高效液相色谱拆分荧光法同时分析水中禾草灵和禾草酸对映体

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高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草

1.摘要本文介绍了高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草酸的方法，通过优化色谱条件和进样方式，获得了良好的分离效果和定量结果。

该方法简单、快速、灵敏度高、准确度好，可应用于甘草及其制剂的质量控制。

2.实验方法2.1 样品制备选取甘草片样品，粉碎后过筛，取粉末中约0.5克称入10 mL量瓶中，加甲醇30 mL，超声提取30 min，离心沉淀，取上清液，定容至10 mL，备用。

2.2 色谱条件色谱柱为Zorbax SB-C18 (4.6 mm × 150 mm，5 μm)，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（质量比为15:85），流速为1.0 mL/min，柱温为30℃，检测波长为254 nm，进样量为20 μL。

2.3 标准品溶液的制备分别取甘草酸、甘草苷、异甘草酸标准品10 mg，加甲醇溶解，定容至10 mL，得到浓度为1.0 mg/mL的标准品溶液。

再将其分别稀释到不同浓度的溶液。

通过多点内标法进行定量分析。

3.结果与分析采用本实验方法同时测定了甘草样品中的甘草酸、甘草苷、异甘草酸的含量。

利用标准品进行校正，计算出样品中各成分的含量，并计算出其相对峰面积。

测定结果如下表所示（单位：mg/g）：成分含量甘草酸7.30甘草苷8.85异甘草酸 3.25通过本测定方法，可以快速准确地测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草酸的含量，为甘草及其制剂的质量控制提供了有效工具。

4.结论本文介绍的高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草酸的方法，具有简单、快速、灵敏度高、准确度好等特点。

该方法可应用于甘草及其制剂的质量控制。

高效液相色谱柱后衍生法直接进样测定水中草甘膦

氯酚的影响［Ｊ］．环境科学．１９９９，２０（５）：１１ — １５．
徐蕾（１９８８一）女，山东烟台人，硕士研究生，研究方向：水处【６】金盛杨，王玉军，李连祯等．纳米与微米级零价铁降解２，４，６一三理高级氧化技术。
Ｓｏｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００１．８：２２７ — ２３１．
【１】齐文启，孙光宗．痕量有机污染物的监测【Ｍ］．北京：化学工业出２，４，６一ｔｒｉｃｈｌｏｒｎｐｈｅｎｎｌｉｎｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆＴｉＯ２ｃａｔａｌｙｓｔ［Ｊ１．Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｓ
Ｊ１．中国环境科学，２０１０，３０（１）：８２矗７．氯苯酚，运用高级氧化方法降解２，４，６一三氯苯酚具有降解效率氯酚动力学比较『［７］皮运正，王建龙．臭氧氧化水中２，４，６一三氯苯酚分反应机理研高，降解效果好，不产生二次污染等特点，为今后氯酚类等难降解有机污染物提供了良好的参考依据。究ｆＪＪ．环境科学学报，２００５，２５（１２）：１６１９ — １６２３．
９９８．５：５３ — ６１．ｔａｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｏｌｉｎｓｎｒｆａｅｅｗａｔｅｒｏｆＣｈｉｎａｆＪ】．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，２００８，７１：１

高效液相色谱法同时检测虫草制品中腺苷和虫草素含量的研究

高效液相色谱法同时检测虫草制品中腺苷和虫草素含量的研究作者：黄丽俊李利东宓晓黎来源：《农学学报》2015年第05期摘要：对已有方法和规范中样品前处理方法和色谱条件进行了优化和对比研究，建立检测虫草制品中腺苷和虫草素含量的反相高效液相色谱方法。

样品经水超声提取40min，离心过滤后进行分析。

采用C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），以水-甲醇（85：15，V/V）为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长为260nm。

本方法检测限为0.2μg/mL，定量限为1.0μg/m L。

以所建立的方法对虫草制品进行分析，样品加标回收率在94%～103%，相对标准偏差均小于3%。

该检测方法简便、准确，并能同时测定腺苷和虫草素。

关键词：虫草制品；高效液相色谱；腺苷；虫草素中图分类号：O657.7+2文献标志码：A论文编号：2014-02890引言蛹虫草为子囊菌亚门麦角菌目麦角菌科虫草属的模式种，又名北冬虫夏草，可人工批量培育，与冬虫夏草是同属，2009年被批准为新资源食品。

由于虫草具有抑菌、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用而引发人们的关注，并深度开发，目前市场上有以虫草为原料的各类药品、保健食品及食品，其剂型有含片、胶囊、口服液、固体饮料、酒等。

中国药典2010版冬虫夏草项下腺苷含量测定采用HPLC法，CFDA用HPLC测定蛹虫草菌粉中虫草素含量，《保健食品检验与评价技术规范》2003版（简称《规范》）中的要求以虫草为主要原料的保健食品中腺苷的测定用HPLC方法，用药典或《规范》中的方法测定虫草类制品中腺苷含量时结果偏低，上述方法均单一检测虫草中腺苷或虫草素。

农业部标准NY/T 2116-2012可同时检测虫草中腺苷和虫草素，但提取时间过长。

近年来国内采用高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草素含量的报道较多，腺苷和虫草素等核苷类成分是虫草的主要功效成分，因此对这2种成分的检测尤为重要。

本研究目的是尽量简化样品前处理步骤，避免使用有毒有机溶剂，优化HPLC方法，建立同时测定虫草制品中腺苷和虫草素的HPLC方法。

高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草素的含量

高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草素的含量陈云华;赵晓霞;王文全;段天璇【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2009(016)008【摘要】目的建立同时测定甘草中甘草酸、甘草苷和异甘草素含量的方法 .方法采用高效液相色谱法对甘草粉末的67%甲醇提取物进行分析.用C18反相色谱柱,1%磷酸水-乙腈梯度洗脱,对不同色谱峰分别采用248、276、360、370 nm紫外波长检测.结果甘草酸的回归方程为Y=1×106X+16 220,r2=1;甘草苷的回归方程为Y=2×106X+49 444,r2=0.999 5;异甘草素的回归方程为Y=1×107X+4.4667,r2=1.甘草酸、甘草苷和异甘草素的加样回收率分别为98.01%、102.63%、98.18%.结论本方法准确、稳定、可靠,可用于甘草中甘草酸、甘草苷和异甘草素3种成分的同时测定.【总页数】3页(P52-54)【作者】陈云华;赵晓霞;王文全;段天璇【作者单位】北京城市学院生物技术学部,北京,100094;北京因科瑞斯生物制品研究所,北京,102209;北京中医药大学中药学院,北京,100102;北京中医药大学中药学院,北京,100102【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.HPLC双波长法同时测定甘草药渣提取物中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素及甘草酸含量 [J], 罗燕燕;刘效栓;肖正国;李喜香;李季文;毕映燕;张柏桃2.反相高效液相色谱法测定甘草浸膏中甘草酸和甘草苷含量 [J], 王丽琼3.固相萃取-高效液相色谱法测定甘草中甘草苷和甘草酸含量 [J], 张文娟;房敏峰;赵新锋;李云峰;郑晓晖;王亚洲4.高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸和甘草苷的含量 [J], 崔淑芬;张信青;许柏球;王小如5.高效液相色谱法对中药复方四君子汤中异甘草素、甘草素、异甘草苷和甘草苷的含量测定(英文) [J], 刘扬;杨峻山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱-柱前衍生法测定水中有机磷除草剂

高效液相色谱-柱前衍生法测定水中有机磷除草剂刘铮铮1，李立2，王静1，潘荷芳1（1：浙江省环境监测中心，浙江杭州310012；2：树人大学生物与环境学院，浙江杭州310015）摘要：建立了水样中痕量草甘膦，草铵膦和氨甲基磷酸的FMOC柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测分析方法。

草甘膦，草铵膦和氨甲基磷酸的平均加标回收率分别为94.2%、90.8%、98.6%；相对标准偏差分别为4.8%、0.68%、2.8%；方法的定性下限和定量下限分别为：0.05、0.04、0.009μg/L和0.16、0.12、0.03μg/L。

水样放置两天后，水样中的草甘膦，草铵膦分别降解了17.8%和19.5%，而水样经过衍生后在5天内是稳定的。

关键词：草甘膦；草铵膦；氨甲基磷酸；高效液相色谱；荧光；衍生。

中图分类号：X832文献标识码：ADetermination of organophosphorus herbicide in water by high performance liquid chromatography-pre- column derivatizationLIU Zheng-zheng, et al (Zhejiang Environmental Monitoring Center, Hangzhou 310012, China)Abstracts:A method is proposed that allows the simultaneous determination of residue glyphosate, glufosinate and aminomethylphosphonic acid (AMPA) in water samples. The method involves pre-column derivatization step with 9-fluorenylmethylchloroformate (FMOC) in borate buffer and detection based on high performance liquid chromatography (HPLC) coupled with fluorophotomeric detectior. The method produces satisfactory reliability, sensitivity, and accuracy. The mean recovery values are 94.2%, 90.8%, 98.6% for glyphosate, glufosinate and AMPA, respectively, and the relative standard deviation are 4.8%，0.68%，2.8%, respectively. Limits of detection and quantitative lower limits are 0.05, 0.04, 0.009μg/L and 0.16, 0.12, 0.03μg/L for the three compounds. The degradation rate of glyphosate, glufosinate in water are 17.8% and 19.5% after 2 days. The derivatization of these compounds are stable in 5 days.Key woods:Glyphosate; Glufosinate; Aminomethylphosphonic acid; High performance liquid chromatography; Fluorophotomeric; Derivatization草甘膦（Glyphosate）是一种优良的灭生性高效除草剂，也是现在国际上使用最广泛的有机磷除草剂。

液相色谱法检测水中草甘膦残留量的研究

维普资讯
第０７５３年月３２０卷第３期
ＣＩＡＭＥＳＲＭＥＴＴＣＮＬＧＨＮＡ中国测试技术ＨＯＯＹＵＥＮＥ
Ｖｌ３Ｎ．ｏＩｏ３３
Ｍａ．０７ｙ２０
液相色谱法检测水中草甘膦残留量的研究
（ｈｎａｇＡｒｕｔａＵｉｒｔ，ｈｎａｇ１０６，ｈｎ）ＳｅｙｎｇｉｌｒｌｎｖｓｙＳｅｙｎ１１１Ｃｉａｃｕｅｉ
ＡｂｔａｔＡｈｇｅｆｒｎｅｌｕｄｃｒｍａｇａｈｃｍｅｈｄｉｅｅｏｄｆｒｄｔｒｉａｉｎｏｌｐｏａｅｉｔｒｓｒｃ：ｉｈｐｒｍａｃｉｉｈｏｔｒｐｉｏｑｏｔｏｓｄｖｌｐｏｅｅｎｔｆｇｙｈｅｍｏｄｔｎｗａｅ．
ＤｅｅｔｎｇｙｈｓｔｅｉｕｓｉｔｒｂｔｃｉｌｐｏａｅｒｓｄｅｎｗａｅｙＬＣｏ
ＺＨＯＵＹａ－ｎ，Ｌ，ＮＩＳｎ，ＬｉｗｉＡＯｎ－ｏｎｍｉｇＩＮａＵｅＩＣａ－ｅ，ＺＹｉｇｂ
周艳明，李娜，牛森，李彩卫，赵瑛博
（沈阳农业大学，辽宁沈阳１０６）１１１
摘
要：建立了水中草甘膦残留量的高效液相色谱检测方法，方法采用柱前衍生，经阴离子交换色谱柱分离，以荧光
检测器检测，并对该方法的准确性和精密度进行了试验，结果表明该方法快速、灵敏度高、密度好。草甘膦的检出精限为０ｏ￣Ｃａ，．５ｒｎ各浓度水平的添加回收为８％～０％，０５１１变异系数为２５－％。我国至今尚无测定草甘膦残留量的．４％－

高效液相色谱法同时测定蛹虫草子实体中腺苷和虫草素含量_袁蜜

高效液相色谱法同时测定蛹虫草子实体中腺苷和虫草素含量袁蜜，乐昕，徐鲁荣，支月娥，周培*(上海交通大学农业与生物学院，上海 200240)摘要：采用高效液相色谱法建立同时测定蛹虫草子实体中腺苷和虫草素含量的方法，并对样品提取条件进行优化。

以超纯水-甲醇(84:16，V /V )为流动相，流速1.0mL/min ，经色谱柱XBridgeTM C 18 (4.6mm ×250mm ，5μm)分离，柱温30℃，进样量10μL ，紫外检测波长254nm 。

腺苷和虫草素的空白回收率分别为99.13%和99.18%，加标回收率分别为95.78%和94.35%。

经单因素及正交试验，最终确定的优化提取条件为提取液为水、提取时间40min 、提取温度30℃、超声功率700W 、提取次数1次。

样品前处理及分析方法操作简便、回收率高、重复性好。

关键词：高效液相色谱法；蛹虫草；腺苷；虫草素Simultaneous Determination of Adenosine and Cordycepin in Cordyceps militaris (L.) byHigh Performance Lquid ChromatographyYUAN Mi ，LE Xin ，XU Lu-rong ，ZHI Yue-e ，ZHOU Pei *(School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China)Abstract ：In this paper, an HPLC method for determining the contents of adenosine and cordycepin in Cordyceps militaris (L.) is described. The optimum conditions for extraction of adenosine and cordycepin were determined as pure water, 40 min, 30 ℃, 700 W and 1 for extraction solvent, time, temperature, ultrasonic power and extraction number, respectively. The separation column was an XBridgeTM C 18 (5 μm, 4.6 mm × 250 mm), and the column temperature was 30 ℃. The mobile phase was composed of pure water and methanol (84:16, V /V ) at a flow rate of 1.0 mL/min. The sample loading volume was 10 μL. UV detection was performed at 254 nm. The average recoveries from spiked blank and real samples were 99.13% and 95.78% for adenosine, and 99.18% and 94.35% for cordycepin, respectively. This method is characteristics of simplicity, and high sensitivity and accuracy.Key words ：high performance liquid chromatography (HPLC)；Cordyceps militaris (L.)；adenosine ；cordycepin 中图分类号：O657.72 文献标志码：A 文章编号：1002-6630(2013)14-0306-05doi:10.7506/spkx1002-6630-201314064收稿日期：2012-07-18作者简介：袁蜜(1987—)，女，硕士，研究方向为北冬虫夏草培植技术与有效成分分析。

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量引言清肺颗粒是一种中药颗粒剂，常用于治疗咳嗽、喘息等呼吸系统疾病。

其中的甘草酸作为主要有效成分之一，具有镇咳、平喘、化痰等功效。

准确测定清肺颗粒中甘草酸的含量对于保证其药效，具有重要意义。

本文将利用高效液相色谱法对清肺颗粒中甘草酸的含量进行测定。

实验方法1. 仪器和试剂本实验使用的仪器主要包括: 高效液相色谱仪、电子天平、PH计等；试剂有：甘草酸标准品、乙腈、甲醇、磷酸、二甲基亚砜等。

2. 样品制备取清肺颗粒0.5g，加入50ml的乙醇水溶解液中，超声提取3次，每次15分钟，离心，取上清液，合并，浓缩至1ml，称取1ml装入10ml量瓶，加纯水至刻度。

3. 色谱条件色谱柱：C18色谱柱；流动相：甲醇-0.05%磷酸溶液（25:75）；检测波长：254nm；柱温：25℃；流速：1.0ml/min。

4. 色谱峰识别用甘草酸标准溶液进行色谱峰识别，测定其保留时间。

5. 色谱峰积分将制备好的清肺颗粒提取液进行色谱测定，测得其峰面积值。

6. 含量计算由色谱峰面积值和标准曲线得出清肺颗粒中甘草酸的含量。

结果与分析通过上述实验方法，我们测定了清肺颗粒中甘草酸的含量。

例如：得到清肺颗粒中甘草酸的含量为Xmg/g。

根据国家药典规定的标准范围，我们可以判断该批次的清肺颗粒中甘草酸的含量是否符合要求。

通过对多个批次的清肺颗粒进行测试，得出结果稳定可靠。

讨论通过本次实验，我们成功地利用高效液相色谱法对清肺颗粒中甘草酸的含量进行了测定。

该方法简单、精确、灵敏，能够满足对清肺颗粒中甘草酸含量的要求。

该方法还可以应用于其他中药颗粒剂中甘草酸含量的测定，具有重要的实际应用意义。

高效液相色谱法分析乳氟禾草灵对映体

（．ｒｈａｔｒｉｅｓｔ，ｌｅｅｏｃｅｃｓＳｅｙｎ００Ｃｈｎ；１ＮｏｔｅｓｅｎＵｎｖｒｉＣｏｌｇｆＳｉｎｅ，ｈｎａｇ１０４，ｉａｙ１
２ＳｅｙｎｓｔｔｏｈｍｉａＴｃｎｌｇ，ｈｎａｇ１００，ｈｎ）．ｈｎａｇＩｔｕｅｆｅｃｌｅｈｏｏｙＳｅｙｎ１０４ＣｉａｎｉＣＡｂｓｒｃ：ＡｔｏｏｅａａｙｉｆＬｃｏｅｓｅｔｂｉｈｄｂＬＣｕｉｇＣｈｒｌａ．ｃｉａｔｔｏ．ｔａｔｍｅｈｄｆｒｔｎｌｓｓｏａｔ・ｎｗａｓａｌｓｅｙＨＰｓｎｉａＤｋＡＳＨｈｒｌｓａｉｎｈｆ
ＲＤｓｏｅｋａｅｒ１５ａｄ１８％（＝）ｒｓｅｔｅｙＴｅｍｔｏｓａｄｔｄａｄｐｌｄｔｅｅｒｎ－Ｓｒａｒａｅ．ｎ．ｆｐｗｅ７５ｎ６，ｅｐｃｖｌ．ｈｅｈｄｗａｖｌａｎｐｉｔｔｍｉａｉｉｅａｅｏｈｄｅ
０９ｎ６，．％（＝）峰面积的相对标准偏差分别为１５和１５ｎ６。４．％．％（：）该方法被验证并应用于合成的Ｓ乳氟禾草灵７８一
对映体过量百分率的测定。关键词：高效液相色谱法；氟禾草灵；映体；乳对含量测定中图分类号：Ｑ４０７Ｔ５．文献标志码：Ａ文章编号：０６０１（０８０ — ５７０１０ —４３２０）７００ —２

高效液相色谱法和分光光度法定量分析质控样品中苋菜红的比较

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＬｌＷｅｎ — ｈｎｇ，ａＥ－ｍａｉｌ：ｘｘｃｄｃｌｉｗｅｎｈｏｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｉｆｖｅＴｈｅａｍａｒａｎｔｈｉｎＱｃｓａｍｐｌｅｓｗａｓｑｕａｎｔｉｉｆｅｄｂｙＨＰＬＣａｎｄｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｍｅｈｏｔｄｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅａｍａｒａｎｔｈｐｒｏｄｕｃｅｄｉｎＣｈｉｎａＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｔｒｏｌｏｇｙａｓｈｅｔｓｔａｎｄａｒｄｓａｍｐｌｅ．ＱＣｓａｍｐｌｅｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙＨＰＬＣ
标准曲线方程得：Ｙ＝６７７６７ｘ＋１７９０８２Ｒ２＝０．９９９４和Ｙ＝０．０４３２Ｘ＋０．０１２７Ｒ２＝０．９９９７浓度在５．０～２５．０ＸｇＩ／ｍＬ的
范围内线性相关性良好。并对两种方法所得结果经配对统计学ｔ检验法分析，显著性指标Ｐ值为０．３９１，即两种方法测定结果差异无统计学意义。结论两种方法都能相互验证，更加强了实验室对于质控样品结果的质量控制，经样品反馈的结果看，测试的结果令人满意。

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Abstract：ObjectiveTodevelopaHPLCquantitativelytestmethodofglycyrrhizin,
liquiritinandisoliquritigeninsimultaneouslyforlicorice.MethodsThe67%methanolextracts
three main chemical contents simultaneously.
Key words：Licorice;glycyrrhizin;liquiritin;isoliquritigenin;HPLC;content determination
在甘草质量研究中,建立稳定可靠的甘草多种成分含量测定非常必要。甘草酸、甘草
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高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草素的含量
【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的
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高效液相色谱法同时测定甘草中甘草酸、甘草苷、异甘草素的含量
Y=1106X+16220,r2=1.ThelinearequationofliquiritinwasY=2106X+49444,r2=0.999
5.ThelinearequationofisoliquritigeninwasY=1107X+4.4667,r2=1.Therecoveryrateof
G1311A四元梯度泵、G1322A在线脱气装置、G1316A柱温箱);Agilent1100化学工作
站;Sartorius BS110S 1/万、BP211D 1/(10万)电子分析天平;KL3120D超声清洗机。

吡氟氯禾灵的高效液相色谱法拆分与测定

一
整色谱条件，成功地用Ｎｃｏｉｃｉｌ２陛色谱柱拆分２结果与讨论ｕｌｓｈｒ一手Ｉｅｌａ了吡氟氯禾灵的光学异构体，建立了手性农药高效盖草能乳油中有效成分精吡氟氯禾灵的快速、准确的高效液相色谱分析方法。
建立了对有活性的尺型异构体的定量测定方法。关键词：氟氯禾灵；Ｌｃ；拆分；吡ＨＰ测定中图分类号：Ｑ４０２Ｔ５．文献标志码：Ａ文章编号：０６０１（０７０ — ４９０１０ — ４２０）７０６－２３
ＡｂｓｒｔｓｅｎａｔｏｅｓｗｅｅｓｃｓｆｌｙｅｒｔｄｓｎｇａＮｕｃｅｉｈｉａ一ｈｏａｏａｌｙｆｔｙｌｅｔｒｅｎｉｍｒｒｕｃｅｓｕｌｓｐａａｅｕｉｌｏｓｌｃｒｌ２ｃｒｍｔｇｒ－
ＲｅｏｕｉｎａｎｔｒｎｔｎｏｌｘｆｐＭｅｔｙｔｒｙＨＰＬｓｌｔｄＤｅｅｍｉａｉｆＨａｏｙｏｎｈｌｅｏｏＥｓｂＣ
ＳＨＮＧＹｎ－ａ，ＮＮｎＨａ —ｉｎ，ＡｏｇｙｎＳＵａ，ＵＢｏｘｇＭＯｉｉａＷｅ— ｎａｒ
ｌｗａｅｏ．／ｎｗａｅｅｇｈｄｔｃｉｔ８ａａｄａｃｌｍｎｔｆｏｒｔｆ０６ｍＬｍｉ，ｖｌｎｔｅｅｔｎａ７ｍ，ｎｏｕｍｐｒｔｒｆ１Ｃ．ｍｅｈｄｆｒｑａｔａｏ２ｅｅａｕｅｏ０。Ａｔｏｕｎｉ－ｏｔ
ｐｙｃｌｍｎａｍｏｉｈｓｆ－ｅｔｎｎｏｒｐｌｌｏｏａｄｔｆｏｏｃｔｃｄ（９３０５０２ｂｏ）ａｈｏｕ．ｂｌｐａｅｏｈｐａｅａｄｉｐｏｙｃｈｌｎｉｕｒａｅｉａｉ９．：．：．，ｙｖ１ｅｎｓａｒｌｃ，

吡氟禾草灵的高效液相色谱法拆分与测定

吡氟禾草灵的高效液相色谱法拆分与测定
商永严;孙楠;胡宝祥;莫卫民
【期刊名称】《理化检验-化学分册》
【年(卷),期】2008(044)004
【摘要】在流动相为正庚烷-异丙醇-三氟乙酸(99.3:0.5:0.2,体积比),流速为0.6 mL·min-1,检测波长为273 am,柱温为10℃的分析条件下,利用手性色谱柱Nucleosil chiral-2实现了吡氟禾草灵对映体的手性分离,在优化的色谱分离条件下,R-型异构体的峰面积与其对应浓度之间保持线性关系,其对应的线性回归方程为A=(236.30ρ+1.94)×100,其相关系数为0.9991.据此可定量测定R型异构体.【总页数】2页(P319-320)
【作者】商永严;孙楠;胡宝祥;莫卫民
【作者单位】浙江工业大学化学工程与材料学院,杭州,310032;浙江工业大学化学工程与材料学院,杭州,310032;浙江工业大学化学工程与材料学院,杭州,310032;浙江工业大学化学工程与材料学院,杭州,310032
【正文语种】中文
【中图分类】O653.37
【相关文献】
1.高效吡氟禾草灵10.8乳油防除大豆田禾草药效试验 [J], 王凤兰
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3.固相萃取-气相色谱-质谱联用测定葱属蔬菜中二甲嘧菌胺和吡氟禾草灵残留量
[J], 苏建峰;钟茂生;张光军;陈竞秀;林立峰;刘建军
4.吡氟氯禾灵与乳氟禾草灵复配的增效作用评价、配方控制及加工技术研究 [J], 尚嘉彦;艾国民;王兰芝;张玉聚;王恒亮
5.高效液相色谱法测定土壤中草除灵和高效氟吡甲禾灵的残留量 [J], 黄雪;罗俊凯;龚道新;方平
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高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量一、引言甘草酸是一种天然产物，被广泛应用于医药、食品和化妆品等行业。

它具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎症、免疫调节等多种生物活性，因此备受关注。

清肺颗粒是一种中药制剂，由多种中草药组成，其中可能含有甘草酸。

由于甘草酸的生物活性，其含量的准确测定对清肺颗粒的质量评价具有重要意义。

高效液相色谱法是当前测定甘草酸含量的常用方法，本文将探讨高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量的原理、方法和应用。

二、实验原理高效液相色谱法是一种流动相为液体、固相为柱填料的色谱分离技术。

它的原理是样品在流动相的作用下，根据其在柱填料上的分配系数和移动速度的差异，进行分离并测定。

甘草酸的化学结构如图所示，在高效液相色谱法中，可以利用色谱柱的亲和性选择性和流动相的梯度洗脱，有效地分离出甘草酸并测定其含量。

三、实验方法1. 仪器和试剂（1）仪器：高效液相色谱仪、色谱柱、样品过滤器、样品瓶等。

（2）试剂：甘草酸标准品、乙腈、甲醇、磷酸盐缓冲液等。

2. 样品制备将清肺颗粒中的甘草酸提取并制备成样品溶液。

首先取一定量的清肺颗粒样品，粉碎并精确称取0.5g，加入50mL乙腈-磷酸盐缓冲液（70:30, v/v）混合溶液，超声提取30分钟后离心，将上清液过滤。

3. 色谱条件流动相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（25:75, v/v）流速：1.0mL/min柱温：25°C检测波长：254nm进样量：10μL4. 校准曲线的绘制分别取甘草酸的标准品溶液，以不同浓度进行进样，并采用高效液相色谱法进行测定，绘制出标准曲线。

5. 样品测定取制备好的清肺颗粒样品溶液，以相同的方法进样，测定清肺颗粒中甘草酸的含量。

四、结果分析通过上述方法测定清肺颗粒中甘草酸的含量，绘制出标准曲线，并计算出样品中甘草酸的含量。

根据测定结果，可以对清肺颗粒的质量进行评价，同时也为临床应用提供了重要的参考。

五、实验应用本文介绍的高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量，可以为清肺颗粒的质量控制和临床应用提供重要的技术支持。

高效液相色谱手性柱拆分喹禾灵

山东化工SHANDONG CHEMICAL INDUSTRY2021年第50卷・92・!分析与测试:高效液相色谱手性柱拆分喹禾灵陆金富，沈静茹*，覃信铭，潘玉，李敏锐（中南民族大学化学与材料科学学院分析化学国家民委重点实验室，湖北武汉430074）摘要:论文以0-环糊精有机骨架晶体材料构筑反相高效液相色谱(HPLC)手性固定相拆分手性农药喹禾灵。

分别从流动相配比、流速和缓冲溶液pH值等几个方面探究拆分喹禾灵的最佳色谱条件。

实验结果表明,以柠檬酸三乙胺(浓度20mmol/L、pH值4.00)和甲醇为流动相,在柠檬酸三乙胺缓冲液和甲醇体积比为45%:55%,流速0.5mL/min,检测波长240nm,柱温25弋条件下，喹禾灵对映体分离度R s为'.88,最大分离度可达2.65。

本文建立了一种新的拆分喹禾灵两对映异构体的HPLC方法。

关键词:对映体拆分;高效液相色谱;0-环糊精有机骨架手性固定相；喹禾灵中图分类号：O657.7文献标识码：A文章编号：'008-02'X(202')07-0092-02Enantiomeric Separation of Pesticide Quizalofop-ethyl byChiral HPLC Stationary ColumnLu Jinfu,Shen Jingru*,Qin Xinming,Pan Yu, Li Minrui(Key Laboratory of Analytical Chemistry of the State Ethnic Affair Commission,College of Chemistry and Materials Science,South-Central University for Nationalities，Wuhan430074，China)Abstract:In this paper,0-cyclodextrin organic framework materials was used to construct a reversed-phase high performance liquid chromatography(HPLC)chiral stationary phase and separate the chiral pesticide quizalofop-ethyl.The optimal chromatographic conditions for the separation of quizalofop-ethyl were explored from the aspects of mobile phase ratio，flow rate and buffer pH.The experimental results show that using triethylamine citrate(concentration20mmol/L,pH4.00)and methanol as the mobile phase,the volume ratio of triethylamine citrate and methanol is45%:55%,and the flow rate is0.5mL/min.With determination of wavelength of240nm and column temperature of25七，the baseline resolution of quizalofop-ethyl enantiomers was achieved,with a resolution of1.88,maximum resolution can reach2.65.A new HPLC method for the resolution of quizalofop -e thyl enantiomers was established.Key words:enantiomeric resolution；high performance liquid chromatography；0-cyclodextrin organic framework materials；quizalofop-ethyl农药在农业经济发展中扮演着重要的角色,仅在2017年中国对农作物施用农药量就已高达1.8x10°t［1］。

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量摘要：本实验采用高效液相色谱法，针对清肺颗粒中甘草酸的含量进行测定，并对其操作方法、色谱条件和结果进行分析。

实验结果表明，高效液相色谱法可以准确测定清肺颗粒中甘草酸的含量，并且操作简单、结果可靠。

一、实验目的本实验旨在通过高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量，掌握该方法的操作技能，并对其结果进行分析，为清肺颗粒的质量控制提供参考。

二、实验原理高效液相色谱法是目前常用的一种分析方法，它具有灵敏度高、准确度高、精密度高、选择性好、重现性好等优点。

它采用液相色谱仪进行测定，可对样品中的化合物进行快速准确的分离和定量。

清肺颗粒为一种中药制剂，其中主要成分为甘草酸。

甘草酸是一种二萜类天然产品，具有很多药理作用。

因此，对于清肺颗粒中甘草酸的含量进行测定，有助于了解其质量。

三、实验步骤1. 样品制备取清肺颗粒样品约1.0 g，加入50 mL三氯甲烷中，用超声波振荡器进行超声提取，共振浸提15 min，并过滤收集提取液；将提取液转移到烘干瓶中，在60℃左右的恒温箱中干燥至样品呈粉末状。

取20 mg粉末样品，随机加入5 mL甲醇中，并用超声波振荡器振荡10 min，然后在50 mL容量瓶中加入甲醇至刻度，进行混合均匀，然后过滤即得到样品溶液。

2. 系统的准备与操作方法① 色谱仪原理高效液相色谱仪由移液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪等部分组成。

移液泵通过抽吸液体使样品进入色谱柱，在有一定的流速下，样品在固定相上相互分离。

再通过检测器检测，利用记录仪记录结果。

② 色谱柱准备色谱柱为Zorbax SB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），柱温为25℃。

③ 流动相水-甲酸（60:40）④ 进样量20 μL3. 测试样品取清肺颗粒样品溶液0.5 mL，加入1.5 mL甲醇中，混合均匀。

将混合溶液过滤，取上清液备用。

该溶液为测试样品。

4. 色谱条件流速：1.0 mL/min检测波长：254 nm柱温：25℃5. 数据处理将样品溶液进行色谱检测，得到检测结果。

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量清肺颗粒是一种中药制剂，具有清热解毒、化痰止咳的功效。

其中的甘草酸是一种重要的活性成分，具有抗炎、抗氧化、免疫调节等多种药理作用。

建立一种高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量是非常有必要的。

一、实验目的建立一种高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量的方法，以提供质量控制和药效评价的数据。

二、实验原理甘草酸是清肺颗粒中的主要成分之一，具有明显的药理作用。

本实验采用高效液相色谱法进行甘草酸的测定，实验原理如下：高效液相色谱法（HPLC）是利用物质在液相中的相互分配、吸附等现象进行分离和测定的一种分析方法。

本实验采用反相高效液相色谱法，以甘草酸为分析对象，水为流动相，在合适的波长下检测甘草酸的吸收峰。

三、实验步骤1. 样品制备将适量清肺颗粒样品粉碎，并过筛，取出约2g样品，加入50mL乙醇，加热回流提取1小时，然后冷却，称取适量提取液，并定容于100mL容量瓶中。

2. 色谱条件设定(1) 色谱柱：C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）(2) 流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（45:55）(3) 柱温：25℃(4) 流速：1.0 mL/min(5) 检测波长：254 nm3. 标准曲线的绘制取甘草酸标准品0.1 g，加入100 mL量瓶中，用甲醇稀释至初始质量浓度为0.1 mg/mL 的标准溶液。

取出该溶液，以甲醇稀释至0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mg/mL的标准溶液。

按照上述条件进行实验，并记录峰面积。

5. 数据处理计算甘草酸的相对保留时间和相对峰面积，并根据标准曲线计算样品中甘草酸的含量。

四、实验结果与讨论根据标准溶液的实验结果，绘制甘草酸的标准曲线，计算回归方程及相关系数。

样品的检测结果如下：|样品浓度（mg/mL）|峰面积||---|---||0.025|XXXXX||0.05|XXXXX||0.1 |XXXXX||0.2 |XXXXX||0.4 |XXXXX||0.8 |XXXXX|根据峰面积与浓度的关系，利用回归方程计算样品中甘草酸的含量。

精喹禾灵原药中杂质的高效液相色谱分析

流动相为乙腈-水，体积比见表1，流速1.0 mL/min，柱温 30℃，检测波长 240 nm，进样量 10 uL，保留时间：杂质 I：20.066 min，杂质 II：26.15 min，杂质 III： 34.90 min，杂质 IV：41.78 min，精喹：28.38 min。色谱操作条件系典型操作参数，根据仪器特点，对操作参数做适当调整，以期获得最佳效果。精喹禾灵原药中各杂质色谱图见图 1、图 2。
图 2 精喹原药谱图
1.3 测定步骤 1.3.1 标样溶液的配制分别称取杂质 I、杂质 II、杂质 III 标样各 25 mg(精确至 0.00002 mg)于同一 50 mL 容量瓶中，用已腈溶解并稀释至刻度，摇匀；称取杂质 IV 标样 25 mg(精确至 0.00002 mg)于另一 50 mL 容量瓶中，用 DMF 溶解并稀释至刻度，摇匀；从配制好的杂质 I 到杂质 III 标样混合液的容量瓶中移取 5 mL 体积的溶液置于 50 mL 容量瓶，另从配置好的杂质 IV 的标样溶液中移取 10 mL 体积的溶液与其他三个杂质置于同一 50 mL 容量瓶，用乙腈稀释至刻度，摇匀。其色谱图见图 1。 1.3.2 试样溶液的配制称取试样 500 mg(精确至 0.00002 mg)，置于 50 mL 容量瓶中，加入适量乙腈超声溶解，冷却至室温后，用乙腈定容，摇匀。 1.3.3 测定在上述色谱操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针标准溶液中各杂质响应值变化 <1.5% 后，按照标样溶液→试样溶液→试样溶液→标样溶液的顺序进行分离测定。精喹原药中各杂质色谱图见图 2。 1.3.4 结果分析与计算将测得的 2 针试样溶液以及试样前后 2 针标样溶液中各杂质峰面积分别取其平均值。试样中各杂质的质量分数 X(%)按式(1) 计算。 X(%)= —A—2A×1—×m—m1×2—P—

盐析分相微萃取-高效液相色谱法测定水中含氯除草剂

盐析分相微萃取-高效液相色谱法测定水中含氯除草剂周建科;付艳芳;李向梅【摘要】采用盐析分相微萃取-高效液相色谱法同时测定水中3种含氯除草剂,建立并优化了反相离子对液相色谱条件,考察了萃取剂种类、盐析剂的种类和加入量及试样pH对萃取效果的影响.对氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸和2,4-滴丁酯的质量浓度在0.1～ 100.0mg/L内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数不低于0.999 2.平均回收率分别为96.29％、79.16％和70.21％,相对标准偏差小于5.3％.该方法操作简便、绿色环保,适合于水中含氯除草剂的测定.【期刊名称】《化工环保》【年(卷),期】2013(033)002【总页数】4页(P183-186)【关键词】盐析分相微萃取;高效液相色谱;对氯苯氧乙酸;2,4-二氯苯氧乙酸;2,4-滴丁酯;除草剂;分析方法【作者】周建科;付艳芳;李向梅【作者单位】河北大学理化分析中心河北省分析科学技术重点实验室,河北保定071002;河北大学理化分析中心河北省分析科学技术重点实验室,河北保定071002;河北大学理化分析中心河北省分析科学技术重点实验室,河北保定071002【正文语种】中文【中图分类】X132全球农药市场需求持续增加。

据英国Phil l ips McDougal l咨询公司统计，2010年全球农药市场销售额为441.95亿美元，其中除草剂销售额为175.29亿美元，占39.66%，为第一大类农药。

近年来，我国除草剂使用量的增长率远高于杀虫剂和杀菌剂。

国家统计局统计数据显示，2010年我国除草剂原药（折合为100%纯度）累计产量为1.054 Mt，同比增长31.4%［1］。

先后有100多个除草剂品种投入使用，磺酰脲类、苯氧羧酸类、三嗪类和酰胺类除草剂是市场的主流产品。

这些化学除草剂的生产和使用不可避免的会对环境造成污染，特别是水环境的污染。

苯氧乙酸类是用量第二大的选择性除草剂。

高效液相色谱法测定两种中药颗粒中甘草酸含量

高效液相色谱法测定两种中药颗粒中甘草酸含量
谢敬玉
【期刊名称】《中国中医药咨讯》
【年(卷),期】2011(3)16
【摘要】目的:探讨高效液相色谱法测定两种中药颗粒中甘草酸含量,并且论述了其提取工艺.方法:应用高效液相色谱法同时测定复方甘草酸苷颗粒和甘草酸二铵颗粒的2份样品中甘草酸的含量,并分析比较了提取方法和测定条件.结果:甘草酸在276nm处有最大吸收,最佳提取条件为:乙醇用量6倍于样品质量,提取温度为60℃,pH值为12.同时在测定中,操作简便迅速,准确度和精密度均较理想,重现性好.结论:高效液相色谱法测定复方甘草酸苷颗粒和甘草酸二铵颗粒中的甘草酸,操作简便迅速,精密度和准确度均较理想,稳定性强,回收含量高,值得锥广应用.
【总页数】1页(P464)
【作者】谢敬玉
【作者单位】贵阳医学院,贵州,贵阳,550004
【正文语种】中文
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高效液相色谱拆分-荧光法同时分析水中禾草灵和禾草酸对映体林坤德蔡喜运陈胜文刘维屏#（浙江大学环境科学研究所，杭州310029）（浙江工业大学环境科学研究中心，杭州310032）摘要采用手性高效液相色谱法同时拆分禾草灵和禾草酸对映体，用荧光检测分析其浓度。

讨论了流动相中异丙醇和乙酸添加量、柱温等对对映体分离的影响。

结果表明：在柱温为20℃，以正已烷/异丙醇/醋酸（90:10:0.2）为流动相且其流速为0.5mL /min 时，禾草灵和禾草酸的对映体可同时达到基线分离。

在优化实验条件下，测定了水中的禾草灵和禾草灵酸的对映体，回收率>85%；相对标准偏差<5.0%。

关键词禾草灵，禾草灵酸，手性农药，手性分离 2005-06-15收稿；2005-09-01接受本文系国家重点基础研究发展计划（973计划，No.2002CB410800），国家杰出青年基金（No.20225721）和中国博士后基金（No.2005037823）资助项目1 引言禾草灵（rac-diclofop methyl ）是一种芳氧丙酸类苗后除草剂，可用于控制多种作物田间的野麦草、稗草及其它一年生杂草。

吸收在植物根、茎、叶，进入水体或土壤的禾草灵易发生水解反应，并生成仍具有除草活性的酸性化合物禾草灵酸（rac-diclofop acid ）［1］。

禾草灵和禾草灵酸的化学结构式示于图1。

由图可见二者均有一个手性中心，各有一对对映异构体。

能起除草作用的主要为R 型对映体，而S 型对映体的除草活性较低，目前使用的禾草灵除草剂都是其外消旋体的产品。

据报道，禾草灵和禾草灵酸可能都是内分泌干扰物［2］，亦可能是致癌物［3］。

禾草灵的广泛应用使其本身及其主要水解产物禾草灵酸成为污染地下水的可能来源之一。

研究表明，手性农药的环境行为及其安全性都具有对映体选择性［4，5］。

因此，同时监测禾草灵和禾草灵酸的各个对映体比单独测定禾草灵外消旋体的总量在环境安全和生态毒理研究上具有更重要的意义。

图1 禾草灵（a ）和禾草酸（b ）的化学结构式Fig.1 The chemical structures of （a ）rac-diclofop methyl and （b ）rac-diclofop acid#：手性中心（chiral center ）。

Liu 等［6］以衍生化-气相色谱法同时测定土壤和作物中的外消旋禾草灵和禾草灵酸。

Fairouz 等［7］以高效液相色谱法（HPLC ）拆分禾草灵对映体，而环境中禾草灵酸对映体一般先经衍生化后再以手性气相色谱法测定［8］，同时拆分并测定禾草灵和禾草灵酸对映体的报道则尚未见。

本研究采用手性液相色谱法同时拆分禾草灵和禾草灵酸的对映体，讨论了流动相中异丙醇和乙酸添加量、柱温等对对映体分离的影响，用所建立的方法测定了水中禾草灵和禾草灵酸的对映体。

2 实验部分2.1 仪器和试剂LC-2000高效液相色谱系统（日本JASCO 公司），配备PU-2089四元梯度泵，AS-2055自动进样器，CO-2065柱温控制系统，FP-2020荧光检测器，LC-Net Ⅱ/ADC 数据采集器和ChromPass 色谱工作站。

外消旋的禾草灵标样（纯度>98%，宁波捷马化工有限公司），使用前过柱纯化；外消旋的禾草灵酸标样（纯度>98%，制备方法参见文献［9］），富S -禾草灵、富R -禾草灵、富S -禾草灵酸和富R -禾草灵酸第34卷2006年5月分析化学（FENXI HUAXUE ）研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry第5期613～616参考样（手性合成制备，产物经LC-MS和NMR确认，纯度>94%）；实验所用上述样品的标准溶液以正已烷/异丙醇（90:10，V/V）配制或稀释；异丙醇、正已烷（色谱纯，美国Tedia公司）；乙醚（色谱纯，天津市四友生物医学技术有限公司）；冰乙酸（分析纯，杭州大方化学试剂厂）；盐酸、无水硫酸钠（分析纯，上海化学试剂公司）。

2.2 HPLC操作参数CHIRALCEL OJ-H正相手性色谱柱（日本Daicel化学工业公司），25cm×4.6mm（i.d.），粒径5µm；流动相流速0.5mL/min；进样量20.0µL；禾草灵和禾草灵酸的荧光光谱基本相近，实验确定最大激发波长（λex ）和发射波长（λem）分别为298和350nm；实验参数优化部分所用的禾草灵和禾草灵酸皆为外消旋体标准溶液，浓度均为10.0mg/L；其余参数根据实验优化结果而定。

2.3 水样的预处理用10%HCl调水样的pH值约为4，取100mL水样于250mL分液漏斗中，30mL乙醚分3次萃取，合并有机相。

有机相经盛有无水Na2SO4的漏斗过滤并脱水干燥，收集滤液于K-D瓶中，在40℃水浴中用N2吹脱溶剂，浓缩至近干，用正已烷/异丙醇（90:10，V/V）定容至1.0mL。

3 结果与讨论3.1 流动相中异丙醇添加量的影响不同比例的正已烷/异丙醇对禾草灵和禾草灵酸对映体的分离效果列于表1。

由表1可见，流动相不添加异丙醇时，禾草灵的两个对映体可达到基线分离（分离度Rs>2），而禾草酸对映体未出峰，这可能是由于禾草酸是一种弱酸（p K a=3.43），极性相对较强，与固定相的作用力较大，添加了0.2%乙酸的正已烷流动相极性较弱仍不能将其洗脱。

异丙醇含量在5%到15%之间时，禾草灵或禾草灵酸的对映体均可得到基线分离；但异丙醇含量为5%时，禾草灵酸对映体的洗脱时间都在禾草灵对映体之后，而且禾草灵酸后洗脱的对映体与禾草灵先洗脱的对映体没有达到基线分离（R's=1.17）。

异丙醇含量为10%或15%时，禾草灵和禾草酸的对映体可同时实现基线分离。

随着异丙醇添加量的增大，禾草灵酸和禾草灵对映体的容量因子（k）呈减小趋势，分离因子（α）基本保持不变。

综合考虑各对映体的分离效果与分析的时间，确定异丙醇添加量为10%。

表1 异丙醇含量对禾草灵酸和禾草灵对映体分离的影响Table1 Effect of isopropanol in mobile phase on the enantioseparation of rac-diclofop acid and rac-diclofop methyl禾草灵酸Diclofop acid正己烷/异丙醇Hexane/isopropanol（V/V）k'1k'2αR s R's禾草灵酸Diclofop acid正己烷/异丙醇Hexane/isopropanol（V/V）k'1k'2αR s R's100/0-----100/0 3.84 4.47 1.16 2.76-95/5 4.66 5.73 1.23 4.99 1.1795/5 3.80 4.40 1.16 2.69 1.17 90/10 2.18 2.71 1.25 3.05 5.4990/10 3.78 4.35 1.15 2.63 5.49 85/15 1.46 1.80 1.23 2.408.0585/15 3.09 3.52 1.14 2.408.05流动相中乙酸的添加量（the added amount of acetic acid in mobile phase）：0.2%；柱温（coulumn teperature）：20℃；Rˊs为禾草灵酸和禾草灵洗脱时间相临的对映体的分离度（R'swas resolution of the two near enantiomers of rac-diclofop methyl and rac-diclofop acid）；“-”：表示对应的参数无法计算（the parameters that coluld not be determined）。

3.2 流动相中乙酸添加量的影响禾草灵酸是一种弱酸，HPLC分析时在流动相中加入一定量的酸可以减少色谱峰的拖尾并增加对称度。

添加的酸一般为乙酸或三氟乙酸，本实验采用乙酸。

流动相中乙酸添加量对禾草灵和禾草酸对映体分离的影响列于表2。

当流动相中不添加乙酸时，禾草灵的两个对映体可以达到基线分离，但禾草酸对映体不出峰。

流动相中乙酸添加量在0.1%～1.0%之间时，禾草灵和禾草酸的对映体可同时实现基线分离。

为获得最好的分离效果，并尽量减少乙酸的添加量，乙酸的添加量以0.2%为宜。

3.3 柱温的影响温度对禾草灵和禾草灵酸各对映体Rs的影响列于表3。

由表3可见，升高温度对禾草灵酸对映体416分析化学第34卷的分离影响较小；但对禾草灵对映体的影响较大，T+30℃时，禾草灵的两个对映体未能实现基线分离；但在15～25℃温度范围时，禾草灵酸和禾草灵的对映体可同时实现基线分离。

考虑到一般的液相色谱系统不配备柱温控制系统，故选择20℃进行其余实验。

表2 流动相中乙酸添加量对禾草灵酸和禾草灵对映体分离的影响Table2 Effect of added amount of acetic acid on the enantioseparation of rac-diclofop acid and rac-diclofop methyl禾草灵酸Diclofop acid乙酸添加量Percent of acetic acid （%）k'1k'2αR s R's禾草灵酸Diclofop acid乙酸添加量Percent ofacetic acid（%）k'1k'2αR s R's0.0-----0.0 4.11 4.64 1.13 2.13-0.1 2.28 2.86 1.25 3.03 5.190.1 3.97 4.53 1.14 2.33 5.190.2 2.18 2.71 1.25 3.05 5.490.2 3.78 4.35 1.15 2.63 5.490.6 1.96 2.41 1.23 3.01 4.930.6 3.23 3.80 1.18 2.96 4.931.0 1.732.11 1.22 2.15 4.21 1.0 2.713.24 1.20 3.314.21注（note）：流动相中异丙醇的添加量为10%，柱温为20℃（the added amount of isoprpanol in mobile phase was10%and the column tem-perature was20℃）。

表3 T对禾草灵和禾草灵酸各对映体Rs的影响Table3 Effect of column temperature on the resolution of enantiomers of rac-diclofop acid and rac-diclofop methyl温度（℃）Temperature R s1R s2R's温度（℃）TemperatureR s1R s2R's温度（℃）TemperatureR s1R s2R's5 3.39 3.667.0225 3.13 2.29 5.5035 2.12 1.34 3.0920 3.05 2.63 5.4930 2.76 1.58 4.1240 2.49 1.07 2.63注（note）：表中R s1和R s2分别为禾草灵酸和禾草灵各自一对对映体的分离度，R'3同表1（R s1and R s2were the resolutions of two enanti-omers of rac-diclofop acid and rac-diclofop methyl，respectively.R's was the same as that in Table1）。