8维生素B12注射液的定性鉴定及含量

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维生素B12注射液的定性鉴别及定量分析

实验十六维生素B12注射液的定性鉴别及定量分析一、实验目的1．掌握定性鉴别的方法和吸光系数法的定量方法；2．熟悉紫外分光光度计的操作方法；3．了解含量测定、标示量的百分含量及稀释度等计算方法。

二、实验原理维生素B12是一类含钴的卟啉类化合物，具有很强的生理作用，可用于治疗恶性贫血等疾病。

维生素B12不是单一的一种化合物，共有七种。

通常所说的维生素B12是指其中的氰钴素，为深红色吸湿性结晶，制成注射液其标示含量有每毫升含维生素B1250、100或500μg等规格。

维生素B12的水溶液在278n m±1nm、361nm±1nm与550nm±1nm三波长处有最大吸收。

药典规定，在361nm波长处的吸光度与278nm波长处的吸光度的比值应为1.70～1.88。

361nm波长处的吸光度与550nm波长处的吸光度比值在3.15～3.45范围内，这为定性鉴别E值（207）为测定注射液的依据。

药典规定，以361nm±1nm处吸收峰的百分吸光系数%11cm实际含量的依据。

三、实验仪器及试剂1．仪器紫外－可见分光光度计、石英吸收池、容量瓶、吸量管。

2．试样维生素B12注射液。

四、实验内容与步骤1．试样溶液制备精密吸取维生素B12注射液样品（100μg/mL）3.0mL，置于10mL量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，得试样溶液。

2．测定将试样稀释液装入1cm石英吸收池中，以蒸馏水为空白，在278nm、361nm波长处与550nm 波长处分别测定吸光度。

五、数据处理1．定性鉴别根据测得的278nm、361nm与550nm波长处的吸光度数据，计算该两两波长处的吸光度比值，并与药典规定的幅度值比较，进行维生素B 12的鉴别。

2．吸光系数法将361nm 波长处测得的吸光度A 值与48.21相乘，即得试样稀释液中每毫升含维生素B 12的微克数。

按照百分吸光系数的定义，每100mL 含1g 维生素B 12的溶液（1％）在361nm 处的吸光度应为207。

维生素B12注射液的定性鉴别及含量测定2

实验十一维生素B 12注射液的定性鉴别及含量测定实验者：李丽贝合作者：倪佳琴一、实验目的1.1掌握722G 型分光光度计的操作方法 1.2熟悉定性鉴别及定量测定方法二、实验原理维生素B 12注射液为含钴的有机药物，为粉红色至红色的澄明液体，用于治疗贫血等疾病。

维生素B 12在278±1mm 、361±1mm 与550±1mm 波长处最大吸收，根据其吸收光谱的形状和最大吸收波长下吸光度比值，可进行定性鉴定。

测量最大吸收波长下吸光度，可算出供试品浓度。

三、实验仪器与试剂仪器 722G 型分光光度计，玻璃洗手池，容量瓶（10ml ），吸量管（1ml ）试剂维生素B 12注射液（1ml ：0.5mg ）四、操作步骤4.1定性鉴别根据中国药典（1995年版）规定，取含量测定项下的溶液，在361±1nm 与550±1nm 处测得的吸光光度比值应为3.15~3.45，即为合格。

4.2定量分析精密量取本品适量，加水定量稀释成1ml 含维生素B 1225ug 的溶液，在361±1nm 处测得吸光度，维生素B 12的吸光系数（E 1%1cm ）按207计算，即得可求得样品的含量五、实验结果 1.（1）定性鉴别（吸光度比值）结果=3.357(规定为3.15~3.45)1% E 1cm 1% E 1cm 361nm 361nm = A 361nm A 550nm（2）定量分析（吸光系数法）A/E1%1cm x1/100x稀释因子标示量%= x100% =90.821标示量（g/ml）(规定为90.0~110.0)六、实验体会这个实验要求我们能正确使用分光光度计，所以还得提前捉摸一下，在这个实验过程中出现了与实际不符合的情况，应该是由于我们的操作失误，又因为数据与数据之间相差很小，所以更加需要细心，在老师的帮助下，顺利的得到了较为准确的数据，体会到自己仍应该更用心地去学习。

维生素b12测定标准编码

维生素b12测定标准编码维生素B12测定标准编码是指用于测定维生素B12水平的标准化方法和编码体系。

维生素B12是一种重要的水溶性维生素，对于维持神经系统的正常功能、红细胞的形成以及DNA合成都至关重要。

因此，准确测定维生素B12水平对于诊断和治疗相关疾病具有重要意义。

在临床实践中，维生素B12的测定通常采用血清或血浆样本，并且常用的方法是酶联免疫吸附法（ELISA）或放射免疫测定法（RIA）。

这些方法通过测定样本中维生素B12与特定抗体结合的程度来确定其浓度。

为了保证测定结果的准确性和可比性，国际上制定了一系列维生素B12测定的标准编码。

其中最常用的是国际单位（IU）和皮克摩尔（pmol/L）两种编码方式。

国际单位（IU）是一种常用的生物活性单位，用于测定生物活性物质的含量。

在维生素B12的测定中，1 IU表示1微克维生素B12的生物活性。

这种编码方式在临床实践中广泛应用，可以用于评估维生素B12的摄入量和生物利用率。

皮克摩尔（pmol/L）是一种浓度单位，用于表示物质在液体中的浓度。

在维生素B12的测定中，1 pmol/L表示每升液体中维生素B12的浓度。

这种编码方式在科研领域中常用，可以用于比较不同实验室或研究之间的维生素B12浓度。

除了编码方式，维生素B12测定还需要参考范围来判断测定结果的正常与否。

参考范围是指在正常人群中维生素B12浓度的范围，通常以百分位数表示。

不同实验室或研究可能会有略微不同的参考范围，但一般来说，正常成年人的维生素B12浓度范围在200-900 pmol/L之间。

综上所述，维生素B12测定标准编码包括国际单位（IU）和皮克摩尔（pmol/L）两种编码方式。

通过测定维生素B12的浓度，结合参考范围，可以评估维生素B12的水平，对于诊断和治疗相关疾病具有重要意义。

维生素B12测定原始记录表

标准曲线的绘制
标准溶液名称：维生素B12标准工作液标准曲线工作液：低浓度0.01ng/mL，高浓度0.020ng/mL
试管号
S1
S2
S3
S4
S5
S6
S7
S8
S9
S10
标准曲线工作液浓度ng/mL
0.00
0.00
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.08
0.10
维生素B12含量
0.00）
维生素B12含量平均值
p（ng/ml）
试验中维生素B12含量X μg/100g
1
2
3
平均值
A1
B1
C1
D1
A2
B2
C2
D2
检验员：复核人：审核人：
0.00
0.01
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.08
0.10
吸光度1
吸光度2
吸光度3
吸光度平均值
标准曲线Y=
样品测定
提取液定容体积V mL；计算公式 p= 曲线查得维生素B12含量/V1；X=p×V×f×100/（m×1000）
序号
试样质量
m（g）
稀释
倍数f
吸取试样
液体积
V1（mL）
吸光度
样品编号
样品名称
检验项目
维生素B12
检验依据
GB5009.285—2022食品中维生素B12含量的测定
检出限
仪器名称
仪器型号
仪器编号
检测起止日期
环境条件
温度湿度
分析步骤：称取试样_____于250mL灭菌瓶中，用10mL的提取溶液混匀后，加150mL水，摇匀，置于压力灭菌器中121℃水解10min,冷却后用盐酸溶液(1mol/L)调pH至4.5±0.2，转人250mL容量瓶中，定容至刻度。混匀，过滤。移取滤液5mL,加入20mL~30mL水，用氢氧化钠溶液(1mol/L)调pH至6.8±0.2，转入100mL容量瓶中，定容至刻度。根据试样中维生素含量用水对试样提取液进行适当稀释，使稀释后试样提取液中生物素含量在0.01ng/mL~0.02ng/mL范围内。取4支试管，分别加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL试样提取液，补水至5.0mL,加入5.0mL维生素B12测定用培养液，混匀。每个梯度做3个平行。取试管分别加人标准使用工作液低浓度0.0mL(未接种空白)、0.0mL(接种空白)、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.00mL、和高浓度3.0mL、4.0mL、5.0mL,补水至5.00mL,相当于标准系列管中维生素B12含量为0.00ng、0.00ng、0.01ng、0.02ng、0.03ng、0.04ng、0.05ng、0.06ng、0.08ng、0.10ng。加5.0mL维生素B12测定用培养液，混匀。每个梯度做3个平行，绘制标准曲线时，以每点均值计算。所有的试管盖上试管帽，放入灭菌釜内，121℃(0.10mPa~0.12mPa)灭菌5min。试管快速冷却至室温，在无菌操作条件下，将接种液转入无菌管，向每支测定管接种50μL测试均菌液，其中标准曲线管中未接种空白和样品空白除外。置于36℃士1℃恒温培养箱中培养19h~20h,直至获得最大混浊度。将培养好的测定管用漩涡混匀器混匀。用厚度为1cm比色杯，于550nm处，以未接种空白管调节透光率为100%或吸光度为0，读出接种空白试管的读数，再以接种空白试验管为空白，调节透光率为100%或吸光度为0，然后依次测定标准系列管、试样系列管吸光值。

51药分作业计算题

药物分析计算题药物分析13 周芷莹 13035401511. 检查维生素C 中重金属时，若取样量为1.0g ，要求重金属含量不得过百万分之十，应吸取标准铅溶液（每1ml 相当于0.01mg 的Pb ）多少毫升？解： ()30.00001 1.010=1.0ml 0.01LS V c ⨯⨯==％2. 依法检查枸橼酸中的砷盐，规定含砷量不得超过1ppm ，问应取检品多少克？(标准砷溶液每1ml 相当于1μg 砷)解：()62110 2.01CV S g L ppm⨯⨯===－3. 取葡萄糖2g ，加水溶解后，依法检查铁盐，如显色与标准溶液3ml （10μgFe/ml ）比较，不得更深，铁盐限量为多少？解： 610103100100=0.00152cV L S -⨯⨯=⨯=⨯％％％4. 用直接滴定法测定阿司匹林原料药的含量，若供试品的称样量为0.3838（g ），氢氧化钠滴定液的浓度为0.1015（mol/L ），消耗氢氧化钠滴定液的体积为21.50(ml ），每1ml 的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）相当于l8.02mg 的阿司匹林，则该阿司匹林的百分含量含为？解：30.101518.0221.500.1=100=100=102.50.383810TVF W ⨯⨯⨯⨯⨯含量％％％％5. 乙琥胺的含量测定：精密取本品约0.1517g ，精密称定，加二甲基甲酰胺30ml 使溶解，加偶氮紫指示液2滴，在氮气流中，用甲醇钠滴定液(0. l035mol/L)滴定至溶液显蓝色，消耗甲醇钠滴定液（0.1035mol/L ）23.55ml 并将滴定的结果用空白试验校正。

空白试验消耗甲醇钠滴定液（0.1035mol/L ）10.27ml 。

每1ml 甲醇钠滴定液(0. l mol/L)相当于14.12mg的C7H11NO2。

计算乙琥胺的百分含量。

解：()30.103514.1223.5510.27()0.1=100=100=99.00.151710T V V FW⨯-⨯-⨯⨯⨯含量％％％％6. 用剩余碘量法测定葡萄糖的含量，在分析天平上精确称取样品0.1026g置于碘量瓶中，加入新煮沸过的冷蒸馏水30ml使溶解，加入I2溶液25.00ml，滴加NaOH 溶液40ml，密塞，封水，暗处放置10min。

维生素b12检测方法标准

维生素b12检测方法标准
维生素B12检测方法标准通常是由专业医学组织或者卫生管理机构制定并推荐的。

常见的维生素B12检测方法包括血清维生素
B12测定、全血维生素B12测定和甲基辛酸测定等。

血清维生素B12测定是最常用的方法，它通过采集静脉血样本，然后在实验室中使用特定的化学试剂来测定血清中维生素B12的浓度。

全血维生素
B12测定则是直接测定全血中的维生素B12含量，通常用于评估维生素B12的储备情况。

甲基辛酸测定是一种新型的维生素B12功能性检测方法，通过测定尿液中的甲基辛酸浓度来评估维生素B12的代谢情况。

这些方法的标准通常包括了样本采集、实验室分析、结果解读和质量控制等方面的详细步骤和要求。

对于样本采集，标准通常会规定使用特定类型的采血管和采血技术，以确保样本的准确性和可靠性。

在实验室分析过程中，标准通常会规定使用特定的仪器设备和试剂，以及严格的操作流程和质量控制措施，以确保测定结果的准确性和可比性。

对于结果解读，标准通常会规定参考范围和异常结果的判定标准，以便医生能够准确诊断患者的维生素B12状况。

此外，标准还会要求实验室具有相应的认证和资质，并且参与
外部质量评估和监测，以确保检测结果的可靠性和准确性。

总的来说，维生素B12检测方法的标准涵盖了从样本采集到结果解读的全过程，旨在确保检测结果的准确性和可靠性，以指导临床诊断和治疗。

维生素B12注射液使用方法

维生素B12注射液使用方法维生素B12注射液，主要用于巨幼细胞性贫血，也可用于神经炎的辅助治疗。

药品名称：维生素B12注射液药品类型：工伤医保甲类双跨汉语拼音：Wei Sheng Su B12 Zhu She Ye用途分类：维生素B补充药一、成份本品主要成份为维生素B12，化学名称：Coα-[α-（5，6-二甲基苯并咪唑基)]-Coβ氰钴酰铵。

二、化学结构式：分子式：C63H88CoN14O14P分子量：1355．38辅料为：氯化钠。

三、性状本品为粉红色至红色的澄明液体，无臭，无味。

四、适应症主要用于巨幼细胞性贫血，也可用于神经炎的辅助治疗。

五、规格1.1ml：0.25mg；2.1ml：0.5mg；3.1ml：1mg。

六、用法用量肌注，成人，一日0.025～0.1mg或隔日0.05～0.2mg。

用于神经炎时，用量可酌增。

七、不良反应肌注偶可引起皮疹、瘙痒、腹泻及过敏性哮喘，但发生率低，极个别有过敏性休克。

八、禁忌尚不明确。

九、注意事项1.可致过敏反应，甚至过敏性休克，不宜滥用。

2.有条件时，用药过程中应监测血中维生素B12浓度。

3.痛风患者使用本品可能发生高尿酸血症。

4.治疗巨细胞性贫血，在起始48小时，宜查血钾，以防止低血钾症。

十、孕妇及哺乳期妇女用药尚不明确。

十一、儿童用药肌注25～100μg/次，每日或隔日1次。

避免同一部位反复给药，且对新生儿、早产儿、婴儿、幼儿要特别小心。

十二、老年用药尚不明确。

十三、药物相互作用氨基水杨酸可减弱本品的作用。

十四、药物过量尚不明确。

十五、药理毒理本品为抗贫血药。

维生素B12参与体内甲基转换及叶酸代谢，促进5-甲基四氢叶酸转变为四氢叶酸。

缺乏时，导致DNA合成障碍，影响红细胞的成熟。

本品还促使甲基丙二酸转变为琥珀酸，参与三羧酸循环。

此作用关系到神经髓鞘脂类的合成及维持有髓神经纤维功能完整，维生素B12缺乏症的神经损害可能与此有关。

十六、药代动力学肌注后吸收迅速而完全，约1小时血药浓度达峰值；体内分布较广，但主要贮存于肝脏，成人总贮量为4～5mg；大部分在8小时经肾脏排泄，剂量愈大，排泄愈多。

实验八维生素B12注射液检验

实验八维生素B 12注射液检验（吸收系数法和标准曲线法）一、实验目的1、掌握维生素B 12注射液的紫外分光光度法鉴别及含量测定2、掌握吸收系数法定量测定的计算公式。

二、主要仪器与试药维生素B 12注射液、维生素B 12对照品紫外-可见分光光度仪、石英比色皿、10ml 容量瓶（4个）、5ml 吸量管三、实验准备1. 0.1mg/ml 维生素B 12贮备液：精密称取干燥至恒重的维生素B 1210mg ，置100ml 量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

四、实验内容实验原理：维生素B 12分子结构中有共轭体系，具有紫外吸收，故可采用紫外分光光度法鉴别和测定含量。

实验方法：精密量取本品适量，加水稀释至维生素B 12浓度约为25 μg/mL ，作为供试液，照分光光度法，在278nm ，361nm ，550nm 处测定吸光度。

1. 鉴别：规定A 361/ A 278 应为1.70-1.88， A 361/ A 550应为3.15-3.45 。

2. 含量测定吸收系数法：利用上述361nm 处测定得到的吸收度，按其吸收系数E 1％1cm =207 计算含量及标示量百分含量。

标准曲线法：精密量取1.0、2.0、3.0、4.0ml 0.1mg/ml 维生素B 12贮备液，分别置于10ml 量瓶中，用水稀释至刻度。

以溶剂为空白，在361nm 处分别测定吸收度（A ）。

以浓度C 为横坐标，以吸收度A 为纵坐标绘制标准曲线。

将样品在361nm 处测定得到的吸收度代入线性回归方程，计算，即得。

五、计算公式本品为注射剂，采用紫外吸收系数法测定含量，其计算公式为：按标准曲线法定量计算：％稀释倍数标示量％标示量标示量实测100C 100C ×××==E A C％稀释倍数标示量％标示量供标示量实测100C C ××==C C（C 供由A 供代入线性回归方程求得）六、思考题1. 如果取注射液水2ml 稀释30倍，在361nm 处测定A 值为0.698，试计算注射液每1ml 含 B 12多少？如果每1ml 标示量为1mg ，则计算标示量％2. 维生素B 原料药和维生素B 注射液所用的含量测定方法有何不同？3. 吸收系数法与标准曲线法的区别？。

紫外习题+答案

解：对照法
2.5 25.00 1000 0.508 Ci C i 98.1g / mL 10 1000 0.518
B 12标示量%
Ci
标示量
100 % 98.1%
2.紫外-可见吸收光谱曲线呈高斯分布的是： A、多普勒变宽 B、自吸现象
( Ｃ
) D、原子吸收特征OFra bibliotek CH3 CH3
O
O
O
(a)
(b)
(c)
解：（b) > (a) > (c) (b) 中有两个共轭双键，存在K吸收带，(a)中有两个双键，而 (c )中只有一个双键．
10. 紫外及可见分光光度计与可见分光光度计比较，有什么不同之处？为什么？
解：首先光源不同，紫外用氢灯或氘灯，而可见用钨灯，因为二者发出的光的波长范围不同．从单色器来说，如果用棱镜做单色器，则紫外必须使用石英棱镜，可见则石英棱镜或玻璃棱镜均可使用，而光栅则二者均可使用，这主要是由于玻璃能吸收紫外光的缘故．从吸收池来看，紫外只能使用石英吸收池，而可见则玻璃、石英均可使用，原因同上。
5. 在有机化合物的鉴定及结构推测上，紫外吸收光谱所提供的信息具有什么特点？
解：紫外吸收光谱提供的信息基本上是关于分子中生色团和助色团的信息，而不能提供整个分子的信息，即紫外光谱可以提供一些官能团的重要信息，所以只凭紫外光谱数据尚不能完全确定物质的分子结构，还必须与其它方法配合起来．
6.举例说明紫外吸收光谱在分析上有哪些应用．解：（１）紫外光谱可以用于有机化合物的定性分析，通过测定物质的最大吸收波长和吸光系数，或者将未知化合物的紫外吸收光谱与标准谱图对照，可以确定化合物的存在．
（２）可以用来推断有机化合物的结构，例如确定1,2-二苯乙烯的顺反异构体．

维生素B12注射液含量测定

《维生素B12注射液含量测定》项目教学设计方案《维生素B12注射液含量测定》项目教学案例：维生素B12注射液含量测定一项目任务：维生素B12注射液含量测定1 适用专业：中专药剂、检验专业2 适用岗位： QC人员3 学习时间：2课时二教学设计的指导思想在基础化学相关章节的学习中，学生已掌握了溶液的浓度及其计算、紫外-可见分光光度法、注射液含量计算等理论知识，具备了一定的实验操作技能，掌握了配制一定浓度的溶液、使用紫外-可见分光光度计测定溶液的吸收值等实验方法。

但是他们对化学知识在职业岗位中的意义及应用方法缺乏正确的认识。

我们选择该课题作为载体，通过项目教学法，培养学生将知识和技能与实际工作联系起来的思维习惯，以提高他们综合运用化学知识与技能完成实际工作的能力。

采用以具体工作任务引领的项目教学,以职场实际操作为依据,满足相应职业资格要求，使学生在校期间就能掌握今后检验工作的方法、程序及要领，毕业后到企业工作能尽快进入岗位角色。

三项目教学目标：根据学以致用的现代化学教育理念，职业教育以能力为本位、促进学生综合职业能力和发展能力的形成的改革方向，结合一线技能型人才的培养目标以及本课程的特点和优势，特制订以下目标。

1.知识与技能目标：1）学会查阅所需检验药品的质量标准；2）按照操作规程准确地配制一定浓度的溶液；3）能够熟练地使用紫外-可见分光光度计测定物质溶液的浓度并进行含量测定的结果计算；2.过程与方法目标：1）注重对学生专业实作技能的培养，培养学生严谨、规范的操作；2）能运用理论知识解释操作过程；3）使学生掌握工作思路与方法，培养学生观察、动手、发现和解决问题的能力以及独立与协作工作的能力；3.情感与价值观目标：1)学会自觉地以医药行业标准规范自己的工作行为；2)培养学生认真负责的工作态度，科学、严谨的的工作作风，树立质量第一的原则；四教学重点和难点项目教学中以项目贯穿整个教学过程，因此项目是整个教学过程的主线，是能力形成的载体，是学生实践活动的对象，学生通过项目获得知识，提高技能，因此项目的选取与确定是关键。

维生素B12(VB12)检测

维生素B12（VB12）检测
维生素B12（Vitamin B12, VB12），又称为钴胺素，为一种含有3价钴的多环系化合物，是唯一含金属元素的维生素，也是唯一含必须矿物质的维生素，因含钴而呈红色，又称红色维生素，是少数有色的维生素。

维生素B12是唯一的一种需要一种肠道分泌物（内源因子）帮助才能被吸收的维生素，参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血，防止大脑神经受到破坏。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)、液质联用(LC-MS)、生化法，可高效、精准的检测维生素B12的含量变化。

此外，我们还提供其他维生素检测服务以及维生素检测试剂盒产品，以满足您的不同需求。

样品制备：
1）称取粉末样品20 mg；
2）加入10 mL盐酸溶液，震荡摇匀；
3）加入10 mL水，震荡摇匀；
4）将溶液定容到200 mL；
5）用0.45 μm的微孔滤膜过滤；
6）用HPLC检测。

HPLC和LC-MS测定维生素B12样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关质谱参数（中英文）。

3. 质谱图片。

4. 原始数据。

5. 维生素B12含量信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。

维生素B12注射液的含量测定

维生素B12注射液的含量测定维生素B12是人体必需的营养素之一，它参与脂肪代谢、细胞DNA合成以及神经系统功能的维持等重要生理功能。

因此，维生素B12在医药、保健品和食品等领域中得到了广泛应用。

维生素B12注射液是治疗缺乏维生素B12症状的一种有效途径，适用于恶性贫血、营养不良性贫血、神经系统疾病等疾病的治疗。

维生素B12注射液的主要成分为羟基钴胺素，其品质的好坏对治疗效果十分关键。

因此，对于维生素B12注射液中羟基钴胺素含量的准确测定显得尤为重要。

1.实验仪器和试剂（1）分光光度计（2）枸磺酸和磷酸二氢钾混合液（3）硫酸氢钠溶液（4）含有维生素B12的标准品（5）无水氢氧化钠（6）乙醇2.实验方法（1）标准曲线法准备一系列不同浓度的含有维生素B12的标准品溶液，分别为 2、4、6、8 和 10μg/mL。

取相应浓度的标准品溶液 1.0 mL，加入混合溶液 3.0 mL，用 0.1 mol/L 硫酸氢钠溶液调节溶液 pH 值至 4.2 左右。

最后，用 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液稀释至 10 mL，并用分光光度计在 361 nm 波长下测定吸光度。

绘制标准曲线，横坐标为不同浓度的标准品溶液浓度，纵坐标为对应的吸光度值。

利用标准曲线计算样品中维生素B12的含量。

（2）内标法计算维生素B12含量的公式为：维生素B12含量=（样品吸光度-双内标吸光度）/标准曲线斜率。

3.实验注意事项（1）所有试剂应使用纯化和高质量的试剂。

（2）稀释过程要求温度稳定不变，否则会影响结果的准确性。

（3）为确保测定结果准确，对于同一种方法应进行多次实验并取平均值。

总之，维生素B12是人体必需的营养素，维生素B12注射液的含量准确测定对于治疗效果的提高至关重要。

在实验过程中，要严格控制实验基质环境和检测仪器的精准性，以保证测定结果的准确性和可重复性。

项目_维生素B12注射液含量测定

7.记录与计算 1.计算供试品的百分含1量0 % 2.计算平均百分含量%
标示量%= 平均百分含量%
8.结果与判定 1.将测得的含量与药典规定值比较，得出结论。 2.相对偏差均应在±0.5%以内。
相对偏差= 结论：
10
三、实验实施
（一）.使用前仪器的校正和检定
1.波长准确度 1.1 波长准确度的允差范围紫外-可见分光光度计波长准确度允许误差，紫外区为±1nm，500nm处±2nm。
品的吸光度后应减去空白读数，或由仪器自动扣除空白读数后再计算含量。
37
（通则0401）
37
三、实验实施
（三）. 紫外-可见分光光度计的使用
5.供试品溶液的吸光度值的测定
供试品溶液的浓度，除各品种项下已有注明者外，供试品溶液的吸光度以在0.3～0.7之间为宜，吸光度读书在此范围误差较小，并应结合
长加减2nm以内，否则应考虑试样的同一性、纯度以及仪器波长的准确
度。
35
（通则0401） P58
35
三、实验实施
（三）. 紫外-可见分光光度计的使用
5. 供试品溶液的吸光度值的测定
36
36
三、实验实施
（三）. 紫外-可见分光光度计的使用
5. 供试品溶液的吸光度值的测定关于皿差问题：由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试
（一）.使用前仪器的校正和检定
表1 分光光度法允差范围
波长 235 257 313 350
吸收强度最小最大最小最大
吸收系数 E1% 1cm
124.5 144.0 48.6 106.6
允差范围 123.0～126.0 142.8～146.2
47.0～50.3 105.5～108.5

维生素B12注射液1ml：0.25mg处方工艺

维生素B12注射液
药品处方、生产工艺、执行标准
1、规格：1ml：0.25mg
2、维生素B12注射液处方
物料名称处方量（g）
维生素B12 2.5
氯化钠88
注射用水加至10000ml
3、生产工艺
3.1 玻璃安瓿瓶包装维生素B12注射液生产工艺
3.1.1配制
原辅料称量配料粗滤精滤合格药液在已清洁的配料罐内加入适量注射用水，加氯化钠，搅拌溶解，用稀盐酸调PH值（4.5～5.0），加维生素B12，搅拌溶解，加注射用水至全量，搅匀静置15分钟，然后用钛棒过滤器过滤，循环10分钟～20分钟。

用钛棒粗滤并经0.65μm聚丙烯滤芯中间过滤，测定含量、pH值合格后，再用0.22μm聚醚砜滤芯精滤，取样检查药液无可见异物，送料，灌封。

3.1.2 洗瓶
将安瓿采用洗、烘、灌联动机进行自动洗瓶。

3.1.3盘清洗、干燥灭菌
空盘清洁，干燥灭菌，供灌封工段使用。

3.1.4灌封
洁净安瓿瓶合格药液灌封
3.1.5灭菌检漏
灭菌车内装好安瓿瓶进柜升温灭菌检漏冷却
灭菌: 按YXQ.EAY-5-SG水浴锅式检漏灭菌柜操作规程操作
温度为100℃；时间为30分钟
3.1.6灯检烘干
3.1.7印字包装
4、该药品现行标准复印件附后
执行标准：中国药典2000版第二部。

维生素B12注射液的定性鉴定及含量

气味鉴定
02
03
折射率鉴定
通过嗅觉判断维生素B12注射液是否有异常气味，如霉味、酸败味等。
测定维生素B12注射液的折射率，与标准值进行比较，以确定其纯度。
化学性质鉴定
酸碱度鉴定
测定维生素B12注射液的酸碱度（pH值），以检查其是否符合规定范围。
紫外可见光谱鉴定
通过紫外可见光谱法测定维生素B12注射液的吸收光谱，与标准品进行比较，以确定其成分和含量。
结果准确性评估
通过对比标准品和其他已知值，对实验结果进行准确性评估。
结果可靠性评估
对实验结果进行可靠性分析，如重复性、再现性等，以确保结果的可靠性。
04 含量测定结果的分析与解读
Байду номын сангаас据处理与统计分析
数据清洗
去除异常值、缺失值，确保数据准确性。
统计分析方法
选择合适的统计方法，如t检验、方差分析等，对数据进行处理。
荧光法
荧光法是一种基于荧光物质与维生素B12相互作用所产生的荧光特性的测定方法。通过测量荧光信号的强度，可以间接测定样品中维生素B12的含量。
荧光法的原理是利用荧光物质与维生素B12结合后产生的荧光信号，该荧光信号的强度与维生素B12的浓度成正比。通过测量荧光信号的强度，可以得出样品中维生素B12 的含量。
遵循标准的实验操作规程，确保实验步骤的准确性和一致性。
实验环境控制
保持实验室内适宜的温度、湿度和清洁度，以减少环境因素对实验结果的影响。
实验数据记录
详细记录实验过程和数据，以便后续分析和处理。
实验结果的质量控制
数据处理方法
采用合适的数据处理方法，如回归分析、统计检验等，对实验数据进行处理和分析。

紫外可见分光光度计维生素B12含量测定

将待测样品溶液分别倒入比色皿中，在紫外可见分光光度计上测量待测样品溶液在278nm波长处的吸光度值。
6. 数据处理与结果计算
根据朗伯-比尔定律，利用标准溶液的吸光度值和浓度绘制标准曲线，再根据待测样品溶液的吸光度值在标准曲线上查出对应的浓度，从而计算出待测样品中维生素B12的含量。
02 实验材料与设备
离心机
用于分离待测样品中的维生素 B12，以便进行测量。
实验试剂
抗坏血酸
用于还原维生素B12，提高其在紫外可见光下的吸收度。
氢氧化钠
用于调节溶液的pH值，确保实验环境的稳定性。
03 实验步骤
标准溶液的配制
总结词
准备标准溶液，为后续测定提供参考。
详细描述
根据实验要求，准确称取适量的维生素B12标准品，用适宜的溶剂溶解并稀释至所需浓度，制备标准溶液。确保标准溶液的浓度准确可靠，以保障测定结果的准确性。
标准曲线的绘制
总结词
根据标准溶液的浓度和吸光度绘制标准曲线，为后续样品测定提供依据。
详细描述
根据实验要求，取不同浓度的标准溶液，在选定的波长下测定其吸光度值，绘制标准曲线。标准曲线应是一条通过原点的直线，用于将样品的吸光度值转化为相应的浓度值。
样品测定
总结词
根据标准曲线和样品的吸光度值，计算样品的维生素B12含量。
通过紫外可见分光光度计测定，维生素B12溶液在280nm波长下的吸光度分别为0.56、0.58、0.57、0.59。
实验结论
根据吸光度和浓度之间的关系，计算出维生素B12的含量分别为2.30mg/L 、2.42mg/L、2.37mg/L、2.49mg/L 。
结果分析
准确性分析
误差分析