OFT与MCV联合检测在地中海贫血产前筛查中的应用

OFT与MCV联合检测在地中海贫血产前筛查中的应用
杨惠新
【摘要】目的探讨红细胞渗透脆性试验(Osmotic fragility test,OFT)与平均红细胞容积检测(Mean corpuscular volume,MCV)两种方法联合使用在孕妇产前地中海贫血筛查的优越性.方法选取2010年8月至2011年10在我站产前检查的孕妇312例,抽取静脉血,独立进行OFT、MCV检测和PCR基因诊断.以PCR基因诊断为参照,对比分析OFT、MCV单项检测及联合检测的灵敏度、特异度和准确度等指标.结果地贫基因携带率为7.69％,OFT检测灵敏度高于MCV (91.67％与
87.50％),OFT检测特异度低于MCV (88.54％与92.36％)；OFT和MCV平行联合检测提高检测灵敏度,系列联合检测提高特异度和准确度.结论 OFT和MCV联合检测在产前地中海贫血筛查中具有重要价值,其应用有利于预防与控制地中海患儿出生,提高优生优育服务质量.
【期刊名称】《海南医学》
【年(卷),期】2012(023)009
【总页数】2页(P95-96)
【关键词】地中海贫血;筛查;红细胞渗透脆性试验;平均红细胞容积
【作者】杨惠新
【作者单位】鹤山市计划生育服务站,广东鹤山 529700
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11+3
地中海贫血(地贫)是世界范围最常见的单基因遗传性血红素合成障碍疾病，目前国内外都无有效的治疗方法。

在我国，其发病率为3%～8%，广东、广西和海南等
是高发地区。

广泛开展产前筛查，降低地贫儿出生率是降低该疾病发病率的最有效措施[1]。

为优化地贫筛查方法，本站对红细胞渗透脆性试验(Osmotic fragility test，OFT)和平均红细胞容积(Mean corpuscular volume，MCV)两种方法联合
使用情况进行评价。

1.1 研究对象选取2010年8月至2011年10月到我站进行产前检查单胎妊娠孕
妇为研究对象。

纳入标准：无地贫检出史；无贫血症状；未接受输血和铁剂治疗。

排除标准：有其他已知异常型血红蛋白，特别是HbE型者；失访者；无检测结局
资料者。

对纳入研究的312例孕妇开展标准产前保健，抽取其外周静脉血样5 ml，添加EDTA抗凝剂保存备用。

1.2 OFT检测用OFT检测红细胞在低渗溶液中的稳定性。

取1 ml血样，于1.5
ml离心管中3 000 r/min离心5 min，弃血浆，将10 μl红细胞加入10 ml含
0.45%甘油的氯化钠磷酸缓冲溶液中，翻转离心管混合15 s后，记录2 min的溶
血动力学情况，间隔时间为2 s，测定溶液620 nm光密度值。

OFT值以溶血细胞百分比表示。

计算方法：(OD15-OD120)×100/OD15。

判断标准：OFT＜60为
异常。

1.3 MCV检测MCV测定用Sysmex公司的自动血液分析仪进行，80 fl为MCV
的截断值。

1.4 血清铁蛋白检测检测血清铁蛋白以排除缺铁性贫血。

利用AXSYM免疫化学发光法进行分析。

1.5 地贫基因诊断检测用TIANGEN试剂盒提取筛查阳性者外周血样DNA，深圳
益生堂生物公司的试剂盒鉴定α-地中海贫血和β-地中海贫血携带者。

其中，α-珠蛋白基因以PCR产物的琼脂糖凝胶电泳进行分析，β-珠蛋白基因的PCR产物的反
向点杂交法进行分析。

该方法能对3种常见缺失型和6种非缺失型α-地贫及17
种β-地贫进行分析。

1.6 统计学方法检测方法灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值均用百分比表示，不同检测方法指标间的比较采用χ2检验。

所有统计学分析在
SPSS11.0统计软件中进行。

P＜0.05时，差异具有统计学意义。

2.1 基因诊断结果312例产前检查孕妇中，α-地贫基因基因携带者有14例，检出率为4.49%；β-地贫基因携带者为8例，检出率2.56%；α/β复合地贫基因携带
者2例，检出率为0.6%。

地贫基因携带者总检出率为7.69%。

2.2 单项试验检测结果OFT检测的灵敏度=22/ 24=91.67%，特异度
=255/288=88.54%，其阴性预测值= 255/257=99.22%，阳性预测值
=22/55=40.00%，准确度= 277/312=88.78%。

MCV检测的敏感性
=21/24=87.50%，特异性=266/288=92.36%，其阴性预测值=266/269=
98.88%，阳性预测值=21/43=48.84%，准确度=287/312= 91.99%。

两种检测
方法比较，OFT灵敏度较高，而MCV检测特异性和准确度较高，见表1和表2。

2.3 两种方法联合检测结果OFT与MCV平行检测(OFT或MCV之一为阳性者被
视为检测阳性)灵敏度=23/24=95.83%，特异度=253/288=87.85%，阴性预测值=253/254=99.61%，阳性预测值=23/58= 39.66%，准确度=276/312=88.46%。

系列检测(OFT和MCV均为阳性者被视为检测阳性)灵敏度=20/24= 83.33%，特异度=288/288=100%，阴性预测值=288/ 292=98.63%，阳性预测值
=20/20=100%，准确度=308/ 312=98.72%。

与单项检测比较，两项指标平行
检测灵敏度显著增高(χ2=4.96，P＜0.05)，系列检测特异度与准确度显著增高
(χ2=5.72，P＜0.05)，见表3。

地中海贫血常见于我国南方地区，特别是在广东、广西等省，由于目前尚无有效的治疗措施，其预防与控制主要依靠产前筛查。

目前，基于PCR的基因诊断技术被
认为是地贫诊断的金标准。

本研究利用PCR法对312例孕妇进行产前诊断，发现地贫基因携带者总检出率为7.69%，低于广东其他地区的近期报道[2-3]。

可能是
由于本研究获取样本时间段短，采取的样本量少。

基层计划生育服务站在产前筛查中发挥重要作用，是预防地贫儿出生率、保障优生优育的第一道防线。

然而，目前国内还有很多计划生育服务站还存在经费短缺、仪器配备相对滞后的现状。

为此，如何利用低成本、高效率、快捷、简便的筛查方法是我们亟待解决的课题。

OFT是利用最为广泛的筛查方法，其主要优点在于低成本、易操作，但是由于主
要靠手工操作，自动化程度较低。

MCV是近年来引进的新筛查技术，主要依靠自动化血液分析仪进行，然而其成本较高。

MCV与OFT检测方法比较在国内外报道还存在分歧。

Sirichotiyakul等[1]研究发现，OFT检测灵敏度高于MCV，而MCV特异度高于OFT。

而王晓忠等[3]的研究认为，MCV的灵敏度高于OFT，OFT的特异性高于MCV。

我们将312例孕妇产前筛查结果与基因诊断的结果进
行比较，发现OFT检测的灵敏度、特异度和准确度分别为91.67%、88.54%和88.78%；而MCV分别为87.50%、92.36%和91.99%。

两者相比，OFT灵敏度
显著高于MCV，而MCV特异度和准确度显著高于OFT。

该结果与Sirichotiyakul等[1]的结果相似。

可能是因为Sirichotiyakul等[1]和我们的调查
均采取了横断面研究，参与检查孕妇的基因诊断与OFT、MCV筛查同时独立进行，避免了结果的相互干扰，携带者与非携带者比例也更接近于筛查人群。

而王晓忠等[4]是选取已知病例和对照样本进行进行检测，病例与对照数量的比例与实际参与
筛查的人群并不一定相符。

对OFT和MCV联合结果进行分析发现，与单项检测结果相比，平行检测灵敏度
显著增高，而系列检测的特异性和准确度显著增高。

本研究结果提示，OFT检测
和MCV检测都不失为孕妇产前地贫筛查的有效方法。

在条件相对滞后的检测机构，可以采用成本低廉、操作简单、灵敏度较高的OFT检测法进行筛查。

在有条件配
备自动化血液分析仪的机构，可根据实际情况利用OFT和MCV平行联合检测，以提高检测的灵敏度，减少漏检；或利用系列联合检测提高特异性和准确度，降低假阳性率。

总之，OFT和MCV联合检测在产前地中海贫血筛查中具有重要价值，其应用有利于预防与控制地中海患儿出生，提高优生优育服务质量。

【相关文献】
[1]Sirichotiyakul S,Wanapirak C,Srisupundit K.et al.A comparison of the accuracy of the corpuscular fragility and mean corpuscular volume tests for the alpha-thalassemia 1 and beta-thalassemia traits [J].International Journal of Gynecology and Obstetrics,2009,107: 26-29.
[2]纪妍,林静吟,李旭艳.地中海贫血的产前筛查及产前诊断探讨[J].海南医学,2009,20(9):104-105.
[3]容永忠,李斌,赖兆新,等.地中海贫血产前筛查及基因诊断研究[J].中国优生与遗传杂
志,2006,14(5):7-9.
[4]王晓忠,曾学辉,占葆娥.MCV和RBC脆性及血红蛋白电泳在产前筛查地中海贫血的价值[J].中国实验诊断学,2009,13(6): 761-763.。