HPLC法测定阿日申—18中栀子苷的含量
高效液相法测定蒙药中栀子苷含量
中 国民族 医药杂志
２１ 年９月第９ ００ 期
高 效 液相 法 测 定 蒙 药 中栀 子苷 含 量
韩 峰 周 亚 丽
（． １ 内蒙 古食 品 药品 检 验 所 ， 内蒙 古 呼和 浩 特
ห้องสมุดไป่ตู้
００２ ； ２ 赤 峰 市红 区 中 医 院 ， １００ ． 内蒙 古 赤峰
Ｏ４ ０ ） ２Ｏ ０
中国药品生物制 品检定所 ； 甲醇 、 乙脂为色谱纯 ， 水为高 纯
水 ， 它试剂均为分析纯。 其
２ 方法学考察
２ １ 色 谱 条 件 ． ２１１ 色谱柱 ： 谱柱填 充剂 为十八 烷基硅 烷键合 硅胶 ， ．． 色
本 实 验研 究 采 用 Ａ Ｅ Ｈ Ｘ—Ｃ８ １ 色谱 柱 （５ｍ ２０ ｍ× ．ｍ ５ ｎ 。 ４ ６ ｍ，／ ） ａ
２４ 专属性考察 ： ． 阳性 对 照 试 验 ： 上 述 方 法 制 备 供 试 品 按
溶液和对照品溶液。另取按处方 比例并 以相同工艺制备 的
缺栀子的阴性对照 ， 供试品溶 液制备 法制得 阴性对照溶 按
加入 ０ １ ．％的三 乙胺 ， 以将流 动相定 为 乙脂 一水 一三 乙 所
胺 （ ： ： ．） ８９ ０ １ 。 ２ ２ １３ 检 测 波 长 的选 择 ： 栀 子 苷 对 照 品 溶 液 ， 紫 外 一 ．． 取 于 可 见 分 光 光 度 仪 上 ， ２０ｍ ～７０ｍ 做 光 谱 扫 描 ， 子 苷 自 ０ｎ ０ｎ 栀
２ ３２ 提取效率 的考察 ： ．． 以甲醇作为提取溶剂进行 超声提
取 ， 验 中考 察 了 超 声 １ 、０３ 、０ ５ ｒｎ 不 同提 取 时 间 实 Ｏ２ 、０４ 、０ ｉ等 ａ 对 提 取 效 率 的影 响 ， 量 测 定 结 果 见 表 １ 含 。
HPLC法测定栀子超微速溶饮片中栀子苷的含量
HPLC法测定栀子超微速溶饮片中栀子苷的含量目的建立高效液相色谱法测定栀子超微速溶饮片中栀子苷含量。
方法采用Hypersil ODS2 C18柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流速：1.0 mL/min，流动相：乙腈-水（15︰85）；检测波长：238 nm，柱温30℃。
结果栀子苷进样量在0.2026～2.0260μg（r2=0.9999，n=6）范围内与峰面积呈良好线性关系，平均加样回收率为99.94%（RSD =1.28%，n=6）。
结论该测定方法简便、准确、灵敏度高，可作为质量控制方法。
标签：栀子苷；栀子超微速溶饮片；高效液相色谱法栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实[1]。
栀子的主要有效成分为栀子苷，具有消退黄疸，降低谷丙转氨酶、保护肝功能，降压，防止动脉硬化，保护血管内皮细胞等作用[2]，因此栀子苷含量常作为判断栀子质量的重要指标[3]。
超微粉碎技术是一种新型的生物粉体技术，可以促进粉体中有效成分的释放与吸收[4]。
本实验将栀子药材进行超微分化后，发现栀子苷含量高且稳定[5]，本实验采用HPLC测定栀子苷的含量测定结果与文献[5]相符。
1 仪器与试药岛津LC-20AD高效液相色谱仪（LC-solution工作站，LC-20AD二元泵，SPD-20A紫外检测器），SimplicityTM型超纯水系统（Millipore公司）；Mettller Tkledo AG135双量程电子天平（十万分之一）；栀子苷对照品（批号：110749- 201115，中国药品生物制品检定所）；栀子超微速溶饮片（由江西天齐堂中药饮片有限公司提供，粒度小于50微米，批号：A1201270865、A1202041574、A1202141739），试验用乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件2.8 加样回收率试验2.9 样品含量测定3 讨论本实验采用高效液相色谱法（HPLC）测定栀子超微速溶饮片中栀子苷的含量，方法可靠，操作简便，重现性好，可作为栀子超微速溶饮片质量控制的研究。
高效液相色谱法测定栀子苷含量的不确定度评定
等领域。在测量中，为评估测量方法的可靠性和测 1.3 色谱条件
量结果的可信程度，需要对测量的不确定度进行评
以 十 八 烷 基 硅 烷 键 合 硅 胶 为 果相关联的参数， 水（15:85）为流动相；检测波长为238 nm。理论塔板
表征合理地赋予被测量值的分散性。测量的不确定 数按栀子苷峰计算应不低于1 500。
定度u3=0.010 68 mg。 （4）由于去皮称量，必须计算两次：
1 mL 移 液 枪 校 准 引 入 的 不 确 定 度 u1（V 1）=
0.001 =0.000 6 mL。 姨3
（2）由温度效应引入的不确定度：
法测定栀子苷含量引入的不确定度因素主要有以
合成不确定度ure（l M）= 姨urel（2 1）+urel（2 2）+urel（2 3） 式中 ur（el 1）———对照品溶液浓度引入的不确定度；
ure（l 2）— ——供试品溶液浓度引入的不确定度； ure（l 3）— ——重复性测量制备引入的不确定度。 3.3 分量的计算 3.3.1 对照品溶液浓度引入的不确定度 对照品溶液浓度引入的不确定度因素包括：对 照品纯度、对照品称量、对照品配制过程。
1.1 材料 1.1.1 栀子药材
栀子药材为浙江温州基地直接购买，并经上海
取本品粉末（过四号筛）约0.1 g，精密称定，置 于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定重量， 超声处理20 min，放冷；再称定重量，用甲醇补足减
19
工艺与装备◆Gongyi yu Zhuangbei
失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液10 mL，置于 下几个方面：对照品溶液的浓度、供试品溶液的浓
关键词：高效液相色谱法；不确定度；栀子苷含量；评定
HPLC法测定不同产地栀子中栀子苷含量
ＨＰＬＣ法测定不同产地栀子中栀子苷含量摘要:目的:测定不同产地栀子中栀子苷的含量。
方法:采用外标法,大连依利特ODS(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(15∶85),流速为1.0mL/min,柱温25℃,检测波长为238nm。
结果:测得7产地的10批栀子中栀子苷含量最高为7.06%,最低为2.89%。
结论:不同产地栀子中栀子苷含量由于土壤等各种因素的影响,差异较为明显。
关键词:栀子;栀子苷;高效液相色谱法栀子为茜草科植物栀子(Gardenia jasminoides Ellis)的干燥成熟果实,为临床常用中药,其性寒味苦,无毒,入心、肝、肺、三焦经,具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒之功效。
栀子药理研究表明其具有抗炎、镇静、镇痛、保肝利胆、抗凝血等作用[1],环烯醚萜类化合物和二萜色素类化合物是栀子的主要成分,也是其主要生物活性物质。
栀子苷是栀子的主要活性成分,具有抗炎、解热、利胆等作用;水提取物有利胆、降压、抗菌消炎作用;醇提取物有解热、镇静作用。
本文建立了HPLC测定栀子中栀子苷含量的方法[2],对7产地的10批栀子中栀子苷含量进行了测定,为中药栀子的质量评价提供科学依据。
1 仪器与试药美国Agillent 1100高效液相色谱仪,二级阵列检测器,1100色谱工作站。
栀子苷(Geniposide)对照品(批号110749-200309)购自中国药品生物制品检定所。
乙腈和甲醇均为色谱纯,水为纯化水。
药材及中试饮片样品购自不同产地,其中江西泰和、江西秀谷、浙江淳安各2批,江西永丰、湖南浏阳、浙江苍南、福建贯岭各1批。
经广东食品药品职业学院中药标本馆鉴定为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。
2 方法与结果2.1 色谱条件大连依利特ODS(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱。
流动相:乙腈-水(15∶85),流速为1.0mL/min,柱温25℃,检测波长为238nm,进样量10μL。
栀子苷的含量测定
高效液相色谱法测定栀子药材中栀子苷的含量实验目的和要求1.掌握高效液相色谱法的基本原理及操作步骤；2.熟悉高效液相色谱法在中草药有效成分测定中的应用。
实验原理高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱，在柱内各组分被分离后,依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。
所用的仪器为高效液相色谱仪。
色谱柱的填充剂和流动相的组分应按待测组分的性质而定，常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶，后者以十八烷基键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用。
除另有规定外，柱温为室温，检测器有紫外检测器，二极管阵列检测器，示差折光检测器等。
影响色谱分离效率有两大主要因素，其一为热力学因素, 如不同组分容量因子(K’)，其二是动力学因素, 如色谱峰的展宽。
反映这些物理过程的指标是保留时间和理论塔板数(N)。
其中K’=t R-t o / t o ；n = 5.54(t R / W1/2)2密切注视和努力解决这两个因素引起的矛盾，组分间的分离就成功了，分离的表现指标是分离度“R”。
R = 2 (t2 - t1) / (W b1+W b2)实验条件1.仪器：高效液相色谱仪，超声波清洗器，Zorbax C18柱（4.6×250mm）。
2.试剂：栀子苷对照品，乙睛，甲醇，水。
实验内容1.色谱条件：色谱柱：Zorbax C18柱（4.6×250mm）；流动相：乙睛—水（15:85）；检测波长：238nm，流速：1mL/min。
2.对照品溶液的制备和标准曲线的绘制：精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，摇匀后，分别取该液1，2，3，4，5mL，置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀后，分别进样20μl，按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数。
高效液相色谱法测定栀子中栀子甙的含量
栀子别名黄栀子 、 黄果树 、 山栀子 、 红枝子 、 山栀 、 白蟾 ， 是茜 草 称取 同一批 的栀 子样 品 ６份 ， 按测定方法项下 的方 法制备供试 科植物栀子 的果实 。栀子具有护肝 、 利胆 、 降压 、 镇静 、 止血 、 消肿 等 品溶液 ， 测定含量 ， 并计算样 品的 Ｒ Ｓ Ｄ值 ， 结果 Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ６ ３ ％， 结果 作 用㈣ 。栀子的果实是传统 中药 ， 属 卫生部颁 布的第 ｌ 批药食两用 表 明此方法的重现性 良好 。 资源。 栀子常用于治疗 黄疸 型肝炎 、 扭挫伤 、 高血压 、 糖尿病等症［ ３ － ６ ］ 。 ２ ． ７准确度试验 《 本草通玄》 记载 ： “ 仲景多用枝 子茵陈 ， 取其利小便而蠲湿热也 。古 取对 照品适量 ， 分别 添加供试 品中 ， 含 量分别相 当于标示 量 的 方治心痛 ， 每用枝子 ， 此为火气上逆 ， 不得下降者设也 。 （ 若） 泥丹溪之 １ ２ ０ ％、 １ ５ ０ ％、 １ ８ ０ ％。 取模拟样品照“ 含量测定”项 下方法试验 ，计 说， 不分寒热 ， 通用枝子 ， 属寒者何以堪 之。 ” 栀子含有去羟栀子甙泊 算 回收率为 ９ ９ ． ８ ％，Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ５ ２ ％。 素一 １ 一葡萄糖甙 、 栀子素 、 藏红花素 、 格尼泊素 一 １ 一Ｂ— Ｄ 一龙胆二糖 ２ ． ８ 样 品稳定性试验 甙等。 现代药理研究表 明栀子具有镇静 、 降压 、 凝血 、 抑制 胃酸 、 泻下 取同一批栀子样 品， 按２ ＿ ３ 项下 的供试 品制备方法制备供试 品 ， 等作用。 本实验采用高效液相色谱法对栀子中的栀子甙 的进行 了含 将供试品置室 温下放置 ， 分别 于第 ０ 、 １ 、 ２ 、 ３ 、 ４ 、 ５ 、 ６小 时 ， 精密 吸取 量测定。 供试品溶液 ｌ Ｏ 注入液相色谱仪中 ， 记录色谱图。 测定栀子 中栀子 １仪 器 与 试 药 甙的 Ｒ Ｓ Ｄ ＝ Ｏ ． ６ ３ ％。结果表明供试 品 ６ 小时 内稳定 。 １ ． １ 仪器 ： Ｓ Ｐ Ｅ Ｃ Ｏ Ｒ Ｄ ２ ５ ０ Ｐ Ｌ Ｕ Ｓ紫外可见分光光度计 （ 德 国耶拿 ２ ． ９样 品含量测定 分析仪 器股 份公 司 ） ； Ｆ Ａ１ ０ ０ ４万分之一分析天平 （ 上海书培实验设 依 照上述含量测定方法 ，测定栀子三批样 品中栀 子甙的含量 ， 备有 限公 司 ） ； 赛多 利斯 Ｐ Ｂ 一 １ ０酸度 计（ 北京晨 曦勇创科 技有 限公 结果三批样 品的含量分别为 １ ． ９ ％、 ２ ． Ｏ ％、 １ ． ９ ％。 ３讨 论 司） ； 博翔兴 旺 ８ ０ Ｋ Ｈ Ｚ 高频超声波 清洗机（ 北京博 宇宝威实验设 备 有 限公 司） ； 莱伯泰科 Ｌ Ｃ ６ ０ ０高效液相色谱仪（ 北京莱伯泰科仪器股 ３ ． １流 动 相 的 选 择 份有 限公 司） ； Ｒ 一 ２ １ ０ 瑞士 Ｂ Ｕ Ｃ Ｈ Ｉ 旋转蒸发仪ｆ Ｊ 一 州 尚准仪 器有 限公 分 别考察水 一甲醇 一磷 酸（ ４ ０ ： ６ ０ ： ０ ． ０ １ ） ， 水 一甲醇 一乙腈 一磷 酸（ ５ ０ ： １ ０ ： ４ ０ ： ０ ． ０ １ ） ， ０ ． １ ％醋酸铵溶液 一甲醇 （ ８ ０ ： ２ ０ ） ， 水 一甲醇 一乙 司）； Ｈ Ｑ 一 ５ ０高端试剂级超纯水机 （ 郑 州华新 电气公 司） 。 ５ ０ ： １ ０ ： ４ ０ ） ， 甲醇 一水 一三 乙胺 （ ７ ０： ３ ０ ： ０ ． ２ ） ， 水 一乙腈 （ ８ ５ ： １ ５ ） 不 １ ． ２ 色谱柱 ： 奥泰公司 ｃ 色谱柱 （ ２ ２ ０ ｍ ｍ× ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ Ｘ Ｉ ｍ） 。 腈（ １ ． ３ 对 照品 ： 栀 子 甙 同比例 的流 动相 ， 结果 以水 一乙腈 （ ８ ５ ： １ ５ ） 为流动相为流动 相 ， 供试 １ ． ４试剂 ： 甲醇 （ 金坛市金冠 化工厂 ） 、 乙腈 （ 天津 市顺 呈化 工有 品各峰分离效果最好 ， 故选用水 一乙腈 （ ８ ５ ： １ ５ ） 为流动相为流动相。 限公 司 ） 、 三 乙胺 （ 济南鸿 鑫化工有 限公 司） 、 磷 酸（ 金 坛市金冠化工 ３ ． ２检测波长的选择 厂） 、 醋酸铵 （ 济南润 尔特化工有 限公司 ） 。 制备栀子甙对照 品稀 释液 照紫外 一可见分光光度法 （ 中国药 典 １ ． ５ 试药： 栀子 ２ ０ １ ０ 版 一 部 附 录 Ｖ Ａ） ， 于 １ ９ ０ ～９ ０ ０ ｎ ｍ 波 长 范 围 内进 行 全 波长 光 ２测 定 方 法 确 定 谱扫描 ， 记 录吸收光谱 。在 ２ ３ ８ ｎ ｍ处有最大 吸收峰 ， 故选 用 ２ ３ ８ ｎ ｍ 为检测波长【 １ １ 。 ２ ． １色谱条件 本实验表 明此方法分离效果好 、 方法 简便 、 快捷、 准确， 、 专属性 依据查阅文献及考查 的结果 ， 确定色谱 条件如下 。 流动相 ： 水一 可用 于栀 子 中栀 子 甙 的 含 量 测 定 。 乙腈 （ ８ ５ ： １ ５ ） 为流动相 ， 检测波长 ： ２ ３ ８ ｎ ｍ， 流速 ： １ ． ０ ｍ ｌ ・ ｍｉ ｎ ～ 。柱 温 ： 好， 参 考 文 献 ３ ０ ￣ Ｃ。理论板数按栀子甙峰计算应不得低于 ２ ０ ０ ０ 。 ２ ． ２对 照品溶液 的制备 【 １ 】 李利娟， 李宏 霞， 吴欣桐， 鄢波， 周 东． 栀 子甙对血管性痴呆 大鼠行 为 Ｊ 】 ． 四川大 学学报 （ 医学版） ， ２ ０ ０ ９ （ ４ ） ． 精密称 取栀子甙对照 品适 量 ，置容量 瓶中 ，加流 动相制成每 学和脑组 织病理改 变的影响『 ｌ ｍ Ｌ含 ２ ０ ｇ的溶 液 ， 即得。 【 ２ 】 杨奎， 闵志强， 石娅萍， 向靓 ， 蒙亚江， 邬春 久， 黄薇， 唐 波． 栀予 总环 烯 醚萜苷 对脑 出血 大鼠炎症反应与神 经元凋亡的影响［ Ｊ ］ ． 中药新 药与 ２ ． ３ 供试 品溶液 的制备 取供试 品粉 碎 ， 精 密称取 （ 相当于栀子甙 ２ ０ ０ ｇ ） ， 置具塞锥形 临床 药理。 ２ ０ ０ ９ （ １ ） ． 瓶中， 精密加入 流动相 １ ０ ｍＬ ， 密塞 ， 精密称定重 量 ， 超声处理 ２ ０分 【 ３ ］ 任强， 孙 丽华， 刘新 民， 刘春 雨， 权 丽辉 ， 谢忱 ， 廖永 红． 栀 子的化 学成 Ｊ １ ． 广 东药学院学报， ２ ０ ０ ９ （ ２ ） ． 钟， 放冷， 精密称定 ， 用 流动相补 足重量 ， 摇匀 ， 滤过 。取续滤液 ， 即 分及抗 白血病活性研 究『 得。 『 ４ 】 刘益华， 李 晶， 林 曼婷， 周海虹， 陈少东． 栀 子有效成分栀子苷 的现代 ２ ． ４精 密 度 试 验 研 究进展『 Ｊ １ ． 中国药学杂志， ２ ０ １ ２ （ ６ ） ． 精密称取栀 子甙对照 品适量 ，加流动相使 溶解 ，制成 浓度为 【 ５ 】 丁 嵩涛， 刘洪涛， 李文明， 李秀英， 于超． 栀 子苷对氧化 应激损伤血 管 ２ Ｏ ｇ ・ ｍＬ － 的供试 品溶液 。照上述 色谱条件 ， 精密吸取 １ Ｏ ｌ ， 连续 内皮细胞的保护作 用『 Ｊ ］ ． 中国药理学通报， ２ ０ ０ ９ （ ￣． ６ 】 李宝莉腾 雅 慧， 杨 暄＇ 古 月 锐， 方志远， 袁秉祥 ． 栀子油的提取和 对中枢 进样 ６次 ， 记 录峰面积 。 结果， Ｒ Ｓ Ｄ ＝ ０ ． ５ ５ ％， 表 明本方法精密度 良好。 【 ２ ． ５ 对 照品的线性考察 神 经系统的作用『 Ｊ ］ ． 第四军医大学学报， ２ ０ ０ ８ （ ２ ３ ） ． 精密称取适 量栀 子甙对照 品 ， 加人流动相溶液使溶解分别配制 成每毫升含 ５ 、 １ ０ 、 １ ５ 、 ２ ０ 、 ２ ５ 、 ３ ０ 、 ３ ５ 、 ４ ０ 、 ４ ５ 、 ５ ０微克的溶液 。分别精 密上述溶液吸取 ｌ ０ Ｌ ， 注人液相色谱仪 ， 依照 ２ ． １ 项下 的色谱条件 测定 ， 记录色谱峰 。以峰面积 ） 为纵坐标 ， 对照 品进样量㈤ 为横坐 标， 绘 制标准曲线 ， 计算 回归方程 。结果 表明 ， 栀子 甙在 ５～ ５ ０ ｇ ・ ｍ Ｌ － 范 围内呈 良好的线性关 系。
HPLC法测定栀子提取物中栀子苷的含量
为研 究对 象 ， 建立 了高 效 液 相 测 定 栀 子苷 含 量 的分 析方 法 ， 为 栀 子提 取物 及 舒 肝 宁成 品 的质 量 控 制 提 供 试 验依据 。报告 如下 。
性， 对 于其组 方 中 ４种提 取 物 的质 量控 制尤 为重 要 。 中成 药栀 子 中含 多 种 环烯 醚萜 甙 类 成 分［ ３ ］ ， 栀 子 苷 是其 中重 要 的活性 成 分 ， 有利胆 ， 保肝等功能， 是舒 肝宁 注射 液功 能与 主治 相结合 的利 肝利 胆有 效成 分 之 一 。虽然 药典 已收录栀 子药 材 中栀子 苷含 量测定 的方 法 ， 但 在公 司实 际生 产 中栀 子药 材 为水提 取 、 醇 沉 淀 的提取 方法 与 药典 有 所 不 同 ， 同时 结 合 实 际批 量 生产 中对 中 间体 的快 速 检 验 的 需要 ， 作 者认 为有 必要 结 合药 典现 有分 析方 法对栀 子 提取物 的含 量测 定方 法 特别 是样 品 的前 处 理方法 进行 分析 流程 的优 化 。舒肝 宁 注射 液质 量 标 准 中有栀 子 苷 含 量 测 定 ， 方 中其 它药材 据 资料 报 道 均 不 含栀 子 苷 ， 故 选 择 栀 子苷 为 指标建 立栀 子提 取物 含量 测定 方法 有利 于产
品质 量控 Leabharlann 。本研究 以舒肝 宁注 射液 中栀 子提取 物
制药 有 限 公 司， 批号： Ｔ — Ｚ ０ ３ ０ １ ２ ３ 、 Ｔ — Ｚ ０ ３ ０ ５ ２ ０ 、 Ｔ —
Ｚ０ ３ ０ ８１ ２、 Ｔ— Ｚ０ ３ ０８ １ ９、 Ｔ－ Ｚ０ ３ １ ０ ０８、 Ｔ— Ｚ０ ４０ ３ ０３、 Ｔ—
栀子苷的含量测定
高效液相色谱法测定栀子药材中栀子苷的含量实验目的和要求1.掌握高效液相色谱法的基本原理及操作步骤；2.熟悉高效液相色谱法在中草药有效成分测定中的应用。
实验原理高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相，泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入色谱柱，在柱内各组分被分离后,依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。
所用的仪器为高效液相色谱仪。
色谱柱的填充剂和流动相的组分应按待测组分的性质而定，常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶，后者以十八烷基键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶次之，氰基或氨基键合硅胶也有使用。
除另有规定外，柱温为室温，检测器有紫外检测器，二极管阵列检测器，示差折光检测器等。
影响色谱分离效率有两大主要因素，其一为热力学因素, 如不同组分容量因子(K’)，其二是动力学因素, 如色谱峰的展宽。
反映这些物理过程的指标是保留时间和理论塔板数(N)。
其中K’=t R-t o / t o ；n = 5.54(t R / W1/2)2密切注视和努力解决这两个因素引起的矛盾，组分间的分离就成功了，分离的表现指标是分离度“R”。
R = 2 (t2 - t1) / (W b1+W b2)实验条件1.仪器：高效液相色谱仪，超声波清洗器，Zorbax C18柱（4.6×250mm）。
2.试剂：栀子苷对照品，乙睛，甲醇，水。
实验内容1.色谱条件：色谱柱：Zorbax C18柱（4.6×250mm）；流动相：乙睛—水（15:85）；检测波长：238nm，流速：1mL/min。
2.对照品溶液的制备和标准曲线的绘制：精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，摇匀后，分别取该液1，2，3，4，5mL，置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀后，分别进样20μl，按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数。
HPLC法测定栀黄滴眼液中栀子苷的含量
栀黄滴眼液为天津中医药大学第一附属医院眼科临床有效制剂。
该药是由栀子、大黄等中药组成，具有清热泻火，解毒明目之功效，用于细菌性结膜炎、角膜炎、流行性角膜炎、结膜炎、沙眼、麦粒肿、霰粒肿等病症，多年临床应用，疗效显著。
为有效控制产品质量，笔者采用高效液相色谱（HPLC ）法对不同批号栀黄滴眼液中有效成分栀子苷进行了含量测定，结果方法简单、重现性好，可有效控制产品质量，现报道如下。
1仪器与试药岛津高效液相色谱仪（LC-10AT vp SPD-10A vp N2000数据工作站浙江大学智能信息研究所）；色谱柱：Inertex C18（4．6mm×250mm ，5μm ）；栀子苷对照品（中国药品生物制品检定所批号：110749－200613）；栀黄滴眼液（天津中医药大学第一附属医院制剂室提供批号：071212，080520，0426-258-4）；乙腈、甲醇均为色谱纯；水为双蒸水。
2色谱条件色谱柱:Inertex C 18（4．6mm×250mm ，5μm ）；流动相：乙腈—水（13∶87）；流速：1.0mL/min ；柱温：室温；检测波长：238nm ；理论板数按栀子苷峰计算不低于3000。
3方法学考察3.1检测波长的确定用贝克曼高效液相色谱仪，在190～600nm 进行波长扫描，栀子苷在238nm 处有最大吸收峰，根据《中国药典》2005年版一部栀子项下，确定238nm 为检测波长。
3.2供试品溶液的制备精密量取本品10mL ，置50mL 量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
结果见图1。
3.3阴性样品溶液的制备按处方比例及滴眼液制备工艺制备缺栀子的阴性样品，再按“3.2”供试品溶液的制备方法制成阴性样品溶液。
结果见图1。
3.4对照品溶液的制备精密称取栀子苷对照品适量,用50%甲醇制成每1mL 含35μg 的溶液，作作者单位：300193天津中医药大学第一附属医院作者简介：郭伟（1967-），女，副主任药师，执业药师，主要从事中药质量控制及其标准研究。
HPLC测定栀子炮制品中栀子苷的含量
HPLC测定栀子炮制品中栀子苷的含量摘要:目的建立测定栀子炮制品（炒、焦、炭、姜炙品）中栀子苷含量的方法，考察栀子炮制前、后栀子苷的含量变化。
方法采用HPLC法，Hypeisil BDS C18柱，流动相为乙腈－水（12：88），检测波长236nm。
结果栀子苷在0．075—0．819μg范周内，线性关系良好（r=0．9999），炒栀子（焦、炭、姜炙品）的平均回收率为97．9％（97．6％、99．2％、99．3％），RSD=2．41％（2．35％、1．56％、2．73％）（n=6）。
结论所用方法简便、准确、重复性好，可作为栀子炮制品的质量控制方法；炮制可导致栀子中栀子苷的含量下降.栀子为茜草科植物栀子Gardeniajasminoides E1．1is的成熟干燥果实，具清热利尿、泻火除烦、凉血解毒等功效。
栀子人药饮片有生栀子、炒栀子、焦栀子及栀子炭等多种规格。
炮制的作用在于改变药性，增强疗效，减少不良反应，满足临床上不同病症的用药需要⋯。
文献报道[ J栀子炮制后的各成分含量有所改变，为此，特采用高效液相色谱法，4 J，对不同炮制品中栀子苷的含量进行了测定，考察栀子炮制前后栀子苷的含量变化。
1 实验部分1．1 仪器与试剂P200Ⅱ高压恒流泵(大连依利特)；UV200Ⅱ紫外可变波长检测器(大连依利特)；HW一2000型色谱工作站(上海千谱软件)；UV／VIS Lambdal2型紫外分光光度计(美国Perkin Elmer)。
栀子(市售，经本所朱良辉副研究员鉴定为茜草科植物栀子Garde。
n mminoides Ellis的干燥成熟果实)；栀子苷对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：110749．一200309)；乙腈、甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；其余试剂为分析纯。
1．2 方法与结果1．2．1 样品的炮制生栀子是将经产地加工处理(蒸或煮后再晒干)后，除去果梗、果叶，碾碎后备用的栀子。
取碾碎的生栀子1 kg，置热锅中，炒至表面深黄色时，取出，放冷，即得炒栀子。
HPLC法测定4种不同产地栀子中栀子苷的含量
表 5 稳定性试验
Fig.5 The test of stability
时 间 （h ）
0
2
4
8
12 平均 RSD（％）
栀子苷峰面积 2 901.9 2 878.1 2 914.3 2 904.7 2 897.8 2 899.36 0.46
取 3 批样品，按“2.4”项下的方法制备样品溶液，依法测
40 中国医药导报 CHINA MEDICAL HERALD
2009 年 12 月第 6 卷第 34 期
· 药品鉴定 ·
表 6 回收率试验（n=5）
Tab.6 Results of recovery test (n=5)
称样量 加入量 测得量 回收率
2005:173. [4] 赵健,唐灿.HPLC 法测定江西红栀子中栀子苷含量[J].四川中医,2009,27
(4):52-54. [5] 李 伟 佳,王 强.HPLC 测 定 4 种 中 药 制 剂 中 栀 子 苷 和 黄 芩 苷 的 含 量[J].
中 成 药,2007,29(8):1177-1179. [6] 李健,饶凡,吴逢波,等.HPLC 测定鼻窦炎颗粒中的栀子苷[J].中国药师,
精 密 吸 取 “2.3” 项 下 对 照 品 溶 液 10 μl， 注 入 液 相 色 谱 仪，重复进样 5 次，考查日内精密度，连续 3 d 进样，每天 3 次，考查日间精密度，记录峰面积 ，计 算 RSD，结 果 表 明 本 法 精密度良好。 见表 2、3。
编号 栀子苷峰面积
表 2 日内精密度试验
进样顺序 栀 子 苷 （％）
RP-HPLC法测定药材栀子及其提取物中栀子苷的含量
RP-HPLC法测定药材栀子及其提取物中栀子苷的含量[摘要] 目的：通过柱色谱提取栀子苷有效成分，用高效液相色谱法测定栀子苷的含量。
方法：反相高效液相色谱法。
结果：得到栀子苷有效部位粉末4.44g，粗提物中栀子苷浓度14.76μg/mL，得到有效部位中栀子苷浓度17.57μg/mL,栀子苷得率57.66%。
[关键词] 栀子；栀子苷；反相高效液相色谱法。
栀子始载于《神农本草经》，为茜草科植物栀子Gardenia -jasminoides Ellis的干燥成熟果实，具有泻火除烦，清热利尿，凉血解毒之功效，用于热病心烦，黄疸尿赤，血淋涩痛，血热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡，外治扭挫伤痛[1] 。
栀子的化学成分主要包括环烯醚萜苷类、有机酸类、绿原酸、藏红花素、挥发油等。
《中国药典》2005年版I部[1]对栀子药材中栀子苷的含量进行了测定并规定了限度。
在文献报道中，也多参照药典的方法来测定栀子苷含量[2,3]。
本实验参考药典规定的方法，以栀子苷为对照品测定有效部位中总环烯醚萜苷成分的含量。
一．仪器与材料高效液相色谱仪；电子分析天平。
栀子粗体物溶液和环烯醚萜苷类有效部位固体粉末（约4.44g）；乙腈（色谱纯）；醋酸（分析纯）；去离子水；栀子苷对照品（纯度>98%）。
二．提取及柱色谱分离纯化2.1提取干燥栀子药材100克置于1000mL烧瓶中，加50%乙醇600mL，80℃回流提取2小时，过滤，滤渣再加50%乙醇500mL于80℃回流提取2小时，再过滤，合并滤液，40℃减压旋转蒸发回收溶剂，浓缩至120mL，离心出去沉淀，得到栀子苷环悕醚萜苷的提取液。
2.2 柱色谱分离纯化（1）大孔吸附树脂预处理树脂用95%乙醇浸泡4小时，然后用乙醇淋洗，至流出液在试管中用水稀释不浑浊为止，最后用水反复洗涤至无明显乙醇味后即可使用。
（2）装柱洗涤层析柱，底部塞入玻璃棉少许。
取适量大孔吸附树脂于烧杯中，加水搅动倒入层析柱，控制层析柱出口水流，（水面不能低于树脂，以免产生气泡），树脂约装满柱的2/3，顶端再用少许玻璃棉覆盖，以防止上样和洗脱时树脂被冲起。
HPLC法测定龙胆泻肝片中栀子苷的含量
ＨＰＬＣ法测定龙胆泻肝片中栀子苷的含量目的：建立龙胆泻肝片中栀子苷的含量测定方法。
方法：采用HPLC法测定，Shimpack VP-ODS C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，乙腈-水（13∶87）为流动相，检测波长为238 nm，流速为1.0 ml/min。
结果：栀子苷线性范围0.102 4~0.716 8 μg；平均回收率为99.58%，RSD为1.24%。
结论：HPLC法可以用于龙胆泻肝片中栀子苷的含量测定。
[Abstract] Objective: To establish a method for determining jasminoidin in Longdan Xiegan Tablets. Methods: The column was Shimpack VP-ODS C18(4.6 mm×250 mm, 5 μm). The mobile phase was acetonitrile-water (13∶87). The flow rate was 1.0 ml/min. The detective wavelength was 238 nm. Results: The linear range was 0.102 4~0.716 8 μg. The average recovery was 99.58% with RSD of 1.24%. Conclusion: The method can be used for the content determination of jasminoidin in Longdan Xiegan Tablets.[Key words] Longdan Xiegan Tablets; Jasminoidin; HPLC龙胆泻肝片收载于《部颁标准中成药分册》第12册，由龙胆、栀子、黄芩等10味中药组成，具有清肝胆、利湿热的功效，临床用于肝胆湿热、头晕目赤、耳鸣耳聋等症状的治疗，效果较好。
高效液相色谱法测定失眠颗粒中栀子苷含量
美国 Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ Ｌ Ｃ 一 １ ２ ６ ０型液 相 色 谱 仪 （ 四元 泵 Ｇ１ ３ １ １ Ｂ； 自动 进样器 Ｇ １ ３ ２ ９ Ｂ；柱 温 箱 Ｇ １ ３ １ ６ Ａ；二 极 管 阵 列 检测 器 Ｇ ４ ２ １ ２ Ｂ； Ｌ Ａ Ｂ ｏ ｐ ｅ ｎ色 谱数 据 工作 站 ） 。Ｂ Ｐ ２ １ １ Ｄ型 电子 分 析天 平 （ 德 国 赛 多利 斯 天 平 有 限 公 司 ） 。栀 子苷 对 照 品 （ 供 含 量 测 定用 ， 批 号 为 ７ ４ ９ — ９ ２ ０ ２ ， 中 国药 品生 物 制品 检定 所 ） ； 乙腈 为 色谱 纯 ， 水 为 娃 哈 哈纯 净 水 ， 其他 试 剂均 为 分 析纯 ； 失 眠颗 粒 （ 陕 西省 中医 医 院 ， 批
溶 液在 ２ ４ ｈ内 稳 定 。
加样 回收试 验 ： 取 已知含 量样 品 约 ０ ． ２ ５ ｇ ， 共 ６份 ， 精密称定 ， 分 别加 入 １ ｍ Ｌ栀子 苷对 照 品溶 液 （ 质量 浓度 为 ０ ． ４ ２ ５ ａ ｒ ｇ ／ ｍ Ｅ ） ， 照 供 试 品溶液 制备方 法 ， 依 法测 定含 量 ， 计 算 回收率 。结 果见 表 １ 。
失 眠颗 粒 原 以汤 剂应 用于 临 床 ， 由栀 子 、 丹皮 、 黄芩 、 柴胡、 郁金等 ｌ ７味 中药 提取 精 制 而 成 ， 源 于 临 床经 验 方 ， 具 有疏 肝清 热、 养 血 安 神 的功 效 ， 用 于肝 郁化 热 、 心 神 失养 型失 眠症 。 方 中君 药 为 牡 丹皮 、 栀子 ， 丹 皮 酚在 方 中含 量较 低 ， 易 挥发 ， 不便 用 于 定 量； 栀 子 中主要 含 栀 子苷 ， 具 有抗 炎 利胆 、 抗肿瘤、 降血 糖 等 多种 药 理 作 用【 １ １ ， 且含 量 较 高 ， 因此 选择 栀子 苷 的含 量 作 为考 察指 标 。 为有 效 控制 产 品 质量 ， 保 证 用药 安全 ， 笔 者 建立 了失 眠 颗粒 中栀 子苷 含 量测 定 方 法 ，以期 为 更好 的控 制 失 眠颗 粒 的产 品质 量 提 供 科 学 依据 。
HPLC法测定中药退黄外洗液中栀子苷的含量
HPLC法测定中药退黄外洗液中栀子苷的含量目的:建立测定中药退黄外洗液中的栀子苷含量方法。
方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为岛津Shim-pack C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水(15:85)为流动相,检测波长为238 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃。
结果:栀子苷在0.0312～0.936 μg范围呈良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为99.9%,RSD=2.4%。
结论:该方法简便、专属性好、准确、重现性好,可用于中药退黄外洗液的质量控制。
标签：中药退黄外洗液;栀子苷;HPLC;含量测定中药退黄外洗液由栀子、茵陈、大黄、柴胡、郁金、金钱草、车前子等十六味中药组成。
临床上具有治疗或预防新生儿黄疸的作用[1]。
方中君药栀子为泻火除烦,清热利尿,凉血解毒药[2],调查发现,栀子中含有多种的化学成分,如黄酮、环烯醚萜苷、三萜、有机酸酯,另外还含有D-甘露醇、甾醇、长链烷烃、醇、色素及多糖等[3]。
《中国药典》2005年版一部“栀子”项下收载有栀子苷的含量测定方法[4],为确保中药退黄外洗液的疗效和质量,拟增加其有效成分栀子苷含量测定方法,作为本品的质量控制指标。
1 仪器与试药高效液相色谱仪:Agilent1200,Chemstation工作软件;乙腈为色谱纯试剂,水为重蒸水,其他试剂均为分析纯;栀子苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号110749-200613);中药退黄外洗液(批号:080225,080515,080827)及缺栀子的阴性对照样品(均由南宁市第一人民医院提供)。
2 方法与条件2.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱:Shim-pack C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-水(15:85);流速:1.0 ml/min;检测波长:238 nm;进样量:10 μl,柱温:30℃,分离度:1.5。
HPLC法测定蒙成药克感额日敦片中栀子苷的含量
HPLC法测定蒙成药克感额日敦片中栀子苷的含量
红霞;旭红
【期刊名称】《中国民族医药杂志》
【年(卷),期】2015(021)002
【摘要】目的:建立蒙成药克感额日敦片中栀子苷的含量测定方法.方法:高效液相色谱法,Diamonsil C18柱,流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液(10:90),检测波长
238nm.结果:栀子苷在78.976ng～1184.640ng范围内分别呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率99.59％,RSD0.87％ (n =5).结论:该方法阴性无干扰,专属性好,能够有效的控制克感额日敦片的内在质量.
【总页数】2页(P59-60)
【作者】红霞;旭红
【作者单位】内蒙古食品药品检验所,内蒙古呼和浩特010020;内蒙古食品药品检验所,内蒙古呼和浩特010020
【正文语种】中文
【中图分类】R291.2
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3.HPLC法测定克感额日敦片中苦参碱的含量 [J], 景慧萍;白炜;丁红
4.HPLC法测定蒙成药额日敦——7中栀子甙的含量 [J], 刘玉丽;白炜
5.用HPLC法测定克感额日敦片中苦参碱的含量 [J], 张晓文;温爱平
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HPLC测定解毒退黄合剂中栀子苷的含量
HPLC测定解毒退黄合剂中栀子苷的含量
李润文
【期刊名称】《中国医药导报》
【年(卷),期】2009(6)16
【摘要】目的:建立解毒退黄合剂中栀子苷的含量测定方法.方法:采用HPLC法,色
谱柱为Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(12∶88),流
速为1.0 ml/min,检测波长为238 nm.结果:栀子苷在0.1424～1.4240 μg范围内
线性关系良好(r=-0.9998),平均回收率为100.6%,RSD为0.91%.结论:本方法灵敏、准确、重复性好,为解毒退黄合剂的质量控制提供了依据.
【总页数】2页(P69-70)
【作者】李润文
【作者单位】沈阳市第六人民医院,辽宁沈阳,110006
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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高效液相色谱法测定利胆排导片中栀子苷含量
高效液相色谱法测定利胆排导片中栀子苷含量黄小蕾【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2012(021)009【摘要】目的建立测定利胆排导片中栀子苷含量的高效液相色谱法.方法色谱柱为Phenomenex C18柱(250mid×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(12:88),流速为1.0 mL/min,检测波长为238 nm,柱温为40℃.结果栀子苷质量浓度在15.01～75.02μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9);平均加样回收率为99.30%,RSD=1.85%(n=6).结论该方法简便易行,结果准确可靠,适用于利胆排导片的质量控制.%Objective To set up a method for quality control of Lidanpaidao Tablets. Methods HPLC method was developed to quantitative determination. Phenomenex C18 column (250 mm ×4. 6 mm, 5 μm) was us ed. The mobilic phase was acetonitrile - 0. 05% phosphoric acid solution (12: 88). The column temperature was 40 ℃ ,the wavelength for detection was 238 nm,flow rate was 1. 0 mL/min. Results The good linear relationship was found for geniposide in the concentration range of 15.01-75.02 μg/mL( r =0. 999 9). The geni-poside's average recovery rate was 99. 30% , and RSD was 1. 85% ( n = 6 ). Conclusion The method is simple, accurate and suitable for its assaying.【总页数】2页(P23-24)【作者】黄小蕾【作者单位】漯河医学高等专科学校,河南漯河,462002【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0【相关文献】1.HPLC法测定降脂排毒片中栀子苷的含量 [J], 赵江红;董文玲;刘伏先;赵向东2.高效液相色谱法测定黄连上清片中栀子苷含量 [J], 孟建升;何波;蒋俊春3.高效液相色谱法测定金玉软坚片中栀子苷含量 [J], 王茉;亓展4.反相高效液相色谱法测定柴远解郁片中栀子苷的含量 [J], 赵霞;仲崇琳;杨美林5.高效液相色谱法测定小儿导赤片中栀子苷的含量 [J], 肖培云;杨永寿;刘光明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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HPLC法测定阿日申—18中栀子苷的含量作者：包长龙萨茹拉赵东鲲
来源：《中国民族民间医药·下半月》2015年第03期
[摘要] 目的：测定阿日申-18中栀子苷的含量。
方法：采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈-水（15∶85），检测波长为238nm，流速为1.0ml/min。
结果：栀子苷在0.0650～0.8125μg/ml范围内呈良好的线性关系。
栀子苷平均加样回收率为101.7%，RSD为1.5%（n=9）。
结论：该方法简便、灵敏，可用于制剂的质量控制。
[关键词] 阿日申-18；栀子苷；HPLC
[中图分类号]R284.1 [文献标志码] A [文章编号]1007-8517（2015）06-0013-02
阿日申-18是由枫香脂、冬葵果、决明子、党参、草乌（制）、麻黄、苦参、黄精、栀子、文冠木、木香、五灵脂（制）、石菖蒲、诃子、川楝子、瞿麦、黑云香、人工麝香十八味药组成的水丸，该方具有清热、泻火、凉血的功效[1-2]，可治疗银屑病、皮肤瘙痒、湿疹、疖肿、梅毒等各种皮肤病及风湿病症。
该方主要成分之一栀子对本方临床疗效有重要作用，本文采用高效液相色谱法测定栀子中主要有效成分栀子苷的含量[3]。
实验表明，该方法简单、准确、重现性好，可有效的控制产品的质量，可作为质量控制的方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Alltech高效液相色谱仪Series1500，UV201紫外检测器，自动进样器；TP-300超声仪。
1.2 试药栀子苷对照品（批号：110749-200613，中国药品生物制品检定所提供）；阿日申-18（批号：080705、090616、090617）由内蒙古通辽市蒙医研究所制剂室提供。
2 方法和结果
2.1 色谱条件色谱柱：Phenomenex C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-水（15∶85）；流速：1.0ml/min；进样量：10μl；柱温：30℃；检测波长：238nm。
理论塔板数按栀子苷峰计算应不低于3000。
2.2 对照品溶液的制备称取栀子苷对照品16mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（制成每1ml含栀子苷30μg的溶液）。
2.3 样品溶液的制备取装量差异项下的本品适量，研细，取约1.6g，精密称定，置100ml 碘量瓶中，加入甲醇25.0ml，称定重量，超声处理（功率160W，50kHz）30min，放冷，再称
定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
量取续滤液3.0ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2.4 阴性对照试验按上述方法制备样品溶液和对照品溶液。
另取阴性样品（按处方比例并以相同工艺制备的无栀子的样品），按阿日申-18溶液制备法制得阴性对照溶液。
分别精密吸取阴性溶液、阿日申-18溶液、对照品溶液各10μl，注入Alltech高效液相色谱仪Series1500，在同一色谱条件下进行测定，结果：阴性色谱图中，在与栀子苷对照品及样品阿日申-18色谱图相同保留时间处无色谱峰出现，表明配方中的其他组分对阿日申-18中栀子苷的测定无干扰。
2.5 线性关系考察精密吸取对照品溶液1、2、5、8、10、15、20、25μl分别进样，按上述色谱条件进行测定，以峰面积为纵坐标（Y），以对照品进样量为横坐标（X），绘制标准曲线。
结果栀子苷在0.3762～
3.7620μg/ml范围内线性关系良好，回归方程为：
Y=1.5E+6X+3692.7，r=0.99985。
2.6 精密度试验精密量取栀子苷对照品溶液10μl，在上述色谱条件下连续进样6次，测定栀子苷峰面积，结果栀子苷峰面积的RSD（n=6）为1.2%。
2.7 重复性试验精密称取同一批样品（批号：090616）6份，研细，按上述样品制备方法制备样品溶液，在上述色谱条件下进行分析测定，测得每份样品含量。
结果栀子苷的平均含量（n=6）为2.11mg/g，RSD为0.1%。
见表1。
2.8 稳定性试验取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、10、15、20h取样10μl，按上述色谱条件进样测定。
RSD（n=6）为0.2%，表明供试品溶液20h内稳定。
2.9 加样回收试验取供试品（含量1.864mg/g）9份，各约0.8g，精密称定，分别置9个具塞锥形瓶中，再分别在其中3个具塞锥形瓶中各精密加入浓度为0.1738mg/ml的栀子苷对照品甲醇溶液5ml（约相当于供试品含有量的75%）及甲醇溶液20ml，另3个具塞锥形瓶中各精密加入上述对照品溶液12ml（约相当于供试品含有量的100%）及甲醇溶液13ml，其余3个具塞锥形瓶中各精密加入上述对照品溶液16ml（约相当于供试品含有量的125%）及甲醇溶液9ml，分别称定重量，超声处理30min，取出，再称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。
各取续滤液10μl进样，测定每份含量，计算回收率，栀子苷平均回收率（n=6）为
101.7%。
RSD为1.5%。
结果见表2。
2.10 样品测定按含量项下方法制备样品溶液，在上述色谱条件下进行测定，三批样品的测定结果见表3。
3 讨论
3.1 提取条件的优化根据文献[4-5]，中药栀子的栀子苷含量测定方法中，选用甲醇作为提取溶剂，故本研究也采用甲醇作为提取溶剂。
分别对不同溶剂体积及不同超声时间进行了对比试验，最后得到最优化的提取方法为：溶剂甲醇，加入量25ml，超声处理30min。
3.2 检测方法的优点本文中定量方法准确、灵敏、专属性强，可作为控制阿日申-18制剂质量的检测方法。
参考文献
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