第五章 药物定量分析与分析方法验证
合集下载
药物定量分析样品与分析方法验证
第四节 生物样品分析方法的 基本要求
二、样品的储存
血浆和血清都必须在采血后即时分离。否则，血凝后 冰冻保存，则因冰冻时引起细胞溶解，而阻碍血浆或 血清的分出，同时因溶血而影响药物浓度变化。
尿样宜立即测定，否则应加入防腐剂或低温冷藏。
第四节 生物样品分析方法的 基本要求
三、生物样品分析前处理技术
微量药物存在于大量生物介质中，若直接进行 测定，内源性物质可能干扰，药物浓度太低将 会达不到仪器灵敏度要求。因此，生物样品中 的药物必须经过分离、纯化与浓集，必要时还 需对待测组分进行化学改性处理，从而为最后 测定创造良好的条件。
第二节 定量分析方法的特点
二、光谱分析法 （1）紫外分光光度法
特点： 1.灵敏度高，10-4 -10-7g/ml。 2.准确度高，RSD%：2%-5%。 3.仪器价廉物美，操作简便，易于普及。 4.应用广泛。
第二节 定量分析方法的特点
二、光谱分析法 （1）紫外分光光度法
含量测定方法
1.对照品比较法 2.吸收系数法 3.计算分光分度法。 4.比色法
一、概述
原料:不经特殊处理直接测定 原料:经有机破坏后测定 制剂:排除处方中干扰组分
药物
二、不经有机破坏的分析方法
➢（一）直接测定法 ➢1.配位滴定法 ➢2.氧化还原法 ➢（二）经水解后测定法 ➢1.碱水解后测定法 ➢2.酸水解后测定法 ➢（三）经还原分解后测定
二、不经有机破坏的分析方法
➢ （一）直接测定法 ➢ 1.配位滴定法
第四节 体内药物分析简介
定义： 体内药物分析是通过分析手段了 解药物在体内数量与质量的变化， 获得各种药物动力学参数，代谢 的方式和途径等信息。
第四节 体内药物分析简介
药物定量分析与分析方法验证-综合
测定供试品中主成分含量外标法是以供试品的对照品或标准品作对照物质，相对比较以求得供试品的含量。
外标法可分为标准曲线法和外标一点法。
①标准曲线法
配制一系列已知浓度的标准液，在同一操作条件下，按同量注入色谱仪，测量其峰面积(或峰高)，作出峰面积(或峰高)与浓度的标准曲线。然后在相同的
条件下，注入同量供试品，测得待测组分的峰面积(或峰高)，根据标准曲线或它的回归方程，计算供试品中待测组分的浓度。
药物定量分析与分析方法验证-综合
D
则，滴定度：
3、含量的计算
用容量分析法测定药物的含量时，滴定方式有两种，即直接滴定法和间接滴定法。其测定结果的计算方法分述如下。
(1)直接滴定法:
此法是用滴定液直接滴定，以求得被测药物的含量。
式中，V：消耗滴定液的体积；
W：供试品取用量；
T：滴定度。
滴定度在药典中是直接给出的，但在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药典上所给出的滴定度(T)，但只要乘以滴定液浓度校正因数(F)即可换算成实际的滴定度( )，即
二、光谱分析法
紫外-可见分光光度法特点：
1、灵敏度高，可达10-4～10-7g/ml。
2、准确度高，相对误差为2％～5％。
3、仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。
4、应用广泛。许多化合物均可采用本法进行测定，同时还可以应用计算分光光
度法不经分离直接测定混合物中各组分的含量。
备注：
比色皿校正：通常实验中用校正方法应对比色皿的误差。
(2)间接滴定法：间接滴定法包括生成物滴定法和剩余量滴定法。
剩余量滴定法亦称回滴定法，本法是先加入定量过量的滴定液A，使其与被测药物定量反应，待反应完全后，再用另一滴定液B来回滴定反应后剩余的滴定液A。
外标法可分为标准曲线法和外标一点法。
①标准曲线法
配制一系列已知浓度的标准液，在同一操作条件下，按同量注入色谱仪，测量其峰面积(或峰高)，作出峰面积(或峰高)与浓度的标准曲线。然后在相同的
条件下，注入同量供试品，测得待测组分的峰面积(或峰高)，根据标准曲线或它的回归方程，计算供试品中待测组分的浓度。
药物定量分析与分析方法验证-综合
D
则，滴定度：
3、含量的计算
用容量分析法测定药物的含量时，滴定方式有两种，即直接滴定法和间接滴定法。其测定结果的计算方法分述如下。
(1)直接滴定法:
此法是用滴定液直接滴定，以求得被测药物的含量。
式中，V：消耗滴定液的体积；
W：供试品取用量；
T：滴定度。
滴定度在药典中是直接给出的，但在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药典上所给出的滴定度(T)，但只要乘以滴定液浓度校正因数(F)即可换算成实际的滴定度( )，即
二、光谱分析法
紫外-可见分光光度法特点：
1、灵敏度高，可达10-4～10-7g/ml。
2、准确度高，相对误差为2％～5％。
3、仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。
4、应用广泛。许多化合物均可采用本法进行测定，同时还可以应用计算分光光
度法不经分离直接测定混合物中各组分的含量。
备注：
比色皿校正：通常实验中用校正方法应对比色皿的误差。
(2)间接滴定法：间接滴定法包括生成物滴定法和剩余量滴定法。
剩余量滴定法亦称回滴定法，本法是先加入定量过量的滴定液A，使其与被测药物定量反应，待反应完全后，再用另一滴定液B来回滴定反应后剩余的滴定液A。
第五章 药物定量分析与分析方法验证
第五章药物定量分析与分析方法验证第1节定量分析样品的前处理一、概述定量分析时需根据所选的分析方法、分析对象的结构与性质以及药物制剂的处方组成对试样进行不同的前处理，用以满足不同的分析方法对试样定量分析的具体要求。
但大多数化学原料药可以不经过特殊处理，使用适当的溶剂溶解后直接采用滴定分析法、分光光度法或色谱法测定，而对于药物制剂的前处理主要考虑处方组成中干扰组分如何排除。
该内容在第十七章“药物制剂分析概论”中详细介绍。
故本节主要介绍含金属或含卤素、硒、硫、磷等特殊元素的药物分析前处理方法。
定量分析样品的前处理方法与金属或卤素在分子中的结合状态直接相关，若有机药物中含有金属或卤素，其药理作用部分主要为金属和卤素，分析时必须测定其所含的金属或卤素。
如果有机药物中的卤素原子直接与脂肪链上的碳原子相连接，其分子结合状态不甚牢固，可在碱溶液中回流解离为无机离子直接分析；如果卤素原子与芳环上的碳原子相连接，其分子结合状态相对牢固，需在碱性溶液中加还原剂回流才能使结合状态解离再行分析。
如果有机药物中的金属原子不直接与碳原子相连，多为有机酸及酚的金属盐或配位化合物，称为含金属的有机药物，其金属原子在分子结构中的结合状态不够牢固，在水溶液中直接解离出金属离子。
若其有机结构部分不干扰测定，可直接在溶液中进行金属的鉴别或含量测定；如果金属原子直接与碳原子以共价键相连接，其金属原子在分子结构中的结合状态比较牢固，在溶液中一般不能解离出金属离子，需经适当前处理，使有机结合状态金属转变为无机金属化合物，才可进行分析测定。
根据以上卤素和金属原子于有机药物分子中结合状态的差异，样品的前处理方法大体分为两类：一是不经有机破坏的样品前处理方法；二是经有机破坏的样品前处理方法。
简要叙述如下：二、不经有机破坏的样品前处理当金属原子或卤素原子在药物分子中的结合的不甚牢固时，样品的前处理可以不经有机破坏。
（一）直接测定法本法适用于金属原子不直接与碳原子相连的含金属的有机药物或某些碳-金属键（C-M）结合不牢固的含金属的有机药物，在水溶液中可以解离，所以不需要进行破坏，能够直接进行滴定。
药物定量分析与分析方法验证PPT资料(正式版)
A．未知药物的真伪 15．药 消物除分系析统方误法差的效方能法指为标有
78．8中国C．药0典. （2000年版）在正文部分的检查项下应包括
B．已知药物的真伪
C．已知药物的疗效 及A．在2药5m物l 分B中．的25应. 用。
5A．．以准同确量度的溶B．剂回替收代率供试C品．同精法密进度行测定试验 5一．、消掌除握系定统量误分差析的方方法法验为证的效能指标。
紫堇色
D
[X型题]
1．药物分析方法的效能指标有 A．检测限 B．耐用性 C．准确度 D．专属性 E．代表性
2．对药物中杂质进行检查时，要求所用的检 查方法应具有
A．耐用性 B．专属性 C．检测限 D．准确度 E．线性与范围
3．用碘量法测定维生素C原料药时，要求碘 量法应具备
A．专属性 B．定量限 C．精密度 D．粗放度 E．线性 4．系统误差来源于 A．分析方法 B．所用试剂 C．操作者 D．所用仪器 E．工作环境
5．消除系统误差的方法为 A．校正所用的仪器 B．作对照实验 C．做空白试验 D．做预试验 E．做回收试验
6．以下所列仪器哪些使用前需进行校正 A．滴定管 B．量瓶 C．量杯 D．移液管 E．碘量瓶
7．中国药典（2000年版）在正文部分的检查 项下应包括
A．药物的真伪 B．有效性 C．均一性 D．纯度要求 E．安全性 8．进行药品检验时，要从大量样品中取出少量 样品应考虑取样的 A．多样性 B．真实性 C．代表性 D．科学性 E．可靠性
药物定量分析与分析方法验证
基本要求
一、掌握定量分析方法验证的效能指标。 二、熟悉定量分析样品的前处理方法。 三、了解定量分析样品的前处理方法的进展
及在药物分中的应用。
返回
练习与思考
78．8中国C．药0典. （2000年版）在正文部分的检查项下应包括
B．已知药物的真伪
C．已知药物的疗效 及A．在2药5m物l 分B中．的25应. 用。
5A．．以准同确量度的溶B．剂回替收代率供试C品．同精法密进度行测定试验 5一．、消掌除握系定统量误分差析的方方法法验为证的效能指标。
紫堇色
D
[X型题]
1．药物分析方法的效能指标有 A．检测限 B．耐用性 C．准确度 D．专属性 E．代表性
2．对药物中杂质进行检查时，要求所用的检 查方法应具有
A．耐用性 B．专属性 C．检测限 D．准确度 E．线性与范围
3．用碘量法测定维生素C原料药时，要求碘 量法应具备
A．专属性 B．定量限 C．精密度 D．粗放度 E．线性 4．系统误差来源于 A．分析方法 B．所用试剂 C．操作者 D．所用仪器 E．工作环境
5．消除系统误差的方法为 A．校正所用的仪器 B．作对照实验 C．做空白试验 D．做预试验 E．做回收试验
6．以下所列仪器哪些使用前需进行校正 A．滴定管 B．量瓶 C．量杯 D．移液管 E．碘量瓶
7．中国药典（2000年版）在正文部分的检查 项下应包括
A．药物的真伪 B．有效性 C．均一性 D．纯度要求 E．安全性 8．进行药品检验时，要从大量样品中取出少量 样品应考虑取样的 A．多样性 B．真实性 C．代表性 D．科学性 E．可靠性
药物定量分析与分析方法验证
基本要求
一、掌握定量分析方法验证的效能指标。 二、熟悉定量分析样品的前处理方法。 三、了解定量分析样品的前处理方法的进展
及在药物分中的应用。
返回
练习与思考
药物定量分析与分析方法验证
第 四章
药物的含量测定方法与验证
03:27:36
1 定量分析方法的分类与特点 2 样品分析的前处理方法 3 药品质量标准分析方法验证
03:27:36
第一节
定量分析方法的分类与特点
一、容量分析法 二、光谱分析法 三、色谱分析法
03:27:36
一、容量分析法
将已知浓度滴定液滴加至被测药物溶液中, 至滴定终点,根据滴定液的浓度,体积和滴定 度,计算含量 .
03:27:36
第二节 样品分析的前处理方法
一、不经有机破坏的前处理方法
(一) 水解法; (二) 还原法
二、经有机破坏的前处理方法
03:27:36
(一) 干法破坏; (二) 湿法破坏
进行药物定量分析之前，一般都 需要对样品进行前处理。
根据待测元素在药物分子中结合 的牢固程度，前处理方法各异。
在分析含金属或含卤素、氮、硫、 磷等元素的有机药物前，需进行适当 的样品前处理。
(V 0
V )S Na2S2O3
FNa2S2O3
TBr2
100%
W
(23.2115.73) 1.03813.01 100% 98.8% 0.10221000
03:27:36
二、光谱分析法
定义
利用物质的 光谱进行定性、 定量和结构分 析的方法—— 光谱分析法
分类
UV-Vis IR AA Fluor FP
03:27:36
含金属的有机药物：金属原子不与碳原 子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐 或配位化合物
如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马 酸亚铁
03:27:36
第三节 药品质量标准分析方法验证
需验证的项目
验证的内容
药物的含量测定方法与验证
03:27:36
1 定量分析方法的分类与特点 2 样品分析的前处理方法 3 药品质量标准分析方法验证
03:27:36
第一节
定量分析方法的分类与特点
一、容量分析法 二、光谱分析法 三、色谱分析法
03:27:36
一、容量分析法
将已知浓度滴定液滴加至被测药物溶液中, 至滴定终点,根据滴定液的浓度,体积和滴定 度,计算含量 .
03:27:36
第二节 样品分析的前处理方法
一、不经有机破坏的前处理方法
(一) 水解法; (二) 还原法
二、经有机破坏的前处理方法
03:27:36
(一) 干法破坏; (二) 湿法破坏
进行药物定量分析之前，一般都 需要对样品进行前处理。
根据待测元素在药物分子中结合 的牢固程度，前处理方法各异。
在分析含金属或含卤素、氮、硫、 磷等元素的有机药物前，需进行适当 的样品前处理。
(V 0
V )S Na2S2O3
FNa2S2O3
TBr2
100%
W
(23.2115.73) 1.03813.01 100% 98.8% 0.10221000
03:27:36
二、光谱分析法
定义
利用物质的 光谱进行定性、 定量和结构分 析的方法—— 光谱分析法
分类
UV-Vis IR AA Fluor FP
03:27:36
含金属的有机药物：金属原子不与碳原 子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐 或配位化合物
如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马 酸亚铁
03:27:36
第三节 药品质量标准分析方法验证
需验证的项目
验证的内容
药物分析-药物定量分析与方法验证
44
特点：
仪器简单－滴定管、锥形瓶等玻璃仪器。 操作方便－通过观察溶液颜色变化确定滴
9
测 定 方 法 ： 取 本 品 约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 加 乙 醇 5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流 15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精 密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二 甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁 胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银 滴 定 液 (0.1mol/L) 相 当 于 6.216mg 的 三 氯 叔 丁 醇 （C4H7Cl3O·1/2H2O）。
13
（1） 碱性还原后测定
例 泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶 液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷 凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗 涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋 酸 5ml 与 曙 红 钠 指 示 液 5 滴 ， 用 硝 酸 银 滴 定 液 (0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L) 相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
富马酸亚铁 C4H2FeO4的含量测定
原理
d H2SO4
O
HC C O
C CH Oˉ
+
Fe2+
富马酸亚铁
Oˉ
富马酸
Fe2+ + Ce4+
滴定 Ce3+ + Fe3+
邻二氮菲指示剂
N
N
红色
Fe2+ + Ce4+
特点：
仪器简单－滴定管、锥形瓶等玻璃仪器。 操作方便－通过观察溶液颜色变化确定滴
9
测 定 方 法 ： 取 本 品 约 0.1g ， 精 密 称 定 ， 加 乙 醇 5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流 15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精 密加硝酸银滴定液(0.1mol/L) 30ml，再加邻苯二 甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁 胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定， 并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银 滴 定 液 (0.1mol/L) 相 当 于 6.216mg 的 三 氯 叔 丁 醇 （C4H7Cl3O·1/2H2O）。
13
（1） 碱性还原后测定
例 泛影酸的测定 ChP (2000)
取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶 液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷 凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗 涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋 酸 5ml 与 曙 红 钠 指 示 液 5 滴 ， 用 硝 酸 银 滴 定 液 (0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L) 相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。
富马酸亚铁 C4H2FeO4的含量测定
原理
d H2SO4
O
HC C O
C CH Oˉ
+
Fe2+
富马酸亚铁
Oˉ
富马酸
Fe2+ + Ce4+
滴定 Ce3+ + Fe3+
邻二氮菲指示剂
N
N
红色
Fe2+ + Ce4+
药物定量分析与分析方法验证
按分离方法分为：PC；TLC；柱色谱；GC；HPLC （一）HPLC法
（1）直接滴定法 D% = V ×F × T/W ×100% F = 实际标定的浓度/规定的浓度
（2）间接滴定法（回滴定法；剩余滴定法）
D% = （VO – VB) ×F ×T/W ×100%
1．乙酰水杨酸的含量测定：取本品，准 确加入氢氧化钠滴定液，水浴 上煮沸15min，放冷后以酚酞为指示剂，用硫酸 滴定液(0.25mol/L, F=1.004)滴定，并将滴定结 果用空白实验校正，每1ml氢氧化钠滴定液 (0.5mol/L)相当于乙酰水杨酸。样品消 耗硫酸滴定液， 空白消耗，求本品的含量？
对乙酰氨基酚的含量测定：取本品，精密称定 （），置500mL量瓶中，加甲醇100mL 溶解，加水至刻度，摇匀。精密吸取5mL，置 100mL量瓶中，加水至刻度，作为供试液。另用 相同溶剂配制对乙酰氨基酚对照液 （），于244nm处，以水为空白，分 别测定供试液和对照液的吸光度，按公式10C （A样/A对）计算供试品中对乙酰氨基酚的mg数。 式中C代表对照液浓度。测得供试液的吸光度为 ，对照溶液为。计算对乙酰氨基酚的 百分含量？并解释上述计算公式中10的由来?
2．盐酸氯丙嗪片剂的含量测定：取本品20片， 精密称定为，研细，精密称取片 粉，置于500ml量瓶中，加酸及水溶解并稀释至 刻度，取上清液，置100ml量瓶中，加水 至刻度，在254nm测得吸收度为，已知盐 酸氯丙嗪在254nm的E为915，标示量为50mg/ 片，计算标示量百分数？
复方酮康唑乳膏中丙酸氯倍他索的含量测定：按HPLC法， 取本品约4 g，精密称定（）,加无水乙醇适量， 水浴加热使溶解，并稀释至，滤过，精密量取续 滤液10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取丙酸氯 倍他索对照品适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀 释制成每1 ml中含丙酸氯倍他索的溶液，摇匀， 同法测定。按外标法以峰面积计算。测得对照液中丙酸氯 倍他索的峰面积为778；供试液中丙酸氯倍他索的峰面积 为768。已知乳膏规格：10mg酮康唑和丙酸氯倍 他索/g，计算丙酸氯倍他索相当于标示量的百分含量?
（1）直接滴定法 D% = V ×F × T/W ×100% F = 实际标定的浓度/规定的浓度
（2）间接滴定法（回滴定法；剩余滴定法）
D% = （VO – VB) ×F ×T/W ×100%
1．乙酰水杨酸的含量测定：取本品，准 确加入氢氧化钠滴定液，水浴 上煮沸15min，放冷后以酚酞为指示剂，用硫酸 滴定液(0.25mol/L, F=1.004)滴定，并将滴定结 果用空白实验校正，每1ml氢氧化钠滴定液 (0.5mol/L)相当于乙酰水杨酸。样品消 耗硫酸滴定液， 空白消耗，求本品的含量？
对乙酰氨基酚的含量测定：取本品，精密称定 （），置500mL量瓶中，加甲醇100mL 溶解，加水至刻度，摇匀。精密吸取5mL，置 100mL量瓶中，加水至刻度，作为供试液。另用 相同溶剂配制对乙酰氨基酚对照液 （），于244nm处，以水为空白，分 别测定供试液和对照液的吸光度，按公式10C （A样/A对）计算供试品中对乙酰氨基酚的mg数。 式中C代表对照液浓度。测得供试液的吸光度为 ，对照溶液为。计算对乙酰氨基酚的 百分含量？并解释上述计算公式中10的由来?
2．盐酸氯丙嗪片剂的含量测定：取本品20片， 精密称定为，研细，精密称取片 粉，置于500ml量瓶中，加酸及水溶解并稀释至 刻度，取上清液，置100ml量瓶中，加水 至刻度，在254nm测得吸收度为，已知盐 酸氯丙嗪在254nm的E为915，标示量为50mg/ 片，计算标示量百分数？
复方酮康唑乳膏中丙酸氯倍他索的含量测定：按HPLC法， 取本品约4 g，精密称定（）,加无水乙醇适量， 水浴加热使溶解，并稀释至，滤过，精密量取续 滤液10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取丙酸氯 倍他索对照品适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀 释制成每1 ml中含丙酸氯倍他索的溶液，摇匀， 同法测定。按外标法以峰面积计算。测得对照液中丙酸氯 倍他索的峰面积为778；供试液中丙酸氯倍他索的峰面积 为768。已知乳膏规格：10mg酮康唑和丙酸氯倍 他索/g，计算丙酸氯倍他索相当于标示量的百分含量?
药物定量分析与分析方式技巧的验证
第6章药物定量分析与分析方法的验证6.1 定量分析样品的前处理方法在采集药物样品之后，往往不能直接铡定，一般需根据药物的性状、结构与性质或组方采用一定的方法对样品进行前处理，使待测药物或待测元素转化为易于测定的形式后再进行定量、定性分析检测。
多数化学原料药物具有特征结构或取代基可不经特殊处理，使用适当的溶剂溶解后直接采用滴定法、分光光度法或色谱法测定。
对于药物制剂，其前处理方法着重考虑的是干扰组分的排除。
而对于一些含有卤素或金属的有机药物，由于其所含金属或卤素在药物分子结构中结合的牢固程度不同，需要采用不同的方法对这些有机药物进行适当的处理才能进行准确地定量分析。
本节主要介绍含金属或含卤素、硫、磷、砷等特殊元素药物分析的前处理方法，这些药物的分析方法通常可分为两大类：一类是不经有机破坏的分析方法；另一类是经有机破坏的分析方法。
6.1.1 不经有机破坏的分析方法本类分析方法不对药物分子中的有机结构部分进行完全破坏，仅选用适当的溶剂溶解样品，使待测元素离子电离或经简单的回流处理使有机结合的待测元素原子离解而转化为无机盐类后测定。
本法主要是用于含金属有机药物或结合不牢固的含卤素等药物的分析。
根据操作方法不同，主要以下三种方法：1. 直接测定法凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些C－M（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中可以电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方法进行测定。
金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸、酚类等的金属盐或络合物，如葡萄糖酸钙、乳酸钙等；而另一种为金属原子直接与碳原子以共价键相连，如葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁等。
例6-1 《中国药典》(2010年版)收载的原料药富马酸亚铁的含量测定方法：取本品约0.3g，精密称定，加稀硫酸15ml，加热溶解后，放冷，加新沸过的冷水50ml 与邻二氮菲指示液2 滴，立即用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。
药物定量分析与分析方法验证 ppt课件
必要时通过HPLC-DAD或LC-MS确证色谱峰的单纯性和同一性 对于结构未知的代谢产物的测定，可采用LC-LC-NMR进行结 构的初步推测后，考察其干扰情况。
ppt课件
32
3. 伍用药物的干扰 进行 TDM 时，还要考虑患者可能同时服用药物 ( 通
常为数有限)的干扰。
比较待测药物及可能同时服用药物的模拟生物样品的检
RCOOCH3 RCOOSiMe3
ppt课件
25
2）手性分离：
+（R）-E R-SA （R）E-（R）SA （R）E-（S）SA 光活性试剂 非对映异构体
S-SA
手性药物
ppt课件
26
3）HPLC:如庆大霉素C组分检查
a.柱前衍生
b.柱后衍生，需一个额外的泵
ppt课件
27
第三节 定量分析方法验证·
3·唾液： 优点：样品易得，采集无痛，无危险。 缺点：一般唾液中药浓与血药浓度不吻合，易变
ppt课件
12
4.组织：用于药物体内动力学研究 步骤：取样，匀浆，去蛋白 5.头发：主要用于体内微量元素的测定。 枕部取样，洗净，消化或者高温灰化后测定
ppt课件
13
二 体内样品的贮藏与处理 1.冷藏或冷冻 2.去活性：快速冷冻；微波照射；加入酶活性阻断剂或者 抗氧剂；高温煮沸。
6
分析方法有: ①色谱法:HPLC,HPCE,GC ②光谱法:比色法、紫外-可见分光光度法、荧光分光光度 法、原子吸收分光光度法 ③免疫分析法:放射免疫法RIA、酶免疫法EIA、化学发光酶 免疫、荧光免疫分析 ④联用技术:GC-MS、LC-MS、LC-NMR
ppt课件
7
第五章药物定量分析与分析方法的验证新
重现性:
不同实验室，不同人测定的精密度
三、专属性(Specificity)
指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在 情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性。
四、检测限(Limit of Detection, LOD)
药物能被检出的最低浓度(µg/ml) 1.非仪器分析目视法 2.信噪比法 一般以信噪比（S/N）3:1或2:1的相应浓 度或注入量来确定检测限
用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为大黄素对照品储备 液。精密吸取 储备液0.2、0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、 9.0mL分别置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，按上述 色谱条件，分别进样10 μl，记录峰面积，以峰面积 ( y ) 为纵坐标、大黄素浓度 ( x ) 为横坐标进行线性回归，得 回归方程。 Y = 2.962 106 X － 4.958 103 r = 0.999 9 结果表明大黄素溶液在 6.92 μg·mL - 1 ~ 311 μg·mL - 1 之间呈良好的线性关系。
接近的程度。
回收率(Recovery)
3×3，至少9 个测定结果
回收试验法
回收率(%)
测得量 加入量
100%
加样回收试验 回收率(%) 测得量 本底量 100%
加入量
回收试验 ：空白+已知量A的对照 品（或标准品）测定，测定值为M
R=M（平均）/A *100%
加样回收试验：已准确测定药物含 量P的真是样品+已知量A的对照品 （或标准品）测定，测定值为M
七.范围
达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法 适用的高低限浓度或量的区间。
八、耐用性(Robustness)
测定条件稍有变动时，对测定结果的 影响程度 影响因素：被测溶液的稳定性，流动 相的组成和pH，商品柱的品牌，柱 温等
药物分析药物定量分析与分析方法验证
例2 葡萄糖酸锑钠的含量测定 在酸性条件下加入碘化钾，用硫代硫酸
钠滴定，碘量法测定
例2 葡萄糖酸锑钠的含量测定
Sb5+ + 2KI
Sb3+ + 2K+ ++ I2
H+
I2 + 2Na2S2O3
2NaI + Na2S4O6
（二）经水解后测定
1、碱水解后测定法 将含卤素有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）
Байду номын сангаас
1、一般情况下，原料药选择适当的溶剂溶解后， 即可以选择相应的分析方法进行分析。
2、制剂，需要进行的前处理主要是要除去制剂敷 料以及共存的其他组分；或者使药物溶解出来（如 软膏制剂）
3、含金属、含卤素药物的分析时，如果利用金属 和卤素的特征进行分析，必须使该元素以无机结合 状态存在，需要在测定前进行处理。本章的测定前 处理仅涉及此部分内容。
一、 概述
（一）含卤素有机药物 系指药物分子结构中所含卤素直接
与芳环或脂肪链相连者，而不包括某 些有机药物的卤酸盐
结构特点：C—X
（二）含金属有机药物
1、金属原子不与碳原子直接相连，结合弱， 通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合 物 。M-O
2、金属原子直接与碳原子以共价键相连， 结合比较牢固。M-C
XO指示剂2d 滴加ZnSO4标液V2ml 黄色恰变橙色
2 氧化还原滴定法
本法利用不同价态的金属离子的氧化还原性， 利用适当的滴定剂测定含量
利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含 量
例1 富马酸亚铁的含量测定 溶于热的稀硫酸后释放出亚铁离子，
用铈量法测定
富马酸亚铁
CH C O
药物定量分析与分析方法验证
方法验证的内容与步骤
准确度
通过对比已知浓度的样品测量值 与真实值，评估方法的准确度。
精密度
通过多次测量同一样品，评估方 法的重复性和再现性。
专属性
验证方法是否能够区分目标成分 与其他物质的干扰。
耐用性
验证方法在不同条件下的稳定性 及变化程度。
范围
验证方法适用的浓度范围。
线性
验证方法在一定浓度范围内的响 应是否呈线性关系。
响应值应无明显交叉干扰，能够准确区分目标物质与杂质。
专属性验证结果
根据响应值判断分析方法的专属性是否符合要求。
检测限与定量限验证
检测限与定量限验证方法
逐渐降低样品浓度，观察信号响应值的变化。
检测限与定量限验证要求
检测限和定量限应满足预设的灵敏度要求。
检测限与定量限验证结果
根据信号响应值判断分析方法的检测限与定 量限是否符合要求。
分析方法验证的意义
分析方法验证是确保药物定量分析结果准确可靠的重要手段。通过验证，可以证明所选用 的分析方法适用于该药物的分析，并确保其在各种条件下的稳定性和可靠性。
当前发展状况
随着科学技术的发展，药物定量分析的方法和技术也在不断进步。目前，高效液相色谱法 、气相色谱法和质谱法等先进技术已被广泛应用于药物定量分析中，大大提高了准物质进行多次测定，计算相对标准偏 差（RSD）。
精密度验证要求
RSD应符合预设的接受范围，通常不超过±5%。
精密度验证结果
根据RSD大小判断分析方法的精密度是否符 合要求。
专属性验证
专属性验证方法
采用具有相似结构或相同成分的物质进行测定，比较其响应值。
专属性验证要求
中药有效成分的定量分析
中药是我国传统医学的重要组成部分， 中药有效成分的定量分析对于确保中 药质量和临床疗效具有重要意义。
药物定量分析与分析方法的验证
药物定量分析与分析方法的验证
基本内容
一、定量分析法得分类与特点 二、样品分析得前处理方法 三、药品质量标准分析方法验证 练习与思考
第一节 定量分析方法分类与特点
一、容量分析法
(一)容量分析法得特点 几个概念:容量分析法、滴定终点、滴定误差 操作简单、快速; 比较准确(相对误差＜0、2%); 仪器普通易得 常用于测定高含量或中含量组分,原料药含量测定首选
(二)容量分析法得计算问题
1、滴定度(T):
每1ml规定浓度得滴定液相当于被测物质得质量(mg)
2.滴定度的计算
aA（待测物） + bB（滴定液）
a
b
T/M
1×c
cC + dD
T = c×a/b×M
c:滴定液浓度 (mol/L)
M:被测物分子量
用溴酸钾法测定异烟肼[M(C6H7N3O)＝ 137、14]得含量时,溴酸钾滴定液得摩尔浓 度为0、02mol/L(以KBrO3为单元),化学 反应式如下:
对照品溶液的吸光度
条件:
A、 待测物与对照品在相同条件下测 定 B、 待测物与对照品浓度相
稀释倍数
原料药:
含量％＝
实测药物质量 供试品取样量
＝
C供 W
D
100％
取样量
平均片重
制剂:
标示量％＝
实测含量 标示含量
/ /
片 片
＝
C 供D W W 标示量
100％
Ｗ＝总片重 片数
片粉量
2)吸收系数法(绝对法)
5、 测定方 法
确定波长 要求供试品溶液得A应在0、3～0、7 狭缝调整
5、 测定方
法 1)对照品比较法:
供试品溶液的吸光度
基本内容
一、定量分析法得分类与特点 二、样品分析得前处理方法 三、药品质量标准分析方法验证 练习与思考
第一节 定量分析方法分类与特点
一、容量分析法
(一)容量分析法得特点 几个概念:容量分析法、滴定终点、滴定误差 操作简单、快速; 比较准确(相对误差＜0、2%); 仪器普通易得 常用于测定高含量或中含量组分,原料药含量测定首选
(二)容量分析法得计算问题
1、滴定度(T):
每1ml规定浓度得滴定液相当于被测物质得质量(mg)
2.滴定度的计算
aA（待测物） + bB（滴定液）
a
b
T/M
1×c
cC + dD
T = c×a/b×M
c:滴定液浓度 (mol/L)
M:被测物分子量
用溴酸钾法测定异烟肼[M(C6H7N3O)＝ 137、14]得含量时,溴酸钾滴定液得摩尔浓 度为0、02mol/L(以KBrO3为单元),化学 反应式如下:
对照品溶液的吸光度
条件:
A、 待测物与对照品在相同条件下测 定 B、 待测物与对照品浓度相
稀释倍数
原料药:
含量％＝
实测药物质量 供试品取样量
＝
C供 W
D
100％
取样量
平均片重
制剂:
标示量％＝
实测含量 标示含量
/ /
片 片
＝
C 供D W W 标示量
100％
Ｗ＝总片重 片数
片粉量
2)吸收系数法(绝对法)
5、 测定方 法
确定波长 要求供试品溶液得A应在0、3～0、7 狭缝调整
5、 测定方
法 1)对照品比较法:
供试品溶液的吸光度
药物定量分析与分析方法验证年ppt文档
M→被测物质分子量
例
VitCI2H 去氢抗坏 I血
以I2（0.05mol/L）计，反应摩尔比 1∶1
TCM a00. 51761 .1 83.806l()
b
1
百分含量
1.直接滴定法
含量%=
VT 100% W
校正系数（F）
F C 实际 C 规定
T ' C实际 T C规定
含量%= V T' 100%
R对照 R对照空白试剂
应在0.5～2.0之间。
三、色谱分析法
❖ 高效液相色谱法（HPLC） ❖气相色谱法（GC）
色谱过程
流动相
被分离组分 固定相
高效液相色谱法（HPLC）
➢固定相、流动相及检测器的选择
常用系统 固定相（色谱柱）：十八烷基硅烷键合硅
胶C18 流动相：甲醇-水、乙腈-水 检测器：紫外吸收检测器
测定λ处吸收度，以该物质在规定条件
下的吸收系数计算。
AE1 1c% mcl
√
C（g/m ） l E1 1c% mA L100
含量％＝ C D ×100％
W
例
盐酸氯丙嗪含量测定:精密称取0.2368g，置500ml量 瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密 量取续滤液1ml，置100ml量瓶中，加同一溶剂稀释 至刻度，摇匀，在254nm波长处测得吸收度为0.435
外标法 内标法
外标一点法 标准曲线法
1. 外标一点法
被测成分浓度与其峰面积成正比关系 要求供试液与对照液浓度相近
C供
A供
=
Ｃ对
A对
对照
C供=
C对×A供 A对
样品
2.标准曲线法
绘制浓度－峰面积( 峰高)标准曲线；
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
具有特征结构或取代基 化学原料药 含金属、卤素、 含金属、卤素、硫、磷、氮等特殊元素 药物制剂
分析样品前处理 采用一定的方法, 采用一定的方法,使待测药物 或待测元素转化为适宜的状态后, 或待测元素转化为适宜的状态后, 再进行分析测定． 再进行分析测定． 前处理对象
1. 含卤素元素（F、Cl、Br、I） 、 、 、） 2.金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn） 金属元素（ 、 、 、 、 金属元素 3.含N、P、S等元素 含 、 、 等元素
2 经水解后测定法 （1）碱水解后测定法 将含卤素的有机药物溶于适当溶 如乙醇） 剂（如乙醇）中,加氢氧化钠溶液回 流使其水解,将有机结合的卤素, 流使其水解,将有机结合的卤素,经 水解作用转变为无机的卤素离子, 水解作用转变为无机的卤素离子,然 后选用间接银量法测定. 后选用间接银量法测定. 适合于： 适合于：含卤素有机药物结构中卤 素原子结合不牢固的药物， 素原子结合不牢固的药物，如：卤 素和脂肪碳链相连者
三氯叔丁醇
CCl3—C(CH3 ) 2— OH + NaOH (CH3 ) 2 CO+NaCl + HCOONa NaCl + AgNO3 AgNO3 + NH4SCN AgCl↓+NaNO3 AgSCN↓+NH4NO3
（2） 用酸水解后测定法 适用于金属原子与脂肪链的碳原子 相连,结合不牢固药物. 相连,结合不牢固药物. • 例2：十一烯酸锌的含量测定 ： • 本品与稀盐酸共沸、水解生成十一稀酸和 本品与稀盐酸共沸、 氯化锌， 氯化锌，用乙二胺四乙酸二钠滴定液直接 滴定锌离子
硝酸① 硝酸-高氯酸法
②
硝酸硝酸-硫酸法
③
硫酸硫酸-硫酸盐法
凯氏定氮法
概述
1. 药物分析中氮测定法中最常用的一种方法 2. 凡有机含氮药物，无适当的含量测定方法 凡有机含氮药物， 可采用凯氏定氮法测定其中氮的含量， 时，可采用凯氏定氮法测定其中氮的含量， 由此换算出被测药物的含量 3. 操作简便，结果可靠、准确 操作简便，结果可靠、 4. 局限性：对硝基化合物、亚硝基化合物、 局限性：对硝基化合物、亚硝基化合物、 偶氮化合物以及杂环中的氮完全转变成氨 较为困难， 较为困难，测定有一定的难度
• 常用的催化剂：汞或汞盐>硒粉>铜盐> 常用的催化剂：汞或汞盐>硒粉>铜盐> 二氧化锰等 • ＊CuSO4：催化剂，使消解速度加快。 催化剂，使消解速度加快。 • 消解产物：(NH4)2SO4、NH4HSO4 消解产物：
• 对某些难以分解的药物（如含氮杂环结构药物）， 对某些难以分解的药物（如含氮杂环结构药物）， 在消解过程中常需加入辅助氧化剂， 在消解过程中常需加入辅助氧化剂，使分解完全 并缩短消解时间。 并缩短消解时间。 • 常用的辅助氧化剂：30％过氧化氢和高氯酸 常用的辅助氧化剂： ％ • 高氯酸为强氧化剂，用量不宜过大；若用量过大， 高氯酸为强氧化剂，用量不宜过大；若用量过大， 可能生成高氯酸铵而分解或将氮氧化成氮气而损 失，而且高氯酸在高温加热时易发生爆炸 • 辅助氧化剂的加入时间：不能在高温时加入，应 辅助氧化剂的加入时间：不能在高温时加入， 待消解液放冷后加入， 待消解液放冷后加入，并再次加热继续消解
一、 湿法破坏法
• 本法主要使用硫酸作为分解剂（消解剂或 本法主要使用硫酸作为分解剂（ 消化剂），常加入氧化剂（ 消化剂），常加入氧化剂（如：硝酸、高 ），常加入氧化剂 硝酸、 氯酸、过氧化氢等）作为辅助分解剂，根 氯酸、过氧化氢等）作为辅助分解剂， 据分解剂组合形式的不同，湿法分为： 据分解剂组合形式的不同，湿法分为：
Ca
2+
OH
[ HC
3
O
-
]
·5H2O
乳酸钙
O
例：乳酸钙含量测定
0.3g+水 放冷+NaOH 0.3g+水100ml 放冷+NaOH 15ml EDTA滴定 EDTA滴定 钙紫红素指示剂
(2)氧化还原滴定法 (2)氧化还原滴定法
O H OH O O Fe
富马酸亚铁
例：富马酸亚铁含量测定 富马酸亚铁溶于热硫酸, 富马酸亚铁溶于热硫酸,同时分解 释放出亚铁离子, 释放出亚铁离子,可选用铈量法进行 测定.邻二氮菲为指示剂. 测定.邻二氮菲为指示剂.
有机破坏方法
含金属、卤素、 含金属、卤素、氮、硫、磷等有机 药物结构中的待测元素离子与碳原子结 合牢固者, 合牢固者,用上述方法难以成为无机的 化合物,此时必须采用有机破坏的方法, 化合物,此时必须采用有机破坏的方法, 使之转变为无机化合物,方可进行测定. 使之转变为无机化合物,方可进行测定.
一、 湿法破坏法 二、 干法破坏法
2、仪器装置 、
3.操作方法： 3.操作方法： 操作方法
(1)．消解 在凯氏烧瓶中进行。 将样品、Con.H2SO4、K2SO4、CuSO4 放入凯氏烧瓶中一起加热，有机含N 化合物中的N全部转变成NH3并以铵盐 的形式固定－(NH4)2SO4、NH4HSO4。
＊H2SO4：氧化剂、炭化剂、固氮作用。 氧化剂、 氧化剂 炭化剂、固氮作用。 消解一般在通风橱中进行。 消解一般在通风橱中进行。 ＊为提高消解温度加硫酸盐，提高硫酸的沸点。 为提高消解温度加硫酸盐， 为提高消解温度加硫酸盐 提高硫酸的沸点。 常用的硫酸盐：硫酸钾、硫酸氢钾、 常用的硫酸盐：硫酸钾、硫酸氢钾、无水硫酸钠 浓硫酸（98.4％，沸点323 ％，沸点323℃ ），加入不 浓硫酸（98.4％，沸点323℃-330 ℃），加入不 同量硫酸钾， 同量硫酸钾，沸点不同 硫酸钾的浓度g/ml: 硫酸钾的浓度g/ml: 0 0.5 1.0 1.5 2.0 沸点℃ 沸点℃ ： 329 344 364 389 404 用量： 用量：H2SO4:K2SO4=2:1(V:W)
(3)．测定
① 直接滴定法 滴定液： 005mol/L 滴定液：0.005mol/L H2SO4液 ml的 005mol/L 1401mg mg的 每1ml的0.005mol/L H2SO4液≡0.1401mg的N 指示剂：甲基红指示剂：甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 终点颜色： 终点颜色：灰紫色 2NH3.H3BO3+H2SO4→(NH4)2SO4+2H3BO3
1、原理 含氮供试品与浓硫酸共热， 含氮供试品与浓硫酸共热 ， 供试 品中所含氮转变成氨， 品中所含氮转变成氨 ， 并与硫酸结 合为硫酸氢铵和硫酸铵， 合为硫酸氢铵和硫酸铵 ， 用氢氧化 钠碱化后， 释放出氨， 钠碱化后 ， 释放出氨 ， 随水蒸气馏 出 ， 用硼酸溶液或定过量的酸吸收 用标准酸液或标准碱液滴定， 后 ， 用标准酸液或标准碱液滴定 ， 用空白试验校正。 用空白试验校正。
第五章
药物定量分析与分 析方法验证
第一节 定量分析样品预处理方法
• 在进行药物定量分析之前，一般需根据分 在进行药物定量分析之前， 析方法的特点、 析方法的特点、化学原料药的结构与性质 及药物制剂的处方组成采用不同的方法对 试样进行前处理， 试样进行前处理，以满足所选用的分析方 法对试样的要求。 法对试样的要求。
COOH I I CH 3COHN I NHCOCH 3
COONa
→
NaOH
回流 加热
→
H 2N NH 2
Zn粉 Zn粉
+3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O NaI+AgNO3 AgI +NaNO3
曙红钠为吸附指示剂 黄色
玫瑰红色
（2）酸性还原后测定
在醋酸酸性条件下加还原剂锌 加热回流,使碳-碘键断裂, 粉,加热回流,使碳-碘键断裂,形成 无机碘化物后用银量法测定. 无机碘化物后用银量法测定. 如：碘番酸含量测定
3 经氧化还原后测定法
（1）碱性还原后测定 卤素结合于芳环上, 卤素结合于芳环上,由于分子碘 的结合较牢固, 的结合较牢固,需在碱性溶液中加还 原剂（如锌粉） 加热回流,使碳原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘 键断裂,形成无机碘化物后测定. 键断影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）
• 例：葡萄糖酸锑钠的含量测定 • 本品所含的五价锑具有氧化性，在酸性溶 本品所含的五价锑具有氧化性， 液中可氧化碘化钾并定量析出碘， 液中可氧化碘化钾并定量析出碘，选用间 接碘量法，用硫代硫酸钠滴定液滴定。 接碘量法，用硫代硫酸钠滴定液滴定。 • Sb5++2KI Sb3++I2+2K+ • I2 +2Na2S2O3 2NaI+Na2S4O6
（一）高温炽灼法
• 适用范围：1.含卤素药物的鉴别 适用范围： 含卤素药物的鉴别 • 2.含磷药物的定量测定 含磷药物的定量测定 • 3.药物中砷盐的检查 药物中砷盐的检查 • 根据分析对象与目的不同，常加无水碳酸钠、硝 根据分析对象与目的不同，常加无水碳酸钠、 酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化，例如: 酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化，例如 • a.含碘药物的鉴别：将适量样品置于坩埚中，直 含碘药物的鉴别： 含碘药物的鉴别 将适量样品置于坩埚中， 火炽灼，或与无水碳酸钠混合后，炽灼至紫色的 火炽灼，或与无水碳酸钠混合后， 碘蒸气产生。 碘蒸气产生。 • b.含氟、氯、溴等元素药物的鉴别：将适量样品 含氟、 溴等元素药物的鉴别： 含氟 置于坩埚中，与无水碳酸钠（或碳酸钠－ 置于坩埚中，与无水碳酸钠（或碳酸钠－碳酸钾 混合物）混合，炽灼至完全灰化，加水（ 混合物）混合，炽灼至完全灰化，加水（必要时 煮沸）溶解后鉴别。 煮沸）溶解后鉴别。
② 剩余滴定法 将蒸馏出来的NH 将蒸馏出来的 3 吸收于定过量 的标准酸（盐酸或硫酸）溶液中， 的标准酸（盐酸或硫酸）溶液中， 过量的酸用标准碱溶液滴定。 过量的酸用标准碱溶液滴定。
二、 干法破坏
——适用于含卤素、 ——适用于含卤素、硫、磷等有机 适用于含卤素 药物分析的前处理， 药物分析的前处理，也用于某些药物中 硒及砷盐的检查 根据破坏方式不同，分为： 根据破坏方式不同，分为： 高温炽灼法 氧瓶燃烧法
分析样品前处理 采用一定的方法, 采用一定的方法,使待测药物 或待测元素转化为适宜的状态后, 或待测元素转化为适宜的状态后, 再进行分析测定． 再进行分析测定． 前处理对象
1. 含卤素元素（F、Cl、Br、I） 、 、 、） 2.金属元素（Ca、Fe、Hg、Zn、Sn） 金属元素（ 、 、 、 、 金属元素 3.含N、P、S等元素 含 、 、 等元素
2 经水解后测定法 （1）碱水解后测定法 将含卤素的有机药物溶于适当溶 如乙醇） 剂（如乙醇）中,加氢氧化钠溶液回 流使其水解,将有机结合的卤素, 流使其水解,将有机结合的卤素,经 水解作用转变为无机的卤素离子, 水解作用转变为无机的卤素离子,然 后选用间接银量法测定. 后选用间接银量法测定. 适合于： 适合于：含卤素有机药物结构中卤 素原子结合不牢固的药物， 素原子结合不牢固的药物，如：卤 素和脂肪碳链相连者
三氯叔丁醇
CCl3—C(CH3 ) 2— OH + NaOH (CH3 ) 2 CO+NaCl + HCOONa NaCl + AgNO3 AgNO3 + NH4SCN AgCl↓+NaNO3 AgSCN↓+NH4NO3
（2） 用酸水解后测定法 适用于金属原子与脂肪链的碳原子 相连,结合不牢固药物. 相连,结合不牢固药物. • 例2：十一烯酸锌的含量测定 ： • 本品与稀盐酸共沸、水解生成十一稀酸和 本品与稀盐酸共沸、 氯化锌， 氯化锌，用乙二胺四乙酸二钠滴定液直接 滴定锌离子
硝酸① 硝酸-高氯酸法
②
硝酸硝酸-硫酸法
③
硫酸硫酸-硫酸盐法
凯氏定氮法
概述
1. 药物分析中氮测定法中最常用的一种方法 2. 凡有机含氮药物，无适当的含量测定方法 凡有机含氮药物， 可采用凯氏定氮法测定其中氮的含量， 时，可采用凯氏定氮法测定其中氮的含量， 由此换算出被测药物的含量 3. 操作简便，结果可靠、准确 操作简便，结果可靠、 4. 局限性：对硝基化合物、亚硝基化合物、 局限性：对硝基化合物、亚硝基化合物、 偶氮化合物以及杂环中的氮完全转变成氨 较为困难， 较为困难，测定有一定的难度
• 常用的催化剂：汞或汞盐>硒粉>铜盐> 常用的催化剂：汞或汞盐>硒粉>铜盐> 二氧化锰等 • ＊CuSO4：催化剂，使消解速度加快。 催化剂，使消解速度加快。 • 消解产物：(NH4)2SO4、NH4HSO4 消解产物：
• 对某些难以分解的药物（如含氮杂环结构药物）， 对某些难以分解的药物（如含氮杂环结构药物）， 在消解过程中常需加入辅助氧化剂， 在消解过程中常需加入辅助氧化剂，使分解完全 并缩短消解时间。 并缩短消解时间。 • 常用的辅助氧化剂：30％过氧化氢和高氯酸 常用的辅助氧化剂： ％ • 高氯酸为强氧化剂，用量不宜过大；若用量过大， 高氯酸为强氧化剂，用量不宜过大；若用量过大， 可能生成高氯酸铵而分解或将氮氧化成氮气而损 失，而且高氯酸在高温加热时易发生爆炸 • 辅助氧化剂的加入时间：不能在高温时加入，应 辅助氧化剂的加入时间：不能在高温时加入， 待消解液放冷后加入， 待消解液放冷后加入，并再次加热继续消解
一、 湿法破坏法
• 本法主要使用硫酸作为分解剂（消解剂或 本法主要使用硫酸作为分解剂（ 消化剂），常加入氧化剂（ 消化剂），常加入氧化剂（如：硝酸、高 ），常加入氧化剂 硝酸、 氯酸、过氧化氢等）作为辅助分解剂，根 氯酸、过氧化氢等）作为辅助分解剂， 据分解剂组合形式的不同，湿法分为： 据分解剂组合形式的不同，湿法分为：
Ca
2+
OH
[ HC
3
O
-
]
·5H2O
乳酸钙
O
例：乳酸钙含量测定
0.3g+水 放冷+NaOH 0.3g+水100ml 放冷+NaOH 15ml EDTA滴定 EDTA滴定 钙紫红素指示剂
(2)氧化还原滴定法 (2)氧化还原滴定法
O H OH O O Fe
富马酸亚铁
例：富马酸亚铁含量测定 富马酸亚铁溶于热硫酸, 富马酸亚铁溶于热硫酸,同时分解 释放出亚铁离子, 释放出亚铁离子,可选用铈量法进行 测定.邻二氮菲为指示剂. 测定.邻二氮菲为指示剂.
有机破坏方法
含金属、卤素、 含金属、卤素、氮、硫、磷等有机 药物结构中的待测元素离子与碳原子结 合牢固者, 合牢固者,用上述方法难以成为无机的 化合物,此时必须采用有机破坏的方法, 化合物,此时必须采用有机破坏的方法, 使之转变为无机化合物,方可进行测定. 使之转变为无机化合物,方可进行测定.
一、 湿法破坏法 二、 干法破坏法
2、仪器装置 、
3.操作方法： 3.操作方法： 操作方法
(1)．消解 在凯氏烧瓶中进行。 将样品、Con.H2SO4、K2SO4、CuSO4 放入凯氏烧瓶中一起加热，有机含N 化合物中的N全部转变成NH3并以铵盐 的形式固定－(NH4)2SO4、NH4HSO4。
＊H2SO4：氧化剂、炭化剂、固氮作用。 氧化剂、 氧化剂 炭化剂、固氮作用。 消解一般在通风橱中进行。 消解一般在通风橱中进行。 ＊为提高消解温度加硫酸盐，提高硫酸的沸点。 为提高消解温度加硫酸盐， 为提高消解温度加硫酸盐 提高硫酸的沸点。 常用的硫酸盐：硫酸钾、硫酸氢钾、 常用的硫酸盐：硫酸钾、硫酸氢钾、无水硫酸钠 浓硫酸（98.4％，沸点323 ％，沸点323℃ ），加入不 浓硫酸（98.4％，沸点323℃-330 ℃），加入不 同量硫酸钾， 同量硫酸钾，沸点不同 硫酸钾的浓度g/ml: 硫酸钾的浓度g/ml: 0 0.5 1.0 1.5 2.0 沸点℃ 沸点℃ ： 329 344 364 389 404 用量： 用量：H2SO4:K2SO4=2:1(V:W)
(3)．测定
① 直接滴定法 滴定液： 005mol/L 滴定液：0.005mol/L H2SO4液 ml的 005mol/L 1401mg mg的 每1ml的0.005mol/L H2SO4液≡0.1401mg的N 指示剂：甲基红指示剂：甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 终点颜色： 终点颜色：灰紫色 2NH3.H3BO3+H2SO4→(NH4)2SO4+2H3BO3
1、原理 含氮供试品与浓硫酸共热， 含氮供试品与浓硫酸共热 ， 供试 品中所含氮转变成氨， 品中所含氮转变成氨 ， 并与硫酸结 合为硫酸氢铵和硫酸铵， 合为硫酸氢铵和硫酸铵 ， 用氢氧化 钠碱化后， 释放出氨， 钠碱化后 ， 释放出氨 ， 随水蒸气馏 出 ， 用硼酸溶液或定过量的酸吸收 用标准酸液或标准碱液滴定， 后 ， 用标准酸液或标准碱液滴定 ， 用空白试验校正。 用空白试验校正。
第五章
药物定量分析与分 析方法验证
第一节 定量分析样品预处理方法
• 在进行药物定量分析之前，一般需根据分 在进行药物定量分析之前， 析方法的特点、 析方法的特点、化学原料药的结构与性质 及药物制剂的处方组成采用不同的方法对 试样进行前处理， 试样进行前处理，以满足所选用的分析方 法对试样的要求。 法对试样的要求。
COOH I I CH 3COHN I NHCOCH 3
COONa
→
NaOH
回流 加热
→
H 2N NH 2
Zn粉 Zn粉
+3NaI+2CH3COONa+3Na2ZnO2+3H2O NaI+AgNO3 AgI +NaNO3
曙红钠为吸附指示剂 黄色
玫瑰红色
（2）酸性还原后测定
在醋酸酸性条件下加还原剂锌 加热回流,使碳-碘键断裂, 粉,加热回流,使碳-碘键断裂,形成 无机碘化物后用银量法测定. 无机碘化物后用银量法测定. 如：碘番酸含量测定
3 经氧化还原后测定法
（1）碱性还原后测定 卤素结合于芳环上, 卤素结合于芳环上,由于分子碘 的结合较牢固, 的结合较牢固,需在碱性溶液中加还 原剂（如锌粉） 加热回流,使碳原剂（如锌粉）,加热回流,使碳-碘 键断裂,形成无机碘化物后测定. 键断影酸（卤素原子与芳环相连,化学键牢固）
• 例：葡萄糖酸锑钠的含量测定 • 本品所含的五价锑具有氧化性，在酸性溶 本品所含的五价锑具有氧化性， 液中可氧化碘化钾并定量析出碘， 液中可氧化碘化钾并定量析出碘，选用间 接碘量法，用硫代硫酸钠滴定液滴定。 接碘量法，用硫代硫酸钠滴定液滴定。 • Sb5++2KI Sb3++I2+2K+ • I2 +2Na2S2O3 2NaI+Na2S4O6
（一）高温炽灼法
• 适用范围：1.含卤素药物的鉴别 适用范围： 含卤素药物的鉴别 • 2.含磷药物的定量测定 含磷药物的定量测定 • 3.药物中砷盐的检查 药物中砷盐的检查 • 根据分析对象与目的不同，常加无水碳酸钠、硝 根据分析对象与目的不同，常加无水碳酸钠、 酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化，例如: 酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化，例如 • a.含碘药物的鉴别：将适量样品置于坩埚中，直 含碘药物的鉴别： 含碘药物的鉴别 将适量样品置于坩埚中， 火炽灼，或与无水碳酸钠混合后，炽灼至紫色的 火炽灼，或与无水碳酸钠混合后， 碘蒸气产生。 碘蒸气产生。 • b.含氟、氯、溴等元素药物的鉴别：将适量样品 含氟、 溴等元素药物的鉴别： 含氟 置于坩埚中，与无水碳酸钠（或碳酸钠－ 置于坩埚中，与无水碳酸钠（或碳酸钠－碳酸钾 混合物）混合，炽灼至完全灰化，加水（ 混合物）混合，炽灼至完全灰化，加水（必要时 煮沸）溶解后鉴别。 煮沸）溶解后鉴别。
② 剩余滴定法 将蒸馏出来的NH 将蒸馏出来的 3 吸收于定过量 的标准酸（盐酸或硫酸）溶液中， 的标准酸（盐酸或硫酸）溶液中， 过量的酸用标准碱溶液滴定。 过量的酸用标准碱溶液滴定。
二、 干法破坏
——适用于含卤素、 ——适用于含卤素、硫、磷等有机 适用于含卤素 药物分析的前处理， 药物分析的前处理，也用于某些药物中 硒及砷盐的检查 根据破坏方式不同，分为： 根据破坏方式不同，分为： 高温炽灼法 氧瓶燃烧法