荧光反猝灭法测定药剂中卡托普利

第33卷第1期2021年1月
化学研究与应用
Chemical Research and Application
Vol.33,No.1
Jan.,2021
文章编号:1004-1656(2021)01-0201-04
荧光反猝灭法测定药剂中卡托普利
戴兴德，石欢，陈盈盈，张小林*
(甘肃医学院药学系，甘肃平凉744000)
摘要:建立荧光反猝灭法测定卡托普利(CAT)的体系。

碘(吗)与罗丹明B(RhB)缔合作用使罗丹明B荧光信
号强度减弱直至荧光猝灭，而卡托普利可将吗还原为「使体系荧光信号再现。

在2~20jimol•L"范围内荧
光强度再现值AF与卡托普利浓度有线性关系:AF=-8.438+10.774c(r=0.9986)，检出限为3.34x10』mol•
L"。

方法用于药剂卡托普利含量测定，测定值与标示量一致,加标回收率在95.2%-102.3%之间。

关键词:罗丹明B；碘;卡托普利;荧光反猝灭法
中图分类号:0657.31文献标志码:A
Determination of captopril in pharmaceutical based
on fluorescence inverse quenching
DAI Xing-de,SHI Huan,CHEN Ying-ying,ZHANG Xiao-lin*
(Department of pharmacy,Gansu Medical College,Pingliang744000,China)
Abstract:A new fluorescence system was developed for the determination of captopril(CAT)in pharmaceutical.When the fluores­cence signal intensity of Rhodamine B(RhB)was weakened or even disappeared by Iodine(I3)solution,Captopril could reduce I?to I',which made the system fluorescent signal reappear.The recovery value of fluorescence intensityAF had a linear relationship with the concentration of captopril in the range of2~20jimol•L_1,The linear regression equation was AF=-8.438+10.774c(r= 0.9986),The detection limit was3・34xl0'9mol•L_1.Captopril tablets were determined by this method,the measured values were consistent with the marked quantity,and the recovery rate was between95.2%〜102.3%.
Key words:rhodamine B；iodine；captopril；fluorescence inverse quenching
卡托普利(Captopril,简写为CAT)是一种常用降压药，广泛用于临床高血压、心脏病治疗。

目前，测定卡托普利的方法主要有滴定法⑴、色谱法口⑷、电化学分析法57］、光度法W1］等。

滴定分析法和光度法操作简便，仪器价廉，但灵敏度不高；高效液相色谱法、电化学法和化学发光法检测程序繁杂；相对而言,荧光法U⑶更具灵敏度高、选择性强、使用简便等优势。

罗丹明B具有荧光特性，缔合物“「RhB”的形成使其荧光猝灭“⑷，张⑹等基于缔合物“「
RhB”中Ij与青霉廛瞠酸氧化还原反应完成青霉素痕量检测,取得了很好的效果。

卡托普利结构
收稿日期：2020-05-15；修回日期：2020-06-15
基金项目:甘肃省高等学校创新能力提升项目(2020A-163)资助
联系人简介:张小林(1968-)，男，教授，主要从事光电分析研究。

E-mail：zxlplyz2005@
202化学研究与应用第33卷
中含有还原性疏基(・SH),弱酸性环境下因与缔合物中的I；发生氧化反应而使罗丹明B荧光恢复再现，其恢复再现程度与卡托普利浓度在一定范围内有线性关系,据此建立药剂中卡托普利荧光检测法,并直接用于药剂样品分析。

与同类方法相比较,方法步骤更为简化、检测限更低。

1实验部分
1.1仪器与试药
930N荧光分光光度计。

罗丹明B；0.lmmol•L“；卡托普利标准溶液: 0.lmmol•L-1;碘标准溶液［阁(5,1mmol•L-1)；
0.1mol•L"醋酸■醋酸钠缓冲溶液(pH4.5)。

卡托普利片(山西津华晖星制药有限公司，批号: H19993357；常州制药厂有限公司，批号: H320233731；上海旭东海普药业有限公司,批号: H31020564)o
1.2样液制备
取卡托普利片5片，准确称量，研细后在250 mL容量瓶中加水定容，充分振荡后过滤,取滤液5.00mL,转移到50mL容量瓶中,用二次蒸憎水定容作测试液。

1.3测定方法
取测试液2.OOmL于50mL容量瓶中,加碘液2.00mL,反应3min后加罗丹明B5.00mL、醋酸.醋酸钠缓冲溶液5mL,蒸锚水定容，静置5min,在580nm发射波长测定荧光强度F,卡托普利空白试液荧光强度记为仇,由AF确定卡托普利浓度。

2结果与讨论
2.1荧光光谱及测试条件
2.1.1确定发射波长360nm作激发波长，改变发射波长，绘制不同体系荧光曲线。

单纯罗丹明B在580nm处有一特征荧光峰(图1曲线a),罗丹明B与碘混合后，荧光值减小，但峰形峰位未发生改变(图1曲线b),显然碘和罗丹明B之间存在化学作用；特定环境下的卡托普利还原反应实现罗丹明B还原(图1曲线c),荧光再现程度与卡托普利浓度有相关性。

测定时的发射波长确定
图1不同体系的荧光光谱
Fig.1Fluorescencespectrain diHeient system
c(RhB)=lOpjnol•L-1；c(I：)=40pjnol■L-1；
c(CAT)=lOpjnol・L_1
2.1.2罗丹明B用量优化在pH4.5环境下考察不同体积罗丹明B稀释液的荧光特性。

结果表明，在0~5.00mL范围内罗丹明B稀释液荧光强度与V(RhB)有线性关系，当c(RhB)0x10-5 mol・时,V(RhB)>5mL,荧光强度趋于恒定,罗丹明B分子间发生了聚合⑴］。

故罗丹明B取
WmL
图2罗丹明B用量与荧光强度关系
Fig.2The relationship between the amount of RhB
and fluorescence intensity
2.1.3碘液用量仅针对“「RhB”体系,改变碘液加入量，考察罗丹明B溶液荧光猝灭程度(图2)o结果表明，当 V(I；)=0.00-4.00mL时，体系荧光强度逐渐降低;XI；)在0.00~2.00mL范围内变化时，有较好的线性度;因此碘液体积确定为2.00mL。

第1期
戴兴德，等：荧光反猝灭法测定药剂中卡托普利
203
P7mL
图3碘液体积与荧光强度关系
Fig. 3 The relationship between the volume of iodine
and fluorescence intensity
2.1.4缔合环境考察 仅针对TQRhB ”体系，改
变环境pH,考察罗丹明B 溶液荧光猝灭程度。

结
果发现，弱酸环境更有利于缔合物稳定存在，在
pH 4.0 ~ & 0时，荧光强度基本保持恒定；当体系
的pH 值大于9.0时，荧光强度随pH 增大,说明缔
合物中的碘发生歧化。

因此，在缔合反应阶段选 择0. 1 mol ・L 1 pH 4.5的醋酸■醋酸钠缓冲溶液
作介质。

2. 1. 5反应时间的优化 取0. 1 mmol ・L 卡托
普利标准溶液5.00 mL,分别考察了卡托普利氧化
以及罗丹明B 缔合两个反应时间对“CAT + I ： +
RhB ”体系荧光强度的影响。

结果表明，卡托普利
与I ；反应速度较快，黄色瞬间有变化,3min 后反
应完全，荧光强度达到最大;罗丹明B 与碘缔合反 应5min 后荧光强度降到最低并保持恒定,故罗丹
明B 加入后静置时间确定为5 min o
2.1. 6试剂加入顺序的优化 取0.1 mmol ・L “
卡托普利标准溶液5.00 mL,其他条件不变，实验 重点考察了“先缔合，后氧化”和“先氧化，后缔
合”两种试剂加入方式对体系荧光强度的影响。

结果表明，两种试剂加入方式的最终结果是一致
的，但达到稳定状态的时间有差异，以“CAT ・「
RhB ”顺序加入时速度更快，这说明游离状态的碘
与卡托普利、缔合物中的碘与卡托普利的反应速 率有差异,缔合物“JRhB ”具有疏水性呦，部分
会形成沉淀。

因此实验选择先氧化，后缔合的加
入顺序(CAT-I 卜RhB)。

2.2线性关系与检出限的考察
取0. lmmol/卡托普利标准溶液0. 00 ~
10. 00mL 作测试液，在最佳条件下完成“CAT ・1卜 RhB ”体系荧光强度变化值测定,绘制工作曲线
(图4)。

卡托普利浓度在2 ~20 pimol ・L"范围内 与荧光强度变化值(AF)呈良好的线性关系,其线
性回归方程为 AF —8.438+ 10.774 c ( jjimol •
L 」)，r = 0.9986。

10次空白溶液的标准偏差s 二 0. 012,3倍的标准偏差除以工作曲线斜率求得方
法检测限为3. 34x10勺mol ・L 」。

c/fiimolL'1)
图4卡托普利工作曲线
Fig. 4 Captopril working curve
2.3干扰试验
实验考察了药品辅料中赋形剂和添加剂对卡
托普利检测的影响。

结果表明,50倍于卡托普利 浓度的淀粉、硬脂酸镁、甘油、糊精、蔗糖、葡萄糖
均不对测定产生干扰，测量误差控制在5%以内;
FJ +和抗坏血酸存在干扰，但药剂附加成分和辅料
中很少含有F 評和抗坏血酸，故在此不予讨论。

Table 1 Detennination results of captopril in tablets and recoveries of the method(n=6)
表1卡托普利片含量测定结果及方法回收率5=6)
样品
测定值
(pjnol • L -1)
RSD (%)
加标量
(p,mol • L -1)
测定值
(pimol ■ L -1)
回收率
(%)滴定法测定
(mg/片)18. 910.6 1.00
9.87
96.2
24.6
2
8.97
1.1
2.0010.996.524.73& 94 1.8
3.0012.01022
4.5
4
& 94
1.3
6.00
14.8
9&1
24.
1
204化学研究与应用第33卷2.4样品分析
按“1.2和1.3”方法完成样品液的制备与测定，依据稀释倍数求得药片中卡托普利的平均含量,结果见表1O
相对标准偏差小于1.8%。

加标回收率在96.2%-102.3%之间；由反应液测定值返推出片剂含量依次为24.2mg/片、24.3mg/片、24.2mg/片,24.3mg/片,与厂家标示量(25mg/片)和滴定法测定值基本相符。

参考文献：
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(2015年版，二
部)[M].北京冲国医药科技出版社,2015:187.
[2]赵建颖.RP-HPLC-UV波长切换法同时测定复方硝酸
异山梨酯胶囊中5种成分的含量[J].中国药房,2013, 24(44)：42104212,
[3]敬永升,胡海廷，杨珂.高效液相色谱法测定复方卡托
普利片剂中氢氯嗟嗪含量[J].中国药业,2009,18
(15)：18-19.
[4]郑冰冰，郭瑞锋，何建峰.HPLC法测定复方卡托普利片
中卡托普利和氢氯嗟嗪的含量[J].药物分析杂志, 2007,27(2)：282-284,
[5]谢志海，张志红,张高杰，等.漠酸钾氧化甲基橙催化光
度法测定卡托普利[J]•分析化学,2003,31(10)：1195-119&
[6]易伟，易兰花,费俊杰,等•碳糊电极阳极吸附伏安法测
定卡托普利[J]・分析科学学报,2012,28(2)：230-232.
[7]杜虹，刘会，赵常志.差分脉冲伏安法测定卡托普利
[J]•分析科学学报,2011,27(3):355-358.
[8]涂常青,温欣荣，肖淑芬•磺基水杨酸分光光度法测定
药物中卡托普利[J].化学世界,2014,31(12):717-719.
[9]涂常青，温欣荣，郭春燕.光度法测定药物中卡托普利
的含量-基于对铁(皿)-钛铁试剂络合物的还原褪色反应[J]•理化检验:化学分册,2014,50(8):1018-1020. [10]翟海云，朱盛山，陈鑽光,等•高效液相色谱法测定中
药中的五种禁用黄色工业染料[J]•化学研究与应用, 2014,26(6)：943-945.3结论
基于I；和RhB缔合反应，依托卡托普利还原
性和13氧化性，构建荧光返猝灭法测定卡托普利新体系，方法集灵敏性、稳定性、实效性于一体，更
适合于样品痕量分析。

标准曲线为AF=-8.438+ 10.774cjmol•L“)，r=0.9986,用于片剂卡托普利含量测定,测定结果与标示量基本一致,加标回收率控制在96.2%~102.3%之间。

[11]李蕊,阎宏涛•基于未修饰银纳米粒子光度法测定卡
托普利[J]・光谱学与光谱分析,2013,33(4):1104-1107.
[12]庞向东,冉金凤，封瑞佳，等.灿烂绿探针共振瑞利散
射法测定药物及生物样品中的卡托普利[J].中国药学杂志,2018,53(5)：383-387.
[13]田锐,薛李慧，马晨，等•基于罗丹明B和金纳米粒子
荧光共振能量转移检测卡托普利[J]-分析科学学报, 2016,32(3)：361-365,
[14]乔玉春，龙大成,孙宗招,等.罗丹明B荧光猝灭法测
定水中碘[J].化学传感器,2018,38(1):3943. [15]栾崇林,黎源倩•流动注射激光诱导荧光光度法测定
食品中的铁[J]•分析试验室,2003,22(3)：74-76, [16]李建国，王耀荣,唐亚莲•硒(IV)-碘化物-罗丹明6G
体系荧光猝灭反应测定茶叶中痕量硒[J]•分析化学, 1997,25(5)：590-593.
[17]张爱菊，戴兴德,张小林.以碘-RB缔合物为荧光探针
的药剂中青霉素含量的检测[J].分析测试学报, 2019,38(9)：1132-1135,
[18]白莹,张小林•碘溶液配制方法改进[J]•化学教育,
2018,39(4)：29-30,
L19]黄保军,李建军，屈凌波•罗丹明B荧光光谱机理的研究[J].天津师范大学学报：自然科学版,2005,25(3)：8-10.
[20]刘希东.碘化物-罗丹明B光度法测定水中痕量有效
氯[J].化学研究与应用,2002,14(2):225-226.
(责任编辑李方)。