各种因素对家兔血液凝固的影响-最终论文修改
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各种因素对家兔血液凝固的影响
专业:临床医学
班级:
实验小组:第三实验室第一小组
小组成员:邓荒
各种因素对家兔血液凝固的影响
邓荒
(XX医学院临床医学,贵州 XX 123456)
【摘要】目的探究各种因素对血液凝固的影响及机制。
方法对新鲜家兔血液分别做置于室温、低温、加肺组织浸液、棉花、加肝素、加草酸钾、用竹签搅动处理,观察记录其凝血时间并与不做任何处理的血液凝固时间进行对比,分析凝血时间的变化。
结果草酸钾、肝素、低温处理的血液凝固时间较室温长,放少许棉花、肺组织浸液处理后的血液凝固时间较室温短,用竹签搅动过的血液不再凝固。
结论草酸钾、肝素、低温可抑制血液凝固;增加粗糙面、组织因子可促进血液凝固;纤维蛋白是血液凝固过程中所产生的不可少的物质。
【关键词】血液;血液凝固因子;肝素;草酸钾
V arious factors on the impact of blood coagulation in rabbits
TANG Jun, LI Y a-Qi, LU Chi-Shuang, WU Chang-Min-Jie, LIU Y e, LI Jun,W ANG Dan, ZHOU Jun, RAN Jun-Hao, ZHU Nan.
Clinical 09 G Class,XX Medical College,XX 123456,Guizhou,China
【Abstract】Objective To explore the various factors on blood coagulation and its mechanism. Methods Fresh rabbit blood were done at room temperature, low temperature,plus heparin, potassium oxalate, stirred with a bamboo handle, and observed and recorded the clotting time of blood with no treatment clotting time compared to analyze changes in clotting time. Results The potassium oxalate, heparin, low-temperature processing of blood clotting time longer than the room temperature, put a little cotton, the lung tissue after infusion of blood clotting time shorter than the room temperature, stirred with a bamboo stick through the blood does not and then solidified. Conclusion The potassium oxalate, heparin, low temperature can inhibit blood coagulation; increase the rough surface, tissue factor can promote blood coagulation; fiber protein is produced by the process of blood coagulation in the essential material.
【Key words】Blood; Blood Coagulation Factors; Heparin; Potassium oxalate
血液凝固参与生理性止血的过程,是机体重要的保护机制之一。
血液凝固的关键过程是血浆中溶胶状态的纤维蛋白原转变成凝胶状态的纤维蛋白。
多聚体纤维蛋白交织成网,将大量血细胞网罗其中形成血凝块。
血液凝固是一系列复杂的酶促反应过程,需要多种凝血因子的参与。
本次实验将观察各种因素对血液凝固的影响并探究血液凝固的机制。
1材料和方法1.1材料
1.1.1实验动物家免两只,贵阳医学院动物实验中心提供。
1.1.2实验药品 25%氨基甲酸乙酯溶液,肝素(8 U/ml),2%草酸钾溶液,生理盐水,肺组织浸液(取兔肺剪碎,洗净血液,浸泡于3~4倍量的生理盐水中过夜,过滤收集的滤液即成肺组织浸液,存冰箱中备用)。
1.1.3实验仪器免手术台,哺乳动物手术器械,动脉夹,动脉插管(或细塑料导管),注射器( 5
ml,10 ml),试管6支,小烧杯2个,试管架,竹签1束(或细试管刷),秒表,三角尺[3]。
1.2方法
1.2.1动脉插管行家兔右颈总动脉插管术[1],准备放血。
1.2.2试管处理取6支试管,编号。
1号试管置于室温作为对照组,将2号试管置于冰水中,3号试管滴加肺组织浸液0.1 ml,4号试管中放入少许棉花,5号试管滴加8U/ml肝素0.1 ml,6号试管滴加2%草酸钾0.1 ml。
1.2.3放血由动脉插管依次向6支试管放血,每管2ml,血液进入试管起开始计时,每隔15s,将试管倾斜30度,观察血液是否流动,血液突然停止时,终止计时,从开始计时至终止计时的时间为血液凝固时间。
1.2.4烧杯处理准备100ml的烧杯2个,编号。
分别放血10ml,同时计时, 1号烧杯作为对照不做任何处理。
2号烧杯用竹签朝一方向搅动血液,待竹签上出现凝血块时,停止计时,记录凝血时间, 并观察去纤维蛋白的血液是否凝固。
2结果
草酸钾、肝素、低温处理的血液凝固时间较室温长,放少许棉花、肺组织浸液处理后的血液凝固时间较生理盐水短,详见表1。
烧杯1中血液不做任何处理,正常凝血。
烧杯2中不断用竹签搅动血液,1h后竹签上缠绕有白色丝状物,血液不再凝固,详见表1。
表 1 某些因素对家兔血液凝固影响
注:实验室室温7℃
3讨论
3.1血液凝固机理血液凝固的化学本质是溶胶状态的纤维蛋白原转变成凝胶状态的纤维蛋白,催化此反应的主要是凝血酶。
而正常血液中以无活性的凝血酶原形式存在,在一定条件下被激活而成为凝血酶。
凝血酶原激活物是由活化的凝血因子和磷脂胶粒和钙的形式复合物,因此凝血因子的活化是导致血液凝固的触发机制,据触发凝血过程的形式不同,又有内源性和外源性凝血之分。
内源性凝血是指因心血管内膜受损或血液抽出机体外接触异物表面而触发的,仅有血管内凝血因子参与的凝血过程;外源性凝血则指有损组织释放的组织凝血活素所参与的凝血过程
[2]。
3.2低温对凝血的影响将血液置于冰块中,凝血时间较室温长。
因此,本次实验证明低温可抑制凝血作用。
其机制为凝血酶发挥作用需要适宜的温度,温度适宜时,凝血酶活性高,血凝速度快。
温度较低时凝血酶活性低,血凝速度慢。
3.3肺组织浸液对凝血的影响肺组织浸液含组织因子,而组织因子在凝血过程中起促进作用。
组织
试管号影响因素凝血时间(min:s)
1 室温19:23
2 置于冰水中48:13
3 肺组织浸液0.1 ml 1:00
4 少许棉花4:26
5 8U/ml肝素0.1 ml 52:39
6 2%草酸钾0.1 ml 61:48
烧杯1 加血10 ml不加任何处理正常凝血
烧杯2 加血10 ml用竹签不断搅动竹签上缠绕有白色丝状物,血液不凝固
因子是一种脂蛋白复合物,含有大量磷脂。
当它进入血浆后。
血浆中的钙离子将因子Ⅶ连接于组织因子的磷脂上,形成复合物,后者可使凝血因子Ⅹ活化为Ⅹα,并与Ca2+、因子V和血小板磷脂相互作用而形成凝血酶原激活物,然后通过与内源性凝血系统后阶段相同的途径,完成凝血的化学反应[3]。
因此,肺组织浸液可促进血液凝固,本次实验中加入肺组织浸液0.1ml后血液凝固时间明显缩短。
3.4棉花对血液凝固的影响实验中在血液中放入少许棉花后血液凝固时间较室温缩短。
棉花给血液凝固提供了一个粗糙的表面。
粗糙表面可引发血小板集聚,而相对光滑的表面可阻止纤维蛋白和血小板聚集的粘附。
3.5肝素对血液凝固的影响实验中肝素延长了凝血时间,机理如下。
肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。
静脉注射后,抗凝作用立即发生,这与其带大量负电荷有关,可使多种凝血因子灭活。
这一作用依赖于抗凝血酶Ⅲ(antithrombin Ⅲ,AT Ⅲ)。
AT Ⅲ是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸的蛋白酶的抑制剂。
它与凝血酶通过精氨酸-丝氨酸肽键相结合。
形成AT Ⅲ凝血酶复合物而使酶灭活,肝素可加速这一反应达千倍以上。
肝素与AT Ⅲ所含的赖氨酸结合后引起AT Ⅲ构象改变,使AT Ⅲ所含的精氨酸残基更易与凝血酶的丝氨酸残基结合。
一旦肝素—AT Ⅲ凝血酶复合物形成,肝素就从复合物上解离,再次与另一分子AT Ⅲ结合而被反复利用。
AT Ⅲ-凝血酶复合物则被网状内皮系统所消除。
抑制凝血酶活性的作用与肝素分子长度有关。
分子越长则酶抑制作用越大[4]。
3.6草酸钾对凝血的影响在众多的凝血因子中,凝血因子Ⅳ是Ca2+,而其他的凝血因子均属蛋白类。
Ca2+可与草酸盐、柠檬酸盐、氟化钠等生成螯合物而除去,使凝血酶源不能激活,从而产生抗凝效果。
3.7竹签搅动对血液凝固的影响实验中用竹签不断搅拌血液1 h后,即使停止搅拌,血液也不再凝固。
而在竹签上可见白色丝状物,该物质即为不溶性的纤维蛋白。
血液凝固的实质就是血浆中的可溶性纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白的过程。
纤维蛋白交织成网,把血细胞和血液的其他成分网罗在内,从而形成血凝块。
用竹签搅动后不容性的纤维蛋白被粘附在竹签上,血液中可溶性纤维蛋白原被完全消耗后,不再产生不溶性的纤维蛋白,血液自然无法凝固。
参考文献
[1]机能实验学/杨芳炬主编.—北京:高等教育出版社,
2010.1:67-68.
[2]汪学荣,周成兰.血液凝固机理的研究[J].肉类研究,
2005(11):45-47.
[3]朱大年.生理学[M].第7版.北京:人民卫生出版社,
2009:63.
[4]药理学/杨宝峰主编.—7版.—北京:人民卫生出版社,
2008.1:282-284.。