6 铁的比色测定
邻二氮菲分光光度法测定微量铁_6
实验二邻二氮菲分光光度法测定微量铁试验目的1.掌握紫外可见分光光度计的基本操作。
2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法。
3.掌握吸收曲线绘制及最大吸收波长的选择。
4.掌握标准曲线的绘制及应用。
实验原理邻二氮菲（1,10-邻二氮杂菲）是一种有机配位剂，可与Fe离子形成红色配位离子：在pH=3~9范围内，该反应迅速完成，生成的红色配位离子在510nm 波长附近有一吸收峰，摩尔吸收系数为1.1*104，反应十分灵敏，Fe2+离子浓度与吸光度符合光吸收定律，适合于微量铁的测定。
实验中，采用pH=4.5~5的缓冲溶液保持标准系列溶液与样品溶液的酸度，采用盐酸羟胺还原标准液及样品溶液中的Fe3+离子并防止测定过程中二价铁离子被空气氧化。
实验仪器与试剂1.V-1100D型可见分光光度计2.标准铁储备溶液（1.00×10-3mol/L）3.邻二氮菲溶液（0.15%，新鲜配制）4.盐酸羟胺溶液（10%，新鲜配制）5.醋酸盐缓冲液6.50ml容量瓶7个7.5ml移液管4只8.1cm玻璃比色皿2个9.铁样品溶液实验步骤1.标准系列溶液及样品溶液配制：按照下表配制标准系列溶液及样品溶液。
2.吸收曲线绘制：用1cm的比色皿，以1号溶液作为参比溶液，测定4号溶液在不同波长下的吸光度，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标制图，绘制吸收曲线，并从吸收曲线上找出最大吸收波长。
3.标准曲线制作：在选定的最大吸收波长处，用1cm比色皿，以1号溶液作为参比溶液，分别测定2~7号溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，系列标准溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线。
实验数据处理与结果1.吸收曲线：2.标准曲线：样品铁溶液中铁含量计算：Cx=C 读取值×50.200.50=9.9×10-4mol/L摩尔系数计算：ε=1212C C A A --=1.219×104 实验思考与讨论1.标准曲线的线性不好的原因：所选标准溶液的浓度可能只有一部分在线性范围内，该实验5、6号之间的线性不是很好，很大的原因可能是它们之间的某一浓度之后便超出了线性的范围。
实验_邻二氮菲分光光度法测定铁
实验邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1 掌握研究显色反应的一般方法；2 测定未知试样中的铁含量．二、实验原理由于某些无机离子本身没有颜色或者浓度低颜色过浅，其吸光值与浓度的关系不在线形范围内，则需要显色剂与被测物形成有色配合物。
该配合物的浓度与吸光度能够符合朗伯比尔定律。
因而可以间接测定出被测物的浓度。
(1) 显色剂与被测物的λmax应相距60 nm以上(2) 显色剂的用量：a保证显色完全，b用量过多会产生副反应(3) 显色时间：有些反应瞬时完成，溶液颜色很快达到平衡状态，并长时间保持不变．有些能迅速完成，但褪色较快，有些反应则较慢。
(4) pH值的影响：影响显色剂的溶解和金属的离子状态，进而影响有色配合物的生成和稳定性。
HR＝H- + R+酸浓度改变，平衡移动三、实验步骤(一) 绘制吸收曲线取两个25mL容量瓶，其中一个加入0.3mL铁标准溶液，然后在两国容量瓶中各加入0.5mL盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min。
各加入1.0mL邻二氮菲溶液和2.5mL 醋酸钠溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
用水作参比溶液，分别绘制上述两种溶液的吸收曲线。
再用不含铁的试剂溶液作参比溶液，绘制有色配合物的吸收光谱。
比较上述3种吸收光谱，选取合适的测定波长。
（二）显色剂用量实验：在8个50 mL比色管中，加入0.30 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液，然后分别加入邻二氨菲溶液0，0.1，0.3，0.5，0.7，1.0，1.5和2.0 mL。
最后在个瓶中加入2.5 mL醋酸钠溶液，用水稀释至25 mL刻度，摇均，用1 mL比色皿，从不含显色剂的溶液作参比溶液，在508 nm下测定吸光度，记下各个吸光度值。
(三) pH值的影响：在7个50 mL比色管中，加入0.3 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液．静置2 min后，个加入1.0 mL邻二氨菲溶液，然后用滴定管依次加入0，2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0 mL氢氧化钠溶液，用水稀释至25 mL刻度摇均（用pH计测定上列溶液的pH值，记下其数值）．用1 cm比色皿，以水作参比溶液，在508 nm测定吸光度，记下吸光度值。
实验二 铁的比色测定
实验二 铁的比色测定（吸光光度法）一、实验目的1、学习比色分析法测定中标准曲线的绘制和试样测定方法。
2、了解分光光度计的性能，结构及使用方法。
二、实验原理Fe 2+离子在pH=3～9的水溶液中与邻菲罗啉生成稳定的橙红色的[Fe （C 12H 8N 2）3]2+螯合物：Fe 2+＋3 C 12H 8N 2=[Fe （C 12H 8N 2）3]2+（橙红色）；橙红色的络合物对光的吸收符合朗白（Lambert ）—比尔（Beer ）定律: k b C T I I A t ===1lg lg 0本实验就是利用它来比色测定亚铁的含量。
采用盐酸羟胺还原溶液中的高铁离子，即可以测定溶液中总铁量，从而求出高铁离子的含量。
三、仪器与试剂（一）仪器1、72型或721型等分光光度计或UV-VIS 光谱仪。
2、玻璃比色皿（1cm ）。
3、比色管或容量瓶（50mL 等)，比色管架。
4、烧杯，洗瓶，移液管和吸量管。
5、擦镜头纸。
（二）试剂1、.NH 4Fe （SO 4）2标准溶液的配制：称取0.2159g 分析纯NH 4Fe （SO 4）2·12H 2O ，加入少量水及20mL6mol·L -1HCl 溶解后，转移至250mL 容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀，此溶液Fe 3+浓度为100mg·L -1。
吸取此标准储备液25.00mL 于250mL 容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，摇匀，此标准溶液Fe 3+浓度为10mg·L -1。
2、邻菲罗啉水溶液（ω为0.0015或0.15%）。
3、盐酸羟胺水溶液（ω为0.10或10%，此溶液只能稳定数日）。
4、NaAC 溶液（1mol·L -1）。
5、HCl （6mol·L -1）。
四、实验步骤1.标准曲线的绘制在5只50mL容量瓶（或比色管）中分别加入2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mLNH4Fe（SO4）2标准溶液（Fe3+浓度为10mg·L-1），然后再各加入1mL 盐酸羟胺，摇匀，再加入5Ml1mol·L-1NaAC溶液、2mL邻菲罗啉水溶液，最后用去离子水稀释至标度，摇匀。
铁含量的测定方法
铁含量的测定方法铁含量的测定采用邻菲啰啉比色法。
一、原理在一定酸度条件下，试液中亚铁离子（Fe2+）与1,10-邻菲啰啉生成红色配合物，于波长为506nm处，测定其吸光度，即可计算出铁含量。
二、试剂和仪器柠檬酸三钠水溶液，150g/L；盐酸羟胺溶液，50 g/L；盐酸溶液，3mol/L；氨水溶液，2.5%；1,1 0-邻菲啰啉溶液，2.5 g/L：称量2.5g1, 10-邻菲啰啉溶于80℃的约l00ml水中，加lml浓盐酸，冷却后加水稀释至1000ml，储于阴凉处备用；醋酸-醋酸钠缓冲溶液：称量272g醋酸钠（NaCH3·CO2·3H2O）于约500m1水中，加入冰醋酸240ml，加水稀释至1000ml；Fe2+标准溶液，lmg/ml：称量7.024g硫酸亚铁铵于约500ml水中，加入浓盐酸10ml，移入l000ml 容量瓶中，稀释至刻度；Fe2+标准溶液，20ųg/ml：吸取lmg/ml的亚铁标准溶液20ml于1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，临用前配制。
仪器：分光光度计；1cm比色皿。
三、测定步骤（一）工作曲线的绘制量取20ųg/ml的亚铁标准溶液0.00m1、2 .50m1、5 .00ml、10.00ml、20.00ml(相当于分别含0、50、100、200、400ųg/ Fe2+)分别加入l00ml烧杯中，用水稀释至50ml，加入150g/L柠檬酸三钠溶液5m1，用3mol/L盐酸或2.5%氨水溶液调节溶液pH为2.4~2.6，加入50 g/L盐酸羟胺溶液5ml混匀，加入1,10-邻菲罗琳溶液5m1，加入醋酸-醋酸钠缓冲溶液l0ml，将溶液移入到l00 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀放置60min。
用分光光度计在波长506nm处用lcm比色皿，以水为参比溶液测定该标准系列的吸光度，以Fe2+标准溶液浓度（ųg/100ml）为横坐标，以其对应吸光度作纵坐标绘制工作曲线。
分析化验分析规程铁含量的测定
铁含量的测定方法一磺基水杨酸分光光度法1适用范围本方法适用于循环冷却水及冷却水系统磷锌预膜液中铁含量的测定，测尢范围为0—2mg/Lo2分析原理在pH=9〜11.5的氨性溶液中，试液中的Fe3+与磺基水杨酸根离子(以SaP表示)定量发生如下显色反应：3+ 2- 3-Fe +3Sal - — Fe(Sal) 3_反应产物Fe(Sal) 33-为黄色的配离子一三磺基水杨酸合铁(III)配离子，其稳定性比聚磷酸铁更高，故可避免大量聚磷酸盐的干扰。
在波长为420nm处，以分光光度计测量该黄色配离子的吸光度，并按标准曲线法进行定量。
水样的F/+可借加入浓硝酸并加热煮沸的方法使其转化为Fe3+,再与显色剂作用，进而与原有Fe3+—同被测定。
3试剂和仪器3.1试剂3.1.1磺基水杨酸溶液(100g/L) o3.1.2 氨水(1+1)。
3.1.3盐酸溶液(1+1)。
3.1.4 硝酸(AR)o2+3.1.5铁离子标准工作溶液(0.01mgFe2+/mL)用3.1.5.1或3.1.5.2均可配制出0.01mgFe2+/mL的Fe2+标准工作溶液。
3.1.5.1准确称取0.2500g高纯铁丝于250mL烧杯中，加入20mL盐酸(1+1),加热使之溶解。
冷却后使其完全转移到500mL容量瓶中，用水稀释至刻度。
所得溶液中Fe2+浓度为1 mg/mL。
将该溶液稀释至100倍，即得0.01 mgFe 2+/mL的F*+标准溶液。
3.1.5.2准确称取0.7020g优级纯硫酸亚铁鞍(FeSO 4 (NFk) 2SO4 • 6H2O),溶于50mL水中，力口20mL浓硫酸后，完全转移于lOOOmL容量瓶中，以水稀释至亥0 度。
所得溶液中F*+含量为0.1mg/mLo将该溶液稀释10倍，即得0.01 mgFe2+/mL 的F/+标准工作溶液。
3.2仪器3.2.1分光光度计，具3cm玻璃比色皿。
3.2.2 50mL 容量瓶。
4操作步骤4.1标准曲线的绘制4.1.1准确移取0, 1, 2, 3, 4, 5mL Fe 2+标准工作溶液(0.01mg/mL)分别置于六个50mL 烧杯中，各加3滴浓硝酸和15mL水，加热煮沸约1 min,冷却后移入50mL容量瓶中，加5mL 100g/L磺基水杨酸和5mL(1+1)氨水溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
实验6 铁的测定——邻菲罗啉法
实验铁的测定——邻菲罗啉法一、目的掌握分光光度计的测定原理、方法及其结构。
掌握吸收曲线的绘制及样品的测定原理。
二、原理亚铁离子（Fe2+）与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。
橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。
三、仪器721型分光光度计、容量瓶（50ml）等。
四、试剂1、铁盐标准溶液：准确称取0.0730克分析纯硫酸亚铁铵于100毫升烧怀中[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]，加50毫升1mol/LHCl，完全溶解后，移入1升容量瓶中，再加50毫升1mol/LHCl，并用水稀释到刻度，摇匀，所得溶液每毫升含铁0.01毫克；2、0.1%邻菲罗啉水溶液；3、1%盐酸羟胺水溶液；4、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（PH4.6）：称取136克分析纯醋酸钠，加120毫升冰醋酸，加水溶解后稀释至500毫升。
五、测定步骤1、邻菲罗啉铁吸收曲线的绘制吸取上述标准铁盐溶液2.0ml于50ml容量瓶中，加入5ml醋酸-醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，用3厘米比色皿，以蒸馏水作参比溶液，在分光光度计上，从波长440～600nm分别测定其吸光度A。
以波长为横坐标，吸光度A纵坐标，绘制邻菲罗啉铁的吸收曲线，求出最大A值时的波长入m。
2、标准曲线的绘制：分别吸取铁的标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml于八只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸－醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，然后用分光度计在其最大吸收的波长下测得吸光度，以不加铁的试剂溶液作参比。
以吸光度为纵坐标，铁含量（mg，50ml）为横坐标，绘制出标准曲线。
3、试样中铁含量的测定吸取试样溶液10ml（其中含铁0.02～0.06mg）于50ml容量瓶中，按绘制标准曲线的操作，加入各种试剂使之显色，用水稀释至刻度，摇匀。
原材料铁含量检测标准
原材料铁含量检测标准一、检测方法1.采用化学分析方法，使用滴定管、比色法等方法测定原材料中的铁含量。
2.在进行检测前，应确保使用的试剂、试样、标准品等符合相关要求，并按照规定的操作步骤进行。
二、检测精度1.检测结果应精确到小数点后两位，以确保数据的准确性和可比性。
2.对于高含量的铁，应采取适当的方法进行稀释或处理，以适应检测范围。
三、检测频率1.原材料铁含量的检测频率应根据生产需求和质量控制要求确定。
通常情况下，每个批次原材料都应进行检测。
2.在某些情况下，可以根据原材料的稳定性、供应商的质量保证等情况适当调整检测频率。
四、异常处理1.如果检测结果出现异常，应立即进行复检，并查找可能的原因。
2.如果复检结果仍不符合标准，应立即通知相关人员，并进行相应的处理，如退货、降级使用或报废等。
五、人员资质1.从事原材料铁含量检测的人员应经过专业培训，并具备相应的检测技能和知识。
2.人员资质应定期进行审核和更新，以确保检测结果的准确性和可靠性。
六、设备维护1.用于铁含量检测的设备和仪器应定期进行检查和维护，以确保其正常运转和准确性。
2.对于关键设备和仪器，应制定详细的维护计划，并建立相应的维护记录。
七、环境控制1.铁含量检测应在干燥、无尘、无震动的环境中进行，以确保检测结果的准确性。
2.环境温度和湿度应控制在适宜的范围内，以保证设备的稳定性和精度。
八、安全操作1.操作人员应了解并掌握所有涉及到的化学品和仪器的安全使用方法。
2.在进行铁含量检测时，应佩戴必要的个人防护装备，如化学防护眼镜、实验服、化学防护手套等。
3.废弃的化学品和废液应按照相关规定进行妥善处理，以防止对环境和人员造成危害。
铁的比色测定
铁的比色测定引言铁是一种重要的金属元素，在生活和工业中有着广泛的应用。
因此，准确、迅速地测定铁的含量对于品质控制和实验室分析至关重要。
比色法是一种常用的测定铁含量的方法，通过将待测样品与试剂发生化学反应，形成带色物质，再用分光光度计测定该物质的吸光度来确定铁的含量。
比色法的原理比色法利用化学反应产生的带色物质与铁的含量成正比的关系来测定铁的含量。
通常使用的试剂是邻二氮菲（1,10-苯并菲啰啉），它与铁离子反应生成紫色络合物，这种络合物在可见光区域有明显的吸光度。
实验步骤试剂与设备准备1.邻二氮菲试剂：取适量邻二氮菲，溶解在适量盐酸中，稀释为一定浓度的邻二氮菲溶液。
2.待测样品：将待测溶液取适量样品。
3.分光光度计：打开分光光度计，根据试剂的吸光度范围选择合适的波长。
标准曲线的绘制1.准备一组已知浓度的铁标准溶液。
使用容量瓶将不同浓度的铁标准溶液配制出来。
2.取一系列标准溶液，加入适量邻二氮菲溶液，接着加入等量的盐酸，充分混合反应。
3.将混合后得到的溶液转移到分光光度计试管中，测定各个浓度溶液的吸光度。
4.依据所使用的盐酸、邻二氮菲溶液的浓度，制作铁离子浓度与吸光度之间的标准曲线。
测定待测样品的含铁量1.取待测样品，加入适量邻二氮菲溶液，接着加入等量的盐酸，充分混合反应。
2.将混合后得到的溶液转移至分光光度计试管中，测定其吸光度。
3.根据标准曲线，查找待测样品吸光度对应的铁离子浓度。
4.计算待测样品中铁的含量。
实验操作要点与注意事项1.实验室操作要卫生，化学品的操作应符合安全规范。
2.试剂的配制过程应准确无误，以免影响测定结果。
3.混合反应后的溶液应充分摇匀，以确保反应均匀。
4.分光光度计的操作应正确，准确记录吸光度数值。
结语铁的比色测定是一种简单、快速、准确的测定方法。
通过形成带色物质，并利用分光光度计测定其吸光度，我们可以确定待测样品中铁的含量。
比色法广泛应用于矿石矿泉水、工业废水和食品等领域中。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1.学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法；2.掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理1.在可见光分光光度法测定无机物时，通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。
2.确定适宜实验条件：改变其中一个影响因素，暂时固定其它影响因素，测吸光度，通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。
其他因素的确定也照此方法。
3.本实验以邻二氮菲（phen）为显色剂，是光度法测定微量铁的优良试剂，pH在2~9时（pH=5~6），Fe2+ + 3phen [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)lgK稳=21.3，λmax=510nm,ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1用盐酸羟胺将Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。
本方法选择性高，杂离子难以干扰。
三、仪器与试剂TU—1901型双光束紫外可见分光光度计，1cm比色皿，10mL吸量管，50mL 比色管。
1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，100μg·mL-1铁标准溶液，0.15%phen水溶液，10%盐酸羟胺溶液，1 mol·L-1醋酸钠溶液，工业盐酸（试样）。
四、实验操作1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液，稀释至刻度线，摇匀。
以蒸馏水为参比液，将上述试液装入1cm比色皿（2/3左右），在440nm~560nm 之间，每隔5nm测一次吸光度，以吸光度A为纵坐标，波长λ为横坐标绘制吸收曲线，选择最适宜波长。
2.确定显色条件⑴显色剂的用量在6支50mL比色管中各加入2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，分别加入0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL0.15%phen 水溶液，再加入5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液,，稀释至刻度线，摇匀。
实验3-比色法测定抗贫血药中铁的含量-人教版选修6实验化学教案
实验3-比色法测定抗贫血药中铁的含量-人教版选修6实验化学教案一、实验目的通过比色法测定抗贫血药中铁的含量，掌握比色法测定铁含量的基本原理和操作方法，培养实验操作技能。
二、实验原理铁离子可以与邻菲罗啉形成深红色络合物，其最大吸收波长为510nm。
利用波长为510nm处的吸光度对铁含量进行测定。
所用试剂：邻菲罗啉、抗贫血药样品。
实验步骤：1.精密称取抗贫血药样品，置于常量量瓶中，用1mol/L硫酸将铁还原为二价铁。
2.取适量还原后的样品，加入适量邻菲罗啉试剂，经酸性混合液中铁与邻菲罗啉络合成红色物质，再将溶液加入比色皿中，用紫外分光光度计比色，记录吸光度。
3.根据比色法的原理计算抗贫血药样品中的铁含量。
三、实验步骤1.准备所需试剂：邻菲罗啉、抗贫血药样品。
2.精密称取抗贫血药样品1g，转移到50mL常量量瓶中，用1mol/L硫酸补足至刻度，摇匀得到10mg/mL的样品溶液。
3.取适量还原后的样品，加入适量邻菲罗啉试剂，经酸性混合液中铁与邻菲罗啉络合成红色物质。
4.将溶液加入比色皿中，用紫外分光光度计比色，记录吸光度。
5.重复至少三次，记录吸光度数据，取平均值。
6.根据比色法的原理计算抗贫血药样品中的铁含量。
四、实验注意事项1.铁离子与邻菲罗啉络合需在弱酸性条件下进行。
2.操作需注意精度，标准溶液需管好。
3.注意皆匀，避免空气对溶液的影响。
4.避光保存。
五、实验结果与分析经三次比色测定，得平均吸光度0.456。
根据比色法的计算公式可得，抗贫血药样品中铁的含量为2.28mg/g。
六、思考题1.为什么铁离子与邻菲罗啉可以形成络合物？2.本实验所用的比色法有哪些缺陷？3.有没有其它测定铁含量的方法？并简述该方法的基本原理。
实验12-铁的比色测定
实验12-铁的比色测定
本实验是一种基于比色法的定量分析方法，主要用于测定水样中铁离子的含量。
本实
验的基本原理是铁离子在酸性条件下与2,4,6-三(2-吡啶卡宾-5-磺酸钠)联合形成紫色络
合物，通过比色法测定铁离子的含量。
实验步骤：
1.称取一定量的待测水样，加入适量的稀盐酸调节pH值，使其达到5.5-6.5之间，
注意不要加过量的稀盐酸。
2.加入2,4,6-三(2-吡啶卡宾-5-磺酸钠)溶液，混匀均匀，使铁离子与络合剂充分反应，生成紫色络合物。
3.将反应液转移到比色皿中，使用分光光度计在546nm处进行比色测定。
注意，按照
常规比色法的要求，反应液浓度的范围应该是0.1毫摩尔到50毫摩尔。
4.比色测定完毕后，根据标准曲线确定反应液中铁离子的浓度。
标准曲线的制备方法
是使用铁离子标准溶液，按照1, 2, 4, 6, 8, 10毫摩尔浓度递增的顺序，逐一测量比色值，并绘制出比色值和铁离子浓度之间的关系图。
据此可以精确确定待测水样中铁离子的
含量。
实验注意事项：
1.实验中要保证反应液的PH值在5.5-6.5之间，过高或过低都会影响到实验结果的
准确性。
2.实验操作时，仪器的清洗、测量和计量要注意避免干扰。
尤其是铁离子是一种容易
被氧化的元素，因此需要密封保存，避免暴露在空气中。
3.在进行的时候应保证溶液中充分混匀，避免产生异相反应导致结果的存在误差。
4.实验过程中使用的试剂应是高纯度试剂，以此保证实验结果的准确性。
本实验准确、简便、安全、快速，能够很好地应用于制药、食品、生物、环境等领域。
饲料中铁的测定
如何测定饲料中的铁
饲料中铁的测定是确保饲料质量和动物健康的重要环节。
为了准确测定饲料中的铁含量，可以采用多种方法，包括化学分析法、光谱法、电化学法等。
1．化学分析法是一种常用的测定铁的方法，其原理是利用铁与特定的化学试剂反应，生成有色化合物，通过比色法或滴定法来测定铁的含量。
该方法具有操作简便、准确度高、适用范围广等优点，但需要使用化学试剂，对环境和人体有一定的危害。
2．光谱法是一种基于物质对光的吸收、反射和散射等特性的测定方法。
在测定饲料中铁含量时，可以使用原子吸收光谱法或原子发射光谱法。
这些方法具有灵敏度高、选择性好、对环境和人体无害等优点，但需要使用昂贵的仪器设备。
3．电化学法是一种基于电化学原理的测定方法，其原理是利用铁在特定的电化学条件下能够产生电流或电位的变化，通过测量电流或电位来计算铁的含量。
该方法具有操作简便、设备简单、对环境和人体无害等优点，但需要使用精确的电化学仪器设备。
在实际应用中，可以根据具体情况选择合适的测定方法。
同时，为了确保测定的准确性和可靠性，需要注意样品的采集和处理、仪器的校准和保养、实验操作的规范和标准化等方面的问题。
比色管测定铁含量的反思
比色管测定铁含量的反思比色管测定铁含量的反思有人认为，既然铁与空气接触会生成四氧化三铁，可以根据比色法来测定铁含量。
但是我想说，这样做是没道理的。
铁在空气中很容易被氧化成氧化铁，并且还会与水结合形成氢氧化亚铁（三价铁），因此就无法再利用比色法来测定铁含量。
另外，即使测出铁中含有多少“杂质”也是枉然。
如果不能将铁完全除去，不仅浪费了资源，而且还会影响冶炼技术。
从实验原理看，采取金属的硫化物、碳酸盐或氧化物等溶液进行滴定时，由于它们均能溶解于某些试剂，而引入所需的干扰离子，这种称之为电极滴定。
其基本原理：当待测离子的浓度很小时，采用适当的指示剂便可使干扰离子不显示颜色；而一旦超过临界值后，任何干扰离子都能被显色。
比色法的依据正好相反，先是干扰离子发生颜色变化，最终被显色。
当指示剂颜色恰好消失时，则证明该溶液中只剩下铁离子，否则干扰离子太多，无法被正确检出。
不难看出，比色法主要靠干扰离子对铁的干扰，来得到待测离子的信息。
现在中国不同于十九世纪末和二十世纪初那个中国了，不但科学家们已经意识到环境保护的问题，而且环境保护工作也日益加强。
因此，比色法根本无法代替金属的高灵敏分析方法。
在使用金属试样进行光谱分析前，必须严格按照操作规程，把金属碎屑完全清洗掉，否则将造成色散效应和背景增宽。
同时还要注意有机分析中大部分金属的共存问题，例如，金属的汞化物、砷化物、铋化物等对一般的火焰分析方法均是非常不敏感的，甚至呈现出干扰作用，如果随便在色谱图上标志这些元素，就可能使仪器报废。
铁矿石在钢铁生产流程里起着重要作用，随着社会的进步，新型材料的广泛运用，特别是用来制造精密零件的微细不锈钢线和用来制造轴承的超高温钢，在冶金工业中有着举足轻重的地位。
但是目前中国却忽视了环境污染的问题，致使一些企业乱排放废弃物，给自然环境带来了严重的损害，影响了中国的形象，阻碍了中国的经济建设和文明发展。
如今，越来越多的科学家提倡绿色环保，改革开放以来，我国各级政府相继制订了许多关于环保的条例和措施，这些法律法规保障了环境保护的健康发展，有力地促进了整个社会的经济发展，人民群众积极投身到保护环境的活动中来。
铁钴比色计操作方法
铁钴比色计操作方法
1.准备工作
-打开铁钴比色计的盖板，将附带的玻璃量杯放入样品池中。
-将一根塑料滴管插入铁钴试剂瓶中，将滴管顶端放入溶液样品中。
-将溶液样品滴入玻璃量杯中，每次滴入约2mL，直至液面接触定量线。
2.添加试剂
-在玻璃量杯中滴加2滴铁试剂和2滴钴试剂。
-使用玻璃棒轻轻搅拌样品溶液，使试剂均匀混合。
3.进行比色
-将玻璃量杯放入样品池中，确保玻璃量杯紧密贴合。
-关闭铁钴比色计的盖板，打开电源开关并选择合适的滤光片。
-调节仪器上的调零旋钮，使指针回到零刻度位置。
-看到比色池中的溶液呈现明显的颜色后，立即按下比色按钮。
4.读取结果
-比色完成后，松开比色按钮，仪器会自动读取结果并显示在仪器的数字显示屏上。
-比色完成后，将玻璃量杯从样品池中取出，并用纸巾擦干，以免对下一个样品产生干扰。
5.清洗仪器
-使用纯水清洗玻璃量杯和铁钴试剂瓶，以防止不同样品之间的污染。
-每次使用完毕后，将铁钴比色计的盖板关闭，将样品池清洗干净。
需要注意的几点：
-操作过程中，要尽量避免接触到试剂和比色池。
-在进行比色之前，要确保仪器已经经过预热，且比色池内没有空气泡。
-滴加样品溶液时要保持均匀滴加，避免溶液溅到其他地方。
-在读取结果时，要确保仪器盖板完全关闭，以免产生误差。
这是铁钴比色计的基本操作方法，根据具体仪器型号和使用说明书，
操作步骤可能会有所不同。
因此，在使用铁钴比色计之前，应先详细阅读
仪器的操作说明书，并按照操作指导进行操作，以确保测试结果的准确性。
实验分光光度法测定铁
实验分光光度法测定铁The following text is amended on 12 November 2020.实验十四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1.学习吸光光度法测量波长的选择方法；2.掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法；3.掌握分光光度计的使用方法。
二. 实验原理分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法，分光光度法用于定量分析的理论基础是朗伯比尔定律，其数学表达式为：A=eb C邻二氮菲(乂称邻菲罗卩林)是测定微量铁的较好试剂，在pH二2〜9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。
摩尔吸光系数£ =11000 L • moE1• cm' ‘。
在显色前，用盐酸疑胺把Fe"还原为Fe=2F『+2NH；0HHClf 2Feh+\：+4H 十+ 2H：0+2C 厂Fe‘ + Phen = Fe‘ - Phen (橘红色)用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钻、银、铜、铅与试剂形成有色配合物；钩、釦、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、钮则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。
三. 仪器与试剂1.醋酸钠：1 mol • L':；2.盐酸：6 mol • L"1；3.盐酸羟胺：10% (用时配制)；4-邻二氮菲(%):邻二氮菲溶解在lOOmLl: 1乙醇溶液中；5-铁标准溶液。
(1)100 ng-mf1铁标准溶液：准确称取(NH4) 2 Fe (SO,) 2 - 12H：0于烧杯中, 加入20 mL 6 mo 1・I?盐酸及少量水，移至1L容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀.6.仪器：7200型分光光度计及1 cm比色皿。
四、实验步骤1.系列标准溶液配制(1)用移液管吸取10mL100 u g • ml?铁标准溶液于100mL容量瓶中，加入2mL 6 mol - L"盐酸溶液,以水稀释至刻度,摇匀.此溶液F』浓度为10 u g • mL'1.(2)标准曲线的绘制：取50 mL比色管6个，用吸量管分别加入0 mL, 2 mL, 4 mL, 6 mL, 8 mL和10 mLlO u g • ml?铁标准溶液，各加1 mL盐酸羟胺，摇匀；经再加2mL邻二氮菲溶液，5mL酷酸钠溶液，摇匀，以水稀释至刻度，摇匀后放置lOmino 2.吸收曲线的绘制取上述标准溶液中的一个，在分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长，从440〜560 nm,每隔10 nm测定一次吸光度，在最大吸收波长处每隔5nm测定一次吸光度。
邻二氮菲分光光度法测铁
max =
比色皿
试液编号 1 2 3 4 5 6
位知液编号
标准溶液的量，ml 0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0
总含铁量，mg
0 20 40 60 80 100
吸光度（A）
10
❖以铁含量为坐标，吸光度为纵坐标 在坐标纸上绘制标准曲线； ❖由未知液的吸光度在标准曲线上查 出5ml未知液中的铁含量； ❖计算每毫升未知液中含多少克铁。
2
二、实验原理
分光光度法测定物质含量时的主要测量条 件是通过吸收曲线的测绘而选择的入射波长。
邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂， 反应式如下：
2Fe3+ + 2NH2OH = 2Fe2+ +N2 + 2H2O + 2H+
2+
Fe2+ + 3
N N
N
Fe
N
3
3
配合物
2+
N N
Fe
3
lgK稳 =21.3，摩尔吸光系数(510)=1.1×104
570nm~430nm，每隔10nm或20nm测一
次吸光度。以波长为横坐标，吸光度
为纵坐标制出吸收曲线，从吸收曲线
上确定最大吸收波长（ max ).
6
2.铁含量的测定
10 mg/ml 铁标准溶
液
（1）标准曲线的绘制：
1
2
3
4
5
6
参比 2 ml 3 ml 4 ml 5 ml 6 ml
然后1~6号中 依次加1 ml 10%盐酸羟胺、 5 ml 1mol/L醋 酸钠溶液和 3ml 0.1%邻二 氮杂菲溶液，
铁的比色测定实验报告
铁的比色测定实验报告试验时间：2014.05.09 报告人：武伟目的要求1. 了解仪器分析。
2. 学习比色法用比色法测定绘制标准曲线、测定试样浓度的方法。
3. 了解分光光度仪的性能、结构及使用方法。
实验原理仪器分析：英文：in strume nt an alysis，仪器分析是指采用比较复杂或特殊的仪器设备，通过测量物质的某些物理或物理化学性质的参数及其变化来获取物质的化学组成、成分含量及化学结构等信息的一类方法。
仪器分析与化学分析（chemical analysis）是分析化学（analytical chemistry）的两个分析方法比色法是根据朗伯一比尔定律发明的，朗伯比尔定律告诉我们，溶液的吸光度和溶液的厚度以及溶液的浓度乘积成正比，如果控制溶液的厚度相同，吸光度就和溶液的浓度成正比，这样我们就可以通过测量溶液的吸光度来进一步推算溶液的浓度。
吸光度在测量时是采用和空白溶液的比值，首相测量一系列已知浓度的溶液的吸光度，绘制吸光度一浓度标准曲线，然后测量未知浓度的吸光度，再在标准曲线上找到对应的浓度值，完成测定。
分光光度仪的使用方法：1）在比色皿中装入2/3体积的溶液，第一个要装空白的溶液。
2）打开分光光度仪，盖好上盖，调节好光波长，调节分光光度仪让空白组的吸光度为零，然后拉动分光光度仪前端转换测量的手柄，依次测量不同组别的吸光度。
3）对应记录已知溶液和未知溶液的分光度，处理数据，计算未知溶液的浓度。
a）拿取比色皿时，只能用手指接触两侧的毛玻璃，避免接触光学面。
同时注意轻拿轻放，防止外力对比色皿的影响，产生应力后破损。
b）凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液，不得长期盛放在比色皿中。
c）不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱烘烤；。
d）当发现比色皿里面被污染后，应用无水乙醇清洗，及时擦拭干净。
，高度为比色皿的2/3处即可，光学面如有残[Fe （C i2H 8N 2）3]2+，本实验就是用它来比 则此法还可以用来测定总铁含量， 从实验试剂e ）不得将比色皿的透光面与硬物或脏物接触。
比色测定的注意事项
比色测定的注意事项一、前言比色测定是一种常见的化学分析方法，它通过比较待测物质与标准溶液之间的颜色差异来确定待测物质的含量。
在进行比色测定时，需要注意许多细节，以确保结果的准确性和可靠性。
本文将详细介绍比色测定的注意事项。
二、实验前准备1.选择合适的比色仪：不同类型的比色仪具有不同的灵敏度和精度，应根据实验要求选择合适的仪器。
2.准备标准溶液：标准溶液应该是纯净、稳定且浓度精确的。
在制备标准溶液时，应使用纯水，并避免污染和误差。
3.样品处理：样品处理应该尽可能地避免对样品产生影响，并且不会引入其他化学物质。
4.试剂选择：试剂应该是纯净、稳定且符合实验要求。
在使用试剂时，要注意保存条件和有效期限。
三、操作步骤1.调节比色仪：在进行比色测定前，需要调节比色仪以确保其正常工作。
调节过程中需要注意仪器的灵敏度和精度。
2.准确配制标准溶液：在配制标准溶液时，需要严格按照实验要求进行。
应使用纯水，并避免污染和误差。
3.样品处理：样品处理应该尽可能地避免对样品产生影响，并且不会引入其他化学物质。
在处理样品时，需要注意样品的稳定性和可靠性。
4.试剂添加：在添加试剂时，应按照实验要求进行。
应使用纯净、稳定且符合实验要求的试剂，并注意保存条件和有效期限。
5.比色测定：在进行比色测定时，需要注意比色仪的灵敏度和精度。
同时，应根据实验要求选择合适的波长范围，并保持恒定的温度和光照条件。
四、结果分析1.数据处理：在进行数据处理时，需要注意数据的准确性和可靠性。
同时，需要根据实验要求进行统计分析，并计算出相应的结果。
2.结果判读：在进行结果判读时，需要根据实验要求进行判读，并考虑到可能存在的误差因素。
如果发现异常结果，则需要重新检查并排除错误因素。
五、安全注意事项1.化学品的安全使用：在使用化学品时，需要注意其毒性和危险性，并遵守相关的安全操作规程。
2.比色仪的安全使用：在使用比色仪时，需要注意其电气和机械安全，并遵守相关的操作规程。
无定形铁、铝、硅的测定方法
无定形铁、铝、锰、硅的测定1 原理无定形（非晶质）氧化物是指不产生X射线的胶体氧化物。
由于酸性H2C2O4-(NH4)2C2O4溶液具有pH缓冲性能极强的特点，对于酸性和中性土壤浸出液的酸度可稳定在pH3.2左右，即使碱土(土壤pH达10)，经测定证实，pH仍能稳定在3.3～3.4。
草酸-草酸铵缓冲也中草酸根可将土壤中非晶质氧化铁中的铁、非晶质氧化铝中的铝以及非晶质氧化硅中的硅络合成水溶性的络合物进入提取液。
因此一般用于浸提活性较大的Fe、Al、Mn、Si等氧化物。
2 试验2.1 样品待测液的制备用H2C2O4-(NH4)2C2O4溶液，一次性振荡提取土壤，使Fe、Al、Mn和Si 等无定形水合氧化物提取到溶液中，然后用同一特测液分别测定。
2.1.1 主要仪器振荡机、三角瓶（250ml）、胶塞、布袋、离心机（最大转速5000r/min，附100ml 离心管）、烧杯（200ml）2.1.2 试剂(1) 酸性H2C2O4-(NH4)2C2O4提取剂：称取25.20g草酸(H2C2O4，分析纯)和49.68g草酸铵（(NH4)2C2O4，分析纯），加水后加热溶解，用水定容到2升(pH 应为3.2，必要时可在pH计上用稀H2C2O4和NH4OH调节)。
(2) H2SO4：硫酸(H2SO4，分析纯)；(3) H2O2：过氧化氢(H2O2，分析纯)；2.1.3 操作步骤(1) 样品待测液的提取称取通过0.25mm的风干土样2.00g，置于250 ml三角瓶中，在20-25℃时，按1:50土液比加入l00 ml H2C2O4-(NH4)2C2O4提取液，加塞，将三角瓶放入布袋中，在振荡机上遮光振荡2小时，然后将混合液转入100ml离心管中，于3000-4000r/min的离心机中离心，离心后的上清液可直接转入塑料瓶或三角瓶中，加塞备用，若上清液中仍有浑浊，则可用干的定性滤纸过滤，滤液作为活性Fe和Si的待测液。
Cr6+的测定(二苯碳酰二肼分光光度法)
Cr6+的测定（二苯碳酰二肼分光光度法）6+C的测定(二苯碳酰二肼分光光度法) r1.适用范围1.1 本标准适用于地面水和工业废水中六价铬的测定。
1.2 测定范围试份体积为50ml，使用光程长为30mm的比色皿，本方法的最小检出量为0.2μg六价铬，最低检出浓度为0.004mg/L，使用光程为10mm的比色皿，测定上限浓度为1.0mg/L。
1.3 干扰含铁量大于1mg/L显色后呈黄色。
六价钼和汞也和显色剂反应，生成有色化合物，但在本方法的显色酸度下，反应不灵敏，钼和汞的浓度达200mg/L不干扰测定。
钒有干扰，其含量高于4mg/L即干扰显色。
但钒与显色剂反应后10min，可自行褪色。
2.原理在酸性溶液中，六价铬与二苯碳酰二肼反应生成紫红色化合物，于波长540nm 处进行分光光度测定。
3.试剂测定过程中，除非另有说明，均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂和蒸镏水或同等纯度的水，所有试剂应不含铬。
3.1 丙酮。
3.2 硫酸3.2.1 1+1硫酸溶液。
将硫酸(H2SO4，ρ=1.84g/ml，优级纯)缓缓加入到同体积的水中，混匀。
3.3 磷酸:1+1磷酸溶液。
将磷酸(H3PO4，ρ=1.69g/ml，优级纯)与水等体积混合。
3.4 氢氧化钠:4g/L氢氧化钠溶液。
将氢氧化钠(NaOH)1g溶于水并稀释至250ml。
3.5 氢氧化锌共沉淀剂3.5.1 硫酸锌:8%(m/v)硫酸锌溶液。
称取硫酸锌(ZnSO4?7H2O)8g，溶于100ml水中。
3.5.2 氢氧化钠:2%(m/v)溶液。
称取2.4g氢氧化钠，溶于120ml水中。
用时将3.5.1和3.5.2两溶液混合。
3.6 高锰酸钾:40g/L溶液。
称取高锰酸钾(KMnO4)4g，在加热和搅拌下溶于水，最后稀释至100ml。
3.7 铬标准贮备液。
0.0001g，用水称取于110?干燥2h的重铬酸钾(K2Cr2O7，优级纯)0.2829?溶解后，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。
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铁的比色测定
一．实验目的
1. 学会吸收曲线及标准曲线的绘制，了解分光光度法的基本原理；
2. 掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；
3. 学会722型分光光度计的正确使用，了解其工作原理；
4. 学会数据处理的基本方法；
5. 掌握比色皿的正确使用。
二．实验原理
根据朗伯—比耳定律：A = εbc ，当入射光波长λ及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A 与该物质的浓度c 成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c 为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
用分光光度法测定试样中的微量铁，可选用的显色剂有邻二氮菲(又称邻菲啰啉)及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。
而目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
在pH=2～9的溶液中，Fe 2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+，
此配合物的lg K 稳 = 21.3，
摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol –1·cm –1，而Fe 3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK 稳 = 14.1。
所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH 2OH·HCl)将Fe 3+还原为Fe 2+，其反应式如下：
2Fe 3+ + 2NH 2OH·HCl → 2Fe 2+ + N 2 + H 2O + 4H + + 2Cl –
测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜。
三．仪器与试剂
仪器：722型分光光度计、容量瓶(100 mL ，50 mL)、吸量管
试剂：硫酸铁铵NH 4Fe(SO 4)2·12H 2O(s)(A.R.)、硫酸(3 mol·L –1)、盐酸羟胺(10%)、NaAc(1
mol·L –1)、邻二氮菲(0.15%)。
四．实验步骤
1. 吸收曲线的制作
用吸量管移取1.000 × 10–3 mol·L –1铁的标准溶液10.00 mL 于50 mL 容量瓶中，用吸量管依次加入10%的盐酸羟胺溶液1 mL ，摇匀，加0.15%邻二氮菲溶液2 mL ，1 mol·L –1 NaAc
2+N N 3Fe 2++
溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上用l cm 比色皿，以试剂空白为参比溶液，在440~560 nm 间，每隔10 nm测定一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长λmax。
2. 显色剂浓度的影响
取7只50 mL容量瓶，用吸量管依次加入1.000 × 10–3 mol·L–1的铁标准溶液2.00 mL和10%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，分别加入0.15%的邻二氮菲溶液0.10 mL，0.30 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，2.00 mL，4.00 mL，然后加入1 mol·L–1 NaAc溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上，用l cm 比色皿，在最大吸收波长下，以试剂空白为参比溶液，测定以上七个溶液的吸光度。
以邻二氮菲的体积(mL) 为横座标，相应的吸光度为纵座标，绘制吸光度－显色剂用量曲线，找出在测定中应加人的显色剂的体积(mL)。
3. 有色溶液的稳定性
在50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入1.000 × 10–3 mol·L–1铁的标准溶液2.00 mL，10% 的盐酸羟胺溶液1 mL，0.15%的邻二氮菲溶液2 mL，l mol·L–1的NaAc溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
立即在所用波长下，用l cm 比色皿，以相应的试剂空白为参比，测定吸光度，然后放置5 min，l0 min，30 min，1 h，2 h，3 h，测定其吸光度，以时间为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度－时间曲线，找出络合物稳定的时间范围。
4. 溶液酸度的影响
在9只50 mL容量瓶中，用吸量管依次加入1.000 × 10–3 mol·L–1的铁标准溶液2.00 mL，10%的盐酸羟胺溶液1 mL，0.15%的邻二氮菲溶液2 mL，再分别加入l mol·L–1的NaOH 溶液0.00 mL，0.20 mL，0.50 mL，0.80 mL，1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL，2.50 mL，3.00 mL，以水稀释至刻度, 摇匀。
用精密pH 试纸或pH 计测定各溶液的pH值。
在所用波长下，用l cm 比色皿，以各自相应的试剂空白为参比，测定九个溶液的吸光度，以pH 值为横座标，吸光度为纵座标，绘制吸光度－pH曲线，找出测定的适宜pH范围。
5. 工作曲线的绘制
在6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别依次加入1.000 × 10–3 mol·L–1的铁标准溶液0.00 mL，2.0 mL，4.0 mL，6.0 mL，8.0 mL，10.0 mL，再分别加入10%的盐酸羟胺溶液1 mL，0.15%的邻二氮菲溶液2 mL，1 mol·L–1 NaAc溶液5 mL，以水稀释至刻度，摇匀。
在所用波长下，用l cm比色皿，以试剂空白为参比，测定各溶液吸光度，绘制工作曲线，并计算摩尔吸光系数。
6. 络合物组成的测定（摩尔比法）
取9只50 mL 容量瓶，用吸量管依次加入1.000 × 10–3 mol·L–1的铁标准溶液1.00 mL，10%盐酸羟胺溶液1 mL，依次加入1.000 × 10–3 mol·L–1的邻二氮菲溶液1.00 mL，1.50 mL，2.00 mL，2.50 mL，3.00 mL，3.50 mL，4.00 mL，4.50 mL，5.00 mL，然后各加入1 mol·L–1 NaAc 溶液5 mL，用水稀释至刻度，摇匀。
在所用波长下用l cm比色皿，以各自试剂空白
为参比，测定各溶液的吸光度，以吸光度为纵座标，以C R/C M为横座标，绘制曲线。
根据曲线上前后两部份延长线的交点位置，确定反应的络合比。
7. 铁含量的测定
准确移取10.0mL未知液，按工作曲线的测定步骤，测定其吸光度，从工作曲线上求出未知液中Fe的含量（mg·mL–1）。
注：由于本实验所使用的邻二氮菲、盐酸羟胺、醋酸钠、NaOH 等溶液，均为无色透明的水溶液，所以实验中所有参比溶液，均可使用蒸馏水。
五．思考题
1.本实验中哪些试剂应准确加入，哪些不必严格准确加入?为什么?
2.加入盐酸羟胺的目的是什么?
3.配制NH4Fe(SO4)2·12H2O溶液时，能否直接用水溶解?为什么?
4.如何正确使用比色皿?
5.何谓―吸收曲线‖、“工作曲线”? 绘制及目的各有什么不同?。