荧光偏振技术原理课件

合集下载

荧光偏振技术介绍

荧光偏振技术介绍

62原理:当荧光分子受平面偏振光激发时,如果分子在受激发时期(对于荧光素约持续 4纳秒)保持静止,发射光将位于同样的偏振平面。

如果在受激发时期,分子旋转或翻转偏离这一平面,发射光将位于与激发光不同的偏振面。

如果用垂直的偏振光激发荧光素,可以在垂直的和水平的偏振平面检测发射光光强(发射光从垂直平面偏向水平平面的程度与荧光素标记的分子的迁移率有关)。

如果分子很大,激发时发生的运动极小,发射光偏振程度较高。

如果分子小, 分子旋转或翻转速度快,发射光相对于激发光平面将去偏振化。

如图2.图2 荧光偏振检测原理任何物质都处于不断运动当中,液态环境中的荧光分子也不例外。

因此当受到偏振光激发时,荧光分子的运动状态例如旋转、翻转、相互结合、排斥、溶液的粘度、温度等这些因素都有可能对这个荧光因子受激发后发出的偏振光的性质产生影响。

对此进行分析比较,有可能揭开物质活动的内在规律,达到研究目的,“荧光偏振”。

近年来,以这种物理学现象为基础的技术在生命科学研究的多个领域中扮演着越来越重要的角色。

因此,我们可以看到,以荧光偏振为基础发展的技术可用来研究生命科学中分子之间的相互作用,以及分子与所处环境——“小”至核酸和蛋白结构,“大”至整个细胞——的相互作用。

相对于传统研究方法,荧光偏振技术在溶液中进行,可最大程度的模拟真实生命环境;利用它,可以实时跟踪监测分子间结合/分离的变化,并解决一直以来困扰荧光技术使用者们对于荧光无法定量的烦恼。

最为重要的是,相对于一直被人们使用的放射性同位素研究方法,它更为安全可靠,不会在实验过程中对研究者造成威胁,也不会产生难以处理的具有放射性的废弃物。

此外,荧光偏振所需的样品量少,灵敏度高,重复性好,操作简便。

概述光由微小的波构成,光波可以在任何一个平面上均匀的振动。

当其通过某些平面时,有可能因受到平面的作用将光波的能量分成不均匀的光束,振动平面也就发生了变化,可能在某一个方向的振动强或弱于其他平面,这种光称为偏振光。

荧光偏振技术介绍

荧光偏振技术介绍

62原理:当荧光分子受平面偏振光激发时,如果分子在受激发时期(对于荧光素约持续 4纳秒)保持静止,发射光将位于同样的偏振平面。

如果在受激发时期,分子旋转或翻转偏离这一平面,发射光将位于与激发光不同的偏振面。

如果用垂直的偏振光激发荧光素,可以在垂直的和水平的偏振平面检测发射光光强(发射光从垂直平面偏向水平平面的程度与荧光素标记的分子的迁移率有关)。

如果分子很大,激发时发生的运动极小,发射光偏振程度较高。

如果分子小, 分子旋转或翻转速度快,发射光相对于激发光平面将去偏振化。

如图2.图2 荧光偏振检测原理任何物质都处于不断运动当中,液态环境中的荧光分子也不例外。

因此当受到偏振光激发时,荧光分子的运动状态例如旋转、翻转、相互结合、排斥、溶液的粘度、温度等这些因素都有可能对这个荧光因子受激发后发出的偏振光的性质产生影响。

对此进行分析比较,有可能揭开物质活动的内在规律,达到研究目的,“荧光偏振”。

近年来,以这种物理学现象为基础的技术在生命科学研究的多个领域中扮演着越来越重要的角色。

因此,我们可以看到,以荧光偏振为基础发展的技术可用来研究生命科学中分子之间的相互作用,以及分子与所处环境——“小”至核酸和蛋白结构,“大”至整个细胞——的相互作用。

相对于传统研究方法,荧光偏振技术在溶液中进行,可最大程度的模拟真实生命环境;利用它,可以实时跟踪监测分子间结合/分离的变化,并解决一直以来困扰荧光技术使用者们对于荧光无法定量的烦恼。

最为重要的是,相对于一直被人们使用的放射性同位素研究方法,它更为安全可靠,不会在实验过程中对研究者造成威胁,也不会产生难以处理的具有放射性的废弃物。

此外,荧光偏振所需的样品量少,灵敏度高,重复性好,操作简便。

概述光由微小的波构成,光波可以在任何一个平面上均匀的振动。

当其通过某些平面时,有可能因受到平面的作用将光波的能量分成不均匀的光束,振动平面也就发生了变化,可能在某一个方向的振动强或弱于其他平面,这种光称为偏振光。

偏振荧光光谱原理

偏振荧光光谱原理

偏振荧光光谱原理偏振荧光光谱原理详解引言:偏振荧光光谱是一种重要的技术手段,广泛应用于化学、物理、生物学等多个领域。

通过对荧光信号的偏振特性进行测量和分析,可以揭示物质的结构、动态行为以及与周围环境的相互作用。

本文将为您详细介绍偏振荧光光谱的原理和分析步骤。

第一部分:偏振荧光的基础知识1. 光的偏振性光是一种电磁波,其电场分量在空间中垂直传播方向的方向不同,可分为无偏振光、线偏振光和圆偏振光。

线偏振光具有固定的电场振动方向,而圆偏振光的电场振动方向沿着垂直传播方向旋转。

2. 荧光光谱荧光是一种物质在受到能量激发后,从高能级跃迁到低能级时放出的光。

荧光光谱是荧光的波长分布,通常可由荧光光谱仪进行测量和记录。

第二部分:偏振荧光光谱的原理1. 偏振效应原理偏振荧光光谱的原理基于荧光分子在激发和发射过程中发生的偏振效应。

激发光通常是无偏振光,而发射光的偏振状态与激发光的偏振状态有关。

通过测量和分析荧光分子产生的线偏振光的偏振特性,可以获得物质的结构和动态信息。

2. 偏振荧光的产生机制荧光分子在受到激发后,电子从基态跃迁到激发态,并在激发态停留一段时间。

在这个过程中,荧光分子与周围环境(如溶液、固体等)的相互作用引起偏振效应。

这些相互作用包括取向效应、共振能量传输效应和旋转扭转效应。

3. 偏振荧光的测量与分析为了获得物质的结构和动态信息,我们需要通过测量荧光的偏振特性。

为此,我们可以使用偏振荧光光谱仪进行实验。

该仪器可以通过包括偏振片和分光器在内的光学元件,对荧光信号的偏振度进行测量和分析。

第三部分:偏振荧光光谱的应用1. 蛋白质结构分析偏振荧光光谱可用于研究蛋白质的构象和动态行为。

通过测量和分析荧光蛋白质的偏振特性,可以揭示其分子结构和溶剂化特性。

2. 荧光标记探针偏振荧光光谱可用于研究荧光标记探针和生物分子的相互作用。

通过测量和分析探针的偏振特性变化,可以揭示探针与靶分子之间的结合方式和状况。

3. 材料科学研究偏振荧光光谱在材料科学研究中也有重要应用。

荧光偏振免疫分析PPT

荧光偏振免疫分析PPT
应用Bio-Kine 软件(Bio-Logic)通过两个散射
组蛋白对DNA荧光偏振度影响
• 3. DNA-组蛋白复合体荧光偏振度随组蛋白与DNA 浓 度比变化关系曲线
组蛋白对DNA荧光偏振度影响
• 4. 对图表的解释:
在溶液中单独存在时, DNA分子随机卷曲 且有弹性此构型对应着一定的偏振度值. 在我们的实验条件下, DNA 分子的荧光 偏振度在0.11左右;
• 2.FPIA易受样本基质(如与基质蛋白的非 特异性结合),背景荧光和光散射的影响。
• 3.FPIA的检测信号的背景较高,检测范围 (窗口)较窄,信噪比(S/N)较低。
• 4. FPIA对荧光标记物的纯度要求较高,需
对本实验室研究的思考
• 当研究对象为与核酸(DNA/RNA)互作的蛋 白时,可以在核酸的末端加上一个荧光标 签,研究二者之间的结合关系,包括结合常数, 动力学白分子可能呈现更紧密、更小 的构型, 导致复合体分子
荧光偏振研究的一般步骤
• 1.确定最佳的荧光标记物;
• 2.确定公式中的各种参数;
• 3.倍比稀释结合物,根据不同的FP值确定 最优稀释比,使其结合能力与FP值成线性 关系;
• 4.建立标准曲线;
• 而待测样本中竞 争抗原的浓度增 加时,荧光标记抗
• FPIA是均相的 竞争免疫分析方 法,反应完全在 溶液系统中,不 需要分离结合的 和未结合的抗体。
• 实验操作过程非 常简单,仅仅是 将抗体,荧光标
组蛋白对DNA荧光偏振度影响
• 1. 制备DNA-组蛋白复合体:
λ-DNA(48kbp)用荧光染料YOYO-1标记, 碱基对与染料分子之比为10:1;
荧光偏振免疫分析的优点
• 1.均相系统,不需要洗涤操作,可大大减少试剂 的用量。

荧光偏振分析方法

荧光偏振分析方法

02
通过实时监测荧光标记信号分 子的偏振状态,可揭示信号传 导过程中的分子事件和调控机 制。
03
荧光偏振技术还可用于研究细 胞间信号传导和细胞通讯过程 ,为理解细胞行为和生理功能 提供新的视角。
04
荧光偏振在材料科
学中应用
高分子材料结构与性能关系研究
荧光偏振用于研究高分子 链构象
通过荧光偏振技术可以观察高分子链在不同 条件下的构象变化,进而理解其物理性质和 化学性质。
数据处理
对采集到的数据进行处理和分析, 包括数据清洗、归一化、统计分 析等步骤,以提取有用的信息并 得出结论。
结果展示
将处理后的数据以图表、图像等 形式展示出来,以便更直观地理 解和解释实验结果。
03
荧光偏振在生物医
学领域应用
药物筛选与评估
1
荧光偏振技术可用于高通量药物筛选,通过测量 荧光标记药物与靶标结合后的偏振变化,快速识 别潜在活性化合物。
THANKS
感谢您的观看
荧光偏振分析方法
目录
CONTENTS
• 荧光偏振原理及基本概念 • 荧光偏振实验技术与方法 • 荧光偏振在生物医学领域应用 • 荧光偏振在材料科学中应用 • 荧光偏振在环境监测领域应用 • 荧光偏振技术发展趋势与挑战
01
荧光偏振原理及基
本概念
荧光产生与发射过程
荧光物质吸收光能
荧光物质在受到特定波长的光照射时,会吸收光能并激发电子从 基态跃迁到激发态。
01
利用荧光偏振技术可以快速筛选具有特定功能的材料,如发光
材料、光电材料等。
荧光偏振用于功能材料性能优化
02
通过荧光偏振技术可以研究功能材料的性能与结构之间的关系,

荧光偏振技术原理

荧光偏振技术原理

荧光偏振
(Fluorescence Polarization,FP)
1926年Perrin首次在研究论文中描述他所观察到的荧光偏振现象。
如果被激发的荧光物质处于静止状态,该物质仍将保持原有激发光的偏振性; 如果被激发的荧光物质处于运动状态,该物质发出的偏振光将区别于原有激发
光的偏振特性,也就是所谓的荧光去偏振现象。
MAP探针
Angew. Chem. Int. Ed. 2008, 47, 8386-8389.
§2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
汞离子检测荧光偏振探针检测限达到0.2 ppb ,比传统荧光偏振方法提高2个数量级,检测 时间只需20分钟,具有良好的特异性
AuNP hancement
AuNP-DNA System 0.2 ppb
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
多元检测方法
5. 小分子分析
Chem. Commun. 2012, 48, 10004–10006.
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
传统荧光偏振分析技术面临的挑战: 荧光偏振变化量较小,灵敏度较低
解决的方案
1 1 ( 1 1)(1 RT ) P 3 P0 3 V
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 常用的测试仪器及配件
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 国内外研究现状及发展动态分析
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
1. 荧光偏振免疫分析
荧光偏振免疫分析法 (fluorescence polarization immunoassay,FPIA) 是一种定量免疫分析技术。
§2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
纳米材料的生物功能化方法
非共价功能化途径
静电相互作用 π-π堆积作用 范德华力

荧光偏振免疫测定原理

荧光偏振免疫测定原理

荧光偏振免疫测定原理荧光偏振免疫测定是一种高灵敏度、高选择性的生物分析技术,被广泛应用于医学、生物学和环境监测等领域。

该技术的原理基于免疫反应和荧光偏振现象,通过对待测物体系中特定分子的选择性捕获和荧光信号检测,实现对目标物质的快速、准确测定。

荧光偏振免疫测定的原理可分为三个关键步骤:免疫反应、荧光标记和偏振信号检测。

首先,免疫反应是荧光偏振免疫测定的基础。

它依赖于抗原与抗体之间的高度特异性结合。

抗原是待测物体系中所含有的分析目标,抗体则是针对特定抗原的免疫分子。

在荧光偏振免疫测定中,抗原首先被固定在试验平台上,形成固相。

然后,待测样品中的抗原与试验平台上的抗体进行结合反应。

这种特异性结合反应仅发生在目标物质存在的情况下,因此可以使用免疫反应来筛选目标物质并排除其他干扰物质。

接下来,荧光标记是实现荧光信号检测的关键步骤。

它利用特定的荧光染料或荧光颗粒,将其标记在反应中与目标物质结合的抗体或其他特定分子上。

这些荧光标记物可以发射特定波长的荧光信号,并具有较长的发光寿命。

荧光标记物的选择应考虑到其荧光性能,例如荧光量子产率和发射波长尽可能远离样品中其他自发荧光的波长,以避免干扰信号。

荧光标记物的引入使得待测物体系具有荧光特性,从而可以通过检测荧光信号来实现分析和测定。

最后,偏振信号检测是荧光偏振免疫测定的核心。

它利用了光波振动方向的偏振特性。

在荧光偏振免疫测定中,通过选择适当的偏振器和荧光探测器,可以将荧光信号从样品中提取出来,并测量相对应的荧光偏振参数。

荧光偏振参数是由样品中荧光分子的取向、偏振或了解以及其与固相之间的相互作用所决定的。

这些参数可以提供关于待测物体系中分子间相互作用的信息,因此能够准确测定特定目标物质的含量。

总之,荧光偏振免疫测定通过免疫反应、荧光标记和偏振信号检测等关键步骤,实现对目标物质的高灵敏度、高选择性测定。

这种技术不仅具有广泛的应用前景,而且对于生物医学研究和临床诊断具有重要意义,能够帮助人们更好地理解分子间的相互作用以及其在生物体系中的功能和调控机制。

荧光偏振免疫分析ppt课件

荧光偏振免疫分析ppt课件
荧光偏振免疫分析的优点
1.均相系统,不需要洗涤操作,可大大减少试剂的用量。
2.检测速度很快,且易于自动化,适于快速的筛选检测。
3.荧光标记抗原的均一性好,性质稳定,可长期保存,方法的重现性好。
4.FP值是一个比值,与其他荧光检测技术相比,不易受溶液颜色和仪器灵 敏度变化的影响,实验结果稳定,可靠性高。
荧光偏振免疫分析的缺点
1. FPIA比ELISA方法的灵敏度低。一般来说FPIA的检测限为 0.1-10ng/mL-1左右。
2.FPIA易受样本基质(如与基质蛋白的非特异性结合),背景荧光 和光散射的影响。
3.FPIA的检测信号的背景较高,检测范围(窗口)较窄,信噪比 (S/N)较低。
4. FPIA对荧光标记物的纯度要求较高,需耍较复杂的纯化步骤。
认识到了贫困户贫困的根Байду номын сангаас原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“精 准扶贫 ”项目
组蛋白对DNA荧光偏振度影响
2.荧光偏振度测量:
用MOS-450/CD测量,其是一个标准的荧光偏振度测量模式;
在测量荧光偏振度时, 偏振光弹性调制器自动设置在半波长模 式, 这样激发光在水平分量和垂直分量之间以100 kHz 的频率转换;
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“精 准扶贫 ”项目
组蛋白对DNA荧光偏振度影响
4. 对图表的解释:
在溶液中单独存在时, DNA分子随机卷曲且有弹性此构型对应着 一定的偏振度值.在我们的实验条件下, DNA 分子的荧光偏振 度在0.11左右;
认识到了贫困户贫困的根本原因,才 能开始 对症下 药,然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视, 已经展 开了“精 准扶贫 ”项目

荧光偏振技术原理PPT

荧光偏振技术原理PPT
荧光偏振技术原理与 仪器及其应用
回目录
荧光偏振技术原理与仪器及其应用
1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
回目录
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
非偏振光原理图
光的偏振性
自然光在各个方向 振动是均匀分布的
偏振光原理图
一束光线都在同一 方向上振动
回目录
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
§2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
纳米二氧化硅颗粒增强荧光偏振探针
Chem. Commun. 2012, 48, 7480-7482.
回目录
§2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
核酸酶检测及药物筛选
Chem. Commun. 2011, 47, 4763-4765.
回目录
§2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
T4 polynucleotide kinase activity B, 2013, 1, 2018-2021.
回目录
§2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
聚乙烯纳米颗粒增强荧光偏振信号放大分析方法
Chem. Asian J. 2014, 9, 2755-2760.
20世纪80年代,随着荧光探针和荧光偏振分析仪器商业化,荧光偏振技术在 生命科学等各个领域扮演越来越重要的角色。
回目录
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
荧光偏振分析的一般步骤
• 利用荧光偏振的原理,通过检测荧光素标记的小分子与其它分子相互作用前 后分子量的变化,计算水平方向及垂直方向的荧光值作相关分析。
Anal. Bioanal. Chem. 2011, 401, 3229-3234.
回目录
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述

荧光偏振免疫测定的原理

荧光偏振免疫测定的原理

荧光偏振免疫测定的原理
荧光物质经单一平面的偏振光蓝光(波长485nm)照射后,可吸收光能跃入激发态;在恢复至基态时,释放能量并发出单一平面的偏振荧光(波长525nm)。

偏振荧光的强度与荧光物质受激发时分子转动的速度成反比。

大分子物质旋转慢,发出的偏振荧光强;小分子物质旋转快,其偏振荧光弱。

利用这一现象建立了荧光偏振免疫测定,用于小分子物质特别是药物的测定。

FPIA的试剂为荧光素标记的药物和抗药物的抗体,模式为均相竞争法,标本中的药物与荧光标记的药物与一定量的抗体竞争结合。

反应平衡后,与抗体结合的荧光标记药物的量与标本中药物浓度的量呈反比。

由于抗体的分子量远大于药物的分子量,游离的荧光标记药物与结合抗体的荧光标记药物所产生的偏振荧光强度相差甚远。

因此在F PIA中测定的偏振荧光强度与标本中药物的浓度呈反比。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
荧光偏振技术原理与 仪器及其应用
学习交流PPT
1
荧光偏振技术原理与仪器及其应用
1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用
学习交流PPT
2
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
非偏振光原理图
光的偏振性
自然光在各个方向 振动是均匀分布的
偏振光原理图
一束光线都在同一 方向上振动
偏振值的影响参数
Hale Waihona Puke ➢ 分子的偏振性与分子旋转弛豫时间成比例,分子旋转弛豫时间是分子转过 68.5度角时所用的时间;
➢ 分子旋转弛豫时间与介质黏度、绝对温度、分子体积和分子重量和气体常 数有关。
P 11 3(P 10 1 3)1(V RT )
偏振值衡量荧光分子的运动性
学习交流PPT
6
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
学习交流PPT
3
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
荧光偏振
(Fluorescence Polarization,FP)
1926年Perrin首次在研究论文中描述他所观察到的荧光偏振现象。
如果被激发的荧光物质处于静止状态,该物质仍将保持原有激发光的偏振性; 如果被激发的荧光物质处于运动状态,该物质发出的偏振光将区别于原有激发
• 如果被检测分子大,激发时运动慢,测得的荧光偏振光值高。如果分子小, 分子旋转或翻转速度快,发射光相对于激发光平面将去偏振化,测得的偏振 光值低,从而计算出样品的偏振值(偏振值单位 mP)。
• 通过专用分析软件,可对检测结果进行分析,判别等工作。
荧光偏振技术的优势:
荧光偏振技术比研究蛋白质与核酸结合的传统方法具有更多优势 (特别是
核酸适配体 (aptamer) 是通过SELEX技术筛选得到的能与蛋白质、小分子、 金属离子等靶标结合的寡核苷酸序列,由于其易合成和修饰、稳定性好、成 本低,已广泛应用于分析应用领域
传统分子量依赖性FA用于研究蛋白质-核酸相互作用的原理
Biosens. Bioelectro学n习. 交2流01PP2T, 32, 148-154.
传统荧光偏振分析技术面临的挑战: 荧光偏振变化量较小,灵敏度较低
解决的方案 ?
P 11 3(P 10 1 3)1(V RT )
MAP探针 (Mass Amplifying Probe)
学习交流PPT
19
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
➢ 小分子检测
蛋白质增强荧光偏振
凝血酶 (thrombin)
磷酸二酯酶I介导的荧光偏振传感平台
Anal. Bioanal. Chem学. 习20交1流1P,P4T01, 3229-3234.
17
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
多元检测方法
5. 小分子分析
Chem. Commun. 20学1习2交, 4流8P,PT10004–10006.
18
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
Chem. Rev. 2010学, 习11交0流, P2P6T 85-2708.
15
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
5. 小分子分析
非竞争法检测小分子化合物
空间构象变化
Anal. Chem. 200学9习, 8交1流, P7P4T68-7473.
16
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
5. 小分子分析
21
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
12
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
超灵敏检测DNA
3. 核酸分析
改进传统的荧光偏振检测方 法,通过引入酶促反应扩增检测 信号应用于超灵敏检测特异性 DNA的检测。
Chem. Commun学. 习20交1流1P,P4T7, 3478-3480.
13
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
3. 核酸分析
20世纪50年代Weber进一步拓展了荧光偏振理论并首次将荧光偏振用于生化 分析领域。
20世纪80年代,随着荧光探针和荧光偏振分析仪器商业化,荧光偏振技术在 生命科学等各个领域扮演越来越重要的角色。
学习交流PPT
7
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
荧光偏振分析的一般步骤
• 利用荧光偏振的原理,通过检测荧光素标记的小分子与其它分子相互作用前 后分子量的变化,计算水平方向及垂直方向的荧光值作相关分析。
实时监测DNA双链的形成和解链过程
Nucleic Acids Re学s习. 2交0流0P3P,T 31: e70.
14
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
4. 水解酶催化反应
实时监测蛋白酶催化过程
• 蛋白酶对机体的新陈代谢 和生物调控起到非常重要 的作用;
• 蛋白酶酶活的评估有助于 理解特定的生化途径、开 发治疗药物。
学习交流PPT
10
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
1. 荧光偏振免疫分析
荧光偏振免疫分析法 (fluorescence polarization immunoassay,FPIA) 是一种定量免疫分析技术。
荧光偏振免学习疫交分流析PP原T 理
11
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
2. 蛋白质-核酸相互作用
不生成有害的放射性废物) 并且检测限更低,可达亚纳摩尔级范围。此外荧光
偏振是真正均相的,允许实时检测 (动力学检测),对于浓度变化不敏感,是均
相检测形式 (中间不含洗涤步骤 ) 的最佳解决方案。
学习交流PPT
8
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 常用的测试仪器及配件
学习交流PPT
9
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 国内外研究现状及发展动态分析
Anal. Chem. 20学12习,交8流4P, P5T535-5541.
20
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
➢ 离子检测
特殊结构核酸增强荧光偏振
K+的作用
一. 调节机体和细胞的渗透压 二. 调节体液的酸碱平衡 三. 参与体内蛋白质和糖类的代谢 四. 维持正常的神经兴奋性和心肌运动
Analyst, 2012, 1学3习7交, 2流7P7PT0-2773.
光的偏振特性,也就是所谓的荧光去偏振现象。
Polarized excitation
100% 0%
学习交流PPT
<100%
>0%
4
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
如何衡量:偏振值的定义
P= +
偏振值一般以mP(毫偏)来表示
对于完全偏振发射,P = 1;对于自然光,P = 0
学习交流PPT
5
§1 传统荧光偏振技术及发展情况概述
相关文档
最新文档