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浅议青霉素结合蛋白测定技术

浅议青霉素结合蛋白测定技术青霉素是一种广泛使用的抗生素，它在治疗感染性疾病时起着非常重要的作用。

然而，对于一些患者来说，它可能会引起过敏反应，这是因为患者对青霉素结合蛋白（PBP）产生了免疫反应。

因此，测定青霉素结合蛋白浓度可以帮助医生更好地诊断和治疗患者。

青霉素结合蛋白测定技术的原理青霉素结合蛋白测定技术是一种免疫测定方法，主要基于抗体-抗原反应原理。

它利用特定的抗体来检测血液或尿液中的青霉素结合蛋白。

首先，制备针对青霉素结合蛋白的抗体。

这些抗体会与青霉素结合蛋白特异性结合，形成抗原-抗体复合物。

然后，将一定量的抗体和未知浓度的样品混合。

当存在青霉素结合蛋白时，它会与抗体结合，形成更多的抗原-抗体复合物。

测定最终复合物的浓度，可以计算出青霉素结合蛋白的浓度。

青霉素结合蛋白测定技术的优势青霉素结合蛋白测定技术有许多优势，具体如下：1. 高度特异性由于它是基于抗体-抗原反应原理，所以只能识别青霉素结合蛋白。

这种高度特异性保证了检测结果的准确性和可靠性。

2. 灵敏度高青霉素结合蛋白测定技术的灵敏度很高，可以检测到非常微小的青霉素结合蛋白浓度。

这与其他测定方法相比具有明显的优势。

3. 操作简便与其他测定方法相比，青霉素结合蛋白测定技术需要较少的样本处理步骤，操作简便。

青霉素结合蛋白测定技术的应用青霉素结合蛋白测定技术可以应用于以下几个方面：1. 诊断过敏反应青霉素结合蛋白浓度的检测可以帮助医生诊断患者是否对青霉素过敏。

如果患者的青霉素结合蛋白浓度高，他们可能会对青霉素产生免疫反应，这需要注意和及时处理。

2. 监测青霉素治疗在患者接受青霉素治疗过程中，青霉素结合蛋白浓度的监测可以帮助医生了解患者在治疗中的反应情况。

如果青霉素结合蛋白浓度下降较慢，可能需要考虑是否要更换抗生素或增加青霉素剂量。

3. 研究青霉素结合蛋白青霉素结合蛋白浓度的测定还可以应用于研究青霉素结合蛋白。

通过测定不同样本中的青霉素结合蛋白浓度，可以了解其变化规律，并探索其功能和作用。

青霉素类药物工业分析与检测方法

2、比浊法：细菌生长产生的浊度与细菌数的增加、细菌群体质量的增加和细菌细胞容积的增加之间，存在着相关性，在一定的范围内符合比耳定律。将抗生素标准品的稀释液与供试品的稀释液分别加入试管中，再加入已接种试验菌的液体培养基，摇匀，置37℃的培养箱中培养24h后，观察试验菌生长情况。由于抗生素浓度不同，试验菌受抑制的程度也不同，因而产生不同程度的混浊。用分光光度计测定其透光率或吸收度，用标准曲线法可测定出供试品的效价。取每mL含24.0、26.8、29.9、33.5和37.5U的链霉素标准品溶液各 1mL，分别加入15支试管中(3个平行)。另取试管3支，每管中各加入供试品溶液1mL。于18支试管中各加入已接种试验菌的液体培养基9mL，摇匀。将标准品管和供试品管置37℃培养箱中培养2～4h 后，取出，分别于每管中各加入12％甲醛溶液0.5mL，摇匀，即可于分光光度计上530nm处以未接种试验菌的液体培养基9mL，加蒸馏水1mL，12％甲醛溶液0.5mL，摇匀作为空白，测定各管内培养物的透光率。以透光度为纵坐标，链霉素浓度为横坐标绘制标准曲线，则可在标准曲线上查出供试品的效价。
青霉素族、头孢菌素族药品中，许多制成钾盐或钠盐供临床使用，因而可利用其火焰反应进行鉴别。
（二）沉淀反应
1、在稀盐酸中生成白色沉淀：青霉素钾(钠) 白色游离基沉淀
头孢哌啶重氮苯磺酸黄色
2、有机胺盐的特殊反应：侧链含有苯羟基基团时，能与重氮苯磺酸试液产生偶合反应而呈色。如：
二、青霉素类药物的鉴别反应（一）官能团的呈色反应：
1、羟肟酸铁反应：碱性环境中与羟胺作用β-内酰胺环破裂生成羟肟酸在稀酸中与高铁离子呈色。
【鉴别】（1）取本品约20mg，加水15ml溶解后，加盐酸羟胺试液与氢氧化钠试液各2ml，放置5分钟后，加盐酸溶液（1→100）3ml与三氯化铁试液1ml，随即振摇，即显赤褐色。

革兰阳性菌青霉素结合蛋白研究进展

菌对１内酰胺类抗生素产生耐药性。不同革兰阳性茵ＰＰ３一Ｂｓ的数量、类和功能不尽相同，在发生ｐ内酰种但一胺类抗生素耐药时，往是ＰＰ相应的基因发生变异，成了细菌耐药机制中的重要部分。往Ｂｓ构
转移酶、基转移酶和丙氨酰一丙氨酸羧肽酶肽（Ｄ羧肽酶）Ｄ，一。糖基转移酶可延长双糖肽的多糖
Ｓ、耐青霉素肺炎球菌（ｅｉｌｎｅｉａｔＡ）ｐｎｃｌｒｓｔｎｉｉｓ
ｓｅｔｃｃｕｎｕｎａ，ＲＰ等嘲。ｔｐｏｏｃｓｅｍｏｉｅＰＳ）ｒｐ另外，在革兰阴性菌中有外膜存在，且具有非常有效的通透屏障作用，阻碍抗生素进入细胞内膜能靶位，少抗生素的吸收；大多数革，很难阻止小分子物质，如抗生
的肽链断裂，放出一个【丙氨酰残基。肽聚糖合释）＿
成过程中的某些反应就是由ＰＰ家族的某些成员Ｂｓ
催化完成的［。２］
素的扩散。所以多数革兰阳性菌不存在膜通透性下降的耐药机制Ｌ。４］
究进展。
存在而对Ｂ内酰胺类抗生素耐药。这种由ＰＰ介一Ｂｓ导的耐药性在革兰阳性菌比革兰阴性菌中更常见，如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
（ｅｈｃｌｉ — ｅｉｔｎｍｔｉｉｌｎｒｓｓａｔｓ口Ｚｃｃ “ ｕｅｓ００ｃｓａｒｕ，ＭＲ—

青霉素与细菌体内的青霉素结合蛋白

青霉素与细‎菌体内的青‎霉素结合蛋‎白，抑制细菌细‎胞壁的合成‎，菌体失去渗‎透屏障而膨‎胀、裂解，同时借助细‎菌的自溶酶‎溶解而产生‎抗菌作用。

青霉素是抗‎菌素的一种‎，是指从青霉‎菌培养液中‎提制的分子‎中含有青霉‎烷、能破坏细菌‎的细胞壁并‎在细菌细胞‎的繁殖期起‎杀菌作用的‎一类抗生素‎，是第一种能‎够治疗人类‎疾病的抗生‎素。

青霉素类抗‎生素是β-内酰胺类中‎一大类抗生‎素的总称。

但它不能耐‎受耐药菌株‎(如耐药金葡‎)所产生的酶‎，易被其破坏‎，且其抗菌谱‎较窄，主要对革兰‎氏阳性菌有‎效。

青霉素G有‎钾盐、钠盐之分，钾盐不仅不‎能直接静注‎，静脉滴注时‎，也要仔细计‎算钾离子量‎，以免注入人‎体形成高血‎钾而抑制心‎脏功能，造成死亡。

【适应症】青霉素适用‎于敏感细菌‎所致各种感‎染，如脓肿、菌血症、肺炎和心内‎膜炎等。

其中青霉素‎为以下感染‎的道选药物‎。

1.溶血性链球‎菌感染，如咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、蜂窝织炎和‎产褥热等。

2.肺炎链球菌‎感染如肺炎‎、中耳炎、脑膜炎和菌‎血症等。

3.不产青霉素‎酶葡萄球菌‎感染。

4.炭疽。

5.破伤风、气性球疽等‎梭状芽孢杆‎菌感6.梅毒（包括先天性‎梅毒）。

7.钩端螺旋体‎病。

8.回归热。

9.白喉。

10.青霉素与氨‎基糖苷灯药‎物联合用于‎治疗草绿色‎链球菌心内‎膜炎。

青霉素亦可‎用于治疗：1.流行性脑脊‎髓膜炎。

2.放线菌病。

3.淋病。

4.奋森咽峡炎‎。

5.莱姆病。

6.鼠咬热。

7.李斯特菌感‎染。

8.除脆弱拟杆‎菌以外的许‎多厌氧菌感‎染。

风湿性心脏‎病或先天心‎脏病患者进‎行口腔、牙科、胃肠道或泌‎尿生殖道手‎术和操作前‎，可用青霉素‎预防感染性‎心内膜炎发‎生。

【用法用量】青霉素由肌‎内注射或静‎脉滴注给药‎。

1.成人：肌内注射，一日80万‎～200万单‎位，分3～4次给药；青脉滴注，一日200‎万～2000万‎单位，分2～4次给药。

青霉素结合蛋白研究进展及新动向

青霉素结合蛋白研究进展及新动向青霉素结合蛋白（PBPs）是广泛存在于细菌表面的一种膜蛋白，是β内酞胺类抗生素的主要作用靶位。

不同细菌其种类及含量都不相同。

但各菌种的PBPs又有许多相似的结构与功能，在细菌生长、繁殖中发挥重要作用。

PBPs结构和数量的改变是产生细菌耐药的一个重要机制。

抗生素虽种类繁多，但在耐药菌的治疗中仍缺乏有效方法。

因此近来围绕PBPs开展了大量的研究工作，希望从分子结构与基因水平认识PBPs，研究细菌耐药的机制，企图获得更有效的治疗手段。

一、青霉素结合蛋白基本概念青霉素是通过干扰细菌表面结构而起作用。

发现青霉素结合蛋白，用放射性同位素标记的青霉素可以标计出细菌表面的PBPs，但后来研究发现并非所有PBPs都是青霉素作用的致命靶位。

所有细菌都含有多种不同青霉素结合蛋白，不同菌属其PBPs含量种类也都各不相同，不同的抗生素通过不同的PBP蛋白结合而产生不同的抗菌活性。

所以与不同PBP结合的抗生素联合应用，往往产生协同作用。

每个菌种都有特异的PBPs称PBPs谱。

在一种菌种中PBPs按分子量大小排序，分别称PBPI，PBP2，PBP3......。

PBPl是分子量最大的一种。

不同菌属PBPs的生理功能相近，且分子结构上也有相似性。

PBPs含量很少，只占细胞膜蛋白总量的1%，不同PBP含量变化确很大，如大肠杆菌中PBPI，PBP2，PBP3含量很少，而PBP5和PBP6却占PBPs量的70%—90%。

不同PBP与抗生素亲和力差别很大。

二、各种青霉素结合蛋白研究进展：PBPs在不同菌种中各不相同，但对其分子结构的研究发现不同菌种都有特异的PBPs，PBPs的生理功能能影响和其结合的抗生素的抗菌活性，对大肠杆菌PBPs的研究最早开展，也是研究最多的，比较具有代表性。

大肠杆菌含有6种PBP，依次为PBPI，PBP2，PBP3，PBP4，PBP5，PBP6。

（1）PBP1主要功能是维持细胞形态，可分为PBP1a，PBPlb两部分。

青霉素结合蛋白与革兰阴性细菌耐药性的研究进展

青霉素结合蛋白与革兰阴性细菌耐药性的研究进展王欣慧;蒋燕群【摘要】青霉素结合蛋白(PBPs)的改变与β-内酰胺类抗生素的亲和力降低是革兰阳性球菌获得抗生素耐药性的重要机制之一,而在革兰阴性细菌中因PBPs的改变导致耐药的出现却十分少见,这一观点忽视了革兰阴性细菌中PBPs在β-内酰胺类抗生素耐药机制中的作用.文章对PBPs的结构、功能、检测方法及与革兰阴性细菌耐药性的关系等方面的研究进展作一综述.%It has been identified that the modification of penicillin-binding proteins ( PBPs) and the reduction of affinity for β-lactams are important mechanisms by which Gram-positive cocci acquire antibiotic resistance. However, among Gram-negative bacteria, the resistance caused by the modification of PBPs has been considered unusual, which neglects the role of PBPs in β-lactams resistance in Gram-negative bacteria. In this paper, the structure, function and research method of PBPs, and the relationship between PBPs and Gram-negative bacterial resistance are reviewed.【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2012(032)006【总页数】4页(P820-822,封3)【关键词】青霉素结合蛋白;革兰阴性细菌;耐药性【作者】王欣慧;蒋燕群【作者单位】上海交通大学附属第六人民医院检验科,上海200233;上海交通大学附属第六人民医院检验科,上海200233【正文语种】中文【中图分类】Q513青霉素结合蛋白(penicillin-binding proteins, PBPs)是细菌细胞内膜上一种特殊的膜蛋白，因其可特异地与β-内酰胺类抗生素共价结合作为β-内酰胺类抗生素的作用靶蛋白而得名。

MRSA耐药机制及检测方法

表达最强，PBP2a产量最多（MIC最高）
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其他耐药相关基因
• 携带mecA基因的MRSA耐药性有很大的差异（MIC为16～2000mg/L）
将转座子 Tn 5 5 1 插入到高度耐药的 M R S A 菌株染色体中，其PBP2a的表达量没有变化，而对 β-内酰胺类抗生素的敏感性显著提高
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Resistance mechanism
• PBPs参与细菌细胞壁合成的转肽酶、羧肽酶和内肽酶,催化糖肽交叉联接反应，对细菌的生长繁殖起着极其重要的作用
• β- 内酰胺类抗生素与PBPs共价结合后，PBPs失去活性而阻断细胞壁的合成,导致细菌死亡
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Resistance mechanism
菌约10－4～10－7，对甲氧西林高度耐药，在50 μg/ml甲氧西林条件
下尚能生存，而菌落中大多数细菌对甲氧西林敏感，在使用抗生素后的几小时内大量敏感菌被杀死，但少数耐药菌株却缓慢生长，在数小时反又迅速增殖。
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overview
• 广谱耐药性 MRSA除对甲氧西林耐药外，对其它所有与甲氧西林相同结构的β-内酰胺类和头孢类抗生素均耐药，MRSA还可通过改变抗生素作用靶位，产生修饰酶，降低膜通透性产生大量 PA B A 等不同机制，对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟喹喏酮类、磺胺类、利福平均产生不同程度的耐药，唯对万古霉素敏感。
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影响mecA表达的因素
• mecA基因的5’端的核苷酸序列与编码β-内酰胺酶的blaZ基因具有同源性，mecA基因的表达也受到β-内酰胺酶诱导基因blaI和bla R1的共同调节，但相对于mecI和mecR1基因作用较弱

试析青霉素结合蛋白和细菌对_内酰胺抗生素的抗药性机理

对不产生β-内酞胺酶但具有青霉素抗性的淋球菌分析表明，有6个遗传位点PenA、mtr、penB、peln、tem、env控制菌株内在的庄内酞胺抗性〔20，“‘’。penA基因专一性决定低水平青霉素抗性，mtl~基因本身除增加对青霉素抗性外还和其它的抗生素抗性有关，tem和pen基因本身没有可表达的性状，但转化实验证实，这二个基因携同其它三个基因一道可以提高菌株对青霉素的抗性，env基因突变则削弱青霉素抗性表达。
Brown和Reyoolds(18)探究表明，金黄色葡萄球菌表达甲氧西林抗性受生长条件的影响。在较低温度(30℃)或高渗透压培养基中抗性增加，在低pH值培养基中抗性降低。菌株13136p一m+在30℃对所有的庄内酞胺抗生素均有抗性，但在40℃则表现正常的敏感型。在30℃培养时，细胞膜中出现大量的PBP2’，而40℃生长的细胞则缺少这种PBP2’。因此，Brown提出，当其它的FBP’s失活后，这种新的低亲和力PBP取代了其它PBP’s的功能。PBF2’存在于所有的已检测的抗甲氧西林菌株中。除在葡萄球菌中观察到PBP’s改变外，在其它抗性菌株中也发现，如抗邻氯青霉素(Cloxacillin)枯草芽抱杆菌，相应的PBP2a对该种抗生素的亲和力降低。在临床分离到的青霉素抗性产气英膜梭菌突变株则降低PBPI对青霉素的亲和力。因此，在不同的革蓝氏阳性菌中，β一内酞胺抗生素和不同的PBP’s亲和力也不同。而有些细菌表达这种内在的β一内酸胺抗性机理要复杂得多。例如肺炎链球菌，该菌不产生庄内酸胺酶。用SDS聚丙烯酸胺凝胶电泳分离肺炎球菌PBP’s时发现敏感型肺炎球菌有5种青霉素结合蛋白PBPla、lb、2a、2b和3。用同样方法检测耐青霉素菌株的PBP产s发现相应的PBP’s的生化特性和对青霉素的亲和力均有所改变。耐青霉素菌株的PBPla和1b完全丧失和青霉素的亲和力，出现一种新的分子量较小的PBPlc。另外耐药菌株的2b也被一种新的分子量接近于2a的PBP2a产所代替。为进一步探究PBP’s和抗药性之间的关系。Zighelboim等〔田分离野生型耐青霉素肺炎球菌8249DNA转化敏感型肺炎球菌受体菌R6。经多次转化获得一系列耐药水平不同的转化子，转化结果说明，菌株8249的高耐药(对青霉素)特征不能通过一次转化传给R6。而需要进行多次转化才能使R。逐渐获得较高的抗性性状。Shoekley等〔20〕以及其它的探究者对肺炎球菌耐药机理探究也得出相同的结果。目前对于肺炎球菌有多少遗传因子和抗药性有关还不清楚，但多重转化实验逐步获得高水平耐药性转化子说明野生型菌株8249携带有多重突变的遗传因子，抗药性是受多基因控制，那么受体菌需要吸收多个DNA分子以满足细胞获得高水平抗性的需要。这种需要多次转化逐步获得较高的抗性水平的现象在金黄色葡萄球菌中也得到证实(17)。

青霉素最新版本

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甲氧西林
特点：甲氧西林(Methicillin)为耐青霉素酶青霉素，其抗菌作用方式与青霉素相仿，但不为青霉素酶水解破坏，对产青霉素酶金黄色葡萄球菌有良好作用。药理特性：对革兰阳性菌和奈瑟菌属有抗菌活性，但对青霉素敏感的葡萄球菌、各种链球菌和脑膜炎球菌的抗菌作用不及青霉素。应用：主要用于耐青霉素葡萄球菌所致的各种感染，如败血症、呼吸道感染、脑膜炎、软组织感染等，也可用于化脓性链球菌或肺炎球菌与耐青霉素葡萄球菌所致的混合感染。肺炎球菌、化脓性链球菌、其他链球菌或对青霉素敏感的葡萄球菌感染则不应采用该品治疗。
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参考文献
1.张冬梅，阿颖利，宋静.青霉素的抗菌作用机制及合理使用分析 [J] .求医问药，2012，10（8）:149. 2. 沈秋香. 一例肺炎静滴青霉素发生过敏性休克的护理[J] .医学信息，2010,12:3636. 3.黄成赛.青霉素G在临床应用中应注意的问题[J] .中国保健营养， 2014，2(中):694. 4.崔丽娟，臧恒昌.青霉素V钾的制备工艺及其应用研究进展[J] .齐鲁药事，2009，28（10）:608-611. 5.胡娟，王虎.遏制金黄色葡萄球菌广泛耐药性以及相关转化医学平台的搭建[J].传染病信息，2014,27（3）：129-133. 6.常用半合成青霉素作用特点及临床应用.见:林蓉，傅强，主编. 药学专业知识（一）[M].8版.北京:中国医药科技出版社，2014:29. 7.覃国统 .抗菌药物临床应用及临床分离菌的耐药相关性分析[J] . 医药前沿，2013，11（2）:220-221.
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英国的Jevons首次发现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)，MRSA从发现至今感染几乎遍及全球，已成为院内和社区感染的重要病原菌之一。不断出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillinresistant Staphylococcus aureus, MRSA）广泛耐药性是医疗机构和社区健康的主要威胁。社区获得性 MRSA （community-acquired MRSA, CA-MRSA）是顽固的传染性致病菌，感染率和病死率高。因 MRSA 不但耐受所有 β内酰胺类抗生素，且具有获得外源毒力抗药基因的能力，临床治疗方法很有限。近来的研究表明 CA-MRSA 分离株比医院获得性 MRSA 更具毒力，更易传播，且具广泛耐药性，临床上只有少数几种抗生素有效（如万古霉素）。[5]

青霉素类抗生素药物-

青霉素类抗生素药物的研究摘要本文主要对青霉素类药物的分类、影响其抗菌作用的主要因素、细菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制、使用青霉素类药物应注意的问题以及青霉素类药物的配伍禁忌等几个方面进行分析阐述。

关键词霉素类β-内酰胺类抗生素青霉素类是一类重要的β-内酰胺类抗生素，它们可由发酵液提取或半合成而制得，各种β-内酰胺类抗生素的作用机制均相似，内酰胺类抗生素与细胞膜上的青霉素结合蛋白〔PBP〕结合而阻碍细菌细胞壁粘肽的合成，使之不能交联而造成细胞壁的缺损，致使细菌细胞破裂而死亡。

这一过程发生在细菌细胞的繁殖期，因此本类药物为繁殖期杀菌药。

细菌细胞有细胞壁，而哺乳动物的细胞无细胞壁，故此青霉素类对动物细胞的毒性很低，有效抗菌浓度的青霉素对动物细胞几乎无任何影响。

1．青霉素类药物的分类青霉素类可分为：天然青霉素和半合成青霉素〔1〕耐酸青霉素苯氧青霉素包括青霉素V和苯氧乙基青霉素〔2〕耐酶青霉素化学结构特点是通过酰基侧链〔R1〕的空间位障作用保护了β-内酰胺环，使其不易被酶水解，耐酸、耐酶、可口服。

用于耐青霉素的金葡菌感染。

常用苯唑西林〔新青霉素〕，氯唑西林，双氯西林与氟氯西林。

〔3〕广谱青霉素对革兰阳性及阴性菌都有杀菌作用，还耐酸可口服，但不耐酶，对绿脓杆菌无效。

常用氨苄西林，阿莫西林，匹氨西林。

〔4〕抗绿脓杆菌广谱青霉素其抗菌谱与氨苄西林相似。

特点是对绿脓杆菌及变形杆菌作用较强。

常用羧苄西林磺苄西林替卡西林，呋苄西林，〔抗绿脓杆菌较羧苄西林强6～10倍〕，阿洛西林，哌拉西林。

2．影响抗菌作用的主要因素影响青霉素类药物抗菌作用的因素主要有：〔1〕药物透过革兰阳性菌细胞壁或阴性菌脂蛋白外膜〔即第一道穿透屏障〕的难易；〔2〕对β-内酰胺酶〔第二道酶水解屏障〕的稳定性；〔3〕对抗菌作用靶位PBPs的亲和性。

3．细菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制细菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制可概括为：〔1〕细菌产生β-内酰胺酶〔青霉素酶、头孢菌素酶等〕使易感抗生素水解而灭活。

青霉素结合蛋白

青霉素结合蛋白青霉素结合蛋白(PBPs)是广泛存有于细菌表面的一种膜蛋白，是β_内酞胺类抗生素的主要作用靶位。

不同细菌其种类及含量均不相同。

但各种菌种的PBPs又有很多类似的结构与功能，在细菌生长、繁殖中发挥重要作用。

PBPs结构与数量的改变是产生细菌耐药的一个重要机制。

现今，各类抗生素虽种类繁多，但在耐药菌的治疗中仍缺乏有效手段。

所以近年来围绕PBPs展开了大量的研究工作，试图从分子结构与基因水平理解PBPs，探求细菌耐药的机制，企图获得更有效的治疗手段。

1PBPs研究简史及基本概念即使临床上很早就开始应用青霉素，但到20世纪50年代，人们才理解到青霉素是通过干扰细菌的表面结构而起作用的。

60年代，细菌细胞壁的结构被阐明，为人们理解青霉素作用机制及PBPs奠定了基础。

1972年Suginak.Blumberg和Strominge：发现青霉素结合蛋白，用放射性同位素标记的青霉素能够标出细菌表面的PBPs，但后来的研究发现并非所有PBP均是青霉素作用的致命靶位。

所有细菌都含有多种青霉素结合蛋白，不同菌属其PBPs含量、种类各不相同，不同的抗生素通过与不同的PBP蛋白结合而产生不同的抗菌活性。

所以，与不同PBP 结合的抗生素可联合应用，往往产生协同作用。

每个菌种都有一套特异的PBPs，称PBPs谱。

在一种菌种中PBPs按分子量大小排序，分别称PBPI,PBP2,PBP3......。

PBPl为分子量最大的一种。

不同菌属PBPs的生理功能很相近，而且分子结构上也有其相关及相似性。

PBPs含量很少，仅占细胞膜蛋白总量的1%，不同PBP含量变化很大，如大肠杆菌中高分子的PBPI,PBP2和PBP3量很少，而低分子PBPS和PBP6却占PBPs量的70%—90%。

各种PBP与抗生素亲和力相差亦很大。

亲和力大小一般用。

表示;指使-青霉素G结合减少50%时该抗生素浓度，其值越高，示药物亲和力越小。

研究PBPs的方法与技术持续地发展。

OprD和青霉素结合蛋白在铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药中的作用的开题报告

OprD和青霉素结合蛋白在铜绿假单胞菌对亚胺培南
耐药中的作用的开题报告
铜绿假单胞菌是医院感染中最致命的病原体之一，对多种抗生素具
有耐药性，包括β-内酰胺类药物亚胺培南。

OprD和青霉素结合蛋白是铜绿假单胞菌外膜中两种重要的蛋白质，它们在铜绿假单胞菌对亚胺培南
耐药中起着重要作用。

本研究旨在探究OprD和青霉素结合蛋白在铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药中的作用，包括两部分研究内容：1、探究两种蛋白是否参与铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制；2、研究OprD和青霉素结合蛋白在亚胺
培南耐药中的调控作用。

在第一部分研究中，我们将利用铜绿假单胞菌耐药和敏感菌株构建
实验模型，并通过比较两者之间OprD和青霉素结合蛋白的表达情况以及其与亚胺培南的结合能力来探究这两种蛋白在铜绿假单胞菌对亚胺培南
耐药中的角色。

在第二部分研究中，我们将采用基因敲除和表达方式调节等手段，
验证OprD和青霉素结合蛋白在调控铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药性中的作用。

同时，我们将通过各种生化实验手段，探究OprD和青霉素结合蛋白对亚胺培南的有效结合是否与耐药机制有关，并探索其底层分子机制。

本研究对于铜绿假单胞菌及其耐药机制的研究将具有重要的指导和
推动作用，同时也将为深入探究OprD和青霉素结合蛋白的生物学功能和应用价值提供重要的基础研究数据。