饲料亮氨酸水平对青虾主要非特异性免疫指标的影响
大黄对凡纳滨对虾生长和非特异性免疫指标的影响
大黄对凡纳滨对虾生长和非特异性免疫指标的影响李素莹;周歧存【摘要】在凡纳滨对虾饲料中分别添加大黄0、0.5、1.0、5.0、10.0和20.0g/kg,研究大黄对凡纳滨对虾(初始体重为0.34±O.004 g)生长及非特异性免疫指标的影响.结果表明,大黄对凡纳滨对虾成活率、增重率、特定生长率、饲料系数、蛋白质效率和蛋白质累积率的影响不显著(P>0.05),对全虾和尾肌肉的灰分、脂肪和粗蛋白含量影响显著,全虾的粗蛋白和粗脂肪含量以1.0g/kg组最高(P<0.05),对凡纳滨对虾血清碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、酚氧化酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶以及血清总蛋白量等的影响显著,溶菌酶活性以1.0 g厂kg组最高(P<0.05);细菌感染实验中以1.0 g/kg组存活率最高(P<0.05).以非特异性免疫反应指标及感染实验存活率为指标,凡纳滨对虾饲料中大黄的适宜添加量为1.0 g/kg.【期刊名称】《广东海洋大学学报》【年(卷),期】2009(029)006【总页数】6页(P36-41)【关键词】凡纳滨对虾;生长;非特异性免疫指标;大黄【作者】李素莹;周歧存【作者单位】广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025;广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025【正文语种】中文【中图分类】S963.73+6近年来,随着水产养殖业的发展,高密度集约化养殖、过量投饵等导致养殖环境恶化以及各类细菌病、病毒病频发[1],若在疾病防治时使用抗生素及化学药物则存在某些病原微生物的耐药性增强及药物残留等问题,可见,提高动物自身的免疫力对解决养殖病害问题极为重要。
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei,Boone)具生长快、繁殖期长、肉质鲜美、出肉率高、抗逆性强、易运输等优点,是高产养殖的优良品种[2]。
中草药具有价格低廉、副作用小、无残留等优点[3] ,研究中草药在凡纳滨对虾养殖中的应用具有重要的经济价值。
饲料中维生素A水平对凡纳滨对虾生长、饲料利用、体组成成分及非特异性免疫反应的影响
动 物营养 学报 20 ,96 :9-0 071 ()6875
C i sJ unl f nm l tt n hn e o r i a Nuri e aoA io
饲料 中维 生素 A水平对凡纳滨对 虾生长、 饲料利用 、 体组成成分及 非特异性免疫反应 的影响
用 、 成成 分及 非特 异性 免疫反 应 的影 响 。试 验选 用平 均初 始体 重 为( .6 0 05g的凡 纳滨 对 虾 40尾 , 分 为 体组 009± .0 ) 5 随机 5 处 理组 , 组 9 尾 , 组设 3 个 每 0 每 个重 复 , 每个重 复 3 。试 验采 用单 因素设 计 , 0尾 以维生 素 A 醋酸 酯为 维生 素 A源 , 添 用 加不 同水 平维 生素 A( 添加量 分别 为 01 、65 7 g k) 、83 、 4和 2m / g 的饲料 喂养 凡纳 滨对 虾 , 验期 u 周 。结 果 表明 : 养殖 前 试 在 4周 , 料 中添加 维生 素 A显 著促 进 凡纳滨 对虾 的生 长 ( <00)提 高其对 饲料 利用 效率 ( <00 )而对对 虾 的成 活 率 饲 P .5 , P .5 ,
研 究则起 步 较 晚 , 有 研 究 的 结 果 表 明 , 生 素 A 现 维
广养 殖后 , 已是我 国沿 海 地 区首 要 的 对虾 养 殖 品 现
种 。然而 , 关于 配合饲 料 中添加 维 生 素 A 对凡 率 及 非特 异 性 免 疫 反应 影 响 的研 究较 少 。因此 , 展 饲 料 中添 加 不 同维 生 素 A 开
增 重 率 的变 化 关 系 , 明 在 试 验 前 4周 , 纳 滨 对 虾 饲 料 中 维 生 素 A 的 适 宜 添 加 量 为 2 5 / g ¨ 周 试 验 表 凡 2. 0mg k ; 期 间 , 纳 滨 对 虾 饲 料 中 维 生 素 A 适 宜 添 加 量 为 1 / g 以 溶 菌 酶 、 氧 化 酶 活 力 为 指 标 , 纳 滨 对 虾 凡 8mg k ; 酚 凡 饲 料 中 维 生 素 A 最 适 添 加 量 为 5 . 1mg k 。 9 5 / g 关 键 词 :凡纳 滨 对 虾 ; 生 素 A; 维 牛 ; 料 利 用 ; 组成 ; 特 异 性 免 疫 饲 体 非
低蛋白质饲料中添加色氨酸对凡纳滨对虾生长性能、体组成、血清免
( 1 . 广 东省农业科 学院动物科 学研究所 , 广州 5 1 0 6 4 0 ; 2 . 华 中农业 大学水产 学院 , 武汉 4 3 0 0 7 0 ; 3 . 广东省 动物育种与 营养 公共实验 室 , 广州 5 1 0 6 4 0 ; 4 . 广东 省畜禽育种 与营养研 究重点实验 室 , 广州 5 1 0 6 4 0 )
收稿 日期 : 2 o 1 5 - O l -2 9
料 蛋 白质作 为 能 量 利 用 时 还 将 伴 随着 氮 的 排 泄 而 影 响 水 体 环 境 。 因 此 , 如 何 调 控 动 物 生 长 并 提
基金项 目 : 广东省海洋渔 业科 技推 广 专项项 目( A 2 0 1 3 0 1 Bl 1 ); 广 州市 科 技计 划项 目( 2 0 1 4 J 4 1 0 0 2 3 9) ; 广东 省 农业 科 学 院院 长基 金 项 目
动物营养学报 2 0 1 5 , 2 7 ( 7 ) : 2 2 7 2 . 2 2 8 1
C h i n e s e J o u r n a l o f A n i m a l N u t r i t i o n
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 6 — 2 6 7 x . 2 0 1 5 . 0 7 . 0 3 5
1 . 2 0 、 2 . 5 0 、 5 . o 0和 1 0 . 0 0 g / k g色氨 酸 的 低 蛋 白质 饲料 , 试 验 期 为 8周 。 结果 表 明 : L T 2 、 L T 3 对 虾
的 终 末体 重 、 增 重 率 和 特 定 生 长 率 显 著 高 于 HT 。 ( P< 0 . 0 5 ) ; L T 、 L T L T 。的摄 食 量 显 著 高 于
饲料中添加核苷酸混合物对凡纳滨对虾幼虾非特异性免疫和抗氧化指标的影响
饲料中添加核苷酸混合物对凡纳滨对虾幼虾非特异性免疫和抗氧化指标的影响许丹丹;黄燕华;曹俊明;蓝汉冰;王国霞;张荣斌;陈晓瑛;严晶【摘要】本试验旨在研究外源核苷酸混合物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼虾非特异性免疫和抗氧化指标的影响.选取960尾初始体重为(0.43±0.01)g的凡纳滨对虾,随机分为8组(每组设3个重复,每个重复40尾虾),分别投喂在基础饲料中添加0(对照)、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0和1.2g/kg核苷酸混合物(5'-腺苷酸:5'-胞苷酸:5'-尿苷酸二钠:5'-肌苷酸二钠:5'-鸟苷酸二钠=1:1:1:1:1,质量比)的试验饲料,养殖期为5周.结果表明,饲料中添加0.4~1.2g/kg 核苷酸混合物可显著或极显著提高凡纳滨对虾幼虾血细胞总数(THC)(P<0.05或P <0.01).与对照组相比,0.6和0.8/kg组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P <0.05).0.4g/kg组血清总抗氧化能力(T-AOC)与对照组相比提高了51.0%(P>0.05),并显著高于1.2g/kg组(P<0.05).各组肝胰腺SOD活性和T-AOC随饲料中核苷酸混合物添加量的增加先升高后降低,均在0.4g/kg组达到最高值.各组血清和肝胰腺过氧化物酶(POD)和碱性磷酸酶(AKP)活性均无显著差异(P>0.05).饲料中添加0.2~1.2g/kg核苷酸混合物可显著降低对虾肝胰腺丙二醛(MDA)含量(P<0.05),而各组血清MDA含量差异不显著(P>0.05).0.2、0.4和0.6g/kg组肌肉抗超氧阴离子自由基(O2-·)活性显著高于1.0和1.2g/kg组(P<0.05),其他各组间差异不显著(P>0.05).结果提示,饲料中添加一定量的核苷酸混合物能提高凡纳滨对虾幼虾的非特异性免疫和抗氧化能力,建议添加量为0.4~0.6g/kg.%A 5-week feeding trial was conducted to study the effects of dietary nucleotides on non-specific immune and antioxidant indices of juvenile Litopenaeus vannamei.A total of 960 shrimp with an average body weight of (0.43 ±0.01) g wererandomly allocated into 8 groups with 3 replicates per group and 60 shrimp per replicate. The control group were fed with the basal diet, while the other 7 groups were fed with the basal diets added with 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0 and 1.2 g/kg the nucleotide mixture of adenosine-5'-monophosphate (AMP), cytidine-5'-monophosphate (CMP), uridine-5'-monophosphate (UMP) disodium salt, inosine-5'monophosphate ( IMP ) disodium salt and guanosine-5'-monophosphate ( GMP ) disodium salt ( 1: 1: 1: 1:1,m/m), respectively. The results showed as follows: shrimp fed diets with 0.4 to 1.2 g/kg nucleotide mixture had a significantly higher total haemocyte count (THC) ( P < 0.05 or P < 0.01 ). Compared with the control group, serum superoxide dismutase (SOD) activity of 0.6 and 0.8g/kg groups were significantly increased (P <0.05). The total antioxidation capacity (T-AOC) of 0.4 g/kg group was increased by 51.0% compared with the control group ( P > 0.05) and significantly higher than that of 1.2 g/kg group ( P < 0.05). With the increasing of dietary nucleotide mixture level, SOD activity and T-AOC in hepatopancreas of all groups increased at first and then decreased, and reached the highest value at 0.4 g/kg group. The activities of peroxidase (POD)and alkaline phosphatase (AKP) in serum and hepatopancreas were not significantly affected by nucleotide mixture supplementation ( P > 0.05). The anti-superoxide anion radical ( O2- · ) in0.2, 0.4 and 0.6 g/kg groups was significantly higher than that of 1.0 and1.2 g/kg groups ( P < 0.05), and there were no significant differences among the other groups ( P > 0.05). It is concluded that nucleotide mixture can improve the non-specific immunity and antioxidant capacity ofjuvenile Litopenaeus vannamei, and the optimal level of dietary nucleotide mixture for juvenile Litopenaeus vannarnei is 0.4 to 0.6 g/kg. [ Chinese Journal of Animal Nutrition, 2011, 23 ( 5 ): 828-835 ]【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2011(023)005【总页数】8页(P828-835)【关键词】凡纳滨对虾;核苷酸混合物;非特异性免疫指标;抗氧化指标【作者】许丹丹;黄燕华;曹俊明;蓝汉冰;王国霞;张荣斌;陈晓瑛;严晶【作者单位】广东省农业科学院畜牧研究所,广州,510640;华南农业大学动物科学学院水产养殖系,广州,510642;华南农业大学动物科学学院水产养殖系,广州,510642;广东省农业科学院畜牧研究所,广州,510640;广东省农业科学院畜牧研究所,广州,510640;广东省农业科学院畜牧研究所,广州,510640;广东省农业科学院畜牧研究所,广州,510640;华中农业大学水产学院,武汉,430070;广东省农业科学院畜牧研究所,广州,510640;华南农业大学动物科学学院水产养殖系,广州,510642;广东省农业科学院畜牧研究所,广州,510640;华中农业大学水产学院,武汉,430070【正文语种】中文【中图分类】S963.73凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)因其具有抗逆能力强、生长速度快、饲料转化效率和加工出肉率高等诸多优点,已成为世界三大对虾养殖品种之一。
饲料中亮氨酸和异亮氨酸交互作用对牙鲆消化酶及免疫相关酶活力的影响
第32卷第3期 2 0 17年6月大连海洋大学学报JOURNAL OF DALIAN OCEAN UNIVERSITYV ol.32 N o.3June 2 0 17D O I:10. 16535/j. cnki. d lh y x b.2017.03.006文章编号:2095-1388 (2017 ) 03-0287-07饲料中亮氨酸和异亮氨酸交互作用对牙鲆消化酶及免疫相关酶活力的影响王莉苹,姜志强,孙梦蕾,司滨,韩雨哲,陈飞,暴宁(大连海洋大学水产与生命学院,农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁省北方鱼类应用生物学与增养殖重点实验室,辽宁 大连116023)摘要:为研究词料中亮氨酸(Leucine,Leu)和异亮氨酸(Isoleucine,Ile)的交互作用对牙鲆Para/ichthysolivaceus肠道消化酶及肝脏免疫相关酶活力的影响,以含50%全鱼蛋白牙鲆幼鱼饲料中氨基酸组成为参考,设2个Leu水平(分别占饲料干物质的2.58%和5.08%),并将其分别与3个Ile水平(分别占饲料干物质的1.44%、2.21%和4.44%)交互制成6种试验饲料(LL-LI、LL-MI、LL-HI、HL-LI、HL-MI、HL-HI);以初始体质量为(2.69依0.04) g的牙鲆为研究对象,将其随机分为6个组,每个处理组设3个重复,分别投喂含不同Leu和Ile水平的上述6种试验饲料;60 d的流水养殖试验结束后,测定牙鲆肠道消化酶(蛋白酶和脂肪酶)及肝脏免疫相关酶(总抗氧化能力T-AOC、过氧化氢酶CAT、超氧化物歧化酶SOD、酸性磷酸酶ACP、碱性磷酸酶AKP)活力。
结果表明:髙Ile饲料组肠道消化酶活力显著髙于中间水平Ile饲料组(P<0. 05),且饲料中髙水平的Leu可降低肠道消化酶活力(LI组除外);在低Leu处理组,当Ile逸2.21%时,随着饲料中Ile含量的增加,肝脏中CAT、SOD、ACP和AKP活力显著提髙(P<0. 05);但在髙Leu处理组,当Ile逸2.21%时,CAT、SOD和AKP活力随饲料中Ile水平的升髙显著降低(P<0.05)。
虾体内氨基酸含量变化及其影响因素的研究进展
虾的不同发育阶段不同组织内氨基酸含量
虾类在不同发育阶段其体内氨基酸的组成不 同 ∀ 年 增加到 等研究表明日本对虾 干重 其中在蚤 而从糠虾幼
Π εναε υσ ϕαπονιχυσ 从卵到仔虾发育过程中 游离
氨基酸含量从
状幼体和糠虾幼体期增长最为显著 ∀在糠虾幼体后 非必需氨基酸主要是甘氨酸持续增加 体期到仔虾 第 含量减少约 天 的变态期内 必需游离氨基酸 在虾幼体的发育期中游离氨基酸
Λ
究了褐对虾的仔虾在高渗透压中氨基酸的合成情 况 发现甘氨酸 !脯氨酸和牛磺酸是最重要的氨基酸 渗压剂 牛磺酸主要在低盐度下存在 而脯氨酸则主 要在高盐度下存在于氨基酸库中 虽然不是库中主要的氨基酸 压下由葡萄糖和谷氨酸合成 谷氨酸和丙氨酸 但是在稳定的高渗透 脯氨酸的合成是在高
盐下进行的 并且由高渗透压诱导非常重要 在任何 实验条件下均未发现甘氨酸是由葡萄糖和谷氨酸合 成的 ∀⁄ 虾 ° 等在
1
类立即进行抢救 !护养 争取尽快放回自然环境中 ∀ 对已搁浅死亡的种类应进行必要的测量和观察研究 如加强 工作 找出死亡原因 ∀
主要参考文献
∏± ογ ψ Χηινεσε ϑουρναλ οφ Οχεανολογ ψ αν δ Λι µ νολ 2
宣传教育 通过各种渠道大力进行宣传教育活动
新闻媒介 广播 !电视 的宣传教育作用 出版专门的 图书 ! 报刊杂志和宣传材料 在大 ! 中小学开设有关 的课程等等 从而提高公民 特别是广大渔民的自觉 保护海洋哺乳动物的意识 ∀ 同时成立救护海洋哺乳 动物的组织机构 对渔网偶然误捕受伤或搁浅的种
姚翠鸾
王维娜
王安利
河北大学生命科学学院 保定
近年实验研究结果表明 随着虾幼体的长大 其 体内蛋白质中各种氨基酸及游离氨基酸的比例也相 应变化 ∀另一方面 许多环境因子也对虾体内氨基酸 的种类和组成有重要影响 ∀因此 分析探讨虾类不同 发育阶段体内氨基酸的组成及环境中某些因素对虾 体内氨基酸含量的影响 可以更好地了解虾类生长 的促进和限制因子 从而在提高其生长发育速度 !免 疫力和营养价值等方面发挥积极作用 ∀
饲料亮氨酸水平对幼草鱼生长、饲料利用及体成分的影响
i(Is.iota1 am ino aci(Is and whole fish composition were not affected significantly by dietary leucine level
fP>0.05).ALT and ASq’activities in hepatopancreas were not affected significantly by dietary leucine level(P>0.05). Fhe broken—line regression analysis with weight gain,feed ef iciency and protein reten一
-l _l _I U
兰 璺堡蔓翌查笙兰塑 璺笙曼 塑
饲 料 利 用 及 体 菇 分 的 影 响
一 黄 爱霞 孙 丽慧 陈建明 沈斌乾 姜 建湖
f浙 江 省 淡 水 水 产 研 究所 农 业 部 淡 水 渔业 健 康 养 殖 实验 室 浙 江 省 鱼 类健 康 与 营养 重 点 实验 室 ,浙 江 湖 州 3l300I)
leucine requirement for juvenile grass carp was
estimated to be 15.17~15.29 g/kg of dry diet. anti 4.68% -4.71% of the dietary crude protein.
tion efficiency as the criteria indicate(J that the
requirements of dietar y leucine for juvenile grass
作 者 简 介 :黄 爱 霞 ,博 士 后 ,研 究 方 向 为 动 物 营 养 与 饲 料 科 学 。
饲料蛋白水平对斑节对虾生长、血液生化指标及体成分的影响
含量上 升 ; 水分含量下降 , 但下 降趋 势不 明显 ( P> 0 . 0 5 ) ; 灰分和脂肪的含量没有规律性 的变化 。
关键 词 :蛋 白水平 ; 斑节对虾 ;生化 指标 ; 体成分
中 图分 类 号 :S 9 6 3 文 献 标 识 码 :A
斑节对 虾( P e n a e u s m o n o d o n ) , 俗称 草虾、 黑
通讯 作者 : 黄建华 , 研究 员。E — m a i l : h j h 2 1 0 4 4 0 @s i n a . c o m. c n
第 1 期
姜
松等: 饲料蛋 白水平对斑节对虾生长 、 血 液生化指标及体成分 的影响
4 5
组 自行繁育的苗种 , 用室外水 泥池暂养和标粗养 殖一个月 , 挑选个体大小在 0 . 5 1 ± 0 . 2 3 g的个体 进 行 实验 。
的研究 较 为 关 注 。对 虾 的 免 疫 为 非 特 异 性
1 材 料 与 方 法
1 . 1 实验 材料
1 . 1 . 1 实验虾
免疫 , 其血液在疾病防御 中起 重要作用。 目前大 多数研究 集 中在抗逆 和抗 病 。 等 免疫方
3 一l 0—9 收稿 日期 2Ul
一
种- 。在对 虾 养 殖 中 , . 饲 料成 本 占养 殖 总 成
本 的一 半 以上 。研究 表 明 , 斑 节 对 虾养 殖 对 蛋 白 质 的需 求很 高 , 饲 料 中蛋 白质适 宜含 量 约 为 3 0 %
~
酯等生化指标和虾体营养组成成分进行 了分析 , 比较 不 同蛋 白水 平 饲 料 的饲 喂 下 , 斑 节 对 虾 血 液
2 0 1 2 0 1 C 0 1 ) ; 广东省科技成果转化项 目( 2 0 1 2 N L 0 2 6 ) ; 桂 科转 1 3 4 6 0 0 4—6 ; 中国水产科 学研 究 院基本科
不同水平蛋白质对“太湖1号”青虾生长性能的试验
合计
1 0 4
2 . 试验 打样 情况 分别 在 8 月 8日、9月 7曰、9 月2 7日、 1 0 月 l 8
8月 8目放 养 7 万尾规格 1 0 0 0 0 尾/ 千克 “ 太湖 l 号” 虾 苗种 。8 个池塘放 养苗种 数量和规格 相 同。虾 苗放 养 前,在池塘四周的浅水 区移栽水草 ,使水草在池塘
3 2 + 1
3 2 + 1 3 2 3 2 3 4
7 . 2 8
7 . 2 8 7 . 2 8 7 . 2 8 8 . 8
除饵料 蛋 白含量 不同 以外 ,放养前的准备工作 以 及 日常管理工作基本 一致,具体是:干塘后进行池塘
清 整 、曝 晒 ,清 除过 多淤泥 。每 亩用 7 5 千 克 生石灰
分别采用 不同蛋 白含量的青虾颗粒饵料进行投 喂,蛋
t l " ] 自苗种 放养 结束后 ,每 隔 2 0 天 ,对 同一养 殖环境
条件下 的虾进行抽样检 查 。
试验 在珥 陵镇 8 个 主养塘 口进行 ,7 月2 8日亩放 养 规格 1 万尾/ 千 克 的青 虾苗种 8 万 尾/ 亩 ,池 塘配备 微孔增氧 设备,从苗种放养后池塘分别投喂不 同蛋 白 含量 的饲 料 以及添 加瑞康 1 号进行对 比试 验 ,方法主
村 ,试验 面积 1 0 4 亩 ,分 8 个塘 口。
在放养模 式一致的情况下 ,进行投 喂不 同蛋 白含
量 的饲料 对青虾生长 的影 响试验 。根据试验要 求,我
采取 8 个试验 点对 比试验 的方法 。选择池塘 条件
相 似 的土池 8 个 ,面积 在 3 0 亩 以内,水深平 均 1 米, 池 底较 平整 ,淤泥 不超 过 2 0 厘米 。水源 充足 ,水质 良好 ,排 灌方 便 。“ 太湖 1 号 ”青 虾苗种 来源 于淡 水 渔业研 究中心大浦基地的亲本繁育后 的子一代 。放养 时间分别 为 2 0 1 1 年7 月2 8日、8 月8 曰。对 三个池塘
糖源组成和投喂频率对凡纳滨对虾非特异性免疫功能及抗氧化性功能的影响
实验数据采用SPSS19.0统计软
件进行数据分析,实验结果以平均值±标准差(mean±SD)表示,数据统计 应用ANOVA单因素比较分析,交互作用采用双因素方差分析分析法(Two-Way LSD,Duncan’s),实验结果以P<0.05表示差异显著。
二、结果
1.投喂频率和糖源组成对凡纳滨对虾增重率的影响
源料 鱼粉 虾粉 豆粕 糖源 纤维素 其他 合计 营养水平 粗蛋白质 粗脂肪
ห้องสมุดไป่ตู้
表1 基础饲料组成及营养水平
蔗糖(%) 37.00 15.00 10.00 20.00 5.00 13.00 100.00
45.90 10.60
淀粉(%) 37.00 15.00 10.00 20.00 5.00 13.00 100.00
技术 交流
以初始体重为(0.38±0.01)g的凡纳滨对虾为实验对象,采用3×2双因子实验,研究两种糖源饲料 (蔗糖和玉米淀粉)和投喂频率(7次/天、5次/天、2次/天)及其交互作用对对虾生长、非特异性免 疫功能和抗氧化性功能的影响,结果表明提高投喂频率后凡纳滨对虾增重率显著升高,糖源对凡纳滨 对虾增重率无显著影响。
实验证明随着投喂频率的增加对虾增长率显著升高,对虾增重率以投喂频率 5次/天淀粉组最高,和投喂7次/天组别间差异不显著,但均显著高于投喂频率2次 /天各组(P<0.05),相同频率各糖源组间无明显差异(P>0.05)。
表2 投喂频率和糖源组成对凡纳滨对虾增重率的影响
投喂频率 2 2 5 5 7 7
糖源品种 蔗糖
糖源组成和投喂频率 对凡纳滨对虾非特异性免疫功能 及抗氧化性功能的影响
文/杨品贤 郭冉 夏辉 路晶晶 贾高旺 李雪鹤
不同水平的氨基酸对小香鸡免疫性能与抗氧化性能的影响
Efe t fDi e e tLe es o f c s o f r n v l fAm i o Ac d n m mun t n n i so I iy a d Anto i to o a x a g Ch c e i x da i n f Xi o i n i k n
s i ft e e p rme ts o e h tt e ewa o sg i c tdf r n e i e i mu i d a t xd t n o a x a g c ik n a n u t o x i n h w d t a h r s n inf a i e e c n t m n t a n i iai fXio in h c e mo g s h e in f h yn o o
江西农业学报
2 1 ,3 8 :5 0 Байду номын сангаас2 ( ) 18~10 6
AeaA r u ua in x t gi h reJa g i c
不 同水 平 的氨基 酸对 小香 鸡 免疫性 能 与抗 氧化性 能 的影 响
杨 兵, 夏先林 , 吴文旋
( 贵州大学 动物科学学院 , 贵州 贵阳 50 2 ) 505
Ab ta t s r c :On u d e n w ny h a ty a d b d ih —ai e Xio i g c ik n ,w ih w l b od fo t e fr a tr e h n rd a d t e t e l o y weg t l k a x a hc e s h c i e s l r m h am f h n n l e i e k ,w r ee td a h x e i t a ma ,te r t o c h n W 1 1 h ywe er n o l iie n o T r e f e w e s e e s lce s te e p r n a i ls h a i f o k t e a : ,t e r a d m y d vd d it h ,L u, v me l n o c o s V dI ru l n a a l go p,e c r u a e e t , d e e yr p a se 0 c ik n .T ep e e t gp ro a a s t etsi gp r e a h go p h d3 r p as a v r e e tt td 1 hc e s h rtsi e d w 2 d y , h t e o n e n i s e n i d
水产动物亮氨酸营养研究进展
动物营养学报2020,32(12):5516⁃5523ChineseJournalofAnimalNutrition㊀doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2020.12.004水产动物亮氨酸营养研究进展张圆圆㊀王连生∗(中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江省水生动物病害与免疫重点实验室,哈尔滨150070)摘㊀要:亮氨酸作为支链氨基酸中唯一的生酮氨基酸,是水产动物的必需氨基酸之一,对水产动物的营养生理作用至关重要㊂本文综述了水产动物亮氨酸需求量㊁亮氨酸与其他氨基酸的相互作用㊁亮氨酸对蛋白质代谢㊁抗氧化能力㊁免疫功能㊁肠道发育的影响,以期为亮氨酸在水产动物营养需求㊁功能机理与健康养殖方面的深入研究提供参考㊂关键词:水产动物;亮氨酸;需求量;免疫;肠道中图分类号:S963㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:1006⁃267X(2020)12⁃5516⁃08收稿日期:2020-04-24基金项目:黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(GA18B202);国家大宗淡水鱼产业技术体系资金(CARS⁃45);黑龙江水产研究所基本科研业务费专项资金(HSY202002M);国家自然科学基金项目(31802305);中国水产科学研究院基本科研业务费(2018HY⁃ZD0503)作者简介:张圆圆(1985 ),女,黑龙江哈尔滨人,助理研究员,博士,从事水产动物营养与饲料研究㊂E⁃mail:zhangyuanyuan@hrfri.ac.cn∗通信作者:王连生,副研究员,E⁃mail:wangliansheng@hrfri.ac.cn㊀㊀必需氨基酸在水产动物生长和健康方面发挥着重要作用㊂支链氨基酸(branched⁃chainaminoacid,BCAA)属于必需氨基酸㊂由亮氨酸㊁缬氨酸和异亮氨酸组成的支链氨基酸,在动物蛋白质总氨基酸中的占比为18% 20%,主要在骨骼肌中被支链氨基酸脱氢酶复合物氧化,为肌肉内源合成谷氨酰胺提供α-氨基[1-2]㊂亮氨酸在机体合成蛋白质㊁能量代谢㊁葡萄糖平衡等方面具有重要作用[3],是一种功能性氨基酸㊂亮氨酸通过激活雷帕霉素靶蛋白(targetofrapamycin,TOR)信号通路,调控机体蛋白质合成㊁分解代谢和免疫功能[4]㊂同时,亮氨酸在血红蛋白生成及胁迫条件下血糖水平调节方面具有重要作用[5]㊂本文综述了水产动物亮氨酸需求量㊁亮氨酸对蛋白质代谢㊁抗氧化能力㊁免疫功能㊁肠道发育的影响,以期为亮氨酸在水产动物营养需求㊁功能机理与健康养殖方面的深入研究提供参考㊂1 水产动物亮氨酸需求量㊀㊀亮氨酸是水产动物的必需氨酸之一,亮氨酸缺乏会降低草鱼(Ctenopharyngodonidella)[6]㊁印度鲤鱼(Cirrhinusmrigala)[7]㊁印度囊鳃鲶(Het⁃eropneustesfossilis)[8]㊁异育银鲫(Carassiusaura⁃tusgibeliovar.CASⅢ)[9]等水产动物的生长性能㊁饲料转化率及蛋白质沉积率[6-9]㊂近年发表的水产动物亮氨酸需求量见表1,由此表可知鱼类对亮氨酸的需求量为1.29% 3.41%,虾蟹类对亮氨酸的需求量为1.70% 2.48%㊂不同品种水产动物的亮氨酸需求量不同,由表1可知,吉富罗非鱼(Oreochromisniloticus)的亮氨酸需求量仅为1.25%,而卵形鲳鲹(Trachinotusovatus)的亮氨酸需求量高达3.29%㊂同一品种不同规格的水产动物对亮氨酸的需求量也不同,体重为2.25㊁295.85g草鱼的亮氨酸需求量分别为1.52%㊁1.30%,一般小规格水产动物的亮氨酸需求量高于大规格水产动物[6,10]㊂不同评价指标对水产动物亮氨酸需求量也有较大影响,杂交石斑鱼(Epi⁃nephelusfuscoguttatusɬˑEpinepheluslanceolatus)分别以增重率㊁蛋白质沉积率为评价指标,回归分析得出的亮氨酸需求量为3.25%㊁3.41%[11]㊂此外,不同的计算模型也影响水产动物的亮氨酸需求量,0.38g凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)分别以二次多项式模型㊁折线模型进行估算,得出的亮氨酸需求量为2.36%㊁2.48%[12-13]㊂12期张圆圆等:水产动物亮氨酸营养研究进展表1 水产动物亮氨酸需求量(占饲料的百分比)Table1㊀Leucinerequirementofaquaticanimal(percentageofdiet)品种Species体重Bodyweight/g模型Mode评价指标Evaluationindicator需求量Requirement/%参考文献Reference鱼类Fish草鱼Grasscarp295.85二次多项式模型增重率血氨含量丙二醛含量1.301.291.32Deng等[6]2.25折线模型增重率饲料转化率1.521.53黄爱霞等[10]杂交鲶鱼HybridCatfish23.19折线模型增重率2.81Zhao等[14]团头鲂Bluntsnoutbream23.27二次多项式模型增重率特定生长率1.401.56Liang等[15]10.2二次多项式模型特定生长率饲料转化率1.441.61Ren等[16]青鱼Blackcarp2.9二次多项式模型增重率饲料转化率2.352.39Wu等[17]露斯塔野鲮Indianmajorcarp0.40二次多项式模型增重率饲料转化率1.571.55Abidi等[5]0.60二次多项式模型增重率1.58Ahmed等[7]杂交石斑鱼Hybridgrouper6.92二次多项式模型增重率蛋白质沉积率3.253.41Zhou等[11]眼斑拟石首鱼Reddrum1.42二次多项式模型增重率蛋白质沉积率1.571.63Castillo等[18]吉富罗非鱼Niletilapia1.94二次多项式模型增重率1.25Gan等[19]卵形鲳鲹Goldenpompano5.76二次多项式模型增重率特定生长率3.283.29Tan等[20]印度囊鳃鲶Stingingcatfish6.80二次多项式模型增重率饲料转化率1.651.69Farhat等[8]建鲤Jiancarp7.88二次多项式模型增重率1.29伍曦[21]花鲈Japaneseseabass167.82二次多项式模型增重率饲料转化率2.762.80路凯[22]8.0二次多项式模型增重率2.39Li等[23]吉富罗非鱼Niletilapia53.65二次多项式模型增重率饲料转化率2.332.28石亚庆等[24]大黄鱼Largeyellowcroaker6.0二次多项式模型增重率2.92Li等[25]卡特拉鱼Catlacatla3.75二次多项式模型增重率1.57Zehra等[26]甲壳类Crustacean三疣梭子蟹Swimmingcrabs3.75折线模型增重率2.21Huo等[27]凡纳滨对虾Pacificwhiteshrimp0.38二次多项式模型增重率饲料转化率2.362.40Liu等[12]0.38折线模型增重率2.48刘福佳等[13]0.53折线模型增重率2.46王用黎[28]斑节对虾Tigershrimp0.02二次多项式模型增重率1.70Millamena等[29]中华绒螯蟹Chinesemittencrabs0.90折线模型特定生长率2.36杨霞等[30]7155㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报32卷2㊀亮氨酸与其他氨基酸的相互作用㊀㊀由于支链氨基酸在细胞膜上的转运载体相同,在水产动物上已开展了关于亮氨酸㊁缬氨酸和异亮氨酸之间及与其他氨基酸的协同或拮抗作用的相关研究㊂2.1㊀亮氨酸与缬氨酸的相互作用㊀㊀Han等[31]采用2ˑ3双因素(亮氨酸含量:1.6%㊁5.0%;缬氨酸含量:1.2%㊁1.8%㊁2.5%)试验明确了亮氨酸能够显著影响增重率㊁特定生长率及饲料转化率,且与缬氨酸之间存在交互作用;低亮氨酸含量时,增重率和特定生长率与随着缬氨酸含量的增加而升高,在亮氨酸含量为1.6%㊁缬氨酸含量为2.5%时,增重率最高;在亮氨酸含量为5.0%㊁缬氨酸含量为2.5%时,增重率最低;与1.6%亮氨酸组相比,5.0%亮氨酸组血细胞比容㊁血红蛋白含量㊁乳酸脱氢酶㊁谷草转氨酶活性及甘油三酯含量显著降低㊂亮氨酸与缬氨酸对牙鲆(Paralichthysolivaceus)消化酶㊁免疫酶活性存在显著的交互作用,且亮氨酸含量为2%㊁缬氨酸含量为2.27%时,脂肪酶㊁超氧化物歧化酶的活性得到显著提高[32]㊂上述研究结果表明饲料高亮氨酸㊁高缬氨酸之间存在拮抗作用,在虹鳟(On⁃corhynchusmykiss)[33]㊁红点鲑(Salvelinusnamay⁃cush)[34]的研究中也得到类似的结果㊂2.2㊀亮氨酸与异亮氨酸的相互作用㊀㊀王丽萍等[35]采用2ˑ3(亮氨酸含量:2.58%㊁5.08%,异亮氨酸含量:1.44%㊁2.21%㊁4.44%)试验研究了亮氨酸和异亮氨酸对生长性能㊁消化酶活性的影响,在亮氨酸含量为5.08%㊁异亮氨酸含量为1.44%时,增重率㊁特定生长率和蛋白酶活性显著高于低亮氨酸低异亮氨酸组;在亮氨酸含量为2.58%㊁异亮氨酸含量为4.44%时,脂肪酶活性显著高于低亮氨酸低异亮氨酸组,且亮氨酸和异亮氨酸之间存在显著的交互作用㊂此外,随着亮氨酸含量的升高,大马哈鱼(Oncorhynchusketa)的异亮氨酸需求量也相应升高[36]㊂2.3㊀亮氨酸与其他氨基酸的作用关系㊀㊀研究发现,眼斑拟石首鱼饲料中亮氨酸含量为0.90%时血清中异亮氨酸㊁缬氨酸的含量显著高于亮氨酸含量为2.50%时[18];草鱼肌肉中异亮氨酸㊁缬氨酸含量随着饲料中亮氨酸含量的升高而显著降低,但肌肉中总氨基酸的含量显著升高[37];随着饲料中亮氨酸含量的升高,杂交石斑鱼血清中缬氨酸㊁异亮氨酸的含量显著降低[11]㊂以上结果显示亮氨酸与异亮氨酸㊁缬氨酸存在拮抗作用,随着饲料中亮氨酸含量的升高,其他2种支链氨基酸的含量显著降低㊂另有研究结果表明,随着饲料中亮氨酸含量的升高,团头鲂(Megalo⁃bramaamblycephala)血清中异亮氨酸的含量显著降低,但对血清中缬氨酸含量的影响未达到显著水平[16]㊂饲料中高亮氨酸含量未对青鱼(Mylo⁃pharyngodonpiceus)肌肉中缬氨酸㊁异亮氨酸的含量产生显著影响,但必需氨基酸苏氨酸㊁赖氨酸㊁亮氨酸㊁苯丙氨酸的含量显著升高,非必需氨基酸谷氨酸㊁天冬氨酸㊁甘氨酸㊁丝氨酸㊁半胱氨酸㊁脯氨酸的含量同样显著升高[17]㊂饲料中亮氨酸含量对凡纳滨对虾肌肉中异亮氨酸㊁缬氨酸的含量均无显著影响,但适量的亮氨酸可提高肌肉中苯丙氨酸㊁苏氨酸的含量[13]㊂随着饲料中亮氨酸含量的升高,中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)肌肉中亮氨酸和缬氨酸的含量随之升高,丝氨酸㊁半胱氨酸㊁总氨基酸㊁总必需氨基酸的含量也随之升高[30]㊂亮氨酸的吸收也受其他氨基酸的影响,肠道主要功能物质谷氨酰胺可以促进草鱼肠道对亮氨酸和脯氨酸的吸收,并显著提高肠道蛋白质的合成水平[38]㊂综上所述,饲料中的亮氨酸与异亮氨酸㊁缬氨酸㊁其他氨基酸的作用关系可能与品种㊁饲料组成等有关㊂3㊀亮氨酸对水产动物蛋白质代谢的影响㊀㊀亮氨酸缺乏或过量阻碍机体蛋白质的沉积㊂亮氨酸缺乏或过量降低凡纳滨对虾蛋白质沉积率㊁出肉率㊁肌肉蛋白质含量,且亮氨酸缺乏还会降低肌肉总氨基酸含量[12]㊂眼斑拟石首鱼(Sci⁃aenopsocellatus)饲料中亮氨酸含量由0.90%提高至2.50%时,蛋白质沉积率㊁出肉率均得到显著提高[18]㊂对于异育银鲫㊁团头鲂㊁草鱼㊁杂交石斑鱼,亮氨酸缺乏显著降低肝脏㊁肌肉TOR基因的表达量,抑制下游基因核糖体S6激酶1(S6K1)基因的表达,降低蛋白质的合成代谢[9,11,16,37]㊂亮氨酸缺乏或过量降低杂交石斑鱼脑垂体生长激素㊁肝脏生长激素受体1㊁胰岛素样生长因子-1的基因表达量[11]㊂孙姝娟等[39]注射亮氨酸24h后,对虾TOR表达量是对照组的3 4倍,表明亮氨酸对TOR的表达具有调节作用㊂815512期张圆圆等:水产动物亮氨酸营养研究进展4㊀亮氨酸对水产动物免疫功能的影响㊀㊀亮氨酸缺乏显著降低水产动物肠道㊁肝脏㊁鳃等器官的免疫功能,主要通过降低非特异性免疫相关酶活性㊁抗炎因子的基因表达量㊁免疫器官结构的完整性产生不良影响㊂亮氨酸缺乏或过量显著降低草鱼前肠㊁中肠㊁后肠溶菌酶㊁酸性磷酸酶活性及补体3(complement3,C3)的含量,以溶菌酶活性为指标,进行二次多项式回归分析得到草鱼亮氨酸需求量为1.29%;亮氨酸缺乏显著提高促炎因子白细胞介素-8(interleukin⁃8,IL⁃8)㊁肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor⁃α,TNF⁃α)的基因表达量,降低抗炎因子白细胞介素-10(interleu⁃kin⁃10,IL⁃10)㊁转化生长因子-β(transforminggrowthfactor⁃β,TGF⁃β)的基因表达量[40]㊂此外,亮氨酸缺乏或过量显著提高团头鲂肝脏TNF⁃α的基因表达量[16]㊂亮氨酸预处理可显著降低脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导露斯塔野鲮(Labeorohita)肝细胞的促炎因子IL⁃8㊁TNF⁃α㊁白细胞介素-1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)的基因表达量,提高抗炎因子IL⁃10的基因表达量,降低Toll样受体4(Tolllikereceptor4,TLR4)信号通路的TLR4㊁转录因子p65㊁髓样分化因子88㊁丝裂原活化蛋白激酶p38的基因及蛋白表达量[41]㊂上述研究表明,亮氨酸缺乏引发肠道炎症反应,影响肠道健康㊂亮氨酸缺乏显著降低卵形鲳鲹(Trachinotusova⁃tus)血清溶菌酶活性㊁全血血红蛋白含量及血细胞比容[20]㊂亮氨酸缺乏显著降低青鱼血清溶菌酶活性㊁C3含量;亮氨酸缺乏或过量均会显著降低血液中天然抗性相关巨噬细胞蛋白㊁溶菌酶㊁C3㊁补体9(complement9,C9)㊁干扰素-α(interferon⁃α,IFN⁃α)㊁肝杀菌肽等基因的表达量,从而影响鱼类非特异性免疫功能[17]㊂鳃不仅是鱼类呼吸㊁调节渗透压㊁酸碱平衡㊁氨氮排放的器官,同时也是主要的淋巴组织,具有重要的免疫功能[42-43]㊂亮氨酸缺乏通过使细胞凋亡㊁紧密连接蛋白受损等方式破坏鳃结构的完整性,鳃结构完整性受损会降低免疫功能,甚至造成死亡[44]㊂注射或灌喂亮氨酸显著降低罗非鱼(Oreochromisniloticus)海豚链球菌攻毒后的死亡率,主要作用途径是促进机体缬氨酸㊁亮氨酸㊁异亮氨酸的代谢及氨基酰-转移核糖核酸(tRNA)的生物合成[45]㊂5㊀亮氨酸对水产动物抗氧化能力的影响㊀㊀活性氧自由基(ROS)可能是引起水产动物机体氧化损伤的主要因素㊂机体非抗氧化酶系统和抗氧化酶系统是抑制氧化损伤的主要防御系统[46]㊂机体抗氧化酶系统主要受Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白α/核因子E2相关因子2(Kelch⁃likeepichlorohydrin⁃associatedprotein1α⁃nuclearfactor⁃E2⁃relatedfactor2,Keap1α/Nrf2)信号通路调控[47]㊂亮氨酸缺乏或过量均会显著提高肠道㊁肌肉丙二醛(malondialdehyde,MDA)㊁蛋白羰基的含量,降低谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量以及铜锌超氧化物歧化酶(copper/zincsuperoxidedis⁃mutase,CuZnSOD)㊁谷胱甘肽过氧化物酶(gluta⁃thioneperoxidase,GPx)的活性,其作用机理可能是亮氨酸缺乏或过量通过Keap1α/Nrf2信号通路降低CuZnSOD㊁GPx的基因表达量,进而降低机体抗氧化能力[6,37]㊂亮氨酸缺乏或过量降低团头鲂血清总抗氧化能力(totalantioxidantcapacity,T⁃AOC)与SOD㊁GPx㊁过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性,提高MDA含量,降低核因子E2相关因子2(nuclearfactor⁃E2⁃relatedfactor2,Nrf2)㊁血红素氧化酶-1(hemeoxygenase⁃1,HO⁃1)㊁GPx㊁谷胱甘肽转移酶(glutathionetransferase,GST)㊁SOD的基因表达量[15]㊂亮氨酸缺乏显著降低卵形鲳鲹血清SOD活性㊁T⁃AOC,提高MDA含量[20]㊂亮氨酸缺乏显著降低三疣梭子蟹(Portunustritubercu⁃latus)血清SOD活性,提高MDA含量[27]㊂亮氨酸含量在1.57% 2.07%时,卵形鲳鲹血清中T⁃AOC㊁SOD活性显著升高,MDA含量显著降低[48]㊂综上可知,适量的亮氨酸可以通过Keap1α/Nrf2信号通路提高水产动物机体抗氧化酶活性,缓解机体氧化损伤㊂6㊀亮氨酸对水产动物肠道发育的影响㊀㊀肠道在水产动物消化吸收㊁抗氧化及免疫方面发挥重要作用,且肠道消化吸收能力与肠道黏膜结构完整性具有相关性㊂因此,肠道发育情况直接影响水产动物生长及健康㊂亮氨酸缺乏显著降低罗非鱼肠道表皮生长因子和肠道表皮生长因子受体的表达量,降低肠Na+⁃K+⁃ATP酶以及胃蛋白酶㊁肠蛋白酶㊁肠脂肪酶㊁肠淀粉酶的活性;添加亮氨酸显著提高吉富罗非鱼肠道表皮生长因子9155㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报32卷(epidermalgrowthfactor,EGF)㊁表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的含量,EGF与EGFR结合后促进肠道黏膜微绒毛的发育,进而提高肠道消化酶的活性和肠道结构的完整性[24]㊂亮氨酸缺乏显著降低青鱼肠道α-淀粉酶㊁胰蛋白酶㊁糜蛋白酶㊁弹性蛋白酶的活性[17]㊂此外,亮氨酸作为支链氨基酸可以为谷氨酰胺合成提供碳源和氮源,促进肠道谷氨酰胺的合成,谷氨酰胺可以为肠道提供能量,进而促进肠道发育[38]㊂亮氨酸缺乏降低肠道消化酶活性的主要原因可能是由于肠道发育受到抑制㊂亮氨酸缺乏显著降低卵形鲳鲹肠道微绒毛数量㊁长度,提高隐窝深度[20]㊂亮氨酸缺乏或过量显著降低杂交石斑鱼褶皱高度㊁褶皱宽度㊁肠上皮细胞高度㊁微绒毛高度[11]㊂亮氨酸含量在1.57% 2.07%时,显著提高卵形鲳鲹肠淀粉酶㊁胃蛋白酶的活性[48]㊂亮氨酸促进肠道完整性主要是通过提高肠道紧密连接蛋白 闭合蛋白(claudin)b㊁claudinc㊁claudin3㊁claudin15㊁闭锁蛋白(occludin)㊁闭锁小带蛋白-1(zonulaoccluden⁃1,ZO⁃1)等基因的表达量,进而促进肠道发育㊁提高消化酶活性[40]㊂7 小结与展望㊀㊀近年来,研究人员开展了大量亮氨酸的相关研究,确定了鱼类对亮氨酸的需求量为1.29% 3.41%,虾蟹类对亮氨酸的需求量为1.70% 2.48%;分析了亮氨酸与缬氨酸㊁异亮氨酸氨基酸的相互作用的;探讨了亮氨酸对蛋白质代谢㊁免疫功能㊁抗氧化功能的影响㊂未来对于亮氨酸的研究,应不局限于鱼类的小规格阶段,需拓展至生长中后期;作为支链氨基酸,其与其他氨基酸和营养物质的互作关系亦是值得深入的方向,从而更全面地了解亮氨酸的功能以及营养作用机制,为水产养殖业㊁动物健康保障和功能性物质的开发奠定基础㊂参考文献:[1]㊀LIP,MAIKS,TRUSHENSKIJ,etal.Newdevelop⁃mentsinfishaminoacidnutrition:towardsfunctionalandenvironmentallyorientedaquafeeds[J].AminoAcids,2009,37(1):43-53.[2]㊀LIP,YINYL,LIDF,etal.Aminoacidsandim⁃munefunction[J].BritishJournalofNutrition,2007,98(2):237-252.[3]㊀LYNCHCJ,ADAMSSH.Branched⁃chainaminoacidsinmetabolicsignallingandinsulinresistance[J].NatureReviewsEndocrinology,2014,10(12):723-736.[4]㊀MEIJERAJ,DUBBELHUISPF.Aminoacidsignal⁃lingandtheintegrationofmetabolism[J].Biochemi⁃calandBiophysicalResearchCommunications,2004,313(2):397-403.[5]㊀ABIDISF,KHANMA.DietaryleucinerequirementoffingerlingIndianmajorcarp,Labeorohita(Hamil⁃ton)[J].AquacultureResearch,2007,38(5):478-486.[6]㊀DENGYP,JIANGWD,LIUY,etal.Differentialgrowthperformance,intestinalantioxidantstatusandrelativeexpressionofNrf2anditstargetgenesinyounggrasscarp(Ctenopharyngodonidella)fedwithgradedlevelsofleucine[J].Aquaculture,2014,434:66-73.[7]㊀AHMEDI,KHANMA.Dietarybranched⁃chainami⁃noacidvaline,isoleucineandleucinerequirementsoffingerlingIndianmajorcarp,Cirrhinusmrigala(Hamilton)[J].BritishJournalofNutrition,2006,96(3):450-460.[8]㊀FARHAT,KHANMA.Responseoffingerlingstin⁃gingcatfish,Heteropneustesfossilis(Bloch)tovar⁃yinglevelsofdietaryL⁃leucineinrelationtogrowth,feedconversion,proteinutilization,leucineretentionandbloodparameters[J].AquacultureNutrition,2014,20(3):291-302.[9]㊀ZOUT,CAOSP,XUWJ,etal.Effectsofdietaryleucinelevelsongrowth,tissueproteincontentandrelativeexpressionofgenesrelatedtoproteinsynthesisinjuvenilegibelcarp(Carassiusauratusgibeliovar.CASⅢ)[J].AquacultureResearch,2018,49(6):2240-2248.[10]㊀黄爱霞,孙丽慧,陈建明,等.饲料亮氨酸水平对幼草鱼生长㊁饲料利用及体成分的影响[J].饲料工业,2018,39(2):26-32.[11]㊀ZHOUZY,WANGX,WUXY,etal.Effectsofdiet⁃aryleucinelevelsongrowth,feedutilization,neuro⁃endocrinegrowthaxisandTOR⁃relatedsignalinggenesexpressionofjuvenilehybridgrouper(Epineph⁃elusfuscoguttatusɬˑEpinepheluslanceolatus)[J].Aquaculture,2019,504:172-181.[12]㊀LIUFJ,LIUYJ,TIANLX,etal.Quantitativedieta⁃ryleucinerequirementofjuvenilePacificwhite025512期张圆圆等:水产动物亮氨酸营养研究进展shrimp,Litopenaeusvannamei(Boone)rearedinlow⁃salinitywater[J].AquacultureNutrition,2014,20(3):332-340.[13]㊀刘福佳,李雪菲,刘永坚,等.低盐度条件下的凡纳滨对虾幼虾亮氨酸营养需求[J].中国水产科学,2014,21(5):963-972.[14]㊀ZHAOY,LIJY,JIANGQ,etal.Leucineimprovedgrowthperformance,musclegrowth,andmusclepro⁃teindepositionthroughAKT/TORandAKT/FOXO3asignalingpathwaysinhybridcatfishPel⁃teobagrusvachelliˑLeiocassislongirostris[J].Cells,2020,9(2):327.[15]㊀LIANGHL,MOKRANIA,JIK,etal.Dietaryleu⁃cinemodulatesgrowthperformance,Nrf2antioxidantsignalingpathwayandimmuneresponseofjuvenilebluntsnoutbream(Megalobramaamblycephala)[J].Fish&ShellfishImmunology,2018,73:57-65.[16]㊀RENMC,HABTE⁃TSIONHM,LIUB,etal.Dietaryleucinelevelaffectsgrowthperformance,wholebodycomposition,plasmaparametersandrelativeexpres⁃sionofTORandTNF⁃αinjuvenilebluntsnoutbream,Megalobramaamblycephala[J].Aquaculture,2015,448:162-168.[17]㊀WUCL,CHENL,LUZB,etal.Theeffectsofdieta⁃ryleucineonthegrowthperformances,bodycomposi⁃tion,metabolicabilitiesandinnateimmuneresponsesinblackcarpMylopharyngodonpiceus[J].Fish&ShellfishImmunology,2017,67:419-428.[18]㊀CASTILLOS,GATLINⅢDM.Dietaryrequirementsforleucine,isoleucineandvaline(branched⁃chaina⁃minoacids)byjuvenilereddrumSciaenopsocellatus[J].AquacultureNutrition,2018,24(3):1056-1065.[19]㊀GANL,ZHOULL,LIXX,etal.Dietaryleucinere⁃quirementofjuvenileNiletilapia,Oreochromisnilotic⁃us[J].AquacultureNutrition,2016,22(5):1040-1046.[20]㊀TANXH,LINHZ,HUANGZ,etal.Effectsofdiet⁃aryleucineongrowthperformance,feedutilization,non⁃specificimmuneresponsesandgutmorphologyofjuvenilegoldenpompanoTrachinotusovatus[J].Aq⁃uaculture,2016,465(1):100-107.[21]㊀伍曦.亮氨酸对幼建鲤生长性能和免疫功能的影响[D].硕士学位论文.雅安:四川农业大学,2011:15-29.[22]㊀路凯.花鲈对亮氨酸㊁异亮氨酸和色氨酸需求量的研究[D].硕士学位论文.青岛:中国海洋大学,2015:16-31.[23]㊀LIY,CHENGZY,MAIKS,etal.DietaryleucinerequirementofjuvenileJapaneseseabass(LateolabraxJaponicus)[J].JournalofOceanUniversityofChina,2015,14(1):121-126.[24]㊀石亚庆,孙玉轩,罗莉,等.吉富罗非鱼亮氨酸需求量研究[J].水产学报,2014,38(10):1778-1785.[25]㊀LIY,AIQH,MAIKS,etal.Dietaryleucinerequire⁃mentforjuvenilelargeyellowcroakerPseudosciaenacrocea(Richardson,1846)[J].JournalofOceanUni⁃versityofChina,2010,9(4):371-375.[26]㊀ZEHRAS,KHANMA.DietaryleucinerequirementoffingerlingCatlacatla(Hamilton)basedongrowth,feedconversionratio,RNA/DNAratio,leu⁃cinegain,bloodindicesandcarcasscomposition[J].AquacultureInternational,2015,23(2):577-595.[27]㊀HUOYW,JINM,SUNP,etal.Effectofdietaryleu⁃cineongrowthperformance,hemolymphandhepato⁃pancreasenzymeactivitiesofswimmingcrab,Portu⁃nustrituberculatus[J].AquacultureNutrition,2017,23(6):1341-1350.[28]㊀王用黎.凡纳滨对虾幼虾对苏氨酸㊁亮氨酸㊁色氨酸和缬氨酸需要量的研究[D].硕士学位论文.湛江:广东海洋大学,2013:16-26.[29]㊀MILLAMENAOM,TERUELMB,KANAZAWAA,etal.Quantitativedietaryrequirementsofpostlarvaltigershrimp,Penaeusmonodon,forhistidine,isoleu⁃cine,leucine,phenylalanineandtryptophan[J].Aqua⁃culture,1999,179(1/2/3/4):169-179.[3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饲料添加剂对虾类免疫力提升及抗WSSV的影响研究进展
饲料添加剂对虾类免疫力提升及抗WSSV的影响研究进展【摘要】本文主要研究了饲料添加剂对虾类免疫力提升及抗WSSV的影响,通过分析饲料添加剂对虾类免疫力的影响和抗WSSV能力的影响,总结了相关研究进展和机理探讨。
实验方法和结果分析表明,饲料添加剂可以显著提高虾类的免疫力和抗WSSV能力。
结论部分强调了饲料添加剂在提升虾类健康水平和抗病能力方面的重要作用,并展望了未来的研究方向。
通过本文的研究可以为开发更高效的饲料添加剂,提高虾类免疫力和抗病能力提供理论支持和实验依据。
【关键词】饲料添加剂、虾类、免疫力、WSSV、影响研究、进展、机理、实验方法、结果分析、作用、未来研究方向、总结1. 引言1.1 背景介绍随着虾类养殖规模的不断扩大,虾类养殖过程中常常受到各种疾病的困扰,其中以白斑综合症病毒(WSSV)对虾类的危害最为严重。
该病毒在虾类养殖过程中容易引发大规模的死亡,给虾类养殖业带来了严重的经济损失。
提高虾类的免疫力和抗病能力成为了当前虾类养殖业发展中急需解决的问题之一。
1.2 研究目的研究目的是为了探究饲料添加剂对虾类免疫力提升及抗WSSV的影响,并对其作用机理进行深入探讨。
通过本研究,旨在为虾类养殖业提供科学依据,寻找一种有效的方法来提高虾类养殖的抗病能力,减少疾病发生的风险,提高养殖效益。
通过探讨饲料添加剂对虾类抗WSSV能力的影响,希望为虾类抗病育种提供参考,推动虾类养殖产业的可持续发展。
通过本研究,还能揭示饲料添加剂在提高虾类免疫力和抗病能力方面的作用机制,为虾类养殖业的发展提供新的思路和方法。
最终目的是通过对饲料添加剂对虾类免疫力及抗WSSV的影响研究进展进行全面系统的总结和分析,为虾类养殖的可持续发展提供科学依据和技术支持。
1.3 意义饲料添加剂在虾类养殖中的应用具有重要的意义。
通过添加合适的饲料添加剂可以有效提高虾类的免疫力,从而增强它们对各类病原体的抵抗能力。
这对于虾类养殖来说是非常重要的,因为免疫系统的强大将有助于减少疾病的发生,提高养殖效益。
GC-MS法测定东平湖关键种青虾氨基酸的相对含量
GC-MS法测定东平湖关键种青虾氨基酸的相对含量作者:刘海珍来源:《湖北农业科学》 2013年第9期刘海珍(聊城大学环境与规划学院,山东聊城252059)摘要:采用化学衍生法和GC-MS分析技术测定了东平湖生态系统中的关键种青虾的氨基酸含量。
结果表明,青虾中总氨基酸含量较高,达24.92%,含有多种人体必需氨基酸(Essentialaminoacid,EAA),组成比较均衡,并对青虾各种氨基酸相对含量及组成特征进行了分析,为进一步进行东平湖生态系统的能量流动稳定性研究提供了理论依据。
该分析方法快速、简单、灵敏,具有良好的准确度和精密度,适用于常规分析检验。
关键词:青虾;氨基酸;组成;东平湖中图分类号:O657.63;S932.5+1文献标识码:A文章编号:0439-8114(2013)09-2149-02DeterminationontheAminoAcidContentoftheKeySpecies-FreshwaterShrimpintheDongpingLakebyGC-MSLIUHai-zhen(EnvironmentandPlanningInstitute,LiaochengUniversity,Liaocheng252059,Shandong,China)Abstract:Thecontentoftheaminoacidsinthekeyspecies-freshwatershrimpwasdeterminatedbychemicalderivatizationmethodandGC-MStechnique.Theresultsshowedthetotalaminoacidcontentinfreshwatershrimpwas24.92%,whichcontainedmanykindsofessentialaminoacids(EAA),andthevariousaminoacidlevelswasproportionate.Variousaminoacidsrelativecontentandcompositionoffreshwatershrimpwereanalyzed,whichcouldprovidereliabledataforfurtherstudyonthestabilityenergyflowoftheDongpinglakeecosystem.Themethodcouldbeusedforconventionalanalysis,whichwasrapid,simple,accurateandsensitive.Keywords:freshwatershrimp;aminoacid;composition;Dongpinglake食物联系是生态系统结构与功能的基本表达形式,初级生产的能量通过食物链-食物网转化为各营养层次生物生产力,形成生态系统资源产量,并对生态系统的服务和产出及其资源种群的动态产生影响;位于山东省泰安市东平县的东平湖生物资源以多种类为特征,同时又有明显的优势种。
饲料亮氨酸水平对青虾主要非特异性免疫指标的影响
2014年第12期(总第215期) 试验研究15饲料亮氨酸水平对青虾主要非特异性免疫指标的影响付天增①② 赵丽娟① 李 娴① 曹振杰①* 王雪鹏②(①山东省淡水渔业研究院 山东 济南 250013 ②山东农业大学动物科技学院 山东 泰安)摘要 在原配方饲料基础上,用L-晶体亮氨酸调节5种饲料亮氨酸水平(1.91%~2.74%),喂养青虾8周后,不同水平的亮氨酸对血清中天冬氨酸转氨酶(AST)的活力无显著影响(P>0.05),但对血清中丙氨酸转氨酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)的活力有显著影响(P<0.05),没有额外添加亮氨酸的饲料组各种酶活力显著低于其余各组,表明了饲料中亮氨酸水平对青虾非特异性免疫有显著影响(P<0.05)。
关键字 亮氨酸 青虾 需要量 非特异性免疫中图分类号:S816.4 文献标识码:A 文章编号:1007-1733(2014)12-0015-02蛋白质是一切生命的物质基础,同时蛋白质也是水产动物饲料中价值最高的成分。
蛋白质由20种氨基酸组成,其中10种非必需氨基酸,8种必需氨基酸。
亮氨酸(Leucine)被证明是青虾的必需氨基酸之一,此外,亮氨酸和撷氨酸以及异亮氨酸被称为支链氨基酸(BCAAs)。
亮氨酸是支链氨基酸中唯一的生酮氨基酸,可以刺激胰岛细胞释放胰岛素,和撷氨酸和异亮氨酸一起可以起到保护肌肉的作用,同时也可以抑制蛋白降解和促进机体蛋白合成,主要表现在骨骼肌上;对血红蛋白合成和维持血糖水平以及激素的增加有重要作用,同时是肌肉应激和能量代谢上起重要作用;氨酸的缺乏可导致各组织和器官功能降低。
目前关于青虾的蛋白取值范围[1-2]已有所研究,鱼类和凡纳滨对虾亮氨酸需要量及日本沼虾赖氨酸的研究也有部分报道[3],但对青虾亮氨酸非特异性免疫的影响报道极少。
本实验的研究目的是饲料中不同亮氨酸含量对一些主要非特异性免疫指标丙氨酸转氨酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)等的影响。
饲粮中色氨酸对畜禽的免疫调节作用
加氧酶(IDO)、犬尿氨酸、喹啉酸和褪黑激素等,可通过抑制 T淋巴细胞增殖、增加血液免疫球
蛋白含量和促进组织的抗原递呈等,来提高机体免疫力、抗炎症反应和影响肿瘤细胞免疫逃逸。
本文就色氨酸及其代谢产物对畜禽免疫功能的调控作用和机制进行简要叙述。
关键词: 色氨酸;畜禽;免疫功能;代谢物
中图分类号:S821.5
生白细胞介素和干扰素,促进免疫细胞释放免疫
母体 细胞攻击 避免流产 等 发 T
,
。 [33] Mosnier [34]
因子,进一步调节免疫平衡[27]。 给哺乳动物注射 现,给妊娠母猪饲粮中添加等量色氨酸,不敏感猪
褪黑激素后,产生大量 细 NK 胞,骨髓内单核细胞 的血浆色氨酸含量低于敏感反应猪,妊娠期间的
细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10( IL-10) 的产
妊娠是猪生长发育过程中的一个特殊阶段,
生,从而调节适应性免疫应答[24]。 除此之外,5- 胎猪的生长发育、营养程序以及产后仔猪健康都
HT还可以提高 细 NK 胞杀伤力,但具体作用机制 取决于母体胎盘营养供给。 胎盘是母胎物质交换
还不清楚 。 [25]
的场所,胎盘养分的转化能力直接决定胎猪对养
褪黑激素是一种松果体激素,可以促进胸腺 分的摄取。 研究发现,胎盘滋养细胞、蜕膜细胞及
和脾脏等免疫器官的增大,进而使脾细胞和淋巴 蜕膜间质细胞等都可以表达 IDO,从而调节母猪
细胞体积增生[26]。 褪黑激素通过诱导巨噬细胞产 妊娠期的免疫耐受、胚胎的生长发育,使胎儿免受
活力增强 等 研究表明 褪黑激素 。 [28] Esteban [13]
,
低反应更利于仔猪的出生。
Kudo
等 发现 在人 [17]
水产氨基酸的成份
水产氨基酸的成份
水产氨基酸的成份
水产氨基酸是水产养殖中常用的营养添加剂之一,其主要成分为多种氨基酸,包括赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸等。
这些氨基酸对于水产动物的生长、发育、免疫和生理功能等方面都具有重要作用。
其中,赖氨酸是一种必需氨基酸,对于水产动物的生长和发育具有重要意义。
赖氨酸可以促进蛋白质合成,提高水产动物的生长速度和饲料利用率。
色氨酸是水产动物合成褪黑激素的重要原料,有助于水产动物调节睡眠和生长。
苯丙氨酸是一种支链氨基酸,有助于促进水产动物的生长和免疫功能。
蛋氨酸和苏氨酸则分别是必需氨基酸和条件性必需氨基酸,对于水产动物的生长发育和免疫力也有重要作用。
此外,水产氨基酸还可以根据不同的养殖对象和养殖环境,添加不同的氨基酸组合和比例,以满足不同水产动物的需求。
例如,在南美白对虾养殖中,适量添加赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸等可以促进虾的生长和提高饲料利用率;在鱼类养殖中,适当添加苯丙氨酸、蛋氨酸等可以改善鱼类的生长性能和免疫力。
总之,水产氨基酸作为水产养殖中的重要营养添加剂,可以帮助提高养殖对象的生长速度、饲料利用率和免疫力,有助于提高水产养殖的经济效益。
虾类氨基酸营养需求的研究进展
本文得到河北省自然科学基金项目394044资助特约刊登菲迪饲料虾类氨基酸营养需求的研究进展姚翠鸾王维娜王安利河北大学生命科学学院摘要氨基酸是虾类的重要营养素之一其在虾的生长发育过程中起着重要作用
2001 年第 1 期 综 述 特约刊登
饲料研究
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菲迪饲料
虾类氨基酸营养需求的研究进展
姚翠鸾 王维娜 王安利 河北大学生命科学学院
类的营养需要 , 而且能节约蛋白源。在以乌贼粉和
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饲料研究
2001 年第 1 期
鱼粉为基础的印度对虾 Penaeus indicus 的饵料中分 别添加精氨酸、 赖氨酸、 蛋氨酸、 色氨酸晶体和它们 的混合物 , 结果表明 , 在乌贼粉中添加 0 6% 的氨基 酸混合物时 , 印度白对虾生长最好。对根据罗氏沼 虾 Macrobrachium rosenbergii 卵中必需氨基酸组成配 制的颗粒饵料研究发现, 亲虾摄食的这种饵料中必 需氨基酸指数越高, 其产卵量就越高。用两种标准 饵料喂养刚变态的罗氏沼虾仔虾 , 发现饵料中氨基 酸组成与虾全身及肌肉中氨基酸组成有很高的相关 性。把晶体氨 基酸添加到万氏 对虾饵料中容 易流 失, 但用复合氨基酸代替晶体氨基酸在减少氨基酸 流失方面效果也不理想, 对万氏对虾的生长也无明 显促进作用。对日本对虾 Penaeus japonicus 饵料中 生长刺激物的研究发现, 一些低分子量的氮化合物 对日本对虾幼虾的生长有促进作用, 例如丙氨酰 甘氨酰 甘氨酸、 丙氨酰 缬氨酸、 甘氨酰 甘氨酰 甘氨酸和甜菜 碱的生长刺激 效果较好。饵 料的 pH 值对万氏对虾利用氨基酸也有一定影响。例如 , 仿对虾 Parapenaeopsis 蛋白质和氨基酸的组成 配制 试验饵料, 结果添加氨基酸和提高 pH 值使 虾的生 长和摄食量显著提高。pH 值调至 8 摄食效果最佳 , 但增重率降低, 而对于虾体水分和粗蛋白含量则影 响不大。经研究还发现用复合氨基酸代替部分鱼粉 养虾是可行的, 并可以促进对虾生长。用复合氨基 酸代替 35% 的鱼粉时 , 对虾体长增长快, 产 量和成 活率提高 , 饵料系数降低。 二、 作为诱食剂 诱食剂可改善饲料风味, 促进消化吸收。由于 氨基酸是水溶性的, 在所有生物细胞中存在, 可用于 调节渗透压, 一些氨基酸、 氨基酸化合物或小肽还可 作为有效的诱食剂。饵料中添加丙氨酸、 精氨酸、 谷 氨酰胺、 甘氨酸、 异亮氨酸、 丝氨酸、 牛磺酸和甜菜碱 的浓度大于 10- 2 mol/ L 时 , 导致斑节对虾的 摄食频 率增高。其中谷氨酰胺、 甜菜碱、 牛磺酸单独使用浓 度大于 10 mol/ L 时就非常有效, 多种氨基 酸和甜 菜碱混合使用浓度在 10- 6mol/ L 就可取得良好诱食 效果, 比单独使用效果更佳。陈楠生等对中国对虾 Penaeus chinensis 摄食 敏感 性的 研究 表明 : 谷氨 酰 胺、 赖氨酸、 牛磺酸、 甜菜碱对中国对虾的摄食活动 具有较强的影响。Harpaz, S. 等也证明牛磺酸、 甘氨 酸、 精氨酸和甜菜碱在临界浓度 ( 10- 5 ~ 10- 8mol/ L) 能引起至少 50% 的罗氏沼虾做出积极反应。 三、 可开发的氨基酸含量丰富的蛋白源 蛋白质是虾生长所必需的营养素 , 其中必需氨
黄芩苷和虾青素对中国对虾非特异性免疫特性影响的研究的开题报告
黄芩苷和虾青素对中国对虾非特异性免疫特性影响
的研究的开题报告
一、研究背景
中国对虾(Litopenaeus vannamei)是世界上最重要的养殖品种之一,但其生长过程中易受到多种疾病的侵袭。
传统的预防和治疗方法主
要是使用化学药物,但长期使用会产生抗药性和环境问题。
因此,越来
越多的研究关注天然药物对虾免疫的调节作用。
黄芩苷和虾青素是两种
广泛存在于自然界中的化合物,具有多种生物活性,但对它们在对虾非
特异性免疫特性方面的影响尚不清楚。
二、研究目的
本研究旨在探究黄芩苷和虾青素对中国对虾非特异性免疫特性的影响,包括:相对的磷酸化水平、抗菌肽基因、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)等基因的表达和活性。
三、研究方法
选用健康的中国对虾作为受试对象,将其分成三组,分别进行细胞
培养实验和体内实验。
在体内实验中,对虾分别注射不同剂量的黄芩苷
和虾青素,然后分别在不同时间点(24、48、72小时)检测虾的免疫特性。
在细胞培养实验中,通过添加黄芩苷和虾青素到培养基中来解释其
调节免疫特性的作用。
通过荧光素酶报告基因系统和荧光显微镜观察系
统来检测基因表达水平。
四、研究意义
本研究可以为开发和利用天然药物对虾免疫进行调节提供理论依据
和实践指导,同时可以探究黄芩苷和虾青素对虾健康的贡献作用,促进
对虾养殖高质量、高效率地发展。
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2014年第12期(总第215期) 试验研究15饲料亮氨酸水平对青虾主要非特异性免疫指标的影响付天增①② 赵丽娟① 李 娴① 曹振杰①* 王雪鹏②(①山东省淡水渔业研究院 山东 济南 250013 ②山东农业大学动物科技学院 山东 泰安)摘要 在原配方饲料基础上,用L-晶体亮氨酸调节5种饲料亮氨酸水平(1.91%~2.74%),喂养青虾8周后,不同水平的亮氨酸对血清中天冬氨酸转氨酶(AST)的活力无显著影响(P>0.05),但对血清中丙氨酸转氨酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)的活力有显著影响(P<0.05),没有额外添加亮氨酸的饲料组各种酶活力显著低于其余各组,表明了饲料中亮氨酸水平对青虾非特异性免疫有显著影响(P<0.05)。
关键字 亮氨酸 青虾 需要量 非特异性免疫中图分类号:S816.4 文献标识码:A 文章编号:1007-1733(2014)12-0015-02蛋白质是一切生命的物质基础,同时蛋白质也是水产动物饲料中价值最高的成分。
蛋白质由20种氨基酸组成,其中10种非必需氨基酸,8种必需氨基酸。
亮氨酸(Leucine)被证明是青虾的必需氨基酸之一,此外,亮氨酸和撷氨酸以及异亮氨酸被称为支链氨基酸(BCAAs)。
亮氨酸是支链氨基酸中唯一的生酮氨基酸,可以刺激胰岛细胞释放胰岛素,和撷氨酸和异亮氨酸一起可以起到保护肌肉的作用,同时也可以抑制蛋白降解和促进机体蛋白合成,主要表现在骨骼肌上;对血红蛋白合成和维持血糖水平以及激素的增加有重要作用,同时是肌肉应激和能量代谢上起重要作用;氨酸的缺乏可导致各组织和器官功能降低。
目前关于青虾的蛋白取值范围[1-2]已有所研究,鱼类和凡纳滨对虾亮氨酸需要量及日本沼虾赖氨酸的研究也有部分报道[3],但对青虾亮氨酸非特异性免疫的影响报道极少。
本实验的研究目的是饲料中不同亮氨酸含量对一些主要非特异性免疫指标丙氨酸转氨酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)等的影响。
1 材料和方法1.1 试验设计和饲料的制备 饲料配方及其营养组成见表1。
饲料以中粮虾饲料为基础饲料,添加L-晶体氨基酸以满足虾除亮氨酸外其它必需氨基酸的需要。
饲料中亮氨酸的添加水平分别为0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%,实测各组饲料亮氨酸含量分别为:1.91%、2.13%、2.32%、2.50%、2.74%。
准确称量饲料,然后添加亮氨酸,采取逐级扩大法混合均匀,用双螺杆挤压机制成粒径为1mm 以及1.5mm 的颗粒饲料。
晾干至含水分约10%,之后分别放入封口袋中存放入-20℃冷冻保存备用。
1.2 试验管理 饲养试验在山东农业大学养殖基地营养车间进行,所用青虾虾购自山东微山湖。
试验虾选用同一批进口一代虾苗。
试验前,试验虾苗暂养于桶中,并以虾片和商业饲料饱食投喂。
选择1.0g 左右的青虾进行分组试验。
表1 饲料配方组成及营养成分分析(干物质) (%)试验饲料原料 Ingredient(%)Diet 1Diet 2Diet 3Diet 4Diet 5日照中粮虾饲料 100 100 100 100 100L-晶体亮氨酸 0 0.2 0.4 0.6 0.8水分 9.40 9.40 9.40 9.40 9.40粗蛋白 42.5742.57 42.57 42.5742.57粗脂肪 6.36 6.36 6.36 6.36 6.36粗灰分 10.9610.96 10.96 10.9610.96营养成分亮氨酸 1.91 2.13 2.32 2.50 2.74每个试验组分三个重复,每个重复30尾虾,放养于0.7×0.9×1.0的网箱中,养殖试验持续8周,投喂4次/d ,投喂时间分别为7:00、12:00、17:00以及21:00,按照体重的8%~10%进行投喂,早晚投喂量为总投喂量的60%,投喂1h 后观察其摄食情况,以调整其投饵量。
前期每两天换一次水,中后期每天换水。
试验过程中不间断充气,试验水温为26~31℃、水质pH 为7.5-7.6、DO 为6.12~ 6.45mg/L ;氨氮为0.14~0.25mg/L 。
1.3 样品采集和分析方法 试验结束时停食24h ,称重并记录尾数。
每组随机取5~7尾虾,保存于-20℃冰箱备用,另取10尾虾,于围心腔取血,置于1.5ml 离心管中于4℃冰箱静置过夜,3000 r/min 离心15min ,取上清液分装于-80℃冰箱备用,并测定血淋巴中天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)和丙氨酸转氨酶(ALT)。
取血后的虾剥离肌肉,放于液氮罐中,保存于-80℃冰箱,以分析肌肉的常规营养组成。
(1)饲料常规分析:试验样品的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量按照标准方法(AOAC,1984)测定。
采用105℃下烘干至恒重并测定水分含量;采用凯氏定氮法测定粗蛋白质含量;采用索氏提取法(以石油醚为提取液)测定粗脂肪含量;粗灰分含量采用550℃马弗炉灼烧法。
(2)酶活力的测定[4]:均采用南京建成生物技术有限公司试剂,用酶标仪测定。
基金项目:山东省现代农业产业技术体系虾蟹类创新团队项目(SDAIT-15-011-05)。
*通讯作者山东畜牧兽医 2014年第35卷16 选择饲料3用于测定饲料的溶失率,称取5g 试验料置于盛有1000m1水的烧杯中,测其浸泡30、60和90min 后的氨基酸组成。
溶失率测定参照Lucia Elizabeth 等的研究方法。
1.4 数据统计分析 所有数据采用“SPSS version 17.0"软件对数据进行统计分析,试验结果以平均数士标准差表示,对数据作单因素方差分析(ANOV A),结果作Duncan's 进行多重比较,P<0.05表示差异显著,P>0.05表示差异不显著。
2 结果2.1 饲料中不同浸泡时间对亮氨酸溶失率的变化 饲料中亮氨酸的溶失率见表2。
再对亮氨酸含量为2.32%的试验饲料3分析中,得知亮氨酸在30、60、90min 的溶失率分别为10.92%、13.65%及15.09%。
饲料浸泡时间越长饲料中亮氨酸溶失率越大,在饲喂中应少量多次,以减小亮氨酸的溶失率。
表2 饲料不同浸泡时间的亮氨酸的溶失率(%)项目 0min 30min 60min 90min失重率 0.00 11.07±0.01 13.47±0.01 14.13±0.01 亮氨酸含量 2.32 2.07±0.03 2.00±0.01 1.97±0.01 溶失率 0.00 10.92±0.01 13.65±0.00 15.09±0.002.2 饲料亮氨酸水平对青虾血清酶活性的影响 饲料中添加不同水平的亮氨酸对青虾酶活力的影响见图1。
饲料中不同水平的亮氨酸对血清中天冬氨酸转氨酶(AST)的活力无显著影响,但对血清中丙氨酸转氨酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)的活力有显著影响(P<0.05)。
没有额外添加亮氨酸的饲料组各种酶活力显著低于其余各组。
图1 饲料中添加不同水平的亮氨酸对青虾ALT 酶活力对比图2 饲料中添加不同水平的亮氨酸对青虾AST 酶活力对比图3 饲料中添加不同水平的亮氨酸对青虾SOD 酶活力对比图4 饲料中添加不同水平的亮氨酸对青虾PO 酶活力对比 3 讨论本试验中,在饲料中添加不同水平的亮氨酸,并测定血淋巴中天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)和丙氨酸转氨酶(ALT)。
青虾亮氨酸最适需要量低于凡纳滨对虾2.46%[5],但是高于日本对虾[6]、普通鲤鱼[7]、尼罗罗非鱼[8]等的亮氨酸需要量,不同鱼虾对亮氨酸需要有所不同。
在本试验中,饲料中不同水平的亮氨酸对血清中丙氨酸转氨酶(ALT),超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)的活力有显著影响(P<0.05),另外没有额外添加亮氨酸的饲料组各种酶活力显著低于其余各组。
综上所述,饲料中亮氨酸的水平对青虾非特异性免疫有显著影响。
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