2022学年辽宁省高考生物必刷试卷((含答案解析))

2022学年高考生物模拟测试卷
考生请注意：
1．答题前请将考场、试室号、座位号、考生号、姓名写在试卷密封线内，不得在试卷上作任何标记。

2．第一部分选择题每小题选出答案后，需将答案写在试卷指定的括号内，第二部分非选择题答案写在试卷题目指定的位置上。

3．考生必须保证答题卡的整洁。

考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。

每小题只有一个选项符合题目要求）
1．人体蛋白质被水解的过程如下图所示，下列相关叙述正确的是（）
A．蛋白质的水解只发生在细胞外，如消化道内
B．该过程中酶分子可发生可逆性形变
C．该过程为放能反应，释放的能量可用于合成ATP
D．可用单位时间内分解蛋白质的量代表酶活性
2．下图表示某森林生态系统一年内CO2消耗量与释放量的情况，其中甲表示该生态系统消费者呼吸作用CO2释放量，乙表示分解者呼吸作用CO2释放量，丙表示生产者呼吸作用CO2释放量，丁表示生产者光合作用及化能合成作用CO2消耗量，下列叙述不正确的是
A．碳循环在甲、乙、丙构成的生物群落内部是以含碳有机物的形式双向传递
B．流经该生态系统的总能量可用丁来表示
C．人工生态系统中CO2的消耗量与释放量关系往往不符合上图
D．根据图示关系可推测该森林生态系统的抵抗力稳定性正在上升
3．下列组成元素不同于其它三类物质的是（）
A．磷脂B．蛋白质C．RNA D．ATP
4．格里菲思的实验证明了
A．DNA是遗传物质
B．RNA是遗传物质
C．转化因子是DNA
D．存在使R型细菌转化为S型的转化因子
5．物质A是一种安全低残留的抑菌剂，是防治水稻纹枯病的主要药物之一。

但因长期使用，其防治纹枯病的效果有所下降，以下解释不合理的是（）
A．突变导致纹枯病菌基因库发生改变
B．物质A使纹枯病菌发生抗药性基因突变
C．物质A对纹枯病菌的抗药性具有选择作用
D．水稻与纹枯病菌之间存在共同进化
6．图甲表示玉米种子萌发过程中干重的变化，图乙表示萌发过程中O2消耗量和CO2生成量的变化。

据图可得出的结论是（）
A．种子萌发初期主要进行有氧呼吸
B．萌发的种子在a点时开始进行光合作用
C．a点前干重减少主要是由于细胞呼吸消耗有机物
D．图乙两条曲线相交时，有氧呼吸速率与无氧呼吸速率相等
二、综合题：本大题共4小题
7．（9分）将某植物的叶肉细胞链于适宜沮度和充足的14CO2条件下，先给予一段时间光照，然后再停止光照，检测整个过程叶肉细胞的叶绿体中放射性C3浓度的变化情况，结果如下图.回答下列问题。

（1）叶肉细胞以14CO2为原料，生成C3的场所是____。

图中a~b段放射性C3浓度基本不变，原因是____。

（2）图示结果显示，停止光照后的b～c时间段内，叶肉细胞中放射性C3的浓度并没有上升，原因是____。

（3）某实验小组对叶肉细胞交替进行光照和黑暗处理（先光照后黑暗，每次光照与黑暗处理的时间相同；各组光照强度和处理的总时间也相同），随着光照和黑暗交替频率的增加，推测叶肉细胞光合作用中CO2的同化总量最可能____（填增加或减少或不变），原因是____。

8．（10分）我国干旱、半干旱区占国土总面积的47％，这些区域水资源贫乏，植被稀疏，生态环境脆弱，加之多年来人为活动(过度放牧、开荒种田等)的干扰，使得本来就脆弱的生态系统遭到了更为严重的破坏。

为了恢复生态，内蒙古锡林郭勒在三种典型草原地带进行为期17年的封育政策，群落变化如表所示：
典型草原地带不同植l物群落封育变化
注：NE、SE、N、S分别代表朝向东北、东南、北、南
（1）封育是恢复生态学的常用手段，恢复生态学主要利用的是___________________理论，充分依靠生态系统自身的能力尽快恢复。

锡林郭勒部分地区实行封育而非发展单一的人工林，这遵循了生态工程的________________________原理。

（2）用样方法对植物种群密度进行调查，应注意_______________，目的是______________。

（3）坡向NE的本氏针茅草群落生产力最高，应该是该区域__________________这一自然因素相对充裕。

研究发现，封育措施较大地改良了土壤，这体现了生物多样性的____________________________价值。

（4）在半干旱区，草原生态系统比农田生态系统抵抗干扰的能力____________(填“强”或“弱”或“差别不大”)，因为
_____________________________________________________。

9．（10分）2012年诺贝尔生理学或医学奖颁给了在细胞核重新编程领域有杰出贡献的两位科学家。

科学家把c—Myc 等4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成未成熟的细胞—诱导多能干细胞即iPS细胞，而未成熟的细胞能够发育成机体内所有类型的细胞。

（1）题中的逆转录病毒相当于基因工程基本工具中的________；构建基因表达载体时对核苷酸序列有严格要求的工具酶是___________。

（2）目的基因进入受体细胞内，并且在其内维持稳定和表达的过程称为______________。

基因工程技术所依据的原理是_________。

（3）若想增强病毒颗粒的感染性，可利用________________方法改造病毒外壳蛋白的结构，并最终通过对_______进行操作来完成。

（4）在培养过程中，要将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是_______________________________。

（5）iPS细胞在功能上类似于胚胎干细胞，则其在功能上的特点是______________________。

iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此不会像生殖性克隆一样引发_____________问题。

10．（10分）某雌雄异株的二倍体植株，其花色有红色和白色两种。

选一株白花雌株和一株白花雄株作为亲本进行杂交，F1中白花：红花=3：1。

不考虑变异和X、Y染色体的同源区段，欲判断控制花色性状的基因数量和位置。

回答下列问题：
（1）若花色由一对等位基因控制，要判断基因位于常染色体还是X染色体，还需统计________________。

（2）若花色由两对等位基因（A/a、B/b）共同控制，且两对基因位于同一对常染色体上。

请在图中标明亲本植株的基因情况。

并结合F1的性状分离比，分析在群体中基因型和表现型的两种对应情况：________，其余基因型表现为白色；
________，其余基因型表现为白色。

________
（3）为进一步确定（2）题中基因型和表现型是哪种对应情况，可选用F1中植株进行一次杂交实验，写出实验思路、预期结果及结论。

实验思路：将F1中___________________进行杂交，统计F2中植株表现型及比例。

预期结果及结论：_____________________________________________________________。

11．（15分）癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。

研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。

研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：
α链：5'-T C A C T C G A G A C C A T G C A G A T C C C A C A G G C G C C C-3'
β链：5'-C T C G A A T T C T C A G A G G G G C C A A G A G C A G T G-3'
图1
（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。

（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA 连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。

该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。

Ca 处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完（3）而后一定温度下，与经过2
成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。

（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。

一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。

为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。

研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。

2022学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）（含详细解析）
一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。

每小题只有一个选项符合题目要求）
1、B
【答案解析】
1、酶是由活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质，极少数酶是RNA；
2、酶的特性：高效性、专一性和作用条件温和的特性；
3、酶促反应速率通常用单位时间内底物浓度的减小量或产物浓度的增加量来表示；
4、分析题图：酶的活性中心往往与底物分子在空间结构上具有特殊的匹配关系，当酶与底物结合形成酶﹣底物复合物后，便启动酶催化化学反应的发生，反应结束后，酶分子的数量和性质不发生改变。

【题目详解】
A、蛋白质的水解可发生在细胞外，如消化道内，也可发生在细胞内，A错误；
B、题图中蛋白酶的活性部位与蛋白质结合后其空间结构会发生形变，催化反应完成后蛋白酶的空间结构又可恢复，即酶在催化化学反应的过程中酶分子可发生可逆性形变，B正确；
C、该蛋白质的水解反应不能释放能量用于合成ATP，用于合成ATP的能量来自光合作用或呼吸作用，C错误；
D、用单位时间内分解蛋白质的量可代表酶促反应的速率，单位时间内分解蛋白质的量不能代表酶活性，D错误。

故选B。

2、A
【答案解析】
A、碳循环在甲、乙、丙构成的生物群落内部是以含碳有机物的形式单向传递的，A项错误；
B、流经该生态系统的总能量是生产者固定的总能量，而丁表示生产者光合作用及化能合成作用CO2消耗量，所以流经该生态系统的总能量可用丁来表示，B项正确；
C、人工生态系统由于人工调节，物质和能量多流向对人类有益的部分，故C项正确；
D、流经该生态系统的总能量大于各个营养级的呼吸消耗，有积累，故适宜物种生存，物种丰富度会逐渐增加，抵抗力稳定性增强，D项正确。

故选A。

考点：本题考查生态系统能量流动、物质循环的相关知识，意在考查考生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。

3、B
【答案解析】
磷脂双分子层是生物膜的基本支架，由C、H、O、N、P五种元素组成，蛋白质是生命活动的主要承担者，由C、H、O、N等元素组成，RNA是核酸中的一种，由C、H、O、N、P五种元素组成，ATP是直接能源物质，全称三磷酸腺苷，由C、H、O、N、P五种元素组成。

【题目详解】
A、磷脂由C、H、O、N、P五种元素组成。

与RNA、ATP相同；
B、蛋白质由
C、H、O、N等元素组成，不一定含有P；
C、RNA由C、H、O、N、P五种元素组成。

与磷脂、ATP相同；
D、ATP由C、H、O、N、P五种元素组成。

与RNA、磷脂相同。

故选B。

【答案点睛】
蛋白质的基本单位是氨基酸，由C、H、O、N等元素组成，常含有S，如胰岛素，血红蛋白含有Fe，不同蛋白质可能含有除C、H、O、N四种元素之外的其他元素，但C、H、O、N四种元素是必有的。

4、D
【答案解析】
格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验，证明了S型细菌中存在某种转化因子，能将R型细菌转化为S型细菌，但未证明DNA是遗传物质，也没有证明RNA是遗传物质以及转化因子是DNA。

故选D。

5、B
【答案解析】
1、害虫产生抗药性的原因并不是由外因引起的，而是内在的遗传与变异引起的；在未使用农药前，某些害虫个体已具有这种抗药性，农药对害虫的抗药性进行了定向选择。

2、生物进化的实质是种群基因频率的定向改变，不同物种之间、生物与无机环境之间是相互影响、共同发展，即共同进化，通过漫长的共同进化，形成生物多样性。

【题目详解】
A、纹枯病菌突变产生新的基因，导致基因库发生改变，A正确；
B、物质A起选择作用，不能使纹枯病菌发生基因突变，B错误；
C、物质A对纹枯病菌的抗药性具有选择作用，使抗药性强的基因逐渐积累，C正确；
D、生物进化是共同进化，因此水稻与纹枯病菌在相互选择中共同进化，D正确。

故选B。

6、C
【答案解析】
根据题意和图示分析可知：图甲表示种子萌发过程中干重的变化，由于干种子进行萌发首先要吸足水分，鲜重在开始快速增加，但干重降低的原因是种子萌发过程中呼吸作用加强，消耗有机物，导致干重减少，后期种子萌发长成幼苗，幼苗进行光合作用积累有机物，使干重增加。

图乙中，开始时，O2吸收量少，细胞主要进行无氧呼吸，两条线相交之前，二氧化碳释放量大于氧气的吸收量，表示细胞的呼吸方式为有氧呼吸和无氧呼吸；两条线相交之后，氧气释放量与二氧化碳吸收量相等，此时，细胞只进行有氧呼吸。

【题目详解】
A、由图乙中氧气消耗量和二氧化碳释放量的曲线图可知，种子萌发初期以无氧呼吸为主，A错误；
B、a点之前干重减少，a点之后干重增加，说明a点时萌发的种子光合作用强度等于呼吸作用强度，而光合作用应在a点之前就已进行，但强度小于呼吸作用强度，B错误；
C、a点前干重减少主要是由于细胞呼吸消耗有机物，即使a点前开始了光合作用，光合作用的强度也小于呼吸作用强度，C正确；
D、图乙两条曲线相交时，二氧化碳释放量与氧气吸收量相等，此时，细胞只进行有氧呼吸，D错误。

故选C。

二、综合题：本大题共4小题
7、叶绿体基质固定生成的速率与还原的速率相等叶绿体基质中还有光反应产生的ATP和[H]，还能维持较短时间的还原反应增加光反应产生的ATP和[H]能及时利用和再生
【答案解析】
光合作用分为两个阶段进行，在这两个阶段中，第一阶段是直接需要光的称为光反应，第二阶段不需要光直接参加，是二氧化碳转变为糖的反过程称为暗反应。

光合作用在叶绿体中进行，光反应的场所位于类囊体膜，暗反应的场所在叶绿体基质。

光反应的发生需要叶绿体类囊体膜上的色素、酶参与。

【题目详解】
（1）14CO2与C5在叶绿体基质中生成C3。

图中a~b段放射性C3浓度基本不变，原因是固定生成的速率与还原的速率
相等。

（2）图示结果显示，停止光照后的b～c时间段内，叶绿体基质中还有光反应产生的ATP和[H]，还能维持较短时间的还原反应，因此叶肉细胞中放射性C3的浓度并没有上升。

（3）随着光照和黑暗交替频率的增加，光反应产生的ATP和[H]能及时利用和再生，故叶肉细胞光合作用中CO2的同化总量最可能增加。

【答案点睛】
本题重点考查光合作用的过程，以及从图形信息中判断交替使用光照的结果，需要学生有一定的分析推理能力。

8、群落演替物种多样性随机取样为了确保所选择的样方具有代表性，不受主观因素的影响，使统计的结果(估算值)能更接近真实的情况水分间接强草原生态系统的组分更多，食物网更复杂，自我调节能力更强
【答案解析】
1、样方法注意事项：（适用范围：植物种群密度，昆虫卵的密度，蚜虫、跳蝻的密度等。

）
（1）样方应随机选取
（2）样方面积大小要合适
（3）样方数目：总体面积大要多取，总体面积小可少取。

（4）样本统计：位于样方边线上的植物计数相邻两边及其交点上的植物；不同生长期的个体都应统计。

2、生物多样性的价值：（1）直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的；（2）间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）；（3）潜在价值：目前人类不清楚的价值。

3、生态系统所具有的保持或恢复自身结构和功能相对稳定的能力，能力大小由生态系统的组分和食物网的复杂程度有关，生态系统的组分越多和食物网越复杂自我调节能力就越强。

但自我调节能力是有限度的，超过自我调节能力限度的干扰会使生态系统崩溃。

【题目详解】
（1）恢复生态学主要利用的是生物群落演替理论，特别强调生态系统的自我调节能力与生物的适应性，充分依靠生态系统自身的能力，并辅以有效的人为手段，从而尽快使生态系统从受损的退化状态恢复到正常的健康状态。

锡林郭勒部分地区实行封育而非发展单一的人工林，这遵循了生态工程的物种多样性的原理。

（2）用样方法对植物种群密度进行调查时，为了确保所选择的样方具有代表性，不受主观因素的影响，使统计的结果（估算值）能更接近真实的情况，因此应注意做到随机取样。

（3）根据题意可知，内蒙古锡林郭勒在三种典型草原地带区域水资源贫乏，封育后坡向NE的本氏针茅草群落生产力最高，说明该区域水分这一自然因素相对充裕。

封育措施较大地改良了土壤，这属于生态功能，因此体现了生物多样性的间接价值。

（4）生态系统抵抗力稳定性的大小与生态系统的自我调节能力有关，草原生态系统的组分更多，食物网更复杂，自我调节能力更强，而农田生态系统物种单一，食物网较为简单，自我调节能力较差，因此草原生态系统的抵抗力稳定性强于农田生态系统。

【答案点睛】
本题以内蒙古锡林郭勒在三种典型草原地带封育实例为背景考查生态学的知识点，要求学生掌握生态工程的基本原理和封育依据的原理，把握样方法的操作过程和注意事项，识记生物多样性的价值和实例，理解生态系统稳定性的原因和自我调节能力之间的关系，这是该题考查的重点。

9、运载体（或载体）限制性核酸内切酶（或限制酶）转化基因重组蛋白质工程基因维持培养基（液）的pH 具有发育的全能性伦理
【答案解析】
基因工程的工具：
1、限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

2、DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

3、运载体：常用的运载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【题目详解】
（1）由于逆转录病毒能将c-Myc等4个关键基因转入小鼠的成纤维细胞，所以逆转录病毒相当于基因工程基本工具中的运载体；构建基因表达载体时需要限制酶和DNA连接酶，其中对核苷酸序列有严格要求的工具酶是限制酶，它能识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

（2）目的基因进入受体细胞内，并且在其内维持稳定和表达的过程称为转化；基因工程技术又称之为基因拼接技术和DNA重组技术，所依据的原理是基因重组。

（3）根据人们对蛋白质功能的特定需求，可利用蛋白质工程技术改造病毒外壳蛋白的结构，要对蛋白质的结构进行设计改造时，最终必须通过对基因进行操作来完成。

（4）动物细胞培养过程中需要一定的气体环境（95%氧气和5%二氧化碳），其中5%CO2的作用是维持培养基（液）的pH。

（5）iPS细胞与ES细胞类似，理论上通过定向诱导能发育成各类组织细胞，但并不能发育成胚胎，这称为发育的全能性。

生殖性克隆就是以产生新个体为目的克隆，反对生殖性克隆的原因主要是伦理问题。

【答案点睛】
本题考查基因工程、蛋白质工程和胚胎工程的相关知识，意在考查知识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。

10、性状在F1代雌雄中的比例A、B基因同时存在时花色表现为红色；
a、b基因均纯合时花色表现为红色红花雌株和红花雄株若F2中白花：红花=1：1，则A、B基因同时存在时表现为红色若F2中全为红花，则a、b基因均纯合时表现为红色
【答案解析】
根据题意可知，一株白花雌株和一株白花雄株作为亲本进行杂交，F1中白花：红花=3：1，可见发生了性状分离的现象，则白花为显性性状，红花为隐性性状。

但是仅根据此结果不能判断基因在染色体上的位置，如果由一对等位基因控制，基因可以在常染色体上，如亲代为杂合子，也可以在X染色体，如亲代为雌株为杂合子，均可以导致F1中白花：红花=3：1的结果出现。

若控制该性状的基因由两对等位基因（A/a、B/b）共同控制，且两对基因位于同一对常染色体上。

结合图示可知，F1中白花：红花=3：1的出现应该是测交的变形，那么亲代的基因型为Aabb与aaBb。

【题目详解】
（1）常染色体遗传与伴性遗传的区别在于后代性状是否与性别相关联，故要判断基因位于常染色体还是X染色体，还需统计红花与白花的性状表现在F1代雌雄中的比例。

（2）结合分析可知：要符合题中表现型比例，填入的基因只能是b，亲本的基因型为Aabb与aaBb，则子代的基因型及比例为AaBb：Aabb：aaBb：aabb＝1：1：1：1，同时有两种情况满足题中白花：红花＝3：1，即①A、B基因同时存在时花色表现为红色，其余基因型表现为白色；或者②a、b基因均纯合时花色表现为红色，其余基因型表现为白色。

（3）为进一步确定（2）题中基因型和表现型是哪种对应情况，若为①，红花的基因型为A_B_，若为②，红花的基因型为aabb，故可让F1中红花雌株和红花雄株进行杂交，统计F2中植株表现型及比例。

若红花的基因型为A_B_，子一代红花的基因型为AaBb，其中Ab连锁，aB连锁，F2的基因型及比例为AAbb：AaBb：aaBB＝1：2：1，表现型比例为白花：红花＝1：1；若红花的基因型为aabb，则F2中全为红花。

【答案点睛】
本题考查遗传定律的应用的知识点，要求学生掌握基因的分离定律和基因的连锁与互换定律的应用及其常见的分离比，能够根据常见的分离比推导相关个体的基因型，理解伴性遗传与常染色体因此的区别，把握伴性遗传的特点及应用，能够根据图示判断配子的类型和后代的基因型，结合题意判断表现型出现的条件，这是该题考查的重点。

11、cDNA PCR Xho I EoR I 启动子、终止子、复制原点卡那霉素PD-1蛋白PDL-1
或答PD-1抗体作为对照
【答案解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。

将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA采用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原—抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【题目详解】
（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA）。

其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理，所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。

（2）分析图1中碱基序列，α链上有“—CTCGAC—”识别序列，β链上有“—GAATTC—”碱基识别序列，与图2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的识别序列相同。

故选用XhoI限制酶和EoRI限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。

基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。

（3）根据第（2）题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养基，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌。

（4）基因表达的产物是蛋白质，一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，可以检测细胞膜表面是否具有PD-1基因表达的PD-1蛋白。

为判断其是否具有生物学活性和功能，可采用抗原—抗体杂交技术，即从裂解293T细胞中，提取PD-1蛋白看能否与PDL-1发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。

为了增加实验的可信度，还需要设置对照实验，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，因为不含PD-1基因，所以“PD-1与PDL-1信号通路”不会阻断。

【答案点睛】
题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识在新的情景材料下分析运用。