个。
叶阔卵形，长3~8厘米，宽2~6厘米，顶端极尖，基部歪斜心形，边缘有不等大的锯齿，两面有疏生毛，但叶脉上毛较密；叶柄长3~8厘米，密生短柔毛。
花单独腋生，花梗长5~10厘米；花萼钟状，5中裂，裂片披针形，联合为合萼且永不脱落；花冠淡黄色，直径6~10毫米；花药淡紫色，长1~2毫米。
果萼卵状，长2~3厘米，直径2~2.5厘米，具5棱角和10纵肋；果实为浆果，金黄色，直径1.2~1.5厘米，平均单果重3.5克左右。
种子近圆盘状，直径约2毫米。
2.生长习性既耐高温，也耐低温，对土壤条件适应性强，酸性土或盐碱地均可，从炎热的广东到寒冷的黑龙江均能栽培，丘陵、山坡、平川和排水较好的低洼地块也能种植。
在适宜栽培区，出苗至成熟需100~125天。
3.营养价值品质分析结果表明，浆果营养价值高，除含有蛋白质、脂肪、糖类、膳食纤维等营养物质外，还含有多种维生素、天然beta;-胡萝卜素、蔗糖、硒等营养物质。
每100克浆果中含维生素A6.7毫克，维生素B212.57毫克，维生素B62.7毫克，维生素C94.03毫克，天然beta;-胡萝卜素77.73毫克，钙108.34毫克，磷672.23毫克，硒1.13毫克，天门冬氨酸1.65%，谷氨酸3.16%，亮氨酸1.38%，蛋白质21.24%，脂肪33.73%，果糖0.77%，蔗糖17.48%，膳食纤维70.92%，葡萄糖含量较葡萄高出十多倍，达14.27%。
植物组织培养名词解释
植物组织培养名词解释植物组织培养是指将植物体的一部分或细胞外植体（包括种子、芽、刺、茎尖、叶尖等）在无菌条件下培养和繁殖，以便快速、大规模地繁殖植物。
植物组织培养是一项重要的生物技术，可应用于种苗繁殖、植物改良、品种保存和组织工程等领域。
植物组织培养涉及许多名词，下面对其中一些常见的名词进行解释。
1. 细胞分裂：细胞分裂是指细胞分裂成两个或多个细胞的过程。
细胞分裂是植物组织培养中细胞增殖的基础。
2. 培养基：培养基是提供植物组织或细胞生长所需的营养物质和植物激素的培养介质。
培养基可以根据不同的植物种类和培养目的进行调配。
3. 愈伤组织：愈伤组织是植物在外界刺激下形成的生长异常组织，具有无定向分裂和再生能力。
愈伤组织培养能够实现无性繁殖，即从愈伤组织中培养出整个植株。
4. 植株再生：植株再生是指在培养基上通过愈伤组织培养得到新的植株。
植株再生可以通过不同的途径实现，如愈伤组织诱导再生、原球茎诱导再生等。
5. 轮回：轮回是指将植物体分离为单细胞再进行培养和繁殖的过程。
轮回可以大大提高植物的繁殖速度和效率。
6. 培养器：培养器是植物组织培养过程中用于装载培养基和植物细胞的容器。
常见的培养器有试管、培养瓶和培养皿等。
7. 无菌技术：无菌技术是一种用于消灭或控制培养中的微生物污染的方法。
无菌技术在植物组织培养中非常重要，可以确保培养体系的纯净性和成功的培养结果。
8. 再生植株硬化：再生植株硬化是指通过逐渐减少对植物的外界保护和提供适宜的环境条件，使得再生植株逐渐适应自然条件。
再生植株硬化是植物组织培养最后一个重要环节，可以确保再生植株的生长和生产力。
总之，植物组织培养是利用植物细胞的再生分裂能力进行无性繁殖和植物改良的生物技术。
在植物组织培养过程中，一系列名词的应用和理解对于成功进行培养和繁殖非常重要。
酸浆种植方法
酸浆种植方法酸浆是北方有名的药材之一，那么你们知道酸浆是如何种植的吗？下面是店铺精心为你整理的酸浆种植方法，一起来看看。
酸浆种植方法酸浆在华北地区一年分三茬栽培：春早熟栽培：1～2月在日光温室或风障阳畦内育苗，4月中旬晚霜过后定植于露地。
5月下旬至6月开始采收。
春露地栽培：3～4月育苗，3月需在塑料大、中、小棚内育苗，4月可在露地育苗。
5月定植，6月下旬至7月开始采收。
秋季露地栽培：6月下旬至7月育苗。
8月上旬定植在露地，9月下旬至10月开始采收。
市近年来，由于酸浆的经济效益不很高，鲜有用保护设施进行栽培者。
春早熟栽培技术春早熟栽培酸浆的上市期正值初夏，由于生产成本不高，经济效益显著。
1、育苗一般在风障阳畦或日光温室中建育苗畦。
育苗初期外界温度较低，为提高地温，建畦播种前15～20天应扣严塑料薄膜，夜间加盖草苫子。
苗床每公顷施腐熟的有机肥30000千克，浅翻、耙平，做成平畦。
播前浇水，水渗下后播种。
种子可用45℃的温水浸种，或用0.01%的高锰酸钾液浸泡10分钟，防止种子携带病毒等病菌。
然后用清水浸种12小时，捞出，放在20～30℃的温度条件下催芽。
待80%的种子露白后播种。
撒种后覆土0.5～1厘米。
立即扣严塑料薄膜，夜间加盖草苫子，提高苗床温度。
白天保持20～25℃，夜间10～15℃。
在最严寒季节，苗床温度不应低于5℃。
出苗后进行间苗，间除过密、并生、伤残弱苗。
在2～3叶期，进行分苗，分苗株行距为10厘米×10厘米。
苗期保持土壤见干见湿。
小苗期外界温度低，蒸发量小，可不用浇水。
分苗期外界温度渐高，可7～10天一水。
如苗床缺肥，可追复合肥一次，每公顷施100～150千克。
2、定植定植地每公顷施腐熟的有机肥45000～75000千克，深翻、耙平，做成平畦。
定植应在晚霜过后进行。
在秧苗6～7叶期第一朵花初开时为定植适期。
定植时应仔细起苗，少伤根系，以利缓苗。
定植密度每公顷75000株左右，株行距为25～28厘米×65～70厘米。
酸浆如何种植
酸浆如何种植种植酸浆有着很多的好处，酸浆如何栽培呢？下面一起来看看店铺为大家精心推荐的酸浆的种植技术，希望能够对您有所帮助。
酸浆的种植技术酸浆(Physalis alkekengi)，别名红姑娘、挂金灯、金灯、锦灯笼、泡泡草等，北方称为菇蔫儿、姑娘儿、鬼灯球(一般指黄色的红姑娘，黄姑娘被称为小菇蔫儿)，其果实可食用。
原产于中国，南北均有野生资源分布。
酸浆在中国栽培历史较久，在公元前300年，《尔雅》中即有酸浆的记载。
现在在东北地区种植较广泛。
其他地区种植较少，仍属稀特蔬菜。
酸浆为茄科酸浆属多年生直立草本植物，株高50～80cm，地上茎常不分枝，有纵棱，茎节膨大，幼茎被有较密的柔毛。
根状茎白色，横卧地下，多分枝，节部有不定根。
酸浆多年生草本，高35～100厘米。
具横走的根状茎。
茎直立，多单生，不分枝，略扭曲，表面具棱角，光滑无毛。
叶互生，通常2叶生于一节上;叶柄长8～30毫米;叶片卵形至广卵形，长4～10.5厘米，宽2～6.5厘米，先端急尖或渐尖，基部楔形或广楔形，边缘具稀疏不规则的缺刻，或呈波状，上面光滑无毛，下面几无毛。
花单生于叶腋，花梗长1～1.5厘米;花白色，直径1.5～2厘米;花萼绿色，钟形，长约1厘米，先端5裂，边缘及外侧被短毛;花冠钟形，5裂，裂片广卵形，先端急尖。
边缘具腺毛;雄蕊5，着生在花冠的基部，花药长圆形，基部着生，花丝丝状;子房上位，卵形，2室，花柱线形，柱头细小，不明显。
浆果圆球形，直径约1.2厘米;光滑无毛，成熟时呈橙红色：宿存花萼在结果时增大，厚膜质膨胀如灯笼，长可达4.5厘米，具5棱角，橙红色或深红色，无毛，疏松地包围在浆果外面。
种子多数，细小。
花期7～10月。
果期8～11月。
生长于路旁及田野草丛中;也有栽培作观赏植物者。
全国大部分地区均有分布。
酸浆的生长习性酸浆为茄科酸浆属多年生宿根草本植物，常作一年生栽培。
适应性很强，耐寒、耐热，喜凉爽、湿润气候。
喜阳光。
不择土壤，尤其是原产亚洲的酸浆在3℃～42℃的温度范围内均能正常生长。
植物组织培养植株再生途径有哪些
植物组织培养植株再生途径有哪些植物组织培养植株再生途径有：1、器官间接发生途径在本途径中，所培养的外植体在培养基中的植物生长物质等因素的诱导下，其细胞呈没有分化的状态，重新恢复了细胞的分裂能力。
然后随着培养的持续，细胞数量不断增加，形成由薄壁细胞所组成的愈伤组织。
这种结构松散的组织在适宜的植物生长物质等培养条件下会重新分化出茎叶、根系等，最终形成一个完整的植株。
利用植物细胞在组织培养过程中所形成的大量愈伤组织，可以在短时间内通过器官发生分化出大量小植株。
因此，通过愈伤组织途径，可以使被培养材料的繁殖系数迅速增加。
但是此途径有其缺陷性，因为愈伤组织的细胞在遗传上具有不稳定性。
此外，随着愈伤组织继代培养时间的延长，它们最初所表现的植株再生能力会逐渐下降，甚至完全消失。
因此在实际的操作中，应根据培养目的应慎重选择此途径。
2、器官直接发生途径在此途径中，器官可直接从外植物体上进行诱导，例如香蕉草的侧芽培养，首先会分化出小芽，然后自新芽叶腋形成芽丛；风信子的鳞茎切片进行培养，在适宜的条件下，其基部就会分化小鳞茎。
在器官直接发生途径过程中，由于细胞染色体的倍数基本保持稳定，因此发生变异的现象频率较低，这样也能保证所培养的试管苗保持母株良好的种性，因此途径是组培中常用的再生途径。
通过腋芽的方式进行器官的直接发生，在正常情况下腋芽都能发育成枝条，但是在很多情况下，腋芽通常都会在一定时间内处于休眠状态，对于顶端优势较强的花卉种类来说，只有将顶芽摘去，才能促使侧芽抽生。
研究表明，顶端优势的现象可以为细胞分裂素所抑制。
因此在组织培养过程中，当提高了培养基中的细胞分裂素水平后，所接种的茎段上往往就会长出大量腋芽。
从细胞学上来说，这些腋芽的遗传性质十分稳定，所以利用所培养出腋芽的快速增殖对于花卉品种，特别是以嵌合体状态存在的花卉品种来说具有实用价值。
不定芽也是增殖试管苗的一种重要方式。
从植物学的角度来看，不定芽是指茎尖、叶腋以外的其他器官或组织上所形成的芽。
组织培养与植物再生技术
组织培养与植物再生技术随着全球环境问题日益突出，自然资源持续减少，维护生态平衡的重要性日益凸显。
为了保护和改善环境，组织培养与植物再生技术成为了一种非常重要的手段。
本文将结合实例分享与这两个领域有关的一些基础知识、最新研究进展及其未来的发展方向。
一、组织培养技术1.什么是组织培养?组织培养是指通过一定的细胞营养基和特定的生长因子，通过体外培养的方式，培育出一定数量和质量的组织细胞。
从根本上理解，组织培养就是把植物的某一组织细胞周围的基质去除之后，用营养元素和激素构成的营养基贡献自然环境，使这些细胞能在不受空气或其它环境污染的干扰下，在其中自我繁殖，增殖。
2. 组织培养在农业上的应用组织培养技术广泛应用于作物良种选育、栽培、产量提高、产品质量提高以及新品种的培育等领域。
特别是在果树的育种过程中，组织培养也起到了非常重要的作用。
以苹果为例，使用种子进行繁殖，所得到的新苗在收获期上产生的食用量、病虫害抵抗能力、发育时间等方面是不同的。
为了保证苹果树的优良性能，通过切割一些新鲜的组织来培育和繁殖植株，选择了具有良好生长特性和耐病性的苗木，又经过一系列组合，最终获得了性状良好的品种。
二、植物再生技术1. 什么是植物再生技术?植物再生技术是指通过一定条件的刺激或者外界环境的变化，使植物体内的某些细胞逆转成为未分化的状态，从而实现其再次生长的过程。
即使一部分组织损伤或死亡，仍然可以通过这种技术进行再生和修复，使植物重新获得生长能力。
2. 植物再生技术在生产中的应用植物再生技术广泛应用于真菌、细菌等微生物的培养以及植物组织、皮肤等生物材料的再生。
在医学和生物技术领域，植物再生技术可以用于治疗一些疾病和创伤。
以农业领域为例，植物再生技术重要应用于生物繁殖和红树林保护中。
在生物繁殖过程中，例如抚子梅的培育中，如果遇到生长不良、死亡等问题，可以使用再生技术实现其重新生长。
而在红树林保护中，再生技术可以通过种子的培育和生长，实现无土栽培，避免破坏红树林根系和维持生态平衡。
植物组织培养技术在种质资源保护与利用中的应用
植物组织培养技术在种质资源保护与利用中的应用植物组织培养技术是一种通过组织分离、增殖和再生的方法，用于研究和利用植物的细胞、组织和器官。
它在植物育种、种质资源保护和利用方面发挥着重要的作用。
本文将探讨植物组织培养技术在种质资源保护与利用中的应用。
一、基因保护与再生植物组织培养技术可以帮助保护濒危植物的基因资源。
通过种子、叶片或其他植物组织的离体培养，可以在小范围内保存濒危植物的基因。
这种方法可以避免因栽培环境的变化或天灾等因素导致基因丧失。
同时，利用组织培养技术还可以对基因进行改良，培育出更具优良性状的植株。
二、病原体的消除与植物健康植物组织培养技术可以有效地消除植物体内的病原体。
通过外源植物激素的添加和培养基成分的调整，可以抑制或杀灭植物体内的病毒、细菌等病原体。
这对于繁育无病害的新品种和疾病抗性植物具有重要意义。
通过组织培养技术培养出的植物组织是无菌的，可以为进一步的育种工作提供健康的材料。
三、植物资源的快速繁殖植物组织培养技术可以快速繁殖珍稀或优良植物资源。
通过离体培养，可以将少量的植物组织快速繁殖成大量的新植株。
这种方法不仅可以保持植物的遗传纯度，还可以有效地节约时间和成本。
对于珍稀植物或高价值植物的繁殖来说，植物组织培养技术是一种非常重要的手段。
四、遗传转化与基因工程植物组织培养技术还为植物遗传转化和基因工程提供了良好的平台。
利用组织培养技术，可以将外源基因导入植物体内，以实现特定性状的改良。
比如，通过转基因技术可以提高植物的产量、抗病性、耐逆性等。
植物组织培养技术为基因工程提供了重要的研究和应用基础。
五、药用植物的生产与合成植物组织培养技术还可以应用于药用植物的生产与合成。
通过组织培养技术，可以培育出具有高产量和高质量药用成分的植株。
同时，利用组织培养技术还可以进行药物合成相关基因的研究和优化，为药物的生产提供更好的手段。
综上所述，植物组织培养技术在种质资源保护与利用中发挥着重要的作用。
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第38卷第6期河南大学学报(自然科学版)V ol.38 N o.6 2008年11月Journal of H enan U niver sity(N atur al Science)No v.2008酸浆的组织培养与植株再生陈明波1,赵丽英2,尚富德1*(1 河南大学生命科学学院,河南开封475004; 2 南阳师范学院生物科学与技术学院,河南南阳473061)摘 要:以酸浆的叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根为外植体进行离体培养,结果表明:叶柄为酸浆不定芽分化的最佳外植体类型;IA A为诱导叶柄不定芽分化较适合的生长素类型;不定芽分化的最佳培养基为M S+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L IA A;丛生芽增殖的最佳培养基为M S+2.0mg/L6-BA+0.05mg/L IA A,增殖系数达5.0;最优的生根培养基为1/2M S,生根率达91.7%.关键词:酸浆;离体培养;植株再生;最佳外植体;最佳培养基中图分类号:Q943.1 文献标志码:A文章编号:1003-4978(2008)06-0613-05 Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Physalis alkekengi L.CH EN M ing-bo1,ZH A O L-i ying2,SH ANG Fu-de1*(1.College of L if e Science,H enan Univ er sity,H enan K aif eng475004,China;2.School of L if e S cience&T echnology,N any ang N or mal Col lege,H enan N any ang473061,China)Abstract:T he leav es,petio le,stems,coty ledon,embryo nic ax is and radicle o f P hy s alis alkekengi as explants wer e cultur ed in v itr o.T he r esults w ere as fo llows.F or inducing adv entit ious buds,petio le was the o ptimal explant;IA A w as the best gr ow th ho rmo ne;and M S+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L IA A was the most appro priate hor mone mix tur e;M S+ 2.0mg/L6-BA+0.05mg/L IA A was the mo st appro priate media fo r differ ent iatio n and multiplicat ion of adventitious shoo ts;the optimum ro oting medium w as1/2M S,and its efficiency w as91.7%.Key words:P hy s alis alk ek engi L.;in v itr o cultur e;plantlet r egeneration;o ptimal ex plant s;the best medium酸浆(Phy salis alkekengi L.)为茄科酸浆属多年生草本,分布于欧亚大陆,在我国产于甘肃、陕西、河南、湖北、四川、贵州、云南等地[1].它是目前发现的少有的集观赏、食用、药用于一身的宝贵的野生植物资源[2].在热带和亚热带地区,酸浆作为一种常用药物被广泛用于治疗疟疾、哮喘、肝炎、皮炎、风湿等疾病;其药用成分酸浆苦素具有免疫调节、抗肿瘤、抗菌、强心等生物活性[3-6].被称为 红灯笼 的带宿萼果实具有极高的观赏价值,且既可以生食,也可加工成果汁、罐头、果酒等产品.近年来,酸浆已由野生状态走向人工种植,其中东北一些地区已有大面积人工栽培.酸浆一般采用种子繁殖,但种子发芽率低,且实生后代个体间药用有效成分和果实品质差异显著,不利于新选育出的优良品种的推广.目前,关于酸浆的研究报道主要集中在其有效化学成分分析及药理研究方面[7,8],对其离体再生体系的研究目前还未见报道.本文以酸浆的叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根为外植体,对酸浆的离体培养条件进行了初步研究,以期为酸浆的快速繁殖和优良野生资源的保护提供理论依据.1 材料与方法1.1材料采自河南省南阳市内乡县宝天曼国家级自然保护区的野生酸浆植株与种子.收稿日期:2007-12-29基金项目:河南省高校创新人才培养工程基金资助.作者简介:陈明波(1981-),男,河南平顶山人,硕士研究生,主要从事植物资源生态学研究.*通讯联系人,E-mail:fudeshang@614河南大学学报(自然科学版),2008年,第38卷第6期1.2 方法1.2.1 外植体的选取选取酸浆的叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根为外植体.叶片取幼嫩叶片,大小为1.5cm,带叶柄;茎段取健壮者为佳,可留1~2片幼嫩小叶,长2cm左右;子叶、胚轴、胚根在种子萌发7d子叶已展开时取.1.2.2 外植体消毒及切割外植体选取后先在自来水下冲洗20~30min,再用蒸馏水冲洗2~3遍,然后用体积分数70%乙醇处理30s,无菌水冲洗2~3遍,随即转入0.1%升汞溶液.叶片、叶柄、茎段灭菌5m in,子叶、胚轴、胚根灭菌3m in,无菌水冲洗5~6遍,无菌滤纸吸干水分备用.灭菌后,叶片去除叶柄,切成0.5cm 0.5cm的小块;叶柄切成0.3~0.5cm的小段;茎段去除叶片,切成0.3~0.5cm的小段;子叶切成0.2cm 0.2cm的小块;胚轴和胚根切成0.3~0.5cm的小段.将切好的外植体接种于含有诱导培养基的三角瓶中.1.2.3 培养基幼芽的诱导以M S为基本培养基[9,10],添加不同种类(IA A、NAA、2,4-D)及浓度(0.05、0.1、0.5、1.0mg/L)的生长素及6-BA(2.0、3.0m g/L);幼芽的增殖以M S为基本培养基,添加6-BA(0.5、2.0、3.0mg/L)和IAA(0、0.05、0.1mg/L);生根培养基分别以M S、1/2M S为基本培养基,添加不同浓度的IAA和2,4-D(0、0.05、0.5mg/L).以上每个处理接种40个左右外植体,重复3次.培养基中蔗糖浓度为3%(1/2MS培养基减半),琼脂浓度为0.7%,pH5.8,于121 灭菌20min,IAA过滤灭菌.1.2.4 培养条件及试管苗移栽培养室温度(25 1) ,光照强度2000lx,光照时间12h.当酸浆生根培养25d,小苗高4~5cm,叶色浓绿,根长2~3cm且发达粗壮时进行移栽.先将培养瓶盖打开,注入少量清水淹没培养基表面,在自然条件下炼苗3~5d,洗净培养基移植于装有花卉营养土与蛭石(体积比为1 1)的塑料盆中,保持高湿环境,观察小苗生长情况并统计试管苗成活率.1.3 数据处理不定芽分化率=分化不定芽外植体数/接种外植体数 100%,增殖倍数=增殖芽数/接种外植体数,生根率=生根幼芽数/接种幼芽数 100%.所有实验数据采用SPSS11.5进行方差分析,Duncan检测方法,百分数在统计分析前均进行反正弦数据转化,用or ig in7.0进行数据作图.2 结果与分析2.1 酸浆不同外植体的分化表现表1结果表明:叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根在3个不同处理的诱芽培养基中培养20d后,其芽的分化能力存在较大差异.在D1中,各种类型外植体的分化率都较低,这可能是由于单一植物生长物质不利于诱导分化.D2培养基中,叶柄、茎段和胚轴的不定芽诱导率较高,分别为52.5%、18.9%和16.1%.D3中,叶片、叶柄、茎段、胚轴都能诱导出不定芽,但不定芽诱导率都未超过30%.在3个处理中子叶切口处在接种后10d左右开始膨大,有少量愈伤组织形成,随着培养时间的延长,部分外植体开始褐化,都未形成不定芽.在继代培养中发现,子叶诱导出不定芽的时间至少在两个月以上且诱导率较低,平均在5%以下.因此,本研究初步认为子叶不适合作为酸浆组织培养的外植体.胚根由于过于细嫩,升汞灭菌后在培养基中全部失水死亡.综合考虑以上各种因素,叶柄为酸浆组织培养最佳外植体类型.表1 酸浆不同外植体在诱芽培养基上的分化率T ab.1 T he differentiatio n rate of P.alkekeng i ex plants in the media o f induced shoots培养基编号生长物质浓度/(mg L-1)6-BA IA A不同外植体的分化率/%叶片叶柄茎段子叶胚轴胚根D1 2.000b7.5a8.3a0b 6.7a0bD2 2.00.0510.5c52.5a18.9b0d16.1b0dD3 2.0 1.0012.2c21.1b27.0a0d10.3c0d 注:表中不同小写字母表示同一处理内不同外植体分化率差异达显著水平(P<0.05),以下类同.陈明波,等:酸浆的组织培养与植株再生6152.2 不同种类生长素对酸浆叶柄不定芽分化的影响以叶柄为外植体,当培养基中6-BA 浓度为2.0m g/L 时,同浓度而不同种类生长素处理的分化率为IAA>NAA>2,4-D(图1).不同浓度生长素的处理中,IAA 和NAA 浓度变化对分化率的影响表现出相图1 不同种类及浓度的生长素对酸浆叶柄不定芽分化率的影响Fig.1 Effects of different types and concentra -tions of aux i ns on differentiation rate of P.alkekengi petiole adventitious shoots同的效应,即随着IAA 、NAA 浓度的提高,分化率都呈现先升后降的趋势.二者浓度为0.5mg /L 时,分化率都达最高值,分别为62.5%和38.4%,但NAA 诱导的不定芽白化率较高(图版 A);当二者浓度大于0.5mg/L 时分化率都开始下降.2,4-D 处理分化出芽率最低,培养过程中在外植体切口处诱导出少量愈伤组织,同时有少量不定芽形成,但4个浓度梯度诱导率都在20%以下.综合看来,IAA 是酸浆叶柄诱导不定芽分化较适宜的生长素类型,但用量过多时有抑制作用.2.3 不同植物生长物质配比对酸浆叶柄不定芽分化率的影响6-BA 与IAA 的比例及其总量对酸浆叶柄不定芽分化率影响较大.由表2可知,不定芽分化率随二者比例的下降呈先升后降趋势,但二者总量不宜过高,否则抑制分化.由处理N2与N6、N3与N7、N4与N8的结果对比可知,在IAA 浓度一定的条件下,较高浓度的6-BA 不利于不定芽诱导率的提高.因此,二者总量比其比例对不定芽分化率影响更大.综合看来,以N3处理的分化率最高,达62.5%(图版 B).因此,M S+2.0mg/L 6-BA+0.50mg/L IAA 是酸浆叶柄诱导不定芽分化的最佳培养基.表2 不同植物生长物质配比对酸浆叶柄不定芽分化率的影响T ab.2 Effects of differ ent r atio o f plant gr ow th substances on differentiatio n rate of P.alkekeng i petio le adventitious shoo ts培养基编号植物生长物质浓度/(mg L -1)6-BA IA A外植体数诱芽外植体数分化率/%N12.004037.5e N2 2.00.05402152.5b N3 2.00.50402562.5a N4 2.0 1.0035720.0d N53.00351234.3c N6 3.00.05391538.5c N7 3.00.50411024.4d N83.01.0040410.0e2.4 酸浆叶柄不定芽的增殖培养当幼芽长到1.5~ 2.0cm 时,从外植体上切下幼芽,接种于增殖培养基,3周后统计出芽情况,结果见表3.可以看出:在只加6-BA 的培养基H 1、H 2、H 5中,随着6-BA 浓度的增加,芽的增殖倍数逐渐上升,但高浓度的6-BA 对芽的增殖有抑制作用.在6-BA 存在的情况下,加入低浓度的IAA 有利于芽的增殖,但此增殖倍数的提高会被高浓度的6-BA 所抑制.综合看来,在H 3培养基上,幼芽增殖倍数最高达5.0(图版 C).因此,酸浆最佳丛芽增殖培养基为M S+2.0mg /L 6-BA+0.05mg/L IAA.表3 不同培养基对酸浆叶柄丛生芽增殖的影响T ab.3 Effect o f differ ent media o n mult iplication of P.alk ek eng i petio le adventitious shoo ts 培养基编号植物生长物质浓度/(mg L -1)6-BA IA A 外植体数增殖芽数增殖倍数H 10.504056 1.4d H 2 2.0040128 3.2c H 3 2.00.0540200 5.0a H 4 2.00.1040163 4.1b H 5 3.0040105 2.6c H 6 3.00.0540122 3.1c H 73.00.10401152.9c616河南大学学报(自然科学版),2008年,第38卷第6期2.5 酸浆幼芽生根培养基的筛选与试管苗的移栽当增殖的幼芽高度达到1.5~2cm且带有3~5片小叶时,从基部切下幼芽接种于生根培养基,3周后统计生根情况.由表4可知,幼芽在不添加植物生长物质的1/2M S培养基上生根率最高,达91.7%(图版 D),且根长最长,平均在2.0cm以上.与不添加植物生长物质的M S培养基相比,IAA和2,4-D都有利于试管苗生根,其中以IAA的促进作用较明显,但高浓度的IAA和2,4-D都抑制根的生成.当生根培养25d,小苗高4~5cm,叶色浓绿,根长2~3cm且发达粗壮时,进行移栽,移栽成活率可达90%以上(图版 E).表4 不同培养基对酸浆幼芽生根的影响T ab.4 Effect of differ ent media on inducing roo ts of P.alk ek engi buds培养基编号基本培养基IA A/(mg L-1)2,4-D/(mg L-1)接种幼芽数生根幼芽数生根率/%平均根长/cmR11/2M S0*******.7a 2.0R2M S0*******.3d 1.0R3M S0.050362261.1b 1.0R4M S0.500361850.0bc 1.0R5M S00.05361541.7cd0.5R6M S00.5036616.7e0.2A-N A A诱导出的酸浆白化苗;B-酸浆叶柄在培养基(M S+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L I AA)中诱导出的不定芽;C–酸浆增殖培养基(M S+2.0mg/L6-BA+0.05mg/L IA A)中生长3周后形成的丛生芽;D–酸浆幼芽在1/2M S生根培养基上生长3周后的幼苗;E–最佳生根培养基上生长25d后移栽的酸浆幼苗;F–N A A诱导的酸浆白化苗转移到IA A培养基中后变绿.3 讨论植物的不同器官,由于其细胞结构和生理状态不同,分化能力存在显著的差异.一般来说,与由成熟的及高度分化的细胞组成的器官相比,分化程度较轻的细胞组成的器官具有较高的再生能力.本研究结果表明,在叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根6种外植体类型中,由高度分化的细胞组成的叶柄具有较高的再分化率,是酸浆不定芽发生的最佳外植体类型,而非子叶、胚轴或胚根等通常情况下具有较强分生能力的器官.这主要是由于子叶在培养中褐化较为严重,而胚根细嫩,对消毒剂敏感,接种后失水严重,因此降低了二者的分化率.组织培养中的器官发生包括外植体直接分化形成器官的直接发生方式和外植体先脱分化形成愈伤组织再分化成器官的间接发生方式[11],器官间接发生方式需经愈伤组织阶段且培养周期较长,试管苗变异率较高.本实验中,酸浆叶柄不定芽直接发生于外植体上,未经愈伤组织阶段,克服了由愈伤组织分化不定芽周期长且变异率高的缺陷.在研究不同生长素对酸浆不定芽诱导的实验中,NAA诱导的不定芽有白化苗出现.白化苗是植物组织培养中常见的一种异常苗,这种异常苗很难移栽成活,是植物组织培养特别是花粉培养中很难克服的一个问陈明波,等:酸浆的组织培养与植株再生617题.引起植物产生白化苗的原因及影响因素很多,光照、温度以及培养基选择不当均可能诱发白化苗.在组培苗白化机理的研究中,陈纯贤、孙敬三等指出核基因是控制花药培养力(包括绿苗率)的关键因素,质体DNA的缺失(可能也有线粒体的参与)是出现白化苗的直接原因,而在离体培养中高频发生的体细胞无性系变异很可能也是白化苗大量出现的原因之一[12].在本实验中,NAA诱导出的不定芽白化率较高,但把白化苗在添加同浓度IAA的培养基中继代培养后,白化苗逐渐转绿(图版 F).NAA诱导产生的白化苗是否发生了核基因的变化及质体DNA的缺失,以及在含有IAA的培养基中继代培养后白化苗转绿过程中核基因及质体DNA是否发生了回复性变化还有待进一步深入研究.本研究的结果表明,低盐的培养基有利于生根培养,这与一般植物生根培养时需要低盐浓度培养基的结论一致[13,14].参考文献:[1]中国科学院 中国植物志 编委会.中国植物志:第67卷[M].北京:科学出版社,1980.[2]孙可群.花卉及观赏树木栽培手册[M].北京:中国林业出版社,1988.[3]Chiang H C,Jaw SM,Chen 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