苦参碱的提取与分离

实验二苦参碱与氧化苦参碱的提取与分离

一、简介

中药苦参是豆科植物苦参Sophora flavescens Ait. 的干燥根，味苦，性寒，有清热燥湿，杀虫等作用。苦参中主要含有生物碱、黄酮等化学成分。苦参碱和氧化苦参碱是中药苦参含有的主要生物碱。药理实验和临床用药证明它们具有多种生理活性。临床上主要用于治疗癌症、病毒性肝炎、病毒性心肌炎及某些皮肤疾患。

二、目的

学会用硅胶柱层析方法分离生物碱

三、原理

RSO3-. Na+ + HCl →R-SO3-. H+ + NaCl

RSO3-. H+ + [BH]+. Cl- →RSO3-. [BH]+ + HCl

RSO3-. [BH]+ +NH3·H2O →RSO3-. [NH4]+ + B- + H2O

四、仪器与试剂

1、仪器：层析住、烧杯、锥形瓶、普通漏斗、抽滤瓶、布氏漏斗、玻璃棒

2、试剂：阳离子交换树脂，苦味酸试剂，鞣酸试剂，硅钨酸试剂，碘化铋钾试剂

五、过程

1、合并、过滤提取液

2、沉淀反应

3、湿法装柱

4、加入需过滤提取液

5、流出液的定性检测（15-30min/次），

6、取出树脂并清洗至pH=5~7

7、抽滤干燥

六、讨论

1、装柱时，一定要注意保持树脂的湿润（湿法装柱），否则树脂内存在气泡，不仅影响对生物碱的吸收同时影响流出液的流出速度。离子交换时也同样要保证树脂的上层有一定深度的提取液。

2、流出液的碘化铋钾反应一直显阴性，我们的树脂一直都没有饱和，原因可能是柱中的树脂较多，而提取液中所含生物碱量过少。

3、关于离子交换树脂的一些注意事项：

离子交换树脂在长期使用中易受悬浮物质、胶体物质、有机物、细菌、藻类和铁、锰等的污染，使离子交换能力降低甚至失去。因此，需根据情况对树脂进行不定期的活化处理。活化方法可根据污染情况和条件而定，一般阳树脂在软化中易受Fe3+污染，可用盐酸浸泡后逐步稀释。阴树脂易受有机物污染，可用10%NaCl+2-5%NaOH混合溶液浸泡或淋洗。必要时可用1%双氧水溶液浸泡数分钟，也可采用酸、碱交替处理法，漂白处理法，酒精处理法和各种灭菌法进行处理。