DB—1MS气相色谱柱法测定面包和糕点中的甜蜜素

DB—1MS气相色谱柱法测定面包和糕点中的甜蜜素
摘要：建立一种运用ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱测定面包和糕点中甜蜜素的分析方法。

甜蜜素和ＮａＮＯ２在Ｈ２ＳＯ４酸性条件下生成环己基亚硝酸酯，运用ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱进行测定。

在１．０～５０μｇ／ｍＬ线性范围内，衍生化后标准曲线的重现性较好，相关系数为０．９９９９。

当添加浓度为０．０６ｇ／ｋｇ时，方法回收率为８８．５％～１０８．３％；分流比为５∶１时，方法检出限为１０．８ｍｇ／ｋｇ。

本法灵敏度高，方便快速，具有良好的回收率和方法检出限，适用于面包、糕点中甜蜜素的检测分析。

关键词：ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱；甜蜜素；重现性
甜蜜素（环己基氨基磺酸钠）是一种人工合成的非营养型食品甜味剂，广泛应用于蜜饯、酿造等各种食品。

我国对食品中甜蜜素有严格的限量标准，面包和糕点中的限量均为０．６５ｇ／ｋｇ（以环己基氨基磺酸计）［１］，美国、加拿大、欧盟和日本等国家则禁止使用甜蜜素作为食品添加剂［２］。

ＧＢ／Ｔ５００９．９７－２００３推荐糕点中甜蜜素测定采用薄层层析法进行分析。

事实上，由于薄层色谱法的繁琐、费时以及试剂有毒等因素，正逐渐被气相色谱法所取代。

目前已有不少文献相继报道了对上述国标方法的探讨和改进［３－６］。

除改进前处理方法外，气相色谱条件的优化也是研究热门之一。

在ＧＢ／Ｔ５００９．９７－２００３中，气相色谱法推荐使用的２ｍＵ型不锈钢柱，也正逐渐被高灵敏度和低流失的毛细管色谱柱代替［７，８］。

但是目前较多使用的毛细管色谱柱为弱极性，如ＨＰ－５［８，９］、ＤＢ－１７０１［４］，中等极性，如ＤＢ－３５［１０］和极性ＤＢ－ＦＦＡＰ［１１］等色谱柱，另有报道使用ＤＢ－１色谱柱对葡萄酒中的甜蜜素进行测定［１２］。

本试验采用ＤＢ－１ＭＳ非极性毛细管色谱柱对面包和糕点中甜蜜素的含量进行了分析，以期为准确定量分析甜味剂提供有效的检测方法。

１材料与方法
１．１仪器与试剂
气相色谱仪Ａｇｉｌｅｎｔ７８９０Ａ，ＦＩＤ检测器，离心机。

环己基氨基磺酸钠（甜蜜素）标准品购自美国Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司（纯度为９９．０％）。

分析用试剂为正己烷（Ｔｅｄｉａ，色谱纯）。

硫酸（分析纯），亚硝酸钠（分析纯），氯化钠（优级纯）；去离子水（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）。

１．２方法
２结果与分析
２．１色谱条件的优化
色谱柱柱温、进样口温度、载气流速等参数均可对色谱图产生影响。

本试验针对色谱柱柱温进行了选择，比较了色谱柱恒温５０、６０、７０和８０℃的分离情况。

结果表明，柱温６０℃时得到的环己醇亚硝酸酯峰形较窄，具有较好的对称性，无拖尾现象，和环己醇能够实现有效分离（分离度＞２），该条件下色谱图见图１。

另外，环己醇亚硝酸酯在６０℃柱温条件下比５０℃时出峰时间相对缩短，有效节约了检测时间。

因此，最终选择６０℃为最佳色谱柱温度。

同时，ＤＢ－１ＭＳ的柱效较高，环己醇亚硝酸酯标准品在色谱柱中的理论塔板数可高达１０万以上，可满足检测分析的需要。

由于环己醇和亚硝酸钠生成环己基亚硝酸酯是一个动态反应，高温环境放置太久，会导致环己醇亚硝酸酯峰和环己醇的峰面积均产生一定的变化，因此样品在衍生化反应完全后应及时进行气相色谱分析，以免影响定量结果。

２．２标准曲线的重现性
２．３方法回收率
２．４方法检出限
在分流比为５∶１的条件下，以３倍信噪比计，此３种基质的方法检出限分别为１２．５、１１．５、１０．８ｍｇ／ｋｇ，方法灵敏度较高，即当使用不分流模式时，该方法检出限可低至２ｍｇ／ｋｇ。

２．５检测结果
在分析的１２０份面包和糕点样品中，甜蜜素的检出率为６％，合格率为１００％，均未超出ＧＢ２７６０－２０１１规定的限量标准０．６５ｇ／ｋｇ（以环己基氨基磺酸计）［１］。

３小结
本试验应用ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱对甜蜜素进行检测，具有较高的灵敏度和较低的方法检出限。

同时，该方法的重现性较好，可适用于日常食品检测分析。

需要注意的是，在高温环境中环己醇亚硝酸酯和环己醇的动态反应非常剧烈，衍生化过程必须在冰浴中进行，同时衍生化后样品尽快进行气相色谱的分析，以保证得到准确和客观的试验数据。

参考文献：
［１］ＧＢ２７６０－２０１１．食品添加剂使用标准［Ｓ］．
［２］王宇．食品中甜蜜素检测的研究进展［Ｊ］．职业与健康，２００８，２４（１４）：１４４３－１４４４．
［３］陈祥明，杨方．食品中甜蜜素的快速测定［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００３，１３（６）：７２６－７２７．
［４］李秀勇，刘惠涛，胡之德．气相色谱法测定水果罐头中甜蜜素［Ｊ］．理化检验（化学分册），２００５，４１（９）：６５１－６５３．
［５］余涛，叶坚．气相色谱测定甜蜜素改良方法的研究［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００６，１６（１２）：１４５３－１４５７．
［６］辛若竹，丁梅，郑贤光，等．气相色谱法测定面包、糕点、酱等食品中复合防腐剂及甜蜜素［Ｊ］．卫生研究，２００８，３７（４）：４９８－５０１．
［７］栾燕，赵晶，权伍英，等．顶空毛细管气相色谱法测定食品中的甜蜜素［Ｊ］．中国公共卫生，２００４，２０（４）：４８７－４８８．
［８］郑三燕，林少美，梁晓蓉，等．毛细管柱气相色谱法对测定固体食品中甜蜜素方法的改进［Ｊ］．中国热带医学，２００８，８（１１）：２０３４－２０３５．
［９］蒋永祥，谈金辉，涂红艳．气相色谱法测定果汁中甜蜜素的含量［Ｊ］．分析试验室，２００７（Ｓ１）：２４２－２４４．
［１０］陈玲，雷蓓．毛细管气相色谱法测定糕点中甜蜜素（环已基氨基磺酸钠）［Ｊ］．河北农业科技，２００８（１９）：４７．
［１１］郝文，孙维，唐岩．食品中甜蜜素的毛细管气相色谱测定法［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００５，１５（１１）：１３４１．
［１２］李锋格，窦辉，姚伟琴，等．毛细管气相色谱法测定葡萄酒中甜蜜素［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００５，１５（６）：７０７－７０８．。