志贺氏菌检测流程
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志贺氏菌属检验的标准操作程序
【目的】
指导检验伤寒、副伤寒沙门氏菌。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。
【标本的采集】
由受检者将采便用已蘸有甘油盐水的棉棒自行插入肛门内,轻轻转动,然后取出,插入带有编号的塑料试管中,交给检验科人员。
【检验程序】
采便→立即划线接种SS平板→培养后挑取可疑菌落接种三糖铁斜面及半固体培养基→生化学试验→血清学试验→报告检验结果。
【操作步骤】
1. 分离培养
采便后立即用采便棒划线接种SS琼脂平板。
36±1℃培养18-24小时,挑取无色半透明的光滑菌落分解乳糖或迟缓分解乳糖的光滑菌落,接种三糖铁斜面及半固体,36±1℃培养18-24小时。
2. 生化学试验
凡是三糖铁反应符合志贺氏菌属特征者(斜面产碱或不变色,底层产酸,H2S(—),产气(—),但福氏6型产生少量气体)、无动力、革兰氏阴性杆菌、作V-P试验,苯丙氨酸,赖氨酸,柠檬酸盐,葡萄糖铵试验。
其结果全部阴性者,作血清学试验。
3. 血清学试验
挑取三糖铁斜面上的培养物,按下列顺序作玻片凝集试验:
四种志贺氏——→福氏————→宋内氏————→志贺氏————→志贺氏
多价血清多价血清血清 2型血清 1型血清
∣ + ∣ +∣ +∣ +∣
—∣↓↓↓↓
∣福氏菌宋内氏菌志贺氏2型志贺氏1型
↓ 1-6型某型+
鲍氏 7-11型某组+:组内分型血清———→鲍氏某型
血清: 12-15型全部—:加热破坏K抗原,重做凝集试验
16-18型
福氏菌的鉴定:凡是与福氏多价血清凝集的菌株,可先用3、4,群6,群7,三种因子血清检查,根据群因子血清反应结果,再用型因子血清检查。
福氏菌抗原成分如下。