酶的制备及活力测定ppt课件(自制) 中图版
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91.要及时把握梦想，因为梦想一死，生命就如一只羽翼受创的小鸟，无法飞翔。――[兰斯顿·休斯] 92.生活的艺术较像角力的艺术，而较不像跳舞的艺术；最重要的是：站稳脚步，为无法预见的攻击做准备。――[玛科斯·奥雷利阿斯] 93.在安详静谧的大自然里，确实还有些使人烦恼.怀疑.感到压迫的事。请你看看蔚蓝的天空和闪烁的星星吧!你的心将会平静下来。[约翰·纳森·爱德瓦兹]
实验原理
辣根过氧化物酶 (horse radish peroxidase，简称 HRP，EC.1.11.1.7)是植物中研究得最深入的一种过 氧化物酶，早在20世纪30年代就有人着手从辣根中分 离此酶，以后又制备出结晶。本实验是以辣根为原料， 经过水的抽提，硫酸铵和丙酮分级分离，再经锌离子 纯化，透析除盐，冰冻干燥，便可得到高纯度的辣根 过氧化物酶。
皮中亦含有丰富的HRP)，用菜刀切成小碎块，在绞 肉机中绞碎1～2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅 拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)源自文库次日用甩干机(或 离心机)甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡 提取1次，合并2次滤液，测得总体积。
实验步骤
2.硫酸铵分级分离：在不断搅拌下，每1 000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵 粉末(相当于0. 40饱和度，0℃)，大约在1～2h内加完，置冷室中放置过夜。 次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面混浊液以3 000r/min离心15min， 弃沉淀，合并上清液。再按每1 000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度) 随加随搅拌，当硫酸铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉 淀部分在冰冻离心机中以13 000r/min离心20min，弃去上清液，收集沉淀。 将沉淀悬浮于100～150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止)，分装 于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1～2天，直到硫酸铵透析完毕为止 (可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析，中间 更换2～3次，用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液 合并，在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去沉淀，量上清液的体
实验原理
辣根过氧化物酶是一种含亚铁血红素的蛋白质 ,Mr在40
000左右，等电点7.2。溶于水，溶解度为5%(W/V)，溶液呈棕
红色，透明。HRP可溶于0.58饱和度以下的硫酸铵溶液，而
0.62饱和度以上则不溶。该酶最适pH7.0(对愈创木酚为氢给体
而言)。在室温下，HRP几周内稳定，加热到63℃，在15min内
97.有三个人是我的朋友爱我的人.恨我的人.以及对我冷漠的人。 爱我的人教我温柔；恨我的人教我谨慎；对我冷漠的人教我自立。――[J·E·丁格] 98.过去的事已经一去不复返。聪明的人是考虑现在和未来，根本无暇去想过去的事。――[英国哲学家培根] 99.真正的发现之旅不只是为了寻找全新的景色，也为了拥有全新的眼光。――[马塞尔·普劳斯特] 100.这个世界总是充满美好的事物，然而能看到这些美好事物的人，事实上是少之又少。――[罗丹] 101.称赞不但对人的感情，而且对人的理智也发生巨大的作用，在这种令人愉快的影响之下，我觉得更加聪明了，各种想法，以异常的速度接连涌入我的脑际。――[托尔斯泰] 102.人生过程的景观一直在变化，向前跨进，就看到与初始不同的景观，再上前去，又是另一番新的气候――。[叔本华] 103.为何我们如此汲汲于名利，如果一个人和他的同伴保持不一样的速度，或许他耳中听到的是不同的旋律，让他随他所听到的旋律走，无论快慢或远近。――[梭罗] 104.我们最容易不吝惜的是时间，而我们应该最担心的也是时间；因为没有时间的话，我们在世界上什么也不能做。――[威廉·彭] 105.人类的悲剧，就是想延长自己的寿命。我们往往只憧憬地平线那端的神奇【违禁词，被屏蔽】，而忘了去欣赏今天窗外正在盛开的玫瑰花。――[戴尔·卡内基] 106.休息并非无所事事，夏日炎炎时躺在树底下的草地，听着潺潺的水声，看着飘过的白云，亦非浪费时间。――[约翰·罗伯克] 107.没有人会只因年龄而衰老，我们是因放弃我们的理想而衰老。年龄会使皮肤老化，而放弃热情却会使灵魂老化。――[撒母耳·厄尔曼] 108.快乐和智能的区别在于：自认最快乐的人实际上就是最快乐的，但自认为最明智的人一般而言却是最愚蠢的。――[卡雷贝·C·科尔顿] 109.每个人皆有连自己都不清楚的潜在能力。无论是谁，在千钧一发之际，往往能轻易解决从前认为极不可能解决的事。――[戴尔·卡内基] 110.每天安静地坐十五分钟·倾听你的气息，感觉它，感觉你自己，并且试着什么都不想。――[艾瑞克·佛洛姆] 111.你知道何谓沮丧---就是你用一辈子工夫，在公司或任何领域里往上攀爬，却在抵达最高处的同时，发现自己爬错了墙头。－－[坎伯] 112.「伟大」这个名词未必非出现在规模很大的事情不可；生活中微小之处，照样可以伟大。――[布鲁克斯] 113.人生的目的有二：先是获得你想要的；然后是享受你所获得的。只有最明智的人类做到第二点。――[罗根·皮沙尔·史密斯] 114.要经常听.时常想.时时学习，才是真正的生活方式。对任何事既不抱希望，也不肯学习的人，没有生存的资格。
87.当一切毫无希望时，我看着切石工人在他的石头上，敲击了上百次，而不见任何裂痕出现。但在第一百零一次时，石头被劈成两半。我体会到，并非那一击，而是前面的敲打使它裂开。――[贾柯·瑞斯] 88.每个意念都是一场祈祷。――[詹姆士·雷德非]
89.虚荣心很难说是一种恶行，然而一切恶行都围绕虚荣心而生，都不过是满足虚荣心的手段。――[柏格森] 90.习惯正一天天地把我们的生命变成某种定型的化石，我们的心灵正在失去自由，成为平静而没有激情的时间之流的奴隶。――[托尔斯泰]
85.每一年，我都更加相信生命的浪费是在于：我们没有献出爱，我们没有使用力量，我们表现出自私的谨慎，不去冒险，避开痛苦，也失去了快乐。――[约翰·B·塔布] 86.微笑，昂首阔步，作深呼吸，嘴里哼着歌儿。倘使你不会唱歌，吹吹口哨或用鼻子哼一哼也可。如此一来，你想让自己烦恼都不可能。――[戴尔·卡内基]
2.愈创木酚法：测k4。以愈创木酚(邻甲氧基酚，guaiacol) 为氢给体，其反应产物四邻甲氧基连酚.有色产物四邻甲氧基连 酚生成的速度(dx/dt)与底物过氧化氢及氢给体愈创木酚的浓度 有关。
本实验是采用测定 k4的方法来判断酶的纯度。
实验步骤
一、 HRP 1.水提取：称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根
实验步骤
3.丙酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐
浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1 倍体积预冷至－15℃的丙酮，放置片刻，在 冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去 沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积) －15℃丙酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离 心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏
94.对一个适度工作的人而言，快乐来自于工作，有如花朵结果前拥有彩色的花瓣。――[约翰·拉斯金] 95.没有比时间更容易浪费的,同时没有比时间更珍贵的了，因为没有时间我们几乎无法做任何事。――[威廉·班] 96.人生真正的欢欣，就是在于你自认正在为一个伟大目标运用自己；而不是源于独自发光.自私渺小的忧烦躯壳，只知抱怨世界无法带给你快乐。――[萧伯纳]
2.蛋白质含量的测定：将酶液适当稀释后，用Bradford法比色测定蛋白质 含量，
实验结果
1.计算产品的RZ值及k4 2.计算产品的比活力。
思考题
1.盐析法制备辣根过氧化物酶的原理是什么? 2.愈创木酚法测定辣根过氧化物酶的原理是什么? 3.测定辣根过氧化物酶的活力时，要求什么样的pH和
温度?是否需要先测定酶液的蛋白质含量?
126.在寒冷中颤抖过的人倍觉太阳的温暖，经历过各种人生烦恼的人，才懂得生命的珍贵。――[怀特曼] 127.一般的伟人总是让身边的人感到渺小；但真正的伟人却能让身边的人认为自己很伟大。――[G.K.Chesteron]
实验步骤
加好反应物，摇匀，在 470nm读出A470nm值，为t=0时的读数。立即 加0.01mL40mmol/L过氧化氢溶液于2个比色池中，即刻摇匀并记时，每隔 30s读数1次，约5min
将所测样品的 A470nm值减去相应时间对照的A470nm值，然后以 A470nm值为纵坐标，时间为横坐标作图，得一直线，计算出平均每分钟 光吸收的增加，即求出△x/△t ，按公式(8)求出k4值。或不求k4值，而把 在上述条件下，每分钟A470nm增加0.001所需酶量定为1个HRP活力单位。
3.1酶的制备及活力测定
辣根过氧化物酶的制备及活力测定
实验目的和要求
1.掌握盐析法制备活性蛋白质的原理及方法。 2.掌握过氧化物酶的活力测定方法。
实验原理
2H 2 O 2 →O 2 +2H 2 O 这一类酶以铁卟啉为辅基，所以属血红素蛋白质 类 (hemeproteins)。过氧化物酶在生物界分布极广， 在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。
酶溶液。
RZ 值近于1的
实验步骤
4.精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L
硫酸锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10
-3 mol/L，5 000r/min离心10min，得上
清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离
心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，
用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行
真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米黄
稳定。氧化还原电势很低，pH6.08时，E ' 0 =-0.2070V，pH为
7.71
E ′ 0 =-0.2787V。
辣根过氧化物酶的活力测定方法
1.RZ值：提纯工作的后几步，以及纯酶溶液可用RZ值表 明酶的纯度。RZ= A403nm/A275nm ，403nm处的吸收代表 血红素辅基的吸收，275nm的吸收是蛋白质的吸收，结晶的 HRP的RZ值为3.04。测定时的酶浓度为1mg蛋白/mL
――[阿萨·赫尔帕斯爵士] 115.旅行的精神在于其自由，完全能够随心所欲地去思考.去感觉.去行动的自由。――[威廉·海兹利特]
116.昨天是张退票的支票，明天是张信用卡，只有今天才是现金；要善加利用。――[凯·里昂] 117.所有的财富都是建立在健康之上。浪费金钱是愚蠢的事，浪费健康则是二级的谋杀罪。――[B·C·福比斯] 118.明知不可而为之的干劲可能会加速走向油尽灯枯的境地，努力挑战自己的极限固然是令人激奋的经验，但适度的休息绝不可少，否则迟早会崩溃。――[迈可·汉默] 119.进步不是一条笔直的过程，而是螺旋形的路径，时而前进，时而折回，停滞后又前进，有失有得，有付出也有收获。――[奥古斯汀] 120.无论那个时代，能量之所以能够带来奇迹，主要源于一股活力，而活力的核心元素乃是意志。无论何处，活力皆是所谓“人格力量”的原动力，也是让一切伟大行动得以持续的力量。――[史迈尔斯] 121.有两种人是没有什么价值可言的：一种人无法做被吩咐去做的事，另一种人只能做被吩咐去做的事。――[C·H·K·寇蒂斯] 122.对于不会利用机会的人而言，机会就像波浪般奔向茫茫的大海，或是成为不会孵化的蛋。――[乔治桑] 123.未来不是固定在那里等你趋近的，而是要靠你创造。未来的路不会静待被发现，而是需要开拓，开路的过程，便同时改变了你和未来。――[约翰·夏尔] 124.一个人的年纪就像他的鞋子的大小那样不重要。如果他对生活的兴趣不受到伤害，如果他很慈悲，如果时间使他成熟而没有了偏见。――[道格拉斯·米尔多] 125.大凡宇宙万物，都存在着正、反两面，所以要养成由后面.里面，甚至是由相反的一面，来观看事物的态度――。[老子]
色纤维状松软物，HRP
RZ 值
可达3.0左右，置真空干燥器中低温保存。
实验步骤
二、 HRP
1.活力测定：测定k4值的方法操作如下：取2个比色池(带盖，
光程1cm)，按表加入反应物。
对照样品
反应物
磷酸盐缓冲液 2.91mL
2.90mL
愈创木酚溶液 0.05mL
0.05mL
酶液
0.0mL
0.01mL
酶液：将1mg蛋白/mL的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后使用。
实验原理
辣根过氧化物酶 (horse radish peroxidase，简称 HRP，EC.1.11.1.7)是植物中研究得最深入的一种过 氧化物酶，早在20世纪30年代就有人着手从辣根中分 离此酶，以后又制备出结晶。本实验是以辣根为原料， 经过水的抽提，硫酸铵和丙酮分级分离，再经锌离子 纯化，透析除盐，冰冻干燥，便可得到高纯度的辣根 过氧化物酶。
皮中亦含有丰富的HRP)，用菜刀切成小碎块，在绞 肉机中绞碎1～2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅 拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)源自文库次日用甩干机(或 离心机)甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡 提取1次，合并2次滤液，测得总体积。
实验步骤
2.硫酸铵分级分离：在不断搅拌下，每1 000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵 粉末(相当于0. 40饱和度，0℃)，大约在1～2h内加完，置冷室中放置过夜。 次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面混浊液以3 000r/min离心15min， 弃沉淀，合并上清液。再按每1 000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度) 随加随搅拌，当硫酸铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉 淀部分在冰冻离心机中以13 000r/min离心20min，弃去上清液，收集沉淀。 将沉淀悬浮于100～150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止)，分装 于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1～2天，直到硫酸铵透析完毕为止 (可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析，中间 更换2～3次，用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液 合并，在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去沉淀，量上清液的体
实验原理
辣根过氧化物酶是一种含亚铁血红素的蛋白质 ,Mr在40
000左右，等电点7.2。溶于水，溶解度为5%(W/V)，溶液呈棕
红色，透明。HRP可溶于0.58饱和度以下的硫酸铵溶液，而
0.62饱和度以上则不溶。该酶最适pH7.0(对愈创木酚为氢给体
而言)。在室温下，HRP几周内稳定，加热到63℃，在15min内
97.有三个人是我的朋友爱我的人.恨我的人.以及对我冷漠的人。 爱我的人教我温柔；恨我的人教我谨慎；对我冷漠的人教我自立。――[J·E·丁格] 98.过去的事已经一去不复返。聪明的人是考虑现在和未来，根本无暇去想过去的事。――[英国哲学家培根] 99.真正的发现之旅不只是为了寻找全新的景色，也为了拥有全新的眼光。――[马塞尔·普劳斯特] 100.这个世界总是充满美好的事物，然而能看到这些美好事物的人，事实上是少之又少。――[罗丹] 101.称赞不但对人的感情，而且对人的理智也发生巨大的作用，在这种令人愉快的影响之下，我觉得更加聪明了，各种想法，以异常的速度接连涌入我的脑际。――[托尔斯泰] 102.人生过程的景观一直在变化，向前跨进，就看到与初始不同的景观，再上前去，又是另一番新的气候――。[叔本华] 103.为何我们如此汲汲于名利，如果一个人和他的同伴保持不一样的速度，或许他耳中听到的是不同的旋律，让他随他所听到的旋律走，无论快慢或远近。――[梭罗] 104.我们最容易不吝惜的是时间，而我们应该最担心的也是时间；因为没有时间的话，我们在世界上什么也不能做。――[威廉·彭] 105.人类的悲剧，就是想延长自己的寿命。我们往往只憧憬地平线那端的神奇【违禁词，被屏蔽】，而忘了去欣赏今天窗外正在盛开的玫瑰花。――[戴尔·卡内基] 106.休息并非无所事事，夏日炎炎时躺在树底下的草地，听着潺潺的水声，看着飘过的白云，亦非浪费时间。――[约翰·罗伯克] 107.没有人会只因年龄而衰老，我们是因放弃我们的理想而衰老。年龄会使皮肤老化，而放弃热情却会使灵魂老化。――[撒母耳·厄尔曼] 108.快乐和智能的区别在于：自认最快乐的人实际上就是最快乐的，但自认为最明智的人一般而言却是最愚蠢的。――[卡雷贝·C·科尔顿] 109.每个人皆有连自己都不清楚的潜在能力。无论是谁，在千钧一发之际，往往能轻易解决从前认为极不可能解决的事。――[戴尔·卡内基] 110.每天安静地坐十五分钟·倾听你的气息，感觉它，感觉你自己，并且试着什么都不想。――[艾瑞克·佛洛姆] 111.你知道何谓沮丧---就是你用一辈子工夫，在公司或任何领域里往上攀爬，却在抵达最高处的同时，发现自己爬错了墙头。－－[坎伯] 112.「伟大」这个名词未必非出现在规模很大的事情不可；生活中微小之处，照样可以伟大。――[布鲁克斯] 113.人生的目的有二：先是获得你想要的；然后是享受你所获得的。只有最明智的人类做到第二点。――[罗根·皮沙尔·史密斯] 114.要经常听.时常想.时时学习，才是真正的生活方式。对任何事既不抱希望，也不肯学习的人，没有生存的资格。
87.当一切毫无希望时，我看着切石工人在他的石头上，敲击了上百次，而不见任何裂痕出现。但在第一百零一次时，石头被劈成两半。我体会到，并非那一击，而是前面的敲打使它裂开。――[贾柯·瑞斯] 88.每个意念都是一场祈祷。――[詹姆士·雷德非]
89.虚荣心很难说是一种恶行，然而一切恶行都围绕虚荣心而生，都不过是满足虚荣心的手段。――[柏格森] 90.习惯正一天天地把我们的生命变成某种定型的化石，我们的心灵正在失去自由，成为平静而没有激情的时间之流的奴隶。――[托尔斯泰]
85.每一年，我都更加相信生命的浪费是在于：我们没有献出爱，我们没有使用力量，我们表现出自私的谨慎，不去冒险，避开痛苦，也失去了快乐。――[约翰·B·塔布] 86.微笑，昂首阔步，作深呼吸，嘴里哼着歌儿。倘使你不会唱歌，吹吹口哨或用鼻子哼一哼也可。如此一来，你想让自己烦恼都不可能。――[戴尔·卡内基]
2.愈创木酚法：测k4。以愈创木酚(邻甲氧基酚，guaiacol) 为氢给体，其反应产物四邻甲氧基连酚.有色产物四邻甲氧基连 酚生成的速度(dx/dt)与底物过氧化氢及氢给体愈创木酚的浓度 有关。
本实验是采用测定 k4的方法来判断酶的纯度。
实验步骤
一、 HRP 1.水提取：称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根
实验步骤
3.丙酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐
浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1 倍体积预冷至－15℃的丙酮，放置片刻，在 冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去 沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积) －15℃丙酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离 心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏
94.对一个适度工作的人而言，快乐来自于工作，有如花朵结果前拥有彩色的花瓣。――[约翰·拉斯金] 95.没有比时间更容易浪费的,同时没有比时间更珍贵的了，因为没有时间我们几乎无法做任何事。――[威廉·班] 96.人生真正的欢欣，就是在于你自认正在为一个伟大目标运用自己；而不是源于独自发光.自私渺小的忧烦躯壳，只知抱怨世界无法带给你快乐。――[萧伯纳]
2.蛋白质含量的测定：将酶液适当稀释后，用Bradford法比色测定蛋白质 含量，
实验结果
1.计算产品的RZ值及k4 2.计算产品的比活力。
思考题
1.盐析法制备辣根过氧化物酶的原理是什么? 2.愈创木酚法测定辣根过氧化物酶的原理是什么? 3.测定辣根过氧化物酶的活力时，要求什么样的pH和
温度?是否需要先测定酶液的蛋白质含量?
126.在寒冷中颤抖过的人倍觉太阳的温暖，经历过各种人生烦恼的人，才懂得生命的珍贵。――[怀特曼] 127.一般的伟人总是让身边的人感到渺小；但真正的伟人却能让身边的人认为自己很伟大。――[G.K.Chesteron]
实验步骤
加好反应物，摇匀，在 470nm读出A470nm值，为t=0时的读数。立即 加0.01mL40mmol/L过氧化氢溶液于2个比色池中，即刻摇匀并记时，每隔 30s读数1次，约5min
将所测样品的 A470nm值减去相应时间对照的A470nm值，然后以 A470nm值为纵坐标，时间为横坐标作图，得一直线，计算出平均每分钟 光吸收的增加，即求出△x/△t ，按公式(8)求出k4值。或不求k4值，而把 在上述条件下，每分钟A470nm增加0.001所需酶量定为1个HRP活力单位。
3.1酶的制备及活力测定
辣根过氧化物酶的制备及活力测定
实验目的和要求
1.掌握盐析法制备活性蛋白质的原理及方法。 2.掌握过氧化物酶的活力测定方法。
实验原理
2H 2 O 2 →O 2 +2H 2 O 这一类酶以铁卟啉为辅基，所以属血红素蛋白质 类 (hemeproteins)。过氧化物酶在生物界分布极广， 在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。
酶溶液。
RZ 值近于1的
实验步骤
4.精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L
硫酸锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10
-3 mol/L，5 000r/min离心10min，得上
清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离
心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，
用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行
真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米黄
稳定。氧化还原电势很低，pH6.08时，E ' 0 =-0.2070V，pH为
7.71
E ′ 0 =-0.2787V。
辣根过氧化物酶的活力测定方法
1.RZ值：提纯工作的后几步，以及纯酶溶液可用RZ值表 明酶的纯度。RZ= A403nm/A275nm ，403nm处的吸收代表 血红素辅基的吸收，275nm的吸收是蛋白质的吸收，结晶的 HRP的RZ值为3.04。测定时的酶浓度为1mg蛋白/mL
――[阿萨·赫尔帕斯爵士] 115.旅行的精神在于其自由，完全能够随心所欲地去思考.去感觉.去行动的自由。――[威廉·海兹利特]
116.昨天是张退票的支票，明天是张信用卡，只有今天才是现金；要善加利用。――[凯·里昂] 117.所有的财富都是建立在健康之上。浪费金钱是愚蠢的事，浪费健康则是二级的谋杀罪。――[B·C·福比斯] 118.明知不可而为之的干劲可能会加速走向油尽灯枯的境地，努力挑战自己的极限固然是令人激奋的经验，但适度的休息绝不可少，否则迟早会崩溃。――[迈可·汉默] 119.进步不是一条笔直的过程，而是螺旋形的路径，时而前进，时而折回，停滞后又前进，有失有得，有付出也有收获。――[奥古斯汀] 120.无论那个时代，能量之所以能够带来奇迹，主要源于一股活力，而活力的核心元素乃是意志。无论何处，活力皆是所谓“人格力量”的原动力，也是让一切伟大行动得以持续的力量。――[史迈尔斯] 121.有两种人是没有什么价值可言的：一种人无法做被吩咐去做的事，另一种人只能做被吩咐去做的事。――[C·H·K·寇蒂斯] 122.对于不会利用机会的人而言，机会就像波浪般奔向茫茫的大海，或是成为不会孵化的蛋。――[乔治桑] 123.未来不是固定在那里等你趋近的，而是要靠你创造。未来的路不会静待被发现，而是需要开拓，开路的过程，便同时改变了你和未来。――[约翰·夏尔] 124.一个人的年纪就像他的鞋子的大小那样不重要。如果他对生活的兴趣不受到伤害，如果他很慈悲，如果时间使他成熟而没有了偏见。――[道格拉斯·米尔多] 125.大凡宇宙万物，都存在着正、反两面，所以要养成由后面.里面，甚至是由相反的一面，来观看事物的态度――。[老子]
色纤维状松软物，HRP
RZ 值
可达3.0左右，置真空干燥器中低温保存。
实验步骤
二、 HRP
1.活力测定：测定k4值的方法操作如下：取2个比色池(带盖，
光程1cm)，按表加入反应物。
对照样品
反应物
磷酸盐缓冲液 2.91mL
2.90mL
愈创木酚溶液 0.05mL
0.05mL
酶液
0.0mL
0.01mL
酶液：将1mg蛋白/mL的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后使用。