气-质联用法研究水溶性茯苓多糖提取方法

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关于茯苓多糖提取的研究

浓度（ｍｇ／ｍｌ１
图１单糖标准曲线
标准曲线方程为：［Ａｂｓ］４９０＝０．０ｌ５６＋０．０５２ｌ ×
时（ｈ）
图３提取时间对多糖提取率的影响
－
２２２－
中国园艺文摘
● 第第２第３均平
１８０ｌ７０
加入９０％乙醇（体积比）２００ｍｌ进行脱脂，回流加热３ｈ，弃去酒精。再将茯苓研磨成粉，调整温度（水量和温度按条件加入），加水若干提取。取出提取物，抽滤，取滤液，即得到水提的茯苓多糖，准确量
作为正交试验水平因子的考查范围，详细讨论见２．５。
入标准曲线即可求出所测溶液的糖含量。
２结果和分析
２．１温度对多糖提取率的影响
为考察温度对茯苓多糖提取率的影响，固定ｐＨ
值７．０，料液比ｌ：８，提取时间３ｈ，进行变温试验。
苓粉末的颗粒大小；加快搅拌，并适当增加浸提时间；增加溶剂用量，提高固液比，增加提取次数等。
中国园艺文摘
２０１７年第８期
关于茯苓多糖提取的研究
王洁，刘鑫
（成都农业科技职业学院，四川成都６１１１３０）
摘要：阐述温度、料液比、提取用时等对茯苓多糖提取的影响，经试验分析得到较优茯苓多糖提取
子。其中，多糖在有机体内大多以糖肽类、核糖核酸、糖脂类物质存在。通常所说的多糖又可称为多聚糖，

茯苓多糖的提取纯化及应用研究进展_张晓娟

于受给药部位的限制,不少中药外用制剂的量效关系并不明显;原则上动物实验外用剂量有一个与临床外用是等效剂量。

针对皮肤用药的特点,经多次试验和分析,认为动物与人等面积用药量一致就是等效剂量,而不是内服药动物用量是人用量的数倍。

1.5 结果观察、判断及指标检测外用动物实验研究原则上以病理切片、照片为重点指标,生化指标是重要的现代数据指标;尽量通过几种观察方法、检测方法对同一批动物实验进行多方位的证实,建立尽可能多的能证实中药外用疗效的指标体系。

许多指标不好确定,可用其他方式换算,例如皮肤烧伤面积测定,可用透明硫酸纸描绘皮肤烫伤面积的图形,称取烫伤皮肤面积图纸的重量,以该重量变化表示皮肤烫伤面积的变化;可用图像分析仪对局部取像后进行分析等[4]。

动物整体情况的肉眼观察、整体变化等,虽是较粗的指标,但也是最能反应临床特点、最受看重的指标;减少指标受影响的关键是要对相关指标的判断进行培训,最好专人、定时、同环境、同条件进行观察判定,以照片、录像等为补充。

1.6 外用药药效的发挥动物局部给药是针对症状和引起的原因用药,为对症治疗,大部分药物在局部或直接进入给药部位发生药效;但药物也可进入血液循环对全身疾病发生作用,或通过影响局部产生药效后间接影响整体发挥全身作用。

根据药效的特点,应设立尽可能多的指标,对局部或整体疗效进行评价。

有些情况下中药外用是和内服配合床治疗疾病,但实验采用内服加外用,不好评价各自的作用;必要时可多设组别,如单独外用、单独内服、外用内服联用。

但最好是观察单独外用的作用。

应考虑动物在遗传背景、皮肤组织结构、生理功能、反应能力等方面与人有种属差异,更有情志等的影响;再者动物实验多是在较短的接触时间、较高的剂量下进行,与临床应用有较大差异,应注意不可直接进行动物实验与人体实验的相互推定。

外用药的局部刺激作用有时是与其疗效相关联的,应考虑动物实验与人体实验在安全性方面的差异[5]。

中药外用疗效的确定最好能在临床进行,但因现行医药管理制度的问题,临床研究的可控性及代价问题等,使大规模临床试用受到限制,只有通过药理实验来弥补。

茯苓多糖的提取、结构、活性和作用机理研究进展

圆园21年4月第42卷第8期DOI ：10.12161/j.issn.1005-6521.2021.08.028食品研究与开发茯苓（Poria cocos ）为多孔菌科真菌茯苓Poria co 原cos （Schw.）Wolf 的干燥菌核，是我国重要的传统药物之一[1]。

作为一种药食同源的物质，我国传统医学认为茯苓有利水渗湿、健脾和宁心的功效，可以用来治疗水肿、小便不利等。

研究发现，茯苓中多糖成分约占菌核干重的70%耀90%[2]，其余为三萜类化合物、甾体类、蛋白质等成分[3]。

自20世纪70年代报道茯苓多糖抗肿瘤作用以来[4]，茯苓多糖的功效报道集中于免疫活性调节、抗肿瘤、抗氧化等作用[5]。

茯苓中的多糖不易溶于水，经过结构改性后得到溶于水的茯苓多糖，抗肿瘤活性得以提高[6-7]。

因此，研究如何高效提取茯苓多糖及后续的活性、结构研究成为研究的热点。

本文综述了茯苓多糖的提取、结构研究、功能活性机制及安基金项目：国家重点研发计划（2018YFC1602106）作者简介：刘星汶（1995—），女（汉），硕士研究生，研究方向：生物活性多糖。

*通信作者：杨继国（1977—），男，教授级高级工程师，博士，研究方向：食品生物化学。

茯苓多糖的提取、结构、活性和作用机理研究进展刘星汶1，徐晓飞2，刘玮2，赵云鹏1，张尚微1，沈艺楠1，杨继国1，2*（1.华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州510640；2.华南协同创新研究院，广东东莞523808）摘要：真菌多糖具有悠久的研究历史，且生物活性广泛。

茯苓多糖来源于多孔菌科真菌茯苓（Poria cocos ）的菌核，具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等多种功能活性，成为近年来的研究热点。

该文主要综述茯苓多糖的提取工艺、结构、功能活性、作用机理以及安全性研究进展，最后对茯苓多糖的应用前景进行展望。

关键词：茯苓多糖；提取工艺；功能活性；构效关系；安全性研究Research Progress on Extraction ，Structure ，Activity and Mechanism of Poria cocos -derived PolysaccharidesLIU Xing-wen 1，XU Xiao-fei 2，LIU Wei 2，ZHAO Yun-peng 1，ZHANG Shang-wei 1，SHEN Yi-nan 1，YANG Ji-guo 1，2*（1.College of Food Science and Engineering ，South China University of Technology ，Guangzhou 510640，Guangdong ，China ；2.South China Institute of Collaborative Innovation ，Dongguan 523808，Guangdong ，China ）Abstract ：Fungal polysaccharides have been intensively investigated for a long time ，which exhibited a widerange of biological activities.Poria cocos -derived polysaccharides ，which were obtained from the sclerotia of Poria cocos ，have been proven to have various bioactivities such as immunomodulation ，anti -tumor ，anti -inflammation ，anti-oxidation ，etc.In this paper ，the extraction methods ，structure ，functional activities and the corresponding mechanism of Poria cocos polysaccharides as well as the safety assessment were reviewed.Finally ，the application prospect of Poria cocos -derived polysaccharides was discussed.Key words ：Poria cocos -derived polysaccharides ；extraction method ；functional activity ；structure-functionalrelationship ；safety assessment引文格式：刘星汶，徐晓飞，刘玮，等.茯苓多糖的提取、结构、活性和作用机理研究进展[J].食品研究与开发，2021，42（8）：172-178.LIU Xingwen ，XU Xiaofei ，LIU Wei ，et al.Research Progress on Extraction ，Structure ，Activity and Mechanism of Poria cocos -derived Polysaccharides[J].Food Research and Development ，2021，42（8）：172-178.专题论述172食品研究与开发圆园21年4月第42卷第8期1.2茯苓多糖的结构研究来自茯苓菌核和菌丝体的茯苓多糖大多是以β-（1→3）-糖苷键为主链，伴有少量β-（1→6）-糖苷键的分支葡聚糖[22]。

茯苓多糖的提取技术

茯苓多糖的提取技术作者：周琳来源：《农民致富之友》2013年第22期[中图分类号] S-1 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 （2013）11-0182-01一、引言茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。

二、材料与方法1.茯苓多糖的提取方法2.均匀设计实验对超声波提取茯苓多糖提取工艺2.1器材及药品茯苓，数控超声波清洗器，紫外分光光度计，电子分析天平。

葡萄糖标准品，苯酚，浓硫酸和铝片等。

2.2.方法2.2.1药材粉碎度的选择参照文献条件，取不同粒度茯苓药材，在乙醇浓度50%，提取温度45℃条件下超声提取20 min，。

实验结果表明，药材粒度为20～60目时，提取时提取率较好。

2.2.2提取次数的选择取20～60目粒度茯苓药材，在2.2.2.1条件下分别提取1，2，3次，结果表明，超声波提取1次后，茯苓多糖即已提取完全。

2.2.3 茯苓提取物中多糖含量的测定方法2.2.3.1 4%苯酚溶液的配制取苯酚100 g，加鋁片0.1 g和碳酸氢钠0.05 g，蒸馏并收集182 ℃馏分，称取4 g，在100 ml容量瓶加水溶解至刻度线，然后放冰箱内冷藏备用。

2.2.3.2制备标准曲线精密称取置五氧化二磷减压干燥器中干燥12 h以上的无水葡萄糖标准品15 mg，置25 ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀置室温下（约24℃）备用（浓度为0.6 mg/ml）。

精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，分别置于100 ml容量瓶中，并加水至刻度，摇匀。

精密量取上述各溶液2 ml，置具塞试管中，分别加入4%的苯酚溶液1 ml，混匀后迅速加入浓硫酸7.0 ml，摇匀，并于45℃水浴中保温30 min后取出，置冰水浴中5 min后取出。

然后以第1份为空白对照组，用分光光度计在490 nm的波长处测定其吸收度A，以吸光度（A）为纵坐标，溶液浓度C为横坐标。

茯苓多糖的提取

茯苓多糖的提取技术作者：周琳班级：食品0931班【摘要】茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。

为进一步优化茯苓多糖的提取工艺，促进其开发应用，文章参考大量国内外文献，对近几年茯苓多糖的提取及其应用作一综述。

【关键词】茯苓多糖，提取，超声波法1.引言自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖(zymosan)具有免疫增强以及抗肿瘤作用以来，人们对多糖的研究产生了极大的兴趣，尤其是其生物活性方面的研究。

茯苓多糖到底是什么呢？它有什么作用呢？茯苓多糖是近年来研究较多的一种真菌多糖，来源于多孔菌科真菌茯苓的菌核，约占整个茯苓菌核干重的70%～90%［1］，其化学组成为（1→3）-β-D- 葡聚糖［2］。

茯Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核，在我国资源丰富，全国各地均自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖具有免疫增强以及抗肿瘤作用以有栽培，主产于云南、安徽、湖南等省。

茯苓是一味使用历史悠久的中药，在《神农本草经》中被列为上品，谓其“主胸胁逆气，利小便，久服安魂宁神，不饥延年。

”《本草纲目》也记载：茯苓“治头风虚眩，暖腰膝，主五劳七伤。

”历代医家均肯定茯苓既有滋补强身作用，又有渗湿利水、益脾和胃、宁心安神之功。

茯苓药性缓和，补而不峻，利而不猛，既能扶正，又可祛邪，能治疗脾胃虚弱、遗精早泄、心悸失眠、健忘多梦、小便不利、呕吐腹泻等症。

其主要有效成分茯苓多糖是一种非特异性免疫促进剂，其不仅能够提高机体的抗病能力，还有较强的抗癌作用。

其性味甘、淡、平，归脾胃肺肾经，有利水渗湿、益脾宁心之功效。

主治气虚劳伤、水肿、痰饮、呕吐、腹泻、热淋、遗精、惊悸、健忘等证。

茯苓多糖是茯苓的有效部位之一，为灰白色粉末，味微咸，无臭，略有吸湿性。

茯苓多糖的提取纯化及应用研究进展

四、结论与展望
茯苓多糖作为一种天然的生物活性物质，具有广泛的应用前景。在医药领域中,茯苓多糖对机体各方面表现出多种生理功能,具重要的药理活性,在临床治疗及药物开发方面展现出了广阔的前景；在食品领域中,茯苓多糖可以作为食品添加剂改善食品口感和质地,同时也可以作为生产保健食品的原料；
在化妆品领域中,茯苓多糖具有保湿和抗氧化等作用,可以用于生产化妆品提高产品的性能。然而,对于如何充分发挥其潜在的药用价值,还需要进行深入的研究与探讨,在实际应用过程中也需要不断进行工艺优化以提高产品的质量和产量, 使茯苓这一传统中药中的有效成分更好地服务于人类健康和生活。
3、超声波辅助法
超声波辅助法是一种利用超声波的振动作用加速茯苓中多糖成分的释放的方法。该方法具有操作简单、提取时间短、提取效率高等优点。在超声波的作用下，茯苓组织的细胞壁被破坏，多糖成分更容易释放出来。同时，超声波的振动作用还可以加速溶剂的渗透和扩散，进一步提高了提取效率。然而，超声波辅助法也存在一些缺点，如超声波的噪音较大、对设备的要求较高等。
二、茯苓多糖的提取纯化方法
1、溶剂提取法
溶剂提取法是提取茯苓多糖的常用方法之一。该方法主要是利用多糖在不同溶剂中的溶解度不同，将多糖从茯苓中分离出来。常用的溶剂包括水、醇类和酮类等。其中，水是常用的提取溶剂，因为多糖在水中的溶解度较大。然而，水提取法也存在一些缺点，如提取时间长、需要大量的水等。因此，一些研究人员尝试使用其他溶剂进行提取，如醇类和酮类等。
多糖纯化技术
多糖的纯化技术主要包括沉淀法、色谱法、电泳法和膜分离法等。其中，沉淀法操作简单，但纯化效果较差；色谱法能够实现高效分离，但成本较高；电泳法能够分离出具有电泳活性的多糖，但不适用于大规模生产；膜分离法能够实现分子级别的分离，但膜的制备和清洗成本较高。近年来，一些新的纯化技术，如亲和色谱法、免疫分离法和纳米膜分离法等也逐渐应用于多糖的纯化。

茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展

茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展一、本文概述茯苓，作为一种具有悠久药用历史的中药材，其在中医药领域的应用广泛而深入。

茯苓多糖作为茯苓的主要活性成分之一，近年来受到了越来越多的关注。

本文旨在全面综述茯苓多糖的提取方法、化学结构以及药理作用的研究进展，以期为茯苓多糖的进一步开发利用提供理论支持和实验依据。

本文将概述茯苓多糖的提取方法，包括传统的水提法、醇提法以及现代的微波辅助提取、酶解法等，并分析各种方法的优缺点。

本文将详细介绍茯苓多糖的化学结构特征，包括其分子量、单糖组成、糖苷键类型等，以及近年来在结构解析方面取得的新进展。

本文将重点综述茯苓多糖的药理作用，如免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等，并探讨其可能的作用机制。

通过本文的综述，期望能够为茯苓多糖的深入研究和应用提供有益的参考和启示。

二、茯苓多糖的提取方法茯苓多糖的提取方法对于其后续的结构研究和药理作用分析具有重要影响。

近年来，随着科学技术的发展，茯苓多糖的提取方法也在不断地优化和创新。

传统的提取方法主要包括水提法、醇提法等。

水提法是以水为溶剂，通过加热煮沸使茯苓中的多糖成分溶解于水中，然后通过浓缩、干燥等步骤得到多糖提取物。

这种方法操作简单，成本低廉，但提取效率较低，且易受到其他水溶性杂质的干扰。

醇提法则是利用醇类溶剂对多糖的溶解性进行提取，常用的溶剂有乙醇、甲醇等。

醇提法相对于水提法，提取效率较高，但成本也相应增加，且需要注意溶剂残留的问题。

随着现代提取技术的发展，出现了许多新型的提取方法，如超声波提取法、微波提取法、超临界流体提取法等。

超声波提取法利用超声波的空化作用、机械振动和热效应等，使茯苓细胞壁破裂，多糖成分更易溶出。

这种方法提取时间短，效率高，但设备成本较高。

微波提取法则是利用微波对物质分子的热效应和非热效应，使茯苓中的多糖成分快速溶出。

微波提取法具有提取速度快、提取效率高、节能环保等优点，但需要注意微波功率和时间的控制。

茯苓中多糖的提取及含量测定方法综述

茯苓中多糖的提取及含量测定方法综述摘要】茯苓多糖具有多种生物活性，在药用方面具有广泛的应用前景，现针对茯苓中多糖的提取及含量测定定方法作一综述。

【关键词】茯苓多糖提取含量测定Content Determination And Extraction Methods Of Polysaccharides of Poria Cocos Hui Qiusha（Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan, 250014）【Abstract】Polysaccharides of poria cocos have the variety of biological activity.They have wide application foreground in Chinese Medicine field. Now a review about the content determination and extraction methods of polysaccharides of poria cocos was made.【Key words】 polysaccharides of poria cocos extraction content determination 茯苓(poria cocos)为多孔菌科(polyporaceae)真菌茯苓的干燥菌，是卫生部公布的药食两用物品之一，也是我国保健食品重要原料。

茯苓主要化学成分有茯苓多糖、三萜、树胶、甾醇、蛋白质、维生素、微量元素等多种营养成分[1]。

其中多糖β-茯苓聚糖是茯苓主要活性成分,占干重的93％[2]。

近年来，国内外学者对茯苓多糖进行了大量研究，发现其主要有增强免疫、延缓衰老、抗病毒、抗肿瘤、降血糖等药理作用[3]，在药用及保健方面有广阔的前景。

现总结了近年来茯苓多糖提取应用比较多的方法，并对其含量测定方法作一综述。

气-质联用法研究水溶性茯苓多糖提取方法

气-质联用法研究水溶性茯苓多糖提取方法王献;赵文杰;苏波【摘要】为研究水溶性茯苓多糖提取方法, 分别采用热水提取法及超声提取法提取水溶性茯苓多糖,并以杂多糖的得率为指标设计正交试验,采用BSTFA(双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺)和DMF (N,N-二甲基甲酰胺)对杂多糖进行衍生化,采用D-果糖作内标进行气相色谱-质谱联用(GC-MS)定量分析.实验表明: 热水浸提的最佳条件为固液比1:40,提取时间3 h,提取温度90 ℃;超声波法最佳条件为固液比1:40,提取时间60 min,超声功率为100 W.热水提取和超声提取水溶性茯苓多糖的平均提取率分别为13.0 %, 8.6 %,热水浸提法的多糖得率较高.均高于现有文献值报道.【期刊名称】《中南民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(029)001【总页数】4页(P28-31)【关键词】气-质联用;热水浸提法;超声波提取法;水溶性茯苓多糖【作者】王献;赵文杰;苏波【作者单位】中南民族大学,化学与材料科学学院,武汉,430074;中南民族大学,化学与材料科学学院,武汉,430074;中南民族大学,化学与材料科学学院,武汉,430074【正文语种】中文【中图分类】O657.63茯苓(Po ria cocos)是一种药用真菌[1].茯苓多糖主要分水溶性茯苓多糖和碱溶性茯苓多糖,水溶性茯苓多糖是杂多糖,含量较低,临床证明是一种具有“扶正固体”、无任何毒副作用的抗肿瘤药物[2].热水浸提法和超声法是提取水溶性多糖应用较为广泛的方法[3-5],传统的测定方法为苯酚-浓硫酸法、蒽酮-浓硫酸法等[6-9].近几年来,随着多糖的分离分析和鉴定技术的发展,上述方法已由现代仪器分析技术,尤其色谱以及色谱-质谱联用技术所取代[10-13].一般化学法,手续繁杂,而且只能测定杂多糖的粗略总量[12],而GC-MS(气相色谱-质谱联用)法具有准确定性、分辨率高、灵敏度高等特点[14-15],大大提高了对多糖定量的可靠性.因此,本实验利用衍生化GCMS法和内标定量,优选热水浸提法和超声波法提取水溶性茯苓多糖的提取条件,研究了得到更高多糖得率及更加可靠的提取水溶性茯苓多糖的条件.1 实验部分1.1 仪器与试药HP6890N-5973MSD气相色谱-质谱联用仪(美国安捷伦科技有限公司);HP-5MSAglient(0.25mm×30m×0.25μm)弹性石英熔融毛细管柱(美国安捷伦科技有限公司);调温电热套(北京市永光明医疗仪器厂);智能集热式恒温加热磁力搅拌器(上海东玺制冷仪器设备有限公司);真空干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);超声波细胞粉碎机(宁波新芝科学仪器研究所).果糖(对照品(≥ 99.5%)上海晶纯试剂有限公司),其它试剂均为分析纯.茯苓为湖北省罗田县规范化种植基地(GAP)的九资河茯苓(由湖北省中医药研究院药物研究所鉴定).1.2 实验方法1.2.1 GC-MS测定条件载气:氦气;进样口温度:260℃;柱流速:1mL/min,进样量:1μL;分流比为20∶1;气化室温度:260℃;升温程序:起始温度为50℃,8℃/min升温至260℃;离子源:EI源;离子源温度:230℃;四极杆温度:150℃;气-质接口温度:280℃;电子能量:70eV.1.2.2 样品预处理将块状茯苓60℃下真空干燥,粉碎至60目,密封于密封袋中备用.1.2.3 水溶性茯苓多糖热水浸提水溶性茯苓多糖的提取步骤:茯苓粉末→浸泡过夜→加热回流→抽滤→浓缩→乙醇沉淀→依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→茯苓多糖粗品.1.2.4 水溶性茯苓多糖的超声提取水溶性茯苓多糖提取步骤:茯苓粉末→超声提取→抽滤→浓缩→乙醇沉淀→依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→茯苓多糖粗品.1.2.5 茯苓多糖水解和衍生化方法取5mg茯苓多糖粗品,加入5mL1mol/L H2SO4水解,适量BaSO4调至中性,取1mL水解后样品,加入100μL果糖(2mg/mL)做内标物,置于真空干燥箱中于65℃下烘干,冷却后分别加入50 μLBSTFA 和DMF各50μL,充氮密封,于75℃下水浴30min,待样品冷却后各加入500μL丙酮,离心取上清液待GC-MS分析.1.2.6 标准单糖GC-MS定量分析和标准曲线制备分别精密量取D-木糖醇/D-葡萄糖/D-甘露醇标准溶液(2mg/mL)10,20,30,40,50,100,150,200,250μL于干净干燥样品瓶中,再分别加入2mg/mL的果糖标准溶液100μL作内标物,按1.2.5中进行衍生化及GC-MS分析.以对照品单糖衍生物峰面积与内标衍生物峰面积之比为纵坐标Y,以对照品单糖衍生物质量浓度与内标衍生物质量浓度之比为横坐标X作图即为标准曲线.2 结果与讨论2.1 GC-MS定性分析图1为热水浸提茯苓多糖的GC-MS总离子流图,图2为单糖的质谱图.图1依出峰顺序各单糖组分分别为序号1～10.通过GC-MS仪的NSIT图谱库分析保留时间18.44min的峰(1),对应化合物名称为:D-1,2,3,4,5-五环-O-(三甲基硅烷基)-木糖醇,分子式C20H52O5Si5,其质谱图和结构式见图2.并且对照衍生化标准品D-木糖醇的GC-MS分析,获知其保留时间、质谱图与峰(1)一致,确认水溶性茯苓多糖中含有D-木糖醇.衍生化标准品D-果糖的GC-MSTIC谱图有3个色谱峰,保留时间分别为19.47,19.57,19.70min,与图1 中峰(3)、(4)、(5)一致,且其质谱图也完全相同,表明这3峰归属于所加入的内标物D-果糖的衍生物,即D-1,3,4,5,6,-五环-O-(三甲基硅烷基)-果糖,分子式为C21H52O6Si5,相同方法依次确认了保留时间为20.54min和21.63min的峰(8)和峰(10)为衍生化D-葡萄糖;保留时间为21.24 min的峰(9)的化合物为衍生化D-甘露醇.研究表明超声提取与热水提取茯苓多糖的GC-MS总离子流图的单糖出峰顺序和成份相当一致,只是糖类相对丰度略有不同.综上所述,水溶性茯苓多糖中所包含的单糖成分主要有D-木糖醇、D-甘露醇、D-葡萄糖.热水浸提法为胞外提取法,超声提取法为胞内提取法,通过对两者的GC-MSTIC谱图分析,观察到热水浸提法谱图峰数较多较杂,峰形较宽,且衍生化葡萄糖、甘露醇、木糖醇的相对丰度要高于超声提取法.其主要差别可能来自于茯苓子实体结构较为致密,超声提取茯苓虽然经过较高功率的超声波破碎细胞壁进行的胞内提取[16]但总提取时间较短,而热水胞外提取通过浸泡和较长时间的加热回流有助于提取率的提高.图1 热水浸提茯苓多糖的GC-M S总离子图Fig.1 To tal ion ch rom atography(T IC)spectrum o f po riacocospo lysacchar by ho tw ater ex traction图2 D-1,2,3,4,5-五环-O-(三甲基硅烷基)-木糖醇的质谱图及化学结构式Fig.2 M ass spectrum o f 1,2,3,4,5-pen tak is-O-(trim ethy lsily l)-D-xy lito land its chem ical structure2.2 正交实验分析热水浸提茯苓多糖以蒸馏水为提取剂,固液比(1∶20,1∶30,1∶40)、提取时间(3,4,5 h)、提取温度(80,90,100℃)为影响茯苓多糖提取得率的主要因素,设计三因素三水平正交实验表进行正交实验.超声提取茯苓多糖以蒸馏水为提取剂,固液比(1∶10,1∶20,1∶30,1∶40),超声时间(15,30,45,60m in),超声功率(100,200,300,400W)主要影响因素,茯苓多糖提取得率(其单糖组分得率之和)为指标,设计三因素四水平正交实验表进行正交实验.根据极差分析(见表1)可知,影响热水浸提茯苓多糖得率的因素A＞B＞C,最佳条件为A 3B 1C2,即固液比1∶40,提取时间3 h,提取温度90℃;影响超声提取茯苓多糖的因素A＞C＞B,超声提取茯苓多糖的最佳条件为A 4C1B 4,即固液比1∶40,超声功率为100W,提取时间60m in. 表1 极差分析Tab.1 Rang analysis tab le效应值A B CA B C(固液比)(提取时间)(提取温度)(固液比)(提取时间)(提取温度)K―1 6.5 10.9 9.5 5.5 7.4 8.9 K―2 10.9 8.2 10.6 7.6 8.1 8.8 K―3 11.8 10.0 9.0 8.7 8.1 8.0 K―4 10.6 8.3 6.8极差R 5.3 2.7 1.6 5.1 0.9 2.1因素主次 ABC ACB最优方案 A 3B 1C2 A 4C1B 42.3 茯苓中水溶性多糖含量的计算在GC-M S优选的最佳提取条件下,平行提取多糖3次,根据内标标准曲线法确定组成茯苓中水溶性多糖的主要3种单糖含量,从而计算出水溶性茯苓多糖的提取率及精密度,如表2所示.表2 各单糖及总多糖提取率Tab.2 M ono saccharide and the to tal ex traction rate o f po lysaccharides热水浸取 9.8 2.3 0.9 13.0 2.4超声提取 6.8 2.1 0.7 8.6 1.93 结语运用GC-M S法采用内标分析得出热水提取和超声提取水溶性茯苓多糖的平均提取率分别为13.0%和8.6%,所得提取率较高.2种提取方法相比较,超声波法操作简单,提取时间短,杂质干扰少,但是热水浸提法提取的茯苓多糖的得率高于超声波法.本文中的2种方法得到茯苓水溶性多糖提取率均高于现有文献报道值 2.4%[2]和0.239 7%[17].衍生化GC-M S法准确可靠,分辨率高,灵敏度高,适合于研究水溶性茯苓多糖的提取,也适用于其他糖类物质的研究.参考文献【相关文献】[1] 王永江,吴学谦,毛建卫,等.茯苓多糖的提取及羧甲基化工艺研究进展[J].农产品加工,2008,10(5):58-60.[2] 黄才欢,李炎,王秀芬,等.茯苓多糖的提取及结构表征[J].广州食品工业科技,2001,17(3):13-15.[3] 张海荣,韩伟珍.微波法与传统热水法提取香菇多糖的比较研究[J].食品研究与开发,2006,26(5):68-70.[4] M ei Z,Zhan G,Cheungb P C K et al.M o lecu lar w eigh t and an ti-tum o r activity of the w ater-so lub le po lysaccharides iso lated by ho tw ater and u ltrasonic treatm en t from the sc lero tia andm ycelia of Pleu ro tus tuber-regium[J].Carbohyd rate Po lym ers,2004,56(1):123-128.[5] 陈莉,郁建平.茯苓多糖提取工艺的优化[J].食品科学,2008,28(5)136-138.[6] 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对茯苓多糖提取方法的比较研究

注：与模型组比较： * P 与低剂量组比较： △ P ＜ 0. 05；
参考文献
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［2］杨牧祥，于文涛，徐华洲，等 . 酒速愈对急性酒精中毒小鼠胃黏膜的保护作用．中华中医药杂志，2010，21（ 6）： 341-343．
［3］张守仁，邵金莺，於毓文 . 呋喃唑酮和一些常用抗溃疡药对四种大鼠胃溃疡模型的影响．药学学报，1984，91： 5-11．
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参考文献
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［2］高杰，李玉欣，于占华，等 . 茯芩多糖提取方法研究．吉林中医药，2007，27（ 9）： 60．
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中国实用医药 2012 年 2 月第 7 卷第 4 期 China Prac Med，Feb 2012，Vol． 7，No． 4
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菜的提取物，吴琼英等的实验表明紫菜多糖在体外具有强大菜多糖组小鼠胃组织 SOD 和 GSH-Px 均高于模型组（ P ＜的抗氧化作用，而 Zhang Q 等的研究指出紫菜多糖在体内有 0. 05，P ＜ 0. 01），提示通过提高胃组织 SOD 和 GSH-Px 活性可增强 SOD、GSH-Px 的活性，清除氧自由基等功能［7-9］。本实验能是紫菜多糖抗溃疡的机制之一。此外，高剂量紫菜多糖组发现，与模型组比较，高、中、低剂量紫菜多糖组小鼠胃溃疡指胃组织 SOD 和 GSH-Px 高于低剂量紫菜多糖组（ P ＜ 0. 05），数均低于模型组（ P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01），提示紫菜多糖对急性提示紫菜多糖对胃组织 SOD 和 GSH-Px 的影响存在一定的量酒精灌胃引起的胃黏膜损伤有保护作用；同时，高、中剂量紫效关系。

茯苓多糖提取方法研究进展

・５８・牡丹江医学院学报２００９年第３０卷第６期ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＭＵＤＡＮＪＩＡＮＧＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＶ０１．３０ＮＯ．６２００９２５顾奎兴．中医药治癌的思路与基因组学［Ｊ］．南京中医药大学学报，２００２，１８（１）：１０—１３２０８８．２６张玲，王芸，毛海婷，等．淫羊霍甙抑制肿瘤细胞端粒酶活性及其调节机制的研究［Ｊ］．中国免疫学杂志，２００２，１８（３）：１９１—１９６．２７李丽．中药ＫＡＬｌ号、Ⅱ号对Ｔ一（２００）荷瘤小鼠肿瘤抑制作用的研究［Ｊ］．牡丹江医学院学报，２００３，２４（３）：１５一１７．茯苓多糖提取方法研究进展才玉婷武蕾蕾王晶华王金英（牡丹江医学院药学系黑龙江牡丹江１５７０１１）收稿日期：２００９—０８—２５【摘要】目的：综述近年来茯苓多糖提取工艺的研究进展。

方法：主要对近十年来有关茯苓多糖提取工艺的文献进行综述。

结果：介绍了茯苓多糖５种提取分离方法。

结论：为茯苓多糖的提取分离提供参考，展望了茯苓多糖有效成分提取分离的应用前景。

【关键词】茯苓多糖；水提醇沉法；稀碱提取法；微波萃取技术；超声提取技术；ＣＯ：超临界流体提取技术茯苓为多孔菌科真菌茯苓ＰｏｒｉａＣｏｃｏｓ（Ｓｃｈｗ．）Ｗｏｌｆ的干燥菌核，性味甘、淡，平；归心、脾、肺、肾经，具有利水渗湿，健脾宁心之功效…。

茯苓中的主要成分为茯苓多糖（ｐａｃｈｙ－ｍａｎ），其具有抑制肿瘤生长，调节机体免疫等功能旧Ｊ，对急、慢性炎症也具有抵抗作用＂Ｊ。

为了提高茯苓多糖的治疗效果，降低毒副作用，选用合理的提取工艺是非常必要的。

茯苓多糖提取的传统方法存在着有效成分损失大，周期长，工序多，提取率低等问题。

近年来，一些新的提取技术受到青睐。

下面就近几年茯苓多糖提取的技术进行综述。

１水提醇沉法一般植物多糖提取多数采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去不溶物，或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，用高浓度乙醇沉淀提纯多，由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，故不同浓度的醇可以用于样品中不同多糖组分的分级分离，另外还可根据多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离Ｈ－。

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关于茯苓多糖的提取方法优选【摘要】目的优选茯苓多糖的提取方法。

方法以茯苓多糖为评价指标，采用正交实验法对茯苓多糖加热回流及超声波提取工艺进行优选，并将两种方法进行比较。

结果两种方法的提取得率有显著性差异(P 0.05)。

结论超声波提取茯苓多糖较优。

【关键词】茯苓; 正交实验法; 超声波提取; 加热回流提取Abstract：ObjectiveTo optimize extraction method of pachyman in poria cocos (Schw.) wolf. MethodsThe orthogonal test was used to optimize extraction technique of pachyman inporia cocos(Schw.) wolf by ultrasonic and heating reflux with the content of pachyman inporia cocos(Schw.) wolf as the index, and the two extraction methodswerecompared.ResultsThere were significant differences between the two methods (P 0.05) withthe extraction rate.ConclusionUltrasonic extraction is better than heating reflux extraction.Key words：Poria cocos(Schw.)Wolf; Orthogonal test; Ultrasonic extraction; Heating reflux extraction茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf 又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核，在我国资源丰富，全国各地均有栽培，主产于云南、安徽、湖南等省。