安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

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安捷伦1260全自动高效液相操作规程

安捷伦1260全自动高效液相操作规程

安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备:最好使用流动相溶解样品;进样前样品需过滤膜,除去悬浮不溶杂质。

2.流动相的选择和处理:使用高纯度试剂,所有含盐或含水溶剂必须膜过滤,100%色谱纯有机试剂,滤膜过滤后方可使用;流动相现配现用,剩余的流动相(水相)及时清理,实验间隔>2天,建议倒掉;任何溶剂,如果有可见悬浮物、菌丝,不可使用;更换流动相之前,必须事先阅读色谱柱的说明书;除非有说明,反相柱不得使用100%水。

3.开机注意事项:先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源;等各电源开启后(30s),打开在线软件;冲柱子和平衡时,暂不开紫外灯;平衡完后,打开紫外灯,设置梯度和波长或引用方法。

4.实验结束:C18反相柱应用色谱甲醇保存,不能含任何酸、盐;用甲醇替换通道,四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中,以防长菌;流速调零,再关闭软件,最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项

简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent HPLC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域。

其操作流程和注意事项如下:
操作流程:
1. 准备样品溶液:根据分析目的选择适当的溶剂,将样品溶解或稀释至所需浓度。

2. 准备色谱柱:根据分析需求选择合适的色谱柱,并按照柱床规定的要求进行预处理,如洗涤、调pH等。

3. 连接系统:将色谱柱安装在仪器上,连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件,确保连接紧密无漏。

4. 设置方法参数:根据分析需求,设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。

5. 系统平衡:启动泵和检测器,运行空白试验,确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。

6. 样品进样:将样品进样器插入样品瓶中,抽取足够的样品并注入进样器,按下进样按钮进行进样。

7. 进行分离:启动泵,使流动相通过柱床,样品分离过程中不断采集检测器的信号。

8. 数据处理:分析和处理检测器输出的信号,得出对应的峰面积、峰高度等结果,进行数据分析和解释。

注意事项:
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器,遵循操作规程,避免误操作和事故发生。

- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好,防止泄漏和污染。

- 选择适当的溶剂和流动相,避免与柱材和样品相互作用,影响分析结果。

- 定期检查和维护仪器,如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等,确保仪器正常运行。

- 样品处理过程中,注意避免光线、温度和湿度的影响,尽量保持稳定的分析环境。

- 使用仪器前,需提前熟悉相关方法和仪器操作,做好实验前的准备工作。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源,待仪器自检完成后,确保所有指示灯都亮起。

2.检查溶剂瓶的液位,确保足够的溶剂供给。

3.清洁好色谱柱并连接到系统中。

三、仪器启动1.打开色谱软件,选择相应的方法。

2.点击“系统”菜单,选择“启动系统”命令,系统开始进行初始化。

3.在系统初始化完成后,点击“准备”菜单,选择“准备系统”命令,系统开始进行一系列的自动化准备工作,比如冲洗和平衡柱子。

4.检查系统的压力和温度,确保在正常范围。

四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。

2.将样品装入进样瓶中,注意不要超过瓶口。

3.将进样瓶插入样品进样系统中,按照方法设置的条件进行进样。

4.点击软件界面上的“进样”按钮,开始进样。

五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点,选择合适的色谱柱。

2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。

3.检查色谱柱的压力和温度,确保在正常范围。

六、色谱条件设置根据分析方法的要求,设置好色谱条件,包括流量、温度、柱温等参数。

七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器,比如紫外检测器、荧光检测器等。

2.设置检测器的工作参数,如波长、增益、基线噪声等。

八、开始分析1.在样品进样后,点击软件界面上的“开始”按钮,开始进行色谱分析。

2.监控检测器输出的信号,根据需要可以对信号进行放大或调整。

九、结果解析1.根据所用方法的要求,对分析结果进行解析。

2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。

十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。

2.关闭色谱柱进样系统。

3.关闭色谱仪电源。

此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程,希望能对使用者提供一定的参考和帮助。

在操作过程中,应严格按照安全操作规范进行,并及时进行维护和保养,以保证仪器的正常运行。

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography,简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器,广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。

为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器,以下是一些规范操作的步骤和注意事项。

1.仪器准备-开启仪器电源,并等待仪器自检完成。

-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。

-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净,并按需更换柱筒。

2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品,并确保其纯度和浓度符合实验要求。

-制备规范的稀释液或内标溶液,以便进行质量控制和校准。

3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。

-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。

-根据实验要求选择合适的检测器(如紫外检测器、荧光检测器等)。

4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱,并将柱安装在柱底座上。

-将导线连接到柱温控制系统,并设置柱温。

-选择适当的流动相溶剂,用它们预平衡柱,以确保柱达到稳定状态。

5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。

-定期进行质控分析,以检验仪器的准确性和精确性。

-根据需要,进行合适的质量控制和校正操作。

6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式(如自动进样器、手动进样器等)。

-通过进样器吸取样品,并确保进样量准确无误。

-进行一定的进样准备,如过滤、稀释等。

7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置,样品进样准备完毕,并进行柱的平衡。

-点击“开始”按钮,启动分析程序。

-监测分离曲线或结果,确保分析结果的准确性与可靠性。

8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。

-对结果进行后处理和数据分析,如绘制色谱图、峰面积计算等。

-存储数据,以备后续分析和查阅。

9.仪器维护与清洁-使用完毕后,关闭仪器并断开电源。

-清洗注射器和柱等关键部位,以防止残留的样品引起交叉污染。

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作

安捷伦高效液相色谱仪的规范操作1. 目的:明确安捷伦高效液相色谱仪的规范操作,确保数据的准确性。

2. 范围:适用于安捷伦高效液相色谱仪。

3. 职责:检验人员对此负责。

4.操作规程:4.1 系统组成本系统由1个溶剂二元输送泵(分主/A泵和副/B泵)、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。

4.2 准备4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气20min。

4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向一致)和定量环。

4.2.3 配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的0.45μm滤膜过滤。

4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常4.1 将待测样品按要求前处理,准备HPLC 所需流动相,检查线路是否连接完好,废液瓶是否够用等。

4.3开机:4.3.1 打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。

4.3.2 打开1200 LC 各模块电源。

4.3.3 待各模块自检完成后,双击[Instrument 1 Online]图标,化学工作站自动与1200LC通讯,进入的工作站画面如下所示。

4.3.4 从[视图]菜单中选择[方法和运行控制]画面, 点击[视图]菜单中的[显示顶部工具栏],[ 显示状态工具栏],[系统视图],[样品视图],使其命令前有[√]标志,来调用所需的界面。

4.3.5 把流动相放入溶剂瓶中。

4.3.6 打开冲洗阀。

4.3.7 点击[泵]图标,点击[设置泵…]选项,进入泵编辑画面。

4.3.8 设流速:5ml/min,点击[确定]。

4.3.9 点击[泵] 图标,点击[控制…]选项,选中[启动],点击[确定] ,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止。

4.3.10 点击[泵] 图标,点击[控制…]选项,选中[关闭],点击[确定]关泵,关闭冲洗阀。

Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程

Agilent 1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。

1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。

1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。

该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。

2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。

将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“OK”,即完成。

2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标,选定文件名,单击“OK”,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。

如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,单击“OK”。

即完成。

2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下,选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,完成后,Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”,给新文件命名,单击“OK”。

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260操作规程安捷伦(Agilent)1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器,具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。

该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。

二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。

2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。

3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充,以及是否有足够的溶剂。

三、方法设置1. 打开色谱软件,并选择合适的方法模板。

2. 根据分析需求,在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。

3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。

四、进样操作1. 打开进样器的盖子,将待测样品加入样品瓶中。

2. 点击软件中的进样按钮,设置样品名称和进样量。

3. 将样品瓶放入进样器,并关闭盖子。

4. 点击软件中的进样按钮,开始进样。

5. 进样完成后,从进样器中取出样品瓶,并将它放入垃圾桶中。

五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门,并将柱端与色谱柱连接。

2. 检查色谱柱是否没有泄漏,如果有泄漏,则需重新连接。

3. 检查色谱柱的温度,确保它处于合适的温度范围内。

六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源,并连接到电脑上。

2. 设置合适的流速和梯度梯度。

3. 点击软件中的启动按钮,开始进行分析。

七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。

2. 根据需要选择适当的数据处理方法,如峰面积计算、定量分析等。

3. 导出分析结果并保存。

八、仪器维护1. 分析结束后,关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。

2. 清洗色谱柱和进样器,保持其清洁。

3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。

九、安全操作1. 在操作仪器时,注意安全,避免接触到有害化学品。

2. 在操作过程中,严禁随意触摸仪器或移动连接线。

3. 在操作过程中,如遇到异常情况,请及时停止分析并向管理员报告。

通过以上操作规程,可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项一、操作规程? 开机1(把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。

2(打开计算机,打开主机各模块电源(从上至下),再双击桌面“LC1260(联机)”图标,进入化学工作站。

3(旋开排气阀(逆时针),右键单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。

将泵流量设为“5mL/min”,溶剂A设为“100%”,打开泵,排出管路中的气体,直到由贮液瓶到泵入口整个管路中无气泡为止,此过程约需要5min。

4(依次切换到溶剂B、C、D,分别排气。

? 数据采集1. 编辑样品信息:由“运行控制”进入“样品信息”,设定操作者姓名,样品数据,文件名等。

2. 编辑完整方法:从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项,单击“确定”进入“方法注释”,编辑好单击“确定”。

在“选择进样源”中选择“手动进样”单击“确定”,在“设置方法”中进行参数设定。

3. 四元泵参数设定:在“流速”处输入流量,如1mL/min,在“溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数,在右侧注释栏中标明各溶剂的名称;设置“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子,在“时间表”添加编辑梯度。

4. TCC(柱箱)参数设定:在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”,使柱箱的温度左右一致。

5. VWD检测器参数设定:在“波长”右侧的空白处输入所需的检测波长,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,再设置“停止时间”和“后运行时间”。

6. 仪器曲线设置:默认即可。

7. 关闭排气阀(顺时针),冲洗色谱柱20~30min,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况。

8. 将进样器转动手柄逆时针转到LOAD位置,在环路全量进样时(定量环体积为20uL),用50~100 uL的液相进样针将2~5倍定量环体积的样品缓慢注入进样器中,再将进样器转动手柄顺时针方向迅速转到INJECT位置,将定量环中样品引入系统中。

安捷伦高效液相色谱仪操作流程步骤

安捷伦高效液相色谱仪操作流程步骤

安捷伦高效液相色谱仪操作流程步骤下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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安捷伦高效液相色谱仪操作说明

安捷伦高效液相色谱仪操作说明

安捷伦高效液相色谱仪操纵说明之答禄夫天创作一、校枪及样品处理1. 校枪仪器:两个小烧杯、分析天平、移液枪1000μL、100μL步调:打开分析天平预热,一只烧杯放到称量盘上调零,一只装入纯水。

将移液枪1000μL、100μL调至950μL、50μL,分别吸取纯水称质量,如偏大或偏小,调节移液枪直至准确到0.001g。

(如枪使用过久或气密性欠好,可以准备一个小烧杯装入纯水,每次先轻轻沾湿枪口,甩掉水或在用卫生纸吸取口上的水,再插上枪头使用。

)注意慢吸慢放,不要挂珠。

2. 样品处理:用1.5mL离心管取0.5mL发酵液,取出样品后,首现在离心机上离心(13000rap/min 3min)。

然后将样品稀释20倍,取950μL纯水、50μL发酵液于离心管中。

混匀后在离心机上离心(13000rap/min 3min)。

准备自动进样瓶(瓶中放上内衬管),取200μL待测液盖紧盖子。

按顺序放到自动进样盘中。

二、开机1、仪器各组件将在线脱气器、泵:四元、进样器:自动进样器(六通阀)、柱温箱、检测器:示差折光检测器开关打开。

打开计算机,进入Windows XP 画面,并运行CAC Server程序,打开色谱仪各组件电源,待显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后,双击Instrument 1 Online ,图标打开工作站。

化学工作站自动与1200LC通讯。

流动相:将流动相(一般不主张使用偏酸、偏碱的流动相)放入溶剂瓶中,打开冲洗阀,设流速为2ml/min,单击确定,再依次单击泵→控制,选中启动,单击确定,则系统开始冲洗,至管路无气泡为止,切换管路反复操纵至所需管路均无气泡。

在“控制”选项中选“关闭”,关闭泵,关闭冲洗阀。

单击泵下面瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积。

每次四元泵开始前,要打开冲洗阀阀门以5ml/min的流速冲洗10分钟,使脱气机与泵之间的流动相从冲洗阀流出,以免隔夜的流动相损伤色谱柱。

每次进样检测前,要用流动相冲洗色谱柱30分钟,达到柱温前20min流速设为0.2ml/min,达柱温后再改为0.6ml/min。

安捷伦HPLC1260操作流程

安捷伦HPLC1260操作流程

安捷伦HPLC1260操作流程HPLC(高效液相色谱)是一种常用的分离和纯化化学物质的技术。

安捷伦HPLC1260系列是一款先进的高效液相色谱仪器,具有高精度、高灵敏度和高分辨率等优点。

下面是安捷伦HPLC1260的操作流程:1.准备工作a.打开色谱仪电源,并确认电源线已连接到稳定的电源插座。

b.打开色谱仪的仪器主机,等待一段时间,让仪器预热至工作温度。

c.确保溶剂瓶中的溶剂已经充足,且瓶盖已经拧紧。

d. 打开安捷伦 ChemStation 软件,点击“仪器控制”界面上的“打开仪器”按钮,连接仪器。

2.设置方法b.在“新建方法”界面上,填写方法名称、采样装置、检测器类型等信息。

c.在“进样”选项中设置进样体积、进样方式和进样流量。

d.在“柱温控制”选项中设置柱温度。

e.在“梯度程序”选项中设置梯度程序,包括流速、时间和浓度等参数。

f.在“检测器”选项中设置检测器的波长或其他相关参数。

g.设置完成后保存方法。

3.准备样品a.准备样品溶液,并使用过滤器过滤掉杂质。

b.将样品溶液定量注入样品瓶中。

4.进样a. 在 ChemStation 软件界面上点击“方法控制”按钮,选择之前设置好的方法。

b.将样品瓶与自动进样器连接,通过软件控制自动进样器进行进样。

c.等待自动进样器完成进样过程。

5.开始分析a. 在 ChemStation 软件界面上点击“仪器控制”按钮,然后点击“开始”按钮,开始分析。

b.软件会自动控制进样和梯度程序,进行样品分离。

6.结果分析a.在分析过程中,软件会实时显示色谱图和数据。

b.分析结束后,可以导出数据或生成报告。

7.清洗和保养a.在分析完成后,关闭仪器主机。

b.清洗色谱柱和进样器,使用对应的溶剂进行清洗。

c.定期检查仪器的运行状况,如进样量、流速等,进行维护和保养。

总结:。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机(1)打开计算机,登陆windows操作系统。

(2)打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。

(3)进行仪器配置,点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址:192.168.254.11。

把各流动相放入相应的溶剂瓶中。

(4)编辑方法。

方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项(四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定,仪器参数默认),完成后,文件→方法另存为→编辑名称,保存方法。

(5)排气。

旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”设置泵流速,排气可设置1.2ml/min,l流量梯度100,也可5ml/min,流量梯度10。

一般冲洗3-5min,注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出,观察管路中气体位置,以其排净为目的。

关泵,关闭排气阀(顺时针)。

(注意:先开排气阀,再开泵,先关泵,后关排气阀)。

(6)在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值,谨防空进。

将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。

(7)换流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器,视图,在线信号,选择信号,观察基线情况。

二、数据采集信息编辑及进样(1)编辑样品信息:点“单次样品”小瓶,或点击运行信息-单次进样,设定操作者姓名,样品数据文件名,进样量等。

(2)编辑好样品信息后方可进样。

三、数据处理(1)打开桌面“仪器1脱机”,单击“数据分析”进入数据分析画面。

(2)从“文件”菜单中选择调用信号,选择您的数据文件名,单击确定。

(3)谱图优化。

从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间,或选择“自定义量程”调整,反复进行,直到图比例合适为止。

(4)积分。

从“积分”中选择“自动积分”,若积分结果不理想,从菜单中选“积分事件”,更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”,从“积分”中选择积分选项,则数据被积分,如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。

安捷伦液相色谱仪操作规程

安捷伦液相色谱仪操作规程

安捷伦液相色谱仪操作规程1. 引言安捷伦液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于药物分析、食品检测、环境监测等领域。

本文档旨在介绍安捷伦液相色谱仪的操作规程,以帮助用户正确、高效地使用该仪器。

2. 仪器准备在正式操作前,需要进行以下仪器准备工作:1.检查仪器及附件是否正常运行,如有故障应及时联系维修人员。

2.检查系统电源是否接通,并确保电源稳定。

3.打开色谱柱热水浴,使其预热至设定温度。

4.检查溶剂储液罐中溶剂余量,如不足应及时更换。

5.检查进样器和检测器,确保其完好并调整到正确位置。

3. 样品处理对于待分析的样品,需要进行以下处理:1.准备样品溶液,确保溶解度适当并不含有干扰物质。

2.使用准确的量筒或移液管,取适量样品溶液放入进样器。

3.注意避免气泡的产生,可以轻轻敲击进样器以排除气泡。

4. 方法设定在进行样品分析之前,需要根据实际需求设定合适的方法参数:1.打开仪器控制软件,选择相应的方法模板。

2.根据样品性质和分析要求,设置进样量、流动相浓度、流速等参数。

3.点击确认,保存方法设定。

5. 进样操作在方法设定完成后,进行样品进样操作:1.将进样器连接至样品溶液,确保连接部位密封良好。

2.打开进样器注射阀,注入样品溶液。

3.操作软件,点击进样按钮,进行样品进样。

6. 色谱柱选择根据样品性质及分析要求,选择适当的色谱柱:1.通过试验和经验,选择合适的色谱柱类型和尺寸。

2.将色谱柱安装到色谱仪上,并调整其位置和方向。

3.使用手轮或电动调节色谱柱的流动方向和速度。

7. 检测器调整确保检测器能够正确检测和记录样品的信号:1.打开检测器的电源,确认其正常运行。

2.根据检测器类型,调整检测器的灵敏度、波长等参数。

3.使用标准样品进行校准和调试,确保检测器输出准确可靠。

8. 数据采集与处理在检测完样品后,需要进行数据采集和处理:1.点击软件界面上的数据采集按钮,开始采集样品的色谱图数据。

2.使用软件提供的数据处理功能,对样品的色谱图进行处理和分析。

Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程

Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程

Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程一、目的:建立Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程,保证正确使用。

二、适用范围:适用于Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作。

三、职责:研发部对本标准的实施负责。

四、正文:1 仪器组成及电源:1.1 仪器组成:本仪器由四元泵、真空脱气机、DAD检测器、安捷伦化学工作站组成。

1.2 电源:泵为110V稳压电源,检测器为220V稳压电源,工作站为220V稳压电源。

1.3开机运行前,更换溶剂瓶中的流动相,若管道为第一次使用,先用针管排空各管道中的气泡。

2 仪器硬件开启:自上而下或自下而上顺序开启各模块(真空脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器、荧光检测器),打开电源指示灯,指示灯亮,显“绿色”;状态指示灯指示当前的状态,各模块进行自检(自动进样器的门板必须关上)。

3安捷伦化学工作站的操作:3.1开机运行步骤3.1.1 待各模块自检完成后,双击“仪器1联机”图标,化学工作站自动与1260LC通讯,进入工作站画面,各模块的软件图标均为绿色。

3.1.2从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,点击”视图”菜单中的”样品视图”、”系统视图”、“命令行”,来调用所需界面(或直接从“视图”菜单中选择“全部菜单”来调用全部界面。

3.1.3把流动相放入溶剂瓶中。

3.1.4打开“Purge”阀,点击泵图标,点击“设置泵”,进入泵编辑画面,设置流速为3-5ml/min,点击“确定”,则系统开始排空管道内的气泡,切换通道继续排空,直至所有要用的通道无气泡为止。

3.1.5点击泵图标,选“控制”选项,选中“关闭”关泵,关闭“Purge”阀。

3.1.6点击泵图标,设置流速冲洗柱子。

3.1.7点击泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,点击“确定”。

3.2数据采集方法编辑3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整菜单”项,选中除“数据分析”外三项,点击“确定”,进入下一画面。

安捷伦液相色谱仪操作及原理

安捷伦液相色谱仪操作及原理

安捷伦液相色谱仪操作及原理一、概述安捷伦液相色谱仪是一种高效、快速、准确的分离分析仪器,广泛应用于化学、生物、制药等领域。

本文将详细介绍安捷伦液相色谱仪的基本操作及原理,帮助用户更好地理解和使用该仪器。

二、安捷伦液相色谱仪操作1. 样品准备在进行液相色谱分析前,需要准备好待测样品。

样品应尽可能纯净,以避免杂质对分析结果的干扰。

根据不同的分析需求,可使用不同的样品处理方法,如萃取、沉淀、离心等。

2. 柱子安装柱子是液相色谱分析的核心部件,需要根据不同的分离需求选择合适的柱子。

安装柱子时,需确保柱子与仪器连接处紧密,无气泡产生。

柱子安装好后,需进行平衡操作,以确保分析结果的准确性。

3. 流动相配置液相色谱分析中,流动相是携带样品通过柱子的介质。

根据不同的分离需求,需选择合适的流动相。

配置流动相时,需注意比例、pH值等参数,以保证分析结果的准确性。

4. 样品进样将处理好的样品注入液相色谱仪中进行分析。

进样时,需注意进样量、进样速度等参数,以保证分析结果的准确性。

5. 检测器设置检测器是液相色谱仪的重要组成部分,用于检测样品中的组分。

根据不同的分析需求,需选择合适的检测器。

设置检测器时,需注意检测波长、灵敏度等参数,以保证分析结果的准确性。

6. 数据处理与分析液相色谱仪在完成样品分析后,会产生一系列数据。

这些数据需要通过相应的软件进行处理和分析,以得出最终的分析结果。

常用的数据处理软件有Agilent ChemStation等。

数据处理过程中,需注意数据清洗、峰识别、定量分析等步骤,以保证分析结果的准确性。

三、安捷伦液相色谱仪原理1. 色谱分离原理色谱分离是一种基于不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡差异的分离方法。

在液相色谱中,固定相是涂布在担体表面的高分子化合物,如硅胶、氧化铝、凝胶等。

流动相是携带样品通过柱子的介质,如有机溶剂、水和缓冲溶液等。

当流动相带着样品通过固定相时,由于不同组分在固定相和流动相之间的分配平衡不同,因此会以不同的速度通过柱子,从而实现各组分的分离。

Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程

Agilent1100 高效液相色谱仪操作规程1. 仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100 高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。

1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。

1.2.2打开HP ChemStations进入Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。

该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,Run Con trol,I nstrume nt等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器一输液泵一柱温箱一检测器一数据处理一报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。

2. 色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。

将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“0K,即完成。

2.2调用已设置好的文件在命令栏“ Method下,选择“LoadMethod ”或直接单击快捷键操作的“LoadMethod ”图标,选定文件名,单击“0K,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。

如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method T,选择“Edit Entire Method ”,在每个页面中键入设定值,单击“OK。

即完成。

2.3编辑新文件先在命令栏“ Method下,选择“ NewMethod”之后再在命令栏“ Method下,选择“Edit Entire Method,在每个页面中键入设定值,完成后,Save Method ”先在命令栏“Method下选择“Save Metho*给新文件命名,单击“OK。

安捷伦液相色谱仪的操作注意事项 液相色谱操作规程

安捷伦液相色谱仪的操作注意事项 液相色谱操作规程

安捷伦液相色谱仪的操作注意事项液相色谱操作规程色谱—质谱联用技术,结合色谱及质谱的技术,是目前分别和鉴定的紧要的分析方法之一、其中液相色谱—质谱仪应用更为广泛,液相色谱除了能分析一般的化合物,还能分析气相色谱不能分析的强极性、热不稳定性、难挥发的化合物。

液相色谱质谱仪由色谱仪、接口、质谱仪、电子系统、记录系统和计算机系统六大部分构成,是一种的检测仪器,仪器的良好工作状态是检测精准度的一个紧要影响因子。

为了保证仪器有一个良好的状态,保证检测结果的牢靠性,需要正确合理的使用和维护仪器。

下面以液相色谱仪为例,从仪器进样系统、色谱柱系统等各个系统的日常维护保养进行认真阐述,并对使用过程中简单碰到的问题进行分析,提出解决方法。

安捷伦液相色谱仪1260液相部分的维护开机注意事项要求使用220?V单相交流电。

如发生断电,不管任何原因造成的,首先关闭仪器面板左下角的开关,等待供电恢复10分钟以上再开启电源,否则有可能烧毁电路板。

仪器运行时需供应纯度99%的氮气作为喷雾与干燥气,输出压力为0.6~0.7?MPa。

试验开始前先检查液氮罐液体存量是否充分。

仪器开机时,确认电源已经连接而且气振阀处于关闭,打开仪器总电源,随后将前面板左下方的电源按键按下,真空泵即开始工作。

大约2~3分钟后,仪器内置的系统启动完毕,可以开启Mass hunter软件与仪器通讯。

等待四极杆温度达到100℃,高真空达到410—5?Torr之后,即可进行调谐或开始试验。

在仪器开始抽真空时,请不要打开前级泵上的气振阀,否则可能由于回油污染真空腔体内部。

流动相的要求每次开机前,保证超纯水和流动相的新鲜,泵的各个管路不应余留上次残留的溶剂。

流动相需符合HPLC与LC—MS要求等级,流动相中尽量加易挥发的盐,尽量不使用表面活性剂之类,否则简单导致离子抑制,表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据。

假如碰到离子抑制,可以把样品峰往后推或者更改提取方法,或者考虑用APCI源。

安捷伦型高效液相色谱仪详细操作规程

安捷伦型高效液相色谱仪详细操作规程

1.目: 规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。

2.适用范围: 本企业化验室Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养。

3.相关责任: 化验室精密仪器室4.引用标准: 仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材5.规程内容:5.1开机前准备5.1.1依据试验要求配制流动相, 须经0.45μm滤膜过滤, 以后再进行脱气处理, 使用前必需用超声波振荡l0-15min, 按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A(装有洗盐装置, 最好固定盛放无机盐水相)、B中; 对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。

5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必需以每分钟2~3滴速度虹吸10%异丙醇水冲洗seal-wash, 以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。

5.2.采样前准备5.2.1打开计算机,进入Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。

5.2.2待各模块自检完成后, 双击桌面上“仪器1联机”图标, 将自动进入化学工作站画面。

5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧“方法和运行控制”项, 进入方法和运行控制窗口。

5.2.4打开Purge阀(逆时针), 右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。

5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min , A通道设到100%, 单击“确定”。

5.2.6单击“泵”图标, 出现参数设定菜单, 单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge, 直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止; 切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到全部通道管路内均无气泡为止。

(查看柱前压力, 若大于10Bar, 则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。

)5.2.7将泵流量设到0.5ml/min, 若使用双泵则应设定溶剂配比, 如A=80%, B=20%; 关闭排气阀(顺时针); 再将流量设到0.8ml/min, 2分钟后设定至方法所需流速, 冲洗色谱柱20-30min。

安捷伦高效液相操作规程样本

安捷伦高效液相操作规程样本

安捷伦液相1260高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料(最佳是外文文献)理解别人做该样品时惯用流动相和固定相。

如果还不清晰样品是什么物质,最起码也应当对其极性进行理解,为选取适当流动相和固定相打好基本。

流动相选取注意事项:①避免使用高粘度溶剂作为流动相;②所选用流动相一定要与样品相溶;③各流动相之间可以较好相溶;固定相选取注意事项:a.正相色谱正相色谱用固定相普通为硅胶(Silica)以及其她具备极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)键合相填料。

由于硅胶表面硅羟基(SiOH)或其她极性基团极性较强,因而,分离顺序是根据样品中各组分极性大小,即极性较弱组份最先被冲洗出众谱柱。

正相色谱使用流动相极性相对比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

b.反向色谱反向色谱用填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团键合相。

反向色谱所使用流动相极性较强,普通为水、缓冲液与甲醇、乙腈等混合物。

样品流出众谱柱顺序是极性较强组分最先被冲洗出,而极性弱组分会在色谱柱上有更强保存。

惯用反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。

2.准备工作①用于液相色谱分析样品溶液使用前要通过0.15µm过滤器过滤,必要达到均匀而无颗粒状态;②流动相一定要选用色谱级别(最佳是默克、飞世尔、时联等牌子),并且在使用之前一定要使用0.4µm过滤器过滤,再用超声波清洗仪脱气解决20-30min;③在连接柱子和色谱仪之前,阀件或管路一定要清洗干净,(普通用异丙醇将管路清洗)3.仪器操作(一)将所选取流动相加入相应试剂瓶中:棕色瓶相应A泵,该瓶中只能加双蒸水或娃哈哈纯净水;B、C、D泵依照需要添加。

注:若流动相中有水、乙腈最佳现用现解决,不适当放置太长时间。

(二)先打开计算机登陆windows操作系统,再将仪器泵、色谱柱、检测器打开,待计算机界面显示连接好后,双击桌面“联机”图标,进入化学工作站,从“视图”菜单中选取“办法和运营控制”画面。

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安捷伦高效液相色谱仪的规范操作
1. 目的:明确安捷伦高效液相色谱仪的规范操作,确保数据的准确性。

2. 范围:适用于安捷伦高效液相色谱仪。

3. 职责:检验人员对此负责。

4.操作规程:
系统组成
本系统由1个溶剂二元输送泵(分主/A泵和副/B泵)、手动进样阀、柱温箱、检测器、化学工作站和电脑等组成。

准备
4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相,用合适的μm滤膜过滤,超声脱气20min。

4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向一致)和定量环。

4.2.3 配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适的μm滤膜过滤。

4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常
将待测样品按要求前处理,准备HPLC 所需流动相,检查线路是否连接完好,废液瓶是否够用等。

开机:
4.3.1 打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序。

4.3.2 打开1200 LC 各模块电源。

4.3.3 待各模块自检完成后,双击[Instrument 1 Online]图标,化学工作站自动与1200LC
通讯,进入的工作站画面如下所示。

4.3.4 从[视图]菜单中选择[方法和运行控制]画面, 点击[视图]菜单中的[显示顶部工具栏],[ 显示状态工具栏],[系统视图],[样品视图],使其命令前有[√]标志,来调用所需的界面。

4.3.5 把流动相放入溶剂瓶中。

4.3.6 打开冲洗阀。

4.3.7 点击[泵]图标,点击[设置泵…]选项,进入泵编辑画面。

4.3.8 设流速:5ml/min,点击[确定]。

4.3.9 点击[泵] 图标,点击[控制…]选项,选中[启动],点击[确定] ,则系统开始冲洗,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止。

4.3.10 点击[泵] 图标,点击[控制…]选项,选中[关闭],点击[确定]关泵,关闭冲洗阀。

4.3.11 点击[泵]图标,点击[设置泵…选项],设流速:min。

4.3.12 点击泵下面的瓶图标,如下图所示(以单元泵为例),输入溶剂的实际体积和瓶体积。

也可输入停泵的体积,点击[确定]。

数据采集方法编辑
4.4.1开始编辑完整方法:从[方法]菜单中选择[编辑完整方法…] 项,如下图所示选中除[数据分析]外的三项,点击[确定],进入下一画面。

4.4.2方法信息
4.4.2.1在[方法注释]中加入方法的信息(如:测试方法)。

4.4.2.2 点击[确定],进入下一画面。

4.4.3 泵参数设定
4.4.3.1 在[流速]处输入流量,如1ml/min,在[溶剂B]处输入,(A=100-B) ,也可[插入]一行[时间表] ,编辑梯度。

在[压力限]处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。

4.4.3.2 点击[确定],进入下一画面。

4.4.4 柱温箱参数设定
4.4.4.1 在[温度]下面的空白方框内输入所需温度,如:40度。

并选中它,点击[更多>>] 键,如图所示,选中[与左侧相同],使柱温箱的温度左右一致。

4.4.4.2 点击[确定],进入下一画面。

4.4.5 检测器参数设定:检测波长:一般选择最大吸收处的波长。

样品带宽:一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。

参比波长:一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区
域。

参比带宽:至少要与样品信号的带宽相等,许多情况下用100nm作为缺省
值。

同时可以输入采集光谱方式,步长,范围,阈值。

选中所用的灯。

4.4.6 在[ 运行时选项表]中选中[ 数据采集],点击[确定]。

4.4.7 点击[方法]菜单,选中[方法另存为…],输入一方法名,如[测试],点击[确定]。

4.4.8 从菜单[视图]中选中[在线信号],选中[信号窗口1],然后点击[改变…] 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击[确定]。

(如同时检测二个信号,则重复10,选中[信号窗口2]。

单击[改变]键,即可弹出右侧的[编辑信号图谱]窗口,进而选择所需的谱图信号。

4.4.9 从[运行控制]菜单中选择[样品信息]选项,如下图所示,输入操作者名称,如[安装工程师];在[数据文件]中选择[手动]或[前缀/计数器]。

区别: 手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。

Pr—在前缀/计数器----[前缀]框中输入前缀,在[计数器]框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名,如vwd数据0001,vwd数据0002……。

4.4.10 点击[确定] ,从[仪器] 菜单选择[系统开启]。

4.4.11 等仪器准备好,基线平稳,用试样溶液清洗注射器,并排除气泡后抽取适量。

数据分析方法编辑:
4.5.1 从[视图]菜单中,点击[数据分析]进入数据分析画面。

4.5.2 从[文件]菜单选择[调用信号],选中您的数据文件名,如下图所示。

点击[ 确定],则数据被调出。

4.5.3做谱图优化:从[图形]菜单中选择[信号选项],如下图所示。

从[范围] 中选择[满量程] 或[自动量程] 及合适的时间范围或选择[自定义量程] 调整。

反复进行,直到图的比例合适为止。

点击[ 确定]。

积分:
4.6.1 从[积分]菜单中选择[积分事件]选项,如下图所示。

选择合适的[斜率灵敏度]
,[峰宽],[最小峰面积],[最小峰高]。

4.6.2 从[积分]菜单中选择[积分]选项,则数据被积分。

4.6.3如积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止。

4.6.4点击左边[√]图标,将积分参数存入方法。

打印报告:
4.7.1从[报告]菜单中选择[设定报告]选项,进入如下图所示画面。

4.7.2 点击[定量结果]框中[计算]右侧的黑三角,选中[面积百分比],其它选项不变。

4.7.3 点击[ 确定]。

4.7.4 从[报告]菜单中选择[打印报告],则报告结果将打印到屏幕上,如想输出到打印机上,则点击[报告] 底部的[打印]钮。

关机:关机前,先关灯,用相应的溶剂充分冲洗系统。

退出化学工作站,依提示关泵,及其它窗口,关闭计算机。

关闭Agilent 1200各模块电源开关。

. 液相色谱日常维护
4.9.1. 贮液器
清洁是保持流动相贮液器正常使用的关键,要尽可能使用HPLC级的溶剂和试剂含有缓冲盐和非HPLC级的流动相一定要通过μm的过滤器以除去其中的微粒物质。

改变流动相时应防止交叉污染,陈旧的流动相和用久了的试剂瓶应定期废弃,防止生长微生物和组分改变。

贮器内壁定期清洗,里面的附件要经常更换。

4.9.2. 泵
泵的密封圈是最易磨损的部件,密封垫圈的损坏可引起系统的许多故障。

采取下列措施可以延长垫圈的寿命:
A 每天要把泵中的缓冲液体洗干净,防止盐沉积,泵要浸在无缓冲液的溶液或有机溶剂中;
B 用HPLC级试剂;
C 用烧结不锈钢沉子。

要注意防止因泵阻塞造成压力过高而损坏柱塞杆或烧坏电机。

4.9.3. 进样器
停机后要用溶剂冲洗干净进样器内残留的样品和缓冲盐,防止无机盐沉积和样品微粒造成阀转子面磨损或阻塞,严禁用气相色谱那样的尖针头进样。

4.9.4. 色谱柱
防止柱性能下降有以下几方面的措施:
A 溶剂的化学腐蚀不能太强;
B 避免微粒在柱头沉降;
C 泵上要装压力限制器,防止压力过高冲击大;
D 流动相pH>7时用大粒度同种填料作预柱;
E 柱头加烧结片不锈钢滤片,需要时加保护柱;
4.9.
5. 检测器
要保持检测器清洁,每天用后连同色谱柱柱一起冲洗。

提倡不定期用强溶剂反向冲洗检测池(拆开柱)。

用脱过气的流动相,防止空气泡卡在池内。

检测器灯有一定的寿命,不用时不要打开灯。

. 当仪器出现故障时应及时与厂家联系,使用人员不得擅自拆开维修。

. 使用人员应经过培训的且熟练操作仪器,每次使用应进行使用登记。

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