实验动物模型(四)
实验动物学-动物模型、设计、结果分析
人类疾病动物模型动物实验的设计、结果分析及影响因素人类疾病动物模型1.定义人类疾病动物模型(animal model of human diseases)是指医学研究中建立的具有人类疾病表现的动物实验对象和相关材料。
是临床和实验假说的试验基础。
疾病模型:包括整体动物、离体器官和组织、细胞株和数学模型。
2.发展史◆18世纪，詹纳（Edward Jenner）牛痘◆1876年，郭霍（Robert Koch）炭疽杆菌。
◆1884年，巴斯德（Louis Pasteur）狂犬病病毒疫苗◆1911年，劳斯(F. P. Rous)鸡肉瘤---1966年诺贝尔生理学或医学奖◆1914年，山极和市川用沥青长期涂抹家兔耳朵成功诱发皮肤癌◆20世纪50年代中期，加德赛克(Daniel Carleton Gajdusek)发现变异的普里昂蛋白(prion protein)是库鲁（Kuru）病的病原体---1976年和1997年诺贝尔生理学或医学奖3.意义◆避免人体实验造成的危害；◆应用动物模型可研究平时不易见到的疾病；（烈性传染病（SAS；狂犬病）、中毒病（蛇毒等）、放射病等）◆研究发病率低、潜伏期和病程长的疾病；（遗传病（白化病）；动脉硬化；肥胖等）◆可严格控制条件，克服复杂因素；年龄、性别、饮食、文化经济等◆样品收集方便，实验结果易分析；◆比较人畜共患病病原体对人与动物病变的异同，更加全面了解疾病性质。
4.制作原则◆与人类疾病的可比性，相似性越高越好；◆复制动物模型可重复性；品种、品系、年龄、性别、体重，健康状况，饲养环境、管理、实验处理要一致。
◆可靠性；特异的、可靠的反映某种疾病。
◆适用性和可控性；临床应用和疾病的可控性，利于疾病研究的开展。
◆易行性和经济性；制模方便易行、小动物多选用而灵长类少5.分类1）按制作方法分类◆诱发性疾病动物模型◆突变系疾病动物模型自发突变动物模型人工诱变动物模型◆转基因疾病动物模型诱发性疾病动物模型experimental animal model通过使用物理、化学、生物等致病手段，人为制造的与人类疾病表现类似的动物模型。
实验动物模型—实验动物模型设计
动物模型的设计原则
4、适用性和可控性
动物模型复制时应尽量考虑到今后临床应用和便于 控制其疾病地发展，以利于研究地开展。
如：
雌激素能终止大鼠和小鼠终止早期妊娠；但不能 终止人的妊娠；因此，选用雌激素复制大鼠和小鼠 终止早期妊娠的模型是不适用的。
实验动物学
动物模型的设计原则
5、易行性和经济性
模型应适用于多数研究者使用，容易复制，实验中 便于操作和采集各种标本。
所以：
首选饲养员比较熟悉的且便于饲养的动物作物研究对象， 动物来源丰富，多胎分娩（有益扩大样本和重复实验）。 慢性动物疾病模型，动物须有一定的生存期，便于长期观察。
实验动物学
动物模型设计注意事项
3、环境因素对模型动物的影响
复制模型的成败往往与环境的改变有密切关系。
理想的模型应是可重复、可标准化的。标准的 动物、标准的环境、标准的饲养管理、标准的实验 器材、标准的实验操作。
实验动物学
动物模型的设计原则
3、可靠性
复制的动物模型应该力求可靠地反映人类疾病， 即可特异性地、可靠地反映某种疾病或某种机能、代 谢、结构变化，应具备该种疾病地主要症状和体征， 经化验或X光照片、心电图、病理切片等实证。
复制动物模型时，在条件允许的情况下，应尽量 考虑选用与人相似、进化程度高的动物模型。
实验动物学动物模型设计注源自事项6、正确地评估动物疾病模型
模型实验结论的正确性只是相对的，最终必须 在人体上得到验证。
实验动物学
盲目使用近交系动物会导致不能控制的因素进入实验。
如：
自发性糖尿病大鼠，如Wistar鼠，除具有糖尿病临床 特征外，还发现多种病理变化（甲状腺炎、恶性淋巴瘤 等），不能盲目使用。
常用实验动物模型
【模型评价】
EMP实验利用啮齿类动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开 臂的恐惧心理，形成矛盾的心理应激，较好地模拟了焦虑样症状。 该模型操作简单，能够简单直观地反映动物的焦虑状态，是一种 较为成熟经典的焦虑动物模型。
2.创伤后应激障碍（PTSD）
【实验动物】
雄性SD大鼠，200g左右。
【操作方法】
【操作方法】
大鼠每日腹腔注射D-半乳糖400mg/kg，连续8周；小鼠每日 颈背部皮下注射D-半乳糖溶液120mg/kg，连续注射6～8周 （各报道略有不同）。
【模型评价】
使用Morris水迷宫，染色及生化指标等，可测试出该模型小鼠 的学习和记忆缺陷、胆碱能系统变化，以及脑组织神经元的丢失 和线粒体膨胀呈空泡样变性的现象，这与老年动物的生理表现一 致。该模型造价低廉、操作简便、可重复性高、模拟损伤较为全 面。
结扎左侧颈总动脉，同时从右侧颈总动脉放血，可选择在放血 后30min、60min、90min及120min解除左侧颈总动脉结扎， 同时结扎右侧颈总动脉停止放血。可将放出的血液经股静脉输回 体内，以继续观察。
【模型评价】
本手术全部在直观下进行，一边从右侧颈动脉放血，一边将放 出的血液从股静脉输入，既能直接观察，又能方便地控制分流量 和速度，较为实用。
【操作方法】
测试前把动物放于盛水玻璃缸中游泳15min，要确保动物不能 逃脱。15min后将动物取出置于加热的环境（32℃）中干燥 15min，再放回各自的笼子。24h后再次将动物分别放入水缸中， 强迫游泳6min。当动物停止挣扎漂浮在水中，只做必要的轻微 动作保持头在水面上的时候，被认为是不动。记录后4min的不 动时间。在抑郁症的药理学和行为学的干预存在下不动时间将会 明显减少。
实验 药理动物模型
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五、实验结果
• • 1、记录悬尾动物模型小鼠不动的累积时间； 2、记录强迫游泳动物模型小鼠不动的累积时间。
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六、注意事项和要求
• 1、在做以上两个实验时，注意环境安静秒表尽量不靠近实验动 物； • 2、强迫游泳实验中，注意放小鼠的高度，不要过高，水位要适 宜约1/2桶。
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七、思考题
• 1、谈谈你对生命及死亡的理解？ • 2、抗抑郁的实验动物模型主要有哪些？
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实验 药理动物模型
• 一、实验目的和任务 • 1、学习和了解实验动物模型的各种原理和方法。 • 2、掌握实验动物悬尾动物模型的方法与技术。 • 3、掌握实验动物强迫游泳动物模型的方法与技术。 • 二、实验原理介绍 • 在动物福利和伦理理论的指导下，根据各种药理实验的要求， 结合实验动物的生理与心理特征，制作各种动物模型（利用小鼠 模拟人类心理活动，制作行为绝望模型）。
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三、实验设备及材料
• • • • • • • 1、昆明种小鼠，SPF级老鼠（带菌少、且菌种明确）。 2、小鼠饲料：普通的实验动物饲料。 3、小鼠垫料：来自木材的木屑，再灭菌、干燥。 4、小鼠水：蒸馏水。 5、小鼠饮水瓶。 6、小鼠笼子。 7、棉线、医用胶布、运动秒表、实验动物专用游泳设备、手套、 鼠笼。
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四、实验内容和步骤
• 1、药理及动物模型简介。 • 2、抗抑郁药理模型 • 1）行为绝望：产生一个行为让小鼠认为做任何努力都无效或 没有改善的可能； • 2）化学绝望：用化学药物造成无法生存的结果（如利血平造 成体温下降、睁眼不能、运动不悬尾动物模型 • 用约4cm胶布将小鼠尾部约离尾 尖1cm处粘起，头部离地约5cm，总 共悬挂6min，记录后4min不动时间 （四肢不动，累积记录），环境需 要安静，小鼠的个体差异较大。 • 4、强迫游泳动物模型 • 用水桶装1/2桶水，从笼子中取出 小鼠，轻轻地放进水中，并马上开 始倒计时5min，在后4min记录小鼠 的不动累积时间。
动物模型的实验报告
1. 了解动物模型在实验研究中的重要性；2. 掌握动物模型构建的基本方法；3. 学习动物模型在疾病研究中的应用。
二、实验原理动物模型是指在实验动物身上模拟人类疾病的生理、生化、病理等方面的变化，以便于研究疾病的发病机制、诊断、治疗和预防。
动物模型在实验研究中具有重要作用，可以弥补体外实验的局限性，为疾病研究提供有力支持。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：昆明种小鼠，体重20-25g，雌雄各半；2. 试剂：生理盐水、葡萄糖、抗生素等；3. 仪器：电子天平、手术器械、显微镜、离心机、电热恒温水浴锅等。
四、实验方法1. 实验动物分组：将昆明种小鼠随机分为对照组和实验组，每组10只。
2. 模型构建：（1）实验组：采用高糖高脂饲料喂养，模拟人类肥胖症模型。
具体操作如下：① 将高糖高脂饲料按一定比例混合均匀；② 将混合饲料作为实验组小鼠的日常饮食，持续喂养4周；③ 在喂养过程中，观察小鼠体重、摄食量、活动量等指标的变化。
（2）对照组：采用普通饲料喂养，作为正常对照。
3. 模型评价：（1）体重变化：每周测量小鼠体重，记录数据；（2）血糖、血脂水平检测：采用血糖仪、血脂分析仪检测小鼠血糖、血脂水平；（3）组织病理学检查：处死小鼠，取肝脏、脂肪组织等，进行病理学检查。
1. 体重变化：实验组小鼠体重明显增加，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。
2. 血糖、血脂水平：实验组小鼠血糖、血脂水平明显升高，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。
3. 组织病理学检查：实验组小鼠肝脏、脂肪组织出现脂肪变性、炎症等病理改变，与对照组相比，差异具有统计学意义（P<0.05）。
六、实验讨论本实验通过高糖高脂饲料喂养昆明种小鼠，成功构建了肥胖症动物模型。
实验结果显示，实验组小鼠体重、血糖、血脂水平及组织病理学改变均与人类肥胖症相似，表明该动物模型具有较好的模拟人类肥胖症的能力。
动物模型在疾病研究中的应用具有以下优势：1. 可重复性：动物模型可重复构建，便于研究疾病的发生、发展及干预措施；2. 可操作性：动物模型便于进行各项实验操作，如药物治疗、基因编辑等；3. 经济性：动物模型成本相对较低，可节省实验资源。
神经系统疾病相关动物模型
2. 旋转大鼠模型 [造模机制] 利用神经毒剂6-羟基多巴胺（6-OHDA)破坏黑质的 多巴胺能神经元。 [造模方法] 利用立体定向仪以微量注射器向黑质内注入6-羟多 巴，两周以后皮下注射Apomorphine 0.25mg/kg诱发大鼠旋转。 模型成功的标准：连续两周测试平均转速〉7次/min，持续 旋转〉40min。 [模型特点] 操作简单成功率高、观察方便。但与灵长类动物相 比不能完整准确的反应PD的特征。
（二）全脑缺血动物模型（Animal model of whole
cerebral ischemia）
1. 沙鼠全脑缺血模型： [造模机制] 结扎双侧颈总动脉可造成全脑缺血模型，开放双 侧颈总动脉可方便地恢复血流，已广泛地应用于脑缺血及再灌 注损伤研究。 2. 大鼠四条血管关闭全脑缺血模型： [模型简述] Pulsimelli法适用于脑缺血的急性和慢性实验研究。 关键之处在于对双侧椎动脉的处理。模型成功的标志为大鼠应 出现意识障碍。
•
犬常用于灵活型和迟钝型的神经 实验；对红绿色盲，因而以红色 刺激进行的条件反射实验不能选 择犬。
•
绵羊的蓝舌病和人的脑积水相似， 适宜于脑积水研究。
• 青蛙和蟾蜍的腓肠肌和坐骨神经很容易获得，且制作方便，适于 观察药物对外周神经、横纹肌或神经肌肉接头的作用。蛙的大脑很 不发达，可用来作简单的神经反射弧实验。 • 树枸是地球上幸存下来的灵长类原型之一，在进化上处于一种特 殊的地位，是神经生物学良好的实验材料。 • 猴的高级神经活动发达，常用于行为学的研究；小儿麻痹症优选 动物。 • 黑猩猩的智力发育和人类幼儿及智能低下的成年人相近，对黑猩 猩学习行为所取得的数据，可应用于人类婴幼儿教育，对智能低下 的成年人的教育也有参考价值。
二、转基因动物技术方法（transgenic animal techniques） 是常规分子生物学技术的延伸和拓展，使动物和人体基 因工程研究由以往的单基因离体水平的操作，发展到了离体 和在体相配合的崭新阶段。 1. 显微注射技术：通过显微注射直接将外源基因导入受精卵， 再移植到受体，使其发育成转基因动物的一种方法。
实验动物模型—实验动物模型分类
实验动物学
自发性动物模型
一、自发性模型的定义
指不加任何人工诱发，在自然条件下动物自然产生 的疾病，或者由于基因突变的异常表现通过遗传育种保 留下来的动物疾病模型。该模型主要用于病因学研究。
自发性动物模型
二、自发性模型的优缺点
• 优点：减少了人为的因素，更接近自然的人类疾病。 在遗传性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等的研究上得到了 广泛应用。
+寒冷共同作用产生的。
实验动物学
诱发性动物模型
四、常见的诱发性动物模型
• 肝硬化（大鼠）——四氯化碳 • 胆石症（豚鼠）——高脂肪、高胆固醇饲料 • 慢性胃炎（SPF小鼠、悉生仔猪）——幽门螺旋杆菌 • 高血脂及动脉粥样硬化——高脂肪、高胆固醇饲料 • 肾炎（兔）——鸡卵白蛋白 • 慢性支气管炎（小鼠）——化学物质（SO2、Cl2、NH3 ）、
实验动物模型—— 动物模型概述
实验动物学
动物模型的概念
动物模型：是指为阐明人类疾病的发生机理或 建立预防、诊断和治疗方法而制作的，具有人 类疾病模拟表现的实验动物。
实验动物学
动物模型的意义
1)人类的替难者，避免了在人身上进行 实验所带来的风险和危害 （外伤、中毒 、肿瘤）。
2)缩短研究周期，提供发病率低、潜伏 期长和病程长的疾病材料。
诱发性动物模型
一、诱发性模型的定义
通过使用物理、化学、生物等致病手段，人为地造 成动物组织、器官或全身形成类似某种人类疾病的动物 模型，在功能、代谢、形态结构上产生与人类疾病类似 的改变。
实验动物学
诱发性动物模型
二、诱发性模型的优缺点
优点：制作方法简便，实验条件可以人工控制，且重复 性好，从而可以在短期内获得大量疾病模型样品。主要 用于传染性疾病、免疫学、肿瘤学研究，以及药物筛选 和毒理学研究。
动物模型的建立与应用
五、严重联合免疫缺陷小鼠（Severe combined immunodeficient mice，SCID）
1. 1983年由美国学者Bosma首先发现于C.B-17近交系小 鼠，位 于16号染色体的scid的单个隐性突变基因所致。
2. 纯合scid基因导致编码免疫球蛋白重链（IgH）和T细胞抗原 受体基因（TCR）V-D-J基因重排异常，抑制B细胞和T和T 细胞前体的正常分化，造成T、B淋巴细胞自身不能分化成特 异性功能淋巴细胞，
循环中免疫球蛋白减少或缺损
C.B-17小鼠是BALB/cAnIcr小鼠的同源近交系，差别在 于该小鼠携带了C57BL/ka小鼠的免疫球蛋白重链Igh-1b 等位基因.
C.B-17小鼠的遗传背景与BALB/cAnIcr基本相同，其H-2 抗原均为H-2d.
此外目前已有C3H-SCID等其他品系遗传背景的SCID小 鼠出现.
孤立动物模型 Orphan disease models
孤立动物模型是指某种疾病最初在一些动物身上发现并 被研究，但到目前为止在人类自身体内无法证实。包括：马 立克氏病（Marek’s disease）, 多发性乳头瘤（Papillomatosis）, 牛 海绵状脑病（bovine spongiform encephalopathy）, 绵羊脱髓鞘性 脑白质炎（Visna virus in sheep）, 猫白血病病毒感染（feline leukemia virus）。
医学动物模型的分类
按产生原因分类
诱发性动物疾病模型：是指通过使用物理、化学、生物等致病 手段，人为地造成动物组织、器官或全身形成人类疾病动物模 型，在功能、代谢、形态结构等方面有所改变，即人为地诱发 动物产生类似人类疾病模型。 主要用途：药理学、毒理学、免疫学、肿瘤和传染病等。
实验四 酒精诱导斑马鱼脂肪肝模型
酒精诱导斑马鱼脂肪肝模型
实验目的
• 掌握酒精诱导斑马鱼脂肪肝模型的建立方 法。
• 熟悉脂肪肝模型的鉴定方法。
实验步骤
1、动物模型的建立： 1）收集胚胎和分组：胚胎发育到 5 dpf，随机均分为对照组、 2% 乙醇处理组 每组 50条，置于培养皿中； 2）酒精处理：处理组加入2% 体积的无水乙醇， 对照组给予斑马鱼培养用水 ( hank' s solution) 。加 盖 后 用Parafilm 封条封闭，置于 28． 5℃培养箱内培养， 处理后32 h。 3）观察和实验记录：观察并记录畸形率和死亡率。
实验动物模型
第章实验动物模型第一节实验动物选择的原则第二节生物科学研究中的动物模型实验动物模型选择什么样的实验动物作实验是生物医学研究工作中一个重要环节，不能随便选用一种实验动物来作科学研究，因为在不适当的动物身上进行实验，常可导致实验结果的不可靠，甚至使整个实验徒劳无功，直接关系到科学研究的成败和质量。
事实上，每一项科学实验都有其最适宜的实验动物。
第一节实验动物选择的原则•科学研究工作中实验动物的选择，首先应根据实验目的和要求来选择，其次再参考是否容易获得、是否经济，是否容易饲养和管理等情况。
•在实验动物选择上必须注意三点，即实验动物的种类（Species）；品种（Breed）或品系（Strain）；质量和实验动物的健康状态。
尽量选择与研究对象的机能、代谢、结构及疾病特点相似的实验动物；•生物医学研究的根本目的是要解决人类疾病的预防和治疗问题。
因此，在选择实验动物时应优先考虑的问题是动物的种系发展阶段。
在可能的条件下，尽量选择那些机能、代谢、结构和人类相似的实验动物作实验。
一般来说，实验动物愈高等，进化愈高，其机能、代谢、结构愈复杂，反应就愈接近人类，猴、狒狒、猩猩、长臂猿等灵长类动物是最近似于人类的理想动物。
第二节生物科学研究中的动物模型一、动物模型的意义和优越性•生物科学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。
人类各种疾病的发生发展是十分复杂的，要深入探讨其疾病的发病机理及疗效机理不能也不应该在病人身上进行。
可以通过对动物各种疾病和生命现象的研究，进而推用到人类，探索人类生命的奥秘，以控制人类的疾病的衰老，延长人类的寿命。
人类疾病的动物模型•人类疾病的动物模型（Animal Model of Human Diseases）：是生物医学科学研究中所建立的具有人类疾病模似性表现的动物实验对象和材料。
•使用动物模型是现代生物医学研究中的一个极为重要的实验方法和手段，有助于更方便、更有效地认识人类疾病的发生、发展规律和研究防治措施。
动物实验模型
摘要：医学中的动物实验模型，为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的西药的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验模型。
实验动物是活的仪器[1]，其重要性已受到世界各国科学家的共同认可。
要合理正确选择实验动物，必须了解它的局限性。
为学习研究提供更广阔的思路是今后进行学习研究的发展方向。
关键词：医学; 动物实验; 实验动物引言：医学科学研究按场合、层次可分为:实验研究、调查研究和临床研究三种。
动物实验模型研究是基础研究，是指在实验室内，为了获得有关生物学、医学等方面的新知识或解决具体问题而使用动物进行模拟的科学研究。
医学科研和临床工作的开展，特别是新技术、新疗法、新药物的应用离不开实验动物动物实验【2】。
而这些都必须由经过培训的、具备研究学位或专业技术能力的人员进行或在其指导下进行。
动物实验的特点是可由实验者根据不同的课题选择动物。
制成动物模型，可作严密的设计，包括目的、对象、方法、对照、随机分组、设定数量、指标、原始记录和统计方法等。
医学中的动物实验为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的西药的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验。
同样，动物实验也为中医、针灸学的发展带来了新的希望。
但是，动物实验有它的局限性，不是所有医疗技术都需要进行动物实验，那些已经被临床实验证明有效的医疗方法，就没有必要再用动物实验来证实。
由于很多高级动物在生理和病理方面与人类有近似之处，因此可以通过动物实验寻找新的药物和新的疗法。
但是人和动物毕竟存在很大差异，动物实验的结果，只能给临床作为参考，而不能代替临床实践。
一般情况下，一种新药或新的疗法，能否试用于临床，必须有足够的动物实验依据，但判断这种新药或新疗法是否真正有效，能否推广使用，还必须经受临床实践的检验。
通常情况下，动物实验有效，临床实践也有效，但有时两者并不一致。
一种疗法，如动物实验证明有效，而临床实践证明无效，就应否定。
反过来，临床实践证明有效，而动物实验却无效，自然还应肯定。
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正常骨转换过程
绝经后骨松 原发性骨质疏松 老年性骨松
特发性骨质疏松
药物性
营养性
继发性骨质疏松 内分泌代谢性 废用性
【复制方法】
1 ．去卵巢致大鼠骨质疏松
2 ．药物致大鼠骨质疏松
3． 废用性骨质疏松
【 复制机理】
妇女绝经或卵巢切除后，由于体 内雌激素水平降低，而使骨代谢呈负 平衡 骨吸收增强，骨量逐渐丢失， 形成骨质疏松。
• 调查发现，我国骨质疏松症总患病率为16.1％。原 发性骨质疏松症总患病率为12.4％（其中80%是女 性 ）。
• 60－69人群骨质疏松发病率：女性50－70％，男性： 30％。
• 骨质疏松相关骨折发生率：27.5－32.6％。 • 目前我国约有骨质疏松症患者6000-8000万以上。 并且有1亿多人需要采取必要的预防措施，即16000 万人。
复制步骤：
测定呼吸 缝皮针穿入剑突处 剥离颈静脉 接输液装置 夹住气管
0.1%肾上腺素0.3ml/kg
处死
1．计算肺系数 2．切开肺脏，注意观察有无 粉红色泡沫样液体流出。
开胸
结扎气管分叉处 取肺
观察测定
【复制方法】
动物选择：小鼠、大鼠、家兔、犬 复制步骤： 注意事项：
1.解剖取出肺时，注意勿损伤肺表面 和挤压肺组织，以防止水肿液流出， 影响肺系数值； 2.动物对注入肾上 腺素的耐受性个 体差异较大，有些动物需注入较多量 的肾上腺素才出现急性肺水肿。
【复制方法】
单平台睡眠剥夺法
平台睡眠剥夺技术
强迫运动睡眠剥夺法
多平台睡眠剥夺法 改良多平台睡眠剥夺法 水平转盘睡眠剥夺法 旋转圆筒睡眠剥夺法
轻柔刺激法 药物睡眠剥夺法 电刺激法
咖啡因、去氧麻黄碱、神经毒素 刺激参数：电流0.5mA,波宽 15ms,频率1Hz,时间30s/次
【 复制机理】
将大鼠置于失眠刺激器内,通过 笼底部的电栅刺激大鼠足底部八小时, 在刺激期间,脑电记录可自动中断,由 电刺激引起的大鼠失眠被认为是接近 于人类失眠的合适病理模型。
【 复制机理】
预先给小鼠注射卡介苗可使中性粒 细胞或巨噬细胞聚集于肝，继后再用低 剂量大肠杆菌脂多糖攻击注射，可激活 这些细胞释放对肝细胞有毒性作用的因 子，造成免疫性肝损伤。
【复制方法】
小鼠
动物选择：小鼠
尾静脉注射卡介苗0.2ml(108活菌/ ml)
复制步骤：
12天后
尾静脉注入Leabharlann .5μg脂多糖3 ．氨基糖苷类抗生素致肾毒性
【 复制机理】
通过机械方法或药物方法，造成 肾脏缺血，最终导致肾小管上皮细胞 损伤，发生急性肾衰竭。
【复制方法】
大鼠
动物选择：大鼠 麻醉、开腹
复制步骤：
1、对循环系统的观 察指标 2、对自由基影响的 观察指标 3、形态学观察
结扎双侧肾动脉
1h后
再灌注
30min后
测定
骨质疏松动物 模型的复制
骨质疏松
Strong, dense bone
Fragile, osteoporotic bone
流行病学
• 我国60岁以上人群达60％，随着我国老龄人口的增 加，骨质疏松病人必将迅速增加。
• 据统计，全球50－70％的骨质疏松症分别发生在亚 洲国家和发展中国家，我国既是发展中国家，又地 处亚洲，人口基数最大，老龄速度最快，这些因素 均决定了骨质疏松症已成为我国一个严重的公众健 康问题。
复制步骤：
30%乙醇 混合饲料
皮下注射40% CCL4橄榄油0.5ml/100g
每隔四天
皮下注射 79.5%单纯玉米 粉20%猪油 0.5%胆固醇 Ccl40.3ml/100g
【复制方法】
雄性大鼠
动物选择：大鼠
喂饲
第一天
复制步骤：
30%乙醇 混合饲料
皮下注射40% CCL4橄榄油0.5ml/100g
觉醒
肌
s
电
in
put
脑 电
F ilt
er 6 .0 0 0 0 0 1 2 .0 0 0 0 0 seconds 1 8 .0 0 0 0 0
浅睡
肌 电
in p
ut
脑 电
F ilt
er
5 4 7 8 .0 0 0 0 0
5 4 8 4 .0 0 0 0 0
5 4 9 0 .0 0 0 0 0 seconds
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定
7天
复制步骤：
单笼饲养
置于失眠刺激 器内
腹腔注射青霉素
【复制方法】
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定
7天
复制步骤：
单笼饲养
置于失眠刺激 器内
腹腔注射青霉素
描记脑电9：30~17：30
【复制方法】
【复制方法】
大鼠
动物选择：大鼠
复制步骤：
腹腔注射庆大霉素（140mg/kg/日）
7天后
观察测定
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定
7天
复制步骤：
单笼饲养
置于失眠刺激 器内
腹腔注射青霉素
描记脑电9：30~17：30
【复制方法】
动物选择：大鼠
复制步骤： 1．动物对实验的影响。
2．及时清理刺激器上的粪便， 注意事项： 保持清洁。 3．保持室内环境安静.
骨 质 疏 松 基 本 预 防 措 施
骨组织 细胞 骨质
骨 祖 细 胞
成 骨 细 胞
骨 细 胞
破 骨 细 胞
有 机 质
无 机 质
骨代谢
骨单位的形成是先由破骨细胞分解吸收陈 旧骨质，形成一锥形隧道，在隧道最宽处出 现一转变区，此处破骨细胞消失，成骨细胞 前体形成成骨细胞，开始形成粘合线并分泌 类骨质，钙化形成骨板。
每隔四天
皮下注射 Ccl40.3ml/100g 第 42天即成
急性肾衰竭模型 的复制
致病因素
• • • • • 1、肾血流动力学障碍 2、肾小管管腔堵塞 3、组织缺氧 4、肾内皮细胞功能失常 5、体内与急性肾衰发病机制密切相关的物质 的异常。
【复制方法】
1．缺血性急性肾衰竭
2．氯化汞致急性肾衰竭
骨质疏松症的危险因素
①长期低钙饮食：每日<600mg。 ②绝经或卵巢切除雌激素下降，骨吸收增加，肠钙吸收下降。 ③长期卧床：见阳光少，骨缺乏肌肉活动刺激，成骨活性下降。 ④营养缺乏：如缺维生素D及K、Ca等，但蛋白质过高，产酸 过多，使尿呈酸性，尿钙排泄增加，亦可促进骨质疏松。 ⑤糖尿病：尿钙增加。 ⑥ 过度饮酒：使尿钙增加。 ⑦大量吸烟、饮咖啡、浓茶：均使尿钙增加，骨吸收增加。 ⑧长期使用皮质激素、巴比妥、肝素均可影响钙的吸收，尿钙 排泄增加，促进骨量丢失。
睡眠剥夺模型的 复制
NREMS
（非快速眼球运动睡眠）
1期 2期
睡 眠 时 相
REMS
（快速眼球运动睡眠）
3期
4期 SWS
SWS REMS
对机体的发育和疲劳的恢复起 着重要的作用
与脑的发育和智力的发达关系 密切
选择性增加 SWS， 同时能够保证 REMS 正常比例的药物。
研究新型催眠
药物的途径
5 4 9 6 .0 0 0 0 0
SWS
肌 电
V o lt
t
s
脑
V o lt
电
s F ilt
er
4 8 4 8 .0 0 0 0 0
4 8 5 4 .0 0 0 0 0 seconds
4 8 6 0 .0 0 0 0 0
4 8 6 6 .0 0 0 0 0
REMS
肌
电
脑 电 er
-6 .0 0 0 0 0 0 11 9 7 6 . 0 0 0 0 0 11 9 8 2 . 0 0 0 0 0 seconds 11 9 8 8 . 0 0 0 0 0
【 复制机理】
维甲酸是维生素A的一类衍生物， 是用于肿瘤和银屑病等治疗的药物， 但对骨质有明显影响，具有致骨质疏 松的副作用。
【复制方法】
动物选择：大鼠
3月龄大鼠 灌胃给予维甲酸7.5mg/kg/日
2周后
复制步骤：
停用
常规饲养
测定
【 复制机理】
由于运动受限和功能障碍，如器 官疾病、骨折固定卧床或失重等因素， 一段时间内引起骨骼肌活动量减少， 会引起废用性骨质疏松。
肝硬变模型 的复制
一、病因和发病机制
㈠病毒性肝炎：乙型慢性活动性肝炎，我国多见。 ㈡慢性酒精中毒： 乙醇
NAD↓ NADH↑
乙醛
乙酸
脂肪氧化↓
脂肪合成↑ 肝脂变
肝细胞 坏死
㈢营养缺乏：
⒈蛋白质↓─→酶结构受损+酶活性↓ ─→肝 细胞抵抗力↓─→易受损害─→坏死 ⒉蛋氨酸↓─→胆碱↓─→磷脂↓─→脂蛋白 ↓─→脂肪肝
【复制方法】
成年大鼠
动物选择：小鼠、大鼠、家兔、犬
复制步骤：
腹腔或皮下注射CCL4原液1ml/kg 灌胃40% CCL4 橄榄油0.8~1.6ml/kg
16~24h
处死动物
取血测定、 肝病理切片
【复制方法】
动物选择：小鼠、大鼠、家兔、犬
复制步骤：
1．四氯化碳剂量要选择合适．
2．四氯化碳蒸汽和液体可由 呼吸道、皮肤吸收，对人体有 注意事项： 一定毒性，操作时应注意。
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定