生物药物分析思考题
生物制药工艺学思考题及答案完整版
生物制药工艺学思考题及答案HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】抗生素发酵生产工艺1. 青霉素发酵工艺的建立对抗生素工业有何意义?青霉素是发现最早,最卓越的一种B-内酰胺类抗生素,它是抗生素工业的首要产品,青霉素是各种半合成抗生素的原料。
青霉素的缺点是对酸不稳定,不能口服,排泄快,对革兰氏阴性菌无效。
青霉素经过扩环后,形成头孢菌素母核,成为半合成头孢菌素的原料。
2. 如何根据青霉素生产菌特性进行发酵过程控制?青霉素在深层培养条件下,经历7个不同的时期,每个时期有其菌体形态特性,在规定时间取样,通过显镜检查这些形态变化,用于工程控制。
第一期:分生孢子萌发,形成芽管,原生质未分化,具有小泡。
第二期:菌丝繁殖,原生质体具有嗜碱性,类脂肪小颗粒。
第三期:形成脂肪包含体,积累储蓄物,没有空洞,嗜碱性很强。
第四期:脂肪包含体形成小滴并减少,中小空泡,原生质体嗜碱性减弱,开始产生抗生素。
第五期:形成大空泡,有中性染色大颗粒,菌丝呈桶状。
脂肪包含体消失,青霉素产量提高。
第六期:出现个别自溶细胞,细胞内无颗粒,仍然桶状,释放游离氨,pH上升。
第七期:菌丝完全自溶,仅有空细胞壁。
一到四期为菌丝生长期,三期的菌体适宜为种子。
四到五期为生产期,生产能力最强,通过工艺措施,延长此期,获得高产。
在第六期到来之前发束发酵。
3. 青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么?控制原理:发酵过程需连续流加葡萄糖,硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐,补糖率是最关键的控制指标,不同时期分段控制。
在青霉素的生产中,及时调节各个因素减少对产量的影响,如培养基,补充碳源,氮源,无机盐流加控制,添加前体等;控制适宜的温度和ph,菌体浓度。
最后要注意消沫,影响呼吸代谢。
4. 青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作?青霉素不稳定,发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速,防止降解。
提炼工艺包括如下单元操作:①预处理与过滤:在于浓缩青霉素,除去大部分杂质,改变发酵液的流变学特征,便于后续的分离纯化过程。
药物分析重点思考题
药物分析重点思考题绪论第一章1、中国药典内容分哪几部分?正文部分包括哪些项目?答:中国药典的内容分为:正文、附录、凡例正文部分包括:品名(中文名,汉语拼音名与英文名)、有机药物的结构式、分子式与分子量、来源或有机药物的化学名称、含量或效价、处方、制法、性状、鉴别、检查、含量或效价测定、类别、规格、贮藏、制剂等。
2、在药分工作中可参考的国外药典有哪些?答:美国药典与美国国家处方集(USPNF) 、英国药典(BP) 、日本药局方(JP) 、欧洲药典(Ph.Eup) 、国际药典(Ph.Int)3、溶液的百分比用%表示,单位是什么?答:g/g是指溶液100ml中含有溶质若干克。
4、中国药典的附录包括哪些内容?答:附录组成:制剂通则、通用检测方法和指导原则除另有规定外,正文中所用试药,均应按附录要求规定选用。
所用试液、缓冲液、指示剂与滴定液等也应按附录规定配制。
试验用水除另有规定外均系指纯化水。
5、试述药品检验程序及各项检验的意义。
药品检验工作的基本程序一般为取样、检验(鉴别、检查、含量测定)、留样、写出报告。
第二章1、药物鉴别的意义是什么?答:药物鉴别是利用物理的、化学的、物理化学或生物学的手段来辨别药物的真伪的试验,收载在药品质量标准的鉴别项下,在药物分析工作中属首项工作。
辨别药品的真伪是保证安全有效的前提条件。
2、什么是一般鉴别试验和专属鉴别试验?答:根据反应的专属性可将鉴别试验分为一般鉴别试验和专属鉴别试验。
一般鉴别试验是以某一类药物的化学结构及其物理化学性质为依据,通过化学反应来鉴别该类药物真伪的方法。
专属鉴别试验是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同,选用某些灵敏的定性反应来区分同类药物中的各个药物单体,达到确证药物真伪的目的。
中国药典采用红外法鉴别药物时,试样的制备方法有哪些?答:压片法、糊法、膜法、溶液法如何利用色谱法鉴别药物?答:色谱鉴别法是利用不同物质在不同色谱条件下,产生各自的特征色谱行为进行鉴别试验,采用与对照品在相同的条件下分离、并进行比较,根据两者保留行为和检测结果是否一致来验证药物真伪。
生物技术制药课后思考题 (2)
生物技术制药课后思考题1. 什么是生物技术制药?生物技术制药是利用生物技术手段,通过生物材料(如细胞、微生物、酶等)进行药物的研发、生产和应用的一种新型药物生产技术。
该技术利用生物工程、分子生物学、细胞生物学等学科的知识,将生物体内的特定基因或蛋白质进行分离、克隆和重组,进而生产出具有特定药理作用的药物。
2. 生物技术制药的优势有哪些?生物技术制药相对于传统的化学合成药物有以下优势:2.1 高效性和特异性生物技术制药可以通过定向克隆和重组技术,针对特定疾病靶点设计并制备药物。
由于药物的结构和功能可精确控制,因此在治疗效果上具有更高的效率和特异性。
2.2 可重复性和稳定性利用生物技术制药生产的药物,可以通过生物体系的复制和扩增得到,具有较高的生产稳定性。
与传统化学合成药物相比,生物技术制药的药物生产过程更为可控,能够保证批次之间的一致性和质量稳定性。
2.3 安全性和可调控性生物技术制药所使用的生物体或细胞经过严格筛选和检测,可以保证药物的可靠性和安全性。
此外,由于药物的来源可以通过基因工程技术进行调整和干预,使药物的生产和效果在一定程度上可调控。
2.4 可持续发展和生态友好相对于化学合成药物,生物技术制药的生产过程更为环保和持续。
生物技术制药利用生物材料进行生产,可以减少对环境的污染并节约资源。
3. 生物技术制药在医药领域中的应用有哪些?生物技术制药在医药领域中有广泛的应用,包括但不限于以下几个方面:3.1 蛋白质药物生物技术制药主要以重组蛋白质药物为主。
这些药物通过基因工程技术将目标蛋白的基因引入到特定的宿主细胞中,通过表达和纯化等工艺步骤获得目标蛋白质药物。
常见的蛋白质药物包括生长激素、胰岛素、抗体药物等。
3.2 基因治疗基因治疗是一种通过修复或改变人体基因来治疗疾病的方法。
生物技术制药可以通过基因工程技术向患者体内导入特定基因,从而纠正基因缺陷或提高免疫系统的活性,达到治疗效果。
3.3 细胞疗法细胞疗法是一种利用活体细胞来治疗疾病的方法。
生物技术制药课后思考题
第一章:绪论思考题1.什么是生物技术?生物技术所包含的内容及定义。
答:1)生物技术又称生物工程,指人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。
2)包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程、抗体工程、糖链工程、海洋生物技术及生物转化等。
(具体定义见P1)。
2.生物技术药物的概念及分类。
答:1)指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物,主要是重组蛋白或核酸类药物。
2)a.按照用途:预防、诊断、治疗;b.按作用类型:细胞因子类、激素类、酶类、疫苗、单克隆抗体类、反义核酸、RNA干扰类、基因治疗药物;c.按照生化特性:多肽类、蛋白质类、核酸类、聚乙二醇化多肽或蛋白质。
3.生物技术药物在理化性质、药理学与作用、生产制备和质量控制方面的特性。
答:1)理化性质(从药物多是蛋白质或核酸出发):a.相对分子质量大;b.结构复杂;c.稳定性差;2)药理学作用:a.活性与作用机制明确;b.作用针对性强;c.毒性低;d.体内半衰期短;e.有种属特异性;f.可产生免疫原性;3)生产制备特性:a.药物分子在原料中含量低;b.原料中常存在降解目标产物的杂质;c.制备工艺条件温和;d.分离纯化困难;e.产品易受有害物质污染;4)质量控制特性:a.质量标准内容的特殊性;b.制造项下的特殊规定;c.检定项下的特殊规定。
4.生物技术制药的概念和主要研究内容与任务。
答:1)指利用基因工程、细胞工程等生物技术的原理和方法,来研究、开发和生产预防、治疗和诊断疾病的药物的一门科学。
2)主要研究内容与任务:a.生物制药技术的研究、开发与应用;b.利用生物技术研究、开发和生产药物。
第二章:基因工程制药思考题1.简述基因工程制药的基本原理和基本流程。
答:1)利用重组DNA技术将外源基因导入到宿主菌或宿主细胞进行大规模培养和诱导表达以获取蛋白质药物的过程称为基因工程制药。
生物制药思考题(树达)
•生物制药概论1.生物药品和生物制药的概念2.•生物制药的主要研究内容及其代表性产品3.•按生化性质来分,生物药物主要有几类,指出各类代表性的产品及其用途4.•生物制药历史上里程碑式的发现、发明或关键技术的建立5.•基因工程技术、细胞工程技术、发酵工程和酶工程在医药工业中应用的主要内容6.•什么是基因治疗?目前考虑用基因治疗的疾病有哪些?7.•细胞因子的含义?哪些是细胞因子?基因工程制药1.•基因工程技术的含义2.•目前开发和上市的主要基因工程药品及其生化性质、基本用途。
3.目前基因工程制药中常用的目的基因克隆载体主要有哪几种?4.•克隆(无性繁殖)的含义?基因工程无性繁殖系的构建过程?5.•获得目的基因的主要方法?哪种在目前的基因工程技术中应用得更普遍?•简要回答利用酶促合成法(逆转录法)制取目的基因的步骤?7.•请说出在基因工程技术中,从真核细胞总RNA中分离mRNA的基本原理。
8.•采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术合成目的cDNA的一般程序是什么?9.•请说出聚合酶链式反应(PCR)体外扩增DNA技术的原理和步骤并图示说明。
10.•受体细胞、转化、转染、转导的含义。
11.•最常用的重组体(菌)的筛选方法有哪三种?12.•Sanger双脱氧链终止法测序的基本原理。
13.•请说明在原核细胞中表达真核基因,合成真核蛋白存在的主要问题。
14.•基因工程产物的分离纯化与传统发酵产物的分离纯化相比具有哪些特点?细胞工程制药1.•细胞工程的含义2.•细胞融合的含义3.•细胞融合的方法有哪几种?其基本原理是什么?4.•两种亲本细胞经过融合后,在其融合混合物种可能会存在几种类型的细胞?杂种细胞筛选的一般原理是什么?有哪些最常用的杂种细胞筛选系统?•什么是杂种细胞的有用性状?有用性状的检测方法有哪些?6.•原生质体融合的含义?微生物原生质体融合育种的主要步骤是什么?7.•酶法进行微生物和植物细胞破壁时,不同酶与不同微生物或植物之间的对应关系如何?8.•植物原生质体融合后的杂种细胞有哪些筛选方法?9.•单克隆抗体的含义?利用杂交瘤技术制备单克隆抗体的一般过程如何?利用单克隆抗体检测病原微生物会产生假阳性吗?10.•利用HAT筛选系统筛选杂交瘤细胞的基本原理11.•什么是杂交瘤细胞的克隆化?克隆化的方法有哪些?12.•目前大规模生产单克隆抗体的方法有哪些,简述其基本原理?13.•单克隆抗体的应用14.•微生物的生物转化的含义?利用微生物的生物转化可生产哪些生物药品?15.什么是核酸适配体、肽配体?动植物细胞培养制药1.•动物细胞培养大致可生产哪些药物?2.•血清作为动物细胞培养基的补充成分有哪些优缺点?3.•请说出贴壁依赖性动物细胞的生长阶段并作简要说明4.•动物细胞培养支原体污染的主要处理方法5.•动物细胞类型及其培养方法,操作方式。
生物药物分析思考题
答:盐溶:蛋白质在第离子强度的介质中表现为溶解,盐析:蛋白质在高离子强度介质中表现为盐析。
常用盐为硫酸铵,原因:高盐吸水,夺取水相*常用于蛋白质沉淀的方法有哪些?答:盐析法、PEG沉淀法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法、热处理沉淀法*色谱法纯化蛋白质常用哪些类型?分别根据什么原理进行分离?答:排阻色谱、离子交换色谱、亲和色谱、疏水色谱、经典的吸附色谱等。
原理上述有写*什么是密度梯度离心?答:密度梯度离心:一种在连续或者不连续的密度梯度介质中,将物质进行离心的方法。
(装载密度梯度介质,梯度介质有足够大的溶解度,常用介质:蔗糖密度梯度系统,制备:梯度混合器,层层铺垫,介质的最大密度比沉降样品的最小密度小。
,适用于大小有别而密度相似的样品)*什么是透析?主要用途是什么?答:透析:样品装入由半透膜制成的透析袋,透析膜允许容积小分子的溶质通过,而大分子则载留在袋内。
用途:透析的主要用途是从生物大分子样品中除去盐类或其它小分子物质。
透析法也可以用来除去与生物大分子结合较弱的小分子或离子,如金属离子及酶的辅助因子NAD,FAD等*蛋白质的定量方法有哪些?答:1光谱法(紫外吸收光谱法)2化学法(凯氏定氮法测有机物含氮量经典方法,双缩脲法,福林-酚法,染料结合方法)*什么是凯氏定氮法?试分析出现奶粉事件的原因以及改进办法?答:凯氏定氮法:测定化合物或者混合物中的总氮量的一种方法(方法:消化 用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵;(耗时),蒸馏 用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发;吸收 用酸性溶液(硼酸)吸收气态氨(使[H+] ),滴定 用已标定的无机酸滴(使[H+] 恢复),计算总氮量)。
奶粉事件的原因:有毒奶粉中主要是过多添加了三聚氰胺,而奶粉中常常需要测定食品的蛋白质含量,由于直接测量蛋白质技术上比较复杂,所以常用凯氏定氮法的方法,通过测定氮原子的含量来间接推算食品中蛋白质的含量。
由于三聚氰胺与蛋白质相比含有更多的氮原子,所以在一些事件中被一些造假者利用,添加在食品中以造成食品蛋白质含量较高的假象。
(整理)生物制药思考题
第一章绪论1.生物技术的定义与内容生物技术是指应用自然科学和工程学的原理,依靠生物作用剂的作用将物料进行加工以提供产品或为社会服务的技术。
生物技术内容:基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程等。
生物技术的一个主要目标就是生物物质的高效生产。
2.什么是生物药物?生物药物可分为哪些类型?生物药物:利用生物体的初级或次级代谢产物、生物组织或整个生物体来生产用于预防、诊断或治疗疾病的医用品。
生物药物的分类(按来源与性质分类)1. 天然生物药物:天然存在于动物、植物、微生物以及各种海洋生物等生物体内,直接通过提取、分离和纯化获得的有效的药理成分;2. 重组药物:重组多肽、蛋白质3. 基因药物:核酸类药物(基因治疗剂、基因疫苗、反义药物等)4. 合成与半合成的生物药物生物药物按功能与用途划分为:1. 治疗药物2. 预防药物(主要预防传染病,疫苗、类毒素)3. 诊断药物(速度快、灵敏度高、特异性强)3. 了解和熟悉一些常见的基因工程肽类药物。
细胞因子(cytokine):细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白质的统称。
在很多情况下,多种免疫细胞间的相互作用是通过细胞因子介导完成的。
干扰素类(interferon,IFN),白细胞介素类(interleukin,IL),集落刺激因子类(colony-stimulating facor, CSF),表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF),神经生长因子(nerve growth factor,NGF ),肿瘤坏死因子类(tumor necrosis factor,TNF),红细胞生成素(erythropoietin,EPO),凝血因子VIII、IX。
激素:胰岛素(insulin),生长激素(growth,GH),降钙素(calcitonin ),心钠素(atrial natriuretic factor, ANF )。
药用酶及其他蛋白药物:链激酶(streptokinase,SK),尿激酶(urokinase),葡激酶(staphylokinase),组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t-PA ),超氧化物岐化酶(superoxide dismutases,SOD)。
生药学部分思考题
生药学部分思考题一、名词解释1.金心玉兰:指药材横切面外侧皮部呈白色,中心木质部呈淡黄色的特征如黄芪2.朱砂点:指药材横切面上的棕红色小点,其色如朱砂(油室及其分泌物),如茅苍术3.菊花心:指根或者根茎类药材横切面上具细密的放射状纹理4.筋脉点:多指单子叶植物根及根茎类药材横切面上棕色或灰白色的点状纹理,主要由散在的有限外韧维管束或周木维管束形成5.指纹图谱:采用光谱、色谱或其他分析方法建立的用于表征生药化学成分特征的图谱6.生药:来源于天然、未经加工或只经过简单加工的植物、动物和矿物类药材7.条痕颜色:矿物在白色毛瓷板上花过后所留下的粉末痕迹的颜色,具有鉴定意义8.矿物的解理:矿物受力后沿一定结晶方向裂开呈光滑平面的性质称为解理9.性状鉴定:通过人体的感官以及一些直观的方法观察生药的性状进行鉴定10.显微鉴定:利用显微镜来观察生药的组织构造、细胞形态及其后含物等特征进行生药鉴定11.理化鉴定:利用物理或化学的分析方法对生药中所含有效成分或主要成分进行定性和定量分析已鉴定真伪优劣的方法12.本色:矿物的成分和内部构造所决定的颜色13.道地药材:来源于特定产区的货真质优的药材14.DNA分子遗传标记技术:通过比较物种间DNA分子遗传多样性的差异来鉴别物种的方法二、来源大黄:掌叶大黄、唐古特大黄、或药用大黄的干燥根和根茎板蓝根:来源于十字花科植物菘蓝的干燥根黄连:毛茛科植物黄连、三角叶黄莲或云连的干燥根茎甘草:豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根和根茎黄芪:豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根黄芩:为唇形科植物黄芩的干燥根三七:为五加科植物三七的干燥根及根茎当归:为伞形科植物当归的干燥根半夏:为天南星科植物半夏的干燥块茎川贝母:为百合科植物川贝母、暗紫贝母、甘肃贝母、太白贝母、瓦布贝母或梭砂贝母的干燥鳞茎天麻:为兰科植物天马的干燥块茎木通:为木通科木通、三叶木通或白木通的干燥藤茎金银花:为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾西红花:鸢尾科植物番红花的干燥柱头五味子:木兰科植物五味子的干燥成熟果实薄荷:唇形科植物薄荷的干燥地上部分青蒿:菊科植物黄花蒿的干燥地上部分冬虫夏草:为冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫子座及幼虫尸体的干燥复合体麝香:为林麝、马麝或原麝成熟雄体香囊中的干燥物鹿茸:为梅花鹿或马鹿的雄鹿为骨化密生茸毛的幼角蟾酥:中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍的干燥分泌物三、性状1.大黄:根茎呈类圆形、圆锥形或不规则块状;质坚实,断面淡红棕色或黄棕色。
生物药物分析思考题
思考题*生物药物的特点?答:1都为生物大分子,2.组成,结构复杂,具有严格的空间构象,以维持其生理功能 3 近与人体的正常生理物质4 安全毒性小5 更高的生化机制合理性,和特定的治疗有效性特点:1相对分子质量需测定性2 生物活性检查3 安全性检查 4 效价测定 5 生化发结构测定*生物制品的质量检定包括哪些方面?答:1理化测定 2.安全检定3效力检定理化检定:外观,真空度和溶解时间,蛋白质,防腐剂,纯度,其他安全检定:一般安全性检查杀菌,灭活,脱毒外源性污染过敏性检查效力检定:动物保护力活疫苗抗毒素和类毒素血清学实验*生物药物常用的定量方法有哪些?答: 1 酶法 2 电泳法 3 理化测定 4 生物检定法*什么是电泳?如何对其分类,分别有哪些?答:电泳是指带电粒子在电场力的作用下与自身所带相反的电荷方向移动分类:按支持物可分为:纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳按凝胶形状可分为:水平平板电泳,圆盘柱状电泳,垂直平板电泳*影响电泳迁移率的因素包括?答:1,带电粒子的性质,电子带静电荷越多,越接近球形,电泳速度快2,电场强度,越强速度越快 3 溶液的ph值,对于蛋白质来说,当ph接近等电点,速度越快,4离子强度,离子强度越小,速度越快5电渗作用,阻碍*血清蛋白常用什么电泳技术分离?核酸常用什么电泳技术分离?答:醋酸纤维素薄膜电泳和琼脂糖电泳*为什么聚丙烯酰胺凝胶电泳是应用最广泛的凝胶电泳技术?答:1 page解离基因量很少,电渗流少,吸附量低,容易制备,2 机械性较好,孔隙可以调节凝胶比重实现可调,具有可拉性分析筛效应3,一定范围对热稳定,无色透明,容易观察,4Acr较纯,可精制,污染小 5 page在280nm 没有吸收利于pro的检测。
*SDS-PAGE电泳用于测定?其中SDS的作用是什么?答:sds主要是用来测定蛋白质的分子量,其中sds作用有两个:1,消除不同蛋白表面表面电荷效应,2引起蛋白构象改变,消除蛋白质的结构效应*核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于哪三个因素?答:凝胶浓度,核酸的大小,核酸的形状*DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有什么效应与什么效应?答:分子筛效应和电荷效应*聚丙烯酰胺凝胶电泳包括连续系统和不连续电泳,其定义和区别分别是什么?答:1.连续系统:缓冲液的离子成分、PH、凝胶浓度、电位梯度都相同,带电颗粒电泳时仅具有电荷效应、分子筛效应。
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生物制药工程思考题(推荐5篇)第一篇:生物制药工程思考题第一章绪论1.生物药物的概念及21世纪生物药物的分类2.生物技术(Biotechnology)概念及现代生物技术的组成和特点3.基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术、发酵工程技术定义4.基因诊断、基因治疗概念5.生物技术在药学应用中的两类方式6.生物药物的两大来源及生物药物的特点7.生物制药的特点、生物制药基本过程及生物制药基本方法第二章基因工程制药复习思考题1.基因的概念及基因的一般特性2.基因工程药物的概念3.基因工程药物制药的主要流程4.基因工程药物建立分离纯化工艺的根据5.基因工程药物分离纯化的一般流程6.基因工程产品的质量控制内容7.基因工程药物临床前安全性评价的特殊性8.蛋白质工程的概念与基本流程第三章动物细胞工程制药复习思考题1.细胞定义、细胞的特征和细胞的化学组成2.细胞培养定义、细胞培养基本条件和基本过程3.细胞融合技术定义和基本过程4.细胞工程技术概念和动物细胞工程制药的基本概念5.动物细胞培养技术概念和动物细胞培养特点6.细胞株、细胞系、原代培养和传代培养的概念7.概念——抗体(antibody)、多克隆抗体(Polyclonalantibody,PcAb)、单克隆抗体(monoclonal antibody)、杂交瘤细胞(hybridoma)技术、抗体工程8.单抗制备的基本流程9.HAT培养基的选择培养杂交瘤细胞的原理10.单克隆抗体的鉴定与检测项目11.动物细胞的大规模培养方法12.干细胞、胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)、组织工程的概念及应用第四章植物细胞工程制药1.植物细胞工程制药的两大内容2.植物细胞的全能性定义和原理3.植物细胞特点——外植体(explant)、脱分(dedifferentiation)、再分化(redifferentiation)、愈伤组织(callus culture)概念4.植物细胞的培养方法6.植物细胞工程制药应用于哪些方面第五章发酵工程制药复习思考题1.发酵定义及发酵类型及特点2.发酵工程的定义和研究内容3.发酵工程制药的特点及其生产药物种类4.理想菌种应该具备哪些条件及菌种的选育方法和这些方法各自的特点5.菌种保藏的目的、关键和保藏方法6.培养基概念和培养基的配制原则7.发酵的基本过程是什么?微生物发酵方式有几种?8.发酵过程影响因素及控制10代谢工程定义11.发酵工程下游加工过程的的特点和一般程序简述各种主要的分离纯化方法的操作原理。
生物制药工艺学复习思考题答案
第一章生物药物概论1.生物药物有哪几类?DNA重组药物与基因药物有什么区别?( 1 )重组DNA药物(又称基因工程药物)(2)基因药物:以遗传物质DNA、RNA为物质基础制造的药物(3)天然生物药物(4)合成或半合成生物药物2.生物药物有哪些作用特点?(一)药理学(pharmacology)特性:1、活性强: 体内存在的天然活性物质。
2、治疗针对性强,基于生理生化机制。
3、毒副作用一般较少,营养价值高。
4、可能具免疫原性或产生过敏反应(二)、理化特性:1. 含量低、杂质多、工艺复杂、收率低、技术要求高;2. 组成结构复杂,具严格空间结构,才有生物活性。
对多种物理、化学、生物学因素不稳定。
3. 活性高,有效剂量小,对制品的有效性,安全性要严格要求(包括标准品的制订)。
3.DNA重组药物主要有哪几类?举例说明之。
1)细胞因子干扰素(IFN)类药物(2)细胞因子白介素类和肿瘤坏死因子(3)造血功能药物(4)生长因子类药物(5)重组蛋白和多肽类激素(6)心血管病治疗剂与酶制剂(7)重组疫苗与治疗性抗体4.术语:药物与药品生物药物,DNA重组药物:又称基因工程药物,应用基因工程和蛋白质工程技术制造的重组活多肽,蛋白质及其修饰物基因药物:这类药物是以基因物质(RNA或DNA及其衍生物)作为治疗的物质基础,包括基因治疗用的重组目的DNA片段、重组疫苗、反义药物和核酶等。
反义药物:以人工合成的10~几十个反义寡核苷酸序列与模板DNA或mRNA互补形成稳定的双链结构,抑制靶基因的转录和mRNA的翻译,从而起到抗肿瘤和抗病毒作用。
核酸疫苗:是指将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的载体上,然后直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,该抗原蛋白可直接诱导机体产生免疫应答。
RNAi :在实验室中是一种强大的实验工具,利用具有同源性的双链RNA(dsRNA)诱导序列特异的目标基因的沉寂,迅速阻断基因活性。
生物制药思考题(树达)
生物制药思考题(树达)生物制药概论1.生物药品和生物制药的概念2.?生物制药的主要研究内容及其代表性产品3.?按生化性质来分,生物药物主要有几类,指出各类代表性的产品及其用途4.?生物制药历史上里程碑式的发现、发明或关键技术的建立5.?基因工程技术、细胞工程技术、发酵工程和酶工程在医药工业中应用的主要内容6.?什么是基因治疗?目前考虑用基因治疗的疾病有哪些?7.?细胞因子的含义?哪些是细胞因子?基因工程制药1.?基因工程技术的含义2.?目前开发和上市的主要基因工程药品及其生化性质、基本用途。
3.目前基因工程制药中常用的目的基因克隆载体主要有哪几种?4.?克隆(无性繁殖)的含义?基因工程无性繁殖系的构建过程?5.?获得目的基因的主要方法?哪种在目前的基因工程技术中应用得更普遍??简要回答利用酶促合成法(逆转录法)制取目的基因的步骤?7.?请说出在基因工程技术中,从真核细胞总RNA中分离mRNA 的基本原理。
8.?采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术合成目的cDNA的一般程序是什么?9.?请说出聚合酶链式反应(PCR)体外扩增DNA技术的原理和步骤并图示说明。
10.?受体细胞、转化、转染、转导的含义。
11.?最常用的重组体(菌)的筛选方法有哪三种?12.?Sanger双脱氧链终止法测序的基本原理。
13.?请说明在原核细胞中表达真核基因,合成真核蛋白存在的主要问题。
14.?基因工程产物的分离纯化与传统发酵产物的分离纯化相比具有哪些特点?细胞工程制药1.?细胞工程的含义2.?细胞融合的含义3.?细胞融合的方法有哪几种?其基本原理是什么?4.?两种亲本细胞经过融合后,在其融合混合物种可能会存在几种类型的细胞?杂种细胞筛选的一般原理是什么?有哪些最常用的杂种细胞筛选系统??什么是杂种细胞的有用性状?有用性状的检测方法有哪些?6.?原生质体融合的含义?微生物原生质体融合育种的主要步骤是什么?7.?酶法进行微生物和植物细胞破壁时,不同酶与不同微生物或植物之间的对应关系如何?8.?植物原生质体融合后的杂种细胞有哪些筛选方法?9.?单克隆抗体的含义?利用杂交瘤技术制备单克隆抗体的一般过程如何?利用单克隆抗体检测病原微生物会产生假阳性吗?10.?利用HAT筛选系统筛选杂交瘤细胞的基本原理11.?什么是杂交瘤细胞的克隆化?克隆化的方法有哪些?12.?目前大规模生产单克隆抗体的方法有哪些,简述其基本原理?13.?单克隆抗体的应用14.?微生物的生物转化的含义?利用微生物的生物转化可生产哪些生物药品?15.什么是核酸适配体、肽配体?动植物细胞培养制药1.?动物细胞培养大致可生产哪些药物?2.?血清作为动物细胞培养基的补充成分有哪些优缺点?3.?请说出贴壁依赖性动物细胞的生长阶段并作简要说明4.?动物细胞培养支原体污染的主要处理方法5.?动物细胞类型及其培养方法,操作方式。
生物制药思考题
思考题一、绪论1.生物药物生物药物种类2.生物技术药物3.生物技术药物种类4、生物技术药物的主要特点及用途5、生物技术制药概念及特征6、简述我国生物技术制药行业状况及存在的问题?7、简述我国生物技术制药产业发展方向。
二、第二章1、生物药物概念2、生物药物特性有哪些?3、生物药物如何分类?4、蛋白质药物的分离纯化方法有哪些?5、核酸类药物的分离纯化方法有哪些?6、糖类药物的分离纯化方法有哪些?7、简述尿激酶制备过程。
三、第三章1、简述基因工程制药的基本程序。
2、采用哪两种方法来确定目的cDNA克隆?3、用蓝藻做宿主生产基因工程药物有什么优越性?4、简述基因工程菌中质粒不稳定的两个指标?如何计算质粒的稳定性?5、简述提高质粒稳定性的方法。
6、重组蛋白不同表达策略的优缺点7、简述基因工程药物分离纯化工艺设计中必须考虑的药物的5个特点。
8、简述重组蛋白(包涵体)的复性过程?9、简述基因工程制备胰岛素的三种方法?10、简述基因工程制备干扰素 2b的二种方法?11、简述基因工程法制备重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的方法?第四章1、动物细胞体外培养形态有哪三种?2、动物细胞体外生长三阶段?3、动物细胞培养方法?4、动物细胞培养操作方式有哪些?5、简述动物细胞工程制药过程?6、药物生产用动物细胞的来源有哪些?7、常用生产用动物细胞系?8、高效表达工程细胞株的筛选方法?9、什么是原始细胞库和生产用细胞库?10、简述利用动物细胞工程法生产促红细胞生成素的过程?11、试述利用动物细胞工程法生产乙肝疫苗的过程?第五章1、名词解释:抗体工程药物 CDR移植抗体 Fab抗体 Fv抗体单链抗体单域抗体双特异抗体噬菌体抗体库技术2、抗体药物存在的问题有哪些?主要研究方向在哪?3、简述单克隆抗体的制备方法?4、基因工程抗体有哪些?简述单链抗体的优缺点?5、简述抗体库技术优点?6、试述噬菌体抗体库的制备方法7、简述单克隆抗体杂交瘤技术与噬菌体抗体技术区别?8、抗体诊断试剂有哪些类型?第六章1、微生物次级代谢产物生物合成的特点?2、微生物药物生产的优点?3、微生物药物包括哪些?4、新型微生物药物的筛选方法?5、微生物药物合成的生源有哪些?6、简述基因工程技术在改进微生物菌种方面的应用。
《生物制药工艺学》复习思考题.docx
《生物制药工艺学》复习思考题第一章生物药物概论1、生物药物有哪几类?DNA重组药物与基因药物有什么区别?2、生物药物有哪些作用特点?DNA重组药物主要有哪几类?举例说明之。
DNA重组药物是基因药物中的一个类别也就是说DNA重组药物是属于基因药物的其次,这两种药物多是由经过遗传物质改变的微生物合成的,二者的根本区别在于DNA 重组药物里的遗传物质改变(包括DNA的插入等过程)的原料仍然来自于生物界,也就是自然界原有遗传物质的重组。
但基因药物遗传物质多为人工合成。
所以,安全性上讲,重组药物比基因药物要安全的多。
3、术语:药物与药品,生物药物,DNA重组药物,基因药物,反义药物,核酸疫苗, RNAi第二章生物制药工艺技术基础1、生物活性物质的浓缩与干燥有哪些主要方法?2、简述生物活性物质分离纯化的特点和分离纯化的主要原理。
3、怎样保存微生物菌种?何谓菌种退化?如何检查菌种退化?4、诱变育种的总体流程是怎样的?选择出发菌需注意哪些事项?5、生物制药工艺中试放大的目的是什么?6、酶固定化的方法有哪些类别?7、术语:冷冻干燥,喷雾干燥,薄膜浓缩,自然选育,诱变育种,蛋白质工程,转基因动物,蛋白质组学,酶工程,immobilized enzyme,抗体酶,模拟酶,组合生物合成, 药物基因组学,DNAShuffling,定向进化,甘油冷冻保藏法,液氮保藏法,斜面保藏法, 沙土管保藏法第三章生物材料的预处理1、去除发酵液中杂蛋白有哪几种方法?2、去除发酵液中钙、镁、铁离子的方法有哪些?3、影响絮凝效果的主要因素有哪些?4、细胞破碎有哪些方法?各有什么特点?5、超声波破碎细胞的原理?6、术语:凝聚作用,絮凝作用,渗透压冲击法,错流过滤,超声波破壁,酶法破壁,高压匀浆法,高速珠磨法,反复冻融法,渗透压冲击法,液氮研磨法,丙酮粉第四章萃取法1、溶剂萃取法的基本原理,其特点是什么?2、溶剂萃取法按操作方式不同,可分为哪几类?各有什么特点?3、影响有机溶剂萃取的因素有哪些?萃取剂的选择需遵循哪些原则?4、使用有机溶剂萃取时,改变pH值将如何影响酸性或碱性抗生素的分配系数?5、乳化剂为何能使乳状液稳定?6、破坏乳状液的方法有哪些?7、影响乳状液类型的因素有哪些?8、双水相萃取的优缺点有哪些?影响双水相萃取的因素有哪些?9、超临界流体萃取有哪些特点?常用的流体为哪种?影响超临界流体萃取的因素有哪些?超临界萃取的流程主要有哪几种类型?10、术语:有机溶剂萃取,反萃取,双节线,多级错流萃取,多级逆流萃取,反胶束萃取,超临界流体萃取,双水相萃取,能斯特分配定律,表观分配系数,萃取因素,萃取剂,萃余液,HLB值第五章沉淀和结晶1、什么是“盐析沉淀” ?盐析的基本原理?2、影响盐析效果的因素有哪些?3、影响有机溶剂沉淀的因素有哪些?4、有哪些方法可形成过饱和溶液?5、哪些因素可影响晶体的大小?6、等电点沉淀有哪些特点?如何应用?7、术语:Ks盐析,B盐析,盐析分布曲线,透析结晶法,亲和沉淀,选择性变性沉淀第六章吸附法1、化学吸附与物理吸附的区别?2、吸附剂及被吸附物的极性对吸附的影响如何?3、吸附剂用量及被吸附物浓度对吸附效果的影响如何?4、例举两种以上常用吸附剂的性质和用途。
生物技术制药课后思考题
生物技术制药课后思考题第一章:绪论思考题1.什么是生物技术?生物技术所包含的内容及定义。
答:1)生物技术又称生物工程,指人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的的技术。
2)包括基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程、抗体工程、糖链工程、海洋生物技术及生物转化等。
(具体定义见P1)。
2.生物技术药物的概念及分类。
答:1)指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物,主要是重组蛋白或核酸类药物。
2)a.按照用途:预防、诊断、治疗;b.按作用类型:细胞因子类、激素类、酶类、疫苗、单克隆抗体类、反义核酸、RNA干扰类、基因治疗药物;c.按照生化特性:多肽类、蛋白质类、核酸类、聚乙二醇化多肽或蛋白质。
3.生物技术药物在理化性质、药理学与作用、生产制备和质量控制方面的特性。
答:1)理化性质(从药物多是蛋白质或核酸出发):a.相对分子质量大;b.结构复杂;c.稳定性差;2)药理学作用:a.活性与作用机制明确;b.作用针对性强;c.毒性低;d.体内半衰期短;e.有种属特异性;f.可产生免疫原性;3)生产制备特性:a.药物分子在原料中含量低;b.原料中常存在降解目标产物的杂质;c.制备工艺条件温和;d.分离纯化困难;e.产品易受有害物质污染;4)质量控制特性:a.质量标准内容的特殊性;b.制造项下的特殊规定;c.检定项下的特殊规定。
4.生物技术制药的概念和主要研究内容与任务。
答:1)指利用基因工程、细胞工程等生物技术的原理和方法,来研究、开发和生产预防、治疗和诊断疾病的药物的一门科学。
2)主要研究内容与任务:a.生物制药技术的研究、开发与应用;b.利用生物技术研究、开发和生产药物。
第二章:基因工程制药思考题1.简述基因工程制药的基本原理和基本流程。
答:1)利用重组DNA技术将外源基因导入到宿主菌或宿主细胞进行大规模培养和诱导表达以获取蛋白质药物的过程称为基因工程制药。
药物分析思考题
(十四)1.三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据(原理)是什么?答:⑴物质对光的吸收具有加和性;⑵杂质的无关吸收在310~ 340 nm波长范围内呈一条直线,且随波长的增大吸收度减小。
2.用三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量时,三点波长选择的原则是什么?第一法和第二法有何不同?答:三点波长的选择原则为一点选择在维生素A的最大吸收波长处(即λ1);其他两点选择在λ1的两侧各选一点(λ2和λ3)。
(1)等波长差法:使λ3-λ1=λ1-λ2.Chp2010规定,测定维生素A醋酸酯时,λ1=328nm; λ2 =316nm; λ3=340nm,△λ=12nm.(2)等吸收比法:使Aλ2=A λ3=6/7A λ1.Chp2010规定,测定维生素A醇时,λ1=325nm; λ2 =310nm; λ3=334nm。
3.Chp收载的两种测定维生素A的方法:★第一法(等波长差法)(适用于酯式维生素A的测定)★第二法(等吸收比法)(适用于维生素A醇的测定)。
4.测定维生素A含量的基本步骤:第一步:选择A (A328 或A328(校正后))第二步:求百分吸光系数。
第三步:求效价效价(IU/g)(样)=百分吸光系数*换算因数。
第四步:求标示量的百分含量。
5.维生素C的性质:⑴溶解性水中易溶,水溶液呈酸性。
在乙醇中略溶,在三氯甲烷或乙醚中不溶。
⑵酸性:烯二醇结构—酸性。
▲C3-OH,pKa=4.17(共轭效应) ▲C2-OH,pKa=11.57(邻位羰基) 。
一元酸.能与NaHCO3作用生成钠盐。
⑶旋光性:维生素C分子中具有2个手性C原子,具有4种光学异构体。
其中生理活性最强的是L(+)-抗坏血酸。
⑷还原性:烯二醇基具极强的还原性,易被氧化为二酮基而成为去氢抗坏血酸,加氢又可被还原为抗坏血酸。
⑸水解性维生素C因双使内酯环变得较稳定,和碳酸钠作用可生成单钠盐,不致发生水解。
但在强碱中,内酯环可水解,生成酮酸盐⑹具有糖的性质:VC结构类似糖结构,Molish试验。
生物药物分析思考题
⽣物药物分析思考题1.⽣物药物的特点?p71)相对分⼦质量的测定2)⽣物活性检查3)安全性检查4)效价测定5)⽣化法确证结构2.⽣物制品的质量检定包括哪些⽅⾯?p14⽣物制品的检定⼀般分理化检定、安全检定、效⼒检定三个⽅⾯3.⽣物药物常⽤的定量⽅法有哪些?p171)酶法2)电泳法3)理化测定法4)⽣物检定法4.什么是电泳?如何对其分类,分别有哪些?p94电泳是指带电粒⼦在电场中向与⾃⾝带相反电荷的电极移动的现象。
按⽀持物,可分纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳,琼脂糖凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
按凝胶形状分有⽔平平板电泳、圆盘柱状电泳及垂直平板电泳。
5.影响电泳迁移率的因素包括?p951)带电颗粒的性质2)电场强度3)溶液的ph值4)溶液的离⼦强度5)电渗作⽤6.⾎清蛋⽩常⽤什么电泳技术分离?核酸常⽤什么电泳技术分离?p99⾎清蛋⽩常⽤醋酸纤维素薄膜电泳技术分离,核酸常⽤琼脂糖凝胶电泳技术分离7.为什么聚丙烯酰胺凝胶电泳是应⽤最⼴泛的凝胶电泳技术?p1001)聚丙烯酰胺聚合物分⼦中可解离的基因很少,因⽽电渗作⽤⼩,对样品的吸附作⽤很⼩,容易制备,并可再⽣吸收。
2)凝胶的孔径可以按需要控制其⼤⼩,因⽽具有可拉的分⼦筛效应,可以根据要分离物质分⼦的⼤⼩,选择适合的凝胶成分,使之既有适宜的空隙度,⼜有⽐较好的机械性质。
3)在⼀定浓度范围聚丙烯暗暗对热稳定。
凝胶⼏乎⽆⾊透明,因⽽电涌结果易观察,可⽤检测仪直接测定。
4)丙烯酰胺是⽐较纯的化合物,可以精制,减少污染。
5)聚丙烯酰胺凝胶在280n波长处没有吸收,利于样品蛋⽩电泳后的扫描检测。
8.SDS-PAGE电泳⽤于测定?其中SDS的作⽤是什么?p102SDS-PAGE电泳⽤于测定蛋⽩质的分⼦量。
SDS的作⽤是使蛋⽩质所带的负电荷远远超过天然蛋⽩分⼦的净电荷,消除了不同蛋⽩分⼦的电荷效应。
9.核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于哪三个因素?p98核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分⼦的⼤⼩、核酸分⼦的形状三个因素10.DNA分⼦在琼脂糖凝胶中泳动时,有什么效应与什么效应?DNA分⼦在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分⼦筛效应11.聚丙烯酰胺凝胶电泳包括连续系统和不连续电泳,其定义和区别分别是什么?p102 & web12.什么是分⼦筛效应?p95分⼦筛效应:分⼦量或分⼦⼤⼩和形状不同的蛋⽩质通过⼀定的孔径分离胶时,受阻滞的程度不同⽽表现出不同的迁移率,这就是分⼦筛效应。
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思考题
*生物药物的特点?
答:组成结构复杂,具有严格的空间构像,以维持其特定的生理功能。
要测定分子量(组分相同的、分子质量不同、活性不同)要测定生物活性(和药效相关)要效价测定(除含量测定,要效价测定或酶活力测定表明有效成分含量)要确定结构(如氨基酸序列分析)
*生物制品的质量检定包括哪些方面?
答:理化测定.安全检定效力检定
*生物药物常用的定量方法有哪些?
答:酶法电泳法理化测定生物检定法
*什么是电泳?如何对其分类,分别有哪些?
答:电泳是指带电粒子在电场力的作用下与自身所带相反的电荷方向移动
分类。
按支持物可分为:纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳。
按凝胶形状可分为:水平平板电泳,圆盘柱状电泳,垂直平板电泳。
*影响电泳迁移率的因素包括?
答:,带电粒子的性质,电子带静电荷越多,越接近球形,电泳速度快
,电场强度,越强速度越快溶液的值,对于蛋白质来说,当接近等电点,速度越快,溶液离子强度,离子强度越小,速度越快电渗作用
*血清蛋白常用什么电泳技术分离?核酸常用什么电泳技术分离?
答:血清蛋白:常用醋酸纤维素薄膜电泳;核酸:琼脂糖电泳
*为什么聚丙烯酰胺凝胶电泳是应用最广泛的凝胶电泳技术?
答:聚丙烯酰胺聚合物分子解离基因量很少,故电渗作用小,对样品吸附作用小,容易制备,并可在吸收机械性较好,孔隙可以调节凝胶比重实现可调,具有可拉性分析筛效应,一定范围对热稳定,无色透明,容易观察,丙烯酰胺较纯,可精制,污染小聚丙烯酰胺凝胶在没有吸收利于样品蛋白质电泳后的扫描检测。
*电泳用于测定?其中的作用是什么?
答:主要是用来测定蛋白质的分子量,其中作用有两个:,消除不同蛋白表面表面电荷效应,引起蛋白构象改变,消除蛋白质的结构效应.
*核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于哪三个因素?
答:琼脂糖浓度,核酸分子的大小,核酸的形状
*分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有什么效应与什么效应?
答:分子筛效应和电荷效应
*聚丙烯酰胺凝胶电泳包括连续系统和不连续电泳,其定义和区别分别是什么?
答:.连续系统:缓冲液的离子成分、、凝胶浓度、电位梯度都相同,带电颗粒电泳时仅具有电荷效应、分子筛效应。
.不连续系统:缓冲液离子成分、、凝胶浓度、电位梯度不连续,带电颗粒电泳时具有浓缩效应、电荷效应、分子筛效应。
区别:不连续系统能使稀样品在电泳过程中浓缩成层,从而提高分离条带清晰度以及分辨率。
*什么是分子筛效应?
答:分子量或分子大小和形状不同的蛋白质通过一定孔径分离胶时,受阻滞的
程度不同而表现出不同的迁移率,这就是分子筛效应。
分子量小,阻力小,移动快;分子量大,阻力大,移动慢。
什么是等电点?什么是等电聚焦?
答:在某一的溶液中,当两性例子的正负电荷值相等,该值为等电点。
等电聚焦:在电泳槽中放入载体的两性点解质形成一个由阳极到阴极增加的梯度,当蛋白质放进此体系时,不同蛋白质即移动到或者聚焦于与其等电点相当的值的位置上。
*在生物大分子的高效液相色谱分离分析中,哪些是常用的分离模式?各分离模式的原理和应用对象是什么?
答:常用的分离模式为:吸附色谱,分配色谱,离子交换色谱,体积排阻色谱,亲和色谱
吸附色谱:机理:依靠分离物质和流动相分子竞争固定相的活性位置,从而使溶质洗脱下来
对象:几何异构体,磷脂,甾体,脂溶性维生素,前列腺素
分配色谱:机理:利用被分离物质在两相的分配系数不同而使组分分离
对象:氨基酸,多肽分析,蛋白质分离,碱基核酸和核酸酶,糖类
离子交换色谱:机理:组分离子与树脂上的可交换例子基团进行可逆交换,根据组分离子对树脂的亲和不同而达到分离。
对象:例子或者可离解的化合物,如氨基酸,多肽核酸,核苷和碱基
体积排阻色谱:机理:组分通过体积排阻色谱中的固定相(多孔隙凝胶),产生分子筛效应来实现分离。
对象:高聚物,蛋白质
亲和色谱:机理:样品中各种物质与固定相载体配基之间亲和作用的差别而实现分离
对象:酶,酶抑制剂,抗体,抗原,受体
*简述亲和色谱的分离机理。
答:机理:样品中各种物质与固定相载体配基之间亲和作用的差别而实现分离,,过程是待测物质和配机间的亲和复合物形成及其解离的过程,对于非转移性的吸附的杂质,可用缓冲液洗去。
*什么是生物检定法?
答:生物检定法:利用药物对生物(整体和离体)的作用,来测定其生物活性的一种定量方法。
应用范围:药物效价的测定,药物毒性成分和有害物质的限度检查,新药的研发
氨基酸、蛋白质
*氨基酸最常用的鉴别方法是什么?
答:氨基酸的茚三酮检测法,现象:显蓝紫色
*蛋白质多用什么提取?
答:水溶液提取(稀盐溶液提取,以下,碘乙酸防水解),有机溶液提取(乙醇,丙酮,丁醇提取脂类蛋白),表面活性剂提取(非离子型表面活性剂)
*蛋白质的纯化方法有哪些?
答:. 沉淀法(,有机溶剂,盐析,等电点,热处理). 色谱法(离子交换,亲和,疏水,体积排阻). 电泳法(聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦). 离心法. 膜分离法(透析). 双水相系统萃取法
*什么是盐溶?什么是盐析?。