分子筛纯化柱联机
实验二 PCR产物的纯化
实验二 PCR产物的纯化PCR（聚合酶链反应）是生物学和分子生物学研究中常用的技术之一，可用于从体外扩增DNA序列。
PCR产物的纯化是PCR实验中非常重要的步骤之一，它可以去除混杂的DNA序列和其他污染物，同时增强PCR产品的纯度和质量。
本文将详细介绍PCR产物的纯化步骤及相关技术。
PCR是一种非常敏感的技术，任何微小的污染物或杂质都可能产生错误的结果。
在PCR 实验中，样品中的其他DNA序列或污染物可能会影响PCR反应，因此需要对PCR产物进行纯化。
通过纯化过程，可以去除PCR反应中的非目标DNA产品和其他杂质，从而确保PCR产物的纯度和质量，使其可以作为后续实验的可靠结果。
PCR产物的纯化有许多方法，包括凝胶切割、列柱法、磁珠法等。
以下将详细介绍这些方法的原理、步骤和注意事项。
1. 凝胶切割法凝胶切割法是一种传统的PCR产物纯化方法，其原理是将PCR反应产生的DNA样品通过凝胶电泳离子色谱分离，然后切割出相关的条带，并用酸性盐溶液将DNA溶解提取。
凝胶切割法的步骤如下：(1) 进行聚丙烯酰胺凝胶电泳：将PCR反应产生的DNA样品进行凝胶电泳，用紫外线检测条带。
(2) 切割DNA条带：使用专门的切割刀进行切割，将条带剪下来。
(3) DNA溶解：使用酸性盐溶液将DNA条带进行溶解。
优点：凝胶切割法的设备成本相对较低，样品可以进行双重检测以确保纯度，同时凝胶切割法适用于大多数DNA样品。
缺点：凝胶切割法需要较长的时间来完成，同时需要熟练的技能和实验室基础。
2. 列柱法列柱法是一种常用的PCR产物纯化方法，其原理是分子筛分离DNA分子和其他污染物，从而实现DNA纯化。
(1) 列制备：购买适合的DNA纯化柱。
对于小样本或小型柱，使用破碎柱或滴漏式柱，对于大样本或大型柱，使用压力筛柱。
(2) 制备酶解混合物：将PCR产物与酶切混合，加入公认的酶解混合物。
(3) 加样：将酶解混合物加入柱，按照柱的指南进行操作。
5a分子筛 色谱柱
5a分子筛色谱柱
5A分子筛色谱柱是一种用于分离和纯化气体的色谱柱，其填充物为5A分子筛。
这种色谱柱可以用于空气的净化、天然气的净制以及正异构烷烃的分离。
在使用5A分子筛色谱柱时，需要注意选择适当的载气和流量，以保证色谱柱的正常工作。
此外，还需要对色谱柱进行定期的检查和维护，以确保其性能和寿命。
5A分子筛色谱柱的规格可以根据需要进行定制，一般包括填充物、长度、外径等参数。
其使用温度上限一般为300℃，载气流量也需要进行控制。
在安装5A分子筛色谱柱时，需要按照规定的步骤进行，包括检查载气、进样垫和衬管等，确定柱前柱后，依次套好柱螺帽、石墨垫圈、安装色谱柱，将色谱柱连接于检测器上，并确定载气流量。
此外，在选择5A分子筛色谱柱时，还需要注意其纯度和质量。
一般来说，高质量的5A分子筛色谱柱可以提供更好的分离效果和稳定性，从而得到更准确的分析结果。
分子筛与分子筛纯化系统
分子筛与分子筛纯化系统一、分子筛的品种型号分子筛（又称合成沸石）是一种硅铝酸盐多微孔晶体，它是由SiO和AIO四面体组成和框架结构。
在分子筛晶格中存在金属阳离子（如Na, K，Ca等），以平衡四面体中多余的负电荷。
分子筛的类型按其晶体结构主要分为：A型，X型，丫型等.A型主要成分是硅铝酸盐，孔径为4A（1A=10 -10米），称为4A （又称纳A型）分子筛；用Ca2+交换4A分子筛中的Na+,形成5A的孔径，即为5A （又称钙A型）分子筛；用K+交换4A 分子筛的Na+,形成3A的孔径，即为3A （又称钾A型）分子筛。
X型硅铝酸盐的晶体结构不同（硅铝比大小不一样），形成孔径为9—10A的分子筛晶体，称为13X（又称钠X型）分子筛；用Ca2+交换13X分子筛中的Na+,形成孔径为9A的分子筛晶体，称为10X （又称钙X型）分子筛丫型丫型分子筛具有X 型分子筛烃似的晶体结构，但化学组成不同（硅铝比较大）通常用于催化领域。
分子筛是一种硅铝酸盐，主要由硅铝通过氧桥连接组成空旷的骨架结构，在结构中有很多孔径均匀的孔道和排列整齐、内表面积很大的空穴。
此外还含有电价较低而离子半径较大的金属离子和化合态的水。
由于水分子在加热后连续地失去，但晶体骨架结构不变，形成了许多大小相同的空腔，空腔又有许多直径相同的微孔相连，比孔道直径小的物质分子吸附在空腔内部，而把比孔道大得分子排斥在外，从而使不同大小形状的分子分开，直到筛分分子的作用，因而称作分子筛。
它主要用于各种气体、液体的深度干燥，气体、液体的分离和提纯，催化剂载体等，因此广泛应用于炼油、石油化工、化学工业、冶金、电子、国防工业等，同时在医药、轻工、农业、环保等诸多方面，也日益广泛地得到应用。
3A型分子筛，主要用于石油裂解气、烯烃、炼气厂、油田气的干燥，是化工、医药、中空玻璃等工业用干燥剂。
化学式：2/3K2O • 1/3Na22O • AI2O3 - 2SiO2・ .9/2H2O主要用途： 1 、液体（如乙醇）的干燥2、中空玻璃中的空气干燥3、氮氢混合气体的干燥4、制冷剂的干燥4A型分子筛主要用于天然气以及各种化工气体和液体、冷冻剂、药品、电子材料以及易变物质的干燥、氩气纯化、甲烷、乙烷丙烷的分离。
蛋白质纯化方法及问题解答
蛋白质纯化一．可溶性蛋白的纯化1. 盐析硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。
用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。
高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。
各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。
这种方法称之为盐析。
盐浓度通常用饱和度来表示。
硫酸铵因其溶解度大，温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。
硫酸铵分级沉淀的方法其实很简单，一般就是用浓度从低到高的硫酸铵去沉淀蛋白，可以直接在液体里加固体的硫酸铵就可以，到一定的浓度离心沉淀，上清继续加硫酸铵，再离心，上清再加硫酸铵，然后用电泳检测或者活性检测沉淀的效果。
2. 亲和纯化2.1. Ni柱纯化2.1.1．Ni柱纯化操作流程1. 蛋白质上清与Ni柱填料在4℃下进行充分旋转混合(≥60 min)；也可以让上清液缓慢流经Ni柱（≥6 sec/drop）。
2. 上清与填料混合后，低速离心（≤ 500 x g），吸去大部分上清，然后将填料悬起，加入柱子中。
也可以直接上柱。
3. 上样后先用5-10 柱体积（CV）的lysis buffer冲洗不结合的杂蛋白，然后再用低浓度的咪唑洗去弱结合的杂蛋白。
在不知道清洗条件时可以进行咪唑浓度梯度洗脱（如10，20，30，40，50 mM），然后在纯度和得率之间选择最合适的咪唑浓度来进行清洗。
4. 清洗结束后，用高浓度咪唑（如200 mM）洗脱目的蛋白质。
5. 洗脱下来的目的蛋白质除电泳留样外，透析除去咪唑，并换成下一步所需的buffer。
6. 一般情况下his tag不需要切除。
当需要切除时：的蛋白质最少1）TEV：咪唑对其没有影响，可以在洗脱后直接酶切。
100 OD280的TEV切过夜，温度20或4℃（20℃的效率是4℃的三倍）。
可用1 OD2802) Thrombin：必须先除去咪唑才能进行酶切。
蛋白纯化柱子选择
蛋白纯化柱子选择
1. 目标蛋白的特性：首先要了解目标蛋白的分子量、等电点、疏水性等特性。
这些信息将有助于选择适合的柱子类型，例如分子筛、离子交换、亲和层析等。
2. 柱子的选择性：不同的柱子具有不同的选择性，可以根据目标蛋白与杂质之间的差异来选择柱子。
例如，离子交换柱可以根据蛋白质的电荷性质进行分离，而亲和层析柱则可以利用蛋白质与特定配体的亲和力进行纯化。
3. 柱子的容量：根据需要处理的样品量来选择柱子的容量。
柱子的容量应足够大，以满足实验需求，但也不宜过大，以免造成浪费。
4. 柱子的分辨率：分辨率是指柱子分离蛋白质混合物的能力。
对于复杂的混合物，可能需要使用具有高分辨率的柱子，如高效液相层析（HPLC）柱子。
5. 柱子的稳定性：柱子的稳定性对于长期的蛋白纯化非常重要。
选择具有良好稳定性和重复性的柱子可以确保实验结果的可靠性。
6. 柱子的价格和可获得性：不同柱子的价格差异较大，需要根据实验预算来选择合适的柱子。
同时，还要考虑柱子的可获得性，以确保实验的顺利进行。
7. 参考文献和经验：查阅相关的文献和其他研究者的经验可以提供有关不同柱子在类似实验条件下的性能信息，有助于做出更明智的选择。
综上所述，选择蛋白纯化柱子需要综合考虑目标蛋白的特性、柱子的选择性、容量、分辨率、稳定性、价格和可获得性等因素。
在选择之前，最好进行一些小规模的实验来评估不同柱子的性能，以确定最适合的柱子。
(完整word版)蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
中试分子筛层析柱
中试分子筛层析柱中试分子筛层析柱是一种重要的实验工具，用于分离和纯化混合物中的目标物质。
它利用分子筛材料的特殊吸附性能，能够有效地将混合物中的不同组分分离开来，达到目标物质的纯化和富集。
本文将详细介绍中试分子筛层析柱的原理、结构、使用方法以及注意事项，帮助读者更好地了解和使用这一实验工具。
中试分子筛层析柱的分离原理基于分子筛材料对混合物中不同组分的吸附选择性。
分子筛材料具有均匀且微细的孔道结构，能够根据不同组分的分子尺寸、形状、极性等特性进行选择性吸附。
通过调节分子筛的孔径和化学组成，可以实现对目标物质的高效富集和纯化。
中试分子筛层析柱通常由柱体、填料和进出口装置组成。
柱体由优质不锈钢制成，具有一定的强度和耐腐蚀性，能够承受一定的工作压力。
填料是分子筛材料，通常为颗粒状或颗粒状填料，能够提供大量的表面积和孔隙用于吸附分离。
进出口装置用于控制混合物的输入和目标物质的收集，确保层析过程的顺利进行。
四、使用方法1. 选择合适的填料：根据待分离混合物的特性选择合适的分子筛填料，考虑到目标物质的分子尺寸、形状和亲疏水性等因素。
2. 准备层析柱：将填料均匀放置在柱体中，注意保持填料层的均匀和紧密。
确保填料床高度合适，以充分利用分子筛的吸附性能。
3. 装入样品：将待分离的混合物按照一定的流速输入层析柱。
注意控制输入样品的浓度和流速，避免超出分子筛的吸附容量和速度。
4. 收集目标物质：通过调节流动相的组成、流速和波峰切割等方式，将目标物质以适当的时间和顺序从层析柱中收集。
五、注意事项1. 填料均匀：保持填料层的均匀和紧密，避免产生空隙和堵塞现象，以免影响分离效果。
2. 控制流速：注意控制输入样品的流速，避免高速流过导致目标物质无法完全吸附和分离。
3. 浓度适宜：根据目标物质的浓度范围，在层析过程中调整样品浓度，避免过高或过低的浓度对分离效果产生不利影响。
4. 波峰切割：合理设置流动相的组成和流速，以保证目标物质能够被完全收集，减少杂质的干扰。
分子筛纯化系统分子筛使用说明书
HXK-279000/5.8型分子筛纯化系统使用说明书二○○八年二月目录1.流程2.参数3.分子筛吸附器4.其它设备5.控制测量点及参数6.起动7.维护与管理8.故障及其排除9.流程图附1: 分子筛纯化系统随机图纸发送清册附2: 分子筛纯化系统设备发送清册HXK-279000/5.8型分子筛纯化系统使用说明书1.流程(见图1)被压缩的空气经预冷系统冷却至15℃,自下而上通过分子筛吸附器01R201A或01R201B(以下简称吸附器)时,空气中所含的H2O、C2H2、CO2、C3H6、C4H8等杂质相继被吸附清除，从而避免了这些杂质在设备和管路局部聚结、堵塞，保证了空分设备的正常运行。
净化后的空气，进入冷箱中的换热器继续换热。
吸附器是成对交替使用的，一只工作时，另一只被再生。
吸附器的再生分四步进行：第一步、降压；第二步、加热；第三步、吹冷；第四步、升压。
降压：吸附器在工作周期即将结束时，需将剩余在器内的空气排放出去。
降压是通过将KV01205阀（或KV01206阀）打开而实现的。
为了避免分子筛床层受到压力波动的冲击，降压的速度不能太快（此点不能忽视），此步完成时间不要短于8分钟。
降压是按压力联锁实现的，当PIS01201(或PIS01203)→0.010MPa时，打开再生污氮气进、出口阀KV01211、KV01213（或KV01212、KV01214）。
加热：打开KV01218阀，相应地关闭KV01217阀，使污氮气经加热器被加热到165℃以上，干燥的热污氮气在吸附器入口处温度在165℃以上，自上而下通过吸附器。
时间为90分钟。
吹冷：打开KV01217阀，相应地关闭KV01218阀，使冷的污氮气不经过加热器而旁通，吹冷用污氮气吹冷期内在吸附器入口处，温度与出主换热器的温度相同，最高为20℃。
污氮气出吸附器温度起初继续上升，待上升至100℃以后就逐渐下降。
吹冷末，污氮气出吸附器温度可下降至比工作温度高5～10℃。
蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
蛋白纯化经验
1) 硫酸铵沉淀后直接过疏水柱，应该用多大浓度的硫酸铵平衡柱子啊看你蛋白情况了,一般也就2M左右吧.挂不住就提高浓度,挂太牢就适当降低盐浓度,一般要根据实验决定.我一般就用苯基琼脂糖凝胶,一般纯化IgG用0.7M硫酸铵就可以挂住.你有个贴子中说在纯化过程中上样的样品中pH和盐浓度,以及种类等组分一定要平衡缓冲液完全相同至少相当。
我想试试你说的硫酸铵沉淀后直接过疏水柱，那我是不是要先确定复溶后样品的盐浓度再确定平衡缓冲液的盐浓度啊，如果是我怎么检测样品的盐浓度啊其实差不多就可以,也不一定特别严格,例如疏水盐浓度你的样品的盐高于平衡的也可以,但是别相差太多,尤其不能样品的盐浓度小于平衡缓冲液,这样也许挂不住,或者会产生沉淀.而缓冲液和盐浓度不同混合也许会产生沉淀,所以要小心,而一样的缓冲液体系和盐浓度可以避免这样的问题.硫酸铵沉淀后的样品,如果是上清按盐浓度稀释到你缓冲液盐浓度就可以,如果是沉淀,直接用缓冲液去溶解,沉淀里的盐可以忽略.最好的办法你可以用电导的方法去检测,只要样品的电导和你的平衡缓冲液一样就可以了.2)我在用镍柱亲和纯化后，蛋白已经比较纯了，仅在银染时能看见微弱的杂带（目的蛋白约25KD，杂蛋白约40KD)。
但我还想试试能不能完全去除杂带。
此前试过分子筛没效果，所以想试试离子交换。
想请教一下，在变性条件下可以做离子交换吗？和复性后再做比起来哪个效果好呢？非常感谢！！浓度太低一些杂带是很难出现的,所以这样的纯度很难说,我觉得得浓度高到25mg/ml左右,这样做电泳才能看得清楚些到底纯不纯.如果你是变性条件下做凝胶过滤没有意义,因为这时候蛋白是链状分子或者是不蜷曲的,不是球型,所以在这样的柱子中没有办法使他们分离,你最好的方法是优化你的亲和纯化条件,也可以在纯化前做好预处理,如果是包涵体,可以用分级沉淀的方法来初纯,亲和柱子的缓冲液中加点土温或者用pH洗脱和咪唑洗脱的方法配合,同时用阶段洗脱的方法,一般都能做得很好,用试剂盒的方法或者线性洗脱的方法有时候很难得到好的效果,你也许可以参考我们的方法,你留下邮箱我给你发一份做参考吧.我觉得离子交换也不一定好,在脲这样的变性剂下可以做离子交换,但是效果也不一定好,我觉得还是优化亲和条件更有意义.此外浓度太低很难纯化.3)重组蛋白A琼脂糖凝胶FF能一次纯化大量血清IgG吗？如几十毫升。
分子筛纯化器操作规程最新
分子筛纯化器操作规程最新操作规程：分子筛纯化器一、仪器准备1. 确保分子筛纯化器外部清洁，无异常2. 检查设备是否接地正常3. 确保仪器正常通电并连接到适当的电源4. 开启仪器电源开关，并检查仪器的运转是否正常二、样品准备1. 根据实验要求准备待处理的样品2. 将样品置于无尘环境下，并避免样品受到污染三、安装样品1. 打开分子筛纯化器的盖子，将待处理的样品放置在适当位置2. 注意将样品放置在与分子筛平行的位置，并确保样品的平整四、选择纯化模式1. 启动分子筛纯化器，进入纯化器系统界面2. 根据样品的特性选择合适的纯化模式，如大分子纯化、小分子纯化等3. 点击对应的纯化模式并确认选择五、启动纯化1. 在系统界面上设置所需的分子筛纯化器参数，如温度、流速等2. 检查设置的参数是否正确，确认后点击开始纯化按钮六、观察纯化过程1. 纯化过程中，定期观察分子筛纯化器的运行情况，确保正常运转2. 观察样品的纯化情况，注意样品是否流畅通过分子筛，并观察纯化后的样品是否符合要求七、结束纯化1. 当纯化过程结束时，停止分子筛纯化器的运行2. 将纯化后的样品取出，并妥善保存八、清洁和保养1. 关闭仪器电源开关，拔出电源插头2. 使用干净的软布清洁分子筛纯化器的外部，注意避免水分进入设备内部3. 检查设备的滤网和管道是否干净，如有污垢应及时清洗4. 定期对分子筛纯化器进行维护保养，如更换滤网、清洗管道等九、安全注意事项1. 在操作分子筛纯化器时，应戴好实验手套和护目镜，避免样品对眼睛和皮肤的直接接触2. 在使用纯化剂过程中，注意防止纯化剂的溅溢3. 在清洁分子筛纯化器时，应切断电源，并注意避免接触水分以上即是分子筛纯化器的操作规程，希望对您有所帮助。
分子筛纯化器操作规程最新
分子筛纯化器操作规程最新
《分子筛纯化器操作规程》
一、安全操作：
1. 操作人员需经过相关培训，并了解使用分子筛纯化器的操作规程及安全注意事项。
2. 检查设备及配件是否完好，确认无破损或松动，确保安全使用。
3. 在操作过程中，需佩戴安全护具，如手套、护目镜等。
4. 操作过程中禁止随意触摸设备，尤其是加热部件。
二、操作步骤：
1. 打开分子筛纯化器电源开关，待设备预热达到工作温度。
2. 将待处理溶液慢慢注入分子筛纯化器中，避免溅出或溢出。
3. 调节分子筛纯化器的工作参数，如温度和流速等，根据具体需要进行调整。
4. 待处理溶液通过分子筛纯化器后，收集出口的纯净溶液。
5. 关闭分子筛纯化器电源开关，等待设备冷却后进行清洗和保养。
三、设备清洗与保养：
1. 使用时结束后，需及时清洗分子筛纯化器，避免残留物堵塞设备。
2. 定期对分子筛纯化器进行保养和维护，如更换损坏的部件和清洗排污系统等。
3. 在长时间不使用时，需对设备进行彻底清洗和消毒，确保下次使用前设备处于干净状态。
四、事故应急处理：
1. 如出现设备故障或操作失误引起的问题，操作人员应立即停止操作并与相关技术人员联系处理。
2. 在设备故障或异常情况下，禁止私自维修或改动设备，需等待专业人员进行处理。
以上即是关于分子筛纯化器操作规程的详细内容，操作人员需严格按照规程进行操作，确保设备安全运行和产品质量。
分子筛色谱柱活化
分子筛色谱柱的活化过程包括以下几个步骤：
1. 反冲：使用20柱体积的强溶剂如二氯甲烷或异丙醇反冲色谱柱，以清除柱内的杂质和残留物。
2. 再生：用适量的有机溶剂冲洗色谱柱，以恢复柱子的原始状态。
3. 活化：将色谱柱暴露在高温下，通常在200到350度之间，进行活化。
需要注意的是，活化温度不应超过400度，否则可能会失去活性。
此外，对于5A分子筛色谱柱，其可以吸附任何小于5nm 孔径的分子，通常被称为钙分子筛，除了3A和4A分子筛外，还可以吸附C3-C4正构烷烃、乙基氯、乙基溴、丁醇等，可用于正异构体的分离、变压吸附和水的分离，同时可与二氧化碳共吸附。
以上内容仅供参考，具体操作请根据所使用的分子筛色谱柱的说明书进行。
dna纯化柱的原理
dna纯化柱的原理
DNA纯化柱的原理是基于DNA与特定载体物质（例如硅胶或硅膜）之间的相互作用力。
这些物质上的载体物质具有一些特定功能基团，如硅胶上的硅氧烷键（Si-O-Si）或硅膜上的硅
氧烷键（Si-O-Si）。
这些功能基团可以与DNA分子中的磷酸
基团相互作用，形成静电或水平排斥力。
DNA纯化柱的使用步骤通常包括细胞裂解、DNA与载体物质
的吸附、洗脱杂质和再生等过程。
首先，细胞裂解后得到的裂解液包含有DNA片段和其他细胞组分，如蛋白质、RNA和杂质。
然后，将裂解液加入DNA纯化柱中，让DNA片段与载
体物质上的功能基团进行结合，从而使DNA与其他组分分离。
此时，DNA片段会与载体物质上的功能基团通过静电或水平
排斥力相互作用。
接下来，在洗脱步骤中，使用缓冲液进行洗脱，将非特异性结合的杂质从载体物质上洗脱下来。
DNA片段则会保留在纯化
柱中。
最后，使用洗脱缓冲液或水溶液进行DNA的洗脱步骤，将纯化的DNA从载体物质中洗脱出来。
DNA纯化柱的原理是基于DNA与载体物质上的功能基团之间的相互作用力，通过调节这些相互作用力来分离纯化DNA片段。
这种纯化方法可用于从复杂的混合物中提取DNA，并广
泛应用于分子生物学和基因工程等领域中。
分子筛纯化系统的投用
分子筛纯化系统的投用分子筛纯化系统首先要进行特殊再生，走短路流程，用空气活化分子筛。
在压缩机启动前就需要将分子筛各阀门准备至正确的位置，使吸附器压力逐渐升高，升压过程缓慢进行，以防止破坏分子筛床层。
活化分子筛时的再生气量比正常加温气量适当减少。
当空分装置正常操作时，吸附器的再生气体为自上塔顶部出来的污氮气。
此时再生气V1239阀应关闭。
分子筛吸附器再生至少运行三个周期后，才能向分馏塔送气。
（必须确定二氧化碳和水份含量达到设计值）1投用前准备工作确认分子筛进出口所有阀门处于关闭状态。
2投用纯化系统（1）在DCS手动打开分子筛出口阀V1203（V1204），缓慢打开分子筛进口旁通阀V1251（V1252）给分子筛充压（注意压缩岗位保证空压机出口压力稳定）；分子筛出口压力与空冷塔出口压力一致后，关闭旁通阀及V1203（V1204），DCS上V1203（V1204）投入自动。
（2）确认分子筛程序控制阀门在自动状态。
（3）选择吸附器A再生B工作；启动分子筛程序控制。
（4）打开再生气V1239阀（刚启车是没有污氮气），控制管线压力PI1205＜20KPa,中控室注意观察再生气流量FIC1231比正常加温气量适当减少，压缩机岗位控制好空压机出口压力。
（5）检查电炉温度、再生气进分子筛的温度、再生气流量正常。
（6）再生及冷吹的调整① 分子筛的再生效果通过冷吹时TIS1201是否达到峰值130℃以上来判断，如果冷吹峰值达不到130℃，即分子筛再生效果较差时，可适当开大开工再生气阀，增加再生气的流量或者适当提高再生气温度，加大进分子筛的再生热量，提高再生效果。
特殊情况下可适当延长加温时间。
②如果分子筛长时间停车后再启动时，至少需要运行3个周期，以保证吸附器得到良好的再生。
（8）检查分子筛运行正常，投用分子筛出口CO2分析仪。
使出口CO2含量≤1ppm，可切换仪表空气气源。
分子筛(凝胶过滤层析)工艺流程
分子筛(凝胶过滤层析)工艺流程
分子筛（凝胶过滤层析）是一种分离和纯化大分子物质的技术。
本文将介绍分子筛的工艺流程。
第一步，制备凝胶。
凝胶是一种聚合物，可以使用不同的物质制备。
首先要选择合适的物质，然后加入交联剂制备凝胶。
凝胶可以用于不同类型的分子筛，例如大小分子筛、电荷分子筛和亲和分子筛。
第二步，制备固定化层析色谱柱。
固定化层析色谱柱由一个空心柱和一层固定化凝胶组成。
在这一步中，要将凝胶灌入空心柱中，并在柱底放置过滤器以减小凝胶颗粒外溢的风险。
之后，将柱放入固定化设备中，加热激活它。
第三步，样品制备。
取样品并将其纯化和浓缩。
这可以通过离心和冻干等方式实现。
纯化过后的样品可以溶解后注入至分子筛柱。
第四步，运行分子筛。
将样品注入至分子筛柱中，并让样品通过柱。
样品的分子会被分离出来并在某一时刻被洗掉。
不同类型的分子筛可以用于不同类型的分子。
第五步，分离产物收集。
收集分离出的产物以便后续的研究或应用。
这些产物可以存储或进一步操作。
总的来说，制备凝胶、制备固定化层析色谱柱、样品制备、运行分子筛和分离产物收集是分子筛的主要工艺流程。
不同类型的分子筛和样品需要不同的操作和步骤。
但总体上，这些步骤都需要精细操作和严密的注意事项，以确保产物的纯度和准确性。
分子筛层析原理
分子筛层析原理
分子筛层析是一种常用的分离和纯化技术，它基于分子筛的特性，利用分子大小和形状的差异来实现对混合物中成分的分离。
分
子筛层析原理的核心在于分子筛材料的选择和操作条件的控制，下
面将详细介绍分子筛层析的原理和应用。
首先，分子筛是一种多孔晶体材料，具有规则的孔道结构，孔
径大小可控。
这种孔道结构使得分子筛具有选择性吸附和分离分子
的能力。
在分子筛层析中，混合物通过分子筛柱时，分子筛的孔道
能够选择性地吸附不同大小和形状的分子，从而实现分离。
其次，分子筛层析的原理基于分子与分子筛之间的相互作用。
分子筛的孔道大小和形状决定了其对分子的选择性吸附能力，较小
的分子可以更容易地进入孔道并被吸附，而较大的分子则会被排斥。
因此，通过合理选择分子筛材料和优化操作条件，可以实现对混合
物中不同分子的分离和纯化。
另外，分子筛层析在实际应用中具有广泛的用途。
例如，在生
物技术领域，分子筛层析被广泛应用于蛋白质纯化和分离；在化工
工艺中，分子筛层析可以用于分离和提纯化学品；在制药工业中，
分子筛层析也被用于药物分离和纯化。
这些应用都充分展现了分子筛层析在分子分离和纯化中的重要作用。
总的来说，分子筛层析原理是基于分子筛材料的选择性吸附和分子与分子筛之间的相互作用，通过合理选择分子筛材料和优化操作条件，实现对混合物中不同分子的分离和纯化。
分子筛层析在生物技术、化工工艺、制药工业等领域具有广泛的应用前景，为分子分离和纯化提供了重要的技术支持。
分子筛层析原理
分子筛层析原理分子筛层析是一种基于分子筛材料的分离技术，其原理是利用分子筛对分子的大小、形状和亲疏水性进行选择性吸附和解吸，从而实现对混合物中不同成分的分离和纯化。
分子筛层析技术在化工、生物制药、食品和环境领域有着广泛的应用，能够高效地分离和纯化目标物质，具有重要的科研和工业价值。
分子筛层析的原理基于分子筛材料的孔隙结构和表面性质。
分子筛是一种具有有序孔道结构的多孔材料，其孔径大小和形状能够选择性地吸附不同大小和形状的分子。
在分子筛层析过程中，混合物溶液首先被加入到分子筛层析柱中，然后通过对溶液施加压力或者利用重力作用，使溶液在分子筛柱中流动。
在流动过程中，分子筛对溶液中的不同成分进行选择性吸附，从而实现混合物的分离。
当目标物质被吸附到分子筛表面后，可以通过改变溶剂成分、温度或者压力等条件来实现目标物质的解吸和纯化。
分子筛层析的分离原理主要包括分子尺寸排斥效应、亲疏水性选择效应和分子筛表面作用等。
分子尺寸排斥效应是指分子筛对溶液中分子的大小进行选择性排斥，从而使得较大分子无法进入分子筛孔道，而较小分子可以被有效地吸附。
亲疏水性选择效应是指分子筛对溶液中分子的亲疏水性进行选择性吸附，从而使得亲水性或疏水性分子能够被选择性地吸附。
分子筛表面作用是指分子筛表面的化学性质对溶液中分子的吸附和解吸起着重要作用，通过改变分子筛表面的化学性质可以实现对目标物质的选择性吸附和纯化。
分子筛层析技术具有高效、选择性强、操作简便等优点，能够实现对混合物中不同成分的分离和纯化。
在生物制药领域，分子筛层析技术被广泛应用于蛋白质纯化、生物大分子分离和纯化等方面，能够高效地分离目标蛋白质并保持其生物活性。
在化工领域，分子筛层析技术被应用于石油化工、化学品生产、环境保护等方面，能够高效地分离和纯化化学品和有机物。
在食品领域，分子筛层析技术被应用于食品添加剂的分离和纯化，能够保证食品的安全和质量。
在环境领域，分子筛层析技术被应用于污水处理、废气处理等方面，能够高效地去除污染物质和有害物质。
分子筛柱_精品文档
分子筛柱概述分子筛柱是一种常用于分离和纯化化合物的工具，它基于分子筛技术，通过对分子大小、形状和极性的选择性吸附，实现对混合物中组分的分离。
分子筛柱在化学合成、制药工业、环境分析等领域具有广泛的应用。
原理分子筛柱基于分子筛材料的吸附性质，特定尺寸的分子可以被分子筛吸附，而较大的分子则无法进入或通过分子筛。
这种选择性吸附的原理使得分子筛柱成为一种常用的分离技术。
分子筛材料是一种多孔固体，具有规则的晶体结构。
它的孔径大小可以通过调整合成过程中的条件来控制，从纳米至微米级别都有可能。
这使得分子筛柱可以选择性地吸附特定尺寸的分子。
分子筛柱的分离过程包括样品的装载、流动相的通入和洗脱物的收集。
样品在柱内通过重力或压力的作用下，从顶部缓慢进入柱内，随着流动相的通入，分子筛材料上的目标分子被选择性地吸附。
其他组分则通过柱底部的出口流出。
材料分子筛柱的核心材料是分子筛。
常用的分子筛材料包括沸石、硅铝酸盐和分子筛聚合物等。
选择适合的分子筛材料取决于需要分离的化合物的性质和分子尺寸。
此外，分子筛柱还需要柱体和柱床材料。
柱体通常由不锈钢或玻璃制成，具有一定的耐压性和耐腐蚀性。
柱床材料可以是硅胶、石英或聚合物微球等，用于支撑和固定分子筛材料。
操作步骤以下是使用分子筛柱进行分离和纯化的一般步骤：1.准备柱床：在分子筛柱内制备均匀的柱床。
首先在柱体底部加入滤芯，然后将合适的柱床材料装入柱体中，并用适当的压力或重力固定。
2.样品装载：在柱床上缓慢而均匀地将需要分离的混合物溶液加入。
3.流动相通入：通过柱床上部的进样口，缓慢地将流动相通入柱内，使样品开始在柱床上流动。
4.分离：样品在流动相作用下，在柱床中向下流动。
目标分子被分子筛材料选择性地吸附，而其他组分则通过柱底部的出口流出。
5.洗脱：一旦分离完成，可以使用洗脱剂将目标分子从分子筛材料上洗脱下来，收集洗脱物。
6.收集：将洗脱物收集起来，即可得到纯化后的目标化合物。
应用领域分子筛柱在许多领域都有广泛的应用，其中包括：•化学合成：分子筛柱可用于合成中间体的纯化和分离，提高合成产物的纯度和收率。
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How to remove the storage/shipping device. (1) Push down the spring-loaded cap (2) Remove the locking pin (3) Release the cap and unscrew the
device
How to refill the storage/shipping device. (1) Connect a syringe or pump to the
50 mM phosphate buffer, 0.15 M NaCl, pH 7.0
Flow rate: Sample volume:
0.5–0.75 ml/min, room temperature 25 µl
Equilibration is not necessary between runs with the same eluent buffer. Read the section “Optimization” for information on how to optimize a separation.
First-time use
Sample volume Preparation
25–500 µl
Dissolve the sample in eluent, filter through a 0.22 µm filter or centrifuge at 10 000 g for 10 min.
1 2
Cleaning
Column data
Acetonitrile, up to 30% Sodium hydroxide, up to 1 M
Matrix
Composite of cross-linked agarose and dextran
Ethanol, up to 70%
Bed dimensions Bed volume Column efficiency, N/M Average Particle Size
Instructions 71-5017-96 AK
High Performance Columns
17-5174-01 SuperdexTM 75 10/300 GL and 17-5175-01 Superdex 200 10/300 GL
Try these conditions first
Eluent:
Before connecting the column to a chromatography system, ensure there is no air in the tubing and valves. Remove the storage/shipping device and the stop plug from the column. Check that the upper adapter is locked (locking ring pressed down, see figure 1). Make sure that the column inlet is filled with liquid and connect it drop-todrop to the system.
Buffers and solvent resistance
Install an on-line filter before the injection valve. Buffers and solvents with increased viscosity will affect the back-pressure and flow rate. De-gas and filter all solutions through a 0.22 µm filter.
Daily use
All commonly used aqueous buffers, pH 3–12
Urea, up to 8 M
Quick information
Superdex 75 10/300 GL and Superdex 200 10/300 GL are Tricorn™ high performance columns. The columns are pre-packed glass columns for high performance gel filtration of proteins, peptides, DNA fragments (<200 bp) and other biomolecules.
The glass tube is coated with a protecting plastic film. Small quantities of air may occasionally be trapped between the glass and the film during manufacture. The resulting uneven surface does not affect column performance or durability.
FPLC system.
Acetonitrile, up to 30% in aqueous buffers Ionic and non-ionic detergents Guanidine hydrochloride, up to 6 M Trifluoroacetic acid, up to 10% Formic acid, up to 70%
Temperature operating storage
3 to 12 1 to 14
4 ºC to 40 ºC 4 ºC to 30 ºC Superdex 75
Superdex 200
Hydrochloric acid, up to 0.1 M
Avoid: Oxidizing agents Unn limit, Mr,
Approx. 1 × 105
Approx. 1.3 × 106
q
q
globular proteins
Optimum separation range globular proteins, Mr dextrans
3 000–70 000 500–30 000
10 000–600 000 1000–100 000
Choice of eluent
Select an eluent that ensures the sample is fully soluble. Also try to choose an eluent that will simplify downstream applications. For example, if the proteins/ peptides are to be lyophilized, a volatile eluent is necessary. As certain pH 7.0 dependent interactions can occur with both acidic and basic proteins at very low salt concentrations, a recommended buffer is 50 mM sodium phosphate, 0.15 M NaCl, pH 7.0. Table 1 lists some useful eluent compositions.
Note: Ensure that the back-pressure over the column does not exceed the maximum recommended pressure (1.8 MPa for Superdex 75 and 1.5 MPa for Superdex 200). This is particularly important when working at low temperatures, like in cold room.
Flow rate (water at room temperature) recommended maximum
Pressure over column maximum
0.5–1.0 ml/min 1.5 ml/min
1.8 MPa, 18 bar, 261 psi
0.25–0.75 ml/min 1 ml/min
In-depth information
Delivery/storage
The column is delivered with a storage/shipping device that keeps the pressure in the column and thereby prevents it from drying out. The column is equilibrated with degassed 20% ethanol.
If the column is to be stored for more than 2 days after use, wash the column with 2 column volumes of distilled water and then equilibrate with at least 2 column volumes of 20% ethanol. We recommend that you connect the storage/shipping device according to “How to connect the storage/shipping device” for long term storage.
10 × 300–310 mm Approximately 24 ml >30 000 m -1 13 µm
Methanol, up to 100% Acetic acid, up to 1 M Isopropanol, up to 30%