实验动物模型(四)
常用实验动物
二、主要品种、品系
豚鼠按毛的长短可分为短毛豚鼠，长毛和刚毛豚鼠3种。一般实验 用豚鼠多为短毛豚鼠。 1.Hartley,为纯白色的短毛豚鼠。中国药品生物制品检定所动物中 心从美国引进。
2.英国种：又称荷兰种。为1919年从日本引入中国东北，早期在民
间饲养。目前国内大多数实验动物繁育单位饲养的豚鼠多为此品种。其 特点是被毛短而光华。毛色有白、黑、棕、灰、淡黄、巧克力等单色，
三、在生物医学中的选择应用
（一）生理学研究
大鼠垂体—肾上腺系统发达，垂体摘除比较容易， 可用来进行肾上腺、垂体，卵巢等内分泌研究。 利用大鼠对新环境易适应，有探索性，易训练， 对惩罚和暗示敏感等特性进行行为学研究和高级神经 活动的研究。 大鼠无胆囊，但胆总管较粗大，可采用胆总管插 管收集胆汁进行消化功能的研究。
胞免疫的研究。
(四)药物学研究
豚鼠对某些药物极为敏感，因此是研究这些药物的“专门 动物”。例如豚鼠对组织胺极敏感，所以很适合做平喘药和抗 组织胺药的研究； 豚鼠妊娠期长，适用于药物或毒物对胎儿后期发育影响的
试验； 豚鼠对多种抗生素类药物非常敏感，是研究抗生素和青霉 素的动物模型； 豚鼠可用于研究麻醉药及镇咳药的药效实验； 豚鼠对人型结核杆菌具有高度的敏感性，因此常用做抗结 核病药物的药理学研究。
仓鼠(地鼠)生物学特性及选择应用
一、生物学特性和解剖生理特点
实验动物模型设计原则
实验动物模型设计原则
1. 替代、减少和优化（Three Rs）原则，这是实验动物伦理的
基本原则，即替代（Replace）、减少（Reduce）和优化（Refine）。即在可能的情况下，应尽量使用替代方法，如细胞培养、计算机模
拟等代替动物实验；在必须使用动物实验时，要尽量减少动物数量
和避免动物痛苦，同时优化实验设计和操作过程，以减少动物的痛
苦和苦难。
2. 选择合适的动物模型，在进行实验动物模型设计时，应根据
研究目的和问题的特点选择合适的动物种类和品系，确保其生物学
特性和实验目的相符合。
3. 动物福利保护，在进行动物实验时，应遵循动物福利保护法
规和伦理规范，提供适当的饲养环境和生活条件，确保动物的健康
和福利。
4. 实验设计的科学性和可靠性，在设计实验动物模型时，应考
虑实验的科学性和可靠性，包括样本量的确定、实验组和对照组的
设置、随机分组等因素，以确保实验结果的准确性和可靠性。
5. 数据共享和透明度，在进行实验动物模型设计和实验过程中，应遵循数据共享和透明度的原则，及时公开实验设计、实验方法和
结果，以促进科学研究的开放和合作。
总之，实验动物模型设计原则是在保障科学研究的同时，最大
限度地保护动物福利和权益的一系列原则和规定，是科学研究和动
物保护之间的一种平衡和妥协。
常见肿瘤动物模型一览
三.移植性肿瘤动物模型及其研究方法
定义：模型是指将动物或人体肿瘤移植到同种或异种动物体内连续传代而形成移植
性肿瘤动物的肿瘤
实验动物选择：移植性肿瘤常用动物为小鼠、大鼠和地鼠
肿瘤细胞的选择：筛选抗癌药物时，最好选用
3类瘤株，及肉瘤、腹水型肿瘤和白血病株。在众多 移植性肿瘤中，小鼠Lewis肺癌、小鼠黑色素瘤B16 及小鼠白血病P388是目前最受重视和应用最广的。
诱发性肿瘤动物模型建立方法
物理方法：放射性物质致瘤，用放射线照射或局部注射放射性同位素。 化学方法：使用化学致癌物，如苯并芘（benzpy rene）、甲基胆蒽
（MC）、联苯胺（benzidine ）、亚硝胺类（nitrosamine ）、黄曲 霉素类（aflatoxin）等。
生物方法：
用能诱发动物肿瘤的病毒致癌，如：小鼠白血病病毒，SV40病毒。 用转基因的方法诱发动物产生肿瘤，可根据启动子类型的不同选择不
接种方法（无菌操作）
1.实体瘤
冻存的瘤株
移入宿主体内
瘤源动物
7~10d
增殖
获得瘤块
制备瘤块
给动物接种
受体动物
实体瘤接种法：瘤块接种法、瘤细胞悬液接种法、培养细胞接种法、活细胞接 种方法等
瘤块接种法
选取接种后7~10d生长状态良好的瘤源动物，颈椎脱臼处死，消毒操 作部位皮肤。切开皮肤，剥离出接种用的瘤块，剔除非肿瘤组织和坏死 组织，选取生长良好而无变性坏死、淡红色（黑色素瘤则呈黑色或黑紫 色）、鱼肉装的瘤组织，在无菌平皿内剪成2mm3小块。平皿放置在冰块 上，平皿内放置少许灭菌的PBS或其它营养液。
四年级科学实验探索动物分类
四年级科学实验探索动物分类动物是地球上最丰富多样的生物之一，根据它们的特征和相似之处，动物被分为不同的类别，这被称为动物分类。通过科学实验，我们可
以探索动物分类的原理和方法。本文将介绍四年级科学实验中的动物
分类实践。
实验材料和器材：
1. 动物图片卡片（包括鱼类、鸟类、昆虫、哺乳动物等）
2. 实验记录表格
3. 放大镜
4. 书写工具
实验步骤：
1. 观察动物图片卡片：考虑动物的外观、体型、皮肤特征等方面。
每个学生拿一张卡片，用放大镜仔细观察动物的细节。
2. 记录观察结果：学生在实验记录表格上记录每个动物的名称，并
写下它们的共同特征。例如，鱼类有鳞片和鳍，鸟类有羽毛和喙。
3. 比较和分类：学生将图片卡片按照它们的相似特征进行分类。比如，将所有有鳞片的动物放在一起，所有有羽毛的动物放在一起。
4. 分析类别：让学生观察分类结果并思考，为什么它们会被分在一起？学生可以根据卡片上的共同特征来解释分类原理。
5. 探索不同类别的特征：学生可以选择其中一类动物，进一步观察和比较它们之间的差异。例如，鱼类中有圆鳍鱼和扁鳍鱼，学生可以观察它们的形状和特征，并记录下来。
实验结果和讨论：
通过这个实验，学生们将会意识到动物的分类是基于它们共有的特征和相似之处。根据实验结果，学生们可以总结出一些常见的动物类别，如鱼类、鸟类、哺乳动物和昆虫等。他们也会发现，在同一个类别中，动物之间可能有许多不同的特征。
这个实验不仅仅是为了帮助学生们理解动物分类的基本概念，同时也培养了他们的观察力和分类能力。通过实践操作，学生们更容易记住和理解知识。
人和实验动物在解剖、生理及代谢方面的相似点PPT课件
时间后，其主动脉及冠状动脉处逐渐形成粥样硬 化斑块，并出现高血脂症。
2. 高胆固醇和高脂饮食，加入少量胆酸Βιβλιοθήκη Baidu，可增加 胆固醇的吸收，如再加入甲状腺抑制药--甲基硫 氧嘧啶或丙基硫氧嘧啶可进一步加速病变的形成。
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造模方法: 1.小型猪：
选用Gottigen系小型猪较为理想，用1％～2％高脂食物饲 喂6个月即可形成动脉粥样硬化病变。
甲基硫氧嘧啶、89％-86％基础饲料)，喂服7～10天。 可形成高胆固醇血症。
配方二饲料(10％蛋黄粉、5％猪油、0.5％胆 盐、85％基础饲料)，喂服7天可形成高胆固醇血症。
评价：饲养方便、抵抗力强、食性与人相近。所形 成的病理改变与人早期者相似，不易形成似人体的 后期病变，较易形成血栓。
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5.小鼠： 雄性小鼠饲以1％胆固醇及10％猪油的高脂饲料，
动脉内膜损伤率为88％，冠状动脉亦有粥样硬 化的病变，若同时给予高胆固醇饲料，病变更加明显。
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2.儿茶酚胺法： 给兔静脉滴注去甲肾上腺素lmg/24h，时间为
30min。一种方法是先滴15min，休息5min后再滴 15min。另一种方法是每次点滴5min和休息5min， 反复6次。 评价:
持续两周，均可引起主动脉病变，呈现血管 壁中层弱性纤维拉长、劈裂或断裂，病变中出现 坏死及钙化。
常用实验动物饲养技术4
❏ 性成熟280-400天 。春秋两季发情 ，发情期13- 19天； 适配年龄 ，雄犬1.5～2岁 ， 雌犬1～1.5岁 。寿命10~ 20年 。犬有染色体39对；
❏ 正常体温39（ 38.5-39.5) ℃ 。
二 、主要品种
1. 比格犬： 又称小猎兔犬 ，属小型犬 ，短毛 ， 是猎犬中 较小的一种 。此种犬是公认的实验用犬 。具有以下特点：
5.版纳微型猪 :版纳微型猪由南农业大学的曾养志老师经 过24年的连续高度近交和严格选择 ，版纳微型猪近交系已形 成具有不同表型和基因型的5个家系和18个亚系 ， 为实验动 物的开发提供了丰富的资源。
6.五指山猪 :五指山猪原产于海南省中部的五指山地区。 该地区历史上交通不便 、 自然封闭 ，仔猪历代多采用“子配母 ” 等高度近交方式和自然选择 ， 因而形成了一种体型小 、增重十 分缓慢的矮小品种 。五指山猪体型小 ， 头 、尾两头尖 ， 形如老 鼠 ，俗称“老鼠猪 ”； 1987 ～1989 年 ， 中国农业科学院冯书
3.汉佛特小型猪 :汉佛特小型猪由汉佛特实验室于 1958年在华盛顿培育而成 。汉佛特小型猪主要用于皮 肤 、外科模型 、心血管模型等研究。
4.尤卡坦小型猪 :尤卡坦小型猪由美国1960年在科 罗拉多州立大学培育而成； 暗色皮肤 ， 很少或无被毛。 有白色无毛家系用于皮肤研究 。也可供应VSD家系 ， 制 作iotech种群的DNA样品库 ， 可提供文件资料和/或供 遗传学研究
实验动物与动物实验
三、实验动物设施分类
屏障环境
三、实验动物设施分类
屏障环境动物实验设施设备
隔离器
四、实验动物生物安全
❖ 实验动物生物安全是避免由实验动物造成的各种危害的综合防护 措施。
❖ 由实验动物造成的各种危害包括： 1.生产和使用实验动物中的各个环节，如实验动物的引种、保种、 繁育、运输、进出口。 2.使用实验动物(包括感染和非感染动物实验)进行动物实验、从事 科研活动等过程中实验动物造成的各种危害。
据的共享、使用高质量的标准动物、合理设计实 验、规范实验的管理 ❖ 替代：人群资料、低等动物代替高等动物、体外 培养、理化技术应用、数学与计算机模型的应用
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动物实验设计
四、 动物实验设计
动物实验设计：是指研究者根据实验目的和要求， 运用有关科学知识和原理，结合统计分析及伦理学 的要求而制定的在动物身上进行试验的实施计划和 方案，并用文字记录或流程图表述的实验方案和技 术路线。
phenotype表现型 周围环境 proximate
drama type 演出型
实验动物环境控制与动物实验结果的关系
实验动物环境的人工控制程度越高，生活在该环境中的实验动物就 越具有一致性，即使不同时间、地点及人员，只要按相同的规范操作， 均能获得一致实验结果。
实验动物学 (4)
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By Chen Min-li
第二专题 常用实验动物的生物学特点及其在生物医学中的应用
4、发热、解热和检查致热原的实验研究 家兔体温变化十分灵敏，最易产生发热反应，发热反应典 型、恒定。因此常用于这方面的研究。①给家兔注射细菌培养 液和内毒素可引起感染性发热，如皮下注射杀死的大肠杆菌或 乙型副伤寒杆菌培养液，几小时内可引起发热，可持续12小时。 ②给兔注射化学药品或异性蛋白等可引起非感染性发热。如皮 下注射2%二硝基酚溶液(30毫克),15-20分钟开始发热1-1.5小 时可达高峰，升高2-3℃, 肌注10%蛋白胨1.0g/kg可在2-3小时 内引起发热, 体温升高显著.③药品生物检定中热原的检查, 热原是微生物及其尸体或微生物代谢产物。
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By Chen Min-li
第二专题 常用实验动物的生物学特点及其在生物医学中的应用
• 3、草食性和食粪性: 兔是草食单胃动物， 对粗纤维消化率为65-78%。食粪性可有效利 用蛋白质(盲肠中有大量微生物-菌体蛋白), 无菌兔或摘除盲肠则无食粪行为。
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By Chen Min-li
第二专题 常用实验动物的生物学特点及其在生物医学中的应用
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By Chen Min-li
第二专题 常用实验动物的生物学特点及其在生物医学中的应用
• 7、其它: 用于急性实验如失血性休克、肠毒素 引起的休克，阴塞性黄疸、离体肠段, 耳、心的 各种研究, 以及骨伤实验如复制慢性和急性的骨 髓炎动物模型。兔的皮肤对刺激反应敏感，反应 近似于人，还可用来化妆品、冻伤、烫伤等对皮 肤的局部反应。
第四章 实验动物学 生物学特性
1、C57BL/6J小鼠，黑色 （aaBBCC），1937 年育成， 1975 年由日本国立肿瘤研究 所引进我国。乳腺癌自发率低， 对放射线耐受性强。目前国际 上使用最广泛的实验小鼠,是 继人类之后第二个开始基因组 测序工程的哺乳动物。 2、FVB小鼠，白色，产子率高， 原核期受精卵大，雄原核清楚。
3、A和A/He，白色（AAbbcc），1921年由strong育成， 雌性乳腺癌发病率为30-50%。血压低，收缩压仅为 82mmHg。唇裂和腭裂散在发生。245日龄有中等听源 性癫痫。对麻疹病毒高度敏感。
4、 BALB/c小鼠， 白色 （AAbbcc），从1913 年开始 近亲交配，1932 年Snell获 得其26代近交系。6月龄以后 出现出现免疫球蛋白增多， 补体活性高。1979 年由美国 引进我国。
4、内分泌研究： 垂体—肾上腺系统应激反应敏感，宜做去 垂体模型，肾上腺、卵巢等腺体摘除。
5、营养学研究：大鼠是首先用于营养学研究的实验动物。 维生素D就是用大鼠研究而发现的。 6、大鼠无胆囊：胆总管较大，可用胆总管插管收集胆wenku.baidu.com， 研究消化功能。
7、肝脏外科学研究：切除肝叶的60-70%后仍能再生。 8、遗传学研究：毛色基因遗传，遗传性疾病的大鼠。
WKY为SHR的正常血压对照组动物，雄鼠动脉收缩压 为：140-150mmHg，雌鼠为：130mmHg。适用于高血压病 研究。
二十种常见实验动物模型
二十种常见实验动物模型
一、缺铁性贫血动物模型
缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）是体用来合成血红蛋白（HGB）的贮存铁缺乏，HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血，主要发生于以下情况：（1）铁需求增加而摄入不足，见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女。（2）铁吸收不良，见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况。（3）铁丢失过多，见于反复多次小量失血，如钩虫病、月经量过多等。
IDA是一种多发性疾病，据报道，在多数发展中国家，约2/3的儿童和育龄妇女缺铁，其中1/3患IDA，因此，研究IDA的预防和治疗具有重要的意义。在这些研究中，缺铁性贫血的动物模型（Animal model of IDA），又是实施研究的基础工具。常见的IDA动物模型的构建技术如下：
实验动物：一般选用SD大鼠，4周龄，雌雄不拘，体重65g左右，HGB≥130g/L。
建模方法：低铁饲料加多次少量放血法。低铁饲料一般参照AOAC 配方配制，采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁，饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键，现有研究表明，饲喂含铁量<15.63mg/Kg的饲料35天，SD大鼠出现典型IDA表现，而饲喂含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁，但并不表现贫血症状。建
模时一般采用去离子水作为动物饮水，以排除饮水中铁离子的影响。少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失，还可以加速贫血的形成。放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行，常用尾静脉放血法，1～1.5ml/次，2次/周。
实验动物的基本内容
1 生物因素对动物实验的影响
（1） 在实验过程中同一笼内的动物之间相互争斗可影响到内 分泌系统的功能。 （2） 实验动物饲养要有合理的密度，防止传染病的发生，影 响实验结果。 （3） 不同品种、品系的动物分开饲养，防止交叉感染。 （4） 病原微生物对实验动物的影响。特别是动物潜在性感染， 往往无临床体征和症状，在进行动物实验时容易激活一些潜 在的病原体，引起发病，影响实验结果。 （5） 饲养人员和动物实验人员的素质直接影响动物实验结果。 一定要爱护动物，善待动物，合理设计实验，严格按标准实 验操作去做。
2、实验动物的麻醉
• 全身麻醉：吸入法，腹腔和静脉给药麻醉法。 • 局部麻醉：方法很多，有表面麻醉，浸润麻醉和阻断麻 醉等，使用最多的是浸润麻醉。常用1%盐酸普鲁卡因。
3、实验动物的给药途径和方法
• 经口给药法：灌胃法，口服法。 • 注射给药法：皮下注射，皮内注射，肌肉注射，腹腔注 射，静脉注射。 • 其它途径给药法：如呼吸道给药，皮肤给药，脑内给药， 直肠给药，关节腔内给药。 • 给药容量（参考）
动物试验区平面图
动物生产区平面图
跨越式鞋柜
二更间
淋浴间
污物走廊
动物间
笼具摆放
清 洁 走 廊
洁具间
医学实验动物学综述
课号：课程名称：医学动物实验学改卷教师：
学号：姓名：得分：
动物疾病模型的复制，是用人为的方法，使动物在一定的致病因素（物理的、化学的、生物的）作用下，造成动物组织、器官或全身一定损害，出现某些类似人类疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病，通过这种手段来研究人类疾病的发生、发展规律，为研究人类疾病的预防、治疗（包括新药物试用）提供理论依据。所以动物疾病模型的复制，在医学科学研究中占有十分重要的地位。（引自《实验动物科学》_第四节动物模型的复制方法）。根据各类动物不同的生理特性和解剖学特点，来复制不同的疾病模型也是极具考究的。次述我想举例的疾病模型是动脉粥样硬化症和心率失常症。
兔是最早用以制造高脂血症和动脉粥样硬化症模型的动物，至今仍然多被采用。它对外源性胆固醇的吸收率高，可达75～95%，通过喂食高胆固醇、高脂肪饮食一段时间，家兔形成动脉粥样硬化症模型，其造模时间仅为3个月，比用犬、猴制作同类模型所需要的时间短。而且与人体发生的病变相似，取血检查也较方便。
动脉粥样硬化症(心血管内科),动脉硬化是动脉壁增厚、变硬而失去弹性，可累及大、中、小三类动脉。常见的动脉硬化有：动脉粥样硬化、动脉中膜钙化和小动脉硬化三种。动脉粥样硬化是临床最重要的一种动脉硬化，是造成脑血管病、冠心病等而威胁中老年人健康和生命的一种疾病。（引自百度百科）
而具体的实验方法，也有多种。例如：兔诱发模型、免疫学方法、注射儿茶酚胺类药物法、注入同型半胱氨酸法、注射表面活化剂法、胆固醇一脂肪乳剂静脉注射法等等。此处，我举例的是胆固醇一脂肪乳剂静脉注射法。具体的操作步骤如下：
动物实验模型
摘要：医学中的动物实验模型，为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的西药的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验模型。实验动物是活的仪器[1]，其重要性已受到世界各国科学家的共同认可。要合理正确选择实验动物，必须了解它的局限性。为学习研究提供更广阔的思路是今后进行学习研究的发展方向。
关键词：医学; 动物实验; 实验动物
引言：医学科学研究按场合、层次可分为:实验研究、调查研究和临床研究三种。动物实验模型研究是基础研究，是指在实验室内，为了获得有关生物学、医学等方面的新知识或解决具体问题而使用动物进行模拟的科学研究。医学科研和临床工作的开展，特别是新技术、新疗法、新药物的应用离不开实验动物动物实验【2】。而这些都必须由经过培训的、具备研究学位或专业技术能力的人员进行或在其指导下进行。动物实验的特点是可由实验者根据不同的课题选择动物。制成动物模型，可作严密的设计，包括目的、对象、方法、对照、随机分组、设定数量、指标、原始记录和统计方法等。医学中的动物实验为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的西药的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验。同样，动物实验也为中医、针灸学的发展带来了新的希望。但是，动物实验有它的局限性，不是所有医疗技术都需要进行动物实验，那些已经被临床实验证明有效的医疗方法，就没有必要再用动物实验来证实。由于很多高级动物在生理和病理方面与人类有近似之处，因此可以通过动物实验寻找新的药物和新的疗法。但是人和动物毕竟存在很大差异，动物实验的结果，只能给临床作为参考，而不能代替临床实践。一般情况下，一种新药或新的疗法，能否试用于临床，必须有足够的动物实验依据，但判断这种新药或新疗法是否真正有效，能否推广使用，还必须经受临床实践的检验。通常情况下，动物实验有效，临床实践也有效，但有时两者并不一致。一种疗法，如动物实验证明有效，而临床实践证明无效，就应否定。反过来，临床实践证明有效，而动物实验却无效，自然还应肯定。只是在现代医学当中，大多是动物实验在先，临床实验在后，如动物实验无效的方法和药物几乎都不可能再用于临床实践，而凡能用于临床的药物和方法自然都能得到动物实验的验证。从而给人们造成一种假象，动物实验依据第一重要。然而用此观点来评定医药疗法，则是完全错误的。医学领域内的动物实验是医学与药学的科学研究中重要的组成部分，医学的研究结果最终要用动物实验加以综合检验，才能进入临床应用[3]。中药和西药的实验研究也要采用一般药物实验研究的方法学原理和技术，包括药效学、药物代谢动力学和毒理学的方法学原理和技术，应用实验动物进行试验与检定，以求得临床前的科学结论。因此，实验动物是活的精密仪器，其重要性已受到世界各国科学家的共同认可。在动物实验中，选择何种动物作为该项动物实验模型的实验动物对于实验的成败是很重要的，本文就这个问题作一些说明
实验动物模型
第章实验动物模型
第一节实验动物选择的原则
第二节生物科学研究中的动物模型
实验动物模型
选择什么样的实验动物作实验是生物医学研究工作中一个重要环节，不能随便选用一种实验动物来作科学研究，因为在不适当的动物身上进行实验，常可导致实验结果的不可靠，甚至使整个实验徒劳无功，直接关系到科学研究的成败和质量。事实上，每一项科学实验都有其最适宜的实验动物。
第一节实验动物选择的原则
•科学研究工作中实验动物的选择，首先应根据实验目的和要求来选择，其次再参考是否容易获得、是否经济，是否容易饲养和管理等情况。
•在实验动物选择上必须注意三点，即实验动物的种类（Species）；品种（Breed）或品系（Strain）；质量和实验动物的健康状态。
尽量选择与研究对象的机能、代谢、结构及疾病特点相似的实验动物；
•生物医学研究的根本目的是要解决人类疾病的预防和治疗问题。因此，在选择实验动物时应优先考虑的问题是动物的种系发展阶段。在可能的条件下，尽量选择那些机能、代谢、结构和人类相似的实验动物作实验。一般来说，实验动物愈高等，进化愈高，其机能、代谢、结构愈复杂，反应就愈接近人类，猴、狒狒、猩猩、长臂猿等灵长类动物是最近似于人类的理想动物。
第二节生物科学研究中的动物模型
一、动物模型的意义和优越性
•生物科学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。人类各种疾病的发生发展是十分复杂的，要深入探讨其疾病的发病机理及疗效机理不能也不应该在病人身上进行。可以通过对动物各种疾病和生命现象的研究，进而推用到人类，探索人类生命的奥秘，以控制人类的疾病的衰老，延长人类的寿命。
实验四 酒精诱导斑马鱼脂肪肝模型
Biblioteka Baidu
实验结果
课堂作业
• 画简图表示对照组和实验组的区别。
酒精诱导斑马鱼脂肪肝模型
实验目的
• 掌握酒精诱导斑马鱼脂肪肝模型的建立方 法。
• 熟悉脂肪肝模型的鉴定方法。
实验步骤
1、动物模型的建立： 1）收集胚胎和分组：胚胎发育到 5 dpf，随机均分为对照组、 2% 乙醇处理组 每组 50条，置于培养皿中； 2）酒精处理：处理组加入2% 体积的无水乙醇， 对照组给予斑马鱼培养用水 ( hank' s solution) 。加 盖 后 用Parafilm 封条封闭，置于 28． 5℃培养箱内培养， 处理后32 h。 3）观察和实验记录：观察并记录畸形率和死亡率。
动物模型的分类
动物模型的分类
一、按产生原因分类
（一）自发性动物模型（Spontaneous Animal Models）
是指实验动物未经任何有意识的人工处置，在自然情况下所发生的疾病。包括突变系的遗传疾病和近交系的肿瘤疾病模型。突变系的遗传疾病很多，可分为代谢性疾病、分子疾病和特种蛋白质合成异常性疾病。如无胸腺裸鼠、肌肉萎缩症小鼠、肥胖症小鼠、癫痫大鼠、高血压大鼠、无脾小鼠和青光眼兔等。它们为生物医学研究提供了许多有价值的动物模型。近交系的肿瘤模型随实验动物种属、品系的不同，其肿瘤的发生类型和发病率有很大差异。
很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值，如自发性高血压大鼠，中国地鼠的自发性真性糖尿病，小鼠的各种自发性肿瘤，山羊的家族性甲状腺肿等。利用这类动物疾病模型来研究人类疾病的最大优点，就是疾病的发生、发展与人类相应的疾病很相似，均是在自然条件下发生的疾病，其应用价值就很高，但是这类模型来源较困难，不可能大量应用。由于诱发模型和自然产生的疾病模型是有一定差异的，如诱发的肿瘤和自发的肿瘤对药物的敏感性是不相同的，加之有些人类的疾病至今尚不能用人工的方法在动物身上诱发出来，因此，近年来十分重视对自发的动物疾病模型的开发，有的学者甚至对狗、猫的疾病进行大规模的普查，以发现自发性疾病的病例，然后通过遗传育种，将这种自发性疾病模型保持下来，并培育成具有特定遗传性状的突变系，以供研究。近年来许多动物遗传病的模型就是通过这样的方法建立的。在这方面小鼠和大鼠的各种自发性疾病模型开发和应用得最多。这类模型在遗传病、代谢病、免疫缺陷病、内分泌疾病和肿瘤等方面的应用正日益增多。
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• 调查发现，我国骨质疏松症总患病率为16.1％。原 发性骨质疏松症总患病率为12.4％（其中80%是女 性 ）。
• 60－69人群骨质疏松发病率：女性50－70％，男性： 30％。
• 骨质疏松相关骨折发生率：27.5－32.6％。 • 目前我国约有骨质疏松症患者6000-8000万以上。 并且有1亿多人需要采取必要的预防措施，即16000 万人。
3 ．氨基糖苷类抗生素致肾毒性
【 复制机理】
通过机械方法或药物方法，造成 肾脏缺血，最终导致肾小管上皮细胞 损伤，发生急性肾衰竭。
【复制方法】
大鼠
动物选择：大鼠 麻醉、开腹
复制步骤：
1、对循环系统的观 察指标 2、对自由基影响的 观察指标 3、形态学观察
结扎双侧肾动脉
1h后
再灌注
30min后
测定
【复制方法】
成年大鼠
动物选择：小鼠、大鼠、家兔、犬
复制步骤：
腹腔或皮下注射CCL4原液1ml/kg 灌胃40% CCL4 橄榄油0.8~1.6ml/kg
16~24h
处死动物
取血测定、 肝病理切片
【复制方法】
动物选择：小鼠、大鼠、家兔、犬
复制步骤：
1．四氯化碳剂量要选择合适．
2．四氯化碳蒸汽和液体可由 呼吸道、皮肤吸收，对人体有 注意事项： 一定毒性，操作时应注意。
【复制方法】
12月龄雌性大鼠
麻醉 腹位固定 纵行切口
（躯干下1/3，距脊柱两侧各1-2cm）
动物选择：大鼠
复制步骤：
骨密度指标 骨矿成分测定 骨组织形态指标 骨代谢有关的生化指标
切除双侧卵巢 缝合
４个月后
测定
【复制方法】
动物选择：大鼠
复制步骤：
注意事项：
1、手术应注意无菌操作。 2、卵巢应尽量切除干净。
骨质疏松动物 模型的复制
骨质疏松
Strong, dense bone
Fragile, osteoporotic bone
流行病学
• 我国60岁以上人群达60％，随着我国老龄人口的增 加，骨质疏松病人必将迅速增加。
• 据统计，全球50－70％的骨质疏松症分别发生在亚 洲国家和发展中国家，我国既是发展中国家，又地 处亚洲，人口基数最大，老龄速度最快，这些因素 均决定了骨质疏松症已成为我国一个严重的公众健 康问题。
肝损伤模型的复制
免疫系统
肝 病 毒
【复制方法】
1．药物性肝损伤: CCL4、D-氨基半乳糖 2．免疫性肝损伤
同种免疫性肝损伤 异种免疫性肝损伤 体外免疫性肝损伤 卡介苗加脂多糖
3 ．嗜肝DNA病毒感染:灵长类、鸭、树鼩等
【 复制机理】
四氯化碳进入动物体内后，在肝内 被氧化酶代谢，生成活波的三氯烷基自 由基和氯自由基。这些自由基可与细胞 内和细胞膜的大分子发生共价结合，使 酶的功能丧失，细胞膜脂质过氧化，导 致细胞损伤坏死。
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定
7天
复制步骤：
单笼饲养
置于失眠刺激 器内
腹腔注射青霉素
【复制方法】
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定
7天
复制步骤：
单笼饲养
置于失眠刺激 器内
腹腔注射青霉素
描记脑电9：30~17：30
【复制方法】
骨质疏松症的危险因素
①长期低钙饮食：每日<600mg。 ②绝经或卵巢切除雌激素下降，骨吸收增加，肠钙吸收下降。 ③长期卧床：见阳光少，骨缺乏肌肉活动刺激，成骨活性下降。 ④营养缺乏：如缺维生素D及K、Ca等，但蛋白质过高，产酸 过多，使尿呈酸性，尿钙排泄增加，亦可促进骨质疏松。 ⑤糖尿病：尿钙增加。 ⑥ 过度饮酒：使尿钙增加。 ⑦大量吸烟、饮咖啡、浓茶：均使尿钙增加，骨吸收增加。 ⑧长期使用皮质激素、巴比妥、肝素均可影响钙的吸收，尿钙 排泄增加，促进骨量丢失。
睡眠剥夺模型的 复制
NREMS
（非快速眼球运动睡眠）
1期 2期
睡 眠 时 相
REMS
（快速眼球运动睡眠）
3期
4期 SWS
SWS REMS
对机体的发育和疲劳的恢复起 着重要的作用
与脑的发育和智力的发达关系 密切
选择性增加 SWS， 同时能够保证 REMS 正常比例的药物。
研究新型催眠
药物的途径
5 4 9 6 .0 0 0 0 0
SWS
肌 电
V o lt
t
s
脑
V o lt
电
s F ilt
er
4 8 4 8 .0 0 0 0 0
4 8 5 4 .0 0 0 0 0 seconds
4 8 6 0 .0 0 0 0 0
4 8 6 6 .0 0 0 0 0
REMS
肌
电
脑 电 er
-6 .0 0 0 0 0 0 11 9 7 6 . 0 0 0 0 0 11 9 8 2 . 0 0 0 0 0 seconds 11 9 8 8 . 0 0 0 0 0
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定
复制步骤：
【复制方法】
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定 单笼饲养
复制步骤：
【复制方法】
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
复制步骤：
30%乙醇 混合饲料
皮下注射40% CCL4橄榄油0.5ml/100g
每隔四天
皮下注射 79.5%单纯玉米 粉20%猪油 0.5%胆固醇 Ccl40.3ml/100g
【复制方法】
雄性大鼠
动物选择：大鼠
喂饲
第一天
复制步骤：
30%乙醇 混合饲料
皮下注射40% CCL4橄榄油0.5ml/100g
10h后
取血和肝组织
【复制方法】
动物选择：小鼠
复制步骤：
每批卡介苗所含活菌数有所差 注意事项： 异，实验前应做活菌数的检测。
【复制方法】
1．药物性肝损伤: CCL4、D-氨基半乳糖 2．免疫性肝损伤
同种免疫性肝损伤 异种免疫性肝损伤 体外免疫性肝损伤 卡介苗加脂多糖
3 ．嗜肝DNA病毒感染:灵长类、鸭、树鼩等
【复制方法】
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
复制步骤：
【复制方法】
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜
剪开皮肤 头部剪毛、消毒
复制步骤：
【复制方法】
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒
复制步骤：
【复制方法】
成年大鼠
【 复制机理】
使用不同浓度的氯化汞溶液给动 物皮下肌内或静脉注射，其可使蛋白 质凝固，造成重金属导致的中毒性肾 小管损伤。
【复制方法】
杂种犬
动物选择：犬
造成输尿管瘘 20%HgCl2腹部皮下 注射20mg/kg
1~2h后
复制步骤：
观察
【 复制机理】
氨基糖苷类抗生素具有肾毒性， 造成肾小管上皮细胞膜脂质代谢及线 粒体能量代谢造成肾小管细胞膜损伤。
【 复制机理】
预先给小鼠注射卡介苗可使中性粒 细胞或巨噬细胞聚集于肝，继后再用低 剂量大肠杆菌脂多糖攻击注射，可激活 这些细胞释放对肝细胞有毒性作用的因 子，造成免疫性肝损伤。
【复制方法】
小鼠
动物选择：小鼠
尾静脉注射卡介苗0.2ml(108活菌/ ml)
复制步骤：
12天后
尾静脉注入7.5μg脂多糖
【复制方法】
制动法 动物选择：大鼠
复制步骤：8月龄大鼠
悬吊法
成年大鼠
切断坐骨神经
8周后
即成
尾部悬吊
29天后
即成
肺水肿模型 的复制
【 复制机理】
肺水肿是液体在肺的间质或肺 泡内积聚。引起肺水肿的原因虽然 各种各样，但大多数是由于肺毛细 血管壁通透性增加或毛细管内血压 升高所致。
【复制方法】
麻醉 剥离气管 备用 剥离颈动脉 测定血压 固定 动物选择：小鼠、大鼠、家兔、犬
【复制方法】
大鼠
动物选择：大鼠
复制步骤：
腹腔注射庆大霉素（140mg/kg/日）
7天后
观察测定
成年大鼠
麻醉 脑立体定位仪固定
动物选择：大鼠
剥离骨膜 安装电极
剪开皮肤 头部剪毛、消毒 牙科水泥固定
7天
复制步骤：
单笼饲养
置于失眠刺激 器内
腹腔注射青霉素
描记脑电9：30~17：30
【复制方法】
动物选择：大鼠
复制步骤： 1．动物对实验的影响。
2．及时清理刺激器上的粪便， 注意事项： 保持清洁。 3．保持室内环境安静.
骨 质 疏 松 基 本 预 防 措 施
骨组织 细胞 骨质
骨 祖 细 胞
成 骨 细 胞
骨 细 胞
破 骨 细 胞
有 机 质
无 机 质
骨代谢
骨单位的形成是先由破骨细胞分解吸收陈 旧骨质，形成一锥形隧道，在隧道最宽处出 现一转变区，此处破骨细胞消失，成骨细胞 前体形成成骨细胞，开始形成粘合线并分泌 类骨质，钙化形成骨板。
每隔四天
皮下注射 Ccl40.3ml/100g 第 42天即成
急性肾衰竭模型 的复制
致病因素
• • • • • 1、肾血流动力学障碍 2、肾小管管腔堵塞 3、组织缺氧 4、肾内皮细胞功能失常 5、体内与急性肾衰发病机制密切相关的物质 的异常。
【复制方法】
1．缺血性急性肾衰竭
2．氯化汞致急性肾衰竭
【 复制机理】
维甲酸是维生素A的一类衍生物， 是用于肿瘤和银屑病等治疗的药物， 但对骨质有明显影响，具有致骨质疏 松的副作用。
【复制方法】
动物选择：大鼠
3月龄大鼠 灌胃给予维甲酸7.5mg/kg/日
2周后
复制步骤：
停用
常规饲养
测定
【 复制机理】
由于运动受限和功能障碍，如器 官疾病、骨折固定卧床或失重等因素， 一段时间内引起骨骼肌活动量减少， 会引起废用性骨质疏松。
肝硬变模型 的复制
一、病因和发病机制
㈠病毒性肝炎：乙型慢性活动性肝炎，我国多见。 ㈡慢性酒精中毒： 乙醇
NAD↓ NADH↑
乙醛
乙酸
脂肪氧化↓
脂肪合成↑ 肝脂变
肝细胞 坏死
㈢营养缺乏：
⒈蛋白质↓─→酶结构受损+酶活性↓ ─→肝 细胞抵抗力↓─→易受损害─→坏死 ⒉蛋氨酸↓─→胆碱↓─→磷脂↓─→脂蛋白 ↓─→脂肪肝
觉醒
肌
s
电
in
put
脑 电
F ilt
er 6 .0 0 0 0 0 1 2 .0 0 0 0 0 seconds 1 8 .0 0 0 0 0
浅睡
肌 电
in p
ut
脑 电
F ilt
er
5 4 7 8 .0 0 0 0 0
来自百度文库
5 4 8 4 .0 0 0 0 0
5 4 9 0 .0 0 0 0 0 seconds
【复制方法】
单平台睡眠剥夺法
平台睡眠剥夺技术
强迫运动睡眠剥夺法
多平台睡眠剥夺法 改良多平台睡眠剥夺法 水平转盘睡眠剥夺法 旋转圆筒睡眠剥夺法
轻柔刺激法 药物睡眠剥夺法 电刺激法
咖啡因、去氧麻黄碱、神经毒素 刺激参数：电流0.5mA,波宽 15ms,频率1Hz,时间30s/次
【 复制机理】
将大鼠置于失眠刺激器内,通过 笼底部的电栅刺激大鼠足底部八小时, 在刺激期间,脑电记录可自动中断,由 电刺激引起的大鼠失眠被认为是接近 于人类失眠的合适病理模型。
正常骨转换过程
绝经后骨松 原发性骨质疏松 老年性骨松
特发性骨质疏松
药物性
营养性
继发性骨质疏松 内分泌代谢性 废用性
【复制方法】
1 ．去卵巢致大鼠骨质疏松
2 ．药物致大鼠骨质疏松
3． 废用性骨质疏松
【 复制机理】
妇女绝经或卵巢切除后，由于体 内雌激素水平降低，而使骨代谢呈负 平衡 骨吸收增强，骨量逐渐丢失， 形成骨质疏松。
复制步骤：
测定呼吸 缝皮针穿入剑突处 剥离颈静脉 接输液装置 夹住气管
0.1%肾上腺素0.3ml/kg
处死
1．计算肺系数 2．切开肺脏，注意观察有无 粉红色泡沫样液体流出。
开胸
结扎气管分叉处 取肺
观察测定
【复制方法】
动物选择：小鼠、大鼠、家兔、犬 复制步骤： 注意事项：
1.解剖取出肺时，注意勿损伤肺表面 和挤压肺组织，以防止水肿液流出， 影响肺系数值； 2.动物对注入肾上 腺素的耐受性个 体差异较大，有些动物需注入较多量 的肾上腺素才出现急性肺水肿。
㈣毒物中毒：
毒物─→肝细胞损伤坏死─→肝硬化
【 复制机理】
实验动物由于炎症、中毒、营养 不良等不同原因，使肝脏受到长期、 反复而且广泛的损害时，可引起肝细 胞变性和坏死，继而由于肝细胞的再 生和纤维组织增生，使肝脏组织结构 破坏，质地变硬，发生肝硬变。
【复制方法】
雄性大鼠
动物选择：大鼠
喂饲
第一天