过碘酸-Schiff染色法与苏丹黑B双重染色在肌病诊断中的应用
过碘酸-雪夫反应
过碘酸-雪夫反应一、正常血细胞的染色反应1、粒细胞系统分化差的原粒细胞阴性，分化好的原粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应，并随着细胞的成熟，阳性反应程度逐渐增强，阳性呈细颗粒、均匀红色；嗜酸性粒细胞中的嗜酸性颗粒本身不着色，而颗粒之间的胞质呈红色；嗜碱性粒细胞中的嗜碱性颗粒呈阳性，而颗粒之间的胞质不着色。
2、红细胞系统幼红细胞及红细胞均呈阴性。
3、单核细胞系统分化差的原单细胞呈阴性，其他阳性，绝大多数阳性呈细颗粒，有时分布于细胞边缘的阳性颗粒较粗大。
4、淋巴细胞系统大多数淋巴细胞系统的细胞呈阴性，少数淋巴细胞呈阳性（阳性率常小于0.20），阳性呈粗颗粒状或块状。
5、巨核细胞系统巨核细胞系统的细胞（包括血小板）呈阳性，阳性呈颗粒状或块状。
6、其他细胞浆细胞一般呈阴性，少数呈阳性，呈细颗粒状；巨噬细胞可阳性，呈细颗粒状。
二、临床意义1、红细胞系统疾病红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征中幼红细胞可阳性（呈均匀红色或块状），有时幼红细胞阳性反应强且阳性率高，甚至红细胞也呈阳性。
在某些红系良性疾病，如缺铁性贫血、地中海贫血中幼红细胞也可呈阳性，有时阳性率也较高；巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等中幼红细胞常呈阴性，有时个别细胞可呈阳性。
2、白细胞系统疾病主要用于辅助鉴别急性白血病的细胞类型等作用，因为不同细胞类型的急性白血病其阳性反应可不同。
急性淋巴细胞白血病时原淋及幼淋巴细胞的阳性率升高，呈粗颗粒状或块状；急性粒细胞白血病时少数原粒细胞呈阳性，阳性呈细颗粒状或均匀红色；急性单核细胞白血病时原单及幼单细胞可呈阳性，阳性呈细颗粒状、弥散分布，有时胞质边缘处颗粒较粗大。
慢性淋巴细胞白血病时淋巴细胞的阳性率增加，呈粗颗粒状或块状；恶性淋巴瘤时淋巴瘤细胞阳性率高、阳性强，呈块状或粗颗粒状。
3、其他细胞戈谢细胞呈强阳性，尼曼-皮克细胞呈阴性或弱阳性；巨核细胞强阳性，Reed-Sternberg细胞阴性或弱阳性；骨髓转移性腺癌呈强阳性。
过碘酸雪夫染色法
过碘酸雪夫染色液说明书【产品名称】过碘酸雪夫染色液【包装规格】货号：DG0005单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml；每套/盒包装规格分别为：4×20ml/盒、4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒。
【预期用途】用于组织细胞学染色从而定性检测组织切片中的糖原、粘多糖。
【检验原理】过碘酸雪夫染色主要用于糖原的染色，是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用过碘酸(又称高碘酸)-雪夫技术显示粘蛋白，该染色法不仅能够显示糖原还能显示中性粘液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
过碘酸是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛与雪夫(Schiff)试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色，过碘酸雪夫染色液主要用组织细胞学糖原和霉菌的染色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、过碘酸溶液过碘酸2、雪夫(Schiff)试剂品红3、苏木素染色液苏木素4、酸性乙醇分化液乙醇【储存条件及有效期】2℃～8℃冷藏保存(有效期内可在-20～2℃或2～35℃温度范围7天内短时运输)，原包装未开封染色液的有效期为12个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后3个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、常规固定，切片常规包埋；2、蒸馏水洗数分钟，然后自来水冲洗，入蒸馏水浸洗；3、入过碘酸溶液，室温放置；4、自来水冲洗，入蒸馏水浸洗；5、入雪夫(Schiff)试剂，置于室温阴暗处浸染；5、流水冲洗，甩去多余水分；6、入苏木素染色液，接着染细胞核，然后用酸性乙醇分化液分化；8、冲洗，更换蒸馏水清洗，使其返蓝；9、逐级常规乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物染色观察。
过碘酸-Schiff(PAS)染色方法的改良及其在病理诊断中的应用
过碘酸-Schiff(PAS)染色方法的改良及其在病理诊断中的应用祁珊珊【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2016(032)007【总页数】2页(P825-826)【关键词】PAS;染色;改良;病理【作者】祁珊珊【作者单位】峡西理工大学维生素D生理与应用研究所病理室,汉中723000【正文语种】中文【中图分类】R361.2PAS作为一种特殊染色技术最早发现于1946年，该技术最早仅用于生物化学，后经不断改进，广泛应用于临床生化、组织化学及病理诊断中。
PAS染色不仅能显示糖原，而且还能显示中性黏液性物质以及软骨、脑垂体、霉菌、脂质、色素、淀粉样物质及基膜等，广泛应用于人体和实验动物组织的诊断和研究。
PAS染色过程中关键染液的配制方法及氧化时间等对染色效果影响较大。
本实验室经过反复试验，对影响其染色效果的因素加以总结分析，并做相应的调整和改进，染色效果较为满意，现介绍如下。
1.1 实验动物健康成年SD大鼠6只，由西安交通大学实验动物中心提供。
1.2 取材与固定 CO2麻醉处死大鼠，取十二指肠(标本大小不超过1.0 cm×1.0 cm)固定于3.7%多聚甲醛溶液中4 ℃保存，固定24 h后梯度乙醇脱水，二甲苯透明，常规石蜡包埋。
1.3 试剂配制 (1)多聚甲醛溶液：取3.7 g多聚甲醛至80 ml PBS(0.1 mol/L，pH 7.4)中加热至60 ℃，边加热边搅拌，同时滴加1 mol/L NaOH至溶液透亮，自然冷却后用0.1 mol/L的PBS定容至100 ml。
(2)1%过碘酸水溶液：过碘酸1 g，蒸馏水100 ml，溶解后避光贮存于4 ℃冰箱，临用前取出，待溶液温度达室温时使用。
(3)Schiff试剂的配制：所需试剂为1 N盐酸20 ml，碱性品红1 g，活性炭2 g，亚硫酸氢钠1 g，蒸馏水200 ml。
先将蒸馏水加热煮沸后，去火加入碱性品红，置于磁力搅拌器使其充分溶解；待溶液冷却至50 ℃时过滤，再加入适量盐酸；冷却至25 ℃时加入亚硫酸氢钠。
PAS染色法
PAS染色法—概况、原理PAS染色法概况PAS染色法（P eriodic A cid-S chiff stain）在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。
过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。
PAS染色法原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。
一般用来显示糖元和其它多糖物质。
原理：过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。
PAS染色法—应用、制作PAS染色法—应用随着医学实验技术的发展，近年来,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病诊断和研究，糖尿病的诊断和研究,用于某些肿瘤的诊断等。
除用于糖原的鉴定和黏液的显示外，还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。
临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据.PAS染色法-制作1. 固定液:用Carnoy液或75%酒精Carnoy固定液：纯酒精60 ml冰醋酸10ml氯仿30ml2. 染色液1）过碘酸酒清夜配法: 过碘酸(HIO .2H O）0.4g95％酒精35ml M/5醋酸钠(2。
72g+蒸馏水100ml）5ml蒸馏水10ml。
保存于冰箱内，用棕色瓶,可用两周.2）Schiff氏液：0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中，时时摇动三角瓶5分钟，使之充分溶解。
冷却至50℃后过滤，加入10毫升1N盐酸。
冷却至25℃,加入0.5—1克偏重硫酸钠，在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存。
3）Schiff氏酒精液配置Schiff氏液11.5ml1N HCI 0。
5ml纯酒精23ml4) 亚硫酸水1％偏重亚硫酸钠10ml1N HCI 10ml蒸馏水180ml的树胶溶解。
PAS染色法-实验效果准备1、10g/L过碘酸液2、Schiff染液：碱性品红0.5g ，DH2O 100ml煮沸后，待片刻，加入碱性品红，振荡数分钟使品红溶解,冷至50℃加入1M的盐酸20ml，混匀。
医院检验中心苏丹黑B染色操作规程
医院检验中心苏丹黑B(SBB)染色操作规程[原理]苏丹黑为一种能溶解于脂肪中的色素。
因此可使细胞内的中性脂肪、碘脂和类固醇着色。
[试剂](1)40％福尔马林。
(2)苏丹黑B备用液，取苏丹黑B粉剂0，68溶于200ml纯酒精中，用研钵慢慢研溶，并在室温下搁置1。
2天，待充分溶解，可冰箱保存1年。
苏丹黑B也可用苏丹黑代替。
(3)缓冲液，苯酚16g加纯酒精30m1，碘酸氢二钠(Na：HPO12HIO)0．38，加蒸馏水100m1，将两份溶液相混而制成，可保存1年。
(4)染色液，以苏丹黑B备用液30m1，缓冲液20ml，两液混合后过滤配成，可保存数周。
[操作](1)血片或骨髓片干后，用福尔马林蒸气固定10分钟(或直接染色)。
(2)浸入苏丹黑B染液中37℃水浴30、60分钟。
(3)求出后立即用70％酒精洗片约10秒钟，水洗。
(4)自然干燥，瑞氏染液复染20。
30分钟。
[结果观察]阴性：胞浆内无棕色颗粒。
弱阳性：细小、分布稀硫的棕黑色颗粒。
强阳性：颗粒粗大，呈黑色，充满整个细胞，常盖到核上。
[临床意义](1)本试验与POX反应平行。
POx染色要求涂片新鲜，而苏丹黑B染色则无此要求。
临床意义与POX染色相似或能相互弥补。
（2)尼曼-匹克细胞及高雪细胞的苏丹黑B染色均呈阳性反应。
[附注](1)苏丹黑B备用液和缓冲液可保存放长时间，但要避光，并密封。
以减少蒸发。
染色液用后放盐水瓶中加盖保存。
染色欠理想时，应及时更换。
(2)70％酒精冲洗时，时间不能太长，否则会将阳性颗粒脱去。
(3)冬天或从冰箱取出的染色液应先放37℃水浴预温5分钟后，再进行涂片染色。
(4)骨髓制片要厚薄得当。
太厚的涂片会影响细胞的观察。
(5)放置时间较长的涂片，应选用SBB染色，不宜作POX染色，因脂类较稳定存在于细胞中。
医学检验·检查项目：苏丹黑B染色_课件模板
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相关症状： 粪便黑色并带有血液、血液粘滞度增高、 血液改变、血液粘度增高、胎盘血液灌注 不良、白血病细胞浸润。
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相关疾病：
慢性粒细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白 血病、急性白血病、急性腹型-高脂血症 综合征、高血脂、白血病性咽峡炎、急性 淋巴细胞性白血病、小儿成人型慢性粒细 胞白血病、小儿类白血病反应、小儿雅克 什综合征、原发性混合型冷球蛋白血症性 血管炎、原发性高脂蛋白血症与黄瘤增生 病、Ⅰ型免疫母细胞性淋巴腺病
医学检验·各论 苏丹黑B染色 内容课件模板
医学检验·各论：苏丹黑B染色 >>>
简介：
SBB染色在鉴别白血病类型，尤其在 帮助鉴别急性非淋巴细胞白细胞与急性淋 巴细胞白细胞时较POX更敏感。苏丹黑是 一种脂溶性染料，可将细胞中的中性脂肪、 磷脂及胆固醇等脂类染成棕黑色颗粒，定 位于胞质內。
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临床意义： 与POX染色相似，但比POX染色更敏感。
对急性白血病的鉴别值更大。
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正常值： 阳性产物为黑色或蓝黑颗粒定位于胞
浆中。
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相关检查： 醋酸AS-D茶酚脂酶染色、阿利新蓝染色、 胶体铁染色、特异性脂酶染色、碱性磷酸 酶染色、过氧化酶染色。
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相关疾病： 人类T淋巴细胞病毒感染、类白血病反应。
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糖原染色(Schiff法)
糖原染色（Schiff法）1. 实验原理过碘酸是氧化剂，使含有乙二醇基（－CHOH—CHOH）的多糖类物质（糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等）氧化，形成双醛基（—CHO—CHO）。
醛基与雪夫试剂中的无色品红结合，使无色的品红变成紫红色化合物，定位于含有多糖类的细胞内。
2. 标本采集2.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。
凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。
2.2 标本种类：新鲜抽取的骨髓穿刺液2.3 标本采集要求2.3.1 高压消毒的穿刺针，一次性无菌手套和抽取骨髓液的无菌注射器。
2.3.2 临床上首选穿刺部位为髂后上棘；翻身困难，需多部位穿刺患者可选择髂前上棘为穿刺部位。
小于3岁的小儿还可选择胫骨头内侧为穿刺部位。
3. 标本储存：滴加固定液盖满血膜5分钟，水洗待干室温避光保存。
4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收的标准：溶血、稀释标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称：血细胞PAS染色测定6.2 试剂生产厂家：xx生物技术公司6.3 试剂组成试剂1：PAS固定液，10％甲醛甲醇溶液。
2℃-8℃避光保存，有效期六个月。
试剂2：PASⅠ液，10g/L（1％）过碘酸溶液。
2℃-8℃避光保存，有效期六个月。
试剂3：PASⅡ液，又称Schiff氏液。
2℃-8℃避光保存，有效期六个月。
试剂4：苏木素复染液。
2℃-8℃避光保存，有效期六个月。
7. 操作步骤7.1 涂片滴加固定液5-8滴，盖满血膜即可，5分钟，水洗待干。
7.2 滴加Ⅰ液10分钟，水洗待干。
7.3 置入Ⅱ液内室温（20～25℃左右为宜）暗处放置30分钟，然后流水冲洗数分钟。
7.4 苏木素复染1～2分钟，水洗待干，镜检。
8. 结果判断8.1 阳性结果—细胞内出现红色沉淀物，定位于胞质。
8.2 阴性结果—细胞内无红色沉淀物。
9. 临床意义9.1 粒细胞系统自早幼粒阶段以下均可呈阳性，且随细胞分化而加强。
肾活检用Schiff试剂的配制及保存
肾活检用Schiff试剂的配制及保存孙璟;杨剑辉【摘要】肾活检全称为肾穿刺活体组织检查法,目前临床常用的方法是在B超引导下,利用穿刺枪从肾脏获取微量肾脏标本后,在显微镜下观察肾组织学变化.它能对许多肾脏病的诊断、治疗以及预后评估提供重要的依据,其价值是其它血、尿检验所不能替代的,现已成为肾内科常做的一项重要检查.过碘酸-Schiff(PAS)特殊染色在肾穿刺活检病理中主要用于显示肾小球系膜区的范围和基膜的厚度,也可显示肾小球内某些渗出性蛋白、节段性硬化和结节性病灶.因此在该病理诊断中起着非常重要的作用,但是由于PAS染色常常受到各种因素的影响,在实际工作中常存在Schiff 试剂难以配制且配制好后保存易失效的问题.通过反复实践,笔者总结了一些经验体会,取得了较好的染色效果,现报告如下.【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2011(028)012【总页数】2页(P1067-1068)【关键词】PAS;肾活检;染色;因素分析【作者】孙璟;杨剑辉【作者单位】250031山东济南,456医院肾内科;250031山东济南,456医院肾内科【正文语种】中文【中图分类】R692.34肾活检全称为肾穿刺活体组织检查法，目前临床常用的方法是在B超引导下，利用穿刺枪从肾脏获取微量肾脏标本后，在显微镜下观察肾组织学变化。
它能对许多肾脏病的诊断、治疗以及预后评估提供重要的依据，其价值是其它血、尿检验所不能替代的，现已成为肾内科常做的一项重要检查。
过碘酸-Schiff（PAS）特殊染色在肾穿刺活检病理中主要用于显示肾小球系膜区的范围和基膜的厚度，也可显示肾小球内某些渗出性蛋白、节段性硬化和结节性病灶。
因此在该病理诊断中起着非常重要的作用，但是由于PAS染色常常受到各种因素的影响，在实际工作中常存在Schiff试剂难以配制且配制好后保存易失效的问题。
通过反复实践，笔者总结了一些经验体会，取得了较好的染色效果，现报告如下。
三种不同固定液对小鼠组织过碘酸雪夫染色效果比较
液：１ ２ ｈ 、２ ４ ｈ 、４ ８ ｈ ，充分 固定后，常规制作石蜡 切片，然后进行 Ｐ Ａ Ｓ染色，对 比观察染色
效 果 。 结 果 三种 固定 液对 不 同组 织 、不 同 固定 时 间下 Ｐ ＡＳ染 色结 果存在 差 异 。肝 脏 、 。 肾脏 、 小肠 经 Ｃ ａ ｒ ｎ ｏ ｙ ’ Ｓ 液处 理 １ ２ ｈ后 Ｐ ＡＳ效 果 最佳 ，质量 分数 ４ ％ 多 聚 甲醛液 固定 ２ ４ ｈ 基 本 满足观 察
糖和 糖 蛋 白，现 己广 泛 应 用 于病 理 学 诊 断 和 鉴别 。 研 究表 明［ １ ， ２ １ ， Ｐ ＡＳ反应 对 固定 液具 有选 择性 ，从而 影 响制 片质 量 和 染 色 效 果 。 目前 固定 液 的种 类 很
多， Ｃａ ｒ ｎ ｏ ｙ ’ Ｓ 液作为 Ｐ ＡＳ反应 的经 典 固定液 ， 却存 在 配 制 麻 烦 、重 复 率 低 、成 本 高 、不 适 用 免 疫 组 化研 究 等 问题 。多聚 甲醛（ Ｐ ａ ｒ ａ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｌ ｄ ｅ ｈ ｙ ｄ ｅ ） 是 目前 实 验室 最常用 的 固定剂之 一 ， 该 固定剂 较为温 和 ， 能
检 测效 果 ，而经 Ｂ ｏ ｕ ｉ ｎ ’ Ｓ 液 固定组织染 色效果相对较 差。结论 Ｐ ＡＳ 反应对 固定液和 固定时 间具有 选
择 陛， Ｃ ａ ｍｏ ｙ ’ Ｓ 液是组 织进行 Ｐ ＡＳ染 色的理 想 固定液 ，但 从 固定效 果 、重复性 、安全 性 、成本 等
多 因素综合考虑，在 Ｐ Ａ Ｓ 反应 中，质量分数 ４ ％多聚 甲醛液可以替代 Ｃ ａ ｒ ｎ ｏ ｙ ’ Ｓ 液。
１ ． ２ 实验方 法
学 显微镜 免疫 化 中，经
Ｃａ ｒ ｎ ｏ ｙ ’ Ｓ 液 固定 的组 织 染色 结果 ， 多聚 甲醛 处理
PAS改良染色法及其在病理诊断中的应用
PAS改良染色法及其在病理诊断中的应用陈锦;史炯;孟凡青;聂岭【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2015(000)021【摘要】目的：改良高碘酸-无色品红染色方法（ PAS），改善PAS染色结果，为临床病理诊断提供可靠依据。
方法：脱蜡至水的病理切片。
选择2%高碘酸钠作为氧化剂，严格控制氧化剂20分钟作用时间，使用自行配制的Schiff试剂染色孵育5分钟，苏木素衬染，观察染色结果。
并将300例含头颈、肺、肾脏、肝脏及胃标本的染色结果与传统的PAS染色法染色结果相互比较。
结果：改良后PAS染色方法的PAS阳性物质（黏液、糖原等）颜色鲜艳，特异性强。
结论：影响PAS 染色的因素很多，使用2%高碘酸钠氧化液，严格控制染色温度和时间，可有效改善PAS染色结果。
%Objective:To refine the periodic acidschiff( PAS)histochemical staining method and to improve quality of staining. Methods:A modified special Schiff reagent was used,then sodium periodate as the oxidizing agent with a reaction time of 20 min. We compared the new reagent with traditional PAS staining in 300 specimens including head & necK,lung,Kidney,liver and stomach. Results:Mucus and glycogen was stained red,the nuclei was stained purple. The effect of the stain was excellent in the improved method. Conclusion:Raised concentration of oxidizing so-lution,a proper dyeing duration and coloration temperature,which improve the PAS staining of glycogen.【总页数】3页(P3069-3071)【作者】陈锦;史炯;孟凡青;聂岭【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院病理科，江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院病理科，江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院病理科，江苏南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院病理科，江苏南京210008【正文语种】中文【中图分类】R730.43【相关文献】1.改良PAS染色法在急性肝损伤中的应用 [J], 张风;陶艳艳;陈高峰2.过碘酸-Schiff(PAS)染色方法的改良及其在病理诊断中的应用 [J], 祁珊珊3.改良微波姬姆萨染色法在病理诊断中的应用体会 [J], 赵一岭;黄高升4.改良PAS染色法在急性肝损伤中的应用 [J], 张风;陶艳艳;陈高峰5.改良的Ab－PABF与Ab－PAS组织化学染色法在小鼠小肠粘液染色中的应用比较 [J], 刘贤华;白晓东;粟永萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
pas染色原理
PAS染色原理介绍PAS（Periodic Acid-Schiff）染色是一种常用的组织学染色技术，用于检测组织中的多糖、糖蛋白和某些酯类物质。
PAS染色原理基于糖类与过碘酸的化学反应，在组织切片上形成紫色沉淀物，从而可视化这些糖类化合物。
PAS染色步骤PAS染色主要分为以下几个步骤：1. 取材和固定首先，需要取得待染色的组织样本，如组织切片或细胞制备物。
然后，将样本进行固定，常用的固定剂包括福尔马林和乙醛。
2. 去蜡和水化将固定的样本切片进行脱蜡处理，去除组织中的石蜡包埋物。
然后，通过一系列浓度递减的乙醇溶液将样本进行水化处理，使其逐渐转变为水溶液环境。
3. 过氧化将样本置于过氧化溶液中，通常为过碘酸溶液。
过碘酸能氧化糖类分子中的羟基，生成醛基，从而为PAS染色提供基础。
4. 染色将过氧化后的样本转移到含有PAS染色剂的溶液中，染色剂一般为含有Schiff试剂的硫酸溶液。
Schiff试剂能与醛基发生偶联反应，形成紫色沉淀物。
5. 去色通过漂洗样本，将未结合的PAS染色剂去除，以减少背景染色。
漂洗方法一般为用亚硫酸氢钠溶液或二氧化硫溶液进行反应。
6. 固定和封片最后，将染色后的样本进行固定和封片处理，使用适当的介质，如乳胶或树脂。
PAS染色的应用PAS染色在临床和科研领域有广泛的应用，以下是一些常见的应用场景：1. 肿瘤诊断PAS染色可用于肿瘤的诊断和鉴别。
某些肿瘤细胞具有高度的糖原含量，如肝细胞癌和胃肠道神经内分泌瘤。
PAS染色可以帮助鉴别这些肿瘤类型。
2. 肾脏疾病PAS染色在肾脏病理学中也有重要应用。
例如，在肾小球疾病中，PAS染色可以显示肾小球基底膜的增厚和肾小球内的糖原沉积。
3. 消化系统疾病PAS染色可用于检测消化道黏膜上皮细胞中的糖原含量。
在某些消化系统疾病中，如克罗恩病和溃疡性结肠炎，黏膜上皮细胞中的糖原含量可能会发生变化。
4. 神经组织研究PAS染色在神经组织研究中也有应用。
例如，神经节细胞中的神经酰胺可以被PAS 染色显示出来，从而帮助研究神经系统的结构和功能。
肌原纤维肌病的临床与病理特征（附1例报告）
肌原纤维肌病的临床与病理特征（附1例报告）陈裕庆;刘文文;高美钦;吴敏霞;张文敏【摘要】目的：研究肌原纤维肌病（myofibrillar myopathy, MFMs）的临床与病理学特征。
方法回顾性分析1例肌原纤维肌病患者的临床与病理学资料。
结果本例为散发病例，青年女性患者，病程较短，主要表现为四肢近端肌无力伴轻度肌萎缩，骨骼肌病理活检示病变肌纤维内出现空泡，内有紫红色颗粒状或团块状物质沉积，结蛋白、dysferlin及a1-抗胰蛋白酶抗体免疫组化染色阳性，电镜示部分肌原纤维破坏，Z线消失，可见肌原纤维降解产物堆积；对症治疗后患者症状缓解，随访1年未再发肌无力等临床表现。
结论肌原纤维肌病临床表现缺乏特异性，病情进展缓慢，确诊有赖于骨骼肌病理活检，光镜见肌纤维内结蛋白等多种蛋白质异常沉积，电镜见肌原纤维破坏、Z线消失。
【期刊名称】《中国神经精神疾病杂志》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P243-246)【关键词】肌原纤维肌病;结蛋白;临床特点;病理特征【作者】陈裕庆;刘文文;高美钦;吴敏霞;张文敏【作者单位】福建医科大学基础医学院病理学系福州350004;福建医科大学基础医学院病理学系福州350004;福建医科大学基础医学院病理学系福州350004;福建医科大学基础医学院病理学系福州350004;福建医科大学基础医学院病理学系福州350004【正文语种】中文【中图分类】R746肌原纤维肌病（myofibrillar myopathy，MFMs）是一类罕见的神经肌肉疾病，成人多见，临床表现缺乏特异性，主要表现为慢性进行性四肢肌无力，可伴有心肌受累和周围神经病，确诊有赖于骨骼肌病理活检，主要表现为肌纤维肌原纤维破坏崩解伴Z线及其相关物质或包涵体的异常聚集。
该病目前国内研究较少，仅见1个家系和3个散发病例报告。
现报告1例经骨骼肌病理活检确诊的肌原纤维肌病，并分析其临床与病理学特征，以提高对该病的认识。
17 病理学常用技术的原理及应用
免疫组织化学(免疫组化)和免疫细胞化学是利用抗原抗体的特异性结合反应来检测和定位组织或细胞中的某种化学物质的一种技术，由免疫学和传统的组织化学相结合而形成。免疫组化染色技术不仅有较高的敏感性和特异性，同时具有将形态学改变与功能、代谢变化结合起来，直接在组织切片、细胞涂片或培养细胞爬片上原位确定某些蛋白质或多肽类物质的存在的特点，并可精确到亚细胞结构水平，结合电子计算机图像分析技术或激光扫描共聚焦显微技术等，可对被检测物质进行定量分析。
电镜技术在生命科学领域可用于胚胎及组织发生学方面的观察和研究，如通过电镜可以了解肿瘤间质新生血管芽的发生和形态特点(图17—2、图17—3)；在临床上可用于多种疾病亚细胞结构病变的观察和诊断，特别是肾小球疾病及肌病的诊断；疑难肿瘤的组织来源和细胞属性判定。如一些去分化、低分化或多向分化肿瘤的诊断和鉴别诊断。随着电镜技术的，不断发展以及与其他方法的综合使用，还出现了免疫电镜技术、电镜细胞化学技术、电镜图像分析技术及全息显微技术等。但电镜技术也有其局限性，如设备昂贵、样本制作较复杂；样本取材少。观察范围有限，有时还可能会遗漏信息：当用于辅助肿瘤的病理诊断时，只能判定肿瘤的组织或细胞的来源，不能确定肿瘤的良恶性。
(三)细胞病理学观察
通过采集病变处的细胞，涂片染色后进行观察、诊断。细胞的来源可以是运用各种采集器在口腔、食管、鼻咽部、女性生殖道等病变部位直接采集的脱落细胞，也可以是自然分泌物(如痰、乳腺溢液、前列腺液)、体液(胸腹腔积液、心包积液和脑积液)及排泄物(如尿)中的细胞，以及通过内镜采集的细胞或用细针直接穿刺病变部位(如乳腺、甲状腺、前列腺、淋巴结、胰腺、肝、肾等)，即细针穿刺(fine neecUe aspiI-ation，FNlA)所吸取的细胞。细胞学检查除了用于病人外，还用于肿瘤的普查。该方法设备简单，操作简便，病人痛苦少易于接受，但最后确定是否为恶性病变尚需进一步经活检证实。此外，细胞学检查还可用于对激素水平的测定(如阴道脱落细胞涂片)及为细胞培养和DNA提取’等提供标本。
实验四 过碘酸雪夫反应
其它细胞均呈阴性。
(2)判断标准及分级： (-) 0分：胞浆呈淡红色，无任何棕黑色颗粒。 (+) 1分：胞浆呈均匀浅色，无颗粒或有少量棕黑色颗粒，但不超过胞浆总面积的1／4。
(++) 2分：全部胞浆呈均匀棕黑色或出现较粗的黑色颗粒，不超过胞浆1／2。 (+++) 3分：胞浆中已基本充满棕黑色颗粒，但密度较低。 (++++) 4分：全部胞浆充满粗大棕黑色颗粒而呈深黑色甚至掩盖其胞核。 (3)计算积分值：油镜下计数100个中性杆状核、分叶核粒细胞，分别记录其分级
(+++)：有很多的铁颗粒、小珠和少数小块状。
(++++)：有极多铁颗粒、小珠，有很多的小块，密集成堆。
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4．用蒸馏水冲洗后用2g/L核固红-硫酸铝溶液复染10～15min。
5．流水冲洗、待干、镜检。
6．结果
(1)在红色背景下铁粒呈蓝绿色。
(2)细胞外铁：用低倍镜观察涂片，特别是涂片尾部和髓粒附近，注意翠蓝色颗粒的 存在，可分五级标准。
(-)：无颗粒所见。
(+)：有少数铁颗粒或偶见铁小珠。
(++)：有较多的铁颗粒和小珠。
[实验器材和试剂]
1. 甲醇 2．200g/L亚铁氰化钾溶液 3．浓盐酸 4. 2g/L核固红-硫酸铝溶液
常用血细胞化学染色原理及应用
常用血细胞化学染色原理及应用（1）过氧化物酶染色的原理和临床意义[原理] 粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶（peroxidase，POX）能将底物过氧化氢分解，产生新生态氧，它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。
联苯胺蓝自我脱氢氧化，显棕色四甲基苯醌二胺，再加入亚硝基铁氰化钠与联苯胺蓝结合，可形成稳定的蓝色颗粒，定位于细胞浆内酶所在的部位。
[临床意义]临床上主要用于急性白血病类型的鉴别：急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应；急性粒细胞白血病原粒细胞POX 染色呈局灶分布的阳性反应；急性早幼粒细胞白血病颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应；急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。
（2）过碘酸-雪夫染色的原理和临床意义[原理] 过碘酸-雪夫（Pexiodic acid-schiff，PAS）染色又称糖原染色。
胞浆内存在的糖原或多糖类物质（如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）经过碘酸（Periodic acid）氧化，转变为二醛基（CHO-CHO），与雪夫（Schiff）试剂中的无色品红结合，形成紫红色化合物而沉积于胞浆中糖原类物质所存在的部位。
该反应称为过碘酸-雪夫（PAS）阳性反应。
[临床意义]1）急性白血病类型的鉴别红白血病的幼红细胞PAS染色多呈阳性反应，阳性率高，反应强；成熟红细胞有时亦可为阳性；急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞PAS染色多为红色颗粒或块状阳性反应；急性粒细胞白血病的原粒细胞呈阴性或胞质呈弥漫淡色阳性反应；急性早幼粒细胞白血病异常早幼粒细胞的PAS染色为阳性反应；急性单核细胞白血病原、幼单核细胞PAS染色阳性反应呈弥漫分布的红色细颗粒，巨核细胞白血病原巨核细胞PAS染色呈阳性或强阳性反应，表现为红色颗粒或块状。
2）各类贫血的鉴别 MDS、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（曾称地中海贫血）的幼红细胞PAS染色多为阴性反应，有时可出现阳性反应；巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。
临床血液学检验：实验四 过氧化物酶染色(POX)
涂片滴加A液3滴固定60秒 （DW冲洗，待干）
滴加B液（高碘酸）3滴氧化10 min， DW冲洗，待干
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
操作步骤
滴加C液（雪夫染液） 3滴氧化15 min， DW冲洗 待干
滴加D液（甲绿） 3滴复染5分钟
DW冲洗 待干
镜检
结果
阳性反应：胞质内染红色或紫红色，呈弥 散状、颗粒或块状。胞核染成绿色。
滴加D液（甲绿） 3滴复染5分钟
滴加C液3滴，D液6滴混匀
5分钟
甩干，镜检
DW冲洗 待干 镜检
CLL
ALL
ALL
ALL中粗 粗粒散在分布
A:红白血病
B:巨幼贫
M6 PAS 染色
•
POX
新鲜涂片
PAS
涂片滴加A液3滴固定60秒 （DW冲洗，待干）
滴加A液3滴（覆盖标本即可）滴加B液（高碘酸） 3滴氧化10 min， DW冲洗，待干 然后
滴加等量B液3滴,吹匀 10分钟
水洗，甩干
滴加C液（雪夫染液） 3滴氧化15 min， DW冲洗 待干
• 结果判断（100×）
胞浆中出现红棕色至蓝黑色颗粒为阳性反应
• （—）无颗粒沉着 • （弱+） 颗粒细小，分布稀疏 • （+）颗粒较粗常呈局灶性分布 • （++）颗粒粗大分布较密占胞浆1/2~2/3 • （+++）颗粒粗大，呈团块状分布 • （++++）颗粒布满细胞，可覆盖胞核
• 正常参考值
• 正常人淋巴细胞、红细胞、巨核细胞、成 熟嗜 碱性粒细胞，均无POX；
• 粒细胞系统：早幼粒以下阶段细胞均为 阳性，且逐渐加强，嗜酸粒细胞阳性最强
pas染色的名词解释
pas染色的名词解释PAS染色是一种常用的组织学染色技术，广泛应用于临床医学和病理学领域。
PAS是Periodic Acid–Schiff的缩写，中文译为“周期酸碘- Schiff碱性染色”。
这种染色方法可用于观察细胞和组织中的多糖物质，如糖原和粘液。
PAS染色的原理是基于化学反应。
首先，使用周期酸（periodic acid）处理样本，这种酸能氧化多糖物质中的羟基产生醛基。
接着，将样本暴露于Schiff试剂中，它是一种含有碱性染料的溶液，能与醛基结合形成红色可见的沉淀物。
通过PAS染色，我们可以直观地观察和分析组织中富含多糖物质的部分。
在临床医学中，PAS染色被广泛应用于病理诊断。
它可以帮助确定组织或细胞中是否存在糖原沉积。
例如，在病理分析中，PAS染色可以用于检测肝脏组织中的糖原沉积情况。
肝脏中的糖原是一种重要能源贮藏物，如果肝细胞缺乏正常的糖原沉积，可能表明患者存在某种病理情况，如肝病或代谢异常。
除了肝脏，其他组织中也可以使用PAS染色以观察糖原沉积情况。
例如，胰岛细胞中的糖原是调节血糖平衡的重要组成部分。
通过PAS染色，医生可以检测胰岛细胞中的糖原含量，以评估胰岛功能的正常性。
此外，PAS染色还可用于诊断其他病理情况。
某些病理状态下，细胞和组织可能会产生大量粘液，这种粘液是由多糖物质构成的。
通过PAS染色，我们可以观察到这些粘液的分布和特点，从而进一步诊断病理类型。
例如，某些肿瘤细胞会产生大量的粘液，这被称为粘液样腺癌。
通过PAS染色，医生可以确定肿瘤的粘液分泌情况，有助于判断肿瘤的分级和治疗方案。
总结而言，PAS染色是一种重要的组织学染色技术，它能够直观地观察和分析细胞和组织中的多糖物质。
通过PAS染色，医生能够评估糖原的沉积情况，检测粘液的产生和分布，进而为病理诊断提供重要信息。
这一技术的应用范围广泛，对于病理学研究和临床诊断具有深远意义。
在未来，随着科学技术的不断发展，PAS 染色可能会进一步优化和应用于更多领域，为医学和病理学进步做出更大贡献。
过氧化物酶与苏丹黑B两种白细胞染色方法灵敏度的比较
过氧化物酶与苏丹黑B两种白细胞染色方法灵敏度的比较
金小珍
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】1999(000)003
【摘要】在急性白血病（ＡＬ）中，过氧化物酶（ＰＯＸ）与苏丹黑Ｂ（ＳＢＢ）为最基本的细胞化学染色，当两项的阳性率≥３％时为急非淋（ＡＮＬＬ），≤３％时为急淋（ＡＬＬ）。
在ＡＬ的细胞化学诊断中，ＳＢＢ染色优于ＰＯＸ染色；特别在ＡＮＬＬ的Ｍ５亚型中，ＳＢＢ的反应尤...
【总页数】1页(P174)
【作者】金小珍
【作者单位】义乌市人民医院检验科
【正文语种】中文
【中图分类】R733.710.4
【相关文献】
1.两种常用固定剂碱性磷酸酶染色的灵敏度比较 [J], 周建中
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5.髓系过氧化物酶和苏丹黑B染色缺乏的急性变异型早幼粒细胞性白血病2例报
道 [J], 崔雯;秦爽;许议丹;郝玉书;钱林生;薛艳萍;季林祥
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显示 ， 女性 ５ 以前 、 性 ５ 以前同性别 各年龄组 间 比较 ， Ｏ岁 男 ５岁
差异无统计学意义 ， 说明侗族女性 ５ Ｏ岁后 ， 男性 ５ 岁后 骨量丢 ５ 失 的速度 和幅度 明显增 加 。Ｙ 检验 表明 ， 女性 ５ Ｏ岁 以上 ， 男性
６ Ｏ岁以上的骨量减少 检 出率增 加 ； 随着 年龄 的增 长 ， 激素水 平 下 降、 胃功能减退等 ， 吸收和利 用能 力下 降， 代谢呈 负平 肠 钙 骨
［ ］ 潘海林 ， ４ 苏宏业 ， 黎英荣 ， 广西 南宁地 区成年 女性骨 密度与 年 等．
龄关 系的研究 口 ． ］ 广西医科大学学报 ，０ ７ ２ （ ） ８４８ ５ ２ ０ ，４ ６ ：８—８ ． ［ ］ 柏根基 ， ５ 崔建 和 ， 士军． 安地 区健康 人群 跟骨 超声调 查研 究 杨 淮
［］ 中国骨质疏松杂志 ，０ ６ １ （） ２ ０２ １ Ｊ． ２ ０ ，２ ３ ：７ —７ ．
普 遍不足 ， 的摄 入量偏 少 ， 能是侗 族 峰值 骨量 偏低 的主要 钙 可
原因 。
［ ］ 薛延 ， ６ 李瑾 ， 张海文 ， 北京市 区 ７ ７ 跟骨定 量超 声测定结 果 等． ０例
（ ｅｉｄｃａｉ ｃ ｉ ， ＡＳ ， ｐ ｒ ｉ ｃ ｓｈｆ Ｐ ） 是一 种常用 的糖原 染色 方法 ； 丹 ｏ ｄ 苏 黑 Ｂ是常用脂 肪染 色方法之一 。笔者 尝试将这 ２种染色方法 在 同一 张切 片上 先后 进行染 色 ， 实验结 果表 明 ， 方法可行 、 结果满 意； 并且给观察提供方便 。
（ 辑 ： 会龙 ） 编 黄
过碘 酸一ｃ ｉ 染 色 法与 苏丹 黑 Ｂ双 重染 色在 肌 病诊 断 中的应 用 Ｓ ｈｆ ｆ
高美钦 张 文敏 晋 雯
（ 福建 医科 大学基础 医学 院病理学 系 ， 福州 ３ ００ ） ５０ ４
在肌病病 理诊 断过程 中 ， 骨骼 肌活检 标本冰 冻切 片进行 对 Ｈ－ Ｅ染色后 ， 观察时发现有空泡现象的组织切片 ， 除排除冰 晶以 外， 一般考虑是否有糖原 累积或脂质沉积 ， 需要分别 进行糖原染 色与脂肪染色 ， 以做进 一步 的鉴别 诊断 。过碘 酸一ｃ ｉ 染 色 法 Ｓ ｈｆ
Ｃ Ｎ Ｓ Ｕ Ｎ ＬＯ Ｎ Ｔ ＭＹ Ｖ １３ ｏ １２ １ ＨＩ Ｅ ＥＪ Ｒ Ａ ＦＡ Ａ Ｏ ｏ．５Ｎ ． ０ ２ Ｏ
解剖学杂志
２ １ 年第 因此 ， ５ 对 Ｏ岁后 的中老年人 ， 应积极 采
３ 讨 论
取适 当措施防止骨质疏松 。
的分 析［］ 中国骨质疏松杂志 ，０ ０ ６ １ ：６５ ． Ｊ． ２ ０ ， （） ５ —９
本研究结果显示 ， 江侗族 女性 ５ 三 Ｏ岁后 ， 性 ５ 后 ， 男 ５岁 随 着年龄的增长 ， 、 男 女性 的 Ｂ ＵＡ值 均呈 增龄性 降低 ， 对男 、 性 女
跟骨 Ｂ ＵＡ值进行方差分析表 明 ， 差异有统计 学意 义 ； 两两 比较
京、 淮安等地 区［ ］ 三江侗 族 的居 住地 多 为重 峦叠 嶂 山 区， ５ ， 日 照时 间相 对较短 ， 农村 的主食 以大米 、 玉米为 主 ， 类 的摄 取量 奶
［ ］ 李伟 ， ３ 吴桐 ， 张勤 ， 成都 市城市 居 民跟骨超声 结果 的分析 ［ ］ 等． Ｊ．
四川 医学 ，０ ７ ２ （ ） ５ ９６ １ ２ ０ ，８ ６ ：９—０ ．
参 考 文 献
峰值骨量是个体 在生命 中所 达到 的最大 骨量值 ， 一般 在青 壮年时期达到高峰 ， 以后随年龄增加 ， 骨量开 始逐 渐丢失 。许 多 研究表明峰值骨量的大小存在明显 的性别 和地 区差异［ 。本 次 ２ ］
［ ］ 刘忠厚 ， １ 杨定焯 ， 朱汉 民， 中国人骨质疏松症建议诊 断标准 （ 等． 第 二稿） Ｊ． ［］ 中国骨质疏松杂 志，０ ０ ６ １ ：－ ２ ０ ， （） １３ ．
［ ］ 高国一 ， ２ 姜范波 ， 刘平 华 ， 西双版纳 傣族 自治州傣 族和汉 族骨 等．
密度分布情况 调查 分 析 ［ ］ 中 国骨 质疏 松 杂 志， ０ ８ １ （ ） Ｊ． ２０ ， ４ ４ ：
２ ６ ２ ９ ６ －６ ．
岁 年龄组 。三 江侗 族峰值 骨 量年龄 分 布 与 国内其他 地 区 的文 献 报道有所不 同［ ］可 能与检测部位 、 ３， 检测 仪器 、 抽样 方法 、 样 本 数量及年龄 组跨度 不 同有关 。本研 究 骨量 峰值 结果 低 于北
调查结果显示 ， 三江侗 族男性 各年龄 组的 Ｂ Ａ值 均高 于女性 ， Ｕ
男性 Ｂ ＵＡ峰值为 （９ ５ 士６ ９ ） ｂＭＨｚ 出现在 ３ ￣３ ６．１ ．０ ｄ／ ， ５ ９岁年
龄组 ， 女性 Ｂ ＵＡ峰 值为 （２ ８ ±８ ４ ） ｂ ＭＨｚ出现在４ ￣４ ６．３ ．５ｄ／ ， ０ ４
１ 材 料 和 方 法
１ １ 组 织切 片 ．
煮 ５ｍｉ， ｎ 移开火源冷却至 ５ ℃ ， ０ 加入 １ ｌＬ盐酸 １ ， ／ ｍｏ ０ 混匀 ； ｍｌ 待冷却 至 ３ ℃ ， 入偏 重亚 硫酸 钠 １ｇ 摇匀 。避光 冷藏 １ ～ ５ 加 ， ２ ２ ， ４ 溶液变为土黄色时 ， 活性碳 ２ｇ 摇匀 过滤 于洁净 的磨沙 ｈ 加 ， 口玻璃瓶 内， 严 。４ 盖 ℃保存 。（ ） 丹黑 Ｂ染液 ： ７ ％乙醇 ３苏 于 Ｏ １ ０ｍｌ ０ 中加 入苏丹黑 Ｂ ０ ５ｇ 加温 ３ ℃溶解 ， 冷却后 ４ ． ， ７ 待 ℃保