动物细胞工程

单克隆抗体的应用
与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强， 灵敏度高，优越性十分明显。
应用主要有：
1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿 瘤 资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗 体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、 血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊 断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体 内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的 注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。
传代培养
细胞系 无限传代
思考：
1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基 有何独特之处？ 主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等 2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物 细胞培养材料？ 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强 3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养 4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成 新个体？
用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程
病毒颗粒 细胞核
细胞核
植物、动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理 细胞融合的方法
细胞膜的流动性、细胞膜的流动性 植物细胞全能性
去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 导原生质体融合 导细胞融合 物理、化学方法 物理（离心、 振动、电刺激） （同左）
动物细胞工程
一、动物细胞培养 1、过程：
动物组织细胞间隙中 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 网络起来形成具有一 定弹性和韧性的组织 和器官。
遗传物质 未改变
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官 单个细胞
胰蛋白酶 （分解弹性纤维） 加培养液
细胞悬浮液 原代培养 10代细胞
细胞株
50代细胞
遗传物质 已改变
胚胎移植技术
试管动物（婴儿）培养过程 卵细胞 体外受精 受精卵 精子
胚胎
母体子宫内 孕育、产出
新个体
核移植技术
克隆羊培育过程
黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊乳 腺细胞核
细胞核移植
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎 胚胎移植
另一头绵羊的子宫
妊娠Hale Waihona Puke Baidu出生
克隆羊多利
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤 风杆菌的实验方案 A 制备单克隆抗体 1、该实验方案的目的是__________ 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ B 骨髓瘤细胞
诱导方法
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途 获得杂种植株 主要用于制备 单克隆抗体
读下面一段文字资料，思考以下问题：
长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复 注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体 的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且 抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现， 在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生 多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌 一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量 的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念 用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性 质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。 2、怎样才能获得单克隆抗体？ 提示1：仅用细胞培养技术可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和 肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？
单克隆抗体制备过程
注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞
细胞培养
筛选，继续培养 足够数量的、能产生 特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔
单克隆抗体
思考：
1、本过程利用了哪些原理？
免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理
2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？
这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传 物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有 无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体
不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成 新的动物个体
动物细胞培养技术的应用
1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品 －病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等 2、获得烧伤病人植皮所需的细胞
3、获得细胞用于检测有毒物质
二、动物细胞融合
细胞A
物理法
化学法
细胞B
仙台病毒
灭活的病毒
疱疹病毒 新城鸡瘟病毒
杂种细胞
杂交瘤细胞
C 3、A是从小鼠的脾脏中取得 抗体 _______, B细胞 该细胞能够产生______ 细胞融合过程，常用 足够数量的细胞群 4、图中B为________ 灭活病毒 _________作为诱导剂，该细胞继 双亲细胞 的遗传特性，既能 承___________ 体外培养 注射到 分泌抗体 无限增殖 __________,又能___________。 小鼠腹腔 5、C过程指细胞培养，该过程包括 原代 传代培养两个阶段，其 _____培养和_____ 50 代以内的的细胞属于细胞株。 中_____