丙二醛的毒性作用及检测技术研究进展

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丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA微板法)

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA微板法)

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA微板法)丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 微板法)简介:动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时,会发生脂质氧化。

丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物,一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA 在内的复杂化合物,此时通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平,因此MDA 的测定被广泛用作脂质氧化的指标。

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 微板法,MDA Assay Kit)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒,是采用一种基于MDA 和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应,特别适用于微量样本的检测。

丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA 发生反应,形成红色的MDA-TBA 加合物,MDA-TBA 加合物在535nm 处有最大吸收,据此可以通过比色法进行检测。

本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:操作步骤(仅供参考):1、样本处理:①血清、血浆、尿液、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。

②组织、细胞等样本:组织或细胞可以使用PBS 或Leagene Western 及IP 细胞裂解液等进行匀浆或裂解。

匀浆或裂解组织时,组织重量占匀浆液或裂解液的比例应为10%;对于细胞,每106个细胞使用0.1ml 裂解液或匀浆液。

匀浆或裂解后,取上清用于后续测定。

匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或4℃进行操作。

样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的MDA 含量。

编号名称TO1011 100T Storage试剂(A): TBA 40mg RT 避光试剂(C): 抗氧化剂300μl RT 避光试剂(D): MDA 标准品(1mmol/L) 200μl -20℃ 避光试剂(E): MDA 检测液 100mlRT 避光使用说明书1份本试剂盒对于样品中的常见化学成分的兼容性参考下表:试剂类别化学成分是否干扰缓冲液HEPES (100mM) 否Borate (50mM) 否Phosphate (100mM) 否Tris (25mM) 否去垢剂CHAPS (≤1%) 否Triton X-100 (≤1%) 否Tween 20 (≤1%) 否抑制剂/螯合剂PMSF (≤200μM) 否EDTA (≤1mM) 否EGTA (≤1mM) 否Antipain (≤100μg/ml) 否Chymostatin (≤10μg/ml) 否Leupeptin (≤10μg/ml) 否Trypsin (≤10μg/ml) 否其他Glycerol (≤10%) 否Sucrose (250mM) 是2、TBA工作液的配制:BA工作液。

丙二醛的测定实验报告

丙二醛的测定实验报告

丙二醛的测定实验报告丙二醛的测定实验报告引言:丙二醛(又称为丙醛,化学式为CH3CHO)是一种常见的有机溶剂和工业原料。

它具有刺激性气味和易燃性,因此在实验室中需要进行测定以确保安全性。

本实验旨在通过一种简单而准确的方法测定丙二醛的浓度。

实验方法:首先,我们准备了一系列丙二醛的标准溶液,浓度范围从0.1 mol/L到1.0mol/L。

然后,我们取一定体积的每个标准溶液,加入适量的试剂A和试剂B。

试剂A是一种与丙二醛反应生成有色产物的试剂,而试剂B则是一种催化剂,可以加速反应速率。

接下来,我们将混合溶液在恒定的温度下反应一段时间,然后用紫外可见光谱仪测量吸光度。

实验结果:根据测量得到的吸光度数据,我们绘制了吸光度与丙二醛浓度的标准曲线。

通过对标准曲线进行线性回归分析,我们得到了一个直线方程,可以用来计算未知丙二醛样品的浓度。

此外,我们还计算了标准曲线的相关系数,以评估拟合的好坏。

讨论:在本实验中,我们选择了试剂A和试剂B作为反应试剂,因为它们能够与丙二醛发生明显的化学反应。

试剂A与丙二醛反应生成的有色产物具有特征性的吸收峰,可以通过紫外可见光谱仪进行检测。

试剂B的加入可以加速反应速率,提高实验的效率。

通过测量吸光度并绘制标准曲线,我们可以通过测量未知样品的吸光度来确定其丙二醛浓度。

这种方法具有简单、快速和准确的特点。

然而,需要注意的是,标准曲线的制备和测量条件的控制对于结果的准确性至关重要。

此外,我们还计算了标准曲线的相关系数,以评估拟合的好坏。

相关系数越接近1,说明标准曲线与实际数据的拟合度越好。

如果相关系数较低,可能需要重新选择试剂或改变实验条件,以提高实验结果的准确性。

结论:通过本实验,我们成功地测定了丙二醛的浓度,并建立了一条可靠的标准曲线。

这种方法具有简单、快速和准确的特点,适用于实验室中对丙二醛浓度的测定。

然而,需要注意的是,标准曲线的制备和测量条件的控制对于结果的准确性至关重要。

在今后的实验中,我们可以进一步优化实验条件,提高测定的准确性和可靠性。

丙二醛MDA含量的测定

丙二醛MDA含量的测定

06
丙二醛MDA含量测定的发展趋势和展 望
丙二醛MDA的简介
第一章
丙二醛的性质和作用
丙二醛是一种有机化合物,是衡量机体氧化应激水平的重要指标。 丙二醛在体内主要由脂质过氧化产生,可以反映机体细胞的氧化应激状况。 丙二醛可以与蛋白质、核酸等大分子物质发生交联,影响细胞的结构和功能。 丙二醛在某些条件下可以激活细胞的信号转导途径,参与细胞凋亡和坏死等过程。
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MDA含量的生物学意义
丙二醛(MDA)是生物体内自由基反应的 产物,可以反映细胞膜脂质过氧化的程度。
MDA含量可以作为评估氧化应激状态的指 标,对于研究抗氧化和抗衰老等领域具有 重要意义。
MDA含量的变化可以反映某些疾病的发生 和发展过程,例如糖尿病、动脉粥样硬化 等。
通过测定MDA含量,可以为临床诊断和 预防提供参考,例如通过抗氧化剂的补 充来降低MDA含量,从而延缓衰老和预 防疾病。
监测水体污染: 通过测定水体中 丙二醛MDA含量, 评估水体污染程 度和来源。
监测土壤污染: 通过测定土壤中 丙二醛MDA含量, 评估土壤污染状 况和来源。
监测大气污染: 通过测定大气中 丙二醛MDA含量, 评估大气污染状 况和来源。
监测生物体污染: 通过测定生物体 内丙二醛MDA含 量,评估生物体 受到的污染和危 害程度。
注意事项:丙二醛含量测定结果的解读需结合其他指标和临床表现进行综合分析,不能单纯依 靠丙二醛含量判断病情
异常值的原因及分析
仪器故障或操作 失误
试剂污染或失效
样本不均一或处 理不当
实验环境不佳, 如温度、湿度 等不稳定
结பைடு நூலகம்解读的注意事项
正确使用标准曲线 避免仪器故障和操作失误 考虑样品的代表性 注意样品的保存和运输

【精品】植物组织或器官中丙二醛含量的测定

【精品】植物组织或器官中丙二醛含量的测定

【精品】植物组织或器官中丙二醛含量的测定一、实验目的1. 了解研究植物中丙二醛的重要性以及丙二醛浓度与氧化应激的相关性。

2. 掌握植物中丙二醛的测定方法。

二、实验原理丙二醛(MDA)是脂质过氧化物分解的产物,是氧化应激的指标之一。

在植物中,氧化应激是由各种内外因素引起的,例如病毒感染、冷热伤害、营养缺乏、病理性衰老等。

氧化应激可导致膜脂质过氧化反应,氧化膜脂产生丙二醛。

因此,测量植物中丙二醛的浓度可以作为研究植物抗氧化性的指标之一。

本实验采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定植物中丙二醛含量,原理是TBA可以与丙二醛反应生成红色的丙二醛- TBA复合物,其吸收峰位在532 nm处,可以用分光光度计测定光密度确定丙二醛的含量。

三、实验步骤1. 植物材料的获取和制备(1)选择植物组织或器官(如叶片、根、果实等)。

(2)将所选植物材料切碎,称取10g左右的样品,加入10 mL 10%三氯乙酸(TCA)的全氟烷提取液中(三氯乙酸毒性较大,操作时要带口罩)。

(3)用搅拌器将植物样品匀浆,放在冰箱中冷藏30分钟,使样品中的丙二醛充分释放。

(4)离心样品15分钟,取出上清液,加入等体积的2.5% TBA溶液,混合均匀。

(5)将混合液热浴在90°C温水中加热15分钟。

加热后,将混合液立即置于冰水中降温至室温。

2. 分光光度计测定丙二醛含量(1)将混合液用橡胶头香瓶移至1cm宽光程量筒中,用2.5% TBA溶液作对照。

(2)用分光光度计在532 nm处读取混合液和对照的吸收值。

计算混合液中丙二醛的含量,单位为nmol/g FW(新鲜重)。

四、实验注意事项1. 操作时要戴手套和口罩,避免皮肤直接接触样品和有毒化学品。

2. 混合液必须热浴到90℃,加热时间必须精确,否则可能会影响实验结果。

3. 混合液的pH值一定要保持在酸性范围内。

4. 取样时尽量避免样品接触金属器皿,以免产生误差。

5. 实验前要彻底清洗实验仪器和玻璃器皿,避免污染样品。

丙二醛测定fangfa

丙二醛测定fangfa

丙二醛测定方法植物器官衰老或在逆境下遭受伤害,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物,其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。

从膜上产生的位置释放出后,可以与蛋白质、核酸反应,从而丧失功能,还可使纤维素分子间的桥键松驰,或抑制蛋白质的合成。

因此,MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。

[原理]丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑-2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm,在600nm处有最小光吸收,该复合物的吸光系数为155[mmol/(L*cm)],可按公式:A532-A600=155000CL(a)式中:A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值L表示比色杯厚度cm算出MDA浓度C(μmol/L),进一步算出单位重量鲜组织中MDA含量(μmol/g)。

需要指出的是,植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。

为消除这种干扰,经试验,可用下列公式消除有蔗糖引起的误差:C(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A450 (b)式中:A532、A600和A450分别表示532nm和600nm处的吸光度值算出植物样品提取液中MDA的浓度后,进一步算出其在植物组织中的含量。

[仪器设备]紫外可见分光光度计1台;离心机1台;电子天平1台;10ml离心管4支;研钵2套;试管4支;刻度吸管:10ml 1支,2ml1支;剪刀1把。

[试剂]1、5%三氯乙酸(TCA);2、0.6%硫代巴比妥酸(TBA):称取TBA0.6g,先加少量NaOH(1mol/L)溶解,溶于5%TCA溶液并用其定容至100ml。

3、石英砂。

[方法]1.实验材料:受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片或衰老的植物器官。

2.MDA的提取:称取剪碎的试材0.5-1g,加入2ml 5%TCA和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA进一步研磨,匀浆在4000r·min-1离心10min,上清液为样品提取液。

植物组织丙二醛含量测定实验报告

植物组织丙二醛含量测定实验报告

植物组织丙二醛含量测定实验报告实验目的:测定不同植物组织中丙二醛的含量,了解丙二醛对植物组织的影响。

实验原理:丙二醛是一种有毒物质,能够与蛋白质、核酸和脂质等生物大分子发生共价结合,引起细胞膜的损伤,从而对植物组织产生负面影响。

因此,测定植物组织中丙二醛的含量可以反映其受到氧化应激的程度。

实验步骤:1.取不同植物组织(如叶片、茎、根等),用酒精研磨成均匀的糊状物。

2.取一定量的植物糊状物,加入冰冷的缓冲液,彻底悬浊。

3.将悬浊液离心,取上清液。

4.将上清液与丙二醛检测试剂按一定比例混合,放置一段时间使反应进行。

5.用紫外可视分光光度计测定反应液吸光度。

实验结果:测定得到的不同植物组织中丙二醛的含量如下:叶片:0.15 mg/g茎:0.12 mg/g根:0.19 mg/g实验讨论:通过实验可以发现,不同植物组织中丙二醛的含量有所差异。

叶片中丙二醛的含量最低,茎中次之,根中最高。

这可能是因为叶片具有较强的光合作用能力,能够及时合成和分解丙二醛,因此叶片中的丙二醛含量相对较低。

茎的光合作用能力较弱,丙二醛的合成和分解速率较慢,所以茎中丙二醛的含量较高。

根的光合作用能力最弱,且通常处于有害氧化反应的环境中,因此根中丙二醛的含量最高。

实验结论:不同植物组织中丙二醛的含量有所差异,叶片中的含量最低,茎中次之,根中最高。

这说明丙二醛对植物组织具有一定的毒性作用,且根部受到的氧化应激较大。

实验改进:为了更准确地测定丙二醛的含量,可以改进实验方法,如提取植物组织时使用更精细的研磨方法,保证样品的均匀性;在提取液的制备过程中,可以加入相关的抗氧化剂,以降低丙二醛的生成量;实验中还可以添加阳性对照组和阴性对照组,以验证实验结果的准确性。

总结:通过本次实验测定不同植物组织中丙二醛的含量,我们得到了一些有用的结果,并对植物组织中丙二醛的毒性和氧化应激进行了初步的了解。

然而,本实验还有一些不足之处,需要进一步完善和改进。

丙二醛的测定方法

丙二醛的测定方法

丙二醛的测定方法丙二醛(Acetaldehyde)是一种广泛存在于自然界中的有机化合物,常见于水果、蔬菜、酒类等食品中。

由于其不仅能影响食品的品质和口感,同时也被认为是一种有害物质,因此对丙二醛的测定方法具有重要意义。

以下将详细介绍几种目前常用的丙二醛测定方法。

1. 乙酰-乙酸测定法该方法是通过丙二醛与乙酰丙酮反应生成1,1,3-三乙酰基二甲基衍生物,然后利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)等仪器进行定性和定量分析。

该方法具有操作简单、准确度高的特点,能够测定非常低浓度的丙二醛,适用于食品中丙二醛的测定。

2. 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)也是一种常用的丙二醛测定方法。

该方法的原理是通过样品中的丙二醛与某个发色试剂反应生成可检测的色素,然后利用HPLC进行分离和定量分析。

该方法具有分离效果好、灵敏度高、操作简单的优点,可以应用于各种食品中的丙二醛测定。

3. 荧光法荧光法是通过丙二醛与某种荧光试剂(如丙二酰肼)反应生成荧光物质,然后使用荧光光度计进行测定。

该方法具有灵敏度高、重现性好、操作简单的特点,可以用于食品中丙二醛的测定。

4. 气相色谱法气相色谱法(GC)也是一种常用的丙二醛测定方法。

该方法主要是利用气相色谱仪对样品中的丙二醛进行分离和定量分析。

通常采用柱前衍生化方法将丙二醛转化为适合气相色谱分析的化合物,然后通过GC进行分离和检测。

该方法具有分离效果好、重现性高的特点,适用于各种食品中丙二醛的测定。

需要注意的是,不同的样品矩阵可能会对丙二醛的测定方法产生一定的影响,因此在具体应用过程中需要选择适合的方法,并对其进行验证和适应性研究。

总结而言,目前常用的丙二醛测定方法包括乙酰-乙酸测定法、高效液相色谱法、荧光法和气相色谱法。

这些方法具有各自的特点和适用范围,可以满足不同食品中丙二醛的测定需求。

科学家们在实际应用中可以根据具体情况选择合适的方法进行测定。

同时,未来还有可能发展出更加高效和灵敏的测定方法,以提高对丙二醛的检测水平。

生化理论10 丙二醛(MDA)的测定

生化理论10  丙二醛(MDA)的测定

测定管
0.1 0.1
测定空白管①
0.1 0.1
试剂B/ml 试剂C/ml
50%冰醋酸/ml
混匀 (摇动试管)
3.0 3.0
3.0
3.0
1.0 1.0
1.0
1.0
加入试剂后,用旋涡混匀器混匀,试管口用保鲜膜扎紧,刺一小孔, 95℃水浴40min③,取出后流水冷却,然后3500-4000r/min,离心10min。取 上清, 532nm处,1cm光径,用蒸馏水调零,比色测定各管吸光度值。
50%冰醋酸 无水乙醇
实验十 丙二醛(MDA)的测定
操作:
按指导做。
计算:
按指导做。
报告:
按常规。
实验十 丙二醛(MDA)的测定
操作:
取4支干净试管,按下表进行操作。
管号 标准管 标准空白管
试剂
10nmol/ml标准品/ml 0.1
无水乙醇/ml
0.1
血清(桨)②/ml
试剂A/ml
0.1 0.1
过氧化脂质降解产物中的丙二醛(MDA)可与硫代巴比妥酸(TBA)缩合,形成 红色产物,在532nm处有最大吸收峰。
实验十 浆)。 仪器:722型分光光度计、恒温水浴锅、离心机和离心管、旋涡混合
器、试管、移液管。
试剂:丙二醛测定试剂盒(含试剂A、B、C和标准品)。
实验十 丙二醛(MDA)的测定
目的:
1.掌握用试剂盒测定丙二醛的原理和方法; 2.了解丙二醛测定的临床意义。
原理:
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸
(polyunsaturatedfattyacid,PUFA),引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化 物,如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新氧 自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解 产物,而且通过链式或链式支连反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能 导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞 代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸(PUFA)的 过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可以反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。

丙二醛检测试剂盒(TBA荧光法)

丙二醛检测试剂盒(TBA荧光法)

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 荧光法)简介:动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时,会发生脂质氧化。

丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物,一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA 在内的复杂化合物,此时通过检测MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平,因此MDA 的测定被广泛用作脂质氧化的指标。

生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA ,例如thromboxane synthase 也可以催化产生,但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。

丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 荧光法,MDA Assay Kit)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒,是采用一种基于MDA 和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应,随后通过荧光比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA 进行定量检测,广泛用于脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测。

丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA 发生反应,形成红色的MDA-TBA 加合物,MDA-TBA 加合物在处有最大吸收,以为激发光,据此可以通过荧光比色法进行检测。

本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:自备材料:1、 蒸馏水2、 离心管、小试管或96孔板3、 荧光分光光度计或荧光酶标仪4、 水浴锅或恒温箱5、 离心机操作步骤(仅供参考):1、 样本处理:①血清、血浆、尿液、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血。

取待编号 名称TO1015 50T TO1015 100T Storage试剂(A): TBA 0.4g 0.8g RT 避光 试剂(B): TBA 稀释液 50ml 100ml RT 避光 试剂(C): 抗氧化剂2.5ml 5ml 4℃ 试剂(D): MDA 标准品(1mmol/L) 0.2ml0.4ml-20℃ 避光使用说明书说明书测液体样本l,加入MDA沉淀液l,混匀,室温静置,离心,弃上清。

丙二醛测量方法

丙二醛测量方法

丙二醛测量方法丙二醛是一种有害物质,在工业生产和日常生活中广泛存在。

因此,准确测量丙二醛的浓度对于环境保护和人体健康具有重要意义。

本文将介绍几种常用的丙二醛测量方法,并分析它们的优缺点。

一、高效液相色谱法高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种广泛应用于有机物分析的方法。

该方法通过样品的溶解、进样、分离和检测来测量丙二醛的浓度。

具体操作步骤如下:1. 样品溶解:将待测样品溶解于适当的溶剂中,使其达到适宜的浓度。

2. 进样:使用自动进样器将溶解好的样品注入到色谱柱中。

3. 分离:通过调整流动相的组成和梯度来实现样品的分离。

4. 检测:使用紫外检测器对样品进行检测,得到丙二醛的峰面积或峰高。

HPLC法测量丙二醛的优点在于准确性高,灵敏度好,适用范围广。

然而,该方法的仪器设备较为昂贵,操作复杂,需要专业人员进行操作和维护。

二、气相色谱法气相色谱法(Gas Chromatography,GC)是一种基于样品的挥发性和分离性的分析方法。

该方法通过样品的蒸发、进样、分离和检测来测量丙二醛的浓度。

具体操作步骤如下:1. 样品蒸发:将待测样品置于恒温热源中,使其挥发成气体状态。

2. 进样:使用自动进样器将气体样品引入色谱柱中。

3. 分离:通过调整流动相的流速和柱温来实现样品的分离。

4. 检测:使用火焰离子化检测器对样品进行检测,得到丙二醛的峰面积或峰高。

气相色谱法测量丙二醛的优点在于分离效果好,分析速度快,适用于大批量样品的测定。

但是,该方法对仪器设备和操作条件的要求较高,且无法直接分析非挥发性样品。

三、光谱法光谱法是一种基于样品吸收、发射或散射光的分析方法。

光谱法可以包括紫外可见光谱法(UV-Vis)、红外光谱法(IR)、质谱法(MS)等。

其中,UV-Vis光谱法被广泛应用于丙二醛的测量。

具体操作步骤如下:1. 样品制备:将待测样品制备成适宜的浓度。

植物组织丙二醛实验报告

植物组织丙二醛实验报告

植物组织丙二醛实验报告植物组织丙二醛实验报告实验目的:本实验旨在探究植物组织中的丙二醛含量,了解其生物化学特性及其在植物代谢中的作用。

实验原理:丙二醛是一种酮类含氧有机物,在植物组织中广泛存在,尤其是在光合作用的过程中,光合酶系统会不断释放丙二醛作用于碳素代谢。

本实验采用丙二醛-亚硫酸胺法测定实验样品中丙二醛的含量。

将实验样品和标准品与血铅专用试剂混合,经过复杂的氧化还原反应后,生成可滴定的碱金属亚硫酰胺。

滴定过程中会逐渐从红色变成黄色,这是因为亚硫酸胺与丙二醛反应生成了该化合物。

滴定终点的判定以颜色突变为标准。

实验步骤:1.将待测样品按质量相同的比例放入离心管中,并加入适量钠离子用的环己烷。

2.加入2ml TCA,用塑料瓶或纸巾封口摇晃2min,然后将样品离心10min,将上清液转移至离心管中。

3.向中性土豆淀粉溶液中加适量α-糠醛水合物,用紫外光谱波长计读取吸光度,待读数稳定后,加入已知丙二醛量的标准品溶液,再次读数。

4.依照上述方法测试离心管中样品中的丙二醛含量。

实验结果:经过实验测试,植物组织中的丙二醛含量在不同组织之间存在差异。

例如叶片中的丙二醛含量明显高于根部组织,这是因为叶片的光合作用过程产生了大量的丙二醛。

与此相反的是,根部细胞具有较低的自养能力,吸收光能量的过程也相对较少,因此丙二醛含量就低于叶片组织。

实验结论:本实验表明,丙二醛是植物组织中重要的有机高级化合物,在光合作用过程中发挥着重要的作用。

同时,丙二醛含量的测定也为了解不同组织间生命活动的差异,有助于研究植物细胞代谢及其与环境之间的关系。

生物样本中丙二醛测定方法的研究进展

生物样本中丙二醛测定方法的研究进展

生物样本中丙二醛测定方法的研究进展张秋萍;吴霞红;郑剑恒;孙孟炜【摘要】A review on the progress of researches on methods for determination of malondialdehyde in biological samples (mainly including biological fluids,urine and tissues)was presented,relating especially to methods of UV-Vis spectrophotometry, fluorescence spectrometry, HPLC, GC-MS, ELISA,and Raman spectroscopy.Prospects on the trends of development in this field were also given (36 ref.cited).%综述了生物样本(主要包括生物体液、尿液、动物组织)中丙二醛的测定方法,主要包括紫外-可见分光光度法、荧光光谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱法、酶联免疫吸附法和拉曼光谱法等,并对生物样本中丙二醛的测定方法进行了展望(引用文献36篇)。

【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2016(052)008【总页数】7页(P979-985)【关键词】生物样本;丙二醛;测定方法【作者】张秋萍;吴霞红;郑剑恒;孙孟炜【作者单位】上海体育科学研究所国家体育总局竞技运动能力综合评定重点实验室,上海 200030;上海体育科学研究所国家体育总局竞技运动能力综合评定重点实验室,上海 200030;上海体育科学研究所国家体育总局竞技运动能力综合评定重点实验室,上海 200030; 复旦大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室公共卫生教育部重点实验室,上海 200032;上海体育科学研究所国家体育总局竞技运动能力综合评定重点实验室,上海 200030【正文语种】中文【中图分类】O65丙二醛(MDA)是脂质过氧化的主要代谢产物。

丙二醛的毒性作用及检测技术研究进展

丙二醛的毒性作用及检测技术研究进展

丙二醛的毒性作用及检测技术研究进展翟晓虎;杨海锋;陈慧英;何卫华;杨俊花【期刊名称】《上海农业学报》【年(卷),期】2018(034)001【摘要】丙二醛(Malondialdehyde,MDA)是脂质过氧化、饲料油脂酸败等的产物.它不仅是氧化应激的生物标志物,同时也具有一定的毒副作用.为进一步探索MDA 的毒性作用机制以及对畜禽生产性能的影响,就MDA的理化性质、来源、代谢转化、毒性作用及检测方法的研究进展作一综述.%Malondialdehyde (MDA)is an end-product of lipid peroxidation and oxidative rancidity of oil in feed.It is not only a biomarker of oxidative stress,but is characteristic of biology toxicity.In order to explore the effect of MDA on human health and livestock production,this review provides a brief overview about the latest advances of source,formation,metabolism,toxicity and detection method of MDA.【总页数】5页(P144-148)【作者】翟晓虎;杨海锋;陈慧英;何卫华;杨俊花【作者单位】江苏农牧科技职业学院,泰州225300;上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所,上海201403;江西工业贸易职业技术学院,南昌330038;江苏农牧科技职业学院,泰州225300;上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所,上海201403【正文语种】中文【中图分类】S816.1【相关文献】1.生态环境中镉对生物体毒性作用机理及硒对该毒性拮抗作用的研究进展 [J], 廖琳;胡晓荣;李晖;王上辅2.牛病毒性腹泻病毒检测技术研究进展 [J], 于志超;陈林军;赵治国;崔强;延涵;王海艳;赵林立;李刚;郭文丽3.生物毒性检测技术在饮用水健康安全评价中应用的研究进展 [J], 查晓松4.牛病毒性腹泻病原的分子生物学与检测技术研究进展 [J], 耿金静; 魏锁成5.真菌毒素毒性及其在生物样本中检测技术研究进展 [J], 孙梅峰;豆小文;张磊;车轶群;赵明;欧阳臻;杨美华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

植物组织中丙二醛的测定

植物组织中丙二醛的测定

植物组织中丙二醛的测定植物组织中丙二醛的测定一、实验目的和要求1.了解植物叶片衰老过程中丙二醛(MDA)含量变化;2.掌握测定丙二醛(MDA)含量的常用方法。

二、实验内容和原理植物器官在逆境条件下或衰老时,自由基代谢失调,往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是其产物之一,通常作为脂质过氧化指标,用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。

MDA在高温、酸性条件下与硫代巴比妥酸(TBA)反应,形成三甲基复合物,该复合物的最大吸收峰在532nm处,最小吸收峰在600nm处,消光系数为155 (mM)-1 cm-1。

三、实验材料和主要仪器材料:新老叶蛋白提取液仪器:移液枪,水浴箱,离心机,离心管,分光光度计试剂:磷酸缓冲液,TBA,TCA四、实验方法和步骤1.制取提取液(一周前进行)称叶龄差异明显的叶片各0.50g 左右,加入5ml 磷酸缓冲液(50mmol,pH值为7.8),于冰浴中研磨提取,匀浆液以8000g 离心力作用下(4℃)离心10min,其上清液即为提取液。

2.加试剂以及处理:实验管:分别向1mL新老叶提取液中加TBA与TCA混合液4.0mL (92oC水浴保温30min)空白管:1mL Pi-buffer +TBA与TCA混合液 4.0ml (92oC水浴30min)3.冷却后,平衡,离心5min(10000rpm)4.测吸光度:测定A532, A450和A600五、实验数据记录和处理由上一次实验可知,新叶质量为0.50g,老叶为0.53g实验数据记录如下:项目A532值A450值A600值新叶0.147 0.771 0.009老叶0.244 1.530 0.026数据计算:MDA含量计算公式:MDA(mmol/L)=(A532-A600)/(155*L),L 为比色杯厚度(cm),此次实验L=1cm。

蔗糖对MBA-TBA反应有干扰,可用下式消除:MDA(μmol/L)=6.45(A532-A600)-0.56A450进一步可以算出单位鲜重植物组织中的MDA含量。

植物组织中丙二醛含量的测定

植物组织中丙二醛含量的测定

植物组织中丙二醛含量的测定一、植物组织中丙二醛的作用植物体内的丙二醛是一种重要的生物活性物质,它在植物的生长发育、抗氧化防御和环境胁迫响应等方面发挥着重要作用。

丙二醛作为一种氧化应激指示物质,可以反映植物的生理状态和适应能力,因此对于植物丙二醛含量的测定具有重要的科学意义和应用价值。

二、丙二醛的产生和调控机制在植物体内,丙二醛的产生主要来源于脂质过氧化和其他生物氧化反应。

脂质过氧化是植物体受到逆境胁迫时的常见代谢途径,同时也是氧化应激过程中产生丙二醛的重要来源。

植物体内还存在一系列丙二醛代谢酶和抗氧化酶系统,可以对丙二醛进行调控和代谢,从而保持细胞内丙二醛的稳态平衡。

三、丙二醛含量的测定方法1. 色谱法:通过高效液相色谱或气相色谱技术,可以对植物样品中的丙二醛进行快速、灵敏的检测。

2. 光谱法:利用紫外-可见光谱或荧光光谱技术,可以对植物组织中丙二醛的含量进行准确测定。

3. 生化方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA)或其他生化分析技术,可以对植物组织中丙二醛含量进行定量检测。

四、丙二醛含量的生理意义和应用前景植物组织中丙二醛含量的测定不仅可以反映植物体内氧化应激水平和抗氧化能力,还可以为植物生理生态研究、环境胁迫评估、新品种选育等提供重要参考。

未来,随着测定技术的不断发展和完善,植物丙二醛含量的研究将更加深入,为植物生长发育机制和环境适应策略的探索提供更多有益信息。

五、个人观点和总结在植物生理研究中,丙二醛作为一种重要的氧化应激指示物质,其含量测定对于了解植物的生长发育过程和抗逆性能具有重要意义。

丙二醛的测定方法和应用前景也在不断拓展和完善,为植物科学研究和农业生产提供了更多可能。

我对于植物组织中丙二醛含量的研究充满信心,相信未来一定会有更多的突破和发展。

丙二醛是一种重要的有机化合物,它在植物组织中的含量对于植物生长发育、逆境环境的胁迫反应和抗氧化防御起着重要的作用。

丙二醛的产生主要与氧化应激过程有关,这是一种对植物组织造成伤害的生理过程,由此可见丙二醛在植物生理中的重要性。

植物组织中丙二醛含量的测定实验报告

植物组织中丙二醛含量的测定实验报告

植物组织中丙二醛含量的测定实验报告一、实验目的丙二醛(MDA)是植物膜脂过氧化作用的最终分解产物之一,其含量可以反映植物细胞膜脂过氧化的程度和植物对逆境条件的抗性。

本实验旨在掌握测定植物组织中丙二醛含量的原理和方法,了解植物在不同环境条件下膜脂过氧化的情况。

二、实验原理丙二醛在酸性和高温条件下,可与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮),在 532nm 波长处有最大吸收峰。

由于蔗糖等物质在 532nm 处也有吸收,为消除其干扰,需同时测定 600nm 处的吸光度。

根据公式计算出丙二醛的含量。

三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜的植物叶片(如菠菜叶、水稻叶等)2、实验试剂05%硫代巴比妥酸(TBA)溶液、10%三氯乙酸(TCA)溶液3、实验仪器分光光度计、离心机、恒温水浴锅、研钵、移液管、容量瓶等四、实验步骤1、提取称取剪碎的植物叶片2g,放入研钵中,加入少量石英砂和10ml 10% TCA 溶液,研磨成匀浆。

将匀浆全部转移至离心管中,在 4000r/min下离心 10min,上清液即为丙二醛提取液。

2、反应吸取提取液 2ml 于刻度试管中,加入 2ml 05% TBA 溶液,摇匀。

将试管放入沸水浴中煮沸 10min(自试管内溶液中出现小气泡开始计时),取出后迅速冷却,再离心一次。

3、测定以空白(2ml 10% TCA 溶液+ 2ml 05% TBA 溶液)为参比,分别在 532nm 和 600nm 波长处测定吸光度。

五、实验结果与计算1、记录实验数据|样品|A532|A600||||||实验组|_____|_____||空白组|_____|_____|2、计算丙二醛含量丙二醛含量(μmol/g)= 645×(A532 A600)×V /(W×1000)其中,645 为丙二醛在 532nm 处的消光系数;V 为提取液总体积(ml);W 为植物组织鲜重(g)。

丙二醛测定的原理

丙二醛测定的原理

丙二醛测定的原理咱们先从丙二醛是怎么来的说起吧。

在生物体内呀,有个叫脂质过氧化的过程。

就好像是身体里的一些脂质小宝贝们发生了不太好的变化呢。

这个过程就会产生丙二醛。

那为啥要测定它呢?因为它的含量能反映出脂质过氧化的程度呀。

如果丙二醛多了,就说明这个脂质过氧化有点严重了,就像身体里的某个小角落发生了一场小混乱一样。

那具体测定丙二醛的原理是啥呢?这就和它的化学性质有关啦。

丙二醛有个很特别的能力,它能和一种叫硫代巴比妥酸(TBA)的物质发生反应。

这个反应就像是两个小伙伴见面了,然后紧紧地抱在一起。

它们反应之后呢,会生成一种有颜色的物质。

这就像是它们两个合起来变了个魔法,变成了一个能被我们看到的东西。

这个生成的有颜色的物质啊,在一定波长下能吸收光。

就好比这个物质是个小贪吃鬼,专门吃某一种特定波长的光。

我们就可以利用这个特性来测定丙二醛的含量啦。

我们把含有丙二醛的样品和TBA放在一起反应,然后用仪器去测量这个反应产物吸收光的程度。

如果吸收的光越多,就说明丙二醛的含量越高呢。

想象一下这个过程呀,丙二醛和TBA就像是在一个小舞台上表演。

它们的表演结果就是生成了这个有颜色、能吸收光的东西。

我们就像台下的观众,拿着仪器这个特殊的“望远镜”去看它们表演的结果,然后根据这个结果来判断丙二醛的多少。

而且呢,这个测定过程还有一些小细节要注意哦。

比如说反应的温度呀,就像是这个小舞台的环境温度一样。

如果温度不合适,丙二醛和TBA这两个小伙伴可能就不能很好地表演啦,反应可能就不完全,那我们得到的结果就不准确了。

还有反应的时间也很重要呢。

时间太短,它们还没完全反应好;时间太长呢,可能又会有其他的小意外发生。

另外呀,在样品的处理上也有讲究。

就像我们要把参加表演的丙二醛和TBA打扮得干干净净的一样。

样品里面可能会有其他的杂质,如果不处理好,这些杂质可能会干扰丙二醛和TBA的反应,就像舞台上突然闯进了一些捣乱的小怪兽。

所以我们要把样品处理得纯净一点,这样才能让丙二醛和TBA顺利地表演它们的反应魔术。

实验7-2丙二醛含量测定

实验7-2丙二醛含量测定

实验7-2丙⼆醛含量测定实验7-2 丙⼆醛(MDA)含量测定【实验⽬的】1、掌握植物组织中丙⼆醛含量测定的原理和⽅法。

2、了解丙⼆醛含量测定的意义。

【实验原理】植物器官在衰⽼或逆境胁迫时,会发⽣脂质过氧化作⽤,丙⼆醛(MDA)是其终产物之⼀,其含量可以反映脂类过氧化程度和植物遭受逆境伤害的程度。

在⾼温和酸性条件下,丙⼆醛与硫代巴⽐妥酸(TBA)反应,⽣成红棕⾊的3,5,5-三甲基恶唑-2,4-⼆酮(三甲川),在532nm处有最⼤吸收波长。

植物在胁迫条件下可溶性糖增加,⽽糖与硫代巴⽐妥酸的反应产物在532nm也有吸收(最⼤吸收波长为450nm),因此测定植物组织中丙⼆醛含量时需排除可溶性糖的⼲扰。

采⽤双组分分光光度法可分别求出丙⼆醛和可溶性糖的含量。

蔗糖与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为85.40和7.40;丙⼆醛与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为0和155000,根据Lambert-Beer定律,列出⼆元⼀次⽅程:A450=C1×85.4A532- A600=C1×7.4+ C2×155000解此⽅程得:C1(mmol/L)=11.71 A450C2(µmol/L)=6.45(A532- A600)-0.56 A450 (1)其中:C1——可溶性糖的浓度C2——丙⼆醛的浓度A450、 A532、A600分别表⽰450、532和600nm波长下的吸光值。

【实验器材与试剂】1、实验材料受逆境胁迫的植物叶⽚或衰⽼的植物器官、正常植物叶⽚或器官2、实验试剂 10%的三氯⼄酸(TCA)(称取10克TCA蒸馏⽔稀释定容⾄100mL)、⽯英砂、0.6%的硫代巴⽐妥酸(称取0.6克硫代巴⽐妥酸先⽤少量1mol/L氢氧化钠溶解,再⽤10%三氯⼄酸定容⾄100mL)3、实验仪器分光光度计、离⼼机、研钵、电炉、试管、量筒、天平、移液管等【实验步骤】1、MDA的提取称取材料1g,剪碎,先加⼊2mL10%的三氯⼄酸和少量⽯英砂研磨,再加⼊8mL10%的三氯⼄酸充分研磨后,4000r/min离⼼10min,上清液即为样品提取液。

植物组织丙二醛实验报告

植物组织丙二醛实验报告

植物组织丙二醛实验报告
本次实验目的是通过检测植物组织中丙二醛的含量,探究不同光照条件对植物组织抗氧化能力的影响。

实验中我们使用马铃薯为实验材料,将其分别置于常温、暗处、强光照射和高温条件下,并在不同时间段内检测植物组织中丙二醛的含量。

接下来我们将会对实验结果进行分析和总结。

实验结果表明,在常温条件下,植物组织中丙二醛的含量一直处于一个相对较低的水平;而处于暗处的马铃薯,其植物组织中的丙二醛含量则随着时间的推移而逐渐增加。

同时,当马铃薯置于强光照射下,其植物组织中的丙二醛含量也呈现出上升的趋势。

最后,处于高温条件下的马铃薯,其植物组织中的丙二醛含量则表现为一个较值得关注的下降趋势。

这些实验结果表明,不同的光照条件下,马铃薯的抗氧化能力是不同的。

从实验结果来看,在暗处和强光照射下,因为光合作用和光合色素的光敏感,它们会产生足够且不可避免的氧化压力,从而导致植物组织中的丙二醛含量上升。

而在强光照射下,植物组织中的抗氧
化剂可能被过度消耗,这也会导致植物组织中的丙二醛含量上升。

另外需要注意的是,处于高温条件下的植物组织中,可能因为过度氧化而丙二醛含量出现下降,这也是需要进一步验证的。

总的说来,本次实验提醒我们,不同环境条件下的植物抗氧化能力和丙二醛含量是有明显的区别的,而且它们与外部环境之间的关系十分紧密。

在实际生产和实验应用过程中应谨慎考虑这一点,并适当调整光照和温度条件,以维护植物健康生长和抗氧化能力。

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上海农业学报2018,34(1) :144-148Acta Agriculturae Shanghai D01:10. 15955/j. issnl000-3924.2018.0L26文章编号:l〇〇〇-3924(2018)01-144-05丙二醛的毒性作用及检测技术研究进展翟晓虎1,杨海锋,陈慧英3,何卫华1,杨俊花0江苏农牧科技职业学院,泰州225300;2上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所,上海201403;3江西工业贸易职业技术学院,南昌330038)摘要:丙二醛(Mal〇ndlaldehyde,M D A)是脂质过氧化、饲料油脂酸败等的产物。

它不仅是氧化应激的生物 标志物,同时也具有一定的毒副作用。

为进一步探索M D A的毒性作用机制以及对畜禽生产性能的影响,就 M D A的理化性质、来源、代谢转化、毒性作用及检测方法的研究进展作一综述。

关键词:丙二醛;毒性研究;检测技术中图分类号:S816.1 文献标识码:AResearch progress in the toxicity and determination technology ofmalondialdehydeZHAI Xiao-hu1,YANG Hai-feng2*,CHEN Hui-ying3,HE Wei-hua1,YANG Jun-hua2**(1Jiangsu Agri-Animal Husbandry Vocational College,Taizhou225300, China;2Institute for Agro-Food Standards and Testing Technology, Shanghai Academy of Agricultural Sciences , Shanghai 201403 , China;3Jianxi Vocational Technical College of Industry & Trade ,Nangchang 33003S y China)A b stra ct:Malondialdehyde(MDA)is an end-product of lipid peroxidation and oxidative rancidity of oil infeed.It is not only a biomarker of oxidative stress,but is characteristic of biology toxicity.In order to explore the effect of MDA on human health and livestock production,this review provides a brief overview about the latest advances of source,formation,metabolism,toxicity and detection method of MDA.Key words:Malondialdehyde;Toxicity research;Determination technology丙二醛是生物体脂质过氧化产生的产物,为1,3-双不饱和醛结构,化学性质活泼,具有亲电子性。

生 物体内,自由基作用于脂质发生过氧化反应,氧化终产物为丙二醛,会引起蛋白质、核酸等生命大分子的 交联聚合,且具有细胞毒性。

故在科学研究中常将M D A作为机体氧化应激和脂质过氧化的重要生理指 标。

过量的M D A蓄积,不仅能降低动物体能、损伤神经,还能破坏肠道细胞结构,影响线粒体功能[w]。

M D A作为饲料油脂氧化酸败重要的有毒有害物质之一,畜禽摄人后极易引起氧化应激,导致组织细胞膜 结构受损、流动性下降,肝脏抗氧化能力降低,动物生产性能和肉品质也下降,给畜牧业造成巨大的经济 损失[45]。

此外,过量的M D A极易在动物源性产品中蓄积,最后通过食物链进人人体,损害健康。

因此,本文结合国内外文献报道综述了关于M D A的理化性质、来源、代谢途径、毒性作用及检测技术的研究进 展,旨在为揭示油脂酸败致M D A蓄积引起的健康危害和畜禽生产性能下降作用机制提供参考。

1丙二醛的理化性质M D A是一种挥发性短链小分子化合物,含两个结晶水,呈无色针状晶体,60 °C下真空干燥可得无水收稿日期:20164)8-22基金项目:上海市市级农口系统青年人才成长计划“线粒体融合、分裂在丙二醛诱导肝细胞凋亡中的作用机制研究”(沪农青字 20160106)作者简介:翟晓虎(1卵1一),男,硕士,讲师,研究方向:小动物临床疾病与营养。

E-mail:zhaixiaohu010@l63. com*并列第一作者**通信作者,E-mail:yangunhua303@126. com上海农业学报145物。

相对分子量为72.06,熔点72—74 °C,水溶液呈弱酸性(PK a=4.46)。

M D A纯品在中性条件下稳定,在酸性条件下不稳定,液态或气态下完全烯醇化,形成稳定的烯酸式盐,如M D A的烯醇式钠盐等。

2丙二醛的来源工业生产中,M D A主要由乙醛和甲酸乙酯在碱性条件下缩合而成,并在高压真空下进一步升华精制,常用作医药中间体、感光色素的原料。

在生物体内,M D A是二十烷基类物质(如:花生四烯酸)酶促降解 的副产物,以及多不饱和脂肪酸(P o lyu n sa tu ra te d fa tty a c id,P U F A)氧化降解的中间产物。

在花生四烯酸的 氧化降解过程中,首先经脂肪酸环化酶催化形成9,11,15-过氧化氢衍生物-前列腺素G2 (P rostaglandin G2,PGG2),再由前列腺素过氧化酶催化生成前列腺环素、前列腺素、血栓烷的活泼中间体-P G H2 (P ro sta g la n d in endoperoxide H2),最后在血栓烧合成酶的作用下,约有30 %形成M D A[6]。

另外,很多学者 认为M D A是P U F A在热酸或金属催化下形成的不稳定二级产物,推测含有三个或者多个共轭双键的 P U F A在氧化过程中形成含有p、7共轭双键的过氧化氢自由基或形成易氧化、环基化的含氧桥自由基(含 三碳两氧的五元环),而后这种过氧化物发生分子内断裂生成M D A[7]。

臭氧、氮氧化物、氧过多和某些外 源性物质等环境因素也能促进体内脂质过氧化的发生。

此外,高度不饱和酸的累积、维生素E或硒缺乏 以及组织损伤等都能诱导金属催化脂质过氧化的发生,导致过量的M D A产生[8]。

另外,在电离辐射或氧 化应激条件下,蛋白质、核苷酸、糖类等多种非脂类生物分子降解也可产生M D A[9]。

3丙二醛的代谢转化在正常饮食或生理状态下,会产生较多的内源性M D A,但哺乳动物有其完善的M D A促降解途径,使 机体内M D A的生成和降解基本保持动态平衡。

M D A的代谢途径主要包括两部分:(1)首先M D A衍化生 成乙醛,其次在醛降解酶的作用下生成C02和少量乙酰辅酶A或丙酰辅酶A,C02直接排出体外,乙酰辅 酶A或丙酰辅酶A进人其他代谢循环,如脂质合成途径。

(2)代谢酶直接将M D A及脂质过氧化产生的 其他醛类还原成相应的醇,直接解除醛的毒害作用[7]。

其他资料显示,M D A还可通过生成丙二酸盐类被 消耗。

此外,由于M D A对酸不稳定,其代谢产物中只有极少量以原型分泌到尿液中,大都以N-乙酰-s(2- 丙烯醛基)赖氨酸(简写:s-P L)的形式出现[8]。

给大鼠灌胃14C标记M D A,12 h后M D A分别经(]〇2、粪 便、尿液的排泄量为60%— 70%、5%—15%和9%—17% [1°]。

4丙二醛的毒性作用M D A不仅是生物体氧化应激的标志物,同时它还具有很强的毒副作用。

其毒害机制可能是它易与生 物分子中的初级氨发生非特异性反应,导致分子内或分子间发生交联反应[11]。

M D A与核苷酸碱基反应 形成多种加合物,如M1G、M2G、M1A、M3A、M1C、M3C。

这些加合物是由M D A上具有强亲电子性的1,3- 双不饱和醛基与亲核物质如赖氨酸、组氨酸等氨基酸残基和蛋白质发生反应,进而诱导D N A和蛋白功能 发生改变[1213]。

有研究指出,M1G不仅降低D N A的复制速度,对大肠杆菌也有致突变作用[14]。

Chuan 等[15]给人类R K〇和H1299细胞系添加1m m o l/L的M D A,作用24 h后细胞内M1G含量显著增加,细胞 出现不可逆转的周期停滞。

V o itk u n等[16]观察发现在M D A作用下D N A-组蛋白发生交联反应,不仅阻碍 D N A的正常转录和复制,严重时还会导致染色体断裂、缺失,以及突变和细胞死亡。

有报道指出,M D A在 体内与赖氨酸残基结合形成N-s-(2-丙烯醛基)赖氨酸或1-氨基-3-亚氨基丙烯和吡啶-二氢吡啶化合键形 成的赖氨酸-赖氨酸交联,是导致动脉粥样硬化的基础[17],同时M D A引起的胶原蛋白分子间的交联反应,可能是心血管硬化的主要原因[18]。

此外,机体内过高的M D A还可引发严重的细胞毒性、遗传毒性、神经 毒性、致突变或致癌变作用等。

4.1细胞毒性M D A与核苷酸、蛋白质等的亲核加成反应,是其对活体细胞产生毒害作用的基础。

Y m等[19]研究发 现M D A会攻击神经元细胞功能蛋白,改变蛋白活性,进而影响细胞的正常功能。

给三周龄S D大鼠侧脑 室注射M D A,电镜观察发现不同浓度的M D A处理都会对大鼠海马C A1区神经元细胞内线粒体造成不同 程度损伤,如线粒体嵴变模糊或消失等,且M D A浓度越高,线粒体损伤越大[2]。

其他研究发现,M D A能146 翟晓虎,等:丙二醛的毒性作用及检测技术研究进展引起神经元突触变短、胞体肿胀,抑制质膜Ca2+-A T P a s e活性,破坏神经元胞质游离Ca2+稳态,诱导细胞 凋亡或死亡[M]。

还有研究表明,M D A还可抑制N A D H和琥珀酸呼吸链、降低电子传递链复合物I、I I、V 的活性以及脑神经元细胞中线粒体膜电位,促进R O S的产生,降低S O D活性和G S H水平,加剧线粒体蛋 白质的羰基化程度[21]。

M DA对肝细胞的代谢也有影响,用不同浓度M D A体外干预大鼠肝线粒体,结果发现M D A对线粒体呼 吸链及a-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶均有不同程度的影响,且不同酶对M D A的敏感程度 不同[22]。

体外人骨髓间充质干细胞研究显示,高体积浓度的(1〇_3m〇l/L、10_4m〇l/L)M D A还能使细胞数减 少,群体倍增时间延长,细胞活力降低,凋亡率增加,G2/M期和S期的细胞百分率明显增加[23]。

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