微生物的接种技术
(完整版)微生物的接种技术
微生物的接种技术
1 目的
1.1学习掌握微生物的几种接种技术
1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节
2 实验说明
将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，则实验结果就不可靠，影响下一步工作的进行。
3 实验器材
3.1 器械和用品
酒精灯，玻璃铅笔，火柴，试管架、接种环、接种针、接种钩、滴管、移液管、三角型接种棒等接种工具。
3.2 菌种和培养基
菌种：大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
培养基：普通琼脂斜面和平板,营养肉汤,普通琼脂高层(直立柱)。
4 实验流程
斜面接种法→液体接种法→固体接种法→穿刺接种法。
5 操作步骤
5.1 斜面接种法
斜面接种法主要用于接种纯菌，使其增殖后用以鉴定或保存菌种。
通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，肉汤中的纯培养物接种到斜面培养基上。操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行，先点燃酒精灯。
将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在前，接种管在后，斜面向上管口对齐，应斜持试管呈45～0度角，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。以右手在火焰旁转动两管棉塞，使其松动，以便接种时易于取出。
细菌培养与接种技术课件
平板划线法：适 用于分离纯化细
菌
涂布接种法：适 用于细菌计数和
菌落形态观察
液体接种法：适 用于细菌培养和
菌种保存
斜面接种法：适 用于菌种保存和
菌种鉴定
接种操作的注意事项
1
2
3
4
接种前，确保接种 环、接种针等工具
已经灭菌
接种时，注意无菌 操作，避免污染
接种过程中，注意 观察细菌生长情况， 及时调整培养条件
04
特殊成分：根 据细菌的特定 需求，选择含 有特殊成分的 培养基，如抗 生素、激素等
培养条件的控制
温度：细菌生长 所需的适宜温度
范围
湿度：保持培养 环境的湿度，防
止干燥
氧气：提供充足 的氧气，促进细
菌生长
营养物质：提供 细菌生长所需的 营养物质，如葡 萄糖、氨基酸等
细菌培养的步骤
1
准备培养基：选择合适的培养基，如LB培养基、MRS培养基等
3
细菌培养与接种 的应用
微生物检测
2019
检测方法：培 养法、PCR法、
免疫法等
2021
检测结果：指导 生产、质量控制、
风险评估等
01
02
03
04
应用领域：食品、 药品、环境、生
物技术等
2020
源自文库
检测目的：确 定微生物种类、
实验3-微生物接种技术
实验三微生物接种技术
一、实验目的
1、掌握无菌操作在微生物接种过程中的重要性。
2、掌握几种常用的微生物接种方法。
3、掌握微生物微生物扩大繁殖的基本方法。
4、认识微生物接种工具
二、实验原理
微生物接种技术是生物科学研究中最基本的操作技术。由于实验目的、培养基种类及容器等不同，所用接种方法不同，如斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种等，以获得生长良好的纯种微生物。为此，接种必须在一个无杂菌污染的环境中进行严格的无菌操作；同时，因接种方法的不同，常采用不同的接种工具，如接种针、接种环、移液管和玻璃刮铲等。
三、实验器材
主要仪器及设备无菌室、超净工作台、培养箱、振荡器、接种针、接种环、接种钩、接种铲，试管固体斜面培养基、培养基平板、三角瓶液体培养基，PDA平板及斜面，牛肉膏-蛋白胨-琼脂平板、斜面培养基、牛肉膏-蛋白胨液体培养基、试管半固体培养基。
菌种大肠杆菌（Escherichia coli)、青霉(Penicillium sp．)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae Hansen)、细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)放线菌等。
四、操作步骤
(一)斜面接种技术具体操作如下：
1、贴标签接种前在试管上贴上标签，注明菌名、接种日期、接种人姓名等。贴在距试管口径2-3厘米的位置。
2、点燃酒精灯。
3、接种用接种环将菌种移接到贴好标签的试管斜面上。无菌操作程序简述如下：
⑴手持试管将菌种和用于接种的斜面两支试管用大拇指和其他四指握在左手中、使中指位于两试管之间。斜面向上，并使它们位于水平位置(图a)。
实验微生物接种技术讲解
实验微生物接种技术讲解实验微生物接种技术讲解
微生物接种篇一：实验微生物接种技术
一、目的：
学习微生物工作的基本接种方法，建立纯培养技术中的“无菌”概念，掌握无菌操作技术。
二、原理：
所谓接种就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌，并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。本实验要求严格进行无菌操作，一般是在无菌操作台或在实验室内火焰旁进行。根据不同的实验目的和培养方式，可以采用不同的接种工具和接种方法。
三、实验材料：
斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒等。
四、操作步骤
（一）无菌操作
菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行，接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。用前先清洁好卫生，再进行消毒处理。可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用，或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。
操作者的手应先用肥皂洗净，再用酒精棉球消毒；整个操作过程都要靠近酒精灯火焰；接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌；棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上；不能有跑、跳等力度大的动作，以免引起空气大振动而增加染菌机会。
（二）接种方法
（1）斜面接种：
从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微生物的接种。
左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。用右手先将棉塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，同时将管口在火
焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或直线。
图1.斜面接种示意图
（2）液体接种：
微生物的分离、接种和培养技术
微生物的分离、接种和培养技术
一、实验的目的和内容
目的：掌握微生物接种和分离纯化技术，掌握无菌操作技术。
内容：用平板划线法分离微生物；学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。
二、基本原理
在自然界中，各种微生物是在互为依赖的关系下共同生活的。因此，为了取出特定的微生物进行纯培养，必须从中把他们分离出来。
微生物接种技术是进行微生物实验和相关研究的基本操作技能。无菌操作是微生物接种技术的关键。接种是将微生物或微生物悬液引入新鲜培养基的过程。由于实验目的、培养基种类及实验器皿等不同，所用接种方法不尽相同。斜面接种、液体接种、固体接种和穿刺接种操作均以获得生长良好的纯种微生物为目的。
分离培养微生物时，要考虑微生物对外界的物理、化学等因素的影响。即选择该类微生物最适合的培养基和培养条件。在分离、接种、培养过程中，均需严格的无菌操作，防止杂菌侵入，所用的器具必须经过灭菌，接种工具无论使用前后都要经过灭菌，且在无菌室或无菌箱中进行。
三、材料及器材
（一）菌种：大肠杆菌、枯草杆菌，金黄色葡萄球菌，酵母菌。
（二）培养基：肉汤培养基试管斜面，肉汤半固体培养基，肉汤固体培养基试管斜面，肉汤固体培养基平板，查氏培养基试管斜面，查氏培养基平板。
易
（三）仪器及其他工具：接种环，接种针，接种钩，镊子，酒精灯，火柴，酒精棉，试管架，标签纸，恒温培养箱等。
四、方法与步骤
（一）接种。
1、试管菌种转接：
试管细菌菌种转接主要用于菌种的活化、分离、纯化。
（1）将菌种试管与待接种的试管培养基依次排列，挟于左手的拇指与其他四指之间，用右手的无名指与小指和手掌边拔出棉塞并挟住。
微生物的无菌操作及接种技术
加强对实验人员的无菌操作培训，提高其无菌意识和操作 技能，确保实验的准确性和可靠性。
定期检查和维护实验环境
定期对实验室环境进行检查和维护，确保实验室的清洁度 和无菌状态，为微生物实验提供良好的环境保障。
关注新兴技术，推动微生物学发展
关注基因编辑技术
基因编辑技术如CRISPR-Cas9等的发展为微生物学研究提供了新的手段，可以更加精确 地研究微生物的基因功能和调控机制。
斜面接种法
用接种环或接种针伸入试管培养基内，挑取少量菌苔，然后从斜面底部 向上划一条直线。该方法主要用于移种纯菌或检查菌种纯度。
03
液体培养基接种法
用无菌移液管或无菌注射器吸取一定量的液体培养基，然后注入到Baidu Nhomakorabea一
个无菌容器中。该方法适用于细菌、酵母菌等微生物的液体培养。
接种过程中注意事项
无菌操作
在整个接种过程中，必须保持无菌操作，避免微 生物污染。所有使用的器具和培养基都必须经过 灭菌处理。
重要性
无菌操作是微生物学实验的基础，对于研究微生物的生长、代谢、遗传等方面 具有重要意义。同时，无菌操作也是生物技术、医学、食品科学等领域中不可 或缺的实验技术。
微生物实验室基本要求
01
02
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实验室环境
微生物实验室应设在清洁 、干燥、通风良好的地方 ，避免阳光直射和灰尘飞 扬。
微生物的接种技术
（二）穿刺接种
用接种针挑取菌种（针必须挺直），自培养基的 中心垂直地刺入半固体培养基中，直至接近管底， 但不要穿透，然后沿原穿刺线将针拔出，塞上试管 塞，烧灼接种针。
五、实验结果 1、待接种菌种培养长出后，看划线是否标准 2、观察穿刺接种生长状态 六、思考题 1、什么是无菌操作 2、接种时应注意的问题有哪些
4、右手拿接种环通过火焰烧灼灭菌，在火焰边用 右手的手掌边缘和小指/小指和无名指分别夹持 试管帽，将其取出，并迅速烧灼管口。
5、将灭菌的接种环伸入菌种试管内，先将环接触试 管 内壁或未长菌的培养基，达到冷却的目的，然后再 挑取少许菌苔。将接种环退出菌种试管，迅速伸入 待接种的斜面试管，用环在斜面上自试管底部向上 端轻轻地划直线，勿将培养基划破，也不要使环接 触管壁或管口。
实验七 微生物的接种技术
一、实验目的
熟悉微生物的无菌接种技术和方法
二、实验原理
微生物接种是将一种微生物移接到另一灭过菌 的新鲜培养基中，使其繁殖生长的过程。
方法有：斜面接种、液体接种、平板接种、穿 刺接种等。
无菌操作：培养基灭菌后，用灭过菌的无菌工 具将含菌材料接种于灭菌培养基上的过程。
三、实验材料 1、菌种：大肠杆菌（Ec） 2、培养基：营养琼脂斜面培养基、
牛肉膏蛋白胨半固体培养基 3、器材：接种环、接种针、酒精灯
微生物的接种技术(斜面接种和平板接种)
接种要注意哪些环节才能避免杂菌的污染？
实训室
公开课级别：
校级
课题：
微生物的接种技术（斜面接种和平板接种）
食品组苏秀华
一、学习目标
1.认知目标：
理解“接种”的概念，掌握斜面接种和平板接种的操作方法
2.情感态度观念：
培养科学严谨的实验态度，养成良好的职业习惯
3.运用：
能够正确规范地完成斜面接种和平板接种
二、教材分析
1.教学重点：
斜面接种和平板接种的操作
b.旋松管塞先用有于松动棉塞或塑料管盖，以便接种时拔出。
c.取接种环右手拿接种环(如握钢笔一样)，在火焰上将环端灼烧灭菌。然后将有可能伸入试管的其余部分均灼烧灭菌，重复此操作，再灼烧一次。
d.拔管塞用右手的无名指、小指和手掌边先后取下菌种管和待接试管的管塞，然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧得过烫)。
h.塞管塞取出接种环，灼烧试管口，并在火焰旁将管塞旋上。塞棉塞时不要用试管去迎棉塞，以免试管在移动时纳入不洁空气。i.将接种环灼烧灭菌。放下接种环，再将棉花塞旋紧。
（2）平板接种
以中指、无名指和小指托住培养皿下盖底部，用虎口及食指扶住上盖，再将斜面菌种管放于培养皿之上，以拇指压住。然后用接种环移取菌种按“Z”形划线。（其他细节参考斜面接种技术）
3.实验器材
器械和用品酒精灯，火柴，试管架、接种环等接种工具
微生物的接种技术
引言：
微生物的接种技术是一种利用活体微生物来改变或影响其宿主环境以达到某种特定目的的方法。它在农业、医疗、环境保护等领域中有着广泛的应用。本文将详细介绍微生物的接种技术的原理、分类以及在不同领域中的应用。
概述：
微生物的接种技术是通过将特定的微生物引入特定的环境中，从而影响宿主环境中的生物群落，并达到改变环境的目的。接种技术的成功与否取决于合适的微生物选择、适当的接种方法和适宜的环境条件。
正文：
一、微生物接种技术的原理
1.1接种微生物的目的和原因
1.2微生物的选择原则
1.3接种微生物的策略
二、微生物接种技术的分类
2.1入侵性接种技术
2.2非入侵性接种技术
2.3增强型接种技术
2.4保护性接种技术
2.5组合接种技术
三、农业领域中的微生物接种技术应用
3.1有益微生物的接种
3.2有害微生物的控制
3.3好氧微生物的应用
3.4厌氧微生物的应用
3.5接种微生物的途径与技术
四、医疗领域中的微生物接种技术应用
4.1微生物解毒剂的应用
4.2高效微生物生产技术的应用
4.3微生物酶的应用
4.4微生物制剂的应用
4.5微生物植入技术的应用
五、环境保护领域中的微生物接种技术应用
5.1污水处理中的微生物接种技术
5.2土壤修复中的微生物接种技术
5.3水质净化中的微生物接种技术
5.4生态系统修复中的微生物接种技术
5.5环境监测与评估中的微生物接种技术
总结：
微生物的接种技术是一种重要的生物技术手段，可以在农业、医疗、环境保护等领域中发挥重要作用。它有助于改善宿主环境、增强微生物活性和促进生态平衡。在应用微生物接种技术时，需注意选择适宜的微生物菌种、合适的接种方法以及适当的环境条件，以达到最佳的效果。
《药学微生物》2-2-2 实训 微生物的接种与纯培养技术
2．液体接种
接种与纯பைடு நூலகம்养技术
（2）用液体培养物接种液体培养基 ①用无菌吸管或移液管吸取菌液接种； ②直接把液体培养物移入液体培养基中接种； ③利用高压无菌空气通过特制的移液装置把液体培养物注入液体培养基 中接种； ④利用压力差将液体培养物接入液体培养基中接种（如种子罐菌液接入 到发酵罐中）。
5．三点接种法
接种与纯培养技术
① 标明三点位置 欲使点接的三点分布均匀，可用记号笔先在平板底部 以等边三角形状标上三点。
② 取接种针 拿接种针，先在火焰上烧红灭菌，并在平板培养基的边缘 冷却且蘸湿。
③ 沾取孢子 将灭过菌并蘸湿的接种针伸入菌种管,用针尖沾取少量霉菌 孢子。
④ 点接 以垂直法或水平法把接种针上沾着的孢子以垂直的方向轻轻的 点接到平板培养基表面预先做好标记的部位。注意在点接时切勿刺破培 养基。
实训 微生物的接种 与纯培养技术
一、实训目的
接种与纯培养技术
熟悉无菌操作在微生物接种过程中的重要性。 掌握几种常用的微生物接种方法。 掌握微生物的培养方法。
二、实训原理
接种与纯培养技术
将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内 的过程叫做接种。
细菌的接种与培养—细菌的接种类型(微生物检验课件)
细菌的接种工具
接种与分离技术
平板划线分离法：1.分区划线 2.连续划线 斜面接种法 穿刺接种法 液体培养基接种法 倾注平板法 涂布接种法
细菌接种目的及方法
平板划线接种法： ➢ 目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以获得纯
菌。 ➢ 方法
分区划线法：适用于含菌量较多的标本 连续划线法：适用于含菌量较少的标本 液体培养基接种法 穿刺接种法：用于观察细菌动力 斜面接种法 倾注培养法：用于细菌计数
简述细菌接种的基本方法。 简述细菌各种接种方法的意义。 如何做到无菌操作？
来自百度文库
细菌接种技术
知道平板划线法、斜面、液体和半固体培养基等各种接种 方法
知道接种细菌用具、接种细菌的环境要求 学会正确选择并使用接种细菌用具的方法 明确各种培养基的用途
细菌的人工培养
无菌技术：是防止微生物进入物品或机体，同时防止被检 物中可能存在病原微生物污染周围环境及工作人员的规范 操作技术。
微生物的无菌操作及接种技术
一、微生物无菌操作技 术
无菌操作材料：
材料
器械和用品：酒精灯、记号笔、标签、火柴、灭菌培养皿、无菌 水、试管架
菌种 培养基：
微生物无菌操作技术与接种技 术
二、原理：
无菌技术：指在微生物实验工作中，控制或 防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操 作方法和有关措施。
(2)特点：进程曲折，发展缓慢，直到20世纪30年代情况才发生变 化。
3．交通通讯变化的影响 (1)新式交通促进了经济发展，改变了人们的通讯手段和 ，出行 方式转变了人们的思想观念。
(2)交通近代化使中国同世界的联系大大增强，使异地传输更为便 捷。
(3)促进了中国的经济与社会发展，也使人们的生活 多。姿多彩
消毒器材：接种试管、无菌室内的凳子、试管架、 天平、工作台等
进入无菌室前的准备
wk.baidu.com（1）定期检查无菌环境的空气是否符合规定； （2）用紫外线灭菌处理30~60min； （3）检查无菌器材是否完备； （4）实验人员进入无菌室前先用肥皂洗手，然后用75
％酒精棉球将手擦干净。 （5）缓冲室内换上洗净并经紫外线灯照射过的工作衣、
[串点成面·握全局]
一、近代交通业发展的原因、特点及影响 1．原因 (1)先进的中国人为救国救民，积极兴办近代交通业，促 进中国社会发展。 (2)列强侵华的需要。为扩大在华利益，加强控制、镇压 中国人民的反抗，控制和操纵中国交通建设。 (3)工业革命的成果传入中国，为近代交通业的发展提供 了物质条件。
微生物分离纯化与接种技术
微生物分离纯化与接种技术
微生物分离纯化与接种技术
微生物学是一门研究微生物的学科，在医学、食品工业、环境保护等行业有着广泛的应用。而微生物的研究需要用到微生物分离纯化与接种技术，这些技术可以让我们有效地获取纯净的微生物，并在实验室中控制其生长条件，从而更好地研究微生物的特性和应用价值。
按照微生物的性质，可以将微生物分为细菌、真菌和病毒三大类。不同的微生物类型需要不同的分离纯化与接种技术。
细菌分离纯化技术是微生物学中最基础的技术，其中最常用的方法就是传统的培养基分离法。这种方法直接将微生物置于固体培养基中，允许其在特定的温度和pH条件下生长，然后通过形态特征和生长习性的观察，将细菌区分出来。而对于那些难以直接用固体培养基分离纯化出来的细菌，我们还可以采用流式细胞术分离法、限制性酶切片段长度多态性分析法等先进的分离技术。
真菌分离纯化技术一般采用无菌活体动物或者人工培养基的方法。在真菌分离和鉴定时，需要根据真菌的外部形态、菌丝的生长特性和菌落的颜色等特征来进行区分和鉴定。为了保证真菌的纯度，我们也需要通过重复传代、提取DNA序列、限制性酶切片段长度多态性分析等方法进行多角度的鉴定，以确保纯化出来的真菌种类正确。
病毒是一种极小的微生物，一般无法在常规的细胞培养中生长。因此，分离纯化技术对于病毒的研究尤其重要。常见的病毒分离技术有鸡胚
培养、细胞培养等。鸡胚培养可以在和病毒感染相同的生理和代谢环
境下使病毒生长，而细胞培养则是让病毒通过培养基中细胞对它的反
应来分离纯化。此外，病毒也可以通过电镜、PCR等现代分析技术来
微生物纯种分离,培养及接种技术实验原理
微生物纯种分离,培养及接种技术实验原理
微生物纯种分离、培养及接种技术是微生物学中最基本的实验技术之一。其目的是从混合的微生物菌群中分离出单一的微生物菌落，并在适宜的培养条件下进行纯化和生长，以获得纯种微生物。
一、实验器材和试剂
1.灭菌针
2.毛细胞计数板
3.显微镜
4.平板接种器、针头
5.无菌匀浆棒、吸管
6.细菌培养基
7.消毒液
二、实验步骤
1. 样品处理及制备
首先需要选择一份待测试的样品，包括土样、水样、空气、食品等，然后将样品采集到无菌容器中，再将其送到实验室。
在进行样品处理之前，需要先进行简单的初步处理，将样品进行稀释或者过滤，将其中的杂质和大颗粒物去除，以利于后续实验的操作。
接下来需要进行制备培养基，根据不同的微生物种类，需要选择适当的培养基进行培养。通常情况下，我们可以使用凝胶培养基、液体培养基、甜菜汁培养基等，以满足微生物在不同环境下生长所需的营养物和成分。
2.分离纯化
分离纯化是该实验的关键步骤。将经过预处理的样品移到无菌试管中，打开试管口，加入适量的制备好的培养基，然后利用匀浆棒或吸管将混合物均匀混合。
然后利用平板接种器将混合物接种到培养基平板上，使其密切接触。然后将接种好的平板置于恒温箱中，以利于微生物的生长和营养物质的自我繁殖。
在接种后2-7天内，不同类型的微生物将在培养基平板上生长出不同的菌落，每一种
菌落都代表一种单一的微生物。将这些菌落分离提取，并再次进行培养，就能得到单纯的
微生物菌种。
3.纯种微生物菌种接种
在获得单纯的微生物菌种之后，需要将其再次接种到培养基中进行培育。将相应体积
微生物的无菌操作及接种技术
工业生产中的微生物接种
2 、压差法
先用棉花球蘸消毒剂覆盖在种子罐接种口的橡皮塞上，消毒 5 ～ 10min ，将连接在盛有菌悬液的容器上的接种针头迅速 插入接种口的橡皮小孔中，然后平衡种子罐与盛菌悬液的容 器之间的压力，接着降低种子罐的压力，菌悬液就会注入到 种子罐里。接种完后，再用消毒剂拭净接种口的小孔。
6、验操作过程的无菌操作要求包括哪些内容？
7、 接种时，为何要尽量使试管平放？ 8、穿刺接种时能否将接种针直接穿透培养基？
工业生产中的微生物接种
工业生产中培养的菌种接入种子罐时，一般先制成菌悬液。 常用的方法有压差法、火焰封口法等。
1 、火焰封口法
种子罐的接种口周围设有沟槽，接种时先在沟槽里注入少 量酒精，然后用火焰点燃酒精，使接种口被包围在一堆火 焰之中，接着将菌悬液倒入种子罐中即可。
• 从已生长好的菌种斜面上挑取少量菌种移植至另一新鲜 斜面培养基上的接种方法。
• 用于好气性微生物的接种。
※ 斜面接种
1) 标记：接种前在试管上注明菌名、接种日期、接种人姓名
2) 点燃酒精灯。
3) 接种： （1）手持试管 将菌种管和待接斜面管用大姆指和其他四指握 在左手中，中指位于两管之间。斜面向上，尽量放平。 （2）旋松管塞 （3）接种环灼烧灭菌
2、常用的接种方法
※划线接种
连续划线法
2、常用的接种方法
微生物接种技术
实验八微生物无菌接种技术
一、实验原理
微生物接种就是在无菌条件下，用接种工具（针、环）从一支原菌种中挑取少许菌体，接入到另一支新的培养基上扩大培养的技术。
要想得到大量的菌种，适应生产、科研和教学要求，就要进行微生物的接种，扩大菌种数量。接种因使用不同容器、不同的培养基，达到不同的目的，而有不同的接种方法，但它们的基本要求是相同的。通常接种都应在空气经过消毒灭菌的接种室或接种箱或超净工作台内完成。
二、实验步骤
1.斜面接种
（1）左手夹住试管（2）灼烧接种环
（3）拔出棉塞，夹在小指、无名指上，管口过火
（4）取菌、接种，接种后在火焰上方迅速塞好棉塞
（5）写好标签（菌种名、日期、接种者姓名），贴于斜面正上方前端约1cm处.
（6）于37度培养箱中培养24小时。（全班统一装入一保鲜袋）
（7）一星期后观察分离效果，拍照，分析结果
2.平板培养基（平板）制备
（1）将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。
（2）右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰。
（3）用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10到20ml）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。
（4）等待平板冷却凝固。
3.涂布平板法（以小组为单位，对混合菌菌悬液进行涂布分离）
(1)用75%酒精或0.01%新洁而灭擦洗双手,进行消毒处理。
（2）将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。
(3) 取少量菌液滴加到培养基表面。
（4）将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10s。
（5）用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。
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1目的
1.1学习掌握微生物的几种接种技术
1.2建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节
2实验说明
将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，则实验结果就不可靠，影响下一步工作的进行。
3实验器材
3.1器械和用品
酒精灯，玻璃铅笔，火柴，试管架、接种环、接种针、接种钩、滴管、移液管、三角型接种棒等接种工具。
3.2菌种和培养基
菌种：
大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphyloccus aureus）。
培养基：
普通琼脂斜面和平板,营养肉汤,普通琼脂高层(直立柱)。
4实验流程
斜面接种法→液体接种法→固体接种法→穿刺接种法。
5操作步骤
5.1斜面接种法
斜面接种法主要用于接种纯菌，使其增殖后用以鉴定或保存菌种。
通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，肉汤中的纯培养物接种到斜面培养基上。操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行，先点燃酒精灯。
将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在前，接种管在后，斜面向上管口对齐，应斜持试管呈45～0度角，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。以右手在火焰旁转动两管棉塞，使其松动，以便接种时易于取出。右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍，尤其是接镍铬丝的螺口部分，要彻底灼烧以免灭菌不彻底。用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。棉塞应始终夹在手中如掉落应更换无菌棉塞。
将灼烧灭菌的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养基上，待冷却后再从斜面上刮取少许菌苔取出，接种环不能通过火焰，应在火焰旁迅速插入接种管。在试管中由下往上做S形划线。接种完毕，接种环应通过火焰抽出管口，并迅速塞上棉塞。再重新仔细灼烧接种环后，放回原处，并塞紧棉塞。将接种管贴好标签或用玻璃铅笔划好标记后再放入试管架，即可进行培养。
5．2液体接种法
多用于增菌液进行增菌培养，也可用纯培养菌接种液体培养基进行生化试验，其操作方法与注意事项与斜面接种法基本相同，仅将不同点介绍如下：
由斜面培养物接种至液体培养基：
用接种环从斜面上沾取少许菌苔，接至液体培养基时应在管内靠近液面试管壁上将菌苔轻轻研磨并轻轻振荡，或将接种环在液体内振摇几次即可。如接种霉菌菌种时，若用接种环不易挑起培养物时，可用接种钩或接种铲进行。
由液体培养物接种液体培养基时，可用接种环或接种针沾取少许液体移至新液体培养基即可。也可根据需要用吸管、滴管或注射器吸取培养液移至新液体培养基即可（图4-5）。
接种液体培养物时应特别注意勿使菌液溅在工作台上或其他器皿上，以免造成污染。如有溅污，可用酒精棉球灼烧灭菌后，再用消毒液擦净。凡吸过菌液的吸管或滴管，应立即放入盛有消毒液的容器内。
5.3固体接种法
普通斜面和平板接种均属于固体接种，斜面接种法已讲了，不再赘述。固体接种的另一种形式是接种固体曲料，进行固体发酵。按所用菌种或种子菌来源不同可分为：
用菌液接种固体料，包括用菌苔刮洗制成的菌悬液和直接培养的种子发酵液。接种时按无菌操作将菌液直接倒入固体料中，搅拌均匀。但要注意接种所用水容量要计算在固体料总加水量之内，否则会使接种后含水量加大，影响培养效果。
用固体种子接种固体料。包括用孢子粉、菌丝孢子混合种子菌或其他固体培养的种子菌。将种子菌于无菌条件下直接倒入无菌的固体料中即可，但必须充分搅拌使之混合均匀。一般是先把种子菌和少部分固体料混匀后再拌大堆料。
5.4穿刺接种法
此法多用于半固体、醋酸铅、三糖铁琼脂与明胶培养基的接种，操作方法与注意事项与斜面接种法基本相同。但必须使用笔直的接种针，而不能使用接种环。
接种柱状高层或半高层斜面培养管时，应向培养基中心穿刺，一直插到接近管底，再沿原路抽出接种针。注意勿使接种针在培养基内左右移动，以使穿刺线整齐，便于观察生长结果。
6结果
分别记录并描绘平板划线、斜面和半固体接种的微生物生长情况和培养特征。
7思考
7.1如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养？请写出实验的主要步骤。
7.2为什么高氏I号培养基和马丁氏培养基中要分别加入酚和链霉素？如果用牛肉膏蛋白胨培养基分离一种对青霉素具有抗性的细菌，你认为应如何做？
7.3试述如何在接种中，贯彻无菌操作的原则?
7.4以斜面上的菌种接种到新的斜面培养基为例说明操作方法和注意事项。
7.5试设计一个实验，从土壤中分离酵母菌并进行计数。