氯吡格雷原料药研究

氯吡格雷的原料药研究一、确定目标化合物在研究血栓形成的过程中发现，血小板是血栓形成的必需物质，所以可以研发能抑制血小板聚集的药物。

进一步发现，二磷酸腺苷(ADP)参与介导血小板的聚集过程，ADP受体位于血小板膜上。

所以可以把ADP受体作为药物作用的靶点，通过寻找可以作为ADP受体拮抗剂的药物，来达到抑制血小板聚集的目的。

在寻找先导化合物的过程中发现，噻吩吡啶类候选药物在口服后经肝细胞色素P450酶系转化，成具有活性的代谢物,该代谢物可以较好地特异性拮抗血小板膜上的ADP受体，继而抑制ADP与其结合及继发的ADP介导的糖蛋白GPIIb／IIIa 复合物的活化，最终抑制血小板的聚集；同时还可以减弱其他激活剂通过血小板释放ADP途径引起的血小板聚集。

噻氯匹定是该家族中的第一个成员，噻氯匹定在预防缺血性脑卒中、治疗心绞痛、防治心肌梗死和改善周围血管闭塞性疾病等方面疗效显著。

但噻氯匹定可以引起中性粒细胞减少、血小板减少、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等副作用，故应慎重使用。

在对噻氯匹定的优化过程中发现：噻氯匹定的乙酸衍生物S构型在药效上强于噻氯匹定，而安全性和耐受性则更胜一筹，与阿司匹林相似，后命名为氯吡格雷。

二、合成路线的设计及优选通过查阅相关文献发现，其合成路线最主要有以下两种：1）以2-噻吩乙胺为起始原料，连接手性或消旋的取代苯乙酸甲酯侧链，再拼合吡啶环，消旋体拆分（用(-)-樟脑-10-磺酸拆分），得到氯吡格雷。

2）以邻氯苯乙酸和4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶为起始原料，连接手性或消旋的取代苯乙酸甲酯侧链，消旋体拆分（用(-)-樟脑-10-磺酸拆分），得到氯吡格雷。

其中，第2种路线反应步骤少，各步骤的收率高，适合工业化生产。

但是，在a-溴代侧链邻氯苯乙酸甲酯时，按照通常的溴化方法，反应温度高达130℃以上，可操作性很低。

研究发现在溴的回流温度60～70℃左右，反应也能顺利进行，在收率相差不大的情况下，大大提高了操作的便利，使之更有利于工业化生产。

三、制备目标化合物主要仪器与试剂:YRT-3熔点仪(天津大学精密仪器厂)；Unityinova 600型超导核磁共振仪(美国Varian公司)；ZabSpec高分辨磁式质谱仪(英国VG公司)；岛津LC-10ATP高效液相色谱仪(日本岛津公司)。

4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶盐酸盐(上海氟德化工有限公司)；2-(2-氯苯基)乙酸(江苏海翔化工有限公司)；L-樟脑-10-磺酸(上海飞祥化工厂)；其他试剂均为工业级。

实验操作:1、2-(2-氯苯基)乙酰氯的合成取500mL三口瓶，加入340mL二氯甲烷，加人170g(1mo1)2-(2-氯苯基)乙酸。

搅拌，保持温度20~25℃，缓慢滴加110mL(1.5mo1)氯化亚砜。

温度升至40～45℃，搅拌2h。

反应中止后，减压蒸发，得到2-(2-氯苯基)乙酰氯粗品。

2、2-溴-2-(2-氯苯基)乙酰氯的合成向500mL三口瓶中加入上述2-(2-氯苯基)乙酰氯粗品，加热至58～65℃，搅拌下缓慢滴加52mL(1mo1)干燥过的Br2，加入完毕后回流搅拌2h。

反应终止后，得到2-溴-2-(2-氯苯基)乙酰氯粗品。

3、2-溴-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯的合成取1L三口瓶，加入上述2-溴-2-(2-氯苯基)乙酰氯粗品，搅拌下缓慢加入500 mL甲醇，待反应平缓后缓慢加入135mL(1mol)三乙胺，20～25℃反应2h。

反应终止后蒸干溶剂，加人500mL二氯甲烷，以50mL水洗涤2次，弃去水相，有机相干燥，蒸干，得到237g 2-溴-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯粗品，收率90%。

4、(R,S)-2-(2-氯苯基)-2-(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5)乙酸甲酯盐酸盐的合成取2 L三口瓶，加入1200mL乙腈，将132g(0.75 mo1)4，5，6，7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶盐酸盐和152g(1.81mo1)碳酸氢钠加入到乙腈中。

升温至30℃搅拌1h。

加入上述237g(0.90mo1)2-溴-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯。

升温至80～85℃反应8h。

反应结束后，停止加热，自然冷却至20～25℃，过滤，滤液蒸干，加入1200 mL乙酸乙酯，搅拌溶解，以10%盐水洗涤3次，弃水相，冷却至0～5℃，加入62.5 mL浓盐酸，保持温度不变。

固体充分析出后抽滤，滤饼烘干，得到(R,S)-2-(2-氯苯基)-2-(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5)乙酸甲酯盐酸盐粗品。

向上述粗品中加人800mL乙酸乙酯，加热至回流搅拌泡洗2h，停止加热，自然冷却到20～25℃，过滤，滤饼烘干，得到(R,S)-2-(2-氯苯基)-2-(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5)乙酸甲酯盐酸盐精品230g，收率85.4% 。

5、S(+)-2-(2-氯苯基)-2-(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5)乙酸甲酯的L-樟脑-10-磺酸盐的合成将42g(0.5mo1)碳酸氢钠加800mL去离子水溶解，制成5%碳酸氢钠溶液。

向2L三口瓶内加入900mL二氯甲烷，加人172g(0.48mo1)2-(2-氯苯基)-2-(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5)乙酸甲酯盐酸盐，搅拌0.5h，加入上述5%碳酸氢钠溶液，调pH8～9。

停止搅拌，静置1h，取有机相，以去离子水洗涤，分液，有机相加无水硫酸镁干燥，过滤，滤液减压蒸干，得到无色油状液体。

向上述油状液体中加入500mL甲苯，搅拌1h，加入58g(0.25mo1)L-樟脑-10-磺酸，搅拌溶解后保持反应液温度l5～20℃，静置3~4d，过滤。

向滤饼中加入200mL丙酮，25~30℃搅拌5h，15～20℃静置1d，过滤，抽干，得到72g S(+)-2-(2-氯苯基)-2-(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5)乙酸甲酯的L-樟脑-10-磺酸盐，收率27%。

6、氯吡格雷的合成取250mL三口瓶，加入150mL丙酮，加入72g(0.13mo1)S(+)-2-(2-氯苯基)-2-(4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]并吡啶-5)乙酸甲酯的L-樟脑-10-磺酸盐，加入11g(0.13mo1)NaHCO3固体,升温至60～65℃，反应6h，停止加热，自然冷却至15～2O℃，过滤，取滤液。

计算得，收率为75%。

四、化学结构的确证测得比旋度+51.52°(C=1.61,甲醇)运用NMR进行结构确证：1HNMR(600 MHz,DMSO-d6)，δ：3.10(br，2H,-CH2)；3.48,3.64(d,2H,-CH2)；3.76(s,3H,-CH3)；3.89,4.24(d,2H,-CH2)；5.67(s,H,-CH)；6.89,6.90(br,H,Ar-H)；7.44,7.45(d,H,3J=6Hz,Ar-H)；7.52～7.58(m,2H,Ph-H)；7.66,7.67(d,H,3J=6Hz,Ph-H)；7.71,7.72(d,H,3J= 6Hz,Ph-H)；10.51(br,2H,NH2+)。

13CNMR(150 MHz，DMSO-d6),δ：22.4；49.1；50.4；53.7；65.6；125.1；125.5；128.5；130.3；130.7；131.7；132.3；134.3；167.4。

FAB-MS，m／z，% ：[M+H]+ ，322.0。

五、氯吡格雷原料药规范化命名通用名：英文clopidogrel中文氯吡格雷化学名：英文(S)-α-(2-chlorophenyl)-6,7-dihydrothieno[3,2-c]pyridine-5(4H)-acetic acid methyl ester中文(S)-α-(2-氯苯基)-6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5(4H)-乙酸甲酯硫酸盐商品名:波立维、泰嘉六、理化性质的研究性状：本品为无色油状物。

物理常数：比旋度+51.52°(C=1.61，甲醇)。

药用其硫酸盐，其硫酸盐为白色结晶，mp.184℃，比旋度+55.10°(C=1.891，甲醇)。

晶型：分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及不定型。

其中，Ⅱ型最稳定。

立体异构现象：本品有R、S两种构型，其中S构型有活性。

七、质量研究1、鉴别：(1)取本品30mg，加水1ml溶解，取溶液1～2滴，置有硫酸甲醛溶液(取37%～40%甲醛溶液1滴加到硫酸1ml中，摇匀，表面即显紫红色。

(2)取本品适量，加盐酸溶液(0.9→1000)制成每1ml中含0.5mg的溶液，照分光光度法(中国药典2010年版二部附录Ⅵ A)测定，在270nm与278nm的波长处有最大吸收，在259nm与275nm的波长处有最小吸收。

(3)本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致(中国药典2010年版二部附录ⅥC)。

2、含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录ⅤD)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-三乙胺(680:320:2)[用磷酸溶液(1→5)调节pH值至3.8]为流动相，检测波长为270nm；理论板数按氯吡格雷峰计算应不低5000。

氯吡格雷峰与内标物质峰及其相邻杂质峰的分离度应符合要求。

内标溶液的制备精密称取四氟苯甲酸适量，加流动相使溶解并稀释制成1ml中含0.1mg的溶液，即得。

测定法取氯吡格雷对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中含0.8mg的溶液；精密量取该溶液与内标溶液各5ml，置容器中，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取本品适量，同法测定，按内标法以峰面积计算，即得。

最终算得纯度为99.1%。

3、杂质检查：有关物质取本品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中含2mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，加流动相稀释制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照溶液。

精密量取对照溶液20μl，照含量测定项下的方法，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分峰的峰高约为记录仪满量程的20%～25%，记录色谱图；再精密量取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。

供试品溶液色谱图中如有杂质峰，量取各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主成分的峰面积。

丙酮精密称取丙酮适量，加盐酸溶液(0.9→1000)稀释制成每1ml中含100μg的溶液，作为对照品溶液；取本品适量，精密称定，加上述盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含50mg的溶液，作为供试品溶液。

取上述两种溶液，照有机溶剂残留量测定法(中国药典2010年版二部附录Ⅷ第二法)测定，供试品溶液如有丙酮峰，其峰面积不得大于对照品溶液主峰的面积(0.2%)。