食用菌生产技术 原种和栽培种的接种和培养
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原种和栽培种的接种和培养
培养基经配制和灭菌后,便可进行接种。
为避免接种过程中污染杂菌,接种工作要在无菌室或接种箱中进行。
无菌室的体积要求不宜过大,一般6~8立方米,能供一、二人操作即可。
室内装有紫外线杀菌灯,门窗关闭后里面的空气能与外界隔绝,经消毒就能造成无菌条件。
若没有无菌室也可用洁净的小房间代替,但必须进行严格的消毒灭菌。
接种箱是代替无菌室的密闭透明小箱。
具有体积小,简单轻便,消毒彻底等优点。
一般长100厘米,宽60厘米,高50~60厘米,顶部向两边倾斜,安装透明玻璃。
箱里装有紫外线杀菌灯,或用福尔马林和高锰酸钾混合熏蒸灭菌,人在箱外,只用两只手伸入箱内进行接种操作,效果好,成功率高。
无菌室和接种箱的灭菌方法,常用的有下列几种:
1.紫外灯灭菌用于空气中灭菌,30瓦紫外灯距桌面1米照射15分钟或30分钟。
2.化学药品灭菌所用化学药品的种类甚多,主要的是:
(1)70%酒精用于接种针以及接种人员的手和玻璃器具的表面杀菌。
(2)5%石碳酸用于空间喷雾灭菌。
(3)0.1%升汞水用于分离材料的表面消毒。
(4)甲醛溶液用于空间熏蒸灭菌,可将福尔马林放在瓷器中,直接加热使其蒸发,或于容器中先加入高锰酸钾,其用量为福尔马林重量的10%以上,然后倒入福尔马林,使其蒸发,一般每一立方米体积用10毫升福尔马林即可。
3.火焰灭菌用于接种针或其他金属用具的灭菌,可直接在酒精灯火焰上烧红。
此外,在接种过程中,将试管口,菌种瓶口等采用通过火焰的方式也可达到灭菌的目的。
培养基经灭菌之后,在无菌室或接种箱中,用接种针在酒精灯火焰上,迅速从试管母种中挑一小块带有培养基的菌丝体,放在瓶内的培养基上即成原种。
接种后的原种应放在培养室中培养,培养室的大小要适当,过大保温比较困难。
四周墙壁用砖砌,石灰粉刷,地面铺水泥,设有通气窗,最好有调温调湿装置,并严格做好消毒灭菌。
温度保持在23~26℃之间,培养一个月左右,待菌丝长满全瓶后,即可用来接栽培种。
栽培种的培养基其配制方法和灭菌等大致与原种相同,但装瓶应满些,至瓶肩处为宜。
一般每瓶原种可转接栽培种60~80瓶。
扩种的操作过程
母种分离材料的选择
1.子实体的选择
无论是用作孢子分离或组织分离的子实体,都要从产量高,长势好,适应性强,无杂菌虫害的群体中,选择朵大,生长健壮的单生子实体作为分离的材料。
选作分离的子实体,成熟度要适当,如蘑菇、草菇具有菌膜,最好选菌膜将破而未破的成熟度,这种子实体发育已成熟,子实层又未受污染,因此能很快散出大量的无菌孢子。
对没有菌膜或菌膜自幼已破的食用菌,如香菇、平菇等,则以选取八分熟,正在释放孢子的个体为最好;因
为刚从担子弹射出来的孢子基本上也是无菌的。
2.菇木和耳本的选择
木生食用菌如香菇、银耳、黑木耳等,可以从它们生长的基质,即菇木和耳木作为分离的材料。
选择时,应从野生或人工栽培场所挑选子实体生长健壮,朵大,长势好,菌丝在段木中发育旺盛,材质较为结实,尚未腐烂,一般是接种后一年内已出菇、出耳而无杂菌害虫感染的幼龄菇木或耳木为最好。
采去子实体后,截取适当部位,挂于通风处风干后,供分离时用。