全自动五分类血细胞分析仪对血小板计数的影响因素分析
全自动五分类血细胞分析仪对血小板计数的影响分析
全自动五分类血细胞分析仪对血小板计数的影响分析作者：丁茜周世添来源：《中国医药科学》2012年第10期[摘要]目的观察全自动五分类血细胞分析仪对血小板计数的影响。
方法选取笔者所在医院自2011年1～6月期间住院患者在使用全自动五分类血细胞分析仪进行血细胞分析，对血小板计数低于100×109/L的标本，进行手工计数复检，比较全自动五分类血细胞分析仪的符合率。
结果 179例患者经手工血细胞计数法检测平均血小板计数为（145.41±55.98）×109/L，全自动五分类血细胞分析仪计数结果，出现假性降低102例，平均血小板计数（59.05±25.68）×109/L，假性增高77例，平均血小板计数（220.33±60.07）×109/L，均较手工法检测差异显著，具有统计学意义（P＜0.05），两种方法检测白细胞计数差异不大，无统计学意义（P＞0.05）。
结论全自动五分类血细胞计数仪操作简便、快捷、精密度高、重复性好，严格按照操作规程，准确判断假性增高和减少原因，是提高检测准确性的关键。
[关键词] 全自动五分类血细胞分析仪；血小板计数；影响[中图分类号] R446 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2012）10-183-02全自动五分类血细胞分析仪在临床上对血小板测定具有简便、快捷、精密度高、重复性好的优点，在我国各级医院检验科已广泛应用，但仪器原理为电阻抗法[1]，主要依靠细胞的体积大小进行分类计数，而无法识别细胞种类，因此，在临床检验工作中，可出现血小板计数偏低或增高的现象，与手工检查结果不符，计数值有较大差异，现就全自动五分类血细胞分析仪对血小板计数的影响因素进行探讨，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取笔者所在医院自2011年1～6月期间住院患者在使用全自动五分类血细胞分析仪进行血细胞分析，对血小板计数低于100×109/L的标本，进行手工计数复检，镜检发现血小板聚集成团，分布情况及计数明显不符者179例，其中男91例，女88例，年龄5～79岁，平均（49.9±5.5）岁。
不同血细胞分析仪血小板计数误差原因分析
参 考文献 ：
［ ］ 陈 文斌 ， 笑 春 ． １ 张 口服 甘 露 醇 灌 洗 肠 道 致 急 性 低 位 肠 梗 阻 ２ ２例 分 析 ［ ］ 医学 临床 研 究 ，０３ ２ （ ）７９ Ｊ． ２ ０ ，０ ９ ：１． ［］ 杨 龙江， ２ 姜琳 ． 口服 甘 露 醇 致 急 性 肠 梗 阻 １ 报 告 ［ ］ 吉 例 Ｊ．
肠减压 ， 每 日予 １或 ２次 大量 肥 皂 水灌 肠 ， 并 同时 严 密
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老 年 医学 ，９ ４ ８ １ ： ． １９ ， （ ）４ ７
观察生命 体征 ， 注意复 查 电解 质 、 常规 、 肾功 能及乳 血 肝
学 院学 报 ，９ ８ ２ （ ） ２ ９ １ ９ ，０ ２ ： ． ０
（ 稿 时 间 ：０７１ —８ 修 回时 间 ： ０—１１ ） 收 ２０ —２０ ２ 因分析
田振 红 王富江 崔永哲 １ 阳市第二人 民医院 ， ， ， （．辽 辽宁 辽 阳 １１０ ； ． １００ ２ 解放军 ２ １医院 ， ０ 辽宁 辽 阳 １１０ ； ．辽 阳 １００ ３
２ １ 干扰 血小板计 数 的原 因 血小 板计数 常见 的干 扰 ． 因素有小 红细胞 、 细胞 碎片 、 小 的血 凝块 、 小板 聚集 微 血
等 。本 文例 １有 长 期 失 血 引起 的严 重 缺 铁 性 贫血 ，
全 自动血 细胞 分 析仪 的使 用 不 仅提 高 了 临床 实 验
【 １ 女 ，８岁 。曾诊 断 为 血小 板 减 少性 紫 癜 。 例 】 ２
本 次血细胞分 析应 用 Ｃ １７ ０三 分类 血 细 胞 分析 仪 检 Ｄ ０
血细胞分析仪在临床应用中的干扰因素及分析
使 稀 释 液结 品 ， 这 种 情 况 下 ． 合 的结 晶 可使 仪 器 分 析 不 出 在 聚
结 果 或 结果 分 析 异 常 。对 这 一 现象 的处 理 方 法 ： 溶 血 剂 或 稀 将
释 液 进 行 加 热 升 高 温 度 ， 除 结 晶 。另 有 文 献 报 道 ， 入 适 量 消 加
丛 玉 隆 等 研 究认 为 ， 验 室 环 境 温 度 决 定 了 仪 器 、 剂 以 实 试
及 标 本 的 温 度 ， 数 时 稀 释 液 的 温 度 应 为 （２ ） 。 当 稀 释 计 ２ 土４ ℃
液 的 温 度低 时 ， 细 胞 溶 解 后 的 膜 碎 片 聚 集 ， 度 分 布 曲 线 的 红 粒
的 非 离 子表 面 活 性剂 ． 减 轻 溶 血刺 结 晶 的发 生 。低 温 也 易 激 可 活 血 小 板 ， 起 血 小 板 凝 集 ， 成血 小 板 计 数 假 性 降 低 ¨ 。刘 引 造 ２ ］
平坦段变短 ， 当试 剂 温 度 低 于 １ ℃ 时 需 加 热 使 用 。有 些 溶 血 ８
剂 在 低 温 时 可 出 现 结 晶 ， 不 容 易 被 察 觉 ， 少 引 起 操 作 者 的 并 很
注 意 ， 在 显 微 镜 下 ， 见 到 其 中悬 浮着 许 多 细小 的结 晶 ， 样 但 可 这 的 溶 血 剂滴 入血 液 中 ， 白细 胞 计 数 必 然 增 高 。这 种 情 况 在 实 际
【 键 词 】 血 细 胞分 析仪 ； 干 扰 因 素 ； 血 小 板 ； 白细 胞 关
中 图分 类 号 ： ４ ６ １ Ｒ ４．ｌ 文献 标 志码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ６ ２ ９ ５ （ ０ ８ ２ 一 ５ ２０ １ ７—４ ５ ２ ０ ） ４】１ —２
EDTA依赖性假性血小板减少症分析
EDTA依赖性假性血小板减少症分析发表时间：2013-04-08T09:33:26.577Z 来源：《医药前沿》2013年第4期供稿作者：贺想平谢海苏嘉恋[导读] 加强血小板减少现象原因的综合分析可纠正EDTA抗凝剂诱发的血小板聚集引起血小板假性减少。
贺想平谢海苏嘉恋（泉州医学高等专科学校附属人民医院福建泉州 362000）【摘要】目的为避免EDTA抗凝剂诱发血小板聚集引起假性血小板减少的错误结果报告。
方法采用仪器法和手工法进行血小板计数和血涂片瑞-姬氏染色法观察血小板形态。
结果改用枸橼酸钠抗凝剂后仪器检测血小板计数不受干扰。
结论加强血小板减少现象原因的综合分析可纠正EDTA抗凝剂诱发的血小板聚集引起血小板假性减少。
【关键词】EDTA抗凝剂假性血小板减少症血液分析仪血小板计数【中图分类号】R558+.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）04-0058-03 由于EDTA盐对各种血细胞的影响极小，因此国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐使用EDTA-K2为血细胞计数的抗凝剂，并已在世界范围广泛应用，一般不会对检测结果造成影响。
但有时EDTA可以诱发血小板发生聚集,引起EDTA依赖性假性血小板减少症(EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia, PTCT),会导致临床增加不必要的辅助检查，备受国内外广泛关注。
现将我院1例EDTA依赖性血小板凝集致血小板假性少症报道如下。
1 材料与方法1.1 病例摘要：患者×××，女，25岁，我院健康产前检查孕妇，PT、TT、APTT和Fib (枸橼酸钠抗凝) 均在参考区间内，皮肤、牙龈、胃肠道等处无紫癜、出血等现象。
1.2 仪器：MAXM型全自动五分类血细胞分析仪，美国库尔特公司产品。
1.3 试剂：1.3.1 仪器试剂：EDTA-K2抗凝剂及仪器原装配套试剂盒。
1.3.2 手工试剂：血小板稀释液、瑞-姬氏染色，按《全国临床检验操作规程》配制[1]。
Beckman-Coulter LH750全自动血液分析仪使用与总结
Coulter LH750(以下简称LH750)是贝克曼库尔特公司推出的高层次的全自动五分类血液细胞分析仪。
有5种不同的分析模式，每小时最高分析速度为110个样本，能提供31项细胞分析参数，白细胞分类散点图及各种怀疑性、限定性旗标。
LH750基于先进的V(电阻抗)、C(高频传导)、S(激光散射)技术对白细胞进行精确的分类。
并可进行网织红细胞的计数及分类。
作者所在科室于2008年4月引进LH750分析仪一台，至今已有一年半的时间，该仪器的使用大大提高了实验室内的分析速度和工作效率。
但是在实际使用过程中由于各种主客观因素的影响，降低了测定结果的准确性和可靠性。
现将我们在日常工作中LH750的一些使用及常见故障排除情况总结如下，以便与使用该仪器的同行共同探讨。
1 使用1.1 标本标本须由静脉穿刺取得，不提倡毛细血管采血法。
盛装的试管有真空采血试管和非真空试管。
推荐使用真空采血管，所注入血液的量必须达到刻度线以上，以保证仪器在吸样过程中有足够的血细胞供分析。
必须充分抗凝，上机前再次颠倒混匀，既可以使试管内的血液均匀分布，还可以在混匀过程中检查血液中有无明显凝块，以免堵塞吸样针。
1.2 抗凝剂使用EDTA-K2抗凝剂，其对细胞形态和血小板计数的影响较小。
作者所在实验室曾发生因血常规试管中加入了枸橼酸钠而造成血液部分凝固血小板计数明显降低的差错事故，给了全科人员一次深刻的教训。
1.3 样本编号LH750英文工作站提供两种不同的编号方式。
方式一：在主界面上点击添加样品请求→自动编号顺序→添加此样品要求，此方法准确可靠，不易跳号。
方式二：点击分析配置→自动编号→起始为，此方法简便快捷，但容易跳号，因此需要操作者注意。
1.4 质控仪器自检程序完成后，观察各项参数及空白值。
合格后再进行每日的质控物测定，只有质控物测定值符合要求方可进行常规标本的测定。
1.5 上机将编好的血常规试管按顺序放入仪器的试管架中，2小时内进行自动测定。
血细胞分析仪计数血小板结果偏低原因分析
的， 重新采血 （ 保 穿刺顺 利 ， 时颠 倒 混匀 ） 重新 仪 器分 确 及 ， 析， 血小板计数结果在正 常范围， 方图分布正 常可 以进一步 直 说 明。 ３ ２ 血 小板 的特点 是易 于粘 附和聚集 ， ． 抗凝血标本静置时 间过长后 ， 血小板容易 聚集成较大 的颗粒 ， 这种可逆聚集的血 小板在血标本重新混匀后重新建立平衡 ， 大约需 ３ ｎ左右 ０ｍｉ 可逐渐解聚而 能够 形成均 匀分 布 的单个血 小板 … 。我们 采 用的 Ｅ Ｔ Ｋ Ｄ Ａ 负压储血 管是玻璃试管 内装 ０ １ｍｌ Ｅ Ｔ Ｋ ． 的 Ｄ Ａ 溶液可有效抗凝 ２ｍｌ 全血 ， 液体抗 凝剂粘附储血 管内壁保持 湿润易与进入储血管的血 流充分混匀 ， 降低 对血凝 系统激活
２ 结 果 见 表 １ 。
（ ４） ｉ－ － ｓ
压储血管 Ｅ Ｔ — Ｄ Ａ Ｋ 血常规化验 。 １２ 试剂 由 Ｓ Ｓ Ｘ公司提供 的 ｓｓ ｅ 、 Ｙ ＭＥ ｙｍ ｘ五分类血 细胞分 析仪 Ｘ 一 ０ ｉ Ｔ １ ０ 配套试剂 。血小板稀释液按第 二版 《 国临床 ８ 全 木检验操作规程》 草酸铵溶液 配制 。 １３ 标本 及方法 ． 标本选 自２０ ０ ６年 ６月至 ８月病房及 门诊
表１ ６ ５份 样 本 在 不 同时 间 血 细胞 分析 仪 与手 －￣ ｄ 板 计 数 结 果 ｒ ｘ
注： ０ ５ｈ一 与 ． １ｈ分析仪结果做配对 ｔ 检验 。 Ｐ＜ ． ｌ ００ 。
３ 讨 论
析仪 提示 血小板异 常直方 图、 血小板 凝集 的 ３ ９例标本 ， 我们 在 ６ｈ不同时间段分析仪血小板计数结 果与人工显微镜计数 结果差别有极显著性意 义 ， 在显 微镜下 可见到三 五成群凝 聚
库尔特血球仪血细胞错误计数原因探讨
库尔特血球仪血细胞错误计数原因探讨Coulter Gen.sII全自动血细胞分析仪(简称库尔特血球仪)是美国贝克曼库尔特公司生产的全自动五分类血细胞分析仪,笔者根据6 a来使用该机的情况,对一些血细胞计数错误常见原因及解决办法进行探讨,供大家参考。
1 温度因素血细胞计数最适温度为17~30e,低于17e或高于30e,均对结果有影响。
因此,操作时应控制室温在20e左右。
实验室温度不仅决定了仪器、试剂的温度,而且决定了标本的温度。
当仪器、试剂温度较低时,不仅白细胞本身体积受到影响,而且可能影响溶血剂与白细胞膜的作用,不能有效地使白细胞皱缩和红细胞破坏,使计数和分类出现异常现象。
2 试剂因素2.1 溶血剂通常表现为白细胞突然增高,其原因是由于溶血不充分,导致大量红细胞进入白细胞计数孔,造成计数错误。
这时应立即检查溶血剂及其管路系统,看溶血剂有无,管路是否通畅以及溶血泵机是否正常工作。
通常情况下,溶血剂瓶内有传感器,无溶血剂会报警,除非传感器已损坏;另一种可能是溶血剂质量出现问题,应检查溶血剂是否过期。
2.2 稀释液过滤不严或被污染,导致本底过高,易引起血小板计数增高,此种情况易被发现,因每天都要做本底测试。
此外,更换试剂时要轻拿轻放,按照更换试剂程序进行更换,否则可能会产生气泡,导致血小板计数假性增高。
3 仪器因素3.1 低负压过高或过低当负压管道提供的进样压力不够时,流速慢,通过计数小孔的有效颗粒数减少,从而导致血细胞计数减少。
反之,流速快,导致血细胞计数假性增高。
处理:应经常清洗负压瓶,并把低负压(Low Vacum)调节在5.94~6.06(6.0?0.10)。
3.2 计数小孔由于没有定期保养仪器或者小的血凝块将计数小孔堵塞,导致计数小孔内有污物沉积异常附着,严重者计数小孔被完全堵塞。
计数小孔因有污物附着,会产生大量低值区域干扰信号,导致白细胞计数假性增高,常可见计数白细胞的三个小孔数值异常增高,白细胞计数值显示/*0,报警/clog0处理:烧灼小孔(用功能键F01或F09)或用10%次氯酸钠浸泡计数池并进行清洗。
XE—5000血细胞分析仪MCV和RDW对血小板测定的影响
XE—5000血细胞分析仪MCV和RDW对血小板测定的影响目的讨论平均红细胞体积（MCV）和红细胞分布宽度（RDW）对Sysmex XE—5000血细胞分析仪检测血小板（PLT）的影响。
方法采用XE—5000血细胞分析仪对处于不同范围内平均红细胞体积的样本进行分组，并分别用电阻抗法和荧光法进行血小板计数，其值分别为（PLT—I）和（PLT—O），两者的血小板数相比较，再将数据进行统计学分析。
结果MCV≥80 fL时，电阻法和光学法血小板测定结果差异无统计学意义（P > 0.05）；70 fL≤MCV 0.05）；MCV0.15时，电阻抗法和荧光法血小板测定差异有统计学意义（P 0.05）。
结论当MCV0.15时，血小板应该采用光学法检测以获得较为准确的数据。
标签：血小板；平均红细胞体积；红细胞分布宽度；影响目前，血细胞分析仪在临床血常规分析中得到广泛应用，XE—5000血细胞分析仪对血小板的检测方法主要有两种：一种为常规模式的电阻抗法（PLT—I），另一种为特殊模式的散射光结合激发荧光法（PLT—O）。
血小板计数是血小板检查的一个动态指标，也是其他血小板参数可靠性的基础，血小板具有黏附、聚集、分泌三大功能，血小板减低是引起出血的常见原因，因此，血小板计数对出血性疾病、恶性肿瘤的放疗、化疗的疗效监测起重要作用，其结果的准确性对临床尤为重要。
平均红细胞（RBC）体积（MCV）正常值为80～94 fL[1]。
其临床意义主要用于对贫血进行形态学分类。
红细胞分布宽度（RDW）是反映红细胞体积异质性的参数，用红细胞分布宽度的变异系数来表示，比一般血涂片上观察RBC形态大小不均更客观准确[2]。
RDW↓表示RCB比正常人的RBC大小更均一，临床意义不大，RDW↑说明RBC大小不均。
MCV↓、RDW↑，其小红细胞会被当成红细胞碎片非血小板颗粒，造成血小板数目的假性增高[3]。
本文选取了处于不同测定范围的MCV和RDW的标本，分别用血细胞分析仪常规模式电阻法和特殊模式光学法进行血小板检测，且对结果进行分析，观察MCV降低、RDW升高对血细胞分析仪测定血小板的影响。
1133例仪器计数血小板结果偏低的原因分析
1133例仪器计数血小板结果偏低的原因分析摘要】目的探讨sysmex2100血细胞分析仪对部分血小板检测结果偏低的原因。
方法对1133例本院住院患者分析仪法，血小板计数低于100×109／L标本进行显微镜计数及血涂片观察。
结果进行手工显微镜计数及血涂片观察结果，部分与仪器结果不符，多偏高。
结论仪器检测血小板偏低时不能轻易发出检验报告，必须显微镜计数及血涂片观察血小板数量及形态后方可发出，以确保检验报告的准确性。
【关键词】血细胞分析血小板减少血涂片血小板计数1 材料与方法1.1 标本来源收集2011～2012年本院住院患者血细胞分析仪测定血小板计数低于100×109／L标本1133例。
1.2 试剂和仪器日本sysmex XE-2100全自动五分类血细胞分析仪。
稀释液、鞘液、溶血素、清洗液及质控液、校准液均为进口原装配套，由希森美康公司提供。
手工镜检血小板稀释液为1%的草酸铵溶液，按《全国临床检验操作规程》第三版配制[1]，4℃冰箱保存。
1.3 方法仪器法严格按仪器操作说明书操作。
复检，吸取每天仪器血小板计数结果低于100×109／L者静脉血20ul置1g／dl的0.38ml草酸铵稀释液内，静置10～15min后显微镜计数，同一份标本计数2次，误差小于10%，取2次均值报告，误差大于10%时做第3次计数，取2次相近结果的均值报告。
同时制备血涂片，染色镜检观察细胞分布均匀的体尾交界区血小板数量及其形态（正常可见8～15/油镜视野），无大量血小板凝块，无大量大型血小板。
也可按下列公式计算：（血小板均值/视野）×（总红细胞计数值<109/L>）/（200红细胞/视野），其中，200红细胞/视野指每油镜视野红细胞均值最佳为200个[2]。
1.4 质控1.4.1室间质评 sysmex XE-2100血细胞分析仪及显微镜形态学参加卫生部及云南省临检中心室间质评活动，连年优秀。
血细胞分析仪假性血小板减少原因分析及处理
报警 提示 ） 依 据全 国血 液 学 的复 检规 则 ， 血小 板 ， 对
数量 、 态 以及 分 布 进 行镜 检 、 形 并计 数 ３次取 均 值 ；
用 ＬＨ ５ 全 自动血 细 胞 计 数 仪 对 血 小 板计 数 值 异 ￣０
常偏低的患者进行血小板 手工计数 ， 血涂 片观察血
小板 分布 情 况等 方法 进行 复检 。发现假 性 血小 板减 少 ２ ３ 标本 ， 将结 果分 析报 道 如下 。 ０ 例 现
细菌对 抗 生素 的耐 药状 况有 着 较强 的 地域 性 的 差异 ， 本研 究对 我 院近 三 年 临 床 分 离 的 铜 绿假 单 胞 菌 的耐药 性进 行 统 计 分 析 ， 临 床 经 验 治 疗 选 择 正 对 确 的抗 生 素 ， 提供科 学依 据 。
参考文献 ：
［］ １ 肖永 红 ， 王 进， 朱 燕 ， ． ｈ ａｉ ０ ８年 度 全 国 细 菌 耐 药 监 等 Ｍｏ ｎ ｒｎ２ ０ 测 口 ］ 中华 医 院感 染 学 杂 志 ，０ ０ ２ （６ ：３ ７ ． ２ １ ，０ １ ） ２ ７ ． ［］ ｉ ｅｂ ｒ ２Ｚｌ ｒｅｇＭＤ，Ｃ ｅ ，Ｍｏ ｙＳ ，ｔ １Ｉ ｐｎ ｍ ｅｉ ａ ｃ ｆ ｂ ｈ ｎＪ ｄ Ｈ ｅ ．ｍｉｅｅ ｒｓ ｔｎｅｏ ａ ｓ Ｐ ｅ ｄ ｍｏ ａ ｎ ｕ ｎａ ｙｔｍａｉ ｌｅａｕｅ ｒｖｅ Ｅ ］ ｓｕ ｏ ｎ ｓｉ ｐ ｅ ｍｏ ｉ：ａｓ ｓｅ ｔ ｉ ｒｔｒ ｅｉ Ｊ ． ｎ ｃ ｔ ｗ
血小板计数偏差原因分析及对策的探讨
不 同 的原 因采 取 不 同 的对 策 。 同时 ， 各 实 验 室应 建立 自己 的 复
检规则进行手工涂片复检 。
参 考 文 献
Ｌ Ｈ７ ５ ０全 自动 血 细 胞 分 析 仪 分 类 溶 血 剂 的 量 都 配 有 夏 天 模式（ ２ ８ Ｉ 全血 ＋３ ５ ０ Ｌ溶 血 剂 ＋ １ ３ ４ Ｌ稳定剂） 与 冬 天 模
（ １ ２）： １ ２ ３７ ．
（ 收 稿 日期 ： ２ ０ １ ２ — ０ ９ — ２ ６ 修 回 日期 ： ２ ０ １ ２ — １ １ － １ ２ ）
血 小 板 计 数 偏 差原 因分 析 及 对 策 的探 讨
刘 美琴 （ 湖 北省 十堰 市房县人 民 医院 ４ ４ ２ １ ０ ０ ）
检 验 医 学 与 临床 ２ ０ １ ３年 ４月 第 １ ｏ卷 第 ８期
Ｌ ａ ｂ Ｍｅ ｄ Ｃ ｌ ｉ ｎ ， Ａｐ ｒ ｉ ｌ ２ ０ １ ３ ， Ｖｏ １ ． １ ０ ， Ｎｏ ． ８
完全 ； 孕妇本身血液处于 高凝状 态 ， 尤 其 一 些 高 龄 孕 妇 红 细 胞 膜特 别厚 ， 在 溶 血剂 作 用下 很 难 胀破 ， 常 会 出现 Ｐ Ｃ ２报 警 Ｊ 。
的泵管道破裂 ： 溶血 剂泵 管道 破 裂难免 出现 裂 也 将 出现 Ｐ Ｃ ２ ， 此 时可 看 到分 类 图点 纵 向上
偏， 计 数不足 ８ １ ９ ２个 。
处 理对策 ： 对 于 这些 血 浆 颜 色 正 常 而 不 分 类 的 标 本 ， 虽 然 不是黄疸标本 ， 同样 可 以使 用 ２ ． １的处 理 对 策 ， 标 本 离 心 洗 涤 后 基本都能分类 ， 并 且 仪 器 分 类 结 果 与 人 工 分 类 结 果 基 本 相 同 。对 于 极 度 贫 血 含 有 幼 红 细 胞 的标 本 与 白血 病 的标 本 ， 仪 器
全自动五分类动物血液分析仪检测血小板影响因素分析
Ｍ ａ． ０ ｒ ２ ０７
全 自动 五 分 类 动 物 血 液 分 析 仪 检 测
血 小 板 影 响 因素 分 析
陈文娜 李曦 明 （ 宁 中医药大 学教 学 实验 中心 辽 宁 沈 阳 １０ ３ ） 辽 １０ ２
【 摘要 】 Ｈ Ｍ Ｖ Ｔ全 自 Ｅ ＡＥ 动五分类动物血液分析仪采 用电阻抗原理对血 小板进行细胞计数和细胞体积测 量， 小板 凝 血
实验方法按 全国临床检 验操作 规 程… ， 机操 作按 仪器说 明书 标本血 小板 可发 生乙二胺 四乙酸二钠 （ Ｄ Ａ） 上 Ｅ Ｔ 依赖 性凝集 ， 血液
进行 。现就 Ｈ ＭＡ Ｅ Ｅ Ｖ Ｔ全 自动 五分类 动物血液分 析仪 检测血 小 细胞分析仪对凝集体 的结构 、 小板数 目不能确认 ， 产生仪 器 血 会
质随标本进 入计数池 ， 如果这些杂质颗粒大小在 ２ ０ｎ以 内， 会 就
全 自动血细胞分析仪是利用 两种溶血 剂将红 细胞溶解 后对 被血液分析仪误 认为血小板而使检 测结果增 高。 ＷＢ Ｃ和 Ｐ Ｔ同时进 行计数 ， Ｌ 在实验过程 中发现 ， 溶血不完全 不但 ６ 仪器本身的影响
３ ０ｎ之间 。因此如果检测标本 Ｐ Ｔ体积超 过 ２ 将不计 人 Ｐ Ｔ 检查时发现 ， Ｌ ４ｎ， Ｌ 在显微镜下均能看到血小板体积偏大而且有 的大小
结果 ， 造成结果 的偏 差 。另 外 由于仪 器不 能正 确识别 血小 板凝 悬殊 。因血液离开机体正常环 境后 ， 由于渗透 压发生 变化 ， 或抗 集、 小红细胞 、 红细胞碎片等 ， 类情况下血 小板计数值将 明显高 凝管壁 、 此 放置温度等 因素 的刺激 ， 随着放 置时 间的延长 Ｐ Ｔ发生 Ｌ 于样本的实际值 ， 血小板直 方图也会出现异 常的特 征性 改变 。另 肿胀或产生构型改变 ， 使血小板平 均体积增 大 ， 同时 Ｐ Ｔ计数 降 Ｌ 外抗凝剂 、 剂的质量 、 试 标本放置 时间 等因素均会 影响对血 小板 低 ， 仪器在血小板参数 中出现 Ｐ 或 Ｐ １ ２报警信号 。
血小板影响原因
血常规分析中血小板检测问题出现的问题•日常工作中五分类血常规检测血小板检测经常会出现结果的不稳定，两次检查的结果不一致。
血小板检测原理•血小板仍然采用电阻抗原理测定•仪器检测血小板阈值在2 fl～30 fl范围内•血小板多集中在3 fl～20 fl范围影响结果的原因•采血因素：采集末梢血穿刺部位皮肤过冷、针刺过浅，用力挤压使组织凝血因子混入血液标本中产生肉眼看不见的小凝块，血液在毛细管中反复吹吸时问过长。
吸取标本量不足也是造成PLT减少的一个原因,同时会造成白细胞和红细胞的计数减少;另外,标本未经混匀既上机测定是造成PLT结果偏低的又一个容易忽视的因素。
•标本放置时问过短：采集末梢血做血细胞分析时．如果采血后马上进行细胞计数，血小板计数明显偏低。
其原因就是EDTA作抗凝剂时．会使血小板形态发生变化，其外膜形成的微小管游离端向外伸展，从而在血小板周围形成丝状伪足，数个这样的血小板伪足相互缠绕．形成血小板可逆聚集体，使血小板计数结果偏低随着时间延长。
EDTA能使血小板由盘状变为球状，血小板伪足回缩到胞质内，相互缠绕的血小板解散。
因此应在采血5min后进行血细胞分析以提高结果的准确性，避免血小板假性减少；•大血小板影响：血细胞分析仪计数血小板原理设计计数阈值，当血小板体积>30 fl时，血小板会被误认为小红细胞而不纳入血小板计数范围，当作红细胞计数；当血小板体积<2 fl时，仪器会把它当作噪音不进行计数，从而使血小板计数结果偏低。
如巨大血小板综合征(BernardSoulier综合征)，ITP时血小板体积增大；再生障碍性贫血、脾功能亢进、白血病、败血症等患者常见小血小板。
与长期的化疗以及激素的使用有关，此时应手工计数血板。
•药物影响：长期应用地高辛、青素、双氢克脲塞、硫酸镁等药物均可引起血小板减少。
这些药物与血浆蛋白结合形成抗原，刺激机体产生抗PLT抗体；这种抗药源性PLT减少常在停药后15—2d恢复正常。
假性血小板减少及原因分析
假性血小板减少及原因分析摘要：目的：探讨假性血小板减少的相关因素，为提高测定结果的准确度提供参考。
方法：抽取同一患者当天静脉血，分别采用乙二胺四乙酸二钾（ethylenediaminetetraacetic acid-k2，edta-k2）抗凝，枸橼酸钠抗凝，edta-k2抗凝后转为枸橼酸钠抗凝处理的血液样本，三种方法处理后的血样均采用三分类和五分类法进行血小板测定，此外三种处理方法的血样均推血涂片，染色后置光学显微镜下观察血小板聚集情况。
查阅相关文献结合此次实验结果分析引起测定结果差异的可能原因。
结果：由于edta-k2导致血小板的聚集，使得依赖性假性血小板减少；经枸橼酸钠抗凝处理后，未见血小板聚集及假性血小板减少现象；自动化血细胞分析仪误将聚集的血小板判读为白细胞而使得白细胞假性增加。
结论：edta-k2抗凝可能会引起血小板聚集与血小板假性减少，对于此类情况应采取手工计数和涂片复检法进行复测，以保证结果的准确性及避免误诊。
关键词：edta 枸橼酸钠抗凝假性血小板减少血小板聚集doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.07.223【中图分类号】r4 【文献标识码】b 【文章编号】1671-8801（2013）07-0202-02血小板在人体内具有维护血管内皮完整性和粘附、聚集、释放、促凝及血块收缩等重要功能，对血小板进行检测已成为入院后的常规检查项目，对于诊断多种疾病有重要作用。
目前各大医院常用全自动血细胞分析仪对血小板进行测定，依据电阻抗或光散射原理推断血细胞的大小与数量，但有时血小板会以聚集状态存在，仪器误读为其它血细胞，最终出现血小板计数减少的假象，即假性血小板减少，故分析血小板假性减少的原因及应对策略就显得非常重要。
本文就工作中出现的1例血小板假性减少现象进行报道并对相关的影响因素进行分析。
1 资料与方法1.1 一般资料。
2013年1月15日来我院内科就诊的73岁女性患者，在体检中心抽取该患者的静脉血，进行血细胞分析。
对血小板相关四项指标空白质疑的剖析
项 指标 正 常 者 ３ ７ ９ ７例 ．血 小 板后 四项 指标 空 白者 ２ ７例 。 常率 ６５ ％。 ７ 异 ．１
２２ 正常 与两种 异 常类 型血 小板 直方 图 图 １ ． 见 ～
图 ３ 。
血细 胞仪 器在 如 何判 定 或提 示 结果 可疑 。 警 示操 可 作人 员慎 重发 报 告或 复查 结 果 。 现 了仪 器 的 先进 体
平均 年龄 ４ ． ８８岁
１ ． 实验 方法 临床 采 集 Ｅ Ｔ Ｋ 抗凝 全 血标 ．２ ２ Ｄ Ａ— ，
本 ２ｌ。 Ｉｌ 在判定 室 内质控 在控 的前提 下 。 本 于 ２小 ｌ 标
图 ３ 血 小 板 异 常 直 方 图
正常 血小 板直 方 图 ｌ ３ ７ 。９ ７例 。 仪 器在 ２ ３ ｆ 该 ～５ ｌ
处。 曲线非但 未 接近 横坐标 。 并且 拐 弯上扬 。
２１ 临床 Ｅ Ｔ — ２ ． Ｄ Ａ Ｋ 抗凝 全 血标 本 ４ ５ ２ ４份 ，测定 后 统计 发 现五 分 类 血 细胞 检 测 报告 中完 整 报 告 ２ ４
作 者单 位 ：３０ ３ 南 昌大 学 第 四 附 属 医 院检 验 科 ３ ００
秋 冬 四 个 时 间 段 ：０ ７４８～ ．１ ２ ０ ．． ７２ 。 ２ ０ ．． ４２ 。０ ７７８～ ．１
２ ０ ． ．－ ０２ 。０ ８１ ～ ．ｌ ０ ７１ ８ １ ．１ ２ ０ ．． １ 。总 计 ４ ５ ０ ８ ２ ２ ４位 临 床 住 院 患者 ： ２ １ 男 ３ ４例 。 １ ４ 女 ９ ０例 。 龄 ｌ ～ ０岁 。 年 ｌ９
５ ．％ 、平 均 红 细 胞 体 积 高 于 正 常 参 考 值 者 为 １ ６ ７ ． 红 细胞分 布宽度高 于正 常参考 值者 ７７ 红 ３ ％， ６ ．％， 细胞分 布宽度一 Ｄ高于正 常值者 ４ ．％ Ｓ ６２ ２４ 对 １３例 血 小板 异 常 直 方 图 ３相 关 指 标 分 ． ０ 析 ，特 点 是 血 小 板 计 数 ｆＬ ）低 于 正 常 值 者 为 ＰＴ ２ ．％、平 均红 细胞体积 低于 正常值 者为 红 细胞分 布 宽 １ １ 度一 Ｄ高于正常 值者 ５ ．％ Ｓ １ ９
血细胞分析仪检测血小板偏低的临床分析
Ｌ ０
１ ． １ ． １标 本
选 自２ ０ １ ０年 至 ２ ０ １ １年 的 自然 检测
１ ． ２ ． ５血 小板计 数参 考方 法 ： ＷＨ Ｏ推 荐血 小板计
数方 法 ： 取 ２ ０ Ｉ ｘ ｌ血 加 入 ｌ ０ Ｌ 草 酸 铵 稀 释 液 ０ ． ３ ８ ｍｌ ， 溶血 １ ０ ｍ ｉ ｎ后 充 入计 数 板 放 置 ３ ０ ｍｉ ｎ ， 用
患者 ， 采用 Ｅ Ｄ Ｔ Ａ—Ｋ 真 空 管 ， 采血 量以 （ ３ ． ０± ０ ． １ ） ｍ ｌ 为准 ， 标本混匀 ｌ Ｏ ｍｉ ｎ后 上 机 进 行 检测 ， 仪器 提示 血小板 直方 图异 常 ， 血 小板 ＜ ５ ０×１ ０ ／ Ｌ
显微 镜计数 中央大方格 四周 ４个 中方格 和 中 央 １
参考文献 １刘秋月． Ａ Ｂ Ｘ Ｐ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ６ ０五分类 血球 仪 的维修 及常 见故 障排 除 ．临床医学与检验 ， ２ ０ １ ０ ； ３ （ ７ ） ： ｌ ５
２ Ａ Ｂ Ｘ Ｐ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ８ ０用 户 手 册
全 自动血 液分 析 仪 属 于高 档设 备 ， 必 须严 格 管理 ， 建 立规范 的操作 程 序 ， 记 录详细 的使 用保 养 维 护手册 。每 日运行 室 内指 控 并记 录质 控 数据 ，
（＞１ ｍ ｉ ｎ ） ， 或 采 血 过程 中顺 利 ， 血 流 不畅 ， 血 液在
注射 器 内停 留时 间过长 ； 多 次穿刺 组织 损伤 ， 使组
织 凝 血 因子 混 入 血标 本 ， 或者 穿 刺 后 未 能及 时来
分析。 １ 材料 与方法
１ ． １材 料
１ ． ２ ． ３仪器血小板计数 ： 每份样本在仪器上均测 定 ３次 ， 记录结果 （ 数据及 直方 图） ， 求其均 值。
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影响 Ｐ Ｔ计数的主要原 因。结果极不可靠 ，须重新采血 。 Ｌ １ ２ 溶血剂 的质量 溶血剂 是血细 胞分析仪试剂 中的 ． 主要试剂 ，能将 红细胞溶解 ，并能使 白细胞 的体积发生 规律性变化 。理论上讲 Ｐ Ｔ计数 时的脉冲 大小只与稀释 Ｌ 液的性能和仪器 的设置有关 ，与溶血剂 的性能无 关。但 实际工 作发现 ，若溶血 不完全 ，由于红细胞碎片冲洗 不
湿度是否控制在 最佳状 态 ，是否有 电磁干扰 。 全 自动 血球 分析不仅 为临床提供多项血细 胞参数 机
直方 图，而且操作简便 重复性好 ，准确度 高，受到广 大 检验工作 者的青睐 ，工 作中为 了得到准确 的血 小板数量
◎ ＩＩＥＣ］ ＣＥＯＩ远擞 ＤＤ代ＡＣ ＨＣＲＥＯ Ｎ Ｎ ＥＩ 现ＤＯ ＳＮ Ｄ ＵＦ Ｅ ＳＣ 哼 Ｔ 程 ＭＭ Ａ Ｉ Ｎ
个 因素是不 可能概括 【，但与肝郁脾 虚关 系密切 。③ 在 １ 】 ２ ０例 统计病例 中，有代 谢综合征体 征的患者 占了 １ １ ０ ７ 例，占 ８． ５５ ％。 比较肝郁脾虚 的症状 和提示患者 实验 室 检查 ，发现 阳性结 果出现较早 ，而症状 出现较晚 ，我们 要重 视平时 的体检和 实验室检验 。④在 体检 中发现 ，部 分体形肥胖 患者体检指标完全 正常 ，也无任何肝 郁脾虚 的症状 ， 果出现 ２ 结 ９例体检正常 的患者 ，从中医辨证此 类体质是属 于脾 虚痰湿 内阻，但临床症状和体 征并未完 全 出现 ，但我们要 密切观 察这部分患者 的体质变化 。 因此 ，在这 次科研调查 中，我们可 以得 出结论 ，中
【】方 剑锋 ， 赛 美， 瑞 芳． “ １ 李 陈 从 治未 病 ”探 讨 代谢 综合 征 的 防治 思路 ． 新 中 医， ０ ，１３：—． ２ ９４（） ７ ０ ５
【】杨 力． 医疾 病预 测 学－版 【 ． ： 京科 学技 术 出版社，０ ５ ５３． ２ 中 ２ Ｍ】 北京 北 ２ ０ ： ．０ ２ ［】乔 哪丽 ， 钦河 ， 桂 元． 肝 郁脾 虚 是脂 肪 肝 的基本 发 病 病机 【 ． 国 ３ 杨 季 论 Ｊ 时珍 ］
彻底将 引起 Ｐ Ｔ 性增高 。 Ｌ假 １３ 抗凝 剂 的影 响 抗凝 剂 的种 类对 检测 结果 影响较 ． 大 ，国际化学标准化 委员会 （Ｃ Ｈ Ｉ Ｓ ）推荐用 Ｅ Ｔ Ｄ Ａ二钾抗 凝 。另外，血液和抗凝 剂 比例也会影 响检 测质量 。血液
比例过 高时 ，由于抗凝剂 相对不足 ，血 浆中 出现微血块 的可 能性增加 。微凝块 可能堵塞仪器 影响检 测结果 。如 果血少 ，抗凝 剂的浓度增高 ，血小板会肿胀 、崩解 、产 生正常 Ｐ Ｔ大小 的碎 片，从而无法得 出正确 的结果 。 Ｌ
大 小分类计数 ，不能识别小红细胞 ，红细胞碎片 ，血小 板 聚集 ，当出现 小红细胞或红细 胞碎片时 ，仪器会误认 为是血小板 ，而使 血小板计数结 果高于实际值 ，此 时血 小板直 方 图在 ２ — ０ ０ ３ 飞升 出现翘尾 峰或为锯 齿状 峰形。
１ ７ 其他 因素 ．
２ 讨论
实验室的环境 因素 ，是 否洁净 ，温度 ，
２Ｏ下期 第１第 ０４半 １期９ ０月 月 ８ ・刊 年总 第 ４ ７
பைடு நூலகம்
医的土行人的体质是代 谢综合征 的高发人 群，肝郁脾虚 是重 要的病理 发病机制 ［，不 良的饮食 和生活 习惯 是发 ３ 】 病 的诱 发因素 。在 防治代谢 综合征 中，运用 中医的整体 观和 治未病 的理论 ，是一条主要 的防治思路 。 参考文献
血小板是血 细胞 中体积最 小的细胞 ，它 是一个多功
能 的细胞 ，在止血 过程 中有重 要的作用 ，由于 它 自身容 易破坏和 易受 到其他因素 的干扰 ，能准确 的测 定血小板 及其相关 的参数 ，无疑是对 临床 诊断疾病和对疾 病疗效 的判断显 得尤 为重 要， 本文 对全 自动血 细胞分 析仪检 测 血小板数 量影响 因素进 行探 讨 ，以排 除假 性增高和假性 降低情况 ，及 时准确地为临床提供可靠 的诊 治依据 。 １ 主要因素
常 ，结果可靠，而异 常体积 增多时对血小板的影响很大 ， 特 别 出现 巨大血 小板时 ，Ｐ Ｔ直 方图的分布变宽 ，血 小 Ｌ 板 的平均体积会 明显增高 ，另外 仪器是根据细胞 的体积
１ １ 标本 的 自身因素 ．
采血过程不顺利 ，过 分的挤 压 ，
或者没有 与抗凝剂充分 的混匀等认为 的因素造成血小板 凝集 ，是造成血小板不 准确的首要 因素 ，导致计数结 果 偏低 。在 Ｐ Ｔ直方 图上提示有大颗 粒存 在，Ｐ Ｔ聚集是 Ｌ Ｌ
随血液进入计数池影响对血 小板 的计数，另外 ， 试剂保存 不 当，或者过期 ，会有一些杂质 ，如果这 些杂质在 ２ Ｏ飞 升 以内，会使血球分析仪误 认为是血小板而使结果偏高。 １ ６ 仪 器本 身 的因素 由于 使用 电阻抗法检 侧血 小板 ． 的 ，血 小板的体积和数量 密切的相关 ，血 小板 的体积 正
偏 高。此外 ，全血标本需不 断混 匀，２ ｈ内完成测定 。 １５ 试剂 的影响 血小板的高低直接反应试剂的质量 ， ． 原则上使用与仪器相 匹配 的试剂，最好使用原装 的试剂 ， 造成血小板增高的另一个原因是仪器的管道长期不清沽 ，
造成管道粘附者 一些絮状物 ， 或者是凝块 ，这些杂质 可是
医 国药，０ ８１ （） ２ ８ １ ３ ． ２ ０ ， ５ ： ３ —２ ９ ９ １ （ 稿 日期 ：２ １ ４ １ ） 收 ０ ００ ．８
关键 词 ：血 小板 计数 ；影 响因 素； 检验 医学 ｄｉ １． ６￣ｉｓ． ７－７ ９２ １． ．７ ｏ： ０３ ９ ． ｎ１ ２２ ７ ． ０１ ０ ７ ９ ｓ ６ ０ ４ 文 章编 号 ：１７ —７ ９ （００ １—１６０ ６ ２２ ７ ２ １ ）一４０ ０— １