2010_色谱_高效液相色谱双波长检测法测定维C银翘片中4种组分的含量
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ห้องสมุดไป่ตู้
!" 实验部分
! ! !" 药品与试剂 ! ! 磷酸二氢钾、 磷 酸、 三 乙 胺 为 分 析 纯 试 剂， 乙腈 为色谱纯 （ 天津科密欧化学试剂有限公司） 。维生 素 !、 对乙酰氨基酚、 马来酸氯苯那敏和绿 原 酸 对照 品 （ 中国药品 生 物 制 品 检 定 所 ） 。维 ! 银翘片为市 售， 系 % 个厂家共 $ 个批次样品 （ ’ 厂： &’&%() ， &’&%#* ，&’&%"& ；( 厂： &’&(&% ，&’&("’ ，&’&$&( ；! 厂： &’&)+& ， &’&*&( ， &’&)"( ； 标示量： 维生素 ! #$, * )* + 片， 对乙酰氨 基酚 +&* )* + 片， 马 来 酸氯 苯 那 敏 +, &* )* + 片） 。实验用水均为自制二次蒸馏水。 ! ! #" 仪器及色谱条件 ! ! 日本岛津 公 司 的 &!,) ’- 高 效 液 相 色 谱 仪， 配 &!,./0123/4 色 谱 工 作 站 和 5%-,"& ’ 紫 外 检 测 器 等； 67$) ,’ 快速混 合器 （ 姜堰 市新康 医 疗 器械 有 限 公司） ；8$5,% ! 精 密 8$ 计 （ 上海精密科学仪器有 限公 司 ） 。 色 谱 柱： 大 连 依 利 特 公 司 534/9:;/) <-5,(% （ "&& )) - #, ) )) ，* ! ) ） ， 预 柱： ! +( （ "* )) - #, ) )) ） ； 流 动 相： &, &* )/0 + & 7$ " %< # （ 8$ %, & ， 含 + = 三乙胺） ,乙 腈 （ ’* . "* ，> + > ） ； 检 测 波 长： ")& 4) 和 %") 4) ； 流速： +, & )& + )34 ； 柱温： "* ? ； 进样量： "& ! & ； 用外标法定量。 ! ! $" 样品溶液的制备 ! ! 取药品 "& 片， 除去包衣， 精密称定， 计算平均 片 重。粉碎研磨后精 密 称 取 适 量 （ 约相当于 + 片的质 量） ， 置于 +&& )& 容量瓶中， 加流 动 相 适 量， 间歇超 声处理使之溶解， 用流动相稀释至刻度， 摇匀， 过滤， 续滤液作为供 试 品 溶 液 ’ ， 用于测定马来酸氯苯那 敏和 绿 原 酸。 取 供 试 品 溶 液 ’ ", *& )& 置 于 +&& )& 容量瓶中， 用流动 相 稀 释 至 刻 度， 得供试品溶液 (， 用于测定维生素 ! 和对乙酰氨基酚。 ! ! %" 对照品溶液的制备 ! ! 分别准确称取维生素 ! 、 对乙酰氨基酚、 马来 酸 氯苯那敏和绿原酸对照品适量， 以流动相溶解， 配制
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董 ) 丽， 副教授， 主要研究方向为药物色谱分析 $ 4’# ： （ "’(’ ） ’"!*#!$ ，567+8# ：#9":; + <<7*$ ’9*$ =:$ ! 通讯联系人： 基金项目： 新乡医学院高学历人才基金项目 （ %"$ !"", >3’# ） $ 收稿日期： !""* 6"( 6!"
董) 丽! ， ) 孙祥德， ) 李) 琴
（ 新乡医学院，河南 新乡 %,’""’ ） 对乙酰氨基酚、 马来酸氯苯那敏 和 绿 原 酸 % 种 组 分 含 量 的 摘要： 建立了高效液相色谱测定维 ? 银翘片中维生素 ? 、 方法。研究优化了样品提取的溶剂与超声提取条件、 色谱分离条件和检测波长等， 采用了 18:"=@)"7 .-16A2 （ %- . 77 / !"" 77 ，, ! 7 ） 色谱柱， 以 "- ", 7"# 0 B CD ! 2.（ 含 # F 三乙胺） 6 乙腈 （ (, 0 !, ，G 0 G ） 为 流 动 相， 双检 % ED ’- " ， 维生素 ? 、 对乙酰氨基酚、 马来酸氯苯那敏和绿 原 酸 的 测 定 测波长 !." :7 和 ’!. :7 等分离检测条件。结果表明， 线性范围均比较宽， 方法平均回收 率 大 于 **- % F ， 相对标准偏差 （ H1- ） 小 于 #- $ F （ ! 1 ,） ， 而 且 测 定 方 法 快 速、 简 便、 准确， 非常适合维 ? 银翘片类药物的质量控制。 对乙酰氨基酚； 马来酸氯苯那敏； 绿原酸； 维 ? 银翘片 关键词： 高效液相色谱法； 双检测波长； 维生素 ? ； 中图分类号： ..,$) ) ) 文献标识码： I ) ) ) 文章编号： #""" 6$(#’ （ !"#" ） "! 6"!"% 6",
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研究论文
高效液相色谱双波长检测法测定维 ! 银翘片中 ! 种组分的含量
! 第"期
董 ! 丽， 等： 高效液相色谱双波长检测法测定维 ! 银翘片中 # 种组分的含量
・ "&*・
谱 （ "#!! ） 模 式 同 时 测 定 对 乙 酰 氨 基 酚、 马来酸氯 苯 那 敏、 维生素 ! 和绿原酸 # 种组分含量的报 道
［$］
# 组分 对 照 品 储 备 液， 其 质 量 浓 度 分 别 为 +, &%& ， +, &"& ，+, &$& 和 &, *&& & * + & 。量取 维生 素 ! 、 对乙 酰氨基酚、 绿原酸 % 种储备液各 *, && )& ， 马 来酸 氯 苯那敏 储 备 液 +&, && )& 置 于 同 一 *& )& 容 量 瓶 中， 用流动相 稀 释 至 刻 度， 得 # 组分混合对照品溶 液， 混合溶液中 各 组 分 的 质 量 浓 度 分 别 为 维 生 素 ! +&%, & )* + & ， 绿 原 酸 *&, && )* + & ， 对乙酰氨基酚 +&", & )* + & ， 马来酸氯苯那敏 "+(, & )* + & 。将此混 合对照品溶液用流 动 相 依 次 等 体 积 稀 释， 得到系列 质量浓度的混合对照品溶液。
#" 结果与讨论
# ! !" 样品溶液制备方法的选择 ! ! 马来酸氯苯那敏和 维 生 素 ! 在 水 中 易 溶， 而绿 原酸和对乙酰氨基酚在水中溶解度较小。根据 # 组 分的溶解性， 本文 曾 试 验 以 水、 甲 醇、 不同比例的甲 醇 , 水及本文最终 选 定 的 流 动 相 等 不 同 的 提 取 溶 剂 进行提取。结果显示， 用水提取时， 对乙酰氨基酚和 绿原酸提取不完全， 而合适 比例 的甲醇 , 水混 合溶剂 虽能对各被测组分 有 较 好 的 提 取 率， 但提取的共存 成分较多， 干扰 被 测 组 分 的 分 离。 用 流 动 相 提 取 不 仅提取完全， 而且干扰组分少， 又不产生溶剂峰。因 此， 本文选择用 流 动 相 作 提 取 溶 剂。 同 时 还 试 验 了 室温下浸取、 振荡、 超声提取等不同的提取方式。结 果表明， 超声提取 简 便 快 速、 提 取 完 全； 但由于维生 素 ! 对热不 稳 定， 超 声 所 产 生 的 热 量 会 使 其 破 坏， 从而影响测定 结 果 的 准 确 度。 同 时， 绿原酸在酸性 中的 稳定 性较好［ +& ］， 但在 较高 温 度 介质 （ 8$ " / # ） 下会加速其分子 中 酯 键 的 水 解。 因 此， 为确保提取 过程中维生素 ! 和绿原 酸 不 被 破 坏 且 提 取 完 全， 本 文采用间歇超声提取的方式。 # ! #" 检测波长的选择 ! ! 以 流 动 相 为 空 白， 在 "&& / #&& 4) 范 围 内 扫 描， 维生素 ! 、 对 乙 酰 氨 基 酚、 绿原酸和马来酸氯苯 那敏的最大 吸 收 波 长 分 别 为 "#* ，"#$ ，%") 和 ")& 4) 。由于绿原酸 与 其 他 % 组 分 的 最 大 吸 收 波 长 相 差悬殊， 故采用 双 波 长 同 时 检 测 模 式 进 行 检 测。 该 制剂中马来 酸 氯 苯 那 敏 的 处 方 量 甚 小， 故 选 择 ")& 4) 作为测定的第 一 检 测 波 长， 在 此 波 长 下， 维生素 ! 和对乙酰氨 基 酚 也 具 有 较 大 的 吸 收， 检测灵敏度 足以达到分析要求。以绿 原 酸 的 最 大 吸 收 波 长 %") 4) 作为第二检测 波 长 对 绿 原 酸 进 行 检 测。 双 波 长 检测模式兼顾了各 组 分 的 含 量 差 别 和 检 测 灵 敏 度， 实现了在同一色谱条件下 # 组分含量的同时测定。 ! ! 文献 ［ ++ ］ 在 以 $%&! 测 定 维 ! 银 翘 片 中 的 上
， 但由于 $%!# 自 身 的 重 现 性 较 差， 使其难以
应用 于 药 品 的 质 量 控 制。 利 用 $%&! 测 定 维 ! 银 翘片中维生素 ! 、 对乙酰氨基酚、 马来酸氯 苯 那 敏和 绿原酸 # 种组分的含量鲜有报道。本文通过优化 样 品提取条件和色谱分离条件， 用外标法定量， 建立了 $%&! 双波长检 测 法 测 定 该 # 种 组 分 含 量 的 方 法， 并应用于实际样 品 的 测 定。 方 法 操 作 简 便， 其灵敏 度、 准确性和重现性均优于已报道的方法。
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［. 2 $］ 法［ , ］及高效液相色谱法 （ D2B? ） 等进行 维 ? 银
马来酸氯苯那敏、 对乙酰 氨基酚 或 翘片中维生素 ? 、 绿原酸等组分的含 量 测 定 多 有 报 道， 但这些方法大 多是测定其中 # 种或同时测定其中 ! 种组分。有采 用高效毛细管电泳法 （ D2?5 ） 的胶束 电动毛 细管 色
!" 实验部分
! ! !" 药品与试剂 ! ! 磷酸二氢钾、 磷 酸、 三 乙 胺 为 分 析 纯 试 剂， 乙腈 为色谱纯 （ 天津科密欧化学试剂有限公司） 。维生 素 !、 对乙酰氨基酚、 马来酸氯苯那敏和绿 原 酸 对照 品 （ 中国药品 生 物 制 品 检 定 所 ） 。维 ! 银翘片为市 售， 系 % 个厂家共 $ 个批次样品 （ ’ 厂： &’&%() ， &’&%#* ，&’&%"& ；( 厂： &’&(&% ，&’&("’ ，&’&$&( ；! 厂： &’&)+& ， &’&*&( ， &’&)"( ； 标示量： 维生素 ! #$, * )* + 片， 对乙酰氨 基酚 +&* )* + 片， 马 来 酸氯 苯 那 敏 +, &* )* + 片） 。实验用水均为自制二次蒸馏水。 ! ! #" 仪器及色谱条件 ! ! 日本岛津 公 司 的 &!,) ’- 高 效 液 相 色 谱 仪， 配 &!,./0123/4 色 谱 工 作 站 和 5%-,"& ’ 紫 外 检 测 器 等； 67$) ,’ 快速混 合器 （ 姜堰 市新康 医 疗 器械 有 限 公司） ；8$5,% ! 精 密 8$ 计 （ 上海精密科学仪器有 限公 司 ） 。 色 谱 柱： 大 连 依 利 特 公 司 534/9:;/) <-5,(% （ "&& )) - #, ) )) ，* ! ) ） ， 预 柱： ! +( （ "* )) - #, ) )) ） ； 流 动 相： &, &* )/0 + & 7$ " %< # （ 8$ %, & ， 含 + = 三乙胺） ,乙 腈 （ ’* . "* ，> + > ） ； 检 测 波 长： ")& 4) 和 %") 4) ； 流速： +, & )& + )34 ； 柱温： "* ? ； 进样量： "& ! & ； 用外标法定量。 ! ! $" 样品溶液的制备 ! ! 取药品 "& 片， 除去包衣， 精密称定， 计算平均 片 重。粉碎研磨后精 密 称 取 适 量 （ 约相当于 + 片的质 量） ， 置于 +&& )& 容量瓶中， 加流 动 相 适 量， 间歇超 声处理使之溶解， 用流动相稀释至刻度， 摇匀， 过滤， 续滤液作为供 试 品 溶 液 ’ ， 用于测定马来酸氯苯那 敏和 绿 原 酸。 取 供 试 品 溶 液 ’ ", *& )& 置 于 +&& )& 容量瓶中， 用流动 相 稀 释 至 刻 度， 得供试品溶液 (， 用于测定维生素 ! 和对乙酰氨基酚。 ! ! %" 对照品溶液的制备 ! ! 分别准确称取维生素 ! 、 对乙酰氨基酚、 马来 酸 氯苯那敏和绿原酸对照品适量， 以流动相溶解， 配制
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研究论文
高效液相色谱双波长检测法测定维 ! 银翘片中 ! 种组分的含量
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董 ! 丽， 等： 高效液相色谱双波长检测法测定维 ! 银翘片中 # 种组分的含量
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马来酸氯苯那敏、 对乙酰 氨基酚 或 翘片中维生素 ? 、 绿原酸等组分的含 量 测 定 多 有 报 道， 但这些方法大 多是测定其中 # 种或同时测定其中 ! 种组分。有采 用高效毛细管电泳法 （ D2?5 ） 的胶束 电动毛 细管 色