含有粘细菌子实体的抗癌药物及其制备方法[发明专利]

[19]
中华人民共和国国家知识产权局
[12]发明专利申请公开说明书
[11]公开号CN 1435254A [43]公开日2003年8月13日
[21]申请号03111898.4[21]申请号03111898.4
[22]申请日2003.02.27[71]申请人山东大学
地址250100山东省济南市山大南路27号
[72]发明人李越中 刘新利 胡玮 扈锡涛 夏志洁
韩冠君 [74]专利代理机构济南三达专利事务所代理人李健康
[51]Int.CI 7A61K 35/84A61P 35/00
权利要求书 1 页 说明书 5 页
[54]发明名称
含有粘细菌子实体的抗癌药物及其制备方法
[57]摘要
本发明公开了一种含有粘细菌子实体的抗癌药
物及其制备方法，该药物是以粘细菌的子实体或其
浸提物为主要原料，配以常规辅料组成；经粘细菌
的子实体或其浸提物及辅料以重量百分比混合后，
采用药剂学的常规方法，制成口服药物。

动物实验
证明，由粘细菌子实体及其浸提物制备的该类口服
制剂无毒，无副作用，可以较好地预防和治疗肿瘤。

03111898.4权 利 要 求 书第1/1页 1.一种含有粘细菌子实体的抗癌药物，其成分中粘细菌子实体或其浸提物的重量百分含量为：60％-90％。

2.如权利要求1所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其成分中还可以包括如下重量百分含量的辅料：
灵芝孢子粉或虫草粉 4-30％
蔗糖 3-5％
焦糖 1-5％
蜂蜜 2-4％
西洋参香精或果味香精 0-0.5％
3.如权利要求1或2所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其特征在于：所述的粘细菌子实体可以是新鲜子实体，或干燥保存的粘细菌子实体粉，或粘细菌子实体的孢子，或粘细菌子实体的浸提物。

4.如权利要求3所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其特征在于：所述粘细菌子实体的浸提物是粘细菌子实体水浸提物或粘细菌子实体有机溶剂浸提物。

5.如权利要求4所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其特征在于：所述粘细菌子实体水浸提物是用80℃热水洗提，由洗提液经减压蒸发浓缩，80℃烘干制成。

6.如权利要求4所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其特征在于：所述粘细菌子实体有机溶剂浸提物是指由极性有机溶剂浸提制成的粘细菌子实体极性有机溶剂浸提物和/或由非极性有机溶剂浸提制成的粘细菌子实体非极性有机溶剂浸提物。

7.如权利要求6所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其特征在于：所述粘细菌子实体极性有机溶剂浸提物是由甲醇或乙醇对粘细菌子实体进行浸提，浸提液经过60℃的减压蒸发，除尽有机溶剂制成。

8.如权利要求6所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其特征在于：所述粘细菌子实体非极性有机溶剂浸提物是由二氯甲烷或石油醚对极性有机溶剂浸提过的样品再次浸提，浸提液经过40℃的减压蒸发，除尽有机溶剂制成。

9.如权利要求1或2所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物的制备方法，其特征在于：利用药剂学的常规方法，将粘细菌的子实体或子实体粉及辅料以重量百分比混合，制成口服冲剂或片剂或胶囊。

10.如权利要求1或2所述的含有粘细菌子实体的抗癌药物的制备方法，其特征在于：利用药剂学的常规方法，将粘细菌的子实体的浸提物及辅料以重量百分比混合，制成口服冲剂或片剂或胶囊。

03111898.4说 明 书第1/5页
含有粘细菌子实体的抗癌药物及其制备方法
(一)技术领域
本发明涉及医药制品及其制备领域，具体地讲是涉及一种能够预防和治疗恶性肿瘤的药物及其制备方法，尤其涉及一种含有粘细菌的子实体或其浸提物的抗癌药物及其制备方法。

(二)背景技术
随着物质生活水平及医疗保健意识的提高，药物的需求量越来越大，为了预防疾病、提高生存质量，开发优质高效的药品以防治恶性肿瘤等重大疾病显得尤为重要。

粘细菌是一类具有特殊社会学行为特征和复杂发育生活史的可滑动的单细胞细菌。

粘细菌通过滑动运动，可以在固体培养基上，特别是贫瘠的培养基上发育形成薄的膜状扩展菌落。

在一定条件下，粘细菌的细胞可以聚集并发育形成子实体结构——由坚硬度不同的分化的细胞和粘孢子组成的简单或复杂的休眠体。

作为最高等的原核生物，粘细菌特殊的社会行为现象和多细胞形态发生在进化上不仅高于一般原核生物，而且与真核生物有着极大的相似性，被认为是原核生物和真核生物间界面上的微生物类群。

粘细菌丰富的次级代谢产物使粘细菌在新药开发中成为极有潜力的资源。

以粘细菌的子实体或子实体的浸提物为主要原料制成的药物，经体内试验证明具有预防和抑制肿瘤的效果，经过文献和专利的检索，由粘细菌子实体或粘细菌子实体的浸提物制备的抗癌药物及其制备方法在国内外技术文献或专利中未见报道。

(三)发明内容
针对上述技术的不足，本发明主要解决的问题是，提供一种用作预防和治疗肿瘤的含粘细菌子实体的抗癌药物及其制备方法。

本发明是通过如下的技术方案实现的：
含有粘细菌子实体的抗癌药物，其成分中粘细菌子实体或其浸提物的重量百分含量为：60％-90％。

上述的含有粘细菌子实体的抗癌药物，其成分中还可以包括如下重量百分含量的辅料：
灵芝孢子粉或虫草粉 4-30％
蔗糖 3-5％
焦糖 1-5％
蜂蜜 2-4％
西洋参香精或果味香精 0-0.5％
上述的粘细菌子实体可以是新鲜子实体，或干燥保存的粘细菌子实体粉，或粘细菌子实体的孢子，或粘细菌子实体的浸提物。

上述粘细菌子实体的浸提物是粘细菌子实体水浸提物或粘细菌子实体有机溶剂浸提物。

上述粘细菌子实体水浸提物是用80℃热水洗提，由洗提液经减压蒸发浓缩，80℃烘
干制成。

上述粘细菌子实体有机溶剂浸提物是指由极性有机溶剂浸提制成的粘细菌子实体极性有机溶剂浸提物和/或由非极性有机溶剂浸提制成的粘细菌子实体非极性有机溶剂浸提物。

上述粘细菌子实体极性有机溶剂浸提物是由甲醇或乙醇对粘细菌子实体进行浸提，浸提液经过60℃的减压蒸发，除尽有机溶剂制成。

上述粘细菌子实体非极性有机溶剂浸提物是由二氯甲烷或石油醚对极性有机溶剂浸提过的样品再次浸提，浸提液经过40℃的减压蒸发，除尽有机溶剂制成。

上述含有粘细菌子实体的抗癌药物的制备方法，是利用药剂学的常规方法，将粘细菌的子实体或子实体粉及辅料以重量百分比混合，制成口服冲剂或片剂或胶囊。

上述含有粘细菌子实体的抗癌药物的制备方法，是利用药剂学的常规方法，将粘细菌的子实体的浸提物及辅料以重量百分比混合，制成口服冲剂或片剂或胶囊。

本项发明的创造性在于：1)、开创了以粘细菌的子实体为材料进行药物开发的新思路，2)、以粘细菌的子实体或子实体的浸提物为主要原料制备药物，能够起到预防和抑制肿瘤的作用。

3)、通过体内试验证明了粘细菌子实体是在医疗保健方面具有很高价值的应用材料。

4)、通过粘细菌子实体或子实体的浸提物与灵芝孢子粉等辅料的合理配比，增强预防和抑制肿瘤的效果。

本发明的含粘细菌子实体的抗癌药物和及其制备方法，为充分利用粘细菌子实体制备预防和抑制肿瘤作用的抗癌药物开创了一条新的途径，所涉及的粘细菌子实体或其浸提物为新型药物开发提供了良好的材料，并且本发明制备的药物生产方法简单，成本低，具有很好的经济效益和市场前景。

下面结合动物实验，对本发明的含粘细菌子实体的抗癌药物在药理学和毒理学以及抗肿瘤方面的功能效果作进一步说明：
1.毒性试验
实验动物：成年健康KM小鼠，合格证号2000 01 004，共50只，雌雄各半，体重22-26克，由山东省卫生防疫站提供。

实验方法：动物称重，编号，随机分为5组，每组10只，雌雄各半，分笼饲养。

其中的4组为实验组，1组为对照组。

采用灌喂口服给药，具体操作见表一：
表一
组 别 样品名称 给药浓度(m g/m l) 给药量(m l) 第1组 子实体悬浮液 5 1.0
第2组 子实体水浸提物 3 1.0
第3组 子实体极性有机溶剂浸提物 1 1.0
第4组 子实体非极性有机溶剂浸提物 1 1.0
对照组 蒸馏水 1.0
连续给药7天，观察其毒作用表现，包括小鼠外部特征变化及死亡情况，停药后连续观察3天，第11天称重后脱椎处死。

实验结果：见表二
表二
组 样品名称 实验前平均体重 实验后平均体重 死亡率 别 (X±SD) (X±SD) (％)第1组 子实体悬浮液 25.2±0.35 32.5±1.68 0第2组 子实体水浸提物 25.3±0.45 30.2±1.81 0第3组 子实体极性有机溶剂浸提物 24.6±1.36 31.1±1.45 0第4组 子实体非极性有机溶剂浸提物 24.9±0.46 30.6±1.54 0对照组 蒸馏水 23.6±0.50 28.8±2.22 0 结论：经口给小鼠试验样品7天，毒作用观察结果为：小鼠均生长发育正常，被毛浓密而光泽，运动活泼，鼻腔、空腔、耳道、眼、肛门及生殖器官均未见异常，LD50计算结果也说明该样品无毒。

2.抑制肿瘤试验
实验动物：成年健康KM小鼠50只，合格证号2000 08 001，雌雄各半，体重20±2克，购于鲁抗医药集团。

接种用肿瘤细胞株：S180，购于山东省医科院药物研究所。

实验样品：粘细菌子实体水浸提物和有机溶剂浸提物的混合物，用水配成2mg/ml 浓度。

阳性对照：灵芝孢子粉，将灵芝孢子粉研碎，用水配成2m g/m l悬液。

阴性对照：蒸馏水。

实验方法：动物称重，编号，随机分为5组，每组10只，体重差异小于4克，雌雄各半，分笼饲养。

其中两组分别为阳性对照组和阴性对照组。

接种肿瘤：于每只小鼠右腹股沟皮下注射0.2ml S180稀释液。

48小时后灌喂给药，样品组与对照组的每只小鼠均灌胃0.5ml。

连续灌喂10天，观察小鼠特征变化，包括行为活动、被毛、精神状态、口腔、鼻腔、耳道、肛门、生殖器官是否正常，以及肿瘤生长及小鼠死亡的情况。

第11天称重后脱椎处死，解剖剥离瘤块，称瘤重，计算肿瘤抑制率。

实验结果：见表三
按照以下公式计算抑瘤率：
表三：试验结果
组 别 小鼠外观变化 处死平均体重 平均瘤重 肿瘤抑制率 g(X±S D) g(X±S D) (％)阴性对照组 正常 24.96±0.95 0.673±0.140
低浓度样品 正常 26.76±1.48 0.616±0.104 8.47中浓度样品 正常 30.37±0.85 0.397±0.058 41.01
高浓度样品 正常 34.81±1.04 0.362±0.067 46.21阳性对照组 有3只腹围增大明 27.57±2.72 0.548±0.167 18.0 显，其余正常
p＜0.05
结论：经口给接种S180瘤株的小鼠试验样品10天，样品组小鼠均生长发育正常，被毛浓密而光泽，运动活泼，鼻腔、空腔、耳道、眼、肛门及生殖器官未见异常。

抑瘤率样品组明显高于阳性对照组。

(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：
实施例1
一种含有粘细菌子实体水浸提物的抗癌口服液及其制备方法。

具体步骤如下： (1)粘细菌子实体的准备及处理：取培养制备的粘细菌子实体直接新鲜使用，或将粘细菌
的子实体干燥后制粉备用。

(2)原料的配制：按照以下重量百分比配制主料与辅料：粘细菌子实体70％，灵芝孢子粉30％。

(3)水浸提物的制备：将(2)配制的原料用80℃热水洗提，提洗液经减压蒸发浓缩，80℃烘干制成水浸提物。

(4)口服液的制备：将(3)的水浸提物称重，加入其重量百分比的蔗糖3.5％，焦糖2％，蜂蜜4％，西洋参香精(或其他果味香精)0.5％，用20倍纯净水溶解，调pH至6.5，分装至10ml/支玻璃小瓶中，然后高压顺时灭菌，即得含有粘细菌子实体水浸提物的抗癌口服液。

实施例2
一种含有粘细菌子实体有机溶剂浸提物的抗肿瘤口服冲剂及其制备方法。

具体步骤如下：
(1)粘细菌子实体的准备及处理：取培养制备的粘细菌子实体直接新鲜使用，或将粘细菌
的子实体干燥后制粉备用。

(2)原料的配制：按照以下重量百分比配制主料与辅料：粘细菌子实体90％，灵芝孢子粉10％。

(3)甲醇浸提物的制备：将(2)制备的原料用极性有机溶剂甲醇浸提，浸提液经60℃减压蒸发浓缩，除尽有机溶剂，制成甲醇浸提物。

(4)二氯甲烷浸提物的制备：将(3)甲醇浸提后的样品用非极性有机溶剂二氯甲烷浸提，浸提液经40℃减压蒸发浓缩，除尽有机溶剂，制成二氯甲烷浸提物。

(5)口服冲剂药物的制备：将(3)和(4)的浸提物称重后，等比混合。

按本技术领域人员公知的方法将上述混合浸提物制备成规格为10克/包的冲剂；或以上述混合浸提物为主料，以蔗糖、淀粉为辅料，以重量比为70-95∶30-5的比例，再加入极少量的柠檬酸、甘露糖添加剂，混合，制粒，烘干，整粒，制成规格为10克/包冲剂。

实施例3
一种含有粘细菌子实体有机溶剂浸提物的抗肿瘤口服冲剂药物及其制备方法。

具体步骤如下：
(1)粘细菌子实体的准备及处理：取培养制备的粘细菌子实体直接新鲜使用，或将粘细菌
的子实体干燥后制粉备用。

(2)以重量百分比100％的比例选取、制备粘细菌子实体。

(3)乙醇浸提物的制备：将(2)制备的原料用极性有机溶剂乙醇浸提，浸提液经60℃减压蒸发浓缩，除尽有机溶剂，制成乙醇浸提物。

(4)石油醚浸提物的制备：将(3)乙醇浸提后的样品用非极性有机溶剂石油醚浸提，浸提液经40℃减压蒸发浓缩，除尽有机溶剂，制成石油醚浸提物。

(5)口服冲剂药物的制备：将(3)和(4)的浸提物称重后，等比混合。

按本技术领域人员公知的方法将上述混合浸提物制备成规格为10克/包的冲剂；或以上述混合浸提物为主料，以蔗糖、淀粉为辅料，以重量比为70-90∶30-10的比例，再加入极少量的柠檬酸、甘露糖添加剂，混合，制粒，烘干，整粒，制成规格为10克/包冲剂。

实施例4
一种含有粘细菌子实体有机溶剂浸提物的抗肿瘤胶囊药物及其制备方法。

具体步骤如下：
(1)粘细菌子实体的准备及处理：取培养制备的粘细菌子实体直接新鲜使用，或将粘细菌
的子实体干燥后制粉备用。

(2)原料的配制：按照以下重量百分比配制主料与辅料：粘细菌子实体80％，虫草粉20％。

(3)甲醇浸提物的制备：将(2)制备的原料用极性有机溶剂甲醇浸提，浸提液经60℃减压蒸发浓缩，除尽有机溶剂，制成甲醇浸提物。

(4)二氯甲烷浸提物的制备：将(3)甲醇浸提后的样品用非极性有机溶剂二氯甲烷浸提，浸提液经40℃减压蒸发浓缩，除尽有机溶剂，制成二氯甲烷浸提物。

(5)口服胶囊药物的制备：将(3)和(4)的浸提物称重后，等比混合。

按本技术领域人员公知的方法将上述混合浸提物制备成规格为100mg/囊的口服胶囊。

或将上述混合浸提物以重量百分比计，加入2％的蔗糖，8％的淀粉，粉碎、磨细、混匀，以淀粉浆为黏合剂，制成细小颗粒，装入胶囊中制成规格为100m g/囊的口服胶囊。

实施例5
一种含有粘细菌子实体的抗肿瘤片剂药物及其制备方法。

具体步骤如下： (1)粘细菌子实体的准备及处理：取培养制备的粘细菌子实体直接新鲜使用，或将粘细菌
的子实体干燥后制粉备用。

(2)原料的配制：按照以下重量百分比配制主料与辅料：粘细菌子实体85％，灵芝孢子粉15％。

(3)口服片剂药物的制备：将(2)中的原料混合后，按本技术领域人员公知的方法，以重量百分比计，加入2％的蔗糖，8％的糊精为辅料，制粒，干燥，压片，制成片剂。

片剂的规格为100mg/片。