BIO2020C-1
《中国药典》2020—注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子原液相关蛋白检测国家药品标准公示稿
注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子原液相关蛋白检测依法测定（通则 0512）。
色谱柱采用四烷基硅烷键合硅胶为填充剂（如： C 4 柱，4.6mm×15cm，粒径 5μm 或其他适宜的色谱柱），柱温为室温；以 0.1%三氟乙酸的水溶液为流动相 A ，以 0.1%三氟乙酸-90%乙腈的水溶液为流动相B ；流速为 1.2ml/min ；在波长 214nm 处检测；按下表进行梯度洗脱。
用稀释液（pH7.0 的磷酸盐缓冲液）将供试品稀释至每 1ml 中约含 0.5mg ，作为供试品溶液；用稀释液将对照品稀释至每 1ml 中约含 0.5mg ，作为对照品溶液 A ；取对照品溶液 A 与每 1ml 中约含 0.125mg 的人或牛血清白蛋白溶液 （溶剂为稀释液），按体积比 1:4 混匀作为对照品溶液 B 。
取供试品溶液与对照品溶液 A 、B 各 100µl 注入液相色谱仪。
供试品溶液与对照品溶液 A 、B 图谱中，粒细胞巨噬细胞刺激因子主峰的保留时间应一致，约为 22 分钟。
对照品溶液 B 图谱中，主峰与人或牛血清白蛋白峰的分离度应不小于 2，重复进样（不少于 4 次）所得主峰峰面积的 RSD 应不大于 1.5%。
按面积归一化法只计算保留时间为 5～30 分钟的相关蛋白峰面积，单个相关蛋白峰面积应大不于总面积的 1.5%，所有相关蛋白峰面积应不大于总面积的4.0%。
备注：在该品种原液检定项下，3.1.4 纯度之后增加 3.1.5 相关蛋白项（具体内容见上文：注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子原液中相关蛋白检测）， 后续检测项目编号依次递增。
时间（分钟） A （%） B （%） 0 64 36 30 44 56 35 0 100 45 0 100 5064 36 60 64 36。
碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌耐药性及耐药基因分析
㊃论 著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2023.18.009碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌耐药性及耐药基因分析*侯素君1,尹盟盟1,王均梅1,别海文1,梁永娟1,朱元祺21.山东省日照市中医医院检验科,山东日照276800;2.青岛大学附属医院检验科,山东青岛266003摘 要:目的 探讨医院碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(C R E )的临床耐药性及耐药表型和基因型,为医院C R E 菌株感染的临床治疗及医院感染暴发的预防和控制提供科学依据㊂方法 收集2020年7月至2023年1月日照市中医医院临床患者标本中分离的77株C R E 菌株,采用全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药敏试验,采用改良碳青霉烯酶灭活试验(m C I M )和乙二胺四乙酸(E D T A )改良碳青霉烯酶灭活试验(e C I M )联合检测碳青霉烯酶表型,采用聚合酶链反应(P C R )扩增耐药基因并进行测序分型㊂结果 77株C R E 菌株主要分离自痰液,其次是尿液㊁胸腔积液;科室来源主要是颅脑外科㊁重症医学科㊁脑卒中监护室㊂C R E 菌株中肺炎克雷伯菌33株,大肠埃希菌15株,阴沟肠杆菌12株,其他细菌17株㊂C R E 菌株对替加环素敏感性为97.4%,阿米卡星为44.2%,复方磺胺甲噁唑为39.0%,对其他抗菌药物的敏感性均低于20.0%㊂m C I M 筛选碳青霉烯酶菌株的灵敏度为95.9%,特异度为100.0%㊂P C R 扩增结果显示49株C R E 菌株携带N D M 基因,24株C R E 菌株携带K P C 基因,1株C R E 菌株携带I M P 基因,3株未检出碳青霉烯酶基因;基因测序比对确定耐药基因亚型分别为b l a K P C -2㊁b l a N D M -1㊁b l a I M P -4㊂结论 C R E 菌株以肺炎克雷伯菌㊁大肠埃希菌㊁阴沟肠杆菌为主,具有较强的耐药性,肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药基因主要为b l a K P C -2㊁大肠埃希菌耐药基因主要为b l a N D M -1,阴沟肠杆菌耐药基因主要为b l a N D M -1,临床需加强C R E 菌株检测,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物,防范其在医院内暴发流行㊂关键词:碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌; 细菌耐药性; 耐药基因中图法分类号:R 446.5文献标志码:A 文章编号:1672-9455(2023)18-2667-05A n a l y s i s o n d r u g r e s i s t a n c e a n d d r u g r e s i s t a n c e g e n e s o f c a r b a pe n e m -r e s i s t a n t E n t e r o b a c t e r i a c e a e b a c t e r i a*H O U S u j u n 1,Y I N M e n g m e n g 1,WA N G J u n m e i 1,B I E H a i w e n 1,L I A N G Y o n g j u a n 1,Z HU Y u a n qi 21.D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,R i z h a o M u n i c i p a l H o s p i t a l o f Tr a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e ,R i z h a o ,S h a n d o n g 276800,C h i n a ;2.D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f Q i n g d a o U n i v e r s i t y ,Q i n g d a o ,S h a n d o n g 266003,C h i n a A b s t r a c t :O b je c t i v e T o e x p l o r e t h e c l i n i c a l d r u g r e s i s t a n c e ,d r u g r e s i s t a n c e p h e n o t y p e s a n d g e n o t y p e s of c a r b a p e n e m -r e s i s t a n t E n t e r o b a c t e r i a c e a e (C R E )b a c t e r i a i n t h e h o s p i t a l s o a s t o p r o v i d e a s c i e n t i f i c b a s i s f o r t h e c l i n i c a l t r e a t m e n t o f C R E b a c t e r i a l s t r a i n s i n f e c t i o n a n d t h e p r e v e n t i o n a n d c o n t r o l o f t h e C R E b a c t e r i a l s t r a i n s i n f e c t i o n o u t b r e a k s .M e t h o d s S e v e n t y -s e v e n C R E s t r a i n s i s o l a t e d f r o m t h e c l i n i c a l p a t i e n t s s a m pl e s i n R i z h a o M u n i c i p a l H o s p i t a l o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e f r o m J u l y 2020t o J a n u a r y 2023w e r e c o l l e c t e d ,t h e b a c t e r i a l i d e n t i f i c a t i o n a n d d r u g s u s c e p t i b i l i t y t e s t s w e r e c o n d u c t e d b y t h e f u l l a u t o m a t i c m i c r o b i o l o gi c a l a n a -l y z e r ,a n d t h e c a r b a p e n a s e p h e n o t y p e w a s d e t e c t e d b y t h e m o d i f i e d c a r b a p e n e n a s e i n a c t i v a t i o n m e t h o d (m C I M )a n d E D T A m o d i f i e d c a r b a p e n e n a s e i n a c t i v a t i o n m e t h o d (e C I M ).T h e d r u g -r e s i s t a n c e g e n e s w e r e a m -p l i f i e d b y p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n (P C R )a n d t h e s e q u e n c i n g w a s p e r f o r m e d .R e s u l t s S e v e n t y-s e v e n C R E s t r a i n s w e r e m a i n l y i s o l a t e d f r o m t h e s p u t u m s p e c i m e n ,f o l l o w e d b y t h e u r i n e a n d p l e u r a l e f f u s i o n .T h e d e -p a r t m e n t s w e r e m a i n l y t h e c r a n i o c e r e b r a l s u r g e r y,i n t e n s i v e c a r e m e d i c i n e a n d s t r o k e i n t e n s i v e c a r e u n i t .A -m o n g th e C R E s t r a i n s ,t h e r e w e r e 33s t r a i n s o f K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e ,15s t r a i n s o f E s c h e r i c h i a c o l i ,12s t r a i n s o f E n t e r o b a c t e r c l o a c a e a n d 17s t r a i n s o f o t h e r b a c t e r i a .T h e s e n s i t i v i t y o f t h e C R E s t r a i n s t o t i g a c y c l i n e w a s 97.4%,w h i c h t o a m i k a c i n w a s 44.2%,w h i c h t o c o t r i m o x a z o l e w a s 39.0%,a n d w h i c h t o o t h e r a n t i b a c t e r i a l d r u g s w a s l o w e r t h a n 20.0%.T h e s e n s i t i v i t y a n d s p e c i f i c i t y o f m C T M f o r s c r e e n i n g c a r b a p e n a s e s t r a i n w e r e 95.9%a n d 100.0%,r e s p e c t i v e l y .T h e P C R a m pl i f i c a t i o n r e s u l t s s h o w e d t h a t 49s t r a i n s o f C R E b a c t e r i a c a r -r i e d t h e N D M g e n e ,24s t r a i n s o f C R E b a c t e r i a c a r r i e d K P C g e n e ,1s t r a i n o f C R E b a c t e r i u m c a r r i e d I M P g e n e,㊃7662㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e pt e m b e r 2023,V o l .20,N o .18*基金项目:青岛大学附属医院 临床医学+X 科研项目(2019-3399);山东省日照市中医医院2021年度院级科研立项项目(R Z Z Y 2021L C -09)㊂ 作者简介:侯素君,女,副主任技师,主要从事临床病原微生物耐药监测及耐药机制方面的研究㊂Copyright ©博看网. All Rights Reserved.a n d3s t r a i n s d i d n o t d e t e c t c a rb a p e n e n a s e g e n e.T h e g e n e s e q u e nc i n g c o m p a r i s o nde t e r m i n e d t h a t t h e s u b t y p e s of d r ug r e s i s t a n c e g e n e w e r e b l a K P C-2,b l a N D M-1a n d b l a I M P-4.C o n c l u s i o n Th e C R E s t r ai n s a r e m a i n l y K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e,E s c h e r i c h i a c o l i a n d E n t e r o b a c t e r c l o a c a e w i t h s t r o n g d r u g r e s i s t a n c e.T h e c a r b a p e n e m r e s i s t a n t g e n e o f K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e i s i s m a i n l y b l a K P C-2,w h i c h o f E s c h e r i c h i a c o l i i s m a i n l y b l a N D M-1,a n d w h i c h o f E n t e r o b a c t e r c l o a c a e i s m a i n l y b l a N D M-1.C l i n i c s h o u l d s t r e n g t h e n t h e C R E s t r a i n s m o n i t o r i n g.T h e a n t i b a c t e r i a l d r u g s s h o u l d b e r e a s o n a b l y s e l e c t e d a c c o r d i n g t o t h e d r u g s u s c e p t i b i l i t y t e s t r e s u l t s t o p r e v e n t i t s o u t b r e a k s a n d e p i d e m i c i n t h e h o s p i t a l.K e y w o r d s:c a r b a p e n e m-r e s i s t a n t E n t e r o b a c t e r i a c e a e;b a c t e r i a l r e s i s t a n c e;d r u g r e s i s t a n c e g e n e当前,细菌耐药已成为全球公共健康领域的重大挑战,其中尤以碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(C R E)引起的感染形势最为严峻,碳青霉烯类抗菌药物包括亚胺培南㊁美洛培南和厄他培南等,是治疗多重耐药革兰阴性杆菌所致感染最有效的抗菌药物之一㊂随着该类药物在临床的广泛应用,肠杆菌目细菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率呈逐年快速上升趋势[1]㊂耐药细菌感染致住院时间延长㊁费用增加㊁病死率增高,在社区或医院中可引起散发,交叉传播,甚至导致暴发流行,对婴幼儿㊁老年人和免疫缺陷者的威胁巨大㊂因此,探讨医院C R E菌株的耐药表型和基因型,可以为医院C R E菌株感染的临床治疗和医院感染暴发的防控提供科学依据㊂1材料与方法1.1菌株来源收集2020年7月至2023年1月日照市中医医院临床患者标本中分离的77株C R E菌株,剔除同一患者同一部位重复分离的菌株㊂1.2质控菌株大肠埃希菌A T C C25922㊁肺炎克雷伯菌A T C C700603㊁大肠埃希菌A T C C700323㊁大肠埃希菌A T C C35218㊁肺炎克雷伯菌A T C C B A A1705㊁肺炎克雷伯菌A T C C B A A2146均由省临床检验中心提供㊂1.3仪器与试剂 V I T E K2C o m p a c t全自动细菌鉴定及药敏分析仪(法国生物梅里埃公司)㊁L a b n e t C1301-230E U型手掌形离心机(美国L a b n e t公司)㊁B i o-R a d M y C y c i e r型P C R扩增仪(美国B i o-R a d公司)㊁E p p e n d o r f5415R型台式高速离心机(德国E p-p e n d o r f公司)㊁北京六一D Y C P-31D N型琼脂糖凝胶电泳仪(北京六一生物科技有限公司)㊁B i o-R a d凝胶成像仪(美国B i o-R a d公司)㊁B i o-R a d电泳槽(美国B i o-R a d公司),2ˑA c c u r a t e T a q预混液(湖南艾科瑞生物工程有限公司),D L2000D N A M a r k e r(日本T a K a R a公司),琼脂糖(日本T a K a R a公司),4S G e l-r e d核酸染料(香港B B I L i f e S c i e n c e C o r p o r a t i o n), W i z a r d G e n o m i c D N A P u r i f i c a t i o n K i t(美国P r o-m e g a公司),胰蛋白胨大豆肉汤培养基(T S B,杭州滨和微生物试剂公司),E t e s t条(温州市康泰生物科技有限公司),头孢哌酮/舒巴坦㊁替加环素药敏纸片均为英国O x i d公司产品㊂1.4方法1.4.1菌株鉴定及药敏试验菌株分离与培养严格按照‘全国临床检验操作规程“(第4版)[2]进行,使用V I T E K2C o m p a c t全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验㊂药敏试验结果判断根据美国临床和实验室标准协会(C L S I)最新版标准判断,收集临床标本中分离的肠杆菌目细菌药敏试验报告中亚胺培南㊁美洛培南最小抑菌浓度(M I C)ȡ4μg/m L或厄他培南ȡ2μg/m L(已用E t e s t条复核)的菌株[3]㊂1.4.2碳青霉烯酶表型确证试验改良碳青霉烯酶灭活试验(m C I M)操作步骤:参照C L S I2020年版M100操作标准,用1μL接种环挑一满环菌落,加入2 m L T S B肉汤中乳化,振荡10~15s,每管放入1张含10μg美洛培南的无菌纸片,确认纸片浸没于菌悬液中,35ħ孵育4h,将美洛培南纸片贴于已涂布大肠埃希菌A T C C25922悬液的MH平板,35ħ孵育18~ 24h,量取抑菌圈直径㊂乙二胺四乙酸(E D T A)改良碳青霉烯酶灭活试验(e C I M)操作步骤:另取一支试管,加入2m L T S B肉汤,再加入20μL0.5m o l/L E D T A溶液混匀,E D T A浓度最终为5mm o l/L㊂其余步骤同m C I M㊂m C I M判断标准:美洛培南抑菌圈直径为6~15mm或直径16~18mm但抑菌圈内有散在菌落时,为碳青霉烯酶阳性;抑菌圈直径ȡ19 mm,为碳青霉烯酶阴性;抑菌圈直径为16~18mm 或直径为19mm但抑菌圈内有散在菌落,则无法判断是否存在碳青霉烯酶,为碳青霉烯酶不确定[4]㊂e C I M判断标准:e C I M与m C I M结果比较,美洛培南抑菌圈直径相差ȡ5mm为金属β-内酰胺酶阳性,美洛培南抑菌圈直径相差ɤ4mm为金属β-内酰胺酶阴性,待测菌株产丝氨酸蛋白酶㊂1.4.3基因检测煮沸裂解法提取D N A模板,采用P C R扩增碳青霉烯酶耐药基因,扩增条件为94ħ预变性5m i n;94ħ变性30s,52ħ退火40s,72ħ延伸50s,共35个循环;72ħ再延伸10m i n㊂扩增后产物取10μL通过1.5%琼脂凝胶电泳30m i n,最终在凝胶成像仪上观察结果㊂引物信息见表1,引物序列查阅文献[5]获得,由上海生工生物工程有限公司合成引物,并进行相应的测序分析,与目的基因㊁阳性对照条带位置的扩增产物送上海生工生物工程有限公司完成测序,基因序列在h t t p://b l a s t.n c b i.n l m.n i h.g o v/b l a s t.c g i进行比对,确定耐药基因亚型㊂1.5统计学处理采用全国细菌耐药监测网提供的W h o n e t5.6软件收集药敏试验结果,使用S P S S21.0统计软件进行分析,计数资料以例数或百分比表示,比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义㊂㊃8662㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n,S e p t e m b e r2023,V o l.20,N o.18Copyright©博看网. All Rights Reserved.表1 P C R 扩增碳青霉烯类耐药基因引物引物引物序列(5'-3')目的基因产物长度(b p )N D M -F G G T T T G G C G A T C T G G T T T T Cb l a N D M 621N D M -RC G G A A T G G C T C A T C A C G A T C I M P -FG G A A T A G A G T G G C T T A A Y T C T C b l a I M P 232I M P -RG G T T T A A Y A A A A C A A C C A C C K P C -F m C G T C T A G T T C T G C T G T C T T Gb l a K P C 798K P C -R m C T T G T C A T C C T T G T T A G G C G V I M -FG A T G G T G T T T G G T C G C A T A b l a V I M 390V I M -RC G A A T G C G C A G C A C C A G O X A -48-FG C G T G G T T A A G G A T G A A C A C b l a O X A -48438O X A -48-RC A T C A A G T T C A A C C C A A C C G2 结 果2.1 C R E 菌株的种类与临床分布 77株C R E 临床分离株中,肺炎克雷伯菌33株(42.9%)㊁大肠埃希菌15株(19.5%)㊁阴沟肠杆菌12株(15.6%)㊁弗劳地枸橼酸杆菌7株(9.1%)㊁雷氏普罗威登斯菌3株(3.9%)㊁产气肠杆菌3株(3.9%)㊁奇异变形杆菌2株(2.6%)㊁产酸克雷伯菌2株(2.6%)㊂77株C R E 菌株来源标本以痰液和尿液为主,其中分离自痰液33株(42.86%)㊁尿液30株(38.96%)㊁胸腔积液6株(7.79%)㊁穿刺液5株(6.49%)㊁脑脊液2株(2.60%)㊂77株C R E 菌株的科室分布:颅脑外科23株,重症医学科10株,脑卒中监护室9株,急诊科6株,泌尿外科6株,肺病科5株,肝胆胰脾科3株,胸外科3株,脑病科2株,心血管内科2株,骨六科2株,康复科2株,髋膝骨科1株,风湿肾病科1株,妇科1株,肿瘤科1株㊂2.2 C R E 菌株药敏试验结果 77株C R E 菌株中超广谱β-内酰胺酶(E S B L s )的检出率为100.0%,对替加环素敏感性最高(97.4%),其次为阿米卡星(44.2%)㊁复方磺胺甲噁唑(39.0%),对其余抗菌药物的敏感性均低于20.0%㊂大肠埃希菌对阿米卡星的敏感性为80.0%,肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对阿米卡星的敏感性分别为48.5%和50.0%㊂见表2㊂表2 C R E 菌株对常用抗菌药物的药敏试验结果(%)抗菌药物总计(n =77)耐药敏感肺炎克雷伯菌(n =33)耐药敏感大肠埃希菌(n =15)耐药敏感阴沟肠杆菌(n =12)耐药敏感阿米卡星55.844.251.548.520.080.050.050.0头孢唑啉100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0头孢吡肟89.610.487.912.180.020.091.78.3头孢替坦94.85.290.99.193.30.7100.00.0头孢呋辛100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0妥布霉素83.116.969.730.386.713.391.78.3庆大霉素79.219.963.636.480.020.091.78.3亚胺培南100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0氨曲南80.519.597.03.020.080.083.316.7美洛培南100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0呋喃妥因98.81.293.96.154.446.6100.00.0头孢曲松100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0头孢他啶100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0环丙沙星98.71.3100.00.093.30.7100.00.0左氧氟沙星89.610.484.815.286.713.391.78.3复方磺胺甲噁唑61.039.036.463.680.020.050.050.0氨苄西林100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0替加环素2.697.40.0100.00.0100.00.0100.0头孢哌酮/舒巴坦96.13.993.96.193.30.7100.00.0哌拉西林钠/他唑巴坦100.00.0100.00.0100.00.0100.00.0阿莫西林/克拉维酸100.00.0100.00.0100.00.0100.00.02.3 耐药基因扩增结果 77株C R E 菌株中74株产碳青霉烯酶,3株未检出㊂其中,33株肺炎克雷伯菌中20株携带K P C 基因,12株携带N D M 基因,1株未检出碳青霉烯酶,主要产K P C (60.6%);15株大肠埃希菌中12株携带N D M 基因,3株携带K P C 基因,主要产N D M (80.0%);12株阴沟肠杆菌携带N D M 基因(100.0%);7株耐弗劳地枸橼酸杆菌携带N D M 基因(100.0%);3株雷氏普罗威登斯菌中2株携带N D M 基因,1株未检出碳青霉烯酶;3株产气肠杆菌中1株携带N D M 基因,1株携带K P C 基因,1株未检出碳青霉烯酶;2株产酸克雷伯菌中1株携带N D M基因,1株携带I M P 基因;2株奇异变形杆菌携带N D M 基因㊂碳青霉烯酶基因型中N D M 占66.2%(49/74),K P C 占32.4%(24/74),I M P 占1.4%(1/74)㊂琼脂电泳图见图1~3㊂2.4 碳青霉烯酶表型试验结果 74株携带碳青霉烯酶基因的C R E 菌株,其中71株m C I M 试验阳性,3株m C I M 试验均阴性,m C I M 筛选碳青霉烯酶菌株的灵敏度为95.9%,特异度为100.0%㊂m C I M 阳性菌株中,肺炎克雷伯菌32株,大肠埃希菌15株,阴沟肠㊃9662㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e pt e m b e r 2023,V o l .20,N o .18Copyright ©博看网. All Rights Reserved.杆菌12株,弗劳地枸橼酸杆菌7株,奇异变形杆菌2株,产气肠杆菌1株,产酸克雷伯菌1株,雷氏普罗威登斯菌1株㊂m C I M 结合e C I M 试验初步判断产金属β-内酰胺酶51株(m C I M 阳性,e C I M 阳性),产丝氨酸蛋白酶20株(m C I M 阳性,e C I M 阴性)㊂ 注:M 为D L 2000D N A 标志物;1为b l a N D M 阳性对照;2为b l a N D M阴性对照;3~16为临床菌株b l a N D M阳性㊂图1 P C R 扩增菌株b l a N D M基因的电泳图注:M 为D L 2000D N A 标志物;1为b l a K P C 阳性对照;2为b l a K P C阴性对照;3~17为临床菌株b l a K P C阳性㊂图2 P C R 扩增菌株b l a K P C基因的电泳图注:M 为D L 2000D N A 标志物;1为b l a I M P 阴性对照;2为b l a I M P阳性对照;4为临床菌株b l a I M P 阳性;3㊁5~12为临床菌株b l a I M P阴性㊂图3 P C R 扩增菌株b l a I M P 基因的电泳图2.5 基因测序 耐药基因扩增结果将与目的基因㊁阳性对照条带位置的扩增产物送上海生工生物工程有限公司完成测序,基因序列在h t t p://b l a s t .n c b i .n l m.n i h .g o v /b l a s t .c gi 进行比对,确定耐药基因型为b l a K P C -2㊁b l a N D M -1㊁b l a I M P -4㊂3 讨 论C R E 是当前最受关注的耐药威胁之一,我国C R E 的流行情况也比较严重㊂中国C H I N E T 细菌耐药性监测数据表明,2005年碳青霉烯类抗菌药物对肠杆菌目细菌保持着较高的抗菌活性,耐药率低于2%;到2010年,耐药率明显上升,达到5%;肺炎克雷伯菌的耐药率已高达10%[6]㊂2018年肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率全国平均为10.1%[7],2021年肺炎克雷伯菌耐药率上升到23.1%[8],肠杆菌目细菌对碳青霉烯类抗菌药物最常见的耐药机制为产碳青霉烯酶[9]㊂因此,快速㊁准确地检测本院耐药菌是否产碳青霉烯酶,了解C R E 菌株基因分型对于临床治疗和医院感染控制至关重要㊂本研究77株C R E 菌株中,肺炎克雷伯菌占42.9%,大肠埃希菌占19.5%,阴沟肠杆菌占15.6%,其他肠杆菌目细菌占22.0%,与陆书华等[10]㊁崔超琼等[11]的研究结果接近;主要碳青霉烯酶基因型中N D M 占66.2%(49/74),K P C 占32.4%(24/74),I M P 占1.4%(1/74)㊂C R E 菌株主要分离自痰液㊁尿液㊁胸腔积液,也可分离自脑脊液㊁血液㊁穿刺液等,说明耐药株引起的感染并不仅限于呼吸㊁泌尿系统,还可能引起颅内㊁血流㊁胸腔等多部位感染,其感染的广泛性应引起临床重视㊂C R E 菌株科室分布主要是颅脑外科㊁重症医学科㊁脑卒中监护室,这与重症监护室患者病因的复杂性㊁病情危重㊁免疫力低下㊁糖皮质激素和高效广谱抗菌药物长期应用,以及侵入性操作治疗较多有关㊂本研究药敏试验结果显示,77株C R E 菌株对青霉素类㊁头孢菌素类㊁头霉素类耐药率均为90%以上,与王珍珍等[12]研究结果一致,临床应慎重经验用药,对替加环素㊁阿米卡星㊁复方磺胺甲噁唑耐药率分别为2.6%㊁55.8%㊁61.0%[13],临床可选择这些药物治疗感染者㊂按照A m b l e r 分子分类方法可将碳青霉烯酶分为3类:(1)A 类丝氨酸碳青霉烯酶,以K P C 为主,该酶活性可被阿维巴坦抑制,产酶菌株通常仅对替加环素㊁多黏菌素或头孢他啶/阿维巴坦敏感;(2)B 类金属β-内酰胺酶,以N D M 型金属酶为主,该酶活性不能被阿维巴坦抑制,产酶菌株通常仅对替加环素㊁多黏菌素敏感,少数菌株对氨曲南敏感;(3)D 类丝氨酸碳青霉烯酶,以O X A -48为主,常见于儿童患者分离的肺炎克雷伯菌,该酶活性可被阿维巴坦抑制,产酶菌株通常仅对替加环素㊁多黏菌素或头孢他啶/阿维巴坦敏感㊂C R E 感染的治疗具有挑战性,应根据药敏试验结果㊁耐药表型或基因分型㊁感染的严重程度,选择有效的治疗方案㊂本研究利用C L S I 推荐的m C I M 和e C I M 试验联合检测碳青霉烯酶表型,m C I M 筛选碳青霉烯酶菌株的灵敏度为95.9%,特异度为100.0%[1],与之符合,结合e C I M 试验初步判断产金属β-内酰胺酶51株,产丝氨酸蛋白酶20株㊂m C I M 试验操作简单,成本低,不需要特殊试剂,灵敏度和特异度高,适合所有微生物室开展㊂m C I M 与e C I M 联合检测筛选碳青霉烯酶表型,对临床选择用药具有重要意义㊂P C R 扩增结果显示,77株C R E 菌株中74株产㊃0762㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n ,S e pt e m b e r 2023,V o l .20,N o .18Copyright ©博看网. All Rights Reserved.碳青霉烯酶,3株未检出,而E S B L s的检出率为100.0%,可能为高产头孢菌素酶(A m p C)或高产E S-B L s合并外膜孔蛋白缺失或变异以及细菌外排泵系统改变所致[14]㊂目前常见的碳青霉烯酶为K P C㊁V I M㊁N D M㊁I M P和O X A,国内以K P C㊁N D M和I M P为主[15]㊂本研究77株菌株主要流行的碳青霉烯酶基因型依次为N D M(66.2%)㊁K P C(32.4%)和I M P(1.4%),以N D M和K P C为主[16]㊂河南部分地区和海南省5家综合医院收集的C R E菌株中,主要的耐药基因型也是N D M[17-18],本研究耐药基因K P C 的检出率低于N D M,77株C R E菌株中,仅有1株耐碳青霉烯产酸克雷伯菌检出I M P基因㊂97.0% (32/33)的肺炎克雷伯菌㊁100.0%(15/15)的大肠埃希菌,100.0%(12/12)的阴沟肠杆菌携带碳青霉烯酶基因㊂碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌主要携带K P C-2基因[19],碳青霉烯类耐药大肠埃希菌和阴沟肠杆菌主要携带N D M-1基因,与陆书华等[10]报道一致㊂K P C和N D M耐药基因均可由质粒介导,通过菌株自身克隆以及不同菌种间水平转移,是C R E流行激增的主要原因㊂K P C-2和N D M-1可水解绝大多数β-内酰胺药物,包括碳青霉烯类,不同之处在于K P C-2为丝氨酸蛋白酶,水解氨曲南,能被新型酶抑制剂阿维巴坦所抑制,而N D M-1为金属酶,不水解氨曲南,不被阿维巴坦㊁韦博巴坦等抑制㊂总之,C R E呈现广泛耐药甚至全耐药的特征,使临床抗感染治疗面临无药可用的困境,导致感染患者病死率高㊂实验室应快速鉴别产碳青霉烯酶菌株,选择早期快速筛查的方法,加快开展联合药敏试验,有效降低C R E感染患者的病死率[20]㊂临床医生应掌握医院C R E临床分布特征及耐药基因㊁细菌耐药情况,根据药敏试验结果合理选用抗菌药物;院感防控部门需加强监督检查,共同遏制C R E菌株在不同患者和不同区域间流行播散,降低医院C R E感染发生率㊂参考文献[1]喻华,徐雪松,李敏,等.肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的实验室检测和临床报告规范专家共识[J].中国感染与化疗杂志,2020,20(6):671-680.[2]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].4版.北京:人民卫生出版社,2015:560-851.[3]C e n t e r s f o r D i s c a s e C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n(C D C).F a c i l i-t y g u i d a n c e f o r c o n t r o l o f c a r b a p e n e m-r e s i s t a n t E n t e r o b a c-t e r i a c e a e(C R E)[E B/O L].[2023-04-15].h t t p s://w w w.c d c.g o v/h a i/p d f s/c r e/c r e-g u i d a n c e-508.p d f.[4]C l i n i c a l a n d L a b o r a t o r y S t a n d a r d s I n s t i t u t e.P e r f o r m a n c es t a n d a r d s f o r a n t i m i c r p b i a l s u s c e p t i b i l i t y t e s t i n g:M100-S30[S].W a y n e,P A,U S A:C L S I,2020.[5]P O I R E L L,WA L S H T R,C U V I L L I E R V,e t a l.M u l t i-p l e x P C R f o r d e t e c t i o n o f a c q u i r e d c a r b a p e n e m a s e g e n e s [J].D i a g n M i c r o b i o l I n f e c t D i s,2011,70(1):119-123.[6]周宏伟,胡燕燕,张嵘.碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的检测方法[J].检验医学,2020,10(35):971-973. [7]国家卫生计生委合理用药专家委员会,全国细菌耐药监测网.2018年全国细菌耐药监测报告[J].中国合理用药探索,2020,17(1):1-10.[8]胡付品,郭燕,朱德妹,等.2021年C H I N E T中国细菌耐药监测[J].中国感染与化疗杂志,2022,22(5):521-530.[9]T Z O U V E L E K I S L,MA R K O G I A N N A K I S A,P S I C HO-G I O U M,e t a l.C a r b a p e n e m a s e s i n K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e a n d o t h e r E n t e r o b a c t e r i a c e a e:a n e v o l v i n g c r i s i s o f g l o b a ld i me n s i o n s[J].C l i n M i c r o b i o l R e v,2012,25(4):682-707.[10]陆书华,李晓哲,刘凌云,等.山东某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌临床感染特征及耐药基因分析[J].检验医学, 2020,35(8):757-762.[11]崔超琼,周义正,李承彬,等.耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的耐药性和分子特征[J].检验医学与临床,2020,17(17): 2455-2459.[12]王珍珍,赵战勤,常永超,等.耐碳青霉烯革兰阴性杆菌耐药性及耐药基因b l a K P C的分子特征[J].中国感染控制杂志,2020,10(19):857-863.[13]杨玉琪,刘家云,徐修礼,等.某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的临床分布特点及药物敏感性分析[J].检验医学与临床,2021,18(1):1-5.[14]刘家旭,汪志勇.耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药机制及流行高危因素的研究进展[J].贵州医药,2020,44(4): 543-546.[15]孙艳.耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药机制及实验室检测研究进展[J].国际检验医学杂志,2020,41(4):2011-2016.[16]王素梅,张键东,王宇凡,等.耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药基因分型[J].中华医院感染学杂志,2019,29(17): 2566-2570.[17]L I U C,Q I N S,X U H,e t a l.N e w d e l h i m e t a l l o-β-l a c t a-m a s e1(N D M-1),t h e d o m i n a n t c a r b a p e n e m a s e d e t e c t e di n c a r b a p e n e m-r e s i s t a n t e n t e r o b a c t e r c l o a c a e f r o m h e n a np r o v i n c e,C h i n a[J].P L o S O n e,2015,10(8):e0135044.[18]苏屿,李天娇,龙文芳,等.海南耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药基因分析[J].中国抗菌药物杂志,2018,43(9): 96-100.[19]冯渐焘,陈爱文,李笃军,等.携带b l a K P C-3基因肺炎克雷伯菌新生儿分离株的研究[J].中国实验诊断学,2020, 24(9):1453-1457.[20]丁丽,陈佰义,李敏,等.碳青霉烯类耐药革兰阴性菌联合药敏试验及报告专家共识[J].中国感染与化疗杂志2023,23(1):80-90.(收稿日期:2023-05-23修回日期:2023-07-26)㊃1762㊃检验医学与临床2023年9月第20卷第18期 L a b M e d C l i n,S e p t e m b e r2023,V o l.20,N o.18Copyright©博看网. 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外固定支架术后行内固定治疗对胫腓骨骨干开放性骨折患者骨折愈合情况及功能的影响
临床医学China &Foreign Medical Treatment 中外医疗外固定支架术后行内固定治疗对胫腓骨骨干开放性骨折患者骨折愈合情况及功能的影响林伟龙，林宇超，郑晓华中国融通医疗健康集团莆田九十五医院骨科，福建莆田 351100［摘要］ 目的 研讨外固定支架术后行内固定治疗对胫腓骨骨干开放性骨折患者骨折愈合情况及功能的影响。
方法 方便选择2020年10月—2022年5月中国融通医疗健康集团莆田九十五医院骨科收治的142例胫腓骨骨干开放性骨折患者为研究对象，按照随机信封法分为对照组和观察组，每组71例。
对照组在外伤清创后，直接行内固定的治疗方法。
观察组在外伤清创后行外固定联合内固定的治疗方法。
对比两组的骨折愈合时间、功能恢复情况、并发症发生率及炎性因子水平。
结果 观察组骨痂形成时间、疼痛消失时间、住院时间、骨折愈合时间均短于对照组，差异有统计学意义（P 均<0.05）。
观察组膝关节和踝关节功能评分分别为（89.33±3.18）分、（87.99±5.14）分均高于对照组，差异有统计学意义（t =13.308、7.432，P 均<0.05）。
观察组并发症发生率低于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。
观察组降钙素原、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、转化生长因子-β及C 反应蛋白均低于对照组，差异有统计学意义（P 均<0.05）。
结论 胫腓骨骨干开放性骨折后先实施外固定支架术，再行内固定治疗，有助于骨折部位的快速愈合，使关节功能得到有效的恢复，改善炎性因子相关指标，降低并发症发生率，二者联合应用具有重要的临床意义。
［关键词］ 胫腓骨骨干开放性骨折；外固定支架术；内固定治疗；骨折愈合；并发症［中图分类号］ R714 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1674-0742（2024）01(b)-0041-05Effect of Internal Fixation after External Fixation Bracing Treatment on Fracture Healing and Function in Patients with Open Fractures of the Tib⁃iofibular DiaphysisLIN Weilong, LIN Yuchao, ZHENG XiaohuaDepartment of Orthopedics, Putian 95th Hospital of China Rongtong Medical and Healthcare Group, Putian, Fujian Province, 351100 China[Abstract] Objective To investigate the effects of internal fixation after external fixation bracing treatment on fracture healing and function in patients with open fractures of the tibiofibular diaphysis. Methods From October 2020 to May 2022, it is conveniently to selected 142 patients with open fracture of tibia and fibula treated in the Department of Or⁃thopaedics, Putian 95 Hospital of China Rongtong Medical and Healthcare Group as the research objects. According to the random envelope method, they were divided into control group and observation group, 71 cases in each group.The control group mainly received the treatment of direct internal fixation after trauma debridement. The observation group mainly received external fixation combined with internal fixation after trauma debridement. The fracture heal⁃ing time, functional recovery, complication rate and inflammatory factor levels were compared between the twogroups. Results The callus formation time, pain disappearance time, hospitalization time and fracture healing time inthe observation group were shorter than those in the control group, and the differences were statistically significant (all P <0.05). After treatment, the scores of knee joint and ankle joint function in the observation group were (89.33±3.18)points and (87.99±5.14) points, respectively, which were higher than those in the control group, and the differences were statistically significant (t =13.308, 7.432, both P <0.05). The incidence of complications in the observation group DOI ：10.16662/ki.1674-0742.2024.02.041[作者简介] 林伟龙（1985-），男，本科，主治医师，研究方向为小儿骨科、脊椎、四肢创伤。
Unit 1 Words and expressions-高二英语(上教版2020选择性必修第三册)
13
fluency
n.the quality of doing something in a smooth and skillful way
熟练自如;流畅
14
grasp
n.a person’s understanding of a subject or of difficult facts 理解(力); 领会
25
vocabulary
n.all the words that a person knows or uses ( 某人掌握或使用的]词汇: 词汇量
26
wilderness
n. a large area of land that has never been developed or used for growing crops because it is dificult to live
He flipped through the channels with the remote. 他用遥控器快速浏览了各个频道。
比较级:remoter
最高级:remotest
06
hunt
v. to chase wild animals or birds in order to catch or kill them for food, sport or to make money 打猎；猎取: 猎杀
v. to ask for something very firmly 强烈要求
demand
vt. / n. 要求；需要；需求 例句： The Harry Porter are quite popular; they are in great demand in this city.（全 国Ⅱ） 《哈利波特》丛书十分受欢迎，在这个城市需求量很大 搭配： demand sth. of/ from sb. 向某人要求某物 meet one's demand 满足某人的需求 be in great demand 需求量极大 考点： demand that ... 从句中谓语动词要用虚拟语气"(should +) do"结构 派生： demanding adj. 要求高的
基于C-NCAP_某座椅鞭打试验仿真和优化
Modeling and Simulation 建模与仿真, 2023, 12(2), 1500-1511 Published Online March 2023 in Hans. https:///journal/mos https:///10.12677/mos.2023.122140基于C-NCAP 某座椅鞭打试验仿真和优化赵 军1，江圆迪1，毛晨曦2，刘会霞1*1江苏大学机械工程学院，江苏 镇江 2上海埃立曼科技有限公司，上海收稿日期：2023年2月17日；录用日期：2023年3月20日；发布日期：2023年3月28日摘要按照2021版C-NCAP 要求，对某车型座椅进行鞭打试验，通过鞭打试验结果分析发现挥鞭伤较为严重，鞭打得分较低。
针对这一问题采用Hypermesh 软件建立有限元模型，用LS-Dyna 显示非线性动力学求解器进行求解，并将有限元结果与试验结果进行对标分析。
在对标合格的有限元模型基础上分析鞭打损伤原因，并根据分析结果提出优化参数，优化参数如下：座椅靠背左右侧板厚度、座椅靠背支撑板厚度、座椅靠背上横杆厚度以及头枕杆直径。
根据优化后的结果可知，优化后的假人挥鞭伤减小，鞭打得分提高，大大增强了座椅防挥鞭伤的能力。
关键词座椅，鞭打试验，有限元分析，C-NCAPSimulation and Optimization of a Seat Whiplash Test Based on C-NCAPJun Zhao 1, Yuandi Jiang 1, Chenxi Mao 2, Huixia Liu 1*1School of Mechanical Engineering, Jiangsu University, Zhenjiang Jiangsu 2Shanghai Elliman Technology Co., Ltd., ShanghaiReceived: Feb. 17th , 2023; accepted: Mar. 20th , 2023; published: Mar. 28th , 2023AbstractAccording to the requirements of the 2021 version of C-NCAP, a whipping test was carried out on the seat of a certain model, and the whiplash injury was found to be more serious and the whip-lash score was lower through the analysis of the whiplash test results. To solve this problem, Hypermesh software is used to establish a finite element model, LS-Dyna is used to display the*通讯作者。
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2020年(生物科技行业)生物化学习题(生物能学与生物氧化)
（生物科技行业）生物化学习题(生物能学与生物氧化)生物化学习题（生物能学和生物氧化）壹、名词解释：1.生物氧化（bioogicaloxidation）生物体内有机物质氧化而产生大量能量的过程称为生物氧化。
生物氧化在细胞内进行，氧化过程消耗氧放出二氧化碳和水，所以有时也称之为“细胞呼吸”或“细胞氧化”。
生物氧化包括：有机碳氧化变成CO2；底物氧化脱氢、氢及电子通过呼吸链传递、分子氧和传递的氢结成水；在有机物被氧化成CO2和H2O的同时，释放的能量使ADP转变成ATP。
2.呼吸链（respiratorychain）有机物在生物体内氧化过程中所脱下的氢原子，经过壹系列有严格排列顺序的传递体组成的传递体系进行传递，最终和氧结合生成水，这样的电子或氢原子的传递体系称为呼吸链或电子传递链。
电子在逐步的传递过程中释放出能量被用于合成ATP，以作为生物体的能量来源。
3.氧化磷酸化（oxidativephosphorylation）在底物脱氢被氧化时，电子或氢原子在呼吸链上的传递过程中伴随ADP磷酸化生成ATP的作用，称为氧化磷酸化。
氧化磷酸化是生物体内的糖、脂肪、蛋白质氧化分解合成ATP的主要方式。
4.磷氧比（P/O）电子经过呼吸链的传递作用最终和氧结合生成水，在此过程中所释放的能量用于ADP磷酸化生成ATP。
经此过程消耗壹个原子的氧所要消耗的无机磷酸的分子数（也是生成ATP的分子数）称为磷氧比值（P／O）。
如NADH的磷氧比值是3，FADH2的磷氧比值是2。
5.底物水平磷酸化（substratelevelphosphorylation）在底物被氧化的过程中，底物分子内部能量重新分布产生高能磷酸键（或高能硫酯键），由此高能键提供能量使ADP（或GDP）磷酸化生成ATP（或GTP）的过程称为底物水平磷酸化。
此过程和呼吸链的作用无关，以底物水平磷酸化方式只产生少量ATP。
如在糖酵解（EMP）的过程中，3-磷酸甘油醛脱氢后产生的1,3-二磷酸甘油酸，在磷酸甘油激酶催化下形成ATP的反应，以及在2-磷酸甘油酸脱水后产生的磷酸烯醇式丙酮酸，在丙酮酸激酶催化形成ATP的反应均属底物水平的磷酸化反应。
野油菜黄单胞菌BioC蛋白的生物信息学分析
基因组学与应用生物学，2020年，第39卷，第11期，第509卜5099页研究报告Research Report野油菜黄单胞菌B ioC蛋白的生物信息学分析陈群一”吴晓妍”陈博，王海洪1余永红3"1华南农业大学生命科学学院，广州，510642; 2华南农业大学，群体微生物研宂中心，广州，510642; 3广东食品药品职业学院，广州，510520*同等贡献作者** 通信作者,**************.cn摘要野油菜黄单胞菌ATCC 33913基因组中XccO?&?、Zcc/67S被标注丙二酸单酰-A C P甲基转移酶 (BioC)编码基因，从KEGG数据库检索Xcc0383和Xccl678的氨基酸序列，运用生物信息学在线分析软件对 这2个基因编码的蛋白进行了理化性质、蛋白结构、亲水性、跨膜结构、信号肽、磷酸化位点及蛋白相互作用 网络的预测分析。
结果表明2个蛋白理化性质相近，但Xcc0383为亲水性蛋白，X ccl678位疏水性蛋白。
2个 蛋白都具有甲基转移酶功能结构域，不存在跨膜结构域和信号肽,磷酸化位点和翻译后修饰位点的数量和位 置类似。
Xcc0383和Xcc1678二级结构中组成最多的是ct-螺旋，分别占46.36%和51.69%,三级结构预测结 果与二级结构一致。
蛋白相互作用预测后发现，Xcc0383与BioH、BioF、B ioA等负责生物素合成的蛋白关系 最为密切，而X ccl678与其毗邻的糖基转移酶关系密切。
氨基酸序列同源比对显示Xcc0383与大肠杆菌(£. C〇Z〇的BioC相似性较高。
Xcc0383编码蛋白负责在野油菜黄单胞菌体内合成生物素，而Xccl678作为甲基 转移酶负责为不同的受体分子提供甲基基团。
关键词生物信息学，野油菜黄单胞菌，丙二酸单酰-A C P甲基转移酶，预测分析Bioinformatics Analysis o f BioC Proteins from Xanthomonas campestris pv. campestrisChen Qunyi '*Wu Xiaoyan2,Chen Bo1Wang Haihong1Yu Yonghong3*.1College of Life Science, South China Agricultural University, Guangzhou, 510642; 2 Integrative Microbiology Research Centre, South China Agricultural University, Guangzhou, 510642; 3 Guangdong Food and Drug Vocational College, Guangzhou, 510520* These authors contributed equally to this work**Correspondingauthor,**************.cnDOI: 10.13417/j.gab.039.005091Abstract Two genes in Xanthomonas campestris ATCC 33913, Xcc0383and Xccl678,were annotated as mal-onyl-ACP methyltransferase.We analyzed and predicted the physicochemical properties,structures,hydrophilicity, transmembrane domain,signal peptide,phosphorylation sites and protein interaction network of Xcc0383 and Xccl678 by using bioinformatics analysis tool.The results showed that the two proteins had similar physicochemical properties,but Xcc0383 was a hydrophilic protein,with X ccl678 a hydrophobic protein.Transmembrane domain and signal peptide did not exist in both of them,and the number and location of phosphorylation and post-translational modification sites were similar.The secondary structures of Xcc0383 and X ccl678, a~helix was the most important component,accounting for46.36% and 51.69%, respectively,and the tertiary structure prediction results are consistent with the secondary structure.The protein interaction network prediction showed that Xcc0383 was most closely related to the proteins responsible for biotin synthesis,such as BioH,BioF,and BioA,基金项目：本研究由国家自然科学基金项目(N〇.31601601;31671987)资助引用格式：C h e n Q.Y., W u X.Y., C h e n B.，W a n g H.H., a n d Y u Y.H., 2020, Bioinformatics analysis o f B i o C proteins f r o m似pv. c o m p e s^i s，Jiyinzuxue Y u Y i n g y o n g S h e n g w u x u e (G e n o m i c s a n d A p p l i e d Biology), 39(11): 5091-5099 (陈群一，吴晓妍，陈博，王海洪，余永红，2020,野油菜黄单胞菌B i o C蛋白的生物信息学分析，基因组学与应用生物学，39(11): 5091-5099)5092 基因组学与应用生物学etc.X ccl678 was closely related to its adjacent bined with the results of protein sequence alignment,Xcc0383 shared higher sequence identity with the E. coli BioC,compared with Xccl678. Therefore,it is speculated that the Xcc0383 was responsible for the synthesis of biotin in Xanthomonas campestris,while Xcc1678 acts as a methyltransferase responsible for providing methyl groups for other receptors.Keywords Bioinformatics,Aw^/u»no«as ccimpestris,Malonyl-ACP methyltransferase,Predictive analysis野油菜黄单胞菌野油菜致病变种t'«/n/;e你(s'pv.<Ycc)，又称甘蓝黑腐病菌，属于变形菌纲，亚纲，黄单胞菌科(Xanthomonadaceae)，黄单胞杆菌属C¥a/if/j〇，_as),革兰氏阴性菌。
BioID技术在肿瘤蛋白质组学中的发展与应用
BioID技术在肿瘤蛋白质组学中的发展与应用作者：王晓飞丁明来源：《科技创新与应用》2020年第13期摘; 要：蛋白质通过形成复合物或蛋白-蛋白相互作用来执行生物学功能，蛋白-蛋白相互作用是细胞生命活动的基础，也是整个生物学领域研究的核心问题之一。
传统的互作蛋白筛选方法包括酵母双杂交和串联亲和纯化等，但这些方法具有一定的局限性，很难适用于实时和动态蛋白相互作用分析。
邻近依赖生物素鉴定（BioID，proximity-dependent biotin identification）是筛选活细胞中发生的蛋白相互作用的独特方法，利用修饰过的生物素连接酶BirA与感兴趣的蛋白融合表达，生物素化近端内源蛋白质，生物素化的蛋白可以被选择性分离并用生物质谱鉴定出目标蛋白的候选相互作用物。
BioID已成功应用于不溶性蛋白及瞬时或弱相互作用蛋白的研究，也逐渐应用于肿瘤等疾病发生机制及药物靶点筛选的研究。
文章针对该技术进行了详细总结，并讨论了其在肿瘤蛋白质组学中的应用。
关键词：BioID;邻近蛋白标记;蛋白-蛋白相互作用Abstract： Proteins perform biological functions by forming complexes or protein-protein interactions. Protein-protein interaction is not only the basis of cell life activities， but also one of the core issues in the whole biological field. Traditional protein screening methods include yeast two-hybrid and tandem affinity purification， but these methods have some limitations and are difficult to be applied to real-time and dynamic protein interaction analysis. Proximity-dependent biotin identification （BioID） is a unique method for screening protein interactions in living cells. Using the fusion expression of modified biotin ligase BirA with proteins of interest， biotinylated proximal endogenous proteins and biotinylated proteins can be selectively isolated and candidate interactions of target proteins can be identified by mass spectrometry. BioID has been successfully applied to the study of insoluble proteins and transient or weakly interacting proteins， and also gradually applied to the pathogenesis of tumors and other diseases as well as drug target screening. In this paper， this technique is summarized in detail， and its application in tumor proteomics is discussed.前言在生命体中，蛋白质是发挥作用的主体。
氨肽酶基因anp-1在秀丽隐杆线虫生长发育中的生物学功能
氨肽酶基因anp-1在秀丽隐杆线虫生长发育中的生物学功能苏山春，汪明(中国农业大学动物医学院，北京海淀100193)摘要:本试验构建重组RNA干扰载体，通过饲喂法沉默秀丽隐杆线虫(5.elegansS氨肽酶基因anp-1,观察5.elegans 表型变化，分析an—1基因在5.elegane生长发育中的生物学功能&RNA干扰anp-1基因导致5.e ggcns N2株L4期幼虫体长明显短于对照组(4<0.001)，寿命显著缩短(4<0.001)&荧光定量PCR试验结果表明，饲喂RNAi菌株,anp-1基因mRNA的相对表达量减少了约85%(4<0.001) o同时，干扰anp-1基因表达导致5.eleeans daf'-16%i n s-1%age-1和unc-ff等寿命相关mRNA表达发生显(4<0.05)&氨肽anp-1在5iean发育和寿命调节中发挥重要作用，了对氨肽酶在线虫生育中生物学功能的理解和&关键词:秀丽隐杆线虫$氨肽酶$RNA干扰$体$寿命中图分类号：S383.1文献标志码：A文章编号：0529—6005(2020)09—0005—06Biological Fucnhont of Aminopeptidase Gene anp-1in theDevelopmect of Caenorhabdito elegapsSU Shan-chun，WANG Ming(Colleae of Veterinara Medicine，China Agricultural University，Beijing100193，China) Abstract:To identOy tOe functions of anp-1in development of5.elegans，we constructed a recombinant RNA interference (RNAi)plasmia to suppress tOe expression of anp-f，and phenotypic changes were characterized beteeen the worms fed with RNAi strain and control strain.The body size of LL/young adult worms fed with anp-f RNAi bacteria wae sianificantla shorter compared with the control group.The life s pan of5.elegans wae decreased when tOe expression of anp-f wae inhibited.The qRT-PCR results indicated tOe expression of anp P wae decreased approxiNately85%when fed witO RNAi bacterial strain.Knockdown of anp P sianif-icantla decreased tOe mRNA of the lifespan-associated genes，such as daf-16，l ns-C，uncP2，and age-1.These results demonstrated that the aminopeptidase gene anp-1plays an important role in the development in5.elegans，which extends our understanding of the bioaogicaa-unctionso-aminopeptidasein nematodedeeeaopment.Key wordt:5aenorhabditis elegans$aminopeptiOase$RNA interferencc$body size$lifespan Corresponding author：WANG Ming，E-mail:vetdean@氨肽酶是一类外切蛋白酶，广泛参与调控生物体的多肽修饰、蛋白质％期发育、信■等列生理过程［1］&据同和机制，氨肽酶可以分为12个家族&素氨肽酶1(Purinomycin-sensitive aminop e p t iOas e1，Pam-1)是Ml氨肽酶家族的成员，4amP破了减数分裂和有丝分体的有效分早期极性素的不对，活力和整体收稿日期：2020—07—05基金项目：家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金(SKLVEB2013KFKT013):苏山春(1987-)，男，助理研究员，博士，主要从事寄生虫病与寄生虫防治工作，E-mail:xinxiyuzhou@ 通讯作者：汪明，E-mait:ve t Oe v n@cau.e d 孵化率［2］。
柴胡桂枝干姜汤治疗Bio-bentall术后发热1例体会
DOI ：10.19435/j.1672-1721.2020.016.070柴胡桂枝干姜汤出自于东汉末年医圣张仲景所著的《伤寒论》第147条，为众多经方之一。
原文记载到“伤寒五六日，已发汗而复下之，胸胁满微结，小便不利，渴而不呕，但头汗出，往来寒热，心烦者，此为未解也，柴胡桂枝干姜汤主之”。
可见张仲景最初以该方治疗外感伤寒误用汗、下之法后出现了病机转化，以致邪气内传，邪犯少阳，出现了半表半里的少阳证候。
然该方的使用范围远不止此，以往对该方的认识研究相对较少，但近年来呈现出百家争鸣的场面，认为其治疗的疾病谱较广，在消化系统、呼吸系统疾病中应用广泛[1，2]。
笔者近期使用柴胡桂枝干姜汤治疗主动脉根部生物瓣膜全主动脉根部置换术（Bio-bentall ）术后发热1例，效如桴鼓，立竿见影，现将具体情况报告如下，供同道参考。
1病例介绍患者，男，66岁，因主动脉窦部瘤样扩张伴主动脉瓣中度返流于2019年9月26日在上海中山医院行Bio-bentall 术，手顺顺利，但术后持续发热，体温波动在36.2~38.5℃之间，2019年10月6日至我科住院诊疗。
诊断为Bio-bentall 术，心功能不全，心功能Ⅱ级。
住院期间患者仍反复发热，伴有轻度畏寒，乏力口苦、倦怠、心烦、胸胁不利等诸多不适，舌质暗红苔少根腻而黄（见图1），脉弦细涩数。
入院后查超敏C 反应蛋白持续升高，胸部CT 示两侧少量胸水（见图2），血培养阴性，心脏超声显示Bio-bentall 术后改变。
予舒普深抗感染治疗体温不退，再联合万古霉素，但体温仍无下降趋势。
患者及家属因发热不退再次至上海中山医院就诊，上海专家建议继续抗感染治疗，并行胸水穿刺。
因我院属于基层医院，患者胸水过少，操作难度过大而未能实施。
见此情形，笔者劝其服中药一试。
从症状上来看，患者低热伴有畏寒间作，似乎有表证（太阳病），但患者无明确感受风寒病史，无汗出异常，无头项僵痛浮脉等其他太阳病表现，故太阳病似是而非。
肺纤维腺瘤1例
临床与实验病理学杂志 J Clin Exp Pathol 2020 Nav ；36( 11)・ 1335 •网络出版时间：2020 -11-23 13：48 网络出版地址：https ：//kns* codd nZ/kcms/ 6eOX/30. 1073. R. 20201103. 0902. 433. 4toi肺纤维腺瘤1例何佳慧1 2*，吴正升4接受日期:4022 - 09 - 05作者单位：、安徽医科大学第一附属医院高新院区病理科，合肥9300312安徽医科大学病理学教研室，合肥237237作者简介:何佳慧，女，硕士，医师。
E-mail ： 7311906 ********吴正升，男，博士，主任医师，通讯作者。
E-mail ： woozson@ 102. om真性红细胞增多症可合并肾脏损害，文献报道真性红细 胞增多症合并肾小球肾炎，首次确诊通常为肾脏损害，在真性红细胞增多症发生2~22年才被诊断，肾脏组织病理类型 分别表现为局灶节段性肾小球硬化症、XA 肾病、紫癜性肾炎 及膜增生性肾小球肾炎。
患者预后与组织学类型相关，如果超过54%肾小球发生硬化尤其伴新月体形成时，易出现肾功能不全，经数月至数年进展为尿毒症。
确诊真性红细胞增多 症后肾脏损害不可逆，可能与真性红细胞增多症引起血小板 活化和微循环障碍以及体内高粘滞状态，导致肾小球毛细血 管壁重塑有关。
本例患者需进一步监测C3NeF 、H 因子基因 背景及其抗体、B 因子自身抗体等，目前患者肾功能已进入规律腹膜透析治疗,需进行长期随访o 参考文献：[1 ] Arber D A , Owzi A , HosepPn R , ot ai The 2016 mvision to theWorld Health Orpanization classification of myeloid neoplasms and zente PuhemiuJ]. Blood, 2016,127（22） ：239、-2405.[2] Movlarb O , MePtu J, FyzeX J, ot ii EhiZemioPpa of mye/fibm-关键词:肺肿瘤;纤维腺瘤;病例报道 中图分类号:R 732.0文献标志码：B文章编号：1001 -7306（2222）11 -1385 -02doi ： 1023315// codh ejeep. 2020. 19 433患者男性32岁，既往体健。
黑蜈蚣叶属（蜈蚣衣科）地衣一新种
黑蜈蚣叶属（蜈蚣衣科）地衣一新种作者：蒋树浩贾泽峰来源：《广西植物》2024年第04期摘要：该文基于形态学、解剖学、化学及分子系统学的方法，对采自中国泰山的黑蜈蚣叶属地衣进行了分类学研究，发现了1新种，即泰山黑蜈蚣叶（Phaeophyscia taishanensis）。
该新种的主要特征为地衣体上表面末端具稀疏的皮层毛；髓层白色；下表面黑色，裂片末端处呈灰白色或浅褐色；盘托上部偶有白色或浅色的皮层毛，常常稀疏可数；子囊孢子褐色，厚壁，Physcia型，孢子大小为（18.0～20.5）μm × （9.0～10.0）μm。
该文还基于表型特征讨论了新种与相似种的异同，并基于分子数据以ITS序列构建最大似然系统发育树且进行了序列分析，同时提供了详细的形态学描述及特征图片。
该新种的发现为蜈蚣衣科地衣生物多样性研究积累了基础资料。
关键词：地衣型真菌，粉衣目，蜈蚣衣科，系统发育，分类学中图分类号： Q949.34文献标识码： A文章编号： 1000-3142（2024）04-0621-08A new species of the lichen genus Phaeophyscia （Physciaceae）JIANG Shuhao， JIA Zefeng（ College of Life Sciences， Liaocheng University， Liaocheng 252059， Shandong，China ）Abstract： Based on morphological， anatomical， chemical and molecular systematic methods， a taxonomic study was carried out on the lichen genus Phaeophyscia collected from Mount Tai. One species， P. taishanensis is reported as new to science. It is characterized by the following characters： white or hyaline cortical hairs sparsely on the upper surface of the marginal peripheral zones of the lobes; white medulla; black lower surface with sometimes white or pale brown ends; sparse cortical hairs occasionally on upper portion of thalline margin; and ascospores brown，Physcia-type， sized （18.0-20.5）μm × （9.0-10.0）μm. Based on phenotypical characteristics，the similarities and differences between the new species and similar species were discussed. the maximum likelihood phylogenetic tree was constructed with ITS sequence， and the sequence analysis was carried out. A detailed morphological description and pictures of the characteristics of this new species are provided. The discovery of this new species has accumulated basic data for the study of Physciaceae biodiversity.Key words： lichenized fungi， Caliciales， Physciaceae， phylogeny， taxonomy黑蜈蚣叶属（Phaeophyscia Moberg）隶属于子囊菌门（Ascomycota）茶渍纲（Lecanoromycetes），粉衣目（Caliciales）蜈蚣衣科（Physciaceae），全世界有66种，中国已报道21种（魏江春，2020; 陈健斌和胡光荣，2022; Wijayawardene et al.， 2022; 陈健斌，2023）。
联合应用Bio-oss_骨代材料和Bio-gide_胶原膜行引导骨组织再生术治疗重度牙周炎的效果
论著China &Foreign Medical Treatment 中外医疗联合应用Bio- oss 骨代材料和Bio- gide 胶原膜行引导骨组织再生术治疗重度牙周炎的效果葛权泉上海市第六人民医院金山分院口腔科，上海 201599［摘要］ 目的 评估重度牙周炎在引导骨组织再生术中Bio-gide+Bio-oss 的作用。
方法 方便选取2020年12月—2021年12月上海市第六人民医院金山分院的74例重度牙周炎患者，随机分为常规组和再生组，每组37例，常规组行翻瓣术治疗，再生组行Bio-oss 骨代材料+Bio-gide 胶原膜引导骨组织再生术，对比两组有效率、龈沟液内炎症因子、牙周指数、牙周疼痛感及并发症。
结果 再生组牙周炎的治疗有效率为97.30%，高于常规组（78.38%），差异有统计学意义（χ2=4.554，P <0.05）。
术后再生组龈沟液中的炎症情况、牙周指数均比常规组低，差异有统计学意义（P <0.05）。
再生组轻度疼痛率（89.19%）比常规组（59.46%）高，中度疼痛率（10.81%）比常规组（35.14%）低，差异有统计学意义（χ2=8.568、6.186，P <0.05）。
再生组牙周炎治疗的并发症发生率2.70%，比常规组（21.62%）低，差异有统计学意义（χ2=4.554，P <0.05）。
结论 Bio-gide+Bio-oss 使用后达到的骨组织再生效果好，能纠正牙周指数，缓解牙周炎症，且牙周创伤小。
［关键词］ Bio-oss 骨代材料；有效性；使用价值；Bio-gide 胶原膜；并发症；炎症因子；重度牙周炎［中图分类号］ R4 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1674-0742（2023）02(c)-0005-05Effect of Combined Application of Bio-oss Bone Substitute Material and Bio-gide Collagen Membrane for Guided Bone Tissue Regeneration in the Treatment of Severe PeriodontitisGE QuanquanDepartment of Dentistry, Shanghai Sixth People's Hospital, Jinshan Branch, Shanghai, 201599 China[Abstract] Objective To evaluate the role of Bio-gide+ Bio-oss in guided bone tissue regeneration for severe peri‐odontitis. Methods convenient selection 74 patients with severe periodontitis in Jinshan Branch of Shanghai Sixth People's Hospital from December 2020 to December 2021 were randomly divided into conventional group and regen‐erative group, with 37 cases in each group. The conventional group received flap surgery, while the regenerative group received Bio-oss bone replacement material +Bio-gide collagen film guided bone tissue regeneration. The effective rate, inflammatory factors in gingival crevicular fluid, periodontal index, periodontal pain and complications were com‐pared between the two groups. Results The effective rate of periodontitis treatment in the regeneration group was 97.30%, higher than that in the conventional group (78.38%), and the difference was statistically significant (χ2=4.554, P <0.05). The inflammation and periodontal index of gingival crevicular fluid in postoperative regenerationgroup were lower than those in conventional group, and the difference was statistically significant (P <0.05). The rate of mild pain in the regeneration group (89.19%) was higher than that in the conventional group (59.46%), and the rate of moderate pain in the regeneration group (10.81%) was lower than that in the conventional group (35.14%), the differ‐ence was statistical significance (χ2=8.568, 6.186, P <0.05). The incidence of complications of periodontitis in the re‐generation group (2.70%) were lower than those in the conventional group (21.62%), and the difference was statistically significant (χ2=4.554, P <0.05). Conclusion Bio-gide+ Bio-oss use achieved good bone tissue regeneration, correctingperiodontal index, relieving periodontal inflammation and with little periodontal trauma.DOI ：10.16662/ki.1674-0742.2023.06.005[作者简介] 葛权泉（1981-），男，本科，主治医师，主要从事牙周病诊治及口腔种植工作。
mdivi-1对匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元保护作用及其机制研究
-751 -网络出版地址：http://k/s. c/ki. /et/kcms/detail/34. 1065. r. 20200507. 0934. 019. htwi
线粒体分裂蛋白抑制剂(mitochondCal division inhibitor, MdPi-1 )是线粒体动力相关蛋白1 ( dy-
2020 -02 -22 接收 基金项目：湖南省医药卫生科研计划项目(编号:B2014 - 056) 作者单位:南华大学附属第二医院神经内科，衡阳421001 作者简介:甘露，男,硕士；
陈琳，女，副主任医师，副教授，责任作者,E-mail： chen-
1P6766@ yeah. net
namin-re/ted protein 1, DRP1 )的选择性抑制剂，属 于座卩坐咻酮衍生物，可通过抑制GTP酶活性发挥作 用［2］。文献'3脱(报道Mdip-1可对脓毒症大鼠器官 功能起保护作用，但在癫痫模型中MdiP-1相关研 究报道较少。现通过建立癫痫大鼠模型，观察各组 大鼠行为学及MdiP-1对海马神经元的保护作用, 探讨其可能的作用机制。
加入DRP1抗体(1 : 500 $, 4 i过夜，PBS冲洗3
1材料与方法
1.1实验动物20只雄性SD大鼠(清洁级,6~8 周龄)，体质量200 -250 g,购于湖南斯莱克景达实 验动物有限公司［许可证：SCXK (湘)2015 -005 ］, 实验前适应性饲养1周,室温(22 ±2)i,恒温、纯 净饮水及标准饲料分笼饲养。所有的实验过程均经 动物伦理委员会同意，实验过程符合3R原则。 1-2试剂与仪器氯化锂、匹鲁卡品(美国sigma 公司);MdiP-1抑制剂(美国seXeck公司);兔抗 DRP1、ENT1抗体(美国Abcom公司)；BCA蛋白试 剂液(上海碧云天)；透射电镜(日立HITACHI公 司)；激光共聚显微镜(德国Leica公司)；全自动曝 光仪(美国BioRad公司)。 1.3实验方法 1 -3.1分组与模型建立将大鼠随机分为正常组、 模型组、DMSO组、MdiP-1组,保证造模成功后每组 均有5只大鼠入组。癫痫造模参考文献［5］方法:氯 化锂-匹鲁卡品模型。正常组:腹腔注射同等容量 的生理盐水替代模型组中匹鲁卡品、氯化锂溶液;模 型组：腹腔注射氯化锂(127 mg/kg,0.9% NaCl配 制)用于增强匹鲁卡品敏感性,20 h后腹腔注射匹 鲁卡品(30 mg/kg,0.9% NaCl配制)，在注射匹鲁 卡品前30 min注射1 mg/kg硫酸阿托品，拮抗外周 胆碱能反应，直至出现Racine分级标准'6］中的6脱 级癲痫持续状态(status epilepticus, SE) ； Mdivi-1 组 和DMSO组:在注射匹鲁卡品前30 min分别腹腔注 射MdPi-1抑制剂(1.2 mg/kg)或0. 1%二甲基亚0 (DMSO)溶液，其余步骤同模型组。癫痫大鼠成功
srebp-1c分子量
srebp-1c分子量SREBP-1c（sterol regulatory element binding protein-1c）是一种转录因子，其分子量约为110-125 kDa。
它在脂质代谢中起着重要的调控作用。
本文将介绍SREBP-1c的结构、功能以及其在脂质代谢中的作用机制。
SREBP-1c是SREBP家族的一员，共有三个亚型，分别是SREBP-1a、SREBP-1c和SREBP-2。
其中，SREBP-1a和SREBP-1c由同一基因SREBF1编码，通过选择性剪切产生不同的转录变体。
SREBP-1c主要在肝脏、肌肉和脂肪组织中表达，并且其表达水平在肥胖和糖尿病等代谢性疾病中显著增加。
SREBP-1c的结构包括N端转录激活结构域（N-terminal transcriptional activation domain）、跨膜结构域（transmembrane domain）和C端DNA结合结构域（C-terminal DNA binding domain）。
N端转录激活结构域与转录共激活因子相互作用，促进基因的转录活性。
跨膜结构域与内质网膜蛋白SCAP （SREBP cleavage-activating protein）相互作用，调控SREBP的成熟和活化。
C端DNA结合结构域与靶基因的启动子结合，进而调控脂质代谢相关基因的转录。
SREBP-1c主要通过以下两个途径参与脂质代谢的调控：合成途径和摄取途径。
在合成途径中，SREBP-1c通过调控多个关键酶的转录，促进脂肪酸和甘油三酯的合成。
其中，SREBP-1c可激活乙酰辅酶A羧化酶（acetyl-CoA carboxylase）和脂肪酸合酶（fatty acid synthase）等酶的转录，提高脂肪酸的合成速率。
在摄取途径中，SREBP-1c可增加低密度脂蛋白受体（LDLR）的表达，促进脂蛋白的摄取和胆固醇的摄入。
SREBP-1c的活性受到多个因素的调控，包括内源性因子和外源性因子。
DB3311∕T 139-2020 生态产品价值核算指南
3.3科学性
应准确反映生态产品的真实价值，基于人类生态认知、生态消费和科学技术水平合理界定纳入核算的生态产品范围和边界。
3.4统一性
同一类型的生态产品应当采用统一的计价标准。不同类型的生态产品之间价值转换时应采用统一的价值核算当量。
b)生态调节服务目录清单应涵盖核算区域生态系统服务的主要功能类型；
c)生态文化服务目录清单应充分考虑核算区域内生态文化服务产业的全部产品和服务。
4.5参考价格
在统计各类生态产品功能量基础上，科学确定当年参考价格，具体价格确定应遵循以下原则：
a)有市场价格的直接采用市场价格；
b)无市场价格的优先采用现行标准及规范的规定价格或行业主管部门的指导价格，其次采用替代成本法推算价格；
本标准属首次发布。
II
生态产品价值核算指南
1范围
本标准给出了生态产品价值核算的基本原则、核算基础、核算体系、核算方法、核算数据、核算报告、核算应用等方面的建议。
本标准适用于指导以市、县、乡、村为单位的生态产品价值核算。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1
生态产品ecosystemproduct
c)既无市场价格又无规定价格和指导价格并且不宜采用替代成本法的，可以采用能值分析法的能值/货币率估算价格。
5核算体系
5.1应根据核算区域生态产品类型和特征分别编制各类生态产品价值核算指标体系。一般按照生态物质产品、生态调节服务、生态文化服务设计一级指标，根据核算区域的实际设计若干二级指标和三级指标，行业细分产品、特色产品和新型产品根据核算需要和实际产出设计四级指标。
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北京化工大学2005——2006 学年第一学期
《科技英语与文献查阅》期末考试试卷
班级：姓名：学号：分数：
题号一二三总分
得分
一、请把下面的句子翻译成汉语。
（Please translate the following sentences into Chinese.）
1.Anabolic processes do not occur spontaneously：they must be driven by an energy flow that for most microorganisms is provided by a series of ‘energy-yielding’ catabolic processes. (4 分)
2.The coupling of catabolic and anabolic processes is the basis of all microbial biochemistry, and can be discussed either in terms of the overall balance or in terms of individual processes, as here. (4 分)
3.Once a useful organism has been isolated by preliminary screening several options are available for improving productivity, which include modifications to the medium and fermentation conditions, mutation and hybridization. (4 分)
4.Future markets are largely assured for fermentation products because, with limited exceptions, it is not possible to produce them economically by other chemical means. (4 分)
5.When a continuous culture system is viewed as a production system its performance will be judged by two criteria: (1) the quantity of cells produced in unit time — the output rate; and (2) the quantity of cells produced from unit weight of substrate — the effective yield or ‘yield coefficient’. (5 分)
6.Although the normal locus of enzyme action is in the interior of the living cell there are numerous examples of cells being able to excrete enzymes (extracellular enzymes) into the environment to break down large organic molecules (proteins, fats, starches) which otherwise could not enter the cell. (4 分)
7.Many operations which are standard in the laboratory will become impractical, or uneconomic, on the process scale. (4 分)
8.Moreover, bioproducts are often very labile or sensitive compounds, whose active structures can survive only under defined and limited conditions of pH, temperature, ionic strength, etc. (4 分)
9.Bearing in mind such restrictions, much ingenuity is called for if the available repertoire of scientific methods is to be used to best effect.
(4 分)
10.It will also be apparent that there is no one unique, ideal, or universal operation, or even sequence of operations, which can be recommended; individual unit operations must be combined in the most suitable way for a particular problem. (4 分)
puter control is the current by-word in fermentation technology and will soon reach the point where you dare not admit that your fermenters are not coupled to a computer; unfortunately, amidst the improvements this brings, we are beginning to see cases of the old dogma ‘instruments prevent creative thinking’. (5 分)
puter control requires online instruments (or at least off-line instruments where the time lag between sampling and analysis is short) and this is reflected in this chapter. (4 分)
二、请把下面的句子翻译成英语。
（Please translate the following sentences into English.）
1.《生物工程和生物技术专业英语》这本书共包含五章内容，第一章: 绪论；第二章: 生长和新陈代谢的生物化学；第三章: 应用遗传学；第四章: 发酵技术；第五章: 酶和固定化细胞技术。
(6 分)
2.生物工程利用细菌，酵母，真菌，植物细胞或培养的哺乳动物细胞作为工业加工的组分。
(6 分)
3.人们在生物反应器的设计方面，在过程监控技术方面以及在计算机控制发酵过程方面都取得了一定的进展。
(6 分)
4. 然而直到1878年，酵母细胞中对发酵起作用的真正成分才被发现并被命名为酶。
(6 分)
5. 离心机的分离效果可以用下面的表达式来描述：
ηρ18/2gZF d Q ∆= 和 900//22Rn g R Z ≈=ω
在上述两个等式中：Q 是容量的给料速率，d 是粒子直径，Δρ是密度差，g 是重力加速度，f 是沉淀物的面积，η是粘度，r 是半径，ω是角速度，n 是每分钟的转数。
(8 分)
6. 考虑到我们需依赖仪表了解生物过程，因而了解所使用的仪表是很重要的，否则在使用中容易在它们的适用性和功能方面犯错误。
（8 分）
三、请把下面的句子拆分成几个简单句。
(Please divide the each of the following sentence into several simple sentences.)
1. Many operations which are standard in the laboratory will become impractical, or uneconomic, on the process scale. （3 分）
2.Anabolic processes do not occur spontaneously：they must be driven by an energy flow that for most microorganisms is provided by a series of ‘energy-yielding’ catabolic processes. （3 分）
puter control is the current by-word in fermentation technology and will soon reach the point where you dare not admit that your fermenters are not coupled to a computer. （4 分）。