DVS乳酸菌种菌株传代过程中遗传稳定性分株中的作用

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乳酸菌的代谢特性和应用研究

乳酸菌的代谢特性和应用研究

乳酸菌的代谢特性和应用研究乳酸菌是一种广泛存在于人类和动物肠道微生态环境中的葡萄球菌类细菌,具有多种保健和治疗功效。

乳酸菌的代谢特性和应用研究成为当前食品、医药等领域的热点。

本文从乳酸菌代谢、代谢产物及其影响、应用研究等三个方面,对乳酸菌的代谢特性和应用研究进行探讨。

一、乳酸菌代谢乳酸菌代谢主要有两种途径,即异源途径和同源途径。

异源途径是指乳酸菌通过代谢外源碳源,从而产生乳酸等代谢产物。

异源途径的一般情况下分为两种方式,一种是利用非糖类底物产生乳酸,如乳酸菌可利用脂肪、酒精等非糖类底物产乳酸;另一种是利用糖类底物产生乳酸,如乳酸菌可以利用果糖、葡萄糖等糖类底物产生乳酸。

同源途径是指乳酸菌通过代谢内源物质,即葡萄糖,从而产生乳酸等代谢产物。

在同源途径中,乳酸菌通过糖酵解作用,将葡萄糖转化为乳酸,并产生能量。

二、乳酸菌代谢产物及其影响乳酸是乳酸菌代谢的最主要产物,是一种低分子量有机酸,具有一定的强酸性和稳定性,能够调节肠道微生态平衡、抑制有害细菌作用,并参与酸奶等乳制品制作。

此外,乳酸菌代谢还会产生一系列的其他有用物质,如丙酸、醋酸、乙酸、甲酸、杂酸、二氧化碳、氢气和酸乳,它们的存在会影响乳酸菌的生长,营养成分的吸收等。

例如,二氧化碳能够在肉类、面包和蛋糕等食品中制造气泡并提高膨化度,也能够在面包中产生酸味;而酸乳菌则是酸奶的最主要菌种,它能够分解乳糖产生乳酸和酸,从而使酸奶具有一定的保健作用。

三、应用研究在食品、医药等领域,巨大的潜力和市场需求使乳酸菌的应用研究越来越深入。

例如,乳酸菌在生化、食品科学、环境工程、制药等领域均有广泛的应用。

在乳酸菌的生化领域,通过对其代谢特性及其产物的深入研究,人们已经成功制备出能够体外合成糖、合成内酯、实现电转化等多种低分子化合物的酶。

在食品科学领域,乳酸菌已成为发酵食品加工的主要菌种之一,如酸奶、凉皮、腊肠、熟鸡巴、橄榄等食品。

在环境工程领域,乳酸菌谷氧化菌被广泛应用于污水处理、废水处理、固废处理等方面。

菌种的培养、传代和保存

菌种的培养、传代和保存

菌种的培养、传代和保存发表时间:2016-09-05T14:58:35.600Z 来源:《健康世界》2016年第15期作者:刘庭琨1 普茺蔚2 [导读] 控制好菌种的培养、传代和保存方法就控制好菌种的质量。

云南省玉溪市食品药品检验所云南玉溪 653100 摘要:控制好菌种的培养、传代和保存方法就控制好菌种的质量。

关键词:菌种;培养;传代;保存微生物具有生命活力,随着菌种培养和保存时间的延长或菌种的多次转接传代,菌种本身所具有的优良的遗传性状可能得到延续,也可能发生变异。

因此,在保存过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。

低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,菌种保存方法都是根据这三个因素而设计的。

控制好菌种的培养、传代和保存方法就控制好菌种的质量。

故应选用合适的培养基,控制菌种培养的条件,使其优良性状得到延续;控制传代次数从而防止菌种的退化;控制保存的条件,使细胞处于休眠状态,采用合适的保存方法,以延长菌种保存的时间。

1.实验准备1.1仪器设备BHC-1300ⅡA2型生物安全柜(苏州安泰空气技术有限公司)、DW-86L486型海尔超低温冰箱(青岛海尔特种电器有限公司)、BCD-215DF型海尔冰箱(青岛海尔股份有限公司)、HRLM-80型海尔立式蒸汽灭菌器(青岛海尔特种电器有限公司)、YQX-Ⅱ型厌氧培养箱(上海新苗医疗器械制造有限公司)、SPX-150型生化培养箱(扬州慧科电子有限公司)。

1.2菌种短小芽孢杆菌[CMCC(B)63202]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501]、藤黄微球菌[CMCC(B)28001]、大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、乙型副伤寒沙门氏菌[CMCC(B)50094]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10104]、生孢梭菌[CMCC(B)64941]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]、志贺氏菌[CMCC(B)51572]、乙型溶血性链球菌[CMCC(B)32210]、单核细胞增生李斯特菌[CMCC(B)54002]、小肠结肠炎耶耳森氏菌[CMCC(B)52204]、蜡样芽胞杆菌[CMCC (B)63303]、阪崎肠杆菌ATCC 29544、副溶血性弧菌ATCC 17802、产气荚膜梭菌ATCC 13124、粪链球菌ATCC 29212大肠埃希氏菌O157 CICC 10907,均为冻干质控菌种。

发酵食品中微生物群落的动态变化和稳定性的研究

发酵食品中微生物群落的动态变化和稳定性的研究

发酵食品中微生物群落的动态变化和稳定性的研究发酵食品是指在食品加工过程中使用微生物来实现食品蛋白质、脂肪和淀粉等营养成分的转化和提高食品品质的一类食品。

微生物在发酵过程中起到核心的作用,发酵食品中微生物群落的动态变化和稳定性是发酵工艺和产品品质的关键。

微生物群落的动态变化是指在发酵过程中,不同种类的微生物根据不同环境条件的变化而发生的数量和组成的变动。

在发酵食品的起始阶段,一般会存在多种微生物共存的情况。

这些微生物会互相作用、竞争和协同发挥作用,经过一段时间的发酵,会逐渐形成主导微生物群落,此时主要由几个优势菌种构成。

比如,乳酸菌在酸奶的制作过程中就起到了主导作用。

在发酵的过程中,微生物群落的数量和组成会不断变化,但整个发酵过程是有序的。

在一定条件下,微生物群落会达到一个相对稳定的状态。

微生物群落的稳定性是指在稳定条件下,微生物群落的数量和组成相对不变。

酸奶乳酸菌是乳酸菌群落的代表,在乳酸的作用下,酸度逐渐增加,抑制了其他细菌的生长。

这种竞争和抑制作用使得乳酸菌能够相对稳定地存在和发展。

对于其他发酵食品,不同菌种之间的相互关系也会影响微生物群落的稳定性。

一方面,微生物之间的竞争和协同作用会影响微生物群落的结构和数量。

另一方面,外界环境的变化,如温度、酸度、氧气含量等,也会影响微生物群落的稳定性。

因此,发酵食品制作过程中需要仔细控制这些因素,以维持微生物群落的稳定性。

微生物群落的动态变化和稳定性研究对于发酵食品的优化和质量保证具有重要意义。

通过对微生物群落的分析,可以了解发酵食品中微生物的种类和数量,进而深入研究发酵过程中微生物的作用机制。

比如,通过研究微生物的代谢产物,可以揭示微生物在发酵过程中的代谢路径和产物的生成规律,为发酵工艺的改进提供理论依据。

此外,还可以研究不同微生物之间的相互作用机制,以进一步优化发酵食品的制作工艺。

总结起来,发酵食品中微生物群落的动态变化和稳定性是发酵过程和产品品质的关键。

对乳酸菌遗传与代谢特性的研究

对乳酸菌遗传与代谢特性的研究

对乳酸菌遗传与代谢特性的研究在当今的日常生活中,乳制品已经成为了人们不可或缺的食品之一。

而在这些乳制品中,乳酸菌是不可或缺的一种重要成分。

乳酸菌在制作酸奶、乳酪等乳制品中起着至关重要的作用。

由于乳酸菌具有良好的耐受性和安全性,它们被广泛地应用于乳制品行业中。

因此对于乳酸菌的遗传和代谢特性研究具有重要的意义。

乳酸菌是一种可以通过发酵来生产乳酸的厌氧菌。

乳酸菌全身黏液,不耐氧气,不具有芽孢,常常在乳品或者动物肠道以无菌状的方式存活。

此外,乳酸菌具有产生抗生素和失活致病菌等其他有益作用。

由于这些优点,人们在乳制品生产中广泛地采用乳酸菌生产乳酸,从而使得乳制品更加健康、更加美味。

乳酸菌的代谢作用主要是通过糖分解产生乳酸。

以常见的乳酸菌属为例,其能够将葡萄糖、果糖、乳糖等糖类分解,并最终生成乳酸。

而随着研究的深入,人们发现除了生产乳酸之外,乳酸菌在代谢过程中还具有一些其他的特性。

例如,乳酸菌可以合成其他一些非醇类有机物质,并且在一定条件下可以通过吞噬其他微生物来获得营养。

除了乳酸菌的代谢特性之外,其遗传特性也是人们研究的另一个重要方面。

乳酸菌属于革兰氏阳性菌,其基因组相对较小。

这意味着其中的基因较为集中,且往往具有重要的生化功能。

随着人们在研究过程中对基因序列的解读能力的不断提升,对于基因编辑技术的开发和应用越来越广泛,人们开始着重研究乳酸菌的基因组构成以及其中重要基因的特性和功能。

乳酸菌的遗传特性和代谢特性的研究,对于提高乳制品生产的效率、保证乳制品的质量以及健康性等具有重要的意义。

在这其中,人们常常会关注到乳酸菌的抗性和感受性,嗜好和环境适应性、基因表达等方面。

毕竟,只有在更加细致的研究和分析之后,我们才能更加全面但饱满地理解乳酸菌,从而对其在生产中的应用充满信心。

总之,乳酸菌的遗传特性和代谢特性的研究对于乳制品行业和大众健康都具有十分重要的意义。

虽然目前对其的研究还有很多待加强和完善的地方,但是我们还是有足够的理由去相信,在不久的将来,我们将会在这方面取得更加令人瞩目的成就!。

DVS乳酸菌种菌株传代过程中遗传稳定性分析

DVS乳酸菌种菌株传代过程中遗传稳定性分析

DVS乳酸菌种菌株传代过程中遗传稳定性分析刘衍芬;高学军;张明辉;葛增广【期刊名称】《生物技术》【年(卷),期】2005(15)2【摘要】目的:对从直投式酸奶发酵剂中分离出的乳酸菌菌株传代过程中的遗传稳定性进行分析。

方法:观察传代培养过程中各个菌株在转管不同次数时的形态变化,用RAPD方法分析传代过程中转管不同次数的乳酸菌基因组的变化趋势,并用SDS-PAGE对比转管不同次数乳酸菌的蛋白质表达的差异。

结果:乳球菌在传代过程中转管不同次数时基因组和蛋白质表达均无变化;乳杆菌1#在传代过程中转管不同次数时基因组基本无变化,蛋白质表达有变化;乳杆菌2#在传代过程中转管不同次数时基因组和蛋白质表达均有变化。

结论:采用RAPD、SDS-PAGE方法可以有效地对直投式酸奶发酵剂菌株传代过程中的遗传稳定性进行分析。

【总页数】3页(P48-50)【关键词】DVS乳酸菌种;传代;遗传稳定性;RAPD;SDS-PAGE【作者】刘衍芬;高学军;张明辉;葛增广【作者单位】东北农业大学动物医学学院【正文语种】中文【中图分类】Q933【相关文献】1.白酒发酵过程中产乳酸优势菌株的分析与鉴定 [J], 刘俊红;谢朝晖;周俊勇2.直投式酸奶发酵剂乳酸菌种遗传稳定性的研究 [J], 刘晓辉;冀宝营;高晓梅;方新3.DVS乳酸菌种菌株保存过程中遗传稳定性分析 [J], 刘衍芬;高学军;张明辉;葛增广4.带状疱疹患者淋巴母细胞在传代培养过程中染色体的稳定性分析∗ [J], 莫小辉;杨连娟;潘会君;胡专;余茜;胡婷婷;吴飞;谭飞5.传统发酵泡菜中乳酸菌种群组成及优良菌株产酸耐酸特性分析 [J], 罗强;李幸洋;陈炼红;张明;刘巧;张大伟;罗璠因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

《菌种传代与保藏》课件

《菌种传代与保藏》课件
通过菌种鉴定和纯化,可以了解菌种的属性和特征,如形态、染色、生化反应等,以确定其分类地位 和用途。这有助于保证实验结果的准确性和可靠性。
去除杂菌和变异株
在菌种传代和保藏过程中,难免会混入杂菌或产生变异株。通过鉴定和纯化,可以去除这些杂菌和变 异株,保持菌种的纯度和一致性。这有助于保证实验的可重复性和结果的可靠性。
02 菌种传代技术
液体培养传代法
总结词
通过液体培养基进行菌种传代的方法
详细描述
将菌种接种到液体培养基中,经过一定时间的培养后,再进行菌种分离和纯化 ,用于后续的实验和研究。该方法操作简便,适用于大规模生产。
固体培养传代法
总结词
在固体培养基上进行菌种传代的方法
详细描述
将菌种接种到固体培养基表面,经过一定时间的培养后,形成菌落并进行纯化。 该方法常用于分离和鉴定微生物,能够较好地保持菌种的特性。
真空冷冻干燥保藏法
结合低温与干燥两种保藏方法,通过 真空冷冻干燥技术延长菌种存活时间 的方法。
将菌种在低温下进行真空处理,去除 水分,然后保存在干燥的环境中,这 种方法可以显著延长菌种存活时间, 并保持菌种的活性和稳定性。
液氮保藏法
通过将菌种保存在极低温度的液氮中,以延长菌种存活时间 的方法。
将菌种悬浮在液氮中,利用液氮的超低温特性(-196°C)来 延长菌种存活时间。这种方法可以长期保存菌种,但需要专 业的设备和操作技术,且成本较高。
03
及时发现并处理变异菌株
在菌种传代过程中,应密切关注菌种的生长和性状变化。一旦发现变异
菌株,应及时进行分离和鉴定,并采取相应的措施进行处理,以防止其
扩散和影响后续实验结果。
保持菌种的纯度和活性
定期进行菌种鉴定和纯化

菌种传代操作规程

菌种传代操作规程
无菌检验、微生物限度检查检验用菌株。 3 内容 3.1 传代前将购进菌种及灭菌后的营养琼脂小斜面置于室温放置 30分钟,待温度平衡后再移入阳性操作室内。 3.2 换好衣服,戴好口罩、手套,用消毒水将手清洗干净。 3.3第二、三代工作菌种的制备: 从超低温冰箱中取出所需的菌种冷冻管,置于35~40℃的水浴中进 行解冻1分钟。 解冻后,放入生物安全柜内,用冷却后的灭菌接种 环从冷冻管中取一环菌液接种于10ml灭菌营养肉汤培养基中,置于 30~35℃的培养箱内18~24小时,进行增菌培养。〔第二 代〕培养后,用冷却的灭菌接种环从增菌液中沾取一环接种于相应 的培养基斜面上贴上菌种标签,置于30~35℃的培养箱内18~24小 时,进行培养。确认符合后置于5℃的冰箱内保存。使用时将培养 出的斜面用5ml的灭菌生理盐水将斜面上的菌落洗下制成菌悬液使 用。〔第三代〕在第三代菌种有效期内进行第四代的接种传代。 3.4 第四、五代工作菌种的制备:
从5℃的冰箱内取出第三代工作菌种,用冷却的灭菌接种环挑取1个 菌落接种于相应的琼脂斜面培养基中,置于30~35℃的培养箱内培 养18~24小时后,确认符合后置于5℃的冰箱内作为第四代工作菌 种保存,备用。 3.5 接种操作规范 3.5.1点燃酒精灯,左手握住菌种斜面,将管口靠近火焰旁,右手 拿接种棒后端,将接种环烧红30秒钟,随后将全部接种棒金属部分 在火焰上烧灼,往返通过3次。右手用无名指、小指及掌部夹住硅 胶塞,左手将管口在火焰上旋转烧灼,右手再轻轻拨开硅胶塞,将 接种环伸入管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下,稍冷却再移至菌苔 上,刮取少量菌苔,随即取出接种棒,并将菌种管口移至火焰旁。 塞上硅胶塞,左手将菌种管放下,取营养琼脂小斜面一支,右手用 无名指、小指及掌部夹住硅胶塞,左手将管口在火焰上旋转烧灼, 右手再轻轻拨开硅胶塞,将接种环伸入管内至琼脂斜面的底部,由 低向上,将接种环轻贴斜面的表面曲折移动,使菌划在斜面的表面 上。 3.5.2 取出接种环,在火焰旁将培养基管硅胶塞堵上,然后将接 种过菌的接种棒在火焰上烧灼灭菌。 3.5.3 将已接种好的细菌管置30—35℃细菌培养箱培养18—24小 时,霉菌管置23—28℃霉菌培养箱培养5-7日。取出后放入冰箱保 存并上锁。 3.6 菌种的传代次数不得超过5代,每一菌株每次传代不超过15 支;1支作为下次传代用,其余作为检验用,每月传代一次。 3.7 传代完毕后,在每支试管上标明菌株名称、代数、序号、传 代日期、有效期。 3.8 实验用菌株均来自于上海市食品药品检验所。

《菌种的传代与保藏》课件

《菌种的传代与保藏》课件
微生物菌种的保藏。
04
CATALOGUE
菌种传代与保藏的注意事项
防止菌种污染与变异
01
02
03
严格控制传代过程
在菌种传代过程中,应采 取无菌操作,避免污染。
选择适当的培养基
选择适当的培养基,以保 证菌种的正常生长和代谢 。
避免频繁传代
频繁传代会导致菌种变异 ,因此应合理控制传代次 数。
保持菌种遗传稳定性
通过菌种传代,可以持续获得相同特 性的菌株,为科学研究、产品开发、 质量控制等提供可靠的实验材料。
菌种保藏的原理与重要性
菌种保藏是长期保存菌种的有效方法,其原理在于创造不适宜菌种生长的环境条 件,使其处于休眠状态,从而延长菌种的保存期限。
菌种保藏对于保护生物多样性、防止菌种丢失、保障实验结果的可靠性等方面具 有重要意义。
尊重他人的知识产权,不得侵犯他 人的合法权益。
05
CATALOGUE
菌种传代与保藏的应用前景
在生物科学研究中的应用
要点一
基础生物学研究
菌种传代与保藏技术对于基础生物学研究至关重要,如微 生物分类学、进化生物学和生态学等。通过菌种传代与保 藏,科学家可以深入研究微生物的生理生化特性、基因组 学和蛋白质组学等,以揭示微生物生命活动的奥秘。
03
CATALOGUE
菌种的保藏技术
低温保藏法
总结词
一种常用的菌种保藏方法,通过降低温 度来降低菌种的代谢活性,延长菌种存 活时间。
VS
详细描述
将菌种保存在低温环境下,如冰箱的冷藏 室或冷冻室内,使菌种处于休眠状态,降 低其代谢活性,减少菌种变异和污染的机 会。适用于大多数微生物菌种的短期保藏 。
业的发展。
生物农药和生物肥料

DVS乳酸菌种菌株传代过程中遗传稳定性分

DVS乳酸菌种菌株传代过程中遗传稳定性分
乳酸菌作为口服疫苗载体的研究方兴未艾 , 而常用来作为乳酸菌基因工程受体菌 的标准菌株多为乳酸乳球菌 , 但乳酸乳球菌转化效率低 、不能持久地在人的肠道中存 活 [1 ] , 因此需要发展能够在肠道中定植且转化效率高的乳酸菌作为受体菌株 , 以便于 基因操作和开发乳酸菌活菌疫苗载体 。分离自人类肠道的植物乳杆菌 NC IMB8826已经 成为研究口服疫苗载体的模式菌株 [2 ] , 而粪肠球菌是栖居于人和动物胃肠道的一种乳 酸菌 , 常作为益生菌用来治疗腹泻等肠道疾病 [3 ] , 有望成为口服疫苗载体的候选者 。 我们的工作是筛选到一株具有高转化效率的粪肠球菌 , 并进行了一些初步的研究 , 为 它的进一步应用奠定基础 。
The Selection, Iden tif ica tion and Character istic Study on a Host Stra in of Lactic Ac id Bacter ia
WAN G Yin2Yu1, 2 CHEN L i2Shan2 J IA Shi2Fang3 REN D a2M ing2 GUO B en2Heng13
3 通讯作者 Tel: 021256036625, E2mail: guobenheng@ brightdairy1com 收稿日期 : 2004207205, 修回日期 : 2004208205
© 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
3 结果与讨论
311 筛选到的受体菌形态观察 对分离到的乳酸菌通过电转化法和抗性条件筛选转化子 。筛选到一株可作为受体
菌的乳酸菌菌株 COCC101。显微镜下显示 COCC101菌株乳酸细菌为椭球型 , 中间粗两 端稍细 , 能够形成短链或长链状 。 312 CO CC 101 菌株的分类鉴定

产细菌素乳酸菌的筛选及其纯化和稳定性研究

产细菌素乳酸菌的筛选及其纯化和稳定性研究

❖ 细菌素对胰蛋白酶的敏感性
用5mg/ml胰蛋白酶对发酵液处理2h,MRS培养为空白 对照,以抑菌圈直径的大小反映该细菌素对胰蛋白酶的敏感性。
结论
利用从30个健康婴儿中分离得到的一株产广谱细菌素的乳酸菌 (F-6-B),通过排除发酵液上清中有机酸和过氧化氢的影响,初步证
明F-6-B产生的是一种细菌素,该细菌素的抑菌活性与Nisin相似。 对该乳酸菌产生的细菌素进行了初步研究,从对该细菌素
连续培养3代
采用牛津杯法进 行筛选
复筛
ห้องสมุดไป่ตู้
❖ 菌种复筛
液体MRS培养基培养
离心,过滤
60%硫酸铵沉 淀
高速离心
抑菌试验(F-6-B)
沉淀乙酸钠复溶
过Hitrap SP HP(GE)阳离子交换柱
生物学特性选育
❖ 细菌素的热稳定性
以金黄色葡萄球菌为指示菌,以未经处理的发酵液为阳性对 照,MRS培养基为空白对照,以抑菌圈直径的大小反映该细菌素 的酸碱稳定性
❖ 细菌素的酸碱稳定性
将发酵液用 HCL和NaOH调节 到不同的pH值, 于25℃处理2h, 金黄色葡萄球菌为 指示菌,MRS培养 基为空白对照,以 抑菌圈直径的大小 反映该细菌素的酸 碱稳定性。
❖ 细菌素在不同pH条件下的热稳定性
将F-6-B菌株发酵离心上清液分别调至不同的pH值,然后在不同的温度下 处理不同的时间,最后回调至中性环境,以未经处理的原液作为对照,检测抑 菌活性。
帖航 天津商业大学 生物工程1001
产细菌素乳酸菌的筛选及 其纯化和稳定性研究
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乳酸菌双组分信号转导系统_崔艳华

乳酸菌双组分信号转导系统_崔艳华

文章编号: 1000-1336(2008)01-0055-04收稿日期:2007-10-12基金项目:哈尔滨工业大学优秀青年教师培养计划(HITQNJS.2007. 36)作者简介:崔艳华(1978-),女,博士,讲师,通讯作者,E-mail: yhcui@hit.edu.cn; 丁忠庆(1976-)女,博士,讲师,E-mail: dingzhongqing@hit.edu.cn; 曲晓军(1973-) 男,助理研究员,硕士,E-mail: qvxiaojun@163.com乳酸菌双组分信号转导系统崔艳华 丁忠庆 曲晓军(1 哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,哈尔滨 150090;黑龙江省科学院应用微生物研究所,哈尔滨 150010)摘要 :乳酸菌广泛应用于食品发酵工业中,其中有些菌种是重要的益生菌。

乳酸菌中存在着双组分信号转导系统,参与乳酸菌的多种生理生化过程,是其代谢活动的重要调控机制。

本文就双组分信号转导系统的组成、作用机制、类型、特点以及乳酸菌中双组分信号转导系统作一综述。

关键词:乳酸菌;双组分信号转导系统;组氨酸蛋白激酶;应答调节蛋白中图分类号:Q936双组分信号转导系统(two-component signaltransduction system, TCSTS)是细菌对各种环境信号作出反应的一个重要机制。

该系统由组氨酸蛋白激酶(histidine protein kinase, HPK)和应答调节蛋白(response regulator protein, RR)两部分组成,因而得名。

双组分系统的调控涉及到细菌的多种生理生化过程,如pH变化、趋化性、好氧性、离子吸收、孢子形成、宿主识别、细胞分裂、生物膜形成等等[1]。

乳酸菌是一群微好氧、大多数G+C含量较低、能够发酵碳水化合物产生乳酸的革兰氏阳性菌。

乳酸菌广泛分布于自然界,与人类关系密切。

乳酸菌在全世界食品生产中,扮演着极其重要的角色[2]。

DVS乳酸菌种菌株保存过程中遗传稳定性分析

DVS乳酸菌种菌株保存过程中遗传稳定性分析

DVS乳酸菌种菌株保存过程中遗传稳定性分析刘衍芬;高学军;张明辉;葛增广【期刊名称】《中国乳品工业》【年(卷),期】2005(033)001【摘要】对从某直投式酸奶发酵剂中分离出的乳酸菌菌株在保存过程中的遗传稳定性进行了分析.观察各种保存情况下各菌株复壮时的形态,用RAPD方法分析不同保存方法保存不同时间的乳酸菌基因组的变化,并用SDS-PAGE对比不同保存方法保存不同时间乳酸菌的全细胞蛋白质表达的差异.结果表明,乳球菌在4℃保存和-80℃保存过程中基因组有变化,蛋白质表达无变化;冻干保存前后基因组和蛋白质表达均无变化.杆菌1在4℃保存过程中基因组基本无变化,蛋白质表达有变化;-80℃保存过程中基因组有变化,蛋白质表达无明显变化;冻干保存前后基因组和蛋白质表达均无变化.杆菌2在4℃保存过程中基因组和蛋白质表达均有变化;-80℃保存过程中基因组和蛋白质表达均有变化;冻干前后基因组和蛋白质表达均无变化.采用RAPD方法可以有效地对乳酸菌种菌株保存过程中的遗传稳定性进行分析.【总页数】4页(P7-10)【作者】刘衍芬;高学军;张明辉;葛增广【作者单位】东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学,动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150030【正文语种】中文【中图分类】Q933【相关文献】1.基因工程菌株BL21(DE3)(pECB-ST1)菌种的限定代次及保存条件试验 [J], 邓光存;吕玉玲;王玉炯;许崇波2.DVS乳酸菌种在我国的应用及其开发研制 [J], 丛玉婷;高学军3.不同Ca_3(PO_4)_2含量及菌种保存温度下SL01菌株的解磷及生长能力 [J], 李剑峰;师尚礼;张淑卿4.DVS乳酸菌种菌株传代过程中遗传稳定性分析 [J], 刘衍芬;高学军;张明辉;葛增广5.仔猪大肠杆菌K88ac-ST1-LTB三价基因工程灭活苗的研究Ⅰ.基因工程菌株BL21(DE3)(pXKST3LT5)菌种的限定代次及保存条件试验 [J], 许崇波;卫广森;王文成;王卓因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

乳酸菌及其代谢物质以其抗菌性强、...

乳酸菌及其代谢物质以其抗菌性强、...

摘要乳酸菌及其代谢物质,以其抗菌性强、无毒性等优势,成为开发研究生物保鲜剂的热点;冷却肉以其外观新鲜、口感好等优势成为消费趋势,而其保质期成为束缚其市场发展的瓶颈,因此筛选具生物保鲜价值的乳酸菌,并将其应用于冷却肉保鲜成为本试验的内容和目的。

本试验从多年收集保藏的菌种中,筛选得到5株对大肠杆菌、荧光假单胞菌、蜡状芽孢杆菌、单核细胞增生李氏杆菌和金黄色葡萄球菌均有良好抑菌效果的乳酸菌,分别是11118、11050、11052、10171和11095。

经过生理生化试验和16SrDNA 同源性比对,鉴定11118、10171和11095为植物乳杆菌(Lactobacillus planatarum),11050和11052为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。

筛出5株菌株的代谢产物经121℃高温处理20min,仍保持80%左右的抑菌活性,但只在酸性条件下(pH4左右)才表现良好的抑菌效果。

在排除酸性末端产物和过氧化氢干扰后,用蛋白酶k等多种蛋白酶处理其代谢产物粗品,发现它们的抑菌活性都会有所降低,甚至是丧失。

因此,其代谢产物中均含有一定的蛋白质类物质。

通过单因素试验和正交设计,对这5株菌产抑菌物质的发酵条件进行了优化。

初始pH6,37℃培养16h,筛出各乳酸菌的最佳接种量和培养基成分因菌株不同而表现出一定的差异性:(1) 11118最佳接种量为2%,最佳培养基成分为蔗糖2.5%、大豆蛋白胨2.5%、乙酸钠0.7%、K2HPO40.2%、吐温-80 1 mL、蒸馏水1000mL;(2) 11050最佳接种量为3%,最佳培养基成分为乳糖2%、大豆蛋白胨3%、乙酸钠0.5%、K2HPO40.1%、吐温-80 1 mL、蒸馏水1000mL;(3) 11052最佳接种量为4%,最佳培养基成分为葡萄糖2.5%、蛋白胨1.6%、酵母粉为0.8%、乙酸钠0.5%、K2HPO40.3%、吐温-80 1 mL、蒸馏水1000mL;(4) 10171最佳接种量为4%,最佳培养基成分为蔗糖2%、大豆蛋白胨3%、乙酸钠0.5%、K2HPO40.1%、吐温-80 1 mL、蒸馏水1000mL;(5) 11095最佳接种量是4%,最佳培养基成分为麦芽糖2%、大豆蛋白胨2%、乙酸钠0.5%、K2HPO40.3%、吐温-80 1 mL、蒸馏水1000mL。

浅谈乳酸菌代谢产物对微生物生长的抑制作用

浅谈乳酸菌代谢产物对微生物生长的抑制作用

浅谈乳酸菌代谢产物对微生物生长的抑制作用乳酸菌是一类常见的有益菌,它们属于革兰氏阳性菌,能够产生大量的乳酸作为代谢产物。

乳酸菌在许多食品和饮料中都有广泛的应用,因为它们能够改善食品的口感、延长食品的保质期,并且对人体有益处。

除了这些有益作用以外,乳酸菌代谢产物还对其他微生物的生长产生抑制作用,这一点也是乳酸菌产生的乳酸的重要作用之一乳酸菌产生的乳酸是一种弱酸,这种弱酸能够对微生物的生长产生直接的抑制作用。

乳酸能够降低环境PH值,使得环境酸化,从而使得微生物的生长受到抑制。

大多数微生物对环境PH值都有一定的适应范围,当环境酸化到微生物的适应范围之外时,微生物的生长就会受到抑制。

乳酸酸化环境后能使其他微生物处于不适应环境并无法生存的状态。

此外,乳酸还能干扰微生物的代谢过程,从而对其生长产生抑制作用。

乳酸能够通过负影响微生物的细胞膜功能和营养摄取来抑制微生物的生长。

对于细菌来说,乳酸能够干扰其细胞膜的透性,使得细胞内的物质无法正常摄取和排出,导致细胞的代谢功能受到破坏。

对于酵母菌来说,乳酸能够抑制其对葡萄糖的摄取,使得酵母菌无法正常进行能量代谢,从而导致酵母菌的生长受到抑制。

此外,乳酸菌还能产生其他具有抑制微生物生长作用的代谢产物。

例如,乳酸菌能够产生一些具有抗菌作用的物质,如乳酸菌素、乳酸菌酸等,这些物质能够直接击败其他微生物,并抑制其生长。

此外,乳酸菌还能够产生一些气体,如二氧化碳和酒精等,这些气体能够改变微生物的生长环境,从而对其生长产生抑制作用。

需要注意的是,乳酸菌的抑菌效果并非完全一致,不同的乳酸菌株和不同的微生物对乳酸的抗性有所不同。

有些微生物能够通过适应乳酸环境来增强自身的耐受性,从而降低乳酸菌的抑制作用。

因此,在实际应用中,需要考虑乳酸菌与目标微生物之间的相互作用,选择适当的菌株和条件来达到预期的抑菌效果。

综上所述,乳酸菌代谢产物对微生物生长具有抑制作用。

乳酸菌产生的乳酸能够通过酸化环境、干扰微生物的代谢以及产生具有抗菌作用的物质等方式,抑制其他微生物的生长。

乳酸发酵菌种间的共生关系

乳酸发酵菌种间的共生关系

乳酸发酵菌种间的共生关系
乳酸发酵菌种间的共生关系是指在一定环境下,多种乳酸发酵菌互相作用,达到共同生存和繁殖的关系。

乳酸发酵是一种重要的生物化学反应,可将碳水化合物转化为乳酸,同时也是制作酸奶、酸菜等食品所必需的过程。

乳酸发酵中涉及到许多不同种类的菌群,它们之间存在着复杂的相互关系。

在乳酸发酵过程中,乳酸菌会释放出一些生物活性物质,这些物质可以与其他细菌产生相互作用。

例如,某些乳酸菌可以在产酸过程中同时产生反酸、乙酸等物质,使得一些被抑制甚至被杀死的菌种复苏,从而形成益生菌的共生关系。

此外,其他一些菌类又可以从中获得营养,在互利互惠的关系下共同繁衍生息。

值得注意的是,不同种类的乳酸菌之间有时也存在竞争和抑制的关系。

例如,某些乳酸菌能够分泌一些抗菌物质,抵御其他微生物的侵袭。

因此,在实际生产过程中,根据不同的产品要求和生产条件,需要选择不同的乳酸菌种,以便维持最佳的共生关系,保证产品质量和生产效率。

总的来说,乳酸发酵菌种间的共生关系是一个复杂而重要的生物学系统,深入研究这些关系对于提高酸奶、酸菜等发酵食品的品质和开发新型益生菌产品具有重要意义。

微生物工程名词解释重点整理

微生物工程名词解释重点整理

微生物工程名词解释重点整理微生物工程名词解释重点整理半合成抗生素:某些天然抗生素在去侧链后,可用化学合成法接上新的侧链而改变原有抗菌谱或其它特性,这样的抗生素就被称为半合成抗生素。

深层培养技术:在深层的液体培养中进行的一种发酵培养方法。

杂交育种:是指将两个基因型不同的菌株经吻合或接合,使遗传物质重新组合,从中分离和筛选具有新性状的菌株。

质粒的分-裂不稳定:是指基因工程菌分-裂时,出现一定比例不含质粒的子代菌。

质粒的结构不稳定:是指外源基因从质粒上丢失、碱基重排或缺失,引起基因工程菌性能的改变。

菌种衰退:菌种经过长期人工培养或保藏,由于自发突变的作用而引起某些优良特性变弱或消失的现象。

代谢调节:是指微生物的代谢速度和方向按照微生物的需要而改变的一种作用,即自我调节。

微生物代谢的控制:是指运用人为的方法对微生物的代谢调节进行遗传改造和条件的控制,以期按照人们的愿望,生产有用的微生物制品。

反馈抑制:是指代谢的末端产物对酶(往往是代谢途径中的第一个酶)活性的抑制。

诱导剂:能够诱导某种酶合成的化合物称为该酶的诱导剂,诱导剂可以是被诱导的酶的底物或底物的结构类似物。

组成酶:是机体内一类不依赖于酶的底物或底物结构类似物的存在而合成的酶。

诱导酶(又称适应酶):是一类依赖于底物或底物结构类似物的存在而合成的酶。

初级代谢:是为生物提供能量、合成中间体及其关键大分子的各种相互关联的代谢网络,对菌的生长是必需的。

产物有单糖、核苷酸、脂肪酸、蛋白质、核酸、多糖、脂类等等。

次级代谢:次级代谢主要涉及合成过程,其终产物、次级代谢物对菌的生长不是必需的,对其生命活动可能具有某种意义,通常是在生长后期开始形成的。

次级代谢产物主要有抗生素、维生素、生物碱、色素、毒素等等。

前体:是指加入到发酵培养基中的某些化合物,能被微生物直接结合到产物分子中去,而自身的结构无多大变化,却能提高产物的产量。

产物促进剂:是指那些非细胞生长所必须的营养物,又非前体,但加入后却能提高产量的添加剂。

《四株共生真菌次生代谢产物及其生物活性的研究》

《四株共生真菌次生代谢产物及其生物活性的研究》

《四株共生真菌次生代谢产物及其生物活性的研究》一、引言真菌作为生物多样性的重要组成部分,其共生关系在自然界中广泛存在。

近年来,共生真菌的次生代谢产物因其独特的生物活性而备受关注。

本文旨在研究四株共生真菌的次生代谢产物及其生物活性,为开发新型药物提供理论依据。

二、材料与方法(一)材料1. 共生真菌菌种:选取四株具有代表性的共生真菌菌种,分别命名为FJ-1、FJ-2、FJ-3和FJ-4。

2. 培养基:采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)进行真菌的培养。

(二)方法1. 真菌培养:将四株共生真菌分别接种于PDA培养基上,进行培养并观察其生长情况。

2. 次生代谢产物的提取:采用不同溶剂对四株共生真菌进行提取,得到其次生代谢产物。

3. 生物活性检测:通过体外实验和动物实验,检测四株共生真菌次生代谢产物的生物活性。

三、结果与分析(一)真菌生长情况四株共生真菌在PDA培养基上均能良好生长,其中FJ-1和FJ-2生长较快,FJ-3和FJ-4生长较慢。

(二)次生代谢产物的提取与鉴定通过不同溶剂的提取,得到了四株共生真菌的次生代谢产物。

经过鉴定,发现这些次生代谢产物主要包括多糖、蛋白质、酚类化合物、酮类化合物等。

其中,FJ-1的次生代谢产物中含有多糖和酚类化合物较多,而FJ-4则以酮类化合物为主。

(三)生物活性检测1. 体外实验:通过细胞毒性实验,发现四株共生真菌的次生代谢产物均具有一定的抗肿瘤活性。

其中,FJ-3的次生代谢产物对癌细胞的抑制率较高,具有较大的开发潜力。

此外,这些次生代谢产物还具有一定的抗菌、抗病毒等生物活性。

2. 动物实验:通过动物实验进一步验证了四株共生真菌次生代谢产物的生物活性。

结果表明,这些次生代谢产物在体内也具有一定的抗肿瘤、抗炎等作用。

其中,FJ-2的次生代谢产物在降低血糖、改善糖尿病症状方面表现出较好的效果。

(四)结果分析根据实验结果,我们可以得出以下结论:四株共生真菌的次生代谢产物具有多种生物活性,包括抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎、降血糖等作用。

乳酸菌代谢物及其作用每天都喝酸奶,你真的知道有什么用吗?

乳酸菌代谢物及其作用每天都喝酸奶,你真的知道有什么用吗?

乳酸菌代谢物及其作用每天都喝酸奶,你真的知道有什么用吗?乳酸菌( lactic acid bacteria,LAB) 由一组形态、代谢和生理特性相同的细菌组成,大多为革兰氏阳性、无芽孢的球菌或杆菌,并且这群菌能在可利用的碳水化合物发酵过程中产生大量的乳酸。

其代谢产物在食品、医药领域具有潜在的应用价值。

乳酸菌主要代谢产物,诸如酸性代谢产物、胞外多糖、乳酸菌素、γ-氨基丁酸的特性及在调节机体免疫力、抗肿瘤、抗菌防腐等方面的作用引起了众多学者的关注。

1、乳酸、乙酸等酸性代谢产物及其作用乳酸菌对葡萄糖等碳源进行同型发酵和异型发酵时,可产生大量的乳酸、乙酸,还产生少量甲酸、丙酸等其它酸性末端产物,这些酸性代谢产物是乳酸菌抗菌防腐的主要力量。

在这些混合物组成的有机酸中,乳酸主要用来降低pH值以增强其它酸的活性,乙酸具有较强的抑菌活性和较宽的抑菌范围,可抑制酵母菌、真菌、细菌及其它一些有害微生物的生长和发育; 丙酸对酵母菌和真菌有很强的抑菌作用;已经观察到乳酸与乙酸的混合物比这两种酸的任何一种都更能降低鼠伤寒沙门氏菌的生长率。

乳酸除降低pH值外,还可穿透一些细菌细胞膜,抑制细胞膜对氨基酸的吸收和一些呼吸酶系的活性,从而达到抑制微生物生长和繁殖的目的。

2、乳酸菌胞外多糖及其作用乳酸菌胞外多糖 (exopolysaccharide,EPS) 是乳酸菌在生长代谢过程中分泌的一类糖类化合物,包括荚膜多糖(包围在菌体周围)和粘质多糖(释放到培养基中的多糖)。

目前研究的可分泌EPS的乳酸菌大多来源于乳制品,产EPS量较高的菌种有: 嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜热链球菌等。

EPS广泛存在于动植物和微生物中,作为生命物质的重要组成成分,广泛参与细胞的各种生命现象及生理过程的调节。

不断积累的证据表明,这些多糖及其缀合物既是通讯的信息分子,如抗原决定簇受体分子上的接受者; 又是细胞间的识别分子,如病原体与寄主的作用; 同时多糖类化合物又是一种免疫调节剂,可通过抗肿瘤、抗溃疡和降低血脂胆固醇等活性而对人类健康具有促进作用。

乐淘乐购-各菌种的生物学效用

乐淘乐购-各菌种的生物学效用

各菌种的生物学效用1.德氏乳杆菌保加利亚亚种保加利亚酸奶中的乳酸菌,在分类上属于乳酸杆菌,因其菌种产地、微生物特性、效能优异等特点,被微生物学家命名为德氏乳杆菌保加利亚亚种(简称保加利亚乳杆菌)。

其作用之一是为双歧杆菌创造厌氧环境促进肠道中双歧杆菌的生长,还可在机体内产生生物拮抗作用,使肠道环境pH值由中性或碱性环境变为酸性,抑制和破坏腐败菌的生长条件,减少有毒物质对人体的侵害;增强胃肠道消化能力;抑制病原菌和有害菌的生长,防止动脉硬化,延缓衰老。

2.嗜热链球菌嗜热链球菌是一种链球菌:兼性厌氧或微好氧的革兰氏阳性菌,过氧化氢酶反应阴性,圆形或椭圆形,成对或成链状,不产芽孢,多不运动,也有少数种厌氧。

嗜热链球菌为健康人肠道正常菌群,可在人体肠道中生长、繁殖。

可直接补充人体正常生理细菌,调整肠道菌群平衡,抑制并清除肠道中对人具有潜在危害的细菌。

嗜热链球菌的乳发酵产物和底物进入人体内,可以促进体内有益菌的增殖,抑制有害菌的繁殖,起到整肠及抗菌作用。

3.嗜酸乳杆菌嗜酸乳杆菌为兼性厌氧菌,通过消耗肠道内的碳水化合物和氧气,分泌乳酸、甲酸、醋酸等酸类物质保持肠道正常的pH值环境,能产生短肽物质,抑制腐败细菌生长。

4.长双歧杆菌长双歧杆菌是双歧杆菌的一种。

双歧杆菌是从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌,末端常常分叉,故名双歧杆菌。

它是人体肠道内最重要的生理性有益菌,具有许多重要的生理活性:可抑制有害菌繁殖,当双歧杆菌在人体肠道内“定殖”占优势后,会对人体肠道菌群起到重要的调节作用,能有效抑制致病菌的繁殖;可缓解便秘,改善粪便的硬度、含水量、pH值等性状;可延缓衰老,人体的衰老与肠内菌群有密切关系,摄入适量的双歧杆菌,可以使肠道变得年轻;具有免疫调节作用,双歧杆菌能激活机体免疫系统中的巨噬细胞、NK细胞和B淋巴细胞,提高机体的特异性及非特异性免疫功能。

5.短双歧杆菌短双歧杆菌从属双歧杆菌,可产生短链脂肪酸,有利于肠道蠕动,防止便秘;增加一些酶的活性有利于肠道有害物质如胺、吲哚等的分解;抑制腐败菌的生长;抗衰老作用。

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2 期
孔 健等 :限制和修饰系统 LlaBIII 在构建抗噬菌体菌株中的作用
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寄主菌 ,L . lactis CHCC2281 是噬菌体 CHPC412 ,CHPC831 和 CHPC832 的寄主菌 。将质粒 pJ K1 分别转 化到菌株 L . lactis SMQ86 和 L . lactis CHCC2281 中 ,所得转化子对噬菌体的抗性结果见表 4 。
菌株 L . lactis MG1614 是圆头状噬菌体 sk1 ,p2 ,jj50 和长头状噬菌体 c2 的寄主菌 ,用 L . lactis MG1614 释放的噬菌体感染转化子 MG1614 [ pJ K1 ] ,结果菌株 MG1614 [ pJ K1 ]表现出对四种噬菌体具有一定的抗 生 ,其 EOP 值相同 ,约为 10 - 3 ,结果见表 2 。菌株 L . lactis IL1403 与 MG1614 具有较高的相似形 ,并且都不 含有质粒 。Schouler et al. (1998) 发现菌株 IL1403 携带有染色体编码的 type I RΠM 系统 ,表现弱噬菌体抗 性 ( EOP 为 10 - 1 ~10 - 2 ) [7] 。将质粒 pJ K1 转化到 L . lactis IL1403 菌株中 ,得到转化子 IL1403 [ pJ K1 ]对 936 类型中的圆头状噬菌体 bIL66 、bIL170 限制作用大幅度提高 , EOP 为 10 - 5 ;对 c2 类型中的长头状噬菌体 bIL67 的作用由弱抗性提高到中抗性 ( EOP 由 10 - 1 降低到 215 ×10 - 3 ) ,说明基因 LlaBIII 的导入 ,增强了菌 株 IL1403 对噬菌体的抗性 。
关键词 : 乳酸乳球菌 , 噬菌体 , 限制和修饰系统 , 乳制品发酵 中图分类号 :Q933 文献标识码 :A 文章编号 :000126209 (2002) 0220246205
限制和修饰 (restriction and modification , RΠM) 系统是指由限制性内切酶和甲基化酶组成的单亚基或 多亚基复合酶系统 ,两者通常成对出现 ,具有相同的 DNA 识别位点 ,其作用相反 。RΠM 系统在原核生物 中普遍存在 ,在保护细胞免遭外源病毒侵害方面具有重要作用[1] 。
1 材料和方法
1. 1 菌株 、噬菌体和培养基 11111 菌株和噬菌体 :本实验所有菌株和噬菌体列表于 1 。 11112 培养基 :乳酸乳球菌培养基 ( GM17) 为 M17 培养基 (Difco) ,加 015 %葡萄糖 ;转化培养基 ( SGM17) 为 M17 培养基 ,加 1 %葡萄糖 ,215mmolΠL MgCl2 ,215mmolΠL CaCl2 ,5μgΠmL 氯霉素 ;噬菌体感染培养基为 GM17 培养基加 5mmolΠL CaCl2 。 1. 2 质粒 D NA 的提取
化子 ,将 pJW566 DNA 经 ClaI 内切酶不完全消化 ,所得片段与来自于质粒 pVC5 的氯霉素抗性基因 Cat 连 接 ,构建了携带有完整 RΠM 系统 LlaBIII 又具有氯霉素抗性标志的质粒 pJ K1[5] 。
将质粒 pJ K1 分别转化到无质粒且噬菌体敏感的菌株 L . lactis MG1614 和无质粒且携带有染色体编 码的 RΠM 系统 I 型的菌株 L . lactis IL1403 中 ,在含有氯霉素平板上选取菌落 ,测定转化子对噬菌体的抗 性。
42 卷 2 期 2002 年 4 月
微生物学报 Acta Microbiologica Sinica
Vol. 42 No. 2 April 2002
限制和修饰系统 Lla BIII 在构建抗噬菌体菌株中的作用
孔 健1 Jytte Josephsen2 马桂荣1
(1 山东大学微生物技术国家重点实验室 济南 250100) (2 丹麦皇家畜牧农业大学乳制品和食品科学系 丹麦)
L . Lactis 培养到指数生长期 ,离心收集菌体 。菌体细胞用 10mgΠmL 溶菌酶 37 ℃酶解 20min ,用 GIA2 GEN plasmid Mini2prep kit (Chatsworth , USA) ,按照实验说明提取质粒 DNA。 1. 3 噬菌体效价( efficiency of plating , EOP) 的测定
[ 14 ] Obtained from T R Klaenhammer
Obtained from J Josephsen Obtained from T R Klaenhammer
[ 15 ]
Q30
Small , isometric2headed P335 species
Q33
Small , isometric2headed P335 species
bIL66
Small , isometric2headed 936 species
bIL170 Small , isometric2headed 936 species
bIL67
Prolate2headed , c2 species
CHPC412 Unknown species
[ 15 ] [ 15 ] Obtained from J Josephsen Obtained from J Josephsen Obtained from J Josephsen Obtained from Chr. Hansen AΠS.
作者简介 :孔 健 (1964 - ) ,女 ,山东菏泽人 ,山东大学微生物技术国家重点实验室副教授 ,博士 ,主要从事乳酸菌 应用基础性研究 。 收稿日期 :2001211206 ,修回日期 :2001212219
2 期
孔 健等 :限制和修饰系统 LlaBIII 在构建抗噬菌体菌株中的作用
ND
bIL66
936
ND
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bIL170
936
ND
ND
1
c2
c2
1
1. 2 ×10 - 3
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bIL67
c2
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1
ND means no detection.
The EOP were an average of at least three independent determinations.
作为发酵剂的乳酸乳球菌在乳制品发酵中具有重要作用 ,但这类菌株极易遭受噬菌体感染 ,导致菌 株产酸力降低 ,甚至发酵失败 ,造成严重的经济损失 。所以在乳制品发酵过程中防止噬菌体感染就成为 十分重要的问题 。
通过自然筛选或诱变处理等手段筛选噬菌体不敏感突变株以及利用基因克隆技术构建抗噬菌株菌 株在发酵过程中起到了良好的抗噬菌体感染效果[2 ,3] 。质粒 pJW566 分离于乳酪发酵剂乳酸乳球菌 (Lactococcus lactis subsp . cremoris) W56[4] ,发现携带有一种新的编码限制和修饰 ( RΠM) 系统的基因 LlaBI2 II[5] ( GenBank 注册号为 AF347071) ,本文通过电转化方法将 RΠM 系统 LlaBIII 导入到不同的乳酸乳球菌 中 ,分析含有 RΠM 系统 LlaBIII 的工程菌株对噬菌体的抗性 。
Type I RΠM system chromosomal located , host for blL67 , bIL 66 ,bIL170
[ 13 ]
Bacteriophages sk1 p2 jj50 c2 ul36
Small , isometric2headed 936 species Small , isometric2headed 936 species Small , isometric2headed 936 species Prolate2headed , c2 species Small , isometric2headed P335 species
CHPC412
ND
ND
1
CHPC831
ND
ND
1
CHPC832
ND
ND
1
ND means no detection. EOP were an average of at least three independent determinations.
214 ×10 - 5 310 ×10 - 5 512 ×1D ND ND
2. 2 ×10 - 5 5. 3 ×10 - 5
ND 2. 5 ×10 - 3
2. 2 RΠM 系统 Lla BIII 与流产感染 AbiS 机制的协同效应 质粒 pAW601 携带有流产感染基因 AbiS(Josephsen J 提供) ,将质粒 pJ K1 转化到含有流产感染质粒
pAW601 的菌株 L . lactis MG1614[pAW601 ]中 ,测定所得转化子对噬菌体 sk1 、c2 的抗性 。结果表 3 所示 。
表 3 RΠM 系统 LlaBIII 与流产感染基因 AbiS 的协同作用 表 3 结果表明 ,质粒 pJ K1 的导入 ,
菌株
MG1614 MG1614[pAW601 ] MG1614[pJ K1 ] MG1614[pAW601 + pJ K1 ]
噬菌体效价 sk1 1
211 ×10 - 3 213 ×10 - 3 115 ×10 - 5
c2 1 312 ×10 - 2 111 ×10 - 3 512 ×10 - 4
使菌株 MG1614 [ pAW601 ]对圆头状噬菌 体 sk1 和长头状噬茵体抗性分别提高了 100 倍 ,也就是说 ,由于 RΠM 系统 LlaBIII 中甲基化酶的识别错误 ,修饰了侵入噬 菌体 DNA 的限制性内切酶的酶切位点 , 或噬菌体的突变 ,逃脱了体内 LlaBIII 限 制性内切酶的切割作用 ,而欲生长繁殖 ,
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