西安医学院分生检验实验大纲(本)

《临床分子生物学检验》实验教学大纲
编写单位：西安医学院医学技术系
临床生化与免疫病原检验教研室编写时间：2013年9月15日
教务处印制
2013年9月15日
一、实验课程简介
二、实验教学内容与基本要求
（一）、实验项目名称：分子生物学检验技术实验室简介[实验目的]
1. 掌握微量移液器的使用；
2. 熟悉分子生物学检验技术常用仪器的结构与功能；
3. 熟悉基因扩增实验室的设置特点；
4.了解分子生物学检验技术操作特点。

[实验教学基本要求]
1. 学习分子生物学检验室常用仪器的结构、功能与使用方法；
2. 介绍基因扩增实验室标准化设置及区域功能；
3. 了解分子生物学检验技术操作要求。

[实验内容提要]
1. 分子生物学检验技术实验须知；
2. 参观分子生物学检验室；
3. 微量移液器的使用；
4. 分子生物学检验技术常用仪器介绍。

[实验类型]
验证性
[实验学时]：2学时
[实验使用的主要仪器]
1. 试剂蒸馏水
2. 器材微量移液器
3. 其他Tip头、Eppendorf管
（二）、实验项目名称：真核基因组DNA的分离与纯化
[实验目的]
1. 掌握基因组DNA的分离与纯化的原理；
2. 熟悉基因组DNA的分离与纯化的基本过程、影响因素。

[实验教学基本要求]
1. 学会基因组DNA的分离与纯化的操作；
2. 学会分子生物学实验室常用仪器的使用。

[实验内容提要]
1. 基因组DNA的分离与纯化的操作过程；
2. 常温与低温高速离心机的使用；
3. 涡旋混匀器、天平等的使用；
4. 注意事项。

[实验类型]
验证性
[实验学时]：5学时
[实验使用的主要仪器]
1．试剂无水乙醇、缓冲液GA、缓冲液GB、缓冲液GD、漂洗液PW、蛋白酶K、洗脱缓冲液TB
2．器材微量移液器、高速离心机、天平、涡旋混匀器、恒温箱、水浴箱、低温冰箱3.其他剪刀、Tip头、Eppendorf管、棉签、收集管、吸附柱CR
（三）、实验项目名称：核酸的浓度和纯度测定
[实验目的]
1. 掌握紫外吸收检测核酸的浓度和纯度原理；
2. 熟悉荧光法检测核酸的浓度的原理；
3. 熟悉核酸的浓度和纯度检测的操作；
4. 了解核酸的浓度和纯度检测的临床意义。

[实验教学基本要求]
1. 学习不同方法测定核酸浓度和纯度的操作；
2. 熟悉实验操作的注意事项。

[实验内容提要]
1. 介绍紫外吸收检测核酸浓度和纯度的原理；
2. 示教基本操作步骤；
3. 观察并记录实验结果；
4. 分析讨论实验原理及实验结果。

[实验类型]
验证性
[实验学时]：2学时
[实验使用的主要仪器]
1．试剂待测核酸样品、蒸馏水
2．器材紫外分光光度计、石英比色杯、微量移液器
（四）、实验项目名称：聚合酶链式反应
[实验目的]
1. 掌握PCR的反应原理；
2. 熟悉PCR扩增模板DNA的操作；
3. 了解PCR反应条件的设置。

[实验教学基本要求]
1. 学会PCR的反应原理和PCR体系组成；
2. 学习PCR扩增模板DNA的操作步骤和注意事项；
3. 探索PCR反应条件。

[实验内容提要]
1. PCR扩增模板DNA的基本原理及体系组成；
2. PCR反应扩增条件的选择；
3. PCR仪基本参数设置；
[实验类型]
综合性/设计性
[实验学时]4学时
[实验使用的主要仪器]
试剂：DNA模板、引物、Taq DNA 聚合酶、dNTPs、10×PCR缓冲液、引物、ddH2O 器材：微量移液器、高速离心机、涡旋混匀器、PCR扩增仪
其他：Tip头，Eppendorf管，记号笔。

（五）、实验项目名称：琼脂糖凝胶电泳分离DNA
[实验目的]
1. 掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段的原理；
2. 熟悉琼脂糖凝胶电泳分析DNA片段的操作。

[实验教学基本要求]
1. 学会凝胶电泳分离DNA片段的原理；
2. 示教凝胶电泳分析DNA片段的操作步骤和注意事项；
3. 学习对实验结果进行分析。

[实验内容提要]
1. PCR扩增产物进行凝胶电泳分析；
2. 紫外灯下观察结果；
3．图像采集分析系统拍照记录；
3. 结果讨论。

[实验类型]
综合性/设计性
[实验学时]3学时
[实验使用的主要仪器]
试剂：琼脂糖、溴化乙锭、5×TBE缓冲液、DNA分子量参照物、6×DNA上样缓冲液
器材：微量移液器、稳压稳流电泳仪、水平式凝胶电泳槽、微波炉或电炉、紫外透射仪、凝胶成像系统
其他：Tip头、Eppendorf管、记号笔、一次性手套。

大纲执笔人：曹珮华
大纲校对人：杨亚娟
大纲审定人：曹珮华。