利用Y-STR技术分离混合DNA分型破获系列盗窃案
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利用Y-STR技术分离混合DNA分型破获
系列盗窃案
2.内蒙古乌兰察布市公安局内蒙古乌兰察布 012000
摘要:根据我地区近些年发生的盗窃案特点,发现室外现场占比较多,然而
该类现场保护困难,现场痕迹物证破坏严重,有人为因素的作用,亦有自然环境
的影响。
现场提取到的检材DNA检测结果多有混合或者污染情况,仅依靠常染色
体DNA检测往往不能直接比中嫌疑人,特别是遇到混合样品时,更难以拆分数据,不能为案件的侦办提供可靠的依据。
本文探讨利用Y-STR技术分离混合DNA分型,结合男性家族调查缩小比对范围,最终通过常染色体分型确定作案人员,为案件
侦破提供线索。
关键词:混合DNA;Y-STR技术;男性家族
一、案例资料
2022年02月份,通辽市奈曼境内发生多起变压器铜芯被盗案,给本地居民
的生产生活造成严重影响。
被盗现场均位于野外沙地,由于我地区该季节多风沙
天气,导致现场痕迹物证荡然无存,现场无监控,也无目击证人,不能确定案发
时间及作案人数。
技术人员在对现场勘验检查后,经走访及分析研判,在距其中
一处中心现场以南20米左右的沙坑中提取到照明设备一个,分析为嫌疑人作案
后逃离现场时遗留。
技术人员按检材提取及送检要求,严格规范将其包装后,第
一时间将可能附着有生物检材的照明设备送我局DNA实验室进行检测。
二、检测过程
初次检验时发现检材表面附着大量油渍,考虑为作案人拆卸变压器铜芯时直
接接触检材造成油渍附着。
检验人员提取时利用擦拭方法转移提取检材表面微量
物证,擦拭作案人经常接触的部位,使用Global Filer试剂盒(美国ABI公司)
进行PCR扩增,反应体系为10μL,DNA模板6μL,经29循环扩增后扩增产物应用ABI-3500型全自动荧光分析仪进行电泳分离,检测结果未获得常染色体DNA 分型。
考虑外界因素如紫外线、雨水加速DNA降解,且沙土和油渍对DNA有抑制作用,故常规部位提取未检测取到DNA分型。
再次提取时对检材进行仔细观察,发现充电插头按钮处油渍较少,且为日常经常接触部位,检验人员利用棉签擦拭和提取器粘取方法分别提取,经30循环PCR扩增,最终获得混合常染色体分型(见图1)。
图1 检材混合常染色体图谱
通过观察,发现检材为两个男性的常染色体混合分型,经过对混合分型的拆分,仅D21S11、D19S433、D13S317、FGA等少数基因座可以拆分出主次峰,其余基因座均不能进行准确拆分,故不能进一步确定单一分型进行比对。
分析Yindel 基因座考虑为两个男性混合分型,决定利用Y-STR进行再次扩增。
后对提取产物使用SureID Y35扩增试剂盒(宁波海尔施公司)进行扩增,反应体系为10μL,DNA模板6μL,扩增产物应用ABI-3500型全自动荧光分析仪进行电泳分离。
经过ID-X软件分析,得到两个男性混合分型,且大部分位点主次峰值清晰(见图2)。
具有进一步比对条件。
图2 检材混合Y-STR图谱
经过拆分Y-STR数据分型,两组分型分别为辽宁省阜新市王府镇张姓家系和
董姓家系,通过对上述两个家族中所有男性可疑人员逐一排查、采样比对,最终
确定家族中张某和董某有重大作案嫌疑。
二人常染色体分型完全包含在现场检材
分型中(见图3、图4)。
张董二人到案后对多次盗窃变压器铜芯一事供认不讳。
图3 嫌疑人张某常染色体图谱
图4嫌疑人董某常染色体图谱
三、讨论
随着DNA检验技术的发展,以及在参与案件侦破时发挥的强大作用,有的直
接比中嫌疑人,有的直接锁定证据,为刑事诉讼提供了依据,办案单位越来越重
视技术指导侦查,在案件现场勘查时对生物物证的发现和提取积极性高,技术相
对成熟,越来越多的基层单位可以第一时间对检材进行检测,降低了因送检时间、送检条件的限制对DNA检出率的影响,增加了检材提取的成功率,一定程度上缓
解了案件侦破的压力。
本文探讨利用Y-STR技术分离混合样本破获系列盗窃案,
混合样本的拆分本身具有一定难度,尤其是各种样本DNA含量未确定时,单依靠
信号峰的高低、面积去拆分混合样本风险大、准确度差,特别是具有纯合体的位
点(如图1的D3S1358、vWA、D18S51),进一步增加拆分难度。
作为常染色体检
测手段的补充,Y-STR呈单倍体连锁遗传,有易于拆分的优点,男、女混合的样
品可以仅对男性检出Y-STR分型。
对多个男性混合DNA样品,可以提供人数信息,结合男性家族的调查数据将检测结果的比对范围缩小,从而增加混合常染色体分
型拆分准确度,提高个人识别能力使常染色体的比对结果更具有针对性。
常染色
体STR与Y-STR检测手段联合使用可以有限提高DNA数据在案件侦办中的利用率,因此加强男性家族的统计显得尤为重要。
接触DNA的检验一直是法医DNA检验技术中的难点,提取前应制定周详的提
取和检验计划。
提取时用力适中,因为用力轻会导致转移不彻底,易造成模板DNA含量少而难检出,或者丢失等位基因,为此对错误埋下隐患。
用力重时反而
会提取到不必要的抑制剂,比如一些化学物质,该案件检材首次提取时就遇到这
样的问题,而二次提取时避开了抑制剂,使接触DNA顺利检出。
因此,同一物品
上各部位脱落细胞附着情况和程度不同,提取时要细分析,分段提取,也是保证DNA检出的关键所在。
室外现场提取到的检材获取准确DNA分型的难度系数大。
一方面检材发现难,由于室外现场很难第一时间被发现,现场大多破坏严重,很难提取到有价值痕迹
物证,所以在对室外现场勘查时一定要扩大勘查范围,结合残存的轮胎印记、足
迹等痕迹发现其他可疑检材,特别注意与现场情况不相符的检材。
另一方面现场
检材多受雨雪、风沙、紫外线等影响,对DNA有抑制和降解作用,所以勘查现场
要及时,检材提取方法要得当,避免检材受到再次破坏和污染。
提取检材后要及
时送检,确保检材DNA提取的成功率、利用率。
旗县级DNA实验室可以第一时间接触到检材,缩短检材的运输时间,规避了
检材的污染和破坏的因素,更及时的对检材进行检验分析,为侦查破案赢得时间。
近年来我实验室利用Y-STR技术接连破获多起重大刑事案件,包括积压命案、系
列强奸案、系列盗窃案等,充分利用DNA检测技术服务侦查、指导侦查,为人民
群众挽回经济损失,捍卫了法律的尊严。
参考文献:
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中国法医学杂志,2014,29(03):247-249.
[2]李承承,冯燕,俞卫东.人体脱落细胞DNA检验1例[J].中国法医学杂
志,2014,29(05):482-483.。