(硕士)环糊精型手性固定相的制备及色谱拆分与保留机理研究
手性药物色谱拆分法研究发展
5.1 间接拆分法
[1]Zukowski J,De Biasi V,Berthod A. Chiral
等特点，并具在手性分离方面与高效液相色谱、
间接拆分法[8]虽需进行衍生化反应，但生 separation of basic drugs by capillary elec－
气相色谱相互补充，在光学纯药物的制备方面 成的非对映体异构体，物化性质不同,可用常规 trophoresis with carboxymethylcyclodextrins [J].J
的技术，它以高压电场为驱动力，以毛细管为分 - NHCO- 基团。苯环的取代基的性质，数目及位 [11]LI Bing，SHI Jie -hua，YANG Gen -sheng，.
离通道，依据样品中各组分间电荷及质量的差 置对手性化合物的拆分影响很大[11]。蛋白质类 Cellulose-based chiral stationary phase in high
副作用。因此手性药物拆分近年来引起人们的 D- 10- 樟脑磺酸胺作为手性离子对试剂添加到 是很广泛；GC 法对于药物的沸点要求严格，故
广泛关注。目前，手性药物的拆分主要有化学拆 流动相中，在硅胶 GF254 薄层板上分离了两种芳 GC 应用范围有限；CE 法和 TLC 法检测灵敏度
分法、结晶法、生物拆分法和色谱法等等，其中 香醇胺类药物对映体拉贝乐尔和倍它乐克，并 较低，有待研究提高发展；HPLC 法因手性固定
也有其局限性，如检测灵敏度不足，重现性差等 磺酰基 - 1,2- 二苯基乙二胺，研究了流动相中 对甲基苯磺酰基-1,2-二苯基乙二胺在卵类粘
[6]。
有机调节剂的种类和含量等色谱条件对拆分结 蛋白柱上的手性拆分[J].色谱,2003, 21(4): 407.
手性拆分
手性是自然界的一种普遍现象，构成生物体的基本物质如氨基酸、糖类等都是手性分子。
手性异构体(对映体)在药物中占有很大的比例，据统计，已知药物中约有30%~40%是手性的［1］。
经由化学合成得到的药物往往是对映体，不是单一的光学异构体。
虽然其物理化学性质基本相同，但是由于药物分子所作用的受体或靶位是氨基酸、核苷、膜等组成的手性蛋白质和核酸大分子等，它们对与其结合的药物分子的空间立体构型有一定的要求，因此，对映体药物在体内往往呈现很大的药效学、药动学等方面的差异(图1)。
鉴于此，美国食品医药管理局(FAD)规定，今后研制具有不对称中心的药物，必须给出手性拆分结果［2］，欧共体也采取了相应措施，因此手性拆分已成为药理学研究和制药工业日益迫切的课题。
利用化学拆分法、超临界流体色谱法、膜法、酶法以及模拟流动床法分离药物对映体，已成为新药研究和分析化学的领域之一。
本文综述了近几年来利用上述方法拆分手性异构体研究的新进展。
1 化学法 化学拆分法是广泛使用的一种方法，经典的化学拆分是利用手性试剂与外消旋体反应，生成两个非对映异构体，再利用其物理性质的差异将其拆分。
但此类方法存在收率较低、拆分剂消耗大及在拆分的化合物类型上受到限制等缺点。
近几年来，随着主客体化学的深入研究而发展起来的包结拆分(inclusion resolution)由于其拆分效率高、操作简单及适用条件广泛等优点而受到重视。
包结拆分的基本原理是：手性主体化合物通过氢键及分子间的次级作用，选择地与客体分子中一个对映体形成稳定的包结络合物析出来，从而实现对映体的分离，如图2所示［3］。
由于包结拆分中主体分子与客体分子间不发生任何化学反应，只是通过分子间作用力来实现拆分，因而很容易地通过如柱、溶剂交换以及逐级蒸馏等手段与客体分离和可循环使用［4］。
甾类化合物是最优良的包结主体之一，因为其化学结构中富含多种功能基且刚性很强，其中胆汁酸类衍生物(图3)广泛地应用于手性醇、酮及手性亚砜类化合物的拆分。
3,5-二硝基苯甲酰化β-环糊精键合硅胶手性固定相的合成及高效液相色谱中的手性分离研究
究在 高效 、 低毒 药 物创 制 中起着 至 关 重要 的作 用ｎ 。 环糊 精 因其 特 殊 的结 构 和性 能 而 在 手 性药 物 的分 ］
离 中 占有 比较 重要 的地 位 。而用 不 同 的衍 生 化 试 剂对 ｐＣ 的 羟基 进 行 修 饰 ， 以 提 高键 合 相 与 手 性 分 －Ｄ 可 子 之 间的作 用力 ， 大应 用 范 围＿ 。朱 全 红等 研究 了 ３ ５二硝 基苯 甲酰化 环糊 精键 合 硅胶 （０ ４ 扩 ２ ］ ，一 １～ ０ ｆ 在 薄层 色谱 中 的性能 。本 文用 更小 粒 径 的硅胶 （ ｍ） 成 了 ３ ５二 硝 基苯 甲酰 化 环糊 精键合 硅 胶 ｍ） ５ 合 ，－ 固定相 ， 并对 此 固定相 在 高效 液相 色谱 中的色 谱性 能 进行 了评 价 。
该 固定 相 对 于一 些位 置 异构 体和 对 映异 构体 具 有较好 的分 离能 力 。
关 键 词 ： ，－ 硝 基 苯 甲 酰 化 环 糊 精 键 合 硅 胶 ； 效 液 相 色谱 ； 性 固 定 相 ３ ５二 高 手 中 图 分 类 号 ： ５ ． ２ Ｏ６ ７ ７ 文献 标识 码 ： Ａ
Ｉ 实验 部分
１ Ｉ 仪 器 与 试 剂 ．
Ｗａｅｓ １ — １ －９ ｔｒ５ ５７ ７９ ６型 高效 液相 色谱 仪 ， 括 ５ ５二 元 泵 ， １ 自动 进 样 器 ， ９ 包 １ ７７ ９ ６二 极 管 阵 列 检 测 器 ， Ｍｉｉｎ ｉｍ船色谱工 作 站 。 ｌｅ ｎｕ ｌ
１．
１ ２ １ 环糊 精键 合硅 胶 的合成 ．．
称取 经 干燥 的 Ｃ ． ６ （ Ｄ ５ ７ ５ｇ ５ｍｍｏ） 于 １ ５ｍＬ无水 Ｄ １溶 ２ ＭＦ中 ， 加
入 ０ ５ｇＮａ ， 温 下 搅 拌 反 应 至 无 气 泡 冒 出 ， 滤 ， 滤 液 中 加 入 ＫＨ一６ ． ５ｍＬ １ ． Ｈ 室 过 向 ５ ０２ ２ （ ０ｍｍｏ） 在 Ｎ １， 保
高效液相色谱手性固定相法研究进展
本研究对于推动手性药物分离技术的发展、提高手性药物的纯度和质量、促进 手性药物的研究和开发具有重要意义。同时，新型手性固定相的开发还将为其 他领域的手性分离提供新的思路和方法。
02 高效液相色谱手性固定相 法概述
手性固定相法的定义与原理
定义
手性固定相法是一种利用手性固定相 来分离手性化合物的方法，属于液相 色谱技术的一种。
在食品科学中的应用
食品添加剂分析
高效液相色谱手性固定相法可用于食品 添加剂的分析，如防腐剂、抗氧化剂等 。这些添加剂往往具有手性特征，通过 手性固定相法可实现其对映体的分离和 检测，为食品添加剂的安全使用提供技 术保障。
VS
食品营养成分研究
食品中的营养成分如氨基酸、糖类等往往 具有手性特征。利用手性固定相法，可以 研究这些营养成分在食品中的存在形态和 含量，为食品营养价值的评估和开发利用 提供重要依据。同时，手性固定相法还可 以用于食品中天然活性成分的分离和纯化 ，为功能性食品的开发提供技术支持。
01
流动相组成的优化
02
色谱柱温度的控制
03
检测器技术的改进
通过调整流动相的组成、pH值和 添加剂等，改善待测物在固定相 上的保留和分离效果。
研究温度对手性分离的影响，优 化色谱柱温度以提高分离效果和 分离速度。
提高检测器的灵敏度和分辨率， 降低检测限和定量限，提高手性 分离的准确性和可靠性。
04 高效液相色谱手性固定相 法的应用实例
国外研究现状
国外在手性固定相的研究方面处于领先地位，已 开发出多种性能优异的手性固定相。
3
发展趋势
随着手性药物市场的不断扩大和技术的不断进步， 手性固定相的研究将朝着更高效、更稳定、更环 保的方向发展。
一种新的环糊精衍生物手性固定相的合成及其在对映异构体过量值测定中的应用
Ｓ ｅｙ ｎ ，ＧＵＯ ｎ ．ｈ ｏ ，Ｗ ＡＮＧ ｎ ， Ｉ Ｗ ｅ － ｅ ，Ｚ ＨＩ Ｘｕ ． ａ Ｈｏ ｇ ｃ ａ １ Ｍｉ Ｊ Ｎ ｎ ｇ ＨＯＵ ｉｇ ｍｅ Ｊｎ — ｉ ｚ
（ Ｃ ｌｇ ｐ ｅ ｌｍｉ ｒ ，Ｃ ｉａＡ ｒ ｕｔｒｌＵ ｉｅ ｉ ，Ｂ ｉｎ ０ ０ ４， ｈｎ ； ｊ ｏｌ ｅ ｆＡ ｌ ｄＣ￣ ｓ ｙ ｈｎ ｇ ｉ ｌ ａ ｎｖｒ ｔ ｅ ｏ ￣ ｅ ｔ ｃ ｕ ｓｙ ｅ ｇ１ ０ ９ Ｃ ｉａ ｉ ｆ
ｅ ａ ｉｍ ｅ ｉ ｘｃ ｓ ｎ ｎｔｏ ｒｃｅ ｅ ｓ
手性分子特有 的物理 、 化学或生物功能使手性 医药 、 药 、 料 、 品添加 剂 、 材料 等具有 重要 价 农 香 食 新 值， 获得手性物质已成为科学研究和工业 生产 的重 要 目标之一。人们一般通过拆分消旋体和不对称合 成来制备手性化合物， 因此测定旋光化合物的对映 异构体过量值 （ｎｎｉ ｅｉ ｅｃ ｓ、 ｅａｔ ｍ ｒ ｘｅ ）评价产 品质量 ｏ ｅ ｓ 已成为一项重 要工作… 。目前 ， 已有多种方法可用 于测定手性化合物的 ｅｅ 值 ， ．． 但大多数方法所用的 试剂和材料价格 昂贵， 而使 用环糊精 手性 固定相 的 毛细管气相色谱法（ ｃ ） ｃ ， 具有高效 、 ｃ 灵敏 、 快速 、 手 性分 离能力 强 、 离适 用 范 围广 、 复性 好 等 优点 ， 分 重 并且费用相对较低 ， 已被广泛使用【 。 目前 ， ２ － 已有 ３ｉ 的环糊精衍生物被合成并用于对映体的分离 。 ｖｔ 研究发现， 不同的环糊精手性固定相分离化合物的 适用范围不同， 因此设计和合成特定结构的手性 固
手性药物对映体的环糊精手性流动相_手性固定相HPLC法拆分
光学异构体药物具有不同的生理作用早已 为人们所熟知 ,例如震惊世界的沙立度胺致畸 事件 ,据研究认为完全由于其 ( S ) 2( - ) 异构体 所致 。目 前 医 药 生 产 中 , 手 性 药 物 已 超 过 50 % ,然而有近 85 %～90 %的手性药物仍以外 消旋体生产出售和使用 。因此建立高专属性 、 高灵敏度 、高分离度的对映体拆分和测定方法 , 对提高药物的活性 、减小副作用 ,深入研究药物 的作用机理等具有重要的理论和实际意义 。
由表 1 可见 ,3 个对映体药物均形成 1 ∶1 的环糊精手性包络物 ,在 8018 两对对映体中 , 对映体 (1) 和对映体 (2) 之间的包络常数是非常 一致的 ,因此表明在β2环糊精对 8018 对映体拆 分过程中 ,只有一个手性中心在起作用 ,而与另 一个手性中心无关 。 3 β2环糊精手性流动相 HPLC 法拆分 8018 , 8021 和 1113 对映体
© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.
药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 1998 ,33 (2) ∶143～147
(A T3) ,99 % ,毒物药物研究所合成并提供 ; 硫 酸阿托品 ,B P ,美国 T &HS 公司 ; 氢溴酸东莨 菪碱 ,Merck 公司 ;去甲基安定 ,对照品 ,中国药 品生物制品检定所 ; 1 , 1’222联萘酚 , Sigma 公 司。
β2环糊精 ,分析纯 ,上海试剂采购供应站 , 经重蒸水 3 次重结晶 、P2O5 真空干燥提纯 。其 他试剂均为国产优级或色谱纯 ,实验用水为二 次石英亚沸蒸馏水 。
手性化合物的拆分技术
手性化合物的拆分技术研究进展摘要本文综述了分离外消旋体的几种主要拆分方法的优缺点及其应用情况。
分别有：化学拆分法、膜拆分法、色谱拆分法以及毛细管电泳拆分法。
关键词：手性物；拆分；外消旋体Technical Progress of Chiral SeparationAbstractThis article reviews separation methods of chiral which include chemical，membranous，chromatographic and electrophoretic methods．Key words：chiral compounds；chiral separation；raceme目前获得手性物的主要方法还是通过拆分外消旋体。
早期的拆分方法主要有机械拆分，结晶拆分以及手性溶剂结晶拆分。
这三种方法都是利用外消旋混合物的两种对应体结晶性能不一样的特点进行分离。
已经有较成熟工业应用，但一次性收率较差，在此不做赘述还是本文综述了今年来手性拆分方法中使用较多的化学拆分法、膜拆分、色谱拆分以及毛细管电泳拆分四种拆分技术。
1化学拆分[1]1.1生成非对映体拆分此方法是利用外消旋混合物与手性试剂反应后生成有不同性质的非対映体，从而利用生成物的不同物理性质（溶解度、蒸汽压、结晶速率等）将其分离，再将分离后的物质分别还原成之前的対映体。
还可以使用拆分剂家族代替单一拆分剂进行拆分，所谓拆分剂家族是指有类似结构的2~3个手性剂拆分剂。
组合拆分提高了产品收率和纯度。
1998年Hulsho F L A等人[2]就使用一定量的（S,S）酒石酸衍生物的拆分剂家族拆分3-（1,4-亚乙基哌啶基）苯甲酸酯和3,4-二笨基四氢吡咯，经过一定处理后，两种対映体的纯度（ee值）分别达到了99%和98%。
如果拆分剂不能和対映体反应，就可以利用拆分剂的空穴与两种対映体之间形成氢键或者范德华力能力的不同，将一种対映体优先包裹以达到分离的目的。
手性分离
手性色谱柱知识介绍手性色谱柱（Chiral HPLC Columns）是由具有光学活性的单体，固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相（Chiral Stationary Phases）。
通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异，从而达到光学异构体拆分的目的。
要实现手性识别，手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。
这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。
手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。
这些相互作用通过影响包埋复合物的形成，特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。
由于这种作用力较微弱，因此需要仔细调节、优化流动相和温度以达到最佳分离效果。
在手性拆分中，温度的影响是很显著的。
低温增加手性识别能力，但可能引起色谱峰变宽而导致分离变差。
因此确定手性分析方法过程中要考虑柱温的影响，确定最优柱温。
迄今为止，尚没有一种类似十八烷基键合硅胶（ODS）柱的普遍适用的手性柱。
不同化学性质的异构体不得不采用不同类型的手性柱，而市售的手性色谱柱通常价格昂贵，因此如何根据化合物的分子结构选择适用的手性色谱柱是非常重要的。
根据手性固定相和溶剂的相互作用机制，Irving Wainer首次提出了手性色谱柱的分类体系[1]：第1类：通过氢键、π-π作用、偶级-偶级作用形成复合物。
第2类：既有类型1中的相互作用，又存在包埋复合物。
此类手性色谱柱中典型的是由纤维素及其衍生物制成的手性色谱柱。
第3类：基于溶剂进入手性空穴形成包埋复合物。
这类手性色谱柱中最典型的是由Armstrong 教授开发的环糊精型手性柱[2]，另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物，如聚（苯基甲基甲基丙烯酸酯）形成的手性色谱柱也属于此类。
第4类：基于形成非对映体的金属络合物，是由Davankov开发的手性分离技术，也称为手性配位交换色谱（CLEC）[3]。
第5类：蛋白质型手性色谱柱。
手性分离是基于疏水相互作用和极性相互作用实现。
谷氨酸衍生化β—环糊精气相色谱手性固定相的合成及其在毛细管气相色谱中的应用
酐 将其 乙酰化 ， 到一 种 非水 溶性 的淡黄 色 粘稠 液体 ， 为 一 种 新 型气 相 色 谱 手性 固定 相 ， 用 红 外 光 得 作 运 谱 对合 成 产物 进行 了表征 测试 ， 运用 热重 分析 考 察 了其 热 稳 定性 能 。在该 固定 相 上 对一 系 列 异 构体 进 行 了拆 分研 究 ， 果表 明 ： 聚合 物对 位 置异 构体 和对 映异 构 体显 示 了很 强 的 立 体选 择 性 能 ， 对 其 拆 结 该 并
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第 ３ Ｏ卷
２０ ０ ２年 １ １月
分 析 化 学 （ Ｅ Ｘ Ｕ Ｘ Ｅ 研 究 简 报 Ｆ Ｎ ＩＨ Ａ Ｕ ）
Ｃ ｉｅ ｅ Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＡ ａｙｉ ａ Ｃ ｅ ｓｒ ｈ ｎ ｓ ｏ ｒ ａ ｎ ｌｔ ｌ ｈ ｍｉｔ ｏ ｃ ｙ
外 光谱 仪 （ ｅｋｎＥｍ ｒ 司） ＷＲ 一Ｐ微 量热 天平 （ 海精 密科 学 仪 器有 限公 司 ） Ｐ ｒｉ ｌ ｅ 公 ． ， Ｔ３ 上 。 ｐ环糊 精 （ ． Ｄ （ ． ｐＣ ） 中国 医药集 团上 海 化 学试 剂 公 司） 环 氧 氯 丙烷 、 氨 酸钠 （ 海试 剂 三 厂 ） 醋 酸 ， 谷 上 ，
２０ ．２１ 稿 ；０ ２０．８接受 ０ １１．５收 ２０ ．７０
择性 。
关 键 词 手 性 固 定 相 ，毛 细 管 气 相 色谱 法 ， 环 糊 精 衍 生 物 ， 构 体 拆 分 异
１ 引
言
在气 相 色谱 手 性 分 离 研 究 中 ， 展 最 快 ， 用 最 广 的 手 性 固 定 相 是 各 种 类 型 的 环 糊 精 衍 生 物 发 应
一种新的β—环糊精衍生物手性固定相的制备及其气相色谱性能
第 ２卷 第 ３ ｌ 期
２０ 年 ５月 ０２
分 析 捌 试 学 报
￣ ＸＩＣＥ ＨＩＸＩＥ ＇ ＥＮ Ｓ Ｌ ＢＡＯｆ ｃ ｍ ａ ｆｌ ｓ ￣ ｎ ａ ｍｏｙ ｉ） Ｊ ￣ ｌｏ ｎ ｔ ｍ ｔｌ？ ］ ｓ ｓ
Ｖ０ ｌ １ ｌ ２ Ｎｏ ３ Ｍｄ ０ ２ ｖ２ ０
１ 实验 部分
１ １ 仪器 与试剂 ．
Ｈ ５９Ａ气相 色谱仪 （ 国惠普公 司 ） Ｐ ８０ 美 ，氢火焰 离 子化检 测器 ＦＤ，３６ Ｉ ３５色谱工 作站 ，１ ５ｍ×０２ ．５ ｎＩｉｄ ） １（．．弹性 石英毛 细管柱 （ Ｉ Ｉ 河北 永年 光纤 厂 ）。
卢 环糊精（ 一 苏州味精厂产品 ， 使用前两次重结晶纯化处理 ， ０℃真空干燥） 手性样品 。 蒎烯、９ ８ ， 一 Ｉ一 蒎烯 、 乳酸乙酯、 － 戊内酯、 一 紫萝酮和 氯代丙酸甲酯等不进行衍生化， ． ａ 苯乙醇和 １２丙二醇 ，－
取 代基 的位 置和类 型是 影 响手性 选择 的主要 因素 ， 用不 同 的衍 生化方 法对具 有 不 同反应 活性 的环 采
糊精分子上 的羟基进行修饰 ， 可得到性质各异 、 选择性不同的手性 固定相。 目前 ， 大多采用烷基化
和酰 基化 改 性 ，以改善其 成 膜 性能 ，提高柱 效 。 同 时 ，采 用聚 硅 氧烷 稀 释 固定 相 ， 获 得 高柱效 、 可 热稳定性 好 ：２Ｏ 一０ —０；怔 回 日期 ： ０２—０ 一ｌ Ｏｌ ６ ３ ２０ ３ ｌ
作者筒 介 ： 唐课文（９０ ） 男 ， １７ 一 ， 湖南岳 阳人 ， 讲师 ， 博士
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一
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第３ 期
庙课 文等： 一种新的 口 环糊精 衍生物手性 固定桐 的制备＆其气相色谱性能 一
R-1-苯基乙基氨基甲酸酯-β-环糊精键合手性固定相的制备与应用研究
Ｐｒ ｐａ ａ ｉ ｎ ａ ｐｌ ａ ｉ ｎ ｏ ｅ ｒ ｔｏ ｎｄ Ａｐ ｉ ｔｏ ｆＲ－１ ｃ －Ｐｈｅ ｌｔ ｌａ ｂａ ｏ ｌ ｔ ｄ ｎｙ ｅ ｈｙ ｃ ｒ ｍ ｙ ａ ｅ
１ ２％， ． １ 计算 得键 合量 为 ０５ ｍｏ・ 。 ．６ ｌｍ
将 ５０ ４ ． ６ｇ的 Ｂ— Ｄ Ｃ Ｐ置 于 三 颈 圆底 烧 瓶 ０ Ｃ —Ｓ
参考文献［ Ｂ Ｃ ８ — Ｄ在氢化钠的作用下与 ３ ／ ， 一缩 水 甘 油基 氧丙 基 三 甲氧 基硅 烷 反应 ， 键 合 到硅 胶 再
各 种 类 型 的手 性 固定 相 如 多糖 衍 生 物 型 、蛋 白质
型 、 石酸型、 酒 印迹 聚合 物 、 性 固定 相 等 已被开 发 刷
并 应用 于手性 拆 分『 环糊 精及 其衍 生物 由于具 有 ２ 一。 良好 的手 性识 别 性 能 ， 也被 广 泛地 用 于制 备手 性 固
２
福建分析测试
研究报告
环糊精键合 固定相上的羟基进行部分衍生 ， 制得 了
Ｒ１ 一 一苯 基 乙基 氨 基 甲酸酯 一Ｂ一环 糊 精 手 性 固定 相 ， 浆法 装 柱后 考 察其 对 氢化 安 息香 等 的拆 分 性 匀 能， 并结合 色 谱保 留模 型探讨 了手 性识 别机 理 。
ｅ ａ ｔ ｓ ｐ ｒｔ ｎ ｆ ｙ ｒ ｂ ｎ ｏｎ．ｂ ｎ ｏｎ ａ ｄ － ｈ ｎ ｔ ｙ ｌ ｏ ｏ ｅ ｅ ｅ ａ ｕ ｔｄ ｕ ｄ ｒ ｈ ｅ ｅｓ ｄ ． ｈ ｆ ｃｓ ｏ ｎ ｎ ｉ ｅ ａａ ｉ ｓｏ ｄ ｏ ｅ ｚ ｉ ｏ ｏ ｈ ｅ ｚ ｉ ｎ ｐ ｅ ｅｈ ｌａｃ ｈ ｌ ｒ ｖ ａｅ ｎ ｅ ｅ ｒ ｖ ｒ ｅｍｏ ｅ Ｔ ｅ ｅ ｅ ｔ ｆ ｗ ｌ ｔ ． ａ ｅ ｎ ｔ ｌ ｍｏ ｎ ｄ ｂ ｆ ｒ ｙ ｅ ｏ ｅ ｒｔｎ ｏ ｎ ｎ ｎ ｉｓ ｐ ｒ ｔ ｎ ｗｅｅ ｉ ｖ ｓｉａｅ ． ｄ ｏ ｅ ｏｎ ｏ ｔｉ ｅ ａ ｅｉ ｅ ｃｔ ｉｉ ａ ｕ ｔ ｏ ｒｅ ｎ ａ ｕ ｅ ｐ ｎ ｔ ｅ ｅ ｔ ｎ ａ ｄ ｅ ａ ｔ ｅ ａａ ｉ ｒ ｎ ｅ ｔ ｔｄ Ｈｙ ｒ ｂ ｍ ｉ ｂ ａｎ ｄ ｂ ｓ ｌ ｔ ｈ ｉ ｏ ｏ ｇ ｎ ｓ ｐ ｒｔ ｎ， ｎ ｅｓ ｐ ｒ ｔ ｎ ｆｃｏ ｏ ｌ ｅ ｃ ． １ ． ｅ ｚ ｉ ｂ ａｎ ｄ ｐ ｒｉｌ ｎ ｎ ｉｓ ｐ ａ ｉｎ， ｎ ｔ ｐ ｅ ｅｈ ｌ ｌ ｏ ｏ ｅ ａ ａｉ ｏ ａ ｄ ｔ ｅ ａ ａｉ ｔｒ ｕ ｄ ｒａ ｈ １２ ４ Ｂ ｎ ｏｎ ｏ ｔｉ ｅ ａｔ ａ ｔ ｅ ａ ｔ ｈ ｏ ａ ｃ ａｅ ｏ ｒ ｏ ａ ｄ Ｏ － ｈ ｎ ｔ ｙ ｃ ｈ ｌ ａ
β-环糊精类液相色谱固定相及其手性拆分应用研究进展
环 糊 精 类 色 谱 固定 相 一 般 是 将 卢 Ｃ 或 其 一Ｄ
衍生物键合到硅胶基 质上 ， 硅胶先经过 硅烷化试
剂 预 处 理 ， 用 的硅 烷 化 试 剂有 一 常 氨丙 基 三 乙氧
基 硅烷 （ Ｈ ５ ） 一 水 甘 油 醚 氧 丙 基 三 甲氧 基 Ｋ ５０ 、 缩
硅烷 （ Ｈ５ ０ 和 Ｔ 甲基丙 烯酰 氧 基丙 基 三 甲氧基 Ｋ ６） ．
硅 烷 （ Ｈ ７ ） －Ｄ经 过 修 饰 后 ， 连 有 氨 基 、 Ｋ ５０ 。 Ｃ 常 羟 基 、 基 或 环 氧 基 官 能 团 ， 与 硅 烷 化 硅 胶 键 烯 可
合 ； 有采 用 硅 烷 化 试 剂 将 — Ｄ 衍 生 化 ， 在 无 也 Ｃ 再
硅胶 ， 其余 的羟基分别采用萘基氨基 甲酸酯化、 乙 酰化 、 甲基 化 进 行 全 衍 生 ， 分离 了 １ 手 性 对 映 ２种 体 。邱月 琴等 ¨ 采用异 氰 酸丙基 三 乙氧基 硅 烷做
第２ ４卷第 ８期 ２１ ０ ２年 ８月
化 学 研 究 与 应 用
Ｃｈ ｍｉａ ｓ ａ ｃ ｎ ｐ ｉａ ｉｎ ｅ ｃｌ Ｒｅ ｅ ｒｈ ａ ｄ Ａｐ ｌ ｔ ｃ ｏ
Ｖｏ． ４ ， ． １ ２ Ｎｏ ８ Ａｕｇ ２０１ ．， ２
文章 编 号 ：０４１５ （０２ ０ —１９０ １０ ．６６ ２ １ ）８１６ －７
定相 ， 手性化合物具有 良好 的拆分 能力 。本文介绍 了 环糊精 的结构 和性质 ， 对 综述 了各种衍生 化 的卢 环糊 一
精 液相色谱键合 固定 相及其在手性化合物拆 分 中的应用 。 关 键词 ：一 Ｊ 环糊精 ； Ｂ 高效液相色谱 固定 相 ； 性拆 分 ； 手 衍生化
中 图 分 类 号 ：６ ７ ７ ０ ５ ． 文 献 标 识 码 ： Ａ
手性药物的制备和分离技术
手性药物的制备和分离技术手性药物是指由手性分子构成的药物。
手性分子是指在空间构型上存在镜像对称的分子，即左旋和右旋异构体。
由于手性异构体之间的药物作用差异较大，因此，研究手性药物的制备和分离技术对于药物研发和生产至关重要。
一、手性药物的制备手性药物的制备分为对映选择性合成和手性分离两种方式。
对映选择性合成是指在化学反应过程中，通过调节反应条件，控制反应产物的手性形态，从而选取特定的对映异构体。
手性分离是指将手性混合物中的对映异构体分离出来。
对映选择性合成方法包括：1. 手性诱导剂合成法该方法是利用手性诱导剂将非手性反应物的手性信息“传递”到产物中，控制产物的手性。
目前广泛应用的手性诱导剂有葡萄糖、天然蛋白质等。
2. 催化剂合成法该方法是利用手性催化剂，使催化反应产生手性产物。
手性催化剂包括非对称合成、核磁共振催化等。
手性分离方法包括：1. 液相色谱法液相色谱法是通过改变手性固定相的化学性质或物理性质，控制手性药物在柱子中的分配行为。
常用的手性固定相有环糊精、聚乙烯亚胺等。
2. 粉末衍射分析法粉末衍射分析法是利用衍射图案分辨出手性分子的对映异构体，对于具有晶体结构的手性分子比较有效。
二、手性药物的分离和纯化手性药物的分离和纯化主要涉及手性液体-液体萃取、手性气相色谱和手性无机杂化材料等技术。
这些技术的实现原理基本上是通过利用手性相互作用，将手性分子与其它化合物区分开来。
手性液体-液体萃取法：手性药物在酸性或碱性条件下会形成盐，通过萃取可以实现手性药物的分离。
手性气相色谱法：利用手性固定相的化学性质实现手性药物分离纯化。
手性无机杂化材料：无机杂化材料具有良好的表面静电相互作用，可以用于分离手性药物。
总之，手性药物的制备和分离技术对于药物研发和生产具有重要的意义。
随着手性药物市场前景的不断扩大，手性药物的制备和分离技术也逐渐得到了广泛的应用。
手性药物拆分方法的研究进展综述
四川理工学院文献综述手性药物拆分方法的研究进展综述姓名：学号：专业：班级：指导教师：四川理工学院化学与制药工程学院2012 年11月手性药物拆分方法的研究进展综述摘要:手性药物（chiral drug），是指药物分子结构中引入手性中心后，得到的一对互为实物与镜像的对映异构体。
这些对映异构体的理化性质基本相似，仅仅是旋光性有所差别，分别被命名为R-型（右旋）或S-型（左旋）[1]。
往往两种异构体中仅有一种是有效的，另一种无效甚至有害。
因此，手性拆分已成为药理学研究和制药工业迫切需要解决的问题。
目前利用酶法、超临界流体色谱(SFC)法、化学法、高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、毛细管电泳(capillary electrophoreisis，CE)法和分子烙印法等方法拆分手性药物，已成为新药研究和分析化学领域的重要课题[1]。
本文综述了近年来利用这些方法拆分手性药物的研究进展。
关键词: 旋光性、手性药物、手性拆分、研究进展1.前言手性（Chirality)是自然界的本质属性之一。
作为生命活动重要基础的生物大分子，如蛋白质、多糖、核酸和酶等，几乎全是手性的，这些小分子在体内往往具有重要生理功能。
目前所用的药物多为低于50个原子组成的有机小分子，很大一部分也具有手性，他们的药理作用是通过与体内大分子之间严格手性匹配与分子识别实现的。
含手性因素的的化学药物的对映体在人体内的药理活性、代谢过程及毒性存在显著的差异。
当前手性药物的研究已成为国际新药研究的主要方向之一。
手性药物（chiral drug），是指药物分子结构中引入手性中心后，得到的一对互为实物与镜像的对映异构体。
这些对映异构体的理化性质基本相似，仅仅是旋光性有所差别，分别被命名为R-型（右旋）或S-型（左旋）、外消旋[2]。
绝大多数的药物由手性分子构成，两种手性分子可能具有明显不同的生物活性。
药物分子必须与受体（起反应的物质）分子几何结构匹配，才能起到应有的药效，就如右手只能带右手套一样。
手性拆分剂及其手性药物色谱拆分技术的应用进展_梁娴
手性拆分剂及其手性药物色谱拆分技术的应用进展梁娴，王慧文(安徽省蚌埠市食品药品检验所，安徽蚌埠233000)关键词：手性拆分；手性拆分剂；色谱拆分法近三十年上市的新药中，手性药物占有很大比例，手性药物拆分技术应用广泛，发展也日趋完善。
手性拆分（Chiral Resolution）也称作光学拆分（Optical Resolution），亦或称作外消旋体拆分，为立体化学上，用以分离外消旋化合物成为两个不同的镜像异构物的方法［1］。
例如反应停事件中：药物沙利度胺（反应停）是以对映体的混合物用作缓解妊娠反应药物，造成许多服用过此药的孕妇产下畸婴，经研究发现（R）-沙利度胺具有镇静和缓解妊娠反应作用，而（S）-沙利度胺可酶促水解成邻苯二甲酰谷氨酸并渗透到胎盘，干扰叶酸的合成，产生强致畸作用。
如果能在药物沙利度胺投放市场前就发现R、S构型手性异构体的性质差别并经分离提纯后用药，就可以避免这样的事故。
对手性化合物的识别、拆分或合成。
需要有能够对被研究的手性化合物（客体分子）进行选择性识别或结合的手性化合物（主体分子），这样的主体分子被称为手性选择剂（手性拆分剂），手性拆分剂是具有多重识别位点的手性化合物。
1手性拆分剂（手性选择剂）根据化学结构不同可以分为：天然多糖及其衍生物（包括环糊精、纤维素、淀粉等多糖衍生物制备的手性固定相）、大环抗生素（主要有利福霉素B、利托菌素A、万古霉素及其衍生物和氨基糖苷类等等）、人工合成的手性大环配体（以N、P、S、Se等杂原子作为给电子原子的聚醚类冠状大环化合物、含氮的大环多胺）、配体交换复合物、手性表面活性剂（包括天然的和合成的两类。
天然的包括胆酸盐、毛地黄皂苷、皂角苷等；人工合成的包括十二烷酰氨基酸钠等）、亲和手性选择剂（包括多肽、蛋白质、糖蛋白和相应的生物聚合物）等［2］。
如黄碧云等［3］以羟乙基-β-环糊精为手性选择剂，确立了苯磺酸氨氯地平对映体的手性拆分方法。
马桂娟等［4］以L-异亮氨酸聚合物手性配体交换固定相对DL-氨基酸进行了有效拆分。
手性药物高效液相色谱拆分方法研究进展
摘要】自然界很多药物是手性药物，手性药物的开发已成为制药领域的必然趋势，其分析测定方法也得到快速发展。高效液相色谱法作为经典实用的分析测定方法，得到了广泛的运用。本文综合国内外文献，综述了手性药物高效液相色谱拆分方法研究进展，为手性药物的含量测定和生物分析提供思路。【关键词】手性药物高效液相色谱法拆分手性是自然界的本质属性之一，作为生命活动重要基础的生物大分子和许多作用于受体的活性物质均具有手性特征。对手性药物而言，两个对映体并非具有相同的药效。HPLC分离药物对映体可分为间接法和直接法，前者又称为手性试剂衍生化(CDR)法，后者可分为手性流动相添加剂(CMPA子内，而CMPA法和CSP法则是将不对称中心引入分子间。1 CDR法CDR法是将药物对映体先与高光学纯度衍生化试剂(CDR)反应形成非对映异构体，再进行色谱分离测定，适用于不宜直接拆分的样品。该法的优点是衍生化后可用通用的非手性柱分离，无需使用价格昂贵的手性柱，而且可选择衍生化试剂引入发色团提高检测灵敏度。金银秀等[1]采用手性衍生化试剂GITC对美西律进行柱前手性衍生化，建立了美西律对映体在人血清白蛋白中的测定方法。2 CMPA法CMPA法是将手性选择剂添加到流动相中，利用手性选择剂与药物消旋体中各对映体结合的稳定常数不同，以及药物与结合物在固定相上分配的差异，实现对映体的分离。此法的优点在于：不需对样品进行衍生化，可采用普通的色谱柱，手性添加剂可流出，也可更换，同时添加物的可变范围较宽，使用比较方便。目前常用的手性流动相添加剂有：环糊精(CD)及其衍生物、配位基手性选择剂、手性离子对添加剂、蛋白质、大分子抗生素。2.1配体交换型手性添加剂此类添加剂多为氨基酸及其衍生物与二价金属离子铜、锌、镍等结合，以适当浓度分布于流动相中，然后外消旋体共同形成非对映的配位络合物进行拆分。2.2环糊精添加剂常用的环糊精主要为β-CD，β-CD络合的化学计量关系通常为1：1，但是其它比例也存在，在添加CD的RP色谱中，存在两个平衡流动相中游离溶质和CD络合物在固定相上的吸附平衡，其影响因素包括有机溶剂的用量及酸度等。如杨青等[2]以C18为分析柱，将β-CD、2,6-二甲基β-CD、2,3,6-三甲基β-CD分别作为手性流动相添加剂，系统地研究了酮基布洛芬对映体在HPLC系统中的拆分。2.3手性离子对添加剂此方法为对映体与手性离子对试剂形成非对映离子对，利用其在固定相和流动相之间不同的分配比来分离，手性离子对必须具有3点作用模式。3 CSP法手性固定相(CSP)是由具有光学活性的单体固定在硅胶或其它聚合物上制成的，在拆分中CSP直接与对映体相互作用，而其中一个生成具有不稳定的短暂的对映体复合物，造成在色谱柱内保留时间的不同，从而达到分离的目的。3.1天然高分子手性固定相这种固定相主要有蛋白质类、环糊精类、多糖及其衍生物类、冠醚等。其中，以环糊精类目前应用较多，同时CD分子上的手性中心也能选择性地与对映体作用。目前，以β-CD应用最多。不同的环糊精的空腔大小不同，α-CD适于分离小分子药物对映体，γ-CD适于分离大分子药物，β-CD对形成包合物有最佳大小的空腔，适用于大多数对映体的位阻和电子特征，如酮咯酸氨丁三醇盐对映体，佐匹克隆对映体，萘普生乙酯对映体的分离[3]。冠醚具有亲水性内腔和亲脂性外壳，可键合在硅胶或聚苯乙烯基质上制成手性固定相。根据主－客化学原理，用于含有能够质子化的伯胺功能团的药物对映体的分离，将(+)-18-冠醚-6-2,3,11,12-四羧酸键合至氨基丙基硅胶上作手性固定相，不仅可以分离具有伯氨基的药物对映体，如肌肉松弛药物氟喹酮、抗疟药伯氟喹等。3.1.1合成高分子固定相主要包括聚丙烯酞胺、聚甲基丙烯酸醋等含光学活性中心的高分子物质。运用较多的是交联聚酞胺，其分离机理一般认为是对映体与高分子聚合物本身的手性空间结合，同时还受到聚合物分子量，溶剂pH值等因素的影响。3.1.2氨基酸型手性固定相该固定相是以硅胶为起始原料，硅烷化成梭基型键合物，最后与有光学活性的氨基酸反应制得。其机理是对映体与固定相的氢键形成不同的非对映体络合物而分离。适于分离α-氨基酸衍生物、α-氨基烃基磷酸衍生物、二肽等，缺点是价格较贵。3.2配体交换型固定相该固定相是以某种聚合物，如交联的氯甲基苯乙烯与手性氨基酸结合而成，同时，还需过渡金属离子的参与，如Cu2＋等。被拆分物质通过金属络合物与固定相上的配位基发生配体交换，络合在固定相上。由于这种络合是可逆的，因此这种方法的分离效果较好，一般用来分离各种氨基酸。3.3蛋白质类固定相AGP是一种键合的蛋白类手性柱，特别适用于阳离子型化合物，手性选择性强。蛋白质手性固定相主要靠氢键及范德华力维持其稳定，可以通过调节流动相缓冲液的组成、PH值和温度来改变手性选择性。蛋白质手性柱的最大优点在于，可使对映体在非衍生形式下得到分离，同时由于采用水相流动相，因此水相样品可直接注射，其中α1-AGP柱尤其适合于对映体药物的分离。傅强等[5]研究了在卵类糖蛋白手性柱上影响钙离子拮抗剂尼卡地平对映体拆分的主要因素，建立了尼卡地平对映体的拆分方法。大环抗生素是近年来比较流行的手性选择剂，大环抗生素具多个手性中心，多个官能团及特定的三维空间结构，它的手性识别机理结合了环糊精、蛋白质、多糖的性质，这类手性固定相拥有较大的对映体选择性，优异的拆分效率和较短的分析时间等优点，使之成为继环糊精之后的常规分析级手性固定相。参考文献[1]金银秀,曾苏.柱前衍生化RP-HPLC测定人血清白蛋白中美西律对映体[J].中国药学杂志, 2007, 42(11)：860-862. [2]杨青,唐瑞仁,曾莎莎.高效液相色谱手性流动相法拆分酮基布洛芬对映体[J].分析试验室, 2007, 26(8):84-86. [3]刁全平,侯冬岩,回瑞华,等.高效液相色谱法拆分酮咯酸氨丁三醇盐对映体[J].鞍山师范学院学报, 2005, 7 ( 6) : 58- 60.
HPLCβ—环糊精手性流动相添加剂的研究：Ⅰ.β—环糊精及其甲基衍生物在ODs固定相上的吸附
HPLCβ—环糊精手性流动相添加剂的研究：Ⅰ.β—环糊精及其甲基衍生物在ODs固定相上的吸附
梁宏希 Durt.DG.
【期刊名称】《中国药科大学学报》
【年(卷),期】1997(28)1
【摘要】通过ＨＰＬＣ结合旋光光度定时的方法，探讨了流动相添加剂ｍ１－环糊精及其２，６－二甲基衍生物的吸附性质。
结果表明β－环糊精在ＯＤＳ固定相上不吸附，春２，６－二甲基衍生物则呈典型的单分子层吸附。
【总页数】1页(P35-35)
【关键词】β-环糊精;手性流动相;添加剂;HPLC
【作者】梁宏希 Durt.DG.
【作者单位】分析计算中心
【正文语种】中文
【中图分类】O657.72
【相关文献】
1.以羧甲基-β-环糊精为HPLC手性流动相添加剂法分离两种手性药物对映体 [J], 刘静;董斌;丁红雨
2.HPLC β-环糊精手性流动相添加剂的研究V.甲基β-环糊精动态覆盖手性色谱固定相模型的提出 [J], D.G.Durham
3.HPLC β-环糊精手性流动相添加剂的研究Ⅱ.RP-HPLC系统中β-环糊精与甲基
苯巴比妥的手性选择性包合 [J], 梁宏
4.HPLCβ-环糊精手性流动相添加剂的研究Ⅴ.β-环糊精增溶剂尿素的影响(英文) [J], 梁宏暸;DurhamDG
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