高效液相色谱法测定烟草和棉花中生长素含量

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【论文】高效液相色谱法检测植物激素方法的建立

摘要植物激素是植物体内合成的对植物生长发育有显著作用的几类微量有机物质。

也被称为植物天然激素或植物内源激素。

它们在细胞分裂与伸长、组织与器官分化、开花与结实、成熟与衰老、休眠与萌发以及离体组织培养等方面，分别或相互协调地调控植物的生长、发育与分化。

由于它在植物体内含量甚微，一般水平为1000 ng/g鲜重，建立一种有效，简便的检测方法对于研究植物激素具有指导性意义。

目前植物激素的定性和定量分析主要以理化方法为主，理化测试法包括气相色谱法、液相色谱法、气象－质谱联用等。

本次研究是利用高效液相色谱法来检测植物体内的酸性激素，即吲哚乙酸IAA,吲哚三丁酸IBA，赤霉素GA3,以及脱落酸ABA。

以HPLC进行分析测试，非常适合用于分析那些不能汽化或者在易于裂解不稳定的物质，用HPLC分析植物激素（IAA、IBA、GA3、ABA），采用二极管阵列检测器检测，本次研究的前处理方法为固相萃取法。

通过本次实验，得到了一种简便易操作的前处理方法，找到了液相色谱的最佳工作条件，并通过检测实际样品，证明了该方法是一种有效可行的植物酸性激素的定性定量分析方法。

关键字：植物激素，提取，高效液相色谱。

AbstractPlant hormone is several kinds of trace of organic matter that synthesized in the plant,and it have significant effect on plant growth. They separately or coordinatively regulate of plant growth, development and differentiation. Because it is a trace contect in plants and general level, 1000 ng / g in fresh weight. Therefore, the establishment of an effective and simple detection method for the study of plant hormones is very significant.Present plant hormones qualitative and quantitative analysis mainly based on physical and chemical methods, physical and chemical testing methods including GC, HPLC, GC-MS.with high performance liquid chromatography, the acidic hormones of IAA, indole-3 butyric IBA, gibberellic acid GA3, and ABA in plants are detected. It is suitable for the analysis of those which do not vaporize easily at high temperatures by HPLC. Analysis of plant hormones (IAA, IBA, GA3, ABA), usually use UV monitor testing, and this study of pre-treatment method for solid phase extraction.A simple and easy pre-treatment methods was established, and found the best conditions for liquid chromatography.With detecting the actual samples, Iit shows that it is the feasible and effective method of the acidic hormones analysis .Key words: plant hormones, extraction, detection, HPLC.目录第一章前言 (1)1.1 植物激素的研究背景与意义 (1)1.2 植物激素的种类及性质 (1)1.2.1植物激素概述 (1)1.2.2植物激素——生长素 (2)1.2.3植物素——赤霉素 (3)1.2.4植物激素——细胞分裂素 (4)1.2.5植物激素——脱落酸 (4)1.2.6植物激素——乙烯 (4)1.3液相色谱法的研究 (5)1.3.1液相色谱仪 (5)1.3.2 液相色谱法的主要类型 (8)第二章实验材料与方法 (11)2.1仪器与试剂 (11)2.2 实验方法 (11)2.2.1 芽样品激素含量的测定 (12)2.2.2种子样品激素含量的测定 (12)2.2.3 C18柱系统的处理及使用（需临时处理） (12)2.2.4 高效液相色谱分析 (12)2.2.5溶液的配制 (13)2.2.6 标准曲线的测定 (14)2.2.7 稳定性实验 (15)2.2.8回收率的测定 (16)2.2.9 检出限的测定 (16)第三章实验结果与讨 (17)3.1标准曲线的绘制 (17)3.1.1 IAA标准曲线的绘制 (17)3.1.2 IBA标准曲线的绘制 (17)3.1.3 ABA标准曲线的绘制 (18)3.1.4 GA3标准曲线的绘制 (19)3.2稳定性实验 (20)3.3 实际样品激素含量测定 (21)3.4回收率的测定 (22)3.4.1 GA3回收率谱图 (22)3.4.2 IAA回收率谱图 (23)3.4.3 ABA回收率谱图 (24)3.4.4 IBA回收率谱图 (24)3.5 检出限的测定 (25)第四章结论 (27)参考文献 (28)致谢 (30)第一章前言1.1 植物激素的研究背景与意义植物激素是存在于植物体内的具有调节植物生长发育作用的微量元素。

_高效液相色谱测定多种植物内源激素方法研究

四川农业大学学报　1997年　15　(3):297—299J .Sichuan Agric.Univ. 1997-01-24收稿。

高效液相色谱测定多种植物内源激素方法研究谢　君 (四川农业大学分析测试中心/雅安市625014)摘要　研究高效液相色谱法测定赤霉素(GA 3)、3-吲哚乙酸(IAA )、脱落酸(ABA )、玉米素(ZT )和激动素(KT )等五种植物激素的条件;采用Spherso rbC 18柱,乙腈-甲醇-0.6%乙酸流动相,检测波长254nm;建立了一种从植物中提取五种激素的样品处理方法,实际分析了植物样。

关　键　词　植物激素[45N D,49LD]　高效液相色谱中图分类号　O657.72;Q946.885引　言植物内源激素的研究是植物生理学领域中的重要内容之一,植物的内源激素与植物生长发育的基本规律和代谢过程的调节控制都密切相关。

因此植物内源激素的准确测定,对植物生命活动和作物遗传育种栽培领域的研究具有重要的意义。

高效液相色谱(HPLC)是较理想的植物内源激素分析方法,由于在联合测定植物组织抽提液中的多种内源激素时,经常见到分离差、峰型不良及严重拖尾现象,因此选择合适的内源激素提取方法和色谱条件较为重要。

本研究采用反相HPLC 法探讨了GA 3、IAA 、ZT 和K T 等五种植物内源激素联合测定的色谱分析条件,并获得满意的分离结果。

有关HPLC 分析植物内源激素,多见于GA 3、IAA 、ABA 的联合测定[1-4],而五种激素的联合分析尚未见报道。

1实验部分1.1仪器与试剂日本岛津LC -6A HPLC 系统,包括LC-6A 高压溶剂输送泵;SPD-6AV 紫外可见检测器;LC-6A 系统控制器;C-R3A 色谱处理器;C TO-6A 柱温箱;旋转蒸发器;0.3μm 超微滤膜;萃取装置;直型层析柱等。

GA 3、IAA 、ABA 标准品均由FLUK A 公司提供;ZT 、K T 由中国科学院上海生物化学研究所提供;石油醚(30-60℃)、Ca-CO 3为优级纯;其它试剂均为分析纯;乙腈为色谱纯,甲醇为AR 重蒸;实验用水均为二次蒸馏水。

超高效液相色谱串联质谱测定蔬菜中23种植物生长调节剂残留

器，为
定多种性质不同的植物生长
提供的简单、快速、可靠、灵敏的 I
方法。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
XEVOTQS超高效液相色谱质谱联用仪购
自美国W A TERS公司，Milli-Q D irect8 超纯水
仪购自美国 M illipore公司，SK3 3 0 0 H P 超声波清
梁秀美，女，硕士，助理实验师，研究方向为农产品质量安全。E-mail:2463403806®qq. com
2期
张维一等：超高效液相色谱串联质谱测定蔬菜中 2 3 种植物生长调节剂残留
• 261 •
S 中图分类号 3
A 文献标志码
文章编号
1004-1389(2019)02-0260-07
植物生长调节剂是一类具有植物激素活性，
可影响植物生长发育的小分
物。这类化合
物在增强植物抗逆性、促进植物细胞分裂与生长、
提高产及改善品方
重要的作用，
因为高产优
相色谱一质谱法（GC-M S) 、高效液相色谱法
(H P L C )、液相色谱串联质谱法（LC-M S) 和离子
色谱法（I C ) 等[5-10]。
因其优异的
定性与定量性能
得到广用。而在蔬菜
u 中农药残留前处理方法上，近年来 Q EChERS
效农业的一项重要技术措
施，已在外得到广用[1—6]。

中国海洋大学生物化学B00-09真题及答案教学教材

中国海洋⼤学⽣物化学B00-09真题及答案教学教材中国海洋⼤学⽣物化学B00-09真题及答案2007年⼀、填空1、维⽣素A是（）类化合物，维⽣素C是（）类化合物，维⽣素D是（）类化合物2、⽣物合成所需要的能量主要是由三羧酸循环和氧化磷酸化产⽣，还原⼒主要是由（）途径产⽣。

3、肽和蛋⽩质的特征颜⾊反应是（）4、精氨酸的PK1（COOH）=2.17，PK2（NH3）=9.04，PK3（胍基）=12.8，则PI=（）5、真核细胞的核糖体是由（）S亚基和（）S亚基组成6、肌⾁细胞中（）和（）两种蛋⽩质承担收缩和运动的功能7、Pauling提出的蛋⽩质的α螺旋结构，每圈由（）个氨基酸组成，螺距是（）。

维系其结构的主要作⽤⼒是（）。

除此之外，蛋⽩质⼆级结构还有2中基本类型是（）和（）8、激酶是⼀种催化（）反应的酶9、黄胺类药物通过竞争性抑制微⽣物的（）合成途径中的关键限速酶发挥其抑菌的作⽤10、⼈体必须的脂肪酸包括亚油酸和（）两种11、肌体将⾮糖的⼩分⼦物质合成糖的过程称为（）12、真核细胞中，细胞的Na+离⼦浓度⽐细胞外（），K+离⼦浓度⽐细胞外（）13、⼀分⼦葡萄糖在肝脏完全氧化产⽣（）分⼦ATP，⼀分之软脂酸完全氧化产⽣（）分⼦ATP14、PCR扩增DNA的反应体系中除了DNA模板，四中dNTP外，还应加⼊（）和（）15、Southern blot , Northern blot , Western blot分别对（）、（）、（）的印记转移技术三、选择题1、α螺旋遇到（）氨基酸时会中断2、为了将核糖核酸酶充分变性，除了使⽤巯基⼄醇外还应使⽤（）3、在接近中性PH的条件下，下列那种氨基酸具有最⼤的酸碱缓冲当量（）A Lys（）（）B Glu（）（）C Arg（）（）D His4、蛋⽩质可被碱⽔解，该反应可⽤来定量蛋⽩质中的（）5、⽣理状态下，⾎红蛋⽩与氧可逆结合的铁处于（）价6、丝氨酸蛋⽩酶包括（）7、⽤凝胶过滤层析分离蛋⽩质时（）A 分⼦量⼤的先被洗脱（）（）B 分⼦量⼩的先被洗脱C 与树脂带同种电荷的先被洗脱（）（）D 与树脂带不同电荷的先被洗脱8、常⽤于多肽链N末端测定的试剂是（）9、丙⼆酸对琥珀酸脱氢酶的抑制属于（）10、染⾊体DNA主要采取（）构型11、蛋⽩质是在（）合成的12、酶的⽐活⼒表征酶的（）A 纯度（）B 量（）C 催化能⼒（）（）D 蛋⽩量13、凝⾎因⼦的合成依赖于维⽣素（）14、要把膜蛋⽩完整的从膜上解离下来，可以使⽤（）15、⽣物分解途径中（）作为氧化还原反应的主要辅酶16、2，4—⼆硝基苯酚是氧化磷酸化的（）17、⼤肠杆菌DNA复制中起主要作⽤的DNA聚合酶是（）18、（）的发现开启了基因体外操作的可能，基因⼯程应运⽽⽣19、极微量的激素可以产⽣⾮常显著的⽣理作⽤，是因为（）四、汉译英Trypsin（）ribozyme（）substrate（）peptide bond（）open reading frame （）helix（）CM—cellulose（）domain（）electrphoreses（）SDS—PAGE（）fattyacid（）glucose（）exon（）lipid（）protein（）conformation（）plasmid（）IEF（）transcription（）gluconeogensis五、简单题1、区分以下概念：超⼆级结构，结构域，模体（motif）和亚基2、酶不同于其他催化剂的关键特点是其可被精细调控，请从蛋⽩质结构和功能的关系的⾓度解释并说明各种酶活调控的⽅式的原理3、对化学偶联假说和构想偶联假说进⾏评价4、根据复制、转录、翻译过程的有关知识说明遗传信息在传递过程中有哪些机制保证了其保真性5、根据三打营养物质代谢有关知识评价观点：只要严格限制糖的摄⼊，可以放开吃⾼蛋⽩⾼脂肪的⾷品任然可以达到减肥的⽬的2006年⼀、填空1、维⽣素D可以通过⽪下的（）经紫外线照射转化⽽来，其功能是（）2、蛋⽩质的含氮量百分⽐为（）依据该含氮量数据进⾏蛋⽩质含量测定的⽅法称为（）3、1926年sumner从⼑⾖中得到了（）酶结晶，从⽽第⼀次证明了酶的蛋⽩质本质4、磺胺类药物通过对（）酶竞争性抑制达到抑菌效果5、蛋⽩质⼆级结构的三种基本类型是（）、（）、（）6、脂肪酸再肝脏中初步氧化形成（）、（）、（）等产物称为酮体，酮体是肝脏运输能量的⼀种⽅式7、⼤肠杆菌启动⼦包含有（）、（）等关键元件8、DNA聚合酶1是DNA损伤修复过程中的关键酶，它具有（）、（）以及3’—5’外切等三种活性9、1分⼦的硬脂酸再线粒体经过（）次β氧化⽣成（）分⼦⼄酰辅酶A和（）对氢离⼦，⽣成的⼄酰辅酶A进⼊（）途径氧化⽣成⼆氧化碳并⽣成⼤量还原⼒，最终通过氧化磷酸化途径将还原⼒氧化三、名词解释Base pair（） restriction map（） hydrophilic（） DNA polymerase（）Edman degradation（） feedback inhibition（）glycoprotein（） dialysis （） endnuclease（） cloning vectors（） glucose（） domain（）Okazaki fragment（）collagen（） degeneracy（） electron transport（）covalent catalysis（） chemiosmotic coupling（） alpha-helix（） promoter （） chain-termination method（） oxidative phoshorylation（） proofreading （） exon（） sedimentation equilibrium（） polyribosome（） citric acid cycle（） fluid-mosaic model（） conformation（） nucleic acid（）四、名词解释PI（）蛋⽩聚糖（）⽣酮氨基酸（）酶活⼒单位（） PCR（） SDS-PAGE（）氧化磷酸化（）蛋⽩质组（）⼀碳单位（）岗崎⽚段（）别够效应（） G蛋⽩（） Na+-K+ATP酶（） motif（）质粒（）五、问答题1、以从猪肝中提取SOD酶为例，说明蛋⽩质分离纯化的⼀般原则和步骤2、结合丝氨酸蛋⽩酶的结构和功能特征，论述蛋⽩质结构和功能的关系3、解释氧化磷酸化偶联假说主要有哪些，并评价4、描述细菌乳糖操纵⼦调控基因表达的机制5、写出葡萄糖有氧氧化的关键调控步骤和氧化还原步骤，在次基础上计算以分⼦葡萄糖可产⽣多少ATP2005年⼀、填空题1、糖原合成酶可以催化（）糖苷键的⽣成2、糖酵解发⽣在细胞的（）限速步骤是（）三羧酸循环发⽣在细胞的（）限速步骤是（）唯⼀⼀步底物⽔平磷酸化是（）3、⽶⽒⽅程是（）竞争性抑制使Km（）4、氨基酸碳⾻架通过延胡索酸、⼄酰辅酶A、草酰⼄酸、（）和（）进⼊三羧酸循环5、真核细胞的mRNA5’往往有（）6、中英互译：Ala（）hnRNA（）核酶（）PAGE（）⼆、名词解释1、福林—酚反应（）2、⽆规则卷曲（）3、盐溶（）4、Z—DNA（）5、⽐活⼒（）6、Cori循环（）7、丙氨酸—葡萄糖循环（）8、外显⼦（）9、rRNA（）10、终⽌⼦（）11、HIV（）12、脂质体（）13、⼄醛酸循环（）14、反义链（）15、拓扑异构酶（）16、滞后链（）17、⼀碳单位（）18、磷酸戊糖途径（）19、别构酶（）20、脂多糖（）三、简答题1、说明酮体的合成与分解途径，⽣理意义及何种病理情况下酮体合成增加，对机体的影响2、说明氧化磷酸化的结构基础及有关解释其机理的假说，你认为每种假说的优缺点是什么3、蛋⽩质分离纯化的⼀般原则和⽅法4、⽐较说明软脂酸的氧化和合成途径5、叙述多肽合成后的加⼯和运输过程2004年⼀、填空题1、中英互译：凝胶电泳（）⾼效液相⾊谱（）核内⼩RNA（）聚合酶链式反应（）联酶免疫吸附测定（）proteome（）Leu（）dG（）NMR （）SOD（）2、细胞溶胶内的NADH通过（）穿梭途径或（）穿梭途径进⼊线粒体3、对于纯的RNA，A260为1相当于每毫升（）微克4、糖酵解、三羧酸循环和酮体合成的限速酶分别是（）、（）和（）三、选择题1、γ—氨基丁酸来源于（）2、Tm越⾼的DNA分⼦，其（）3、在离体肝线粒体悬液中加⼊氰化物，则1分⼦β—羟丁酸的P/O⽐值为（）4、肝外组织氧化利⽤酮体的酶主要在于（）5、肌糖原分解不能直接补充⾎糖的原因是肌⾁缺少（）6、甲亢病⼈，甲状腺分泌增⾼会出现（）7、有⼀种激素，溶于⽔，但与脂溶性激素⼀样需进⼊核内发挥作⽤，这种激素是（）A、胰岛素B、⼼纳素C、⽣长素D、肾上腺素E、甲状腺激素8、细菌被紫外线照射引起DNA损伤时，编码DNA修复酶的基因表达增强，这种现象是（）9、葡萄糖在合成糖原时，每加上⼀个葡萄糖残基需消耗（）⾼能磷酸键10、有关外显⼦核内含⼦，下列叙述正确的是A hnRNA上只有外显⼦⽽⽆内含⼦B 成熟mRNA有内含⼦C 除去外显⼦的过程称为剪接D 除去内含⼦的过程称为拼接11、真核⽣物DNA聚合酶α抑制剂是（）12、核蛋⽩体的受位和给位，可被下述霉素或抗⽣素鉴别出来的是A 红霉素B 氯霉素C ⽩喉霉素D 环⼄酰亚胺E 嘌呤霉素13、既是⽣糖氨基酸⼜是⽣酮氨基酸的是（）14、实际测得1分⼦丙酮酸完全氧化释放的能量低于理论值，约为（）15、⼈体内的嘌呤核苷酸分解代谢的主要终产物是（）16、⼈体内不能⾃⾝合成维⽣素C的原因是（）四、名字解释蛋⽩聚体（）酸值（）核酶（）转换数（）H—DNA（）Cori循环（）岗崎⽚段（）中⼼法则（）化学渗透学说（）别构酶（）五、简答题1、以⾎红蛋⽩和肌红蛋⽩为例说明蛋⽩质的结构和功能关系2、说明⼤肠杆菌DNA复制有关的酶和蛋⽩的作⽤3、⽐较脂肪酸氧化与合成途径4、从底物专⼀性与反应⾼效率两⽅⾯解释作⽤机理5、请说明Southern blotting的原理及流程6、体内脂肪酸可否转化为葡糖糖？为什么？2003年⼀、填空题1、由FAD或NAD+传递⼀对H经过电⼦传递链传递到氧，其P/O值分别是（）和（）2、核糖体上存在2个tRNA结合位点，分别是（）和（）3、1926年Summer从⼑⾖中得到了（）酶结晶，从⽽第⼀此证明了酶的本质是蛋⽩质4、胰凝乳蛋⽩酶专⼀性的切断（）和（）氨基酸的羧基形成的肽键5、糖蛋⽩上的糖基⼀般连接在蛋⽩质的（）、（）、（）氨基酸上6、凝集素能专⼀性识别和结合细胞表⾯的（）7、糖酵解途径的调控酶是（）、（）、（），TCA循环的调控酶是（）、（）、（）8、Watson&Crick根据X射线晶体衍射数据提出的DNA双螺旋结构模型，其螺旋直径为（）碱基平⾯间距为（）每以螺旋周期包含（）对碱基这种结构为B型DNA，除此之外还有（）型DNA9、⼀分⼦葡萄糖经过糖酵解途径⽣成（）分⼦ATP，TCA循环中⽣成（）分⼦ATP，完全氧化⽣成（）分⼦ATP三、翻译Cellulose（）self-assembly（）attenuator（）calvin cycle（）competitive inhibition（）freeradical（）genome（）semiconservative replication（）splicing（）proteinfolding（）operons（）chromategraphy（）CM-cellulose（）heta-oxidiation（）ketonebody（）superhelix（）denaturation（）D-loop（）plasmid（）peptide（）density gradient（）chymonypsm（）base pairing（）association（）disulfide bond（）coenzyme（）molecularsieve（）flavoprotein（）configuration（）transposon（）四、名词解释等电点（）双螺旋结构（）核酶（）Tm值（）操纵⼦（）Pribnow box （）排阻层析（）岗崎⽚段（）协同效应（）级联放⼤效应（）酵解途径（）电⼦传递链（）脂质体（）第⼆信使（）端粒酶五、问答题1、简述乳糖操纵⼦调控机制2、请综述糖、脂肪、蛋⽩质的代谢途径及其相互关系2002年⼀、填空题1、精氨酸的PK1（COOH）=2.17，PK2（NH3）=9.04，PK3（胍基）=12.08，则其PI值=（）2、维⽣素（）可以帮助钙的吸收，它可以由⽪肤中的（）经紫外线照射转变过来3、酶的（）抑制不改变酶促反应的Vmax，（）抑制不改变酶促反应的Km4、⼀分⼦葡萄糖在肝脏完全氧化才⽣（）分⼦ATP，⼀分⼦软脂酸完全氧化产⽣（）分⼦ATP5、2，4—⼆硝基苯酚是氧化磷酸化的（）剂6、脂肪酸在肝脏不完全氧化形成（）、（）、（）等产物称为酮体7、⽣物合成所需要的还原⼒由（）过程提供8、Watson&Crick根据X射线晶体衍射数据提出的DNA的双螺旋结构模型，其螺旋直径为（），碱基平⾯间距为（）nm，每以螺旋周含（）对碱基，这种构型为B型DNA，除此之外还有⼀种（）型DNA9、真核细胞的核糖体由（）亚基和（）亚基组成，其中（）亚基含有mRNA的结合位点10、⼤肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ具有三种活性，分别是（）、（）、（）三、名词解释1、凯⽒定氮法（）2、抗体酶（）3、中⼼法则（）4、化学渗透学说（）5、外显⼦（）6、端粒酶（）7、氧化磷酸化（）8、限制性内切酶（）9、流动镶嵌模型（）10、分⼦筛层析（）四、问答题1、请说明操纵⼦学说2、现在要从动物脏器中纯化SOD酶，请设计⼀套实验路线3、请举出2种⽣物化学新技术，并说明原理与应⽤4、请计算⼀分⼦三软脂酸⽢油在体内完全氧化⽣成的ATP数2001年⼀、填空题1、已知Glu的PK1（COOH）=2.19，PK2（NH3）=9.67，PKR（侧链）=4.26，则其PI=（），Glu在PH=5.58的缓冲液中电泳时向（）极移动，所以Glu属于（）氨基酸2、酶的可逆抑制有（）、（）和（）三种，对酶促反应动⼒⾎参数影响分别是（）、（）和（）3、糖酵解的关键控制酶是（）、（）、（），TCA循环的调控酶是（）、（）4、α螺旋是蛋⽩质种常见的⼆级结构，酶螺旋含（）个氨基酸，沿轴前进（）nm，在（）氨基酸出现地⽅螺旋中断形成结节5、每分⼦葡萄糖通过酵解产⽣（）ATP，若完全氧化产⽣（）ATP6、细胞中由ADP⽣成ATP的磷酸化过程有两种⽅式，⼀种是（），⼀种是（）⼆、名词解释1、Tm值（）2、中间产物学说（）3、中⼼法则（）4、凯⽒定氮法（）5、超⼆级结构（）6、电⼦传递链（）7、PCR（）8、启动⼦（）9、糖异⽣（）10、多聚核糖体三、问答题1、简述蛋⽩质⼀、⼆、三、四级结构的概念2、写出软脂酸完全氧化的⼤体过程及ATP的⽣成3、简述磷酸戊糖途径及其⽣理意义4、请说明操纵⼦学说5、从⼀种真菌中分离得到⼀种⼋肽，氨基酸分析表明它是由Lys、Lys、Phe、Tyr、Gly、Ser、Ala、Asp组成，此肽与FDNB作⽤，进⾏酸解释放出DNP—Ala，⽤胰蛋⽩酶裂解产⽣两个三肽即（Lys、Ala、Ser）和（Gly、Phe、Lys）以及⼀个⼆肽，此肽与胰凝乳蛋⽩酶反应即放出⾃由的天冬氨酸，⼀个四肽（Lys、Ser、Phe、Ala）及⼀个三肽，此三肽与FDNB反应随后⽤酸⽔解产⽣DNP—Gly，试写出此⼋肽的氨基酸序列6、化学渗透是怎样来解释电⼦传递与氧化磷酸化的偶联的？你认为这个学说有什么缺陷、不完善之处，你能提出什么想法2000年⼀、填空题1、维⽣素（）可帮助钙质吸收，它可由⽪肤中的（）经紫外线照射转变⽽来2、对酶的（）抑制不改变酶促反应的Vmax，（）抑制不改变酶促反应的Km3、⽣物合成所需要的还原⼒由（）过程提供4、⼀分⼦葡萄糖在肝脏完全氧化产⽣（）分⼦ATP，⼀分⼦软脂酸完全氧化产⽣（）ATP5、蛋⽩质的含氮量百分⽐是（），依据该数据进⾏定氮的⽅法是（）6、精氨酸的PK1（COOH）=2.17，PK2（NH3）=9.04，PK3（胍基）=12.08，则其PI=（）7、多肽链中（）氨基酸出现的地⽅会引起螺旋型构象的中断8、⼤肠杆菌DNA聚合酶的三种活性分别是（）、（）、（）9、Km值可以⽤来反应酶与底物（）的⼤⼩10、肽和蛋⽩质特有的颜⾊反应是（）11、Watson&Crick根据X射线晶体衍射数据提出的DNA的双螺旋结构模型，其螺旋直径为（），碱基平⾯间距为（）nm，每以螺旋周含（）对碱基，这种构型为B型DNA，除此之外还有⼀种（）型DNA三、名词解释1、结构域（）2、岗崎⽚段（）3、PCR（）4、多酶体系（）5、别构效应（）6、操纵⼦（）7、酸败（）8、酵解（）9、电⼦传递链（）10、排阻层析四、英译汉PI（）alpha-helix（）peptide bond（）domain（）glucose（）lipid （）protein（）fatty acid（）ribozyme（）Krebs cycle（）Tm（）cDNA（）transcription（）Pribnow box（）exon（）plasmid（）eletrophoreses（）CM-cellulose（）IEF（）SDS-PAGE（）五、简答1、解释蛋⽩质的⼀、⼆、三、四级结构2、简述酮体及其⽣理意义3、简述真、原核⽣物核糖体结构的异同4、简述化学渗透学说是怎样来解释电⼦传递与氧化磷酸化的偶联的5、请列举2中⽣物新技术，简要说明其原理和应⽤六、问答1、⼀分⼦17碳饱和脂肪酸⽢油在有氧的情况下在体内完全氧化需要经过怎样的氧化途径，产⽣多少ATP2、有⼈认为RNA是最早出现的⽣物⼤分⼦，你能对此提出何种⽀持或反对的理由，并试对上述说法进⾏评价3、现在要从动物肝脏中提纯SOD酶，请设计⼀套合理的实验路线2008年⼀、填空题1、蛋⽩质的平均含氮量为（）%，是凯⽒定氮法的理论依据2、蛋⽩质⼆级结构的三种基本类型是（）、（）和（）3、⾎红蛋⽩具有四级结构，它是由（）个亚基组成的，每个亚基中含有⼀个（）辅基4、蛋⽩质的可逆磷酸化修饰是重要的功能调控⽅式，磷酸化时需要（）酶催化，⽽去磷酸化需要（）5、⼈体必需的脂肪酸有（）和（）6、植物激素（）具有促进⽣长的作⽤，⽽（）可以促进果实成熟7、糖酵解途径中的三个调节酶是（）、（）和（）8、线粒体外的NADH经磷酸⽢油或苹果酸经穿梭后进⼊呼吸链氧化，其P/O ⽐分别是（）和（）9、1分⼦⼄酰辅酶A经TCA循环⽣成（）分⼦NADH，（）分⼦FADH2和（）个CO2，脱下的氢通过电⼦传递链彻底氧化，可⽣成（）分⼦ATP 10、原核⽣物核糖体为70S，它由⼤⼩2个亚基构成，其⼤⼩分别是（（））和（（））11、肌⾁细胞中（）和（）两种蛋⽩承担收缩和运动的功能⼆、判断（正确以“+”表⽰，错误以“—”表⽰。

《肥料中植物生长调节剂的测定高效液相色谱法》标准解读

《肥料中植物生长调节剂的测定高效液相色谱法》标准解读近日，国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会批准发布了多项植保农资类国家标准，其中GB/T37500-2019《肥料中植物生长调节剂的测定高效液相色谱法》标准的发布，让监管在肥料里添加植物生长调节剂的违法行为有了技术支撑。

该标准适用于水溶性肥料、复合肥料、复混肥料、掺混肥料等肥料中复硝酚钠、2.4-D、脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑、吲哚-3-乙酸、吲哚丁酸等植物生长调节剂含量的测定。

标准中各目标物的方法检出限和定量限分别为：复硝酚钠3mg/kg和10mg/kg；2.4-D5mg/kg和10mg/kg；脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑3mg/kg和10mg/kg；吲哚-3-乙酸、吲哚丁酸5mg/kg和10mg/kg。

如何理解？以复硝酚钠为例，当肥料中添加复硝酚钠3mg/kg以上时，就可以通过高效液相色谱法测定出来；当肥料中添加复硝酚钠10mg/kg以上时，可以通过该方法测出具体的复硝酚钠含量。

据了解，目前市场上存在不少添加植物生长调节剂的肥料，扰乱市场秩序，危害农作物安全。

植物生长调节剂是一类与植物激素具有相似生理和生物学效应的物质。

现已发现具有调控植物生长和发育功能化合物有胺鲜酯（DA-6）、氯吡脲、复硝酚钠、赤霉素、乙烯利、芸苔素内酯和多效唑等。

植物生长调节剂属于农药，使用时需按照登记批准标签上标明的使用剂量、时期和方法。

使用植物生长调节剂对人体健康一般不会产生危害。

但如果使用上出现不规范，可能会使作物过快增长，或者使生长受到抑制，甚至死亡。

对农产品的品质会有一定影响，并且对人体健康产生危害。

根据《农药管理条例》，只要肥料里面添加了农药，该产品就属于农药，应该按照农药进行登记、生产、经营、使用和监管。

未办理农药登记证的，即属于未依法取得农药登记证而生产的农药，或者农药所含有效成分种类与农药的标签、说明书标注的有效成分不符，确定为假农药。

对生产和经营假农药，《农药管理条例》也有明确规定，未取得农药生产许可证生产农药或者生产假农药的，由县级以上地方人民政府农业主管部门责令停止生产，没收违法所得、违法生产的产品和用于违法生产的工具、设备、原材料等，违法生产的产品货值金额不足1万元的，并处5万元以上10万元以下罚款，货值金额1万元以上的，并处货值金额10倍以上20倍以下罚款，由发证机关吊销农药生产许可证和相应的农药登记证；构成犯罪的，依法追究刑事责任。

高效液相色谱法同时分离测定包菜中4种植物生长素

ｓｏｆＲＳｉｎｏＤ ≤ １２．．１
Ｋｅｒｓ：ｈｉｈｐｅｆｒｎｃｉｉｈｒｍａｏｒｐｈｙＨＰＬＣ）；ｐａｘｉｙｗｏｄｇｒｏｍａｅｌｑｕｄｃｏｔｇａ（ｌｎｔａｕｎ；ｃｂｇｅａｂａ
１１材料与仪器．
吲哚乙酸、哚丁酸、哚乙腈和奈乙酸标样吲吲
（２０ａ）Ｔｈｂｌｈｓｓｃｍｐｓｄｏｔａｏｎａｅｉｃｄ（５：４Ｖ／）ｔｅｆｗ一８ｍ．ｅｍｏｉｐａｅｗａｏｏｅｆｍｅｈｎｌａｄ２ｅｃｔｃａｉ５５，Ｖ，ｈｌｏ
高效液相色谱法同时分离测定包菜中４种植物生长素
谢勇平，新宇，丹丽，陈锦鸿郑林
（建农林大学生命科学学院，州３００）福福５０２

摘
要：采用ＡｇｌｔＣＣ８ｉｎ１色谱柱（５ｅＴ２０ｍｍ×４６ｍ，ｍ）Ａｉｎ１０ＶＷＤ检测器，甲醇：．冰乙．ｍ５、ｇｌｔ１０ｅ以２０
新疆农业大学学报
２１，３５：０￣４１００３（）４９１
ＪｕｎｌｆＸｉｊａｇＡｒｕｔｒｌｎｖｒｉｏｒａｎｉｎｇｉｌａｉｅｓｙｏｃｕＵｔ
文章编号：１０ — ６４２１）５００ —３０７８１（０００ — ４９０
ｒｃｖｒｅｆ８．～９．ｅｏｅｉｓｏ１６８２％．ｅｄｔｒｎｔｎｍｅｈｄｈｄａｄｔｃｉｎｌｔ≤ ００￣／ｎｒｃ— Ｔｈｅｅｍｉａｉｔｏａｅｅｔｏｉｏｍｉ．５ｇｍＬａｄａｐｅｉ

高效液相色谱法快速分析植物内源性激素

高效液相色谱法快速分析植物内源性激素植物内源性激素在植物生长和发育过程中起着重要的调节作用。

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种先进的分析技术，被广泛地用于植物内源性激素的定量分析和研究。

通过快速、准确地分析植物内源性激素，我们可以深入了解植物的生长和发育调控机制，为农业生产和植物育种提供重要的理论指导和实践应用。

一、植物内源性激素的概述植物内源性激素是一类在植物体内合成和调节生长发育的化合物，包括生长素、赤霉素、脱落酸、激素酮、保护素和亚硫酸氨基酸等。

它们在调节植物生长和发育过程中发挥着不可或缺的作用，如控制细胞分裂和伸长、调节根系和茎的形态发育、调控开花和果实发育等。

了解植物内源性激素的合成、分布和调控机制对于揭示植物的生长发育规律具有重要意义。

二、高效液相色谱法在植物内源性激素分析中的优势高效液相色谱法是一种在液相中进行分离和测定的分析技术，具有分离能力强、选择性好、分析速度快以及样品处理简单等优点，因此被广泛应用于植物内源性激素的定量分析中。

与传统的色谱方法相比，高效液相色谱法具有以下几个优势：1.分离能力强：高效液相色谱法能够有效地将混合样品中的激素物质分离出来，得到高纯度的化合物。

这一点对于复杂的植物组织和生理液体样品分析尤为重要。

2.选择性好：高效液相色谱法能够通过调整色谱柱、流动相和检测器等条件，实现对不同内源性激素的选择性分离和测定，从而提高了分析的准确性和可靠性。

3.分析速度快：高效液相色谱法具有快速分析的特点，一般可以在几分钟到几十分钟内完成一次分析，提高了实验效率。

4.样品处理简单：高效液相色谱法在样品处理时通常只需简单的提取和净化步骤，可以大大简化实验过程，提高了实验效率。

三、高效液相色谱法快速分析植物内源性激素的方法高效液相色谱法快速分析植物内源性激素的方法主要包括激素提取、净化和检测。

根据不同植物内源性激素的特性和含量，可以选择不同的样品处理方法和色谱条件。

植物激素的测定方法

植物激素的测定方法植物激素是一类在植物生长和发育过程中起调节作用的化合物。

它们能够通过调节细胞分裂、扩展和分化以及调控植物对环境的适应能力，从而影响植物的形态和功能。

为了研究和了解植物激素的作用机制，科学家们发展了多种测定植物激素的方法。

这些方法可以帮助我们准确地测定植物激素的浓度，并进一步揭示植物激素在植物生长和发育中的作用。

一种常用的测定植物激素的方法是高效液相色谱法（HPLC）。

HPLC 是一种基于植物激素在液相中的分离和检测原理的分析方法。

首先，样品中的植物激素会被提取出来，然后通过在柱子中的固定相上进行分离，最后利用紫外光谱仪或质谱仪等设备进行检测和定量。

这种方法具有高分离效果、高灵敏度和高准确性的优点，常用于测定植物激素如生长素、赤霉素、脱落酸等的浓度。

除了HPLC，放射免疫测定法（RIA）也是一种常用的测定植物激素的方法。

RIA利用植物激素与标记同位素结合的原理，通过测量放射性同位素的放射线强度来定量植物激素的浓度。

这种方法具有高灵敏度和高特异性的优点，可以测定植物激素如赤霉素、激动素、玉米素等的浓度。

酶联免疫吸附测定法（ELISA）也是一种常用的测定植物激素的方法。

ELISA利用植物激素与特异性抗体的结合反应，通过测量抗体与酶标记物质之间的酶活性来定量植物激素的浓度。

这种方法具有简单、快速和高灵敏度的优点，常用于测定植物激素如赤霉素、生长素、激动素等的浓度。

除了上述几种常用的测定方法，还有一些新兴的测定植物激素的方法也在不断发展中。

例如，质谱法（MS）是一种基于植物激素分子的质量和质荷比的分析方法，可以精确测定植物激素的结构和浓度。

另外，生物传感器和光谱法等新技术也被应用于植物激素的测定领域，为研究人员提供了更多的选择。

测定植物激素的方法多种多样，各有优劣。

科学家们根据研究目的和需求选择合适的方法来测定植物激素的浓度。

这些测定方法的发展和应用，不仅有助于我们深入了解植物激素的作用机制，还为植物生长和发育的调控提供了重要的理论和实践基础。

植物脱落酸测定方法

植物脱落酸测定方法植物脱落酸测定方法是一种用于测定植物体内脱落酸含量的技术手段。

脱落酸又称为植物生长素（auxin），是一类具有促进植物生长和发育的植物激素。

测定植物脱落酸含量可以帮助我们了解植物的生理状态、响应外界环境变化的能力以及促进和抑制植物生长的机制。

本文将介绍几种常用的植物脱落酸测定方法。

首先是高效液相色谱法（HPLC），该方法利用高效液相色谱仪对植物组织中的脱落酸进行分离和定量。

测定前需要将植物样品研磨成粉末，然后使用有机溶剂提取植物中的脱落酸。

提取液经过预处理后，使用高效液相色谱仪进行分离和定量。

该方法具有测定速度快、灵敏度高和分离效果好的优点，但需要使用昂贵的仪器设备和特殊的试剂。

其次是酶联免疫吸附测定法（ELISA），该方法利用特异性抗体与脱落酸结合形成免疫复合物，通过检测免疫复合物的光学信号来确定脱落酸的含量。

该方法不需要分离和纯化样品中的脱落酸，操作简便、灵敏度高，可以同时测定多个样品，但需要配套的抗体和试剂。

第三种方法是生物测定法，该方法利用感生植物对脱落酸的特异生物学效应，测定植物样品中的脱落酸含量。

常用的感生植物包括纤维苋（Avena sativa）和豌豆（Pisum sativum）等。

测定方法包括种子萌发试验、生长促进试验和胚轴伸长试验等。

该方法操作简单、成本低，但具有一定的主观性和时效性。

最后是气相色谱法（GC），该方法通过将植物样品中的脱落酸转化为易于挥发的二氯苯酚酯衍生化物，然后使用气相色谱仪进行分离和定量。

该方法的优点是灵敏度高、精确度好，但需要较长的操作时间和复杂的操作步骤。

综上所述，植物脱落酸测定方法包括高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法、生物测定法和气相色谱法等。

每种方法都有其适用的场景和优缺点，研究人员可以根据自己的需求和实验条件选择合适的方法来测定植物脱落酸含量。

HPLC分析烟草化学成分

2.2 多酚的测定分析烟草中有很多的酚类化合物，这些物质的存在与烟草的色泽和香气息息相关。

而且烟草里面的酚类化合物一般都不稳定，容易发生化学反应。

在这个过程中会生成有色的物质，从而影响烟草的颜色。

在点燃烟草的时候，这些物质很容易挥发出来，分解后进入到烟气中，从而影响烟气的香味，让烟草的香味增加。

目前主要运用以下几种方法对烟草中的多酚类物质进行分析。

科学家们利用酚类物质还原性强的这特点，发明了容量法来进行多酚类物质的分析。

在实验中采用多种氧化剂对样品进行滴定处理，然后通过反应判断样品中的多酚类物质含量及组成。

这个方法操作简单，对设备等要求较低，但是烟草中还有很多其他具有还原性的物质，会对测定的结果产生影响。

所以无法对各种酚类物质进行准确测定。

在1977年，一位科学家开始使用高效液相色谱仪(HPLC)进行烟草中酚类物质的分析研究。

首先他运用色谱柱然后采用了梯度洗脱，得到了19个化合物的色谱峰，之后用紫外光谱的方法鉴定出了其中的7个多酚类化合物。

之后的Nisseror 等人再次使用HPLC 进行烟草中多酚类物质的研究，发现在20 cm ×4.6 cm 内填入5 nm 的Nucleosil 的C18色谱柱上，采用甲醇作为流动相进行梯度洗脱，在用紫外光进行测定的时候，可以对烟草中的酚类等物质进行分析检测[3]。

HPLC 法是将各种物质分开进行测定，采用不同的洗脱系统进行化合物的分析，这样的操作可以得到更加准确的结果，不会被其他的物质干扰，但是因为它需要进行多次的进样然后洗脱分析，操作比较复杂而且十分耗费时间。

因此现在很多的科学家开始进行梯度洗脱这方面的研究，希望可以节约实验的时间，提高效率。

目前应用高效液相色谱仪进行这类物质的分析已经开始取缔其他的方法，因此我们也应该大力发展这个技术。

2.3 糖类的测定分析在烟草中糖类与烟草的品质有很大的关系，烟草燃烧的时候它们可以产生大量的酸性物质和一些香气，降低烟草气味的刺激性，产生令人感到愉悦的气味。

高效液相色谱法测定果蔬中7种植物激素的残留量

高效液相色谱法测定果蔬中7种植物激素的残留量周艳明;忻雪【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2010(031)018【摘要】建立高效液相色谱泫测定果蔬中7种植物激素残留的方法.选择10种果蔬样品,经体积分数80%甲醇提取后、过C18柱净化,用带有紫外检测器的液相色谱仪测定,外标法定量.通过对该方法的精密度和加标回收实验,所有激素的添加回收率均在70.23%～98.10%之间,回收率的变异系数在3.34%～10.12%之间,方法的最低检出限为0.004～0.02mg/kg、最低定量限为0.01～0.1mg/kg,所建立的果蔬中植物激素残留量的测定方法满足国家标准对食品中农药残留测定的要求,可提供给相关部门用于对相关农产品、食品的质量监控.【总页数】4页(P301-304)【作者】周艳明;忻雪【作者单位】沈阳农业大学分析测试中心,辽宁,沈阳,110866;沈阳农业大学分析测试中心,辽宁,沈阳,110866【正文语种】中文【中图分类】TS207.53【相关文献】1.超高效液相色谱串联质谱法测定果蔬中13种植物生长调节剂残留量 [J], 林海丹;谢守新;王岚;徐娟;吴思彦;邹志飞2.超高效液相色谱-串联质谱法测定果蔬中氟啶虫胺腈、Pyrifluquinazon和螺虫乙酯残留量 [J], 崔淑华;李正义;程刚;李瑞娟;王宇;张雪琰;赵峰3.固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定果蔬中34种植物生长调节剂的残留量 [J], 陈金斌;张伊;张晓景;王凌杰4.高效液相色谱-串联质谱法测定果蔬中6种三嗪类除草剂的残留量 [J], 王玉健;黄惠玲;李华平;梁振纲5.QuEChERS–超高效液相色谱–串联质谱法测定果蔬中57种农药残留量 [J], 张嘉楠;曹秀梅;王爱卿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法测定烟草和棉花中生长素含量

高效液相色谱法测定烟草和棉花中生长素含量龚晓崇;宋从凤;王鸣华;郑服丛;缪卫国;王金生【摘要】生长素是最早发现的一类天然植物激素,即吲哚乙酸(Indole-3-aceticacid,IAA).它对植物的许多生理活动具有影响,包括纵向生长、细胞分裂、分化、生根、开花、落叶、向光性等[1].最近更多研究报道认为IAA可能在植物防卫机制中担当一定的角色[2].因此,研究植物组织中生长素含量的变化,对进一步研究其作用机制,以及深入认识植物生长发育的生理过程有着极为重要的意义.【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2012(028)001【总页数】3页(P225-227)【关键词】高效液相色谱法;生长素含量;烟草;棉花【作者】龚晓崇;宋从凤;王鸣华;郑服丛;缪卫国;王金生【作者单位】南京农业大学植物保护学院,农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室,江苏南京210095;南京农业大学植物保护学院,农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室,江苏南京210095;南京农业大学植物保护学院,农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室,江苏南京210095;海南大学环境与植物保护学院,海南海口570228;海南大学环境与植物保护学院,海南海口570228;南京农业大学植物保护学院,农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室,江苏南京210095【正文语种】中文【中图分类】Q946.885+.1生长素是最早发现的一类天然植物激素，即吲哚乙酸(Indole-3-aceticacid，IAA)。

它对植物的许多生理活动具有影响，包括纵向生长、细胞分裂、分化、生根、开花、落叶、向光性等［1］。

最近更多研究报道认为IAA可能在植物防卫机制中担当一定的角色［2］。

因此，研究植物组织中生长素含量的变化，对进一步研究其作用机制，以及深入认识植物生长发育的生理过程有着极为重要的意义。

植物激素在植物体内含量甚微，而且其在植物体内的组成复杂，相互共存的干扰组分多、对温度等条件敏感，因而对植物激素的测定非常困难，定量分析的精度也较低［3］。

超高效液相色谱法快速测定烟草样品中的植物色素

超高效液相色谱法快速测定烟草样品中的植物色素王晋;李雪梅;黄海涛;刘欣;许永;李晶;孔维松;张涛;张承明;杨光宇【摘要】建立超高效液相色谱法快速测定烟草中植物色素(新黄质、紫黄质、叶黄素、叶绿素-a、叶绿素-b、β-胡萝卜素)检测方法.90％丙酮超声萃取30 min,色谱柱为Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,以体积比按(乙腈90％+10％水),4.0 min(100％乙腈)的梯度条件,流速为0.8 mL/min,用二极管阵列检测器检测.6种色素在5 min内分离,检测限15～22 ng/mL,平均回收率为93％～105％.采用自主设计的样品萃取瓶进行前处理,前处理简单快速,同时,色谱分离周期明显缩短,与目前行业标准相比,样品分析效率提高了4倍以上.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2018(057)022【总页数】4页(P124-127)【关键词】超高效液相色谱;烟草;植物色素;快速测定【作者】王晋;李雪梅;黄海涛;刘欣;许永;李晶;孔维松;张涛;张承明;杨光宇【作者单位】云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106;云南中烟工业有限责任公司技术中心,昆明 650106【正文语种】中文【中图分类】O656.3植物色素是烟草生长和利用太阳能进行光合作用的重要物质，同时也是影响烟草品质的重要成分，它们对烟叶的色泽和香味也有着重要影响［1-4］。

高效液相色谱-荧光检测器法同时测定蔬果中5种植物生长素残留

高效液相色谱-荧光检测器法同时测定蔬果中5种植物生长素残留胡晓科;邹海民;薛勇【摘要】采用高效液相色谱-荧光检测器法同时测定蔬菜、水果中的吲哚-3-乙酸、吲哚-3-丙酸、吲哚-3-丁酸、2-萘氧乙酸、1-萘乙酸等5种植物生长素残留.取蔬菜或水果样品的可食部分,切碎并充分混匀,称取10.000 g,加入20 mL含0.2％(体积分数)甲酸的乙腈,高速匀浆2 min,加入4 g无水硫酸镁、1 g氯化钠,涡旋5 min 后,以8000 r·min-1转速离心5 min,取10.0 mL上清液蒸发至近干,用5 mL含0.2％(体积分数)甲酸的二氯甲烷-乙腈(9+1)混合液复溶,溶液以1 mL·min-1流量通过氨基固相萃取小柱.收集流出液,在溶剂蒸发工作站上浓缩至近干,用甲醇溶解残渣并定容至1.0 mL,溶液经0.45μm滤膜过滤后,进行高效液相色谱分析.以Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为固定相,用0.1％(体积分数)乙酸溶液与甲醇的混合液为流动相进行梯度洗脱;在激发波长287 nm,发射波长337 nm处进行荧光检测.结果表明:5种植物生长素的质量浓度均在0.050～5.0 mg·L-1内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)在0.93～2.0μg·kg-1之间.对空白样品进行加标回收试验,回收率在72.4％～114％之间,测定值的相对标准偏差(n=6)低于4.6％.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2019(055)003【总页数】5页(P309-313)【关键词】高效液相色谱法;荧光检测器;植物生长素;蔬菜;水果【作者】胡晓科;邹海民;薛勇【作者单位】成都市疾病预防控制中心,成都 610041;成都市疾病预防控制中心,成都 610041;成都市疾病预防控制中心,成都 610041【正文语种】中文【中图分类】O657.7随着吲哚－3－乙酸（IAA）的人工合成与应用的发展，出现一类具有相似活性和生长调节功能的非天然生长素，如吲哚－3－丁酸（IBA）、1－萘乙酸（NAA）等。

高效液相色谱法测定棉花中3种脱叶剂的残留量

高效液相色谱法测定棉花中3种脱叶剂的残留量孙武勇;魏东伟;刘海芳;郭会清【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2014(050)001【总页数】2页(P112-113)【作者】孙武勇;魏东伟;刘海芳;郭会清【作者单位】河南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,郑州450003;河南农业大学生命科学学院,郑州450002;河南农业大学生命科学学院,郑州450002;河南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,郑州450003【正文语种】中文【中图分类】O652.63棉花作为纺织品的主要原材料，在纺织工业领域起着支柱作用。

在棉花的生长过程中使用农药不可避免。

脱叶剂作为一种植物生长调节剂，能够促使植物叶子提前脱落，有利于农业的机械化［1－2］。

棉花中使用的脱叶剂农药主要有噻节因、噻苯隆、敌草隆、脱叶磷和乙烯利等，常用的脱叶剂农药商品主要为一种或几种成分的混合物。

由于脱叶剂在棉花收获前期使用，与杀虫剂和除草剂相比更易在棉花纤维中残留，对产业工人及纺织品的生态安全潜在危害更大［3－5］。

噻节因、噻苯隆、敌草隆3种脱叶剂农药在国内尚没有设定棉花中的最大残留限量，美国所设定棉花中三种农药的最大残留限量分别为0.5，0.4，1.0mg·kg－1。

但是，目前国内对棉花脱叶剂残留检测技术的研究多针对其中的一种［6－7］，因而研究其快速、经济、可靠的多残留同时检测技术，建立多残留的检测方法，对棉花中脱叶剂残留进行安全性评价、风险分析和预警，能更好地满足棉纺织品质量日益提高的需求。

本工作建立了高效液相色谱法测定棉花中噻苯隆、噻节因、敌草隆残留量的方法。

1 试验部分1.1 仪器与试剂Agilent 1200 型高效液相色谱仪；可变波长（VWD）检测器及化学工作站；HITACHI CT6E 型离心机；PB4002－S型精密电子天平。

脱叶剂标准储备溶液：300mg·L－1，移取适量噻节因、噻苯隆、敌草隆标准品分别用乙睛溶解配制成标准储备溶液。

海南大学环境与植物保护学院博士生、硕士生导师介绍

海南大学环境与植物保护学院博士生、硕士生导师介绍姓名缪卫国性别男出生日期1969.11 最高学位博士职称教授职务副院长毕业院校南京农业大学所属单位海南大学环境与植物保护学院从事专业植物病理学电话0898-******** E-mail weiguomiao1105@个人简历缪卫国, 江苏海安人，博士，教授，博士生导师，副院长。

1991年南京农业大学植物保护系，获得农学学士学位；2000年在美国阿肯色大学做访问学者；2001年新疆农科院副研究员；2007年新疆农业大学硕士生导师；2009年南京农业大学植物保护学院植物病理学专业，获农学博士学位；2010年在海南大学环境与植物保护学院任教，同年5月被海南大学高聘为教授；2011年任海南大学环境与植物保护学院副院长，负责科研、研究生、学科建设及科技开发工作；2011年获得海南大学博士生导师资格。

主要研究领域是植物与病原微生物的互作、转基因植物的分子检测、植物病害生物防治。

主持过973前期、国家自然科学基金、科技部项目、农业部项目、“948”项目、国家外专局项目、国家留学基金委资助项目、农业部公益性行业专项子项目等。

参加过“863”、“973”等多个项目。

获得省级科技成果一等奖、二等奖、三等奖等共8项。

制定国家标准（GB 20817-2006）一项。

自2001年至今，作为研究生导师，已培养或正在培养研究生20余名。

目前主要承担博士生、硕士生及本科生的“分子植物病理学”等课程的教学任务。

先后在《Journal of Experimental Botany》（SCI，IF:4.990）、《BMC Plant biology》（SCI，IF:4.09）、《Annals of Applied Biology》（SCI，IF:1.967）、《AMINO ACIDS》。

固相萃取反相高效液相色谱荧光检测法测定拟南芥中的生长素

固相萃取反相高效液相色谱荧光检测法测定拟南芥中的生长素[ 11-04-23 13:32:00 ] 编辑：studa20作者：符继红褚金芳王吉德闫存玉【摘要】建立了固相萃取反相高效液相色谱荧光检测法测定拟南芥中生长素的方法。

采用Waters sunfire C18(150 mm×4.6mm,5μm)色谱柱，以乙腈10 mmol/L【关键词】固相萃取，生长素，吲哚乙酸，吲哚丙酸，拟南芥，高效液相色谱1 引言植物激素是在植物体内某一部位合成，并可转移到其它部位，调节植物生长发育具有显著的微量有机物。

植物激素在植物生长发育过程中发挥着重要作用[1]。

植物功能基因对植物生长发育起到的精细调控作用通常以植物激素的形式体现出来,植物激素含量的微小变化就能够引起植物明显的生理变化，对其进行提取和测定非常困难。

生长素是最早发现的一种植物激素，主要功能是促进植物生长、细胞分裂和分化[2]。

由于其在植物体内含量甚微，所以从少量样品中分离测定生长素具有重要的意义。

近年来，检测植物激素主要采用气相色谱质谱联用(GC MS)和液相色谱质谱联用(LC MS)技术。

但是GC MS方法要求样品的衍生化以提高挥发性和灵敏度，样品处理过程复杂费时。

LC MS/MS技术虽然有较高的灵敏度和选择性，同位素内标物的使用使其定量更为准确[3～7]。

但由于仪器和内标物的昂贵，限制了该方法的广泛应用。

高效液相色谱(HPLC)是一种通用的分析仪器，其在植物激素测定研究中已有报道，但因生物体内激素的复杂性与特殊性，使其有效成分的提取分离成为极为关键的一步。

HPLC法测定多种植物内源激素时经常发生分离差、峰型不良及严重拖尾现象[8]，且样品用量一般要求较多[9,10]，对一些特殊样品无法实现测试要求。

因此，选择合适的植物激素提取方法和色谱条件尤为重要。

本研究建立的固相萃取高效液相色谱(HPLC)荧光检测法可以准确测定植物中的生长素类物质，样品用量少，可以满足普通分析实验室完成相关测试的要求。

高效液相色谱法测定烟草和棉花中生长素含量

【论文】高效液相色谱法检测植物激素方法的建立

_高效液相色谱测定多种植物内源激素方法研究

超高效液相色谱串联质谱测定蔬菜中23种植物生长调节剂残留

中国海洋大学生物化学B00-09真题及答案教学教材

《肥料中植物生长调节剂的测定高效液相色谱法》标准解读

高效液相色谱法同时分离测定包菜中4种植物生长素

高效液相色谱法快速分析植物内源性激素

植物激素的测定方法

植物脱落酸测定方法

HPLC分析烟草化学成分

高效液相色谱法测定果蔬中7种植物激素的残留量

高效液相色谱法测定烟草和棉花中生长素含量

超高效液相色谱法快速测定烟草样品中的植物色素

高效液相色谱-荧光检测器法同时测定蔬果中5种植物生长素残留

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海南大学环境与植物保护学院 博士生、硕士生导师 介绍

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