高效液相色谱法测定水中苯酚类化合物

三、实验仪器与试剂
高效液相色谱仪 邻苯二酚、对苯二酚、间苯 二酚，甲醇（色谱纯）
定性标准溶液：邻苯二酚，对苯二酚，间苯 二酚，含量均为100μgml-1单标水溶液 定量标准溶液：含邻苯二酚，对苯二酚，间 苯二酚各适量，至于50ml容量瓶中，用二次 蒸馏水定容，得到质量浓度分别为100μgml1和200μgml-1的混合标准溶液。
附Ⅱ：（预习）实 验 报 告 格 式
1．工作准备 实验室级别：温度： 相对湿度： 高效液相所用液体的确认 样品确认 2．高效液相柱状态确认 柱型： 。高效液相柱连接是否完好 平衡柱 流动相： 流速： （ml/min）时间： （min） 2、上样 上样量： μl 流速： (ml/min) 样品采集时间 （min） 检测波长 (nm) 3 、清洗 流动相： 流速： （ml/min）时间： （min） 4、封柱 流动相： 流速： （ml/min）时间： （min）
高效液相色谱法测定水中 苯酚类化合物
指导教师：刘晓宇
一、实验目的
1、初步掌握高压液相色谱仪的基本原理和使 用方法。 2、了解反相液相色谱仪的分离非极性与弱极 性化合物的基本原理。 3、站我反相液相色谱法分离苯酚类化合物试 验条件。 4、对水中苯酚类化合物进行定性和定量分析。
二、实验原理
1、反相液相色谱法 是指流动相极性大于固定相极 性的分离体系。 分离机理：基于被分离组分与固定相疏水作用力 的差别。 2、定性分析：
四、实验步骤
1、实验条件 1)色谱柱： 2)流动相：甲醇水溶液（甲醇：水=20:80）流 量为1.2mlmin-1 3)紫外光度检测器：检测波长为270nm 4)进样量：20μg
2、具体步骤 1)用20%甲醇清洗进样针 2)进样针吸取对本二酚标准溶液，测得保留时 间吸光度（t1，A1） 3)进样针吸取邻本二酚标准溶液，测得保留时 间吸光度（t2，A2） 4)进样针吸取样品溶液，测得3个峰值的保留 时间，吸光度（t1’、t2’tx’ A1 ’ Ax’ A2 ’ ） 5)计算邻本二酚、对苯二酚的浓度
5. 判定 1 判定标准： 2 判定结果： 检品批号 检测结果：各参数值 6. 实验后检查 1梯度控制器是否切断电源 2紫外-可见光检测器是否切断电源 3电脑是否切断电源 4高压液相色谱泵是否切断电源 5使用后玻璃器皿、工作台是否清理干净
在相通色谱条件下，任何物质都有一确定的保留值。 在了解样品来源、性质的情况下，在相通的色谱 条件下，待测组分与标样的保留值相一致，就可 以初步认为待测组分与标样相通。
3、定量分析：外标法 标准品： A0=KC0V0 得出K值 待测样品： A’=KC’V’ 得出A’ V’值，通过上 式求的K1，算C’