菌种的保存方法介绍
简述微生物菌种的保存方法
简述微生物菌种的保存方法
微生物菌种保存方法包括冻干法、冷冻法和液氮冻存法。
冻干法是将微生物菌种培养物通过低温和真空脱水的方法,将其冻结并除去水分。
冻干的菌种可以在常温下保存较长时间,并在需要时重新培养。
冷冻法是将微生物菌种培养物置于低温环境中冷冻保存。
通常使用甘油、乳糖或甲醇等添加剂来保护细胞。
冷冻保存可在-20°C或更低的温度下进行,可以保存1-2年的时间。
液氮冻存法是将微生物菌种培养物经过处理后,存放在液氮中保存。
液氮的温度极低,可达到-196°C,可以长时间保存微生物菌种。
使用液氮冻存法可以保存几十年的时间。
在保存微生物菌种时,需要注意一些因素。
例如,菌种保存时要保证细胞的完整性和活力,因此在保存前需要进行特殊的处理或增加添加剂来保护细胞。
此外,保存容器也很重要,应选择耐低温和密封性好的容器来存放菌种。
综上所述,微生物菌种的保存方法有冻干法、冷冻法和液氮冻存法,根据实际需要和保存时间的长短选择不同的保存方法。
菌种保存操作方法
菌种保存操作方法
菌种的保存操作方法主要包括以下几个步骤:
1. 预处理:将菌种转接到适宜的培养基上,并培养出适量的细胞。
2. 选择保存方法:根据菌种特性和保存时间的要求,选择合适的保存方法,常见的方法有低温保存、冷冻保存和冷冻干燥保存。
3. 低温保存:将菌种接种在石蜡或冰芯样管中,并将其放入冷藏库中保存。
一般保存温度在4以下,可以延长菌种的保存时间,但菌种仍然会有某些代谢活动。
4. 冷冻保存:菌种培养后,用无菌培养基或添加防护剂的无菌培养基冻结培养基培养的菌株。
将菌株和培养基混合后,迅速冷冻至-70以下,并将其存放在液氮罐中。
这种保存方法可以延长菌种的保存时间,并防止细胞活力的丧失。
5. 冷冻干燥保存:将菌种培养后,将菌株和保护剂混合,制成细胞悬浮液,用真空冷冻干燥仪将其冷冻干燥。
干燥后,将其密封在干燥剂中保存,可以在室温下保存数年甚至数十年,且菌种仍然具有一定的活力。
需要注意的是,在保存菌种时要注意保持无菌条件,并在保存前对菌种进行鉴定和纯化,以确保保存的菌种是纯种菌株。
此外,保存后的菌种要定期检查其存活
率和纯度,必要时进行保存方法的更替。
食用菌菌种保藏的方法
食用菌菌种保藏的方法
食用菌是一种广泛使用的食品,如何保存食用菌的菌种是非常重要的。
下面介绍几种常用的菌种保藏方法。
一、冷冻法
冷冻法是将菌种置于低温下,使其处于冷冻状态以达到保藏的目的。
将菌丝均匀地涂于平板上,置于-80℃的低温冷冻柜中冷冻,或将菌丝混入15%甘油溶液中,用液氮冷冻保存。
这种方法保存的菌种质量较好,保藏时间较长。
二、干燥法
将菌丝培养在无菌环境下,培养到菌丝生长至顶部时,用无菌石英砂或无菌滤纸吸干培养皿内的水分,再将石英砂或滤纸中的菌种置于无菌条件下进行干燥,然后密封保存。
这种方法使用简单,保存时间较长,但保存的菌种易受到氧气、温度和湿度等因素的影响。
三、冷藏法
冷藏法是将培养好的菌种置于低温环境下进行保存。
将培养好的菌种涂于平板上,进行初步培养,再将平板用无菌纸包好,置于4℃的冰箱中保存。
这种方法保存的菌种质量较好,但保存时间较短。
四、液氮保存法
将培养好的菌种混入15%甘油溶液中,用液氮冷冻保存。
这种方法保存的菌种质量较好,保存时间长达数年,但需要液氮存储设备。
五、糖分保藏法
将培养好的菌种混入10%蔗糖水溶液中,用常温保存。
这种方法保存的菌种质量较好,保存时间长达数年,但需要注意保藏容器的密封性。
不同的菌种保藏方法适用于不同的情况,我们需要根据实际情况选择合适的方法。
同时,在进行菌种保藏时,需要注意保藏容器的密封性、温度、湿度等因素,以确保保存的菌种质量。
菌种储藏说明范文
菌种储藏说明范文朋友!如果你手里有菌种需要储藏,那可得好好看看这份说明啦,这可是保证菌种能好好保存,日后还能活力满满发挥作用的秘籍呢!一、短期储藏(1 2周)1. 常温储藏(如果菌种比较耐折腾的话)首先呢,要找个干净、干燥的地方。
你可别把菌种随手扔在厨房水槽边那种湿漉漉的地方,那可不行。
把装有菌种的容器(像小试管或者小瓶子之类的)放在一个纸盒里,就像给它安个小房子,避免阳光直射。
阳光要是一直照着菌种,就像一直给它烤火,它可受不了,会被热坏的。
2. 冰箱冷藏(适合大多数菌种)如果你的菌种比较娇弱,那冰箱冷藏层就是个不错的选择。
温度大概设置在4 8℃就好。
在把菌种放进去之前,一定要确保容器密封得严严实实的。
要是密封不好,冰箱里那些怪味就会钻进菌种里,而且冰箱里的水汽也会让菌种受潮,就像给它洗了个冷水澡,这对它可不好。
二、中期储藏(1 6个月)1. 甘油冷冻保存。
这个方法稍微复杂一点,不过很有效哦。
先准备好甘油溶液。
一般来说,甘油和培养基(或者水)按照1:1或者1:2的比例混合就可以了。
就像调一杯特别的饮料,不过这杯饮料是给菌种喝的,能让它在低温下过得舒服点。
然后把菌种小心地混到甘油溶液里,轻轻晃一晃,让它们充分接触。
接着把混合好的菌种甘油溶液放到小离心管里,标记好菌种的名字和日期。
这就像给菌种做个小身份证,以后找它的时候就方便多了。
最后把小离心管放到 -20℃的冰箱里。
这个温度对菌种来说就像进入了一个冰爽的小世界,它可以在里面安安静静地待上好几个月呢。
1. 液氮冷冻保存。
这可是个很厉害的方法,不过需要一些特殊的设备哦。
要把菌种处理一下,让它处于合适的状态。
这就像给它穿上一层特殊的防护服,具体的处理方法根据不同的菌种会有所不同,你得查一查对应的资料或者请教一下专家。
然后把处理好的菌种放到专门的液氮保存管里,标记清楚。
最后把保存管放到液氮罐里。
液氮的温度超级低,大概 -196℃呢,菌种在里面就像被施了魔法一样,时间好像都停止了,能保存很长很长时间。
菌种的保藏方法
菌种的保藏方法菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
菌种保藏的目的是保存菌种的遗传信息、保持菌种的稳定性和纯度,为后续的研究提供保障。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
1. 冻干法冻干法是一种常用的菌种保藏方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻干管吸取菌液。
将冻干管放入液氮中,冷冻至-80℃,待冻干后,将管子密封,保存在-80℃的冰箱中。
冻干菌株可以保存多年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
2. 静态液氮法静态液氮法是一种高效、长期保存菌株的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入液氮中,冷冻至-196℃,保存在液氮罐中。
静态液氮保存的菌株可以保存数十年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
3. 冷藏法冷藏法是一种简单、易行的菌株保存方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将冻存管放入4℃的冰箱中保存。
冷藏法保存的菌株可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
4. 活体保存法活体保存法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
活体保存法可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
5. 长期培养法长期培养法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
每隔一段时间,将菌株转移到新的培养基上进行培养,以保持菌株的纯度和稳定性。
总之,菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
保存菌种最好的方法是
保存菌种最好的方法是菌种是微生物学研究中非常重要的实验材料,其保存质量直接影响着后续实验的结果。
因此,科学家们一直在探索最好的菌种保存方法。
下面我们将介绍一些常见的菌种保存方法,希望对您有所帮助。
首先,冷冻保存是最常见的菌种保存方法之一。
将菌种悬浮液加入到含有冻存剂的冻存管中,然后迅速冷冻至-80℃或更低的温度。
这种方法可以有效地延长菌种的保存时间,但需要注意的是,冷冻过程中应尽量避免冻存剂与菌体接触过久,以免对菌体产生不利影响。
其次,干燥保存也是一种常用的菌种保存方法。
将菌种培养在适当的培养基上,然后用干燥剂将菌落中的水分去除,最后将干燥的菌落保存在干燥的环境中。
这种保存方法适用于一些耐干燥的菌种,可以有效地延长菌种的保存时间。
另外,液氮保存也是一种被广泛应用的菌种保存方法。
将菌种悬浮液直接浸入液氮中保存,可以将菌种保存时间延长到数年甚至数十年。
但是,使用液氮保存菌种需要注意安全问题,液氮具有极低的温度,操作时务必小心谨慎,以免造成意外伤害。
除了上述常见的保存方法外,还有一些新型的菌种保存技术也在不断涌现。
比如,冷冻干燥技术可以将菌种在低温下冷冻,并在真空环境下将水分去除,从而达到保存的目的。
此外,一些生物技术公司还开发了各种特殊的保存方法,如超低温保存、冷冻干燥和冷冻复苏等,这些方法在一定程度上提高了菌种的保存质量和保存时间。
总的来说,选择合适的菌种保存方法需要根据具体的菌种特性和实验需求来决定。
在保存菌种的过程中,需要注意保存环境的清洁和干燥,避免细菌和真菌的污染。
另外,定期检测保存菌种的活力和纯度也是非常重要的,及时更换保存方法或重新分装菌种,以确保菌种的保存质量。
综上所述,菌种的保存方法多种多样,选择合适的保存方法可以有效地延长菌种的保存时间,保证实验结果的准确性。
希望本文介绍的方法对您有所帮助,谢谢阅读!。
保存菌种的方法
保存菌种的方法
保存菌种是微生物学研究中非常重要的一项工作。
菌种可以通过不同的方法进行保存,以保证其长期的存活和保持其特性。
以下是几种常见的保存菌种的方法:
1. 冷冻保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后将细菌悬液添加到含有冷冻保护剂的离心管中,将其置于-80℃的冰箱中冷冻保存。
这种方法可以长期保存菌株,但需要注意冻存液的配制以及冷冻和解冻的操作。
2. 干燥保存:将菌株在富含营养物的培养基上生长,将其转移到无菌纸片上,然后在室温下晾干并密封保存。
这种方法不需要低温保护,但需要在干燥的条件下保存,并且菌株的保存时间较短。
3. 防冻干保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后将其转移到无菌滤纸片上,在防冻干剂的条件下进行干燥处理,并在干燥后密封保存。
这种方法可以在室温下保存菌株,并且可以长期保存,但需要注意干燥和密封的条件。
4. 长期冷藏保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后在4℃的冰箱中长期保存。
这种方法简便易行,但保存时间较短,通常不超过6个月。
需要注意的是,保存菌株的方法应根据不同的菌株和实验需求来选择。
保存菌株时也需要注意无菌操作,选择适当的保存容器和保存条件,并及时更新保存记录,以保证菌株保存的质量和可靠性。
简述菌种保藏的几种方法及条件。
简述菌种保藏的几种方法及条件。
菌种保藏是重要的生物资源的保护和利用过程,其主要方法有:
一、冷冻法。
冰冻法是最常用的保藏菌株的方法,也是目前最理想的保藏方法之一,其主要原理是将活菌体放入冰冻室,温度由常温降至-80℃,使得菌种活动受到抑制,在-80℃的状态下可以长期保存。
二、液氮法。
液氮法是一种依靠低温和高压技术保存菌种的方法,主要是将活菌体置入液氮容器中,使其处于-195℃的极低温状态。
三、干燥法。
干燥法是将活菌体及高浓度营养培养基同时干燥,使其中的水份完全蒸发而获得半干燥的状态,这种状态下可以防止菌种的增殖。
四、水银法。
水银法是一种利用活菌体对水银的耐受性,将活的菌体悬浮在7%的水银中的保存方法。
保藏菌种的条件:
1、环境温度应该控制在0~4℃,并保持温度稳定。
2、控制保藏过程中的湿度,干燥法中的湿度应在10%~15%之间,而冷冻、液氮保藏则要求保证容器中有足够多的液氮,避免菌种因温度过高而复苏。
3、控制光照,避免菌株遭受接触紫外线的伤害、褪色、衰退和增强其致病性等。
4、控制空气中的致病因子;
5、定期检测样品的质量,确保其始终处于较好的保藏状态。
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实验室菌种保存常用方法
实验室菌种保存常用方法一、概述微生物具有容易变异的特性,因此,在保存过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态。
二、常用保存方法1.斜面低温保存法将分纯的待存菌接种于适宜的固体斜面培养基上,得到充分生长后,用封口膜封口,贴上标签,保存于4℃的冰箱中。
此法操作简单、使用方便、不需要特殊设备,是实验室菌种保存最常用的方法。
但保存时间短,一般每个月都要移种1次,而且菌种容易变异,所以此方法只适合实验室短期实验菌株的保存。
2.半固体琼脂法用接种针将以分纯的待存菌,穿刺接种于半固体中,放入培养箱培养后出,封上无菌的液体石蜡,贴上标签,放4℃冰箱保存。
此方法简便易操作,不需特殊设备、技术难度不大,但保存的时间不长,一般只能保存1年以内,而且对抵抗力弱以及一些特殊菌种大概只能存活3~6个月,需要频繁的传代,这样很容易使菌株受到污染、变异。
所以此方法不适用菌种的长期保存,只适合实验室一些要求不高的菌种的短期保存。
3.液体石蜡保存法将液体石蜡灭菌,放于37℃恒温箱中,使水汽蒸发掉备用。
再将已分纯的待存菌在最适宜的斜面培养基中培养,使得到健壮的菌体,用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡,注入已长好的斜面培养基上,用量以高出斜面1cm为准,将试管直立,贴上标签,置4℃下保存。
此法制作简单,不需要特殊设备,菌种可以保存1年左右不需要经常移种,缺点是保存的时候需要直立放置。
此方法适合实验室短期保存,而且保存时需要一定的空间。
4.高层半固体琼脂石蜡保存法将待存菌经平板划线分离后,挑单个菌落用接种针反复穿刺接种到高固体琼脂培养基中,经培养箱培养后取出,用灭菌过的液体石蜡滴加到半固体琼菌种管表层约0.5cm高度,贴上标签,存放4℃冰箱。
此法操作简便,不需要特殊设备,效果好,可以保存菌株1~2年。
所以适合实验室菌株的较长期的保存。
5.纸片法将已分纯的待存菌用无菌镊子镊取纸片,在纸片上刮取4~5个菌落,入冻存管内,盖上盖子后用封口胶布封住边缘,贴上标签,放入冰箱冷冻保存(-20℃左右)。
菌种保藏的几种方法
菌种保藏的几种方法
1. 冷冻保藏:把微生物悬浮在特定培养基中,置于-80℃或以下的低温条件下,使其失去酵母菌能够进行分裂和繁殖的能力。
2. 干燥保藏:将微生物分散悬浮在一定浓度的特定培养基中,然后用离子交换树脂吸附、电泳或超声波处理,使其失去水分而形成干燥有机物,再用热风烘干或真空烘干,将其存放在4-10℃的干燥室中进行保存。
3. 液氮保藏:采用特定的培养基将菌种分散悬浮,用离子交换树脂吸附、电泳或超声波处理,形成无水有机物,再将其放入液氮容器中,放入液氮中冷冻保存,液氮温度为-196℃,此温度可有效杀灭菌种中的生物活性,以达到保藏目的。
菌种保存方法
菌种保存方法菌种保存是微生物学研究中非常重要的一环,它可以保证菌种的长期保存和稳定性,为科研工作提供了可靠的保障。
下面将介绍几种常见的菌种保存方法。
首先,冷冻保存是最常见的菌种保存方法之一。
冷冻保存是指将培养好的菌种悬浮液或培养物在-80℃以下的低温条件下保存。
在保存前,需要将菌种悬浮液加入一定比例的保护剂,如甘油或DMSO,以增加菌种的冷冻耐受性。
冷冻保存不仅简单易行,而且保存时间长,可以保存数年甚至更长时间。
其次,干燥保存也是一种常用的菌种保存方法。
干燥保存是指将培养好的菌种用干燥剂或者真空干燥的方法将菌种完全脱水,然后保存在低温、低湿的条件下。
这种方法保存的菌种可以在常温条件下保存,并且保存时间也相对较长。
另外,液氮保存也是一种非常有效的菌种保存方法。
液氮保存是指将培养好的菌种悬浮液或培养物直接存放在液氮罐中保存。
由于液氮的温度极低,可以有效地阻止微生物的代谢和生长,因此保存效果非常好。
但是在使用液氮保存时需要注意安全问题,操作人员要具备相关的安全知识和技能。
最后,冷冻干燥保存也是一种常见的菌种保存方法。
冷冻干燥保存是将培养好的菌种在低温条件下冷冻,然后通过真空干燥的方法将菌种脱水保存。
这种方法既兼具冷冻保存和干燥保存的优点,保存效果非常好,被广泛应用于微生物学研究中。
综上所述,菌种保存方法有很多种,选择合适的保存方法需要根据具体的实验要求和条件来确定。
无论采用何种保存方法,都需要严格按照操作规程来进行,以确保菌种的保存质量和稳定性。
希望本文介绍的菌种保存方法对大家有所帮助。
实验室最常用的五种菌种保藏方法
在现代生物学研究和生物技术应用中,菌种保藏是至关重要的环节。
恰当的菌种保藏方法能够确保菌种的活性、遗传稳定性和可用性,为科学研究的持续开展以及相关产业的发展提供坚实的基础。
本文将重点介绍实验室中最常用的五种菌种保藏方法,深入探讨它们各自的特点、适用范围以及操作要点。
一、低温冷冻保藏法低温冷冻保藏法是目前最为广泛应用且效果较为可靠的菌种保藏方法之一。
其基本原理是将菌种置于超低温环境(通常为液氮温度,即-196℃)下,使菌种细胞处于极度冷冻的状态,从而抑制其代谢活动,达到长期保存的目的。
该方法具有诸多显著优点。
低温能够极大地减缓细胞的生理活动,几乎使其处于完全停滞状态,从而有效地延长菌种的存活时间。
低温冷冻保藏对菌种的遗传稳定性影响较小,经过长期保存后,菌种的特性通常能够较好地保持。
操作相对简单,只需将菌种制备成适宜的冷冻保存液,然后置于液氮罐中即可。
在具体操作时,首先要选择合适的冷冻保存液。
常用的冷冻保存液一般含有一定比例的保护剂,如甘油、二甲基亚砜等,它们能够降低细胞内冰晶的形成对细胞的损伤。
制备好冷冻保存液后,将菌种接种到冷冻保存液中,制成菌悬液。
将菌悬液分装到合适的冷冻管中,迅速放入液氮罐中进行保存。
在液氮罐中,要定期检查液氮的液位,确保菌种始终处于适宜的低温环境中。
低温冷冻保藏法适用于大多数微生物菌种的长期保存,尤其对于那些对温度敏感、容易变异的菌种,如细菌中的一些致病菌、真菌中的丝状真菌等,具有良好的保藏效果。
然而,该方法也存在一些不足之处,例如液氮的成本较高,液氮罐的储存空间有限,以及在取出菌种进行复苏时可能存在一定的风险等。
二、干燥保藏法干燥保藏法是利用菌种在干燥环境下代谢活动受到抑制的原理来实现保藏的方法。
常见的干燥保藏法包括沙土管保藏法、滤纸保藏法等。
沙土管保藏法是将菌种接种到无菌的沙土中,然后将沙土管置于干燥器中进行干燥保存。
该方法具有操作简便、成本低廉的特点。
在干燥过程中,菌种细胞内的水分逐渐散失,代谢活动减缓,从而达到保藏的目的。
菌种保藏方法
一、石蜡油低温保藏法本方法的原理是在长好的斜面菌上覆盖灭菌的液体石蜡,达到菌体与空气隔绝,使菌处于生长和代谢停止状态,同时石蜡油还防止水分蒸发,在低温下达到较长期的保藏菌种的目的。
保藏温度要求在-4~4℃下。
液体石蜡法适用于不产孢子的菌种。
具体操作是:菌种为斜面培养菌种,斜面不宜过长;选择纯净优质石蜡油,置三角烧瓶中经过121℃高压蒸汽灭菌1~2h,将其放烘箱中(160℃左右)干热处理,去除灭菌时渗入的水分,待石蜡油变得清澈透明后冷却即可加入斜面,斜面上不能出现气泡,液蜡添加量以高出斜面顶部约1cm为宜。
二、甘油管冷冻保藏法1.试验方法介绍本法也是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。
其方法是,将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。
将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液(108~1010/ml)。
取1ml灭菌甘油放入与甘油充分混匀,使甘油浓度约为10%-30%,于-70℃下冻存。
-20℃保存时间较短。
或采用体积比为8:2的甘油-生理盐水,加入新鲜培养的菌体肉汤,混合均匀后至-20℃冰箱保存。
2.效果该法适用于一般细菌的保存,同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种,适用范围广,操作简便,效果好,无变异现象发生。
甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液,其原因可能是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用,且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分,从而更好地保护了待保存的菌株。
三、真空冷冻干燥法1.试验原理真空冷冻干燥保藏法是兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素,除不宜于丝状真菌的菌丝体外,对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用,不宜用冻干法保存的微生物不到2%。
冷冻干燥法是在低温下快速将细胞冻结,然后在真空条件下干燥,使微生物的生长和酶活动停止。
为了防止在冷冻和水分升华过程中对细胞的损害,要采用保护剂来制备细胞悬液,使菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质,通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。
菌种长期保存方法
菌种长期保存方法
菌种的长期保存方法有多种,常用的包括以下几种:
1. 冷冻保存:将菌株培养物添加适量的保护剂(如甘油、蔗糖等),将菌种冷冻在低温下保存。
通常在-70或更低的温度下保存,可以避免菌种的变异和死亡。
2. 真空冻干保存:将菌株培养物通过真空冷冻干燥技术,制备成干粉状,然后密封保存。
这种方法适用于某些脆弱的菌种,有助于保持菌株的原始特性。
3. 高温烘箱保存:将菌株培养物置于高温(通常为40-50)的烘箱中烘干,然后密封保存。
这种方法适用于耐热的菌株,可以较长时间地保持菌种的活性。
4. 冷冻干燥保存:将菌株培养物进行冷冻干燥处理,制备成干燥粉末,并密封保存。
这种方法可以长期保存菌种,且易于运输和储存。
5. 非洲紫外线灭菌保存:将菌株培养物置于紫外线照射仪中进行灭菌处理,然后密封保存。
这种方法适用于一些容易形成胞内孢子的菌株,可以有效地保持菌种的活性。
选择合适的保存方法应根据菌株的特性以及实验需求来确定,同时在保存过程中应注意使用无菌操作,确保保存的菌种不受外界污染。
保存菌种的方法
保存菌种的方法菌种保存是微生物学中非常重要的一环,因为合适的保存方法可以保证菌株的品质和稳定性,使其能够长期存储。
以下是关于保存菌种的10条方法以及详细描述。
1. 冷冻保存:将菌株生长到对数生长期,用稳定添加剂(例如甘油、二甲基亚砜等)制成含有冷冻保护剂的菌液或菌片,加入液态氮或-80℃冰箱中保存。
这种保存方法适用于细菌、真菌、酵母等样品,能够长期保存,但对于需要氧气或是不能耐受低温的菌株不适用。
2. 真空气体吸口保存:将菌株生长后制成含有添加剂的液态培养基,混合好后放入真空器中,排除气体后,用火焰消毒,制成真空条件下的口密封菌液或菌片,然后保存在4℃下。
这种方法不需要添加保护剂,保存时间较短,但适用于不能耐受低温和不适用于冷冻保存的菌株。
3. 干燥保存:将菌株生长到对数生长期,将细菌涂在玻璃片上,用烘箱干燥后保存在密封袋或密闭容器中。
这种方法适用于细菌,真菌和酵母,可以长期保存,但能否使用仍需进一步验证。
4. 固体培养基上保存:将菌株生长到对数生长期,在固体培养基上形成孢子或菌落,将所长好的固体培养基通过滴管法滴入稳定添加剂中,然后冷冻或冷冻干燥保存。
适用于真菌和酵母等难以保存的菌类。
5. 血清中保存:将菌株生长到对数生长期,加入相当于液态氧气的气体,保护期生产的抗凝血清中,保存在4℃下。
适用于不耐受低温和不能被冷冻保存的菌种。
6. 挤压保存:将菌株生长到对数生长期,用挤压材料制成粘稠的菌株,将其保存在温和的环境中,适用于不适用于氧气的微生物,例如厌氧菌等。
7. 转移保存:将菌株接种在体积较大的液态培养基中,生长到对数生长期,然后将一部分转移到其他培养基上进行保存。
这种方法适用于一些菌株对培养条件较为敏感的样品。
8. 摆动保存:将菌株生长到对数生长期,加入稳定添加剂后,用摆动培养箱或者下摆式培养箱保存。
这种方法可以长期保存,便于使用,适用于通气好的微生物。
9. 融合细胞保存:将两个不同的细胞系合并后保存,可以保持其品质和繁殖能力。
高中保存菌种的方法
高中保存菌种的方法
在高中生物实验中,保存菌种是非常重要的一环。
正确的保存方法可以保证菌种的活性和纯度,为后续实验提供可靠的基础。
下面介绍几种高中保存菌种的方法。
1. 冷冻保存法
冷冻保存法是一种常见的保存菌种的方法。
将菌种培养在富含营养物质的培养基上,生长到对数期后,用无菌的冰冻管将菌液吸入管内,加入等体积的保护剂(如甘油、DMSO等),在-80℃的冰箱中保存。
这种方法可以保存较长时间,但需要注意的是,菌种的冷冻速度要快,解冻时也要迅速,以保证菌种的活性。
2. 干燥保存法
干燥保存法是将菌种培养在富含营养物质的培养基上,生长到对数期后,用无菌的吸管将菌液吸入管内,滴在无菌的滤纸上,晾干后放入无菌的干燥瓶中保存。
这种方法可以保存较长时间,但需要注意的是,干燥的时间不能过长,否则会影响菌种的活性。
3. 冷藏保存法
冷藏保存法是将菌种培养在富含营养物质的培养基上,生长到对数期后,用无菌的冰冻管将菌液吸入管内,放在4℃的冰箱中保存。
这种方法可以保存较短时间,但是操作简单,适合保存一些常用的
菌种。
4. 静置保存法
静置保存法是将菌种培养在富含营养物质的培养基上,生长到对数期后,用无菌的吸管将菌液吸入管内,放在无菌的培养皿中,不加任何保护剂,放在恒温培养箱中保存。
这种方法适用于一些易于保存的菌种,但需要注意的是,保存时间不能过长,否则会影响菌种的活性。
保存菌种是一项非常重要的工作,需要严格按照操作规程进行,以保证菌种的活性和纯度。
在保存过程中,需要注意无菌操作,避免污染,同时选择适合的保存方法,以满足实验的需要。
菌种的保存名词解释
菌种的保存名词解释菌种的保存是指将某种真菌或细菌的纯种分离出来,并以特定的方式保存下来,以便于研究、利用和保护。
在生物学和微生物学领域,菌种的保存被广泛应用于学术研究、工业应用以及生物资源的保护。
一、菌种的定义菌种是指菌株的一种分类单位,是对具有相同性状、遗传特征和形态特征的真菌或细菌群体的统称。
它是生物学研究中的基本单位,不同的菌种拥有独特的遗传特征,并在不同的环境条件下表现出不同的生物学特性。
二、菌种的保存方式1. 冷冻保存:冷冻保存是最常见的菌种保存方式之一。
通常使用液氮或低温冷冻器将菌种冷冻存储在极低的温度下。
这种方法可以有效地延长菌种的保存时间,并保持菌落原始的遗传特征和生物学特性。
2. 干燥保存:干燥保存是将菌种培养物在特定条件下干燥,以去除水分并防止细菌或真菌的生长。
这种方法适用于一些耐干燥的菌种,能够在缺水的情况下保持活力,并可长期保存。
3. 低温保存:低温保存是将菌种存储在低温环境中,如冰箱或冰柜中。
这种方法相对简单易行,并可保持菌种的存活率和遗传特性。
三、菌种的保存机构为了方便和促进菌种的保存和交流,世界范围内建立了许多菌种保存机构。
这些机构致力于收集、分类、保存和研究各种菌种,同时提供菌种的鉴定、分发和信息查询服务。
1. 世界菌种保存中心 (World Data Center for Microorganisms):作为国际联合科学组织的的一个分支,该机构负责协调全球的菌种保存和研究工作。
它承担了菌种的鉴定、保存和分类的任务,并向全球用户提供菌种资源和相关信息。
2. 全球菌种文化集中保藏中心 (Global Culture Collection Network):这是一个全球性的菌种文化集中保藏机构网络,致力于保藏世界各地的菌种资源,并推动资源共享和交流。
3. 国内菌种资源保存中心:我国设有多个地方和机构专门负责菌种的保存工作,如中国科学院微生物研究所和中国菌种保藏管理中心等。
实验室菌种保存方法
实验室菌种保存方法1、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。
传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。
传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。
培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。
一般地,大多数菌种的保藏温度以5C为好,像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37 C进行保存,而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。
传代培养保存法虽然简便,但其缺点也很明显,如:①菌种管棉塞经常容易发霉;②菌株的遗传性状容易发生变异;③反复传代时,菌株的病原性、形成生理活性物质的能力以及形成抱子的能力等均有降低;④ 需要定期转种,工作量大;⑤杂菌的污染机会较多。
2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
此法可防止干燥,并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。
其具有方法简便的优点,同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物(如产孢能力低的丝状菌)的保存,而某些细菌如固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。
3、载体保存法:即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。
常用的有方法包括以下几种,如:①土壤保存法:主要用于能形成抱子或抱囊的微生物菌种的保藏。
方法是在灭菌的土壤中加入菌液,立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥,然后冷藏或在室温下密封保存。
保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜,土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。
使微生物在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是:取适量土壤(5 克)置于塞有棉塞的试管中,加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤最大持水量的60%为宜),然后高压灭菌。
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细菌鉴定卡保存菌种[4]
本法适用于使用VITEK全自动微生鉴定仪的实验 室。方法是将鉴定卡标注后直接放置-20℃冰箱保 存,复苏时将鉴定卡直接从-20℃移至35℃,待小 孔液体完全融化后,以无菌手续,用注射器抽吸 出阳性生长孔内的液体,点种于合适平板,置 35℃孵箱内24~48小时即可。该法生化卡内的细 菌反复冻融 5次,分离出的细菌效果相同。葡萄 球菌属、肠杆菌属、念珠菌属存活时间不小于29 个月;肠球菌属、黄杆菌属、不动杆菌属存活时 间不小于21个月,链球菌属和假单胞菌属存活时间 不小于10个月。
菌种管由传统的玻璃菌种管改为0.5ml带盖塑料离 心管。方法:①将塑料离心管置耐高压塑料离心 管盒内并用双层报纸包好,高压蒸汽15磅15min消 毒,放烤箱80℃烤干。②在净化工作台内将脱脂 牛奶洗下的浓厚菌悬液用长毛细玻璃滴管加到塑 料离心管的底部,每只0.2ml左右,切记不要将牛 奶污染离心管口。③将加好菌液的离心管盒置20℃冰箱预冻,预冻好后把离心管盒放置到冷冻 干燥机干燥箱内冻干。④冻干后在净化工作台内 压好离心管盖,不抽真空。贴标签,用封口膜封 离心管口。放-20℃冰箱保存。
菌种的保存方法介绍
江西省临床检验中心 吴茂红
临床微生物实验室经常能够分离到一些有 意义的菌种,但接种在平板上的细菌放 4℃冰箱只能保存数天,并且细菌在培养基 上移种 3次后,其形态、菌落、毒力等均 易发生变异[1],监测日常工作的室内质控用 标准菌株也需要长期留存。所以尽可能长 期有效地留存菌种对于系统地分析当前流 行株的生物学、分子生物学特征及耐药性 变迁,医院感染病原学调查、新药临床研 究都十分重要的意义。本文介绍几种常用 的菌种保存方法
低温冷冻保存法 实验室必须配备-20℃以下低温 冰箱,冰箱温度越低,保存的 时间越长。
滤纸片低温冷冻保存菌种方法[2]
将新华滤纸片剪成 3mm× 3mm,经高压蒸汽灭菌 置无菌器皿中备用,0.5ml无菌带盖塑料离心管。 将待保存菌种在血平板上分离纯化后,用无菌小镊 子夹住滤纸片,在平板上刮取多量细菌,放在塑料 离心管内, 1只离心管中可放数十片带菌滤纸片, 然后盖上盖子,用胶布将盖口封严,注明患者姓名, 菌名及保存日期等以备查找。将塑料管放在-70℃ 冰箱内保存。使用时将菌种分别从塑料离心管中取 出 1片,放入增菌肉汤中,35℃孵育18~24h,再 将菌悬液移种于血平板上。本方法适于保存对营养 要求不高的细菌,而不适于苛养菌的保存。
⑵血液琼脂斜面保存法:链球菌及肺炎球 菌等对营养要求较高的细菌应接种于血液 琼脂斜面上, 37℃培养生长后,放 4℃冰 箱保存。链球菌须半个月至 1个月移种一 次,肺炎球菌则须 4d移种一次。 ⑶鸡蛋斜面保存法:将细菌接种于鸡蛋斜 面上,经 37℃18-24h培养后,加无菌液体 石蜡至斜面浸液,再超出约1cm,置 4℃冰 箱保存。此法用于保存含有Vi抗原的沙门 氏菌及其它含表面抗原的细菌,可保存3-6 个月。
商品化菌种保存管
每只保藏管中含20-25个小珠以及缓冲液, 使用时将菌落挑入缓冲液中,混匀,将缓 冲液吸去,置-70℃冰箱保存可达10年,20℃冰箱可保存1-3年。复苏时,只需将小 珠接入肉汤或平板上滚动即可。商品化菌 种保存管操作简单,但价格偏高。笔者预 计随着经济的不断发展和实验室条件的改 善,使用的单位将会越来越多。
湿牛奶冷冻法[3]
材料 ①保护剂牛奶的准备:新鲜牛奶经脱脂棉 反复 3次过滤后,10磅10min高压蒸气灭菌后,冰 箱保存备用。②菌种管的处理:先经清洁液浸泡 1天,之后用清水冲洗,再用蒸馏水浸泡过夜,以 达中性,然后管口塞上棉花,经15磅30min高压蒸 气灭菌备用。方法 将各种细菌种于各自生长良 好的平板培养基上,经分纯后在37℃孵箱孵育18h 后,用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔,然后用无 菌毛细滴管吸取菌悬液滴入菌种管球部,每管球 部约有一半的菌液,之后火焰封口,保存于-20℃ 冰箱。抵抗强的细菌至少可保存 3年,抵抗力弱 的细菌保存不低于 2年。
⑷吕氏血清斜面:白喉棒状杆菌可保存在 该培养基上,其成份为 1 %葡萄糖肉汤 (pH7.4) 1份,无菌牛血清或兔血清 3份。 白喉棒状杆菌在此培养基上生长迅速、旺 盛,菌体形态典型,如在培养基中再加入 5%-10%的中性甘油,则培养出的白喉棒 状杆菌异染颗粒更为明显,单24小时后即 衰老成为多形态,很少有异染颗粒,菌体 粗大3-4倍,置 4℃可保存 2周至 1个月。
斜面保存法
⑴普通琼脂斜面保存法:葡萄球菌、肠道 杆菌等对营养要求不高的一股细菌可接种 于普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无 糖肉膏液,以防干涸 (但变形杆菌"OX"及伤 寒杆"O"菌株宜接种于干燥的琼脂斜面以防 变异 )。用橡皮塞塞紧,经37℃18-24h培养 后,存放于 4℃冰箱中,一般可保存3-6个 月。
冷冻真空干燥保存法
该法是目前保存菌种的最佳方法,具有如下几个 突出的优点:①适用范围广。除少数不产生孢子 只产生菌丝体的丝状真菌不宜采用此方法保藏外, 其他各大类微生物如细菌、放线菌、酵母菌、丝 状真菌及病毒均可采用此方法保藏;②保藏期长, 成活率高。有人报道保藏在真空冷冻干燥安培管 中的真菌成活期长达40多年[5],一般微生物至少 可保存 10余年;③微生物在保藏期内可避免其它 杂菌污染;④便于携带运输,易实现商品化生产。 其缺点为需要一定的设备(冷冻真空干燥机)、 操作繁琐等。
砂土管保存法
适用于产芽孢的细菌
将过筛后的ห้องสมุดไป่ตู้性细砂烘干,装入小试管内 约lcm高,塞以棉塞,灭菌烘干备用。用无 菌生理盐水洗下培养基上的细菌培养物, 制成菌悬液。然后吸此菌悬液约0.5m1注入 砂土管内,以砂土全部浸湿为度。塞好棉 塞,放入干燥器内抽干。然后放在装有氯 化钙 (吸水剂 )的干燥瓶内,置冰箱保存备 用。需用时可取一接种环砂土接种于适宜 培养基上培养即可。
临床微生物实验室可以根据 本室的条件,挑选最适合的 菌种保存法,也可以加以改 良,其原则是除了菌种存活 外,还必须保证其生物学性 状不发生改变。
谢 谢!
常规保存法
该法操作简单,只需普通冰 箱保存,每个临床微生物实 验室均可采用。但缺点是留 存时间短,传代频繁,菌种 易变异。
半固体穿刺保存法
用穿刺接种法将细菌培养物接种于半固体培养基 内,经 37℃18-24h培养后,加一层无菌的液体石 蜡,厚度约为 1cm,置冰箱保存。肠道杆菌及葡 萄球菌等,一般可保存3-6个月。当需传代移种时, 将半固体菌种管倾斜使液体石蜡流至一边,再取 菌移种于新的培养基。将沾有少量液体石蜡的接 种环浸于 95%酒精中片刻,再烧灼灭菌以免直接 在酒精灯上烧灼时,液体石蜡四处溅散而引起污 染。如保存副溶血性弧菌可加入NaCl制成3.5%高 盐半固体,在室温下可保存 1个月。
该改良法优点有:⑴操作过程大大简化, 菌种管口不需溶封,不抽真空。⑵菌种管 抗破损性极佳;⑶菌种管体积超小。⑷成 本低廉,易于商品化生产、推广。笔者使 用该改良法近七年,本省发放菌种上万只 没有破损情况出现;数次发放嗜血杆菌、 链球菌、奈瑟氏菌等苛养菌,生长情况良 好。近几年我们还向华东地区部分兄弟省 分提供了室间质评菌种四万余只,效果满 意。