高产辅酶Q10光合细菌的筛选及鉴定-2019年文档资料
产辅酶Q_(10)菌株选育及发酵过程优化研究
产辅酶Q_(10)菌株选育及发酵过程优化研究辅酶Q10(CoQ10)作为细胞有氧呼吸链中的一个重要递氢体,广泛应用于医药和食品行业。
近年来,CoQ1o作为一种辅助药物,在治疗心脏衰竭方面,使用比例逐年增加,因此对CoQ1o的需求也不断增长。
对产CoQ1o微生物的开发利用也愈发重要。
本文以类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)为出发菌,研究了该菌的诱变选育、培养基优化和补料分批发酵工艺。
1.对比皂化法、超声波破碎法、反复冻融法、酸热法和酸热辅助超声法对CoQ1o提取效果的影响,确定了酸热辅助超声破胞方法的可行性。
并通过单因素实验、正交法实验确定其最佳提取工艺条件。
酸热辅助超声法提取类球红细菌中CoQ1o最优的提取条件是加入300μL的盐酸、80 ℃、400w超声处理20min。
此时,CoQ1o得率为3.738mg/g。
2.以自然筛选获得的R.spl-11为出发菌株,经过紫外-LiCl、NTG结合VK3、NaN3和PHB 复合抗性诱变,获得一株遗传性状良好的CoQ1o高产菌株,其产量为71.23mg/L,比出发菌株提高了132.17%。
通过单因素实验对R.sp3-7菌株发酵条件进行优化,得到最优条件为：32℃、初始pH为7.0、接种量8%及装液量为40mL/250mL, CoQ10产量为82.70mg/L。
3.对R.sp3-7生产CoQ1o的发酵培养基进行优化,首先通过单因素筛选确定了培养基最佳碳源、氮源和需添加的金属离子。
通过Plackett-Burman设计对培养基中的9种成分进行筛选,获得影响发酵的3个重要成分：葡萄糖、玉米浆干粉和硫酸镁,再采用Box-Behnken响应面试验对上述三种成分进行优化,获得最佳浓度：葡萄糖36.9g/L、玉米浆干粉5.3g/L、MgSO4 14.4g/L。
优化后CoQ1o产量达到135.20mg/L,比优化前提高了68.62%。
4.在5L发酵罐中考察了pH、溶氧(DO)水平对CoQ1o合成的影响,结果发现CoQ1o合成的最适pH为6.8。
通过耐受前体或结构类似物筛选提高辅酶Q10产量
辅 酶 Ｑ 又 名 泛 醌 、 烯 醌 （ ｏ ｎｙ 。 癸 Ｃ ｅｚｍｅＱ叭 Ｕｂｑ ｉｏ ｅ ０ 简 称 辅 酶 Ｑ ） 是 一 类 脂 溶 性 醌 ｉｕｎ ｎ 一１ ， 。， 类 化合 物 ， 学 名称 ２ ３一二 甲氧 基 一５一甲基 一６ 化 ， 癸异 戊烯 基苯 醌 ， 广泛存 在 于动 物 、 物及 微 生物 植 体内， 是生 物细 胞呼 吸链 中 的重要 递氢 体 ［ ， 是人 １也 ］
ｂ ｃ ｅ ｕａｉｎｍｅ ｈ ｎｓ ｆｒｃ ｅ ｚ ｍｅＱ１ｓ ｎ ｈ ｓｓｐ ｔｗａ ，ａｈｇ ｒｄ ｃｉ ｔ ｏ ｎ ｙ ０ｍｕ ａ ｋ ｒｇ ｌｔ ｃ ａ ｉｍ ｏ ｎ ｙ ０ ｙ ｔ ｅｉ ａｈ ｙ ｉｈ ｐｏ ｕ ｔ ｙｃ ｅ ｚ ｍｅＱｌ ｏ ｏ ｉ ｖ —
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辅酶Q10菌种选育及高通量筛选研究进展
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第３ 期 （ 总第 ２ ４ ７ 期）
２１ ０ ２年 ３月
农 产品加 工 ・ 刊 学
Ａｃ ｄ ｍｉ ｅ ｉｄ ｃ ｌ ｆ Ｆ ｒ Ｐｒ ｄ ｃ ｓ Ｐ ｏ ｅ ｓｎ ａ ｅ ｃ Ｐ ｒｏ ｉ ａ ａ ｍ ｏ ｕ ｔ ｒ ｃ ｓ ｉ ｇ ｏ
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文章 编号 ：１７ — ６ ６ （０ ６ ０
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高产辅酶Q_10_类球红细菌的化学诱变筛选及其发酵培养基优化_扶教龙
(School of Chemical and Biological Engineering, Suzhou University of Science and Technology, Suzhou 215009, China)
中图分类号：TS201.3
文章编号：0254-5071（2016）06-0090-06
doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2016.06.019
Screening of high CoQ10-produc mutagenesis and its fermentation medium optimization
类球红细菌（Rhodobacter sphaeroides）：由浙江大学于 洪巍教授赠送。 1.1.2 培养基
种子培养基：葡萄糖3 g/L，酵母提取物8 g/L，NaCl 2 g/L，KH2PO4 1.3 g/L，MgSO4·7H2O 0.25 g/L，1 mL/L辅液； 用NaOH调pH至7.2。121 ℃灭菌20 min。
2016 Vol.35 No．6
·90· Serial No．292
China Brewing
Research Report
高产辅酶Q10类球红细菌的化学诱变筛选及其发酵培养基优化
扶教龙，钱大伟*，吴晨奇，徐敏强，胡翠英，李良智
（苏州科技大学 化学与生物工程学院，江苏 苏州 215000）
摘 要：利用菌株对（维生素K3+叠氮化钠+对羟基苯甲酸）的复合抗性作为筛选标记，对产辅酶Q10的类球红细菌（Rhodobacter
提高微生物发酵辅酶Q10产量的研究进展[1]
![提高微生物发酵辅酶Q10产量的研究进展[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/c4dac6d7360cba1aa811daab.png)
图 (! 异戊烯基侧链的生物合成路线 :GK. ( N9FAO96 2H ?G2I6DFA3IGI 2H IGC3 EA9G4 2H GI2976@343 K82DB
(L (! 营养缺陷型突变株筛选! 由异戊烯基侧链及芳香环 的生物合成途径路线， 选育营养缺陷型突变株， 有利于提 ［-］ 高所需产物的浓度。 P@I24 和 MDC436 发现类胡萝卜素 与 12+(# 均以聚异戊二烯为前体进行合成代谢， 减少类胡 萝卜素的生成量可能会促进 12+(# 的生物合成。 Q2IAGC9
从表 ( 可以看出， 光合细菌菌体中 12+(# 的含量普遍较
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"##$ % #& % ’# 收稿日期： （ ()*" ） ， 作者简介： 张千 男， 硕士研究生， 主要从事微生物发酵研究。
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辅酶q10生产菌株
辅酶Q10生产菌株1. 简介辅酶Q10，也被称为辅酶Q，是一种存在于细胞膜中的脂溶性物质，具有抗氧化和能量传递的功能。
它在许多生物体中广泛存在，包括人类、动物和微生物。
辅酶Q10对维持细胞健康和机体的正常功能非常重要，因此具有广泛的应用潜力。
辅酶Q10的生产主要依赖于菌株，这些菌株能够通过发酵过程合成辅酶Q10。
本文将详细介绍辅酶Q10生产菌株的选取、发酵过程的优化以及产物提取和纯化的方法。
2. 菌株的选取辅酶Q10生产菌株的选取是生产过程中的关键步骤。
合适的菌株应具有以下特点：•高产量：菌株应具有较高的辅酶Q10产量，以提高生产效率。
•耐受性：菌株应具有较高的耐受性，能够适应较高的辅酶Q10浓度和发酵条件。
•稳定性：菌株应具有较高的遗传稳定性，以确保长期稳定的产量。
常用的辅酶Q10生产菌株包括酵母菌、细菌和真菌等。
其中，酵母菌属于常见的菌株，如Saccharomyces cerevisiae和Candida utilis等，具有较高的辅酶Q10产量和较好的发酵性能。
细菌菌株如Escherichia coli和Agrobacterium tumefaciens等也被广泛应用于辅酶Q10的生产。
在菌株选取过程中，需要进行菌株的筛选和优化，以获得较高产量和稳定性的菌株。
这可以通过菌株的培养和筛选实验来实现。
3. 发酵过程的优化发酵过程是辅酶Q10生产的核心环节。
通过优化发酵条件，可以提高辅酶Q10的产量和纯度。
3.1 培养基的选择培养基的选择对发酵过程至关重要。
合适的培养基应提供菌株所需的营养物质，并具有适当的pH值和温度。
常用的培养基包括复合培养基和简单培养基。
复合培养基包含多种有机和无机物质，能够提供菌株所需的各种营养物质。
简单培养基则只包含少数必需的营养物质，适用于某些菌株的特定需求。
3.2 发酵条件的调控发酵条件的调控对辅酶Q10的产量和质量具有重要影响。
常见的调控参数包括温度、pH值、氧气供应和搅拌速度等。
提高微生物发酵辅酶Q10产量的研究进展
第２ ４卷第 ｌ 期
２０ ０ ７年 ２月
生 物 学 杂 志
Ｊ ＯＵＲＮ Ｉ ＯＧＹ ＡＬ ＯＦ Ｂ ＯＬ
Ｖｏ ． ４ Ｎｏ １２ ．１ Ｆｅ ２ ７ ｂ， ００
提 高微 生物 发 酵 辅 酶 Ｑ０ 量 的研 究进 展 产
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酵产物为 Ｃ Ｑ。 ｏ 多种 同系物 的混 合产 物 ， 造成 Ｃ Ｑ。 ｏ， 提纯 成本较高 ， 凶此 在 Ｃ Ｑ 发 酵生产 中， ｏ 生产 菌 株 的选 择是 首要 的。２ ０世 纪 ７ 、０年 代 ， 们 广 泛 寻 找 Ｃ Ｑ。 生 ０８ 人 ｏ 产
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微生物辅酶Q10高产菌株理性选育
微生物辅酶Q10高产菌株理性选育[摘要]辅酶Q10是一种新型的生化药物,常作为保健品、食品以及化妆品的添加剂,在医药和化妆品领域具有广泛的应用前景。
近年来,Q10的研究与开发越来越受国内外学者的关注。
本文概述了微生物辅酶Q10合成代谢途径、代谢定向育种等方面的研究进展。
[关键词]辅酶Q10微生物理性育种辅酶Q10(CoQ10)又称为泛醌,为2,3-二甲氧基-5-甲基-1,4-二苯醌的侧链带有10个类异戊二烯的衍生物,在真核细胞内与线粒体内膜相结合,在原核细胞内则存在于细胞质膜中,是呼吸链的重要递氢体[1]。
它是细胞自身合成的天然抗氧化剂和细胞代谢的激活剂,具有提高机体免疫力的功能,因而是一种临床价值很高的生化药物。
它可用于治疗心脏病、胃溃疡、病毒性肝炎;还具有抗肿瘤、治疗圆形脱发和肺气肿的功能;对艾滋病和帕金森症有显著的辅助治疗[2]。
在化妆品和保健品市场中,辅酶Q10对延缓衰老和提高机体免疫力有着不可代替的作用[3]。
随着生活水平的提高,近年来人们对它的需求量不断攀升,从而促进了辅酶Q10产品生物加工的发展目前,辅酶Q10的生产主要依赖于微生物发酵法,受限于发酵的效价低,造成生产成本居高不下。
本文主要对目前微生物辅酶Q10的研究现状、高产菌株的选育思路以及发酵工艺控制方面进行概述,为大规模的工业化生产提供一定依据。
1微生物法生产辅酶Q10辅酶Q10的生产方法一般分为直接提取法、化学合成法、微生物发酵法等。
直接提取法受到原材料辅酶Q10含量的限制且受原料及季节等的限制,提取成本高,不适合于现代化工业大生产。
化学合成法制得辅酶Q10为顺反异构体混合物,生物活性低,同时合成过程反应复杂、步骤多、且转化效率低、往往还存在许多副产物,这些因素都严重影响了其产业化的发展[4]。
微生物发酵法是目前生产辅酶Q10的最主要生产方法。
该生产方法由于原料廉价丰富,产物分离过程相对简单,产物为天然品,不存在手性问题,生物活性好,易被人体吸收,且可以通过发酵罐实现规模化工业化生产,因此成为最有发展潜力的辅酶Q10生产方法。
辅酶Q10的高产菌种筛选及发酵工艺优化
展潜 力 的 ＣｏＱ。。生 产 方 法 。 目前 ，日本 在 发 酵 生 产 ＣｏＱ，。研究 中处于领 先 地 位 ，国 内发 酵 高 产 ＣｏＱ。。 的研 究 尚未见 有 报道 。 本 文主 要从 筛选 高产 ＣｏＱ。。 生 产 菌种 出发 ，确定 实验 菌种 ，进 一步对 发酵 工艺 进 行 优化 。
辅 酶 Ｑ。。系醌 类 化 合 物 ，广 泛 存 在 于 动 物 、植 物 、微生 物 等 细 胞 体 内。辅 酶 Ｑ。。在 电 子 传 递 链 中 处 于 重要 地位 ，人体 一旦 缺乏 ，极 易导 致线 粒体 功能 性 障碍 。故 临 床上辅 酶 Ｑ。。被 视 为 细 胞 代谢 及 呼 吸 的激活 剂 ，广 泛 用 于治 疗 心 脑 血 管疾 病 ，具 有 降压 、
过 程相 对简 单 ，不存 在手 性 问题 等 优点 ，成 为最 有发
西安 市皓 天生 物工 程有 限公 司 提供 。
辅酶Q10的生产工艺、
辅酶Q 10的生产工艺、功能研究及应用摘要：辅酶Q 10是一种广泛存在于生物体内的重要生理活性物质，具有提高人体免疫力，增强抗氧化能力，延缓衰老等功能。
本文通过查阅大量文献，将从辅酶Q 10的基本结构介绍、辅酶Q 10的工艺研究进展、辅酶Q 10生产中菌种优化、辅酶Q 10提取、辅酶Q 100的功能性、辅酶Q 10应用及展望等几个方面进行详细综述以最大程度地了解辅酶Q 10在当代科学研究中的重要地位和功能。
关键词：辅酶Q 10辅酶Q 10生物合成辅酶Q 10功能辅酶Q 10应用辅酶Q 10是人类健康不可缺少的重要生理活性物质之一，是人体内唯一的辅酶Q 类物质，又称泛醌，是一种脂溶性醌类化合物，由于在人体器官中的存在及在生理等方面的重要功能，因此又叫维生素Q 或维生素辅酶Q 10。
随着临床医学和流行病学研究的不断深入，辅酶Q 10已被证实具有抗氧化和清除自由基，抗肿瘤和提高人体免疫力，缓解疲劳和提高运动能力，防老抗衰以及保护心血管等多种保健功效。
除了药用外，辅酶Q 10可以作为某些高级化妆品的添加剂及食品中的添加剂等，因此辅酶辅酶Q 10是食品、药品、化妆品等工业的重要原料。
据报道，2005年世界市场对辅酶Q 10原料的年需求量已经达到400t 左右，并且仍以每年10%的速度增长[1]。
日本是最早开发辅酶Q 10的国家，其产量居世界首位。
目前全球大部分的产品来自日本。
1.辅酶Q 10简介辅酶Q 10（coenzymeQ 10）又称泛醌（因广泛存在于生物体x 细胞线粒体呼吸链中的醌类物质而得名），分子式：C 59H 90O 4，分子量：863.36，化学名称：2，3-二甲氧基-5-甲基-6-癸异戊烯基苯醌，其结构式如下[2]：辅酶Q 10为黄色或淡黄色结晶性粉末，无臭无味，易溶于氯仿、苯、四氯化碳，溶于丙酮、石油醚和乙醚；微溶于乙醇，不溶于水和甲醇。
遇光易分解成红色物质，对湿度和温度稳定，熔点为46℃[3]。
高产辅酶Q10类球红细菌的选育及发酵优化
高产辅酶Q10类球红细菌的选育及发酵优化李文鑫;曾伟主;周景文【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2022(48)23【摘要】辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)是一种淡黄色的脂溶性醌类,常见于动植物和微生物的细胞内膜中,是天然的抗氧化剂和细胞代谢激活剂。
该研究以1株具有CoQ10生产能力的类球红细菌(Rhodobacter sphaeroides)为出发菌株,其在摇瓶水平上初始CoQ10产量为136.47 mg/L,通过常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变和多孔板高通量筛选相结合的方法,确定了ARTP诱变处理的时间为120 s,致死率为90%。
在孔板初筛阶段,从5184株菌的突变菌库采用高通量筛选方法获得8株高产菌株,经过复筛得到1株CoQ10的高产突变菌株7p22,其摇瓶水平CoQ10产量达到158.44 mg/L,相比出发菌株提高了16.1%。
验证其遗传稳定性后,进一步优化了碳源、前体物质、金属离子等,提高了辅酶Q10的产量。
最后,在5 L发酵罐上对突变菌株进行培养条件的优化,CoQ10产量提高至1640.6 mg/L。
该研究所使用的结合筛选因子和Craven test检测法的高通量筛选方法可以实现简单、高效地获得高产CoQ10突变菌株。
【总页数】9页(P34-41)【作者】李文鑫;曾伟主;周景文【作者单位】江南大学生物工程学院;粮食发酵工艺与技术国家工程实验室(江南大学);江南大学未来食品科学中心【正文语种】中文【中图分类】TQ9【相关文献】1.类球红细菌产辅酶Q10发酵工艺的优化2.高产辅酶Q10类球红细菌的化学诱变筛选及其发酵培养基优化3.类球红细菌辅酶Q10发酵培养基的优化4.类球红细菌辅酶Q10高产菌株选育及发酵工艺研究5.56Fe17+重离子诱变选育高产辅酶Q10类球红细菌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
等离子体作用结合氧限制模型选育辅酶Q10高产菌株
等离子体作用结合氧限制模型选育辅酶Q10高产菌株本期为您推荐华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心庄英萍教授研究团队发表在《华东理工大学学报（自然科学版）》上的一篇文章：等离子体作用结合氧限制模型选育辅酶Q10高产菌株。
文章摘要内容如下：辅酶Q10（Coenzyme Q10）是一种广泛存在于生物体细胞膜上的脂溶性化合物，具有抗氧化、清除体内自由基以及促进ATP合成等生理功能。
微生物虽然可以产生辅酶Q10，但野生型菌株其辅酶Q10的天然产量都较低，不能满足工业大规模生产降低成本的目标，需要通过选育高产菌株、优化发酵工艺和提高分离纯化效率等手段最大限度地提高辅酶Q10的产量。
类红球细菌（Rhodobacter sphaeroides）是近年来常用的辅酶Q10生产菌株。
本研究将常温常压等离子体（Atmospheric and room temperature plasma，ARTP）诱变和无水亚硫酸钠构建的氧限制筛选模型相结合，通过建立适合辅酶Q10生产菌株的24孔板高通量快速培养技术，选育类球红细菌耐氧限的高性能突变株。
实验结果表明：该菌株诱变筛选最适的ARTP诱变时间为25s，最佳的氧限制平板上无水亚硫酸钠的质量浓度为0.4g/L，24孔板对于该菌的氧传递最优的装液量为2mL和发酵周期为48h，最终选育出了能够在氧限制条件下菌体生长和辅酶Q10合成效率高的突变菌株Rhodobacter. sphaeroides F5D13。
在5L发酵罐成批培养过程中，该高产菌株表现出了较强的氧亲和力，单位菌体的合成效率比出发菌株提升了18%。
ARTP是由工作气体在外加射频电场作用下，产生温度在25-40℃之间的等离子体射流，其中包含了大量的活性粒子（如电子、离子、激发态原子、分子等），可以在常压下处理微生物，使DNA等遗传物质的分子结构发生改变，研究表明ARTP对活细胞DNA的损伤强度远高于其它诱变源，因此ARTP诱变比传统诱变手段更为高效，目前已成功用于100多种微生物的诱变育种。
如何鉴别光合细菌的质量
鉴别光合细菌质量：1、稀释后置阳光底下1-2小时再比色，色深者为佳；2、闻气味：光合细菌OD》8时（国家标准》1.7），有特殊酵香味，而不是恶臭；3、看瓶壁：瓶壁粘附菌膜的，已经大量衰亡；4、看黏度：越浓稠的（小瓶装）极有可能是增稠剂；5、看活力：光合细菌培养出来以后都是9.0左右的pH值，如果是透明瓶子装的，打开盖子，加食醋适量，调pH至7.5-8.0，摇匀放太阳底下，如果4-6小时后pH重新回到8.5以上，说明菌体活力好；6、看包装：几乎所有20Kg或以上的白色塑料桶装的，便宜质劣，5Kg透明瓶的比较合适水产养殖。
随着水产养殖业的不断发展，水域环境加剧恶化，导致水产养殖动物疾病频发。
由于过度使用消毒剂及抗生素等药物，不仅使病原菌耐药性增强，而且干扰了养殖环境中有益菌群的生长、繁殖，引起微生态失调；药物在动物体内残留富集又将对人体构成危害，引发食品安全问题。
为此，绿色环保的微生物制剂不断被开发应用于养殖业，并取得显著效果。
现将近年应用于水产养殖的有益菌类介绍如下。
1光合细菌简称PSB，是国内最早用于水产养殖的细菌制剂。
光合细菌是一些能利用光能进行不产氧的光合作用的细菌，革兰氏阴性，无毒，大多数为厌氧菌，细胞内有细菌叶绿素，可在日光下，在无氧条件下以H2S、硫代硫酸根作供氢体，进行不产氧的光合作用，植物的光合作用则不同，将两种反应过程比较如下：植物：光CO2 + H2O叶绿素(CH2O) + O2细菌：光CO2 + 2H2S细菌叶绿素(CH2O) + H2O + 2S光2CO2 + S2O32- ＋3H2O细菌叶绿素2(CH2O)+SO42- + H2SO4光合细菌通常不能利用大型有机物，它能吸收利用水中残留有机物经异养细菌分解后产生的有机物(低级脂肪酸、氨基酸、糖类)、H2S、NH4+等合成菌体，参与水体净化。
作用原理如下图所示：光合细菌体内富含蛋白质，大量B族维生素、B12、叶酸、生物素等，是鱼虾及饵料生物的优质饵料，添加于饲料中使动物体色鲜艳，提高孵化率及存活率。
高产辅酶Q10光合细菌的分离与鉴定
Ｃ Ｃ ０ ０ ５ ， 脂 １ ５ ， 白胨 ０ ２ ， 母 膏 ０ ａｈ ．０ ％ 琼 ．％ 蛋 ．％ 酵 ．
２ ， 量元素 溶液 ｌ ｍ／ 。 ％ 微 Ｏ ｌＬ
Ｎ ＩＣ 配成 ５ 的溶液 ， ａＩＯ， － ％ 过滤 除菌 后按 ６ 的量 接 ％
入 培养 基 中， 即终溶度达 ０ ３ ，Ｈ 自然 。 ．％ ｐ （） ｃ 微量元 素溶 液配方
利 于生长 的缺氧环境。 我们利用 富集 培养基及平 板倾 注厌 氧培 养法从 赣 江 ， 湖 ， 新 区麻丘 镇 某 池塘 污 泥 中富集 、 离 出 ４ 前 高 分 株光合细菌 ， 同时对这 ４株菌 产生 的辅酶 Ｑ。 行 了定 进
性定量分析 ， 并对其 中辅酶 Ｑ。 量最 高的 １ 菌进 行 。 含 株 了表型特征 、 理生化特性 、 微结 构和 特性及 传代 稳 生 显
产量 为 目的 ， 样 品中分离到一株 高产辅 酶 Ｑ。 从 的光合 细菌 ， 经初 步鉴定 为沼泽 红假 单胞
菌。
关键词 ： 辅酶 Ｑ 。 分离
１ 前 言
鉴定
沼泽红假单 胞菌
Ｏ ０ ％ ， Ｃ ２ ， ＨＣＯ３ ３ ， ＨＰ ． ５ ， ０． ２ Ｎａ １ ０． ％ Ｎａ ０． ％ Ｋ２ Ｏ４ ０ ０ ％
是人 体必需物质 ， 毒副 作用 。近年 来 在医 药 、 品 添加 剂 和保 健 品方 面得 到 了广 泛应 无 食 用 ， 目前 辅酶 Ｑ。 但 。的合成 效率 还不是 很高 ， 且成 本非 常高 ， 因此 ， 这需 要我们 投入 大量 的 研究 工作 ， 以满足市场 上 日益增长 的需求。本课题 以提高光 合细 菌 （ ｓ 菌体辅 酶 Ｑ。 Ｐ Ｂ） ，的
溶 液 １ ｍ／ 。 ０ ｌＬ
辅酶Q10
制剂
（1）辅酶Q10片；（2）辅酶Q10软胶囊；（3）辅酶Q10注射液；（4）辅酶Q10胶囊。
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辅酶Q10
有机物
01 性状03 含量测定 来自5 制剂目录02 鉴别 04 贮藏
辅酶Q10，化学名称为2-[(全-E) 3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-十甲基-2,6,10， 14,18,22,26,30,34,38-四十癸烯基}- 5,6-二甲氧基-3-甲基-p-苯醌，是真核细胞线粒体中电子传递链和有氧 呼吸的参与物质之一，为黄色至橙黄色结晶性粉末，无臭无味，遇光易分解。
含量测定
照高效液相色谱法测定。避光操作。
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-无水乙醇（1 : 1）为流动相；柱 温为35°C;检测波长为275nm。取辅酶Q10对照品和辅酶Q9对照品适量，用无水乙醇溶解并稀释制成每1ml中各约 含0. 2mg的混合溶液，取20μl注入液相色谱仪，辅酶Q9峰与辅酶Q10峰的分离度应大于6.5，理论板数按辅酶 Q10峰计算不低于3000。
性状
为黄色至橙黄色结晶性粉末，无臭无味，遇光易分解。 在三氯甲烷或丙酮中溶解，在乙醇中极微溶解，在水中不溶。 熔点为48〜52°C。
鉴别
(1)取含量测定项下的供试品溶液，加硼氢化钠50mg，摇匀，溶液黄色消失。 (2)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 (3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱一致。
测定法：取本品20mg，精密称定，加无水乙醇约40mL，在50°C水浴中振摇溶解，放冷后，移至100mL量瓶中， 用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取辅酶Q10 对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
辅酶Q10高产菌株的诱变选育
辅酶Q10高产菌株的诱变选育曹燕妮;岳田利;袁亚红;高振鹏【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2012(033)011【摘要】以豌豆根瘤菌（Rhizobium leguminosarum 11723）为出发菌株，利用紫外-LiCl和超声波进行诱变，以期获得高产辅酶Q10菌株。
结果表明：lg／LLiCl诱变能显著提高菌株的正突变率，超声波诱变会引起细胞壁结构与构成发生改变。
通过罗红霉素初筛和摇床复筛，获得辅酶Q10突变株C40-05，胞内辅酶QlO产量为1．198mg／g干菌，比出发菌株（0．389mg／g）提高了208％。
菌株经5次传代培养，胞内辅酶Q10产量下降了2．67％，突变株遗传形状稳定，可作为辅酶Q10生产菌株。
【总页数】5页(P121-125)【作者】曹燕妮;岳田利;袁亚红;高振鹏【作者单位】西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100;西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】TS201.3【相关文献】1.产辅酶Q10根瘤土壤杆菌的紫外诱变选育及其发酵培养基优化 [J], 施磊;扶教龙;吴晨奇;钱大伟;徐敏强;鞠鑫;李良智2.沼泽红假单胞菌高产辅酶Q10菌株的诱变选育研究 [J], 李涵依;李建国;欧小兵;车晨;郝葆青3.微波结合紫外诱变选育辅酶Q10高产菌株 [J], 朱俊丰;朱光宇;刘宏生;郑方亮;艾海新;朱春玉;季士坤;丁国伟;白婷婷;王加友;李雪娇4.紫外诱变结合离子束诱变选育辅酶Q10高产菌株 [J], 焦雪茜; 张梁; 胡柏藩; 胡柏剡; 丁重阳; 石贵阳5.56Fe17+重离子诱变选育高产辅酶Q10类球红细菌 [J], 高维东; 马项英; 弥超; 秦云; 刘恭; 谢小冬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
产氢光合细菌的分离鉴定及高产氢菌株的筛选
1.3.1 生理生化特征鉴定 按照《伯杰细菌鉴定手册》(第 8版)[23]关于光合细菌分类的方法进行菌种生理生化特征鉴 定，主要包括细菌形态、生理特征观察，进行利用底物类 型、氮源类型、硫化物作为电子供体等方面实验. 培养条 件：日光灯为光源，光照度3 000 lx，温度28 ºC. 1.3.2 16S rDNA基因序列分析 16S rDNA PCR扩增引物序 列 为 ： 5'-AGAGTTTGATCCTGGCTC-3'， 5'-GGTTACCTTG TTACGACTT-3'；PCR体系为：10×PCR buffer 2 μL，10 μmol·L-1引物各0.5 μL，10 mol L-1 dNTP 0.5 μL，模板DNA 1 μL，Taq Platinum DNA聚合酶 0.5 μL，补充灭菌超纯水 至25 μL；PCR条件为：95 ºC预变性3 min，95 ºC 0.5 min， 55 ºC 0.5 min，72 ºC 2.5 min，35个循环，72 ºC 10 min；其 扩增片断产物在1%琼脂糖凝胶中，100 V电压下电泳20 min；在凝胶成像系统中观察电泳结果；纯化的PCR扩增 产物由中国科学院上海生物工程研究中心测序，将测序结 果与NCBI (The National Center for Biotechnology Information,
1.006；KH2PO4 0.544；MgSO4·7H2O 0.3；FeSO4·7H2O
0.0018；(NH ) Mo O ·4H O 0.0075；ZnSO ·7H O 0.0024；
46
7 24
2
4
2
NaCl 0.2；CaCl2 0.015；CO(NH2)2 1.5；酵母膏0.4；葡萄糖
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高产辅酶Q10光合细菌的筛选及鉴定
光合细菌（Photosynthetic bacteria，PSB）是一大类能利用光能作为能源进行不放氧光合作用的原核生物的总称，是地球上最早出现的具有原始光能合成体系的原核生物，除蓝细菌外，都能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用有机物作氢供体兼作碳源，进行不放氧的光合作用以合成自身物质[1]。
光合细菌广泛分布在海洋、湖泊、江河、水田和活性污泥等各个角落，能充分利用光能和各种有机物为其营养源进行自身的营养繁殖[2]。
光合细菌营养丰富，细胞干物质中蛋白质含量超过60%，含有多种维生素，尤其是B族维生素含量极为丰富，VB12、叶酸、泛酸、生物素的含量远高于酵母[3]，在人类生活的多方面都具有极其重要的作用。
光合细菌中辅酶Q10（CoQ10）的产量较高，尤其是红螺菌科细菌。
Yoshida等[4]报道了用Rhodobacter sphaeroides KY - 4113生产CoQ10。
目前日本已实现利用光合细菌工业化发酵生产CoQ10，而国内应用光合细菌发酵生产的技术还未成熟，主要还是用来净化水体、作为生物肥料以及动物饲料添加剂[5～7]。
CoQ10又称泛醌，是一种脂溶性醌类化合物，主要存在于动植物和微生物体内，在细胞内与线粒体内膜结合，作为生物体内细胞呼吸链上的电子递氢体和能量代谢的激活剂，是人体重要的生化辅酶之一。
CoQ10在心血管疾病的治疗中起重要作用，并可
提高人体免疫力和治疗人体免疫系统疾病，是一种临床价值很高的生化药物，近年来已广泛应用于各类心脏病、糖尿病、癌症、急慢性肝炎、帕金森症等疾病的治疗[8，9]。
因此，筛选高产CoQ10的光合细菌具有积极的现实意义。
我们利用富集培养基从池塘污泥中富集和分离出5株光合细菌，对这5株光合细菌产生的CoQ10进行了定性定量分析，并对CoQ10产量最高的菌株进行了表型特征、生理生化特性及16S rDNA的系统发育分析，为以后提高CoQ10产量提供菌株材料。
1 材料与方法
1.1 试验材料及仪器。